CN115317610A

CN115317610A - 基于vps9d1-as1靶点的aso药物在肿瘤治疗中的应用

Info

Publication number: CN115317610A
Application number: CN202110509964.9A
Authority: CN
Inventors: 杨磊; 董希琛
Original assignee: Beijing Chaoyang Hospital
Current assignee: Beijing Chaoyang Hospital
Priority date: 2021-05-11
Filing date: 2021-05-11
Publication date: 2022-11-11

Abstract

本发明公开了基于VPS9D1‑AS1靶点的ASO药物在肿瘤治疗中的应用。本发明提供了抑制或者干扰VPS9D1‑AS1基因表达的物质在如下至少一种中的应用：1)制备治疗结直肠癌产品；2)制备抑制肿瘤细胞增殖的产品；3)制备改善或减轻结直肠癌动物或结直肠癌患者肠道出血症状的产品；4)制备预防或减轻结直肠癌引起的肠梗阻的产品；5)制备延长结直肠癌动物或结直肠癌患者的生存期的产品。本发明发现VPS9D1‑AS1作为药物靶点在抑制结直肠癌细胞增殖中，并且制备出ASO药物，验证其可以实现抑制或治疗结直肠癌。

Description

基于VPS9D1-AS1靶点的ASO药物在肿瘤治疗中的应用

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种基于VPS9D1-AS1靶点的ASO药物在肿瘤治疗中的应用。

背景技术

反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide，ASO)是一类经过化学修饰的可用于体内抑制靶mRNA的一种单链小干扰RNA分子，ASO小干扰RNA经过N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)修饰以达到稳定分子结构，以及在体内被细胞吸收的功能。相较于传统的siRNA，ASO小干扰RNA可用于进行动物实验以及开发成药物用于治疗疾病，目前已有多个ASO药物开始应用于临床，例如Alnylam公司的靶向于氨基乙酰丙酸合成酶1的givosiran已开展治疗急性肝卟啉症的III期临床实验。

因长链非编码RNA(LncRNA)无法采用抗体进行封闭，且其它小分子化合物对抑制LncRNA作用不理想，因此，寻求有效抑制LncRNA的小分子化合物成为研究重点。

