CN115287181A - 一种程序性组织移植物脱细胞装置及方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及组织移植物脱细胞技术领域,具体为一种程序性组织移植物脱细胞装置,包括无菌超净台***,所述无菌超净台***的顶端设置有脱细胞***,所述无菌超净台***的底端设置有自动进料***,所述脱细胞***的内侧底端设置有甩干装置和灭菌装置,所述脱细胞***的内侧设置有机械臂***;本发明通过设置无菌超净台***,达到保证在无菌环境下完成脱细胞操作的目的,通过设置自动进料***,达到有效精确控制原料投放量,而且可自动配制脱细胞试剂溶液,所有液体试剂的加入或排空均为全自动操作,无需人工操作,降低受污染风险以及人工称量误差的目的,通过设置脱细胞***,达到实现了程序性、全自动组织移植物脱细胞处理,提高工作效率的目的。
Description
技术领域
本发明涉及组织移植物脱细胞技术领域,更具体地说,涉及一种程序性组织移植物脱细胞装置及方法。
背景技术
脱细胞组织移植物是通过结合物理、化学及生物方法,将同种异体或异种组织进行脱细胞处理后获得的组织移植物,脱细胞技术可去除组织中的细胞成分,从而最大程度上降低组织移植后的排斥反应,同时,通过优化脱细胞技术,尽可能保留组织内具有生物学效应的成分,例如蛋白多糖、胶原及生长因子等,脱细胞组织移植物可保留天然组织内部结构,为组织修复及再生提供天然支架,为修复细胞的迁移、增殖、***及分化提供天然场所,并且保留的生物学活性因子可调控细胞的生理活动、信号转导,从而调控组织的修复与再生,因此,脱细胞组织移植物在组织修复及再生领域具有突出的优势,并且具有较大的应用前景。
然而,现有的脱细胞技术通常是采用人工更换脱细胞试剂的方式完成,人工操作存在如下缺点:无法精确控制每一步操作的时间,而且需要时刻有人蹲守,极大浪费人力资源;在更换脱细胞试剂过程中,人工操作会增加污染的风险;人工操作无法精确控制脱细胞试剂加样量及体积,并且每次使用天平称量试剂存在称量误差且效率较低;最终脱细胞组织移植物需要单独取出,使用专用的灭菌仪器进行灭菌后包装成品,在转移产品过程中也会增加污染风险。
1.要解决的技术问题
针对现有技术中存在的问题,本发明的目的在于提供一种植保设备用的电池组,其优点在于防止因人工操作导致脱细胞组织移植物受到污染,有效降低产品的受污染风险。
发明内容
2.技术方案
为解决上述问题,本发明采用如下的技术方案。
一种程序性组织移植物脱细胞装置,包括无菌超净台***,所述无菌超净台***的顶端设置有脱细胞***,所述无菌超净台***的底端设置有自动进料***,所述脱细胞***的内侧底端设置有甩干装置和灭菌装置,所述脱细胞***的内侧设置有机械臂***;
所述无菌超净台***包括无菌超净台体、紫外灯、照明灯、抽风***和传送带,所述无菌超净台体为类L型结构,所述紫外灯、照明灯和抽风***均匀分布安装于无菌超净台体的垂直端面,所述传送带活动安装于无菌超净台体的水平端面。
可选的,所述脱细胞***包括主机、顶盖、操作主板、料筒指示板、开关按钮、预警***和若干脱细胞装置,所述主机的底端固定连接于无菌超净台体的顶端,所述顶盖转动连接于主机的顶端,所述操作主板固定连接于主机的顶端,所述料筒指示板固定连接于主机的前端,所述开关按钮固定连接于主机的顶端,所述预警***固定连接于主机的后端,若干所述脱细胞装置固定连接于主机的内侧底端。
可选的,所述脱细胞装置包括脱细胞料筒、第一固定座、第二磁力搅拌转子和超声装置及温控装置,所述第一固定座的底端固定连接于主机的内侧底端,所述脱细胞料筒的底端固定连接于第一固定座的顶端,所述第二磁力搅拌转子转动安装于脱细胞料筒的内侧底端,所述超声装置及温控装置固定安装于第一固定座的内壁,所述脱细胞料筒的顶端活动连接有悬吊杆,所述悬吊杆的底端固定连接有组织收集框。
可选的,所述自动进料***包括智能投料***、智能给水***、若干给水管道、若干液体试剂储存罐、若干试剂废液缸、清洗液储存罐、清洗液废液缸、若干试剂进液管道、若干试剂进液管道控制装置、若干试剂排液管道、若干试剂排液管道控制装置、