发明内容

本发明的一个目的是提供抑制或者干扰VPS9D1-AS1基因表达的物质的用途。

本发明提供的抑制或者干扰VPS9D1-AS1基因表达的物质在如下至少一种中的应用：

1)制备治疗结直肠癌产品；

2)制备抑制肿瘤细胞增殖的产品；

3)制备预防或减轻结直肠癌引起的并发症的产品，所述并发症包括肠道出血和/或肠梗阻；

4)制备改善或减轻结直肠癌动物或结直肠癌患者肠道出血症状的产品；

5)制备预防或减轻结直肠癌引起的肠梗阻的产品；

6)制备延长结直肠癌动物或结直肠癌患者的生存期的产品。

上述改善或减轻结直肠癌动物或结直肠癌患者肠道出血症状为由AOM/DSS诱导引发的结直肠癌动物或结直肠癌患者肠道出血症状。

上述VPS9D1-AS1的核苷酸序列为序列表中序列1。

上述应用中，所述抑制或者干扰VPS9D1-AS1基因表达的物质为干扰或靶向所述VPS9D1-AS1基因的ASO。

上述应用中，所述干扰或靶向VPS9D1-AS1基因的ASO为序列2、序列3或序列4所示的RNA。

上述VPS9D1-AS1基因作为药物靶点在如下至少一种中的应用也是本发明保护的范围：

1)制备治疗结直肠癌产品；

2)制备抑制肿瘤细胞增殖的产品；

5)制备预防或减轻结直肠癌引起的肠梗阻的产品；

6)制备延长结直肠癌动物或结直肠癌患者的生存期的产品。

上述肿瘤细胞为结直肠癌肿瘤细胞。

上述应用中，所述药物靶点为ASO药物靶点。

本发明另一个目的是提供一种产品。

本发明提供的产品，包括抑制或者干扰VPS9D1-AS1基因表达的物质。

上述产品具有如下至少一种功能：

1)治疗结直肠癌；

2)抑制肿瘤细胞增殖；

3)预防或减轻结直肠癌引起的并发症，所述并发症包括肠道出血和/或肠梗阻；

4)改善或减轻结直肠癌动物或结直肠癌患者肠道出血症状；

5)预防或减轻结直肠癌引起的肠梗阻；

6)延长结直肠癌动物或结直肠癌患者的生存期。

上述产品中，所述抑制或者干扰VPS9D1-AS1基因表达的物质为干扰或靶向VPS9D1-AS1基因的ASO。

上述产品中，所述干扰或靶向VPS9D1-AS1基因的ASO为序列2、序列3或序列4所示的RNA。

本发明发现VPS9D1-AS1作为药物靶点在抑制结直肠癌细胞增殖中，并且制备出ASO药物，验证其可以实现抑制或治疗结直肠癌。

附图说明

图1为VPS-ASO药物抑制MC38、HCT116、SW480细胞。

图2为VPS9D1-AS1在16种癌细胞系种的表达水平。

图3为ASO-VPS抑制小鼠移植瘤的生长。

图4为C57BL6/L转基因小鼠基因型鉴定以AOM/DSS诱导小鼠结直肠癌。

图5为VPS-ASO治疗AOM/DSS诱导的小鼠结直肠癌模型注射进程及小鼠体重结果。

图6为VPS-ASO治疗AOM/DSS诱导的小鼠结直肠癌模型生存期结果。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1、VPS9D1-AS1及其与人结直肠癌相关性的发现

研究发现：VPS9D1-AS1(NR_036480，长度1753bp，其核苷酸序列为序列1)是人结直肠癌组织中高表达的一种LncRNA，可作为治疗人结直肠癌的药物靶点。

实施例2、ASO小RNA药物在靶向VPS9D1-AS1治疗结直肠癌中的应用

一、3个靶向于VPS的ASO小RNA

根据VPS9D1-AS1的mRNA序列，设计靶向VPS9D1-AS1的反义寡核苷酸ASO作为ASO-VPS药物，靶向于VPS9D1-AS1的ASO-siRNA(由广州锐博生物合成)，共三个AOS-siRNA，分别命名为：ASO-siVPS1、ASO-siVPS2、ASO-siVPS3(表1所示)。

具体序列如表1所示。

表1为靶向于VPS9D-AS1的ASO小分子药物

ASO	Sequences(5‘-3’)
		ASO-siVPS 1	UCUACCACUGUUACUUACUG(序列2)
ASO-siVPS 2	CGACCAUGGACCUGCUCACA(序列3)
		ASO-siVPS 3	UCCUCCACCCAACUCCUCAA(序列4)
ASO-NC	由广州锐博公司提供

二、ASO-VPS药物抑制肿瘤细胞增殖

1、细胞处理

首先以小鼠结直肠癌细胞MC38(中国医学科学院基础医学研究所)、人结直肠癌细胞HCT116(中国医学科学院基础医学研究所)和SW480(中国医学科学院基础医学研究所)为模型对ASO药物的抗肿瘤效果进行验证。

因人鼠基因差异，MC38细胞中没有人VPS9D1-AS1基因，因此采用在MC38细胞中过表达人VPS9D1-AS1(序列1)的策略，所获得的细胞标记为MC38VPS OE。

MC38VPS OE为将表达VPS9D1-AS1的过表达载体导入MC38细胞，得到的重组细胞。

上述表达VPS9D1-AS1的过表达载体为将序列1所示VPS9D1-AS1的编码基因替换慢病毒载体(pLV-hef1a-mScarlet-P2A-neo-WPRE-CMV-VPS9D1-AS1LncRNA(Human)、北京合生基因科技有限公司)骨架的SpeI和KpnI酶切位点间的片段，得到的载体。

2、ASO-VPS药物抑制肿瘤细胞增殖

分别将上述1得到的MC38-VPS OE细胞(MC38 VPS OE)、HCT116细胞和SW480细胞接种于96孔板中(每孔1000个细胞)，采用lipofectamine 3000(Invitrogen)作为转染试剂转染(每孔0.3μl)，三种ASO-siRNA分别接种到不同孔中(每孔3pmol)。37℃，5％CO2孵箱中培养下培养。

每隔24小时采用CCK8试剂盒(日本同仁化学，CK04)检测细胞活力(OD450nm吸光度)，连续检测144个小时(6天)。

结果如图1所示，可以看出，与ASO-NC相比，ASO-siVPS1、ASO-siVPS2和ASO-siVPS3均能抑制各种肿瘤细胞的生长，其中ASO-siVPS3对肿瘤细胞MC38-VPS过表达(OE)、HCT116和SW480增殖的抑制效果最好。

三、ASO-VPS抑制小鼠移植瘤的生长

下面的小鼠实验均以ASO-siVPS3为例进行。

在Balb/c裸鼠(北京维通利华实验动物技术有限公司，品系代码401)中以HCT116细胞为小鼠移植瘤模型验证ASO药物的抑制肿瘤效果，在接种细胞后的第7天开始进行ASO治疗，以腹腔注射给药。具体方法如下：

1、小鼠移植瘤模型的制备

检测不同肿瘤细胞中VPS9D1-AS1表达量，发现HCT116中VPS9D1-AS1表达量最高(图2)，因此以HCT116细胞作为小鼠移植瘤模型。

将2×10⁶个HCT116细胞接种注射到BALB/c nude小鼠左下肢腹股沟皮下，共12只小鼠，分两组，每组6只小鼠，构建小鼠移植瘤模型。

2、药物注射

ASO-VPS组：在注射HCT116细胞的第7天(以第一天注射HCT116细胞记作第1天)开始注射ASO-VPS(ASO-siVPS3)溶液，每只小鼠于移植瘤周围皮下注射100nmol，注射体积为100μl，每周注射1次，共注射7次。共7只小鼠移植瘤模型。

ASO-VPS(ASO-siVPS3)溶液的溶质为ASO-siVPS3，溶剂为浓度为1nmol/μl、pH值为6.7的PBS缓冲液。

ASO-NC组：在注射HCT116细胞的第7天(以第一天注射HCT116细胞记作第1天)开始注射ASO-NC溶液，每只小鼠于移植瘤周围皮下注射100nmol，注射体积为100μl，每周注射1次。共注射7次。共7只小鼠移植瘤模型。

ASO-NC溶液溶液的溶质为ASO-NC，溶剂为浓度为1nmol/μl、pH值为6.7的PBS缓冲液。

3、检测

每周测量皮下移植瘤体积，并且在接种注射后第27天(以第一天注射HCT116细胞记作第1天)结束实验。处死小鼠后，取皮下肿瘤组织，拍照观察肿瘤大小、检测肿瘤重量。

1)肿瘤体积

27天内监测肿瘤体积结果如图3A所示，对照ASO-NC组相比，注射ASO-siVP组小鼠的肿瘤体积增殖速度显著降低。

2)VPS9D1-AS1的表达

注射后第27天提取各组小鼠肿瘤组织RNA，反转录得到cDNA，用如下表2所示的引物进行实时荧光定量PCR验证。以18S基因作为内参。

表2为实时荧光定量PCR引物

结果如图3B(VPS9D1-AS1倍数变化为ASO-VPS组小鼠肿瘤组织中VPS9D1-AS1的表达量/ASO-NC组小鼠肿瘤组织中VPS9D1-AS1的表达量)所示，可以看出，与对照组ASO-NC相比，ASO-VPS组显著抑制肿瘤内VPS9D1-AS1的表达。

3)肿瘤体积表型

第27天拍照观察皮下肿瘤体积结果如图3C所示，可以看出，ASO-NC组肿瘤体积大于ASO-VPS组的肿瘤。

4)肿瘤重量

第27天检测肿瘤重量结果如图3D所示，可以看出，与对照ASO-NC组相比，ASO-VPS组小鼠的肿瘤重量减少。

5)ASO-VPS抑制结直肠癌进展相关通路

第27天提各组小鼠肿瘤组织的蛋白，用Western blotting检测，抗体分别为TGF-β(CST公司,Cat#3711s)、TGFBR1(Abcam公司,Cat#ab31013)、SMAD1(CST公司,Cat#6944)、OAS1(Cat#14498)、IFI27(Abclonal公司，Cat#A14174)、ERK(CST公司，Cat#4695S)、E-Cadherin(Abcam公司，Cat#ab15148)、Vimentin(Abcam公司，Cat#ab92547)、β-actin(碧云天公司，Cat#AF0003)。

结果如图3E所示(1#-6#分别为各组小鼠的单只编号)，可以看出，与ASO-NC组相比，ASO-VPS组可使移植瘤组织中TGF-β信号通路(TGF-β、TGFBR1、SMAD1)、IFN(OAS1、IFI27)、增殖(ERK)、迁移(E-Cadherin、Vimentin)信号通路分子都有明显影响，证明ASO-VPS抑制结直肠癌进展相关通路。

上述结果表明，VPS可作为药物治疗的靶点分子，用于抑制肿瘤的生长。

四、ASO-VPS药物抑制AOM/DSS诱导小鼠结直肠癌模型中肿瘤生长

1、AOM/DSS诱导小鼠结直肠癌模型

1)消化道上皮特异性表达VPS9D1-AS1的小鼠的制备

以C57BL/6鼠(上海南方模式生物技术股份有限公司)为背景，将启动子两侧带有两套反向Loxp位点的VPS9D1-AS1(NR_036480，1753bp，序列1)定点***到ROSA26基因1号内含子(FW565793.1，27-DEC-2010)中，获得的定点***小鼠F1代。

将上述获得的定点***小鼠F1代与Villin-Cre鼠(Villin基因具有消化道上皮特异表达特性，上海南方模式生物科技股份有限公司)进行交配，产生如下表型的后代：VPS+/+子代鼠、VPS+/-子代鼠和野生型对照子代鼠(WT)；即为消化道上皮特异性表达VPS9D1-AS1的小鼠，该模型中VPS9D1-AS1基因在VPS+/+子代鼠、VPS+/-子代鼠的肠上皮细胞特异性表达。其中VPS+/+鼠为纯合的R26-eCAG-VPS9D1-AS1子代小鼠。

上述定点***小鼠在未与Villin-Cre小鼠交配前只表达EGFP报告基因，VPS9D1-AS1基因不表达，仅在与Villin-Cre小鼠交配后，条件性过表达VPS9D1-AS1基因。

用下表(P1/P2野生型，P3/P4扩增VPS9D1-AS1基因)引物和Villin-Cre鉴定引物，对子代小鼠的基因组DNA进行PCR扩增，检测小鼠基因型，Villin-Cre为对照。

表3为基因型鉴定PCR引物

结果如图4A所示，上图可以看出，含有738bp ROSA26 VPS片段且含有MUT994bp片段的为VPS+/-杂合子(HE)子代小鼠，仅含有738bp ROSA26 VPS片段的为VPS+/+纯合子(HO)子代小鼠，仅含有MUT994片段的小鼠为野生型子代小鼠。

下图为Vil-Cre小鼠基因鉴型，两条扩增片段代表Vil-Cre小鼠，单条带代表野生型小鼠。

2)AOM/DSS诱导小鼠结直肠癌模型

将上述1)得到的VPS+/+子代鼠(3只)、VPS+/—子代鼠(4只)和野生型对照子代鼠(WT)(3只)腹腔注射AOM(azoxymethane)(10mg/kg)，一周后用含2％(质量体积比，g：ml)DSS(Dextran Sulfate Sodium，MW＝36,000-50,000)的水喂养小鼠1周，之后换正常水喂养1周，之后再用2％DSS水喂养一周，共3个DSS循环，每周测量小鼠体重。

于第12周(以2％DSS水喂养第一周起，记作第1周)分析小鼠结直肠部位肿瘤的情况。将形成肿瘤的组织制备成石蜡组织切片，进行苏木素&伊红染色。

染色结果如图4C所示(4个图分别为：正常小鼠肠组织，左上+下；小鼠结直肠癌组织，右上+下)，可以看出，VPS9D1-AS1表达的小鼠结直肠癌更为严重。

统计第12周不同小鼠的肿瘤体积，结果如图4B和4D所示，可以看出，VPS+/+子代鼠的肿瘤体积大于VPS+/—子代鼠，VPS+/—子代鼠的肿瘤体积大于野生型子代小鼠；也进一步证明VPS9D1-AS1促进AOM/DSS诱导小鼠结直肠癌模型中的肿瘤生长，VPS9D1-AS1促进了结直肠癌的发生发展。

上述结果表明，获得结果证明成功建立了AOM/DSS诱导小鼠结直肠癌模型，利用该模型可用于分析ASO药物对结直肠癌的治疗作用。

2、ASO药物对AOM/DSS诱导小鼠结直肠癌模型的治疗

图5A为药物注射进程，具体如下：

共12只小鼠AOM/DSS诱导结直肠癌模型，分为两组(ASO-VPS和ASO-NC)，每组6只。

ASO-VPS组：在上述1得到的AOM/DSS诱导小鼠结直肠癌模型(VPS+/-子代鼠)第14周(以2％DSS水喂养第一周起，记作第1周)开始分别注射ASO-VPS(ASO-siVPS3)溶液，每只小鼠于抑制瘤周围皮下注射100nmol，注射体积为100μl，每周注射1次，连续12周，每周测量小鼠体重。并记录小鼠生存情况。

ASO-VPS(ASO-siVPS3)溶液的溶质为ASO-siVPS3，溶剂为浓度为100nmol、pH值为6.7的PBS缓冲液。

ASO-NC组：在上述1得到的AOM/DSS诱导小鼠结直肠癌模型(VPS+/-子代鼠)第14周(以2％DSS水喂养第一周起，记作第1周)开始注射ASO-NC溶液，每只小鼠于抑制瘤周围皮下注射100nmol，注射体积为100μl，每周注射1次，连续12周，每周测量小鼠体重。并记录小鼠生存情况。

ASO-NC溶液的溶质为对照ASO-NC，溶剂为浓度为100nmol、pH值为6.7的PBS缓冲液。

在第27周(以2％DSS水喂养第一周起，记作第1周)，取ASO-VPS组小鼠肠组织观察，结果如图5B所示，可以看出，AOM/DSS诱导的结直肠癌鼠肠道出血，且出现肠梗阻。

27周的小鼠重量统计，结果如图5C所示，可以看出，与对照组ASO-NC相比，ASO-VPS药物治疗抑制肠梗阻和出血导致的体重下降。

在第27周(以2％DSS水喂养第一周起，记作第1周)，取ASO-VPS组和ASO-NC组小鼠肠道观察，结果如图6A左图所示，可以看出，与对照组ASO-NC相比，ASO-VPS药物治疗可改善结直肠癌鼠肠道出血症状，预防或减轻结直肠癌引起的肠梗阻。

在第27周(以2％DSS水喂养第一周起，记作第1周)，取ASO-VPS组和ASO-NC组小鼠肿瘤，统计各组肿瘤体积，结果如图6A右图，可以看出，与对照组ASO-NC相比，ASO-VPS组小鼠肿瘤大小显著降低。

统计27周(以2％DSS水喂养第一周起，记作第1周)ASO-VPS组和ASO-NC组小鼠的生存率，结果如图6B所示，ASO-NC治疗组中，所有6只小鼠均有检出肠部肿瘤，有4只小鼠死亡；而ASO-VPS组，5只小鼠有肠部肿瘤，至27周时无死亡，说明ASO-VPS显著抑制了肿瘤生长，延长了生存期。

上述结果说明ASO-VPS可作为抗结直肠癌药物。

鉴于以上结果，VPS9D1-AS1可作为治疗药物结直肠癌的药物靶点，本发明设计了可靶向于该基因的ASO小分子药物，并进行了临床前相关实验，证实了药物的有效性。

SEQUENCE LISTING

<110>首都医科大学附属北京朝阳医院

<120>基于VPS9D1-AS1靶点的ASO药物在肿瘤治疗中的应用

<160> 4

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 1753

<212> DNA/RNA

<213> Artificial sequence

<400> 1

aaagccuggg cccguggggg acgcacaugg uccuguucgu acuccaggau ggcggcguaa 60

agggcccgcu gcucccguuc cuccgggguc agggcgacuu ggcugcaaaa ccuccugggg 120

agaaaggcac gcggugggug ccggggccag gcccuccccg cagcggcccc aggggcgggc 180

aggaguccca ccuguuggcg gccuccugga gccgcagccg gcgcuccucc aucuuucucu 240

ggagcugggu gcagagucaa ggggccgagc gugggaucug agcgggcccu cgguucccaa 300

ccccguccca cacccggaga ggccgggacg ucccagggac cuccucucgg ugaggggcug 360

uccccaggga ggccuccucc aguggcguca gcucucugga aaugugacaa gcugcugucu 420

agaccccagg aagcccagug gugucuggac accagaggag ucucucucau ccucccggau 480

ugcucugagg ccaggagcuu ugugacucug cccccugaag cuucuggaag aucucgggug 540

gcagaaaagg agagagcuuu ccuccuucau cggaguauac acggcggugu cggccggcag 600

gcuggggaau gggagcagcu gcaggcaugg uuggcuucag gcguguuuuc ccugcaagcc 660

auggguaacc aggggucaag cggugggcca caucccacag aggagaugcg ggcuuggggg 720

augccccagg agagccgccu acugcaggag acccaccaag cuuggcggcc gucgacuggg 780

cccucuccag acacugcugu gcuagcuuca gcaucuugga ggugucgggg ggcacaguuu 840

ccccagcuuc ugggggaggg acaagaaggc uggucacagu cggcucuacc acuguuacuu 900

acugcugaga uaaaaugagg caacggaaaa ggccucuggg aaguggccgu uuuacagaga 960

caaggacgug cugaggggau cgccucaccc aucucccacc ggcugugucc ccaaaguccu 1020

gccuucccgu agcuuggcau ggagcaccuc ugcgcgacca uggaccugcu cacacagccc 1080

uucugcgcgc cgugggagcu gccucucugu gacucgcccc uggacccacc gccccagcgc 1140

cugacccacc ucccugcugc ccuucacaga aaacuucuca uagacuccca uuuucucauc 1200

ccgccccgau uuagcccccg acuccccccg gaaacugccc uuacccgucc ccaccuugcc 1260

agacacggug ggccacugga guuccucugu cuucugggac uuugcucucc ccaggggauc 1320

cucugccacu ccuccaccca acuccucaau cuuggagcgc cagagcucag ccgagcucac 1380

cggcucccua gggagcuggg gcaacuguua gcucccccug accuguguga uccuacgucc 1440

aguggcugcc ccgaccucug ugaucccacg uccaggggcu cccccgaccu cugugauccc 1500

acguccagug gcucccccga ccucugugcu cccacgucca guggcucccc cgaccucugu 1560

gcucccacgu ccaguggcuc ccccgaccuc ugugcuccca cguccagugg gucccccuga 1620

ccucugugau cccacgucca guggcucccc cugaccucug ugcucuaugu ccaguggcuc 1680

ccccugaccu cugugauccu uugugcagcg gcugcuggcc ucucaaacuu aauguguuca 1740

uugcggaacu ugc 1753

<210> 2

<211> 20

<212> DNA/RNA

<213> Artificial sequence

<400> 2

ucuaccacug uuacuuacug 20

<210> 3

<211> 20

<212> DNA/RNA

<213> Artificial sequence

<400> 3

cgaccaugga ccugcucaca 20

<210> 4

<211> 20

<212> DNA/RNA

<213> Artificial sequence

<400> 4

uccuccaccc aacuccucaa 20

Claims

1.以抑制或者干扰VPS9D1-AS1基因表达的物质在如下至少一种中的应用：

1)制备治疗结直肠癌产品；

2)制备抑制肿瘤细胞增殖的产品；

5)制备预防或减轻结直肠癌引起的肠梗阻的产品；

6)制备延长结直肠癌动物或结直肠癌患者的生存期的产品。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：

所述抑制或者干扰VPS9D1-AS1基因表达的物质为靶向或干扰VPS9D1-AS1基因的ASO。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

所述靶向VPS9D1-AS1基因的ASO为序列2、序列3或序列4所示的RNA。

4.VPS9D1-AS1作为药物靶点在如下至少一种中的应用：

1)制备治疗结直肠癌产品；

2)制备抑制肿瘤细胞增殖的产品；

5)制备预防或减轻结直肠癌引起的肠梗阻的产品；

6)制备延长结直肠癌动物或结直肠癌患者的生存期的产品。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述药物靶点为ASO药物靶点。

6.一种产品，包括抑制或者干扰VPS9D1-AS1基因表达的物质。

7.根据权利要求6所述的产品，其特征在于：所述产品具有如下至少一种功能：

1)治疗结直肠癌；

2)抑制肿瘤细胞增殖；

4)改善或减轻结直肠癌动物或结直肠癌患者肠道出血症状；

5)预防或减轻结直肠癌引起的肠梗阻；

6)延长结直肠癌动物或结直肠癌患者的生存期。

8.根据权利要求6或7所述的产品，其特征在于：所述抑制或者干扰VPS9D1-AS1基因表达的物质为靶向或干扰VPS9D1-AS1基因的ASO。

9.根据权利要求8所述的产品，其特征在于：所述靶向或干扰VPS9D1-AS1基因的ASO为序列2、序列3或序列4所示的RNA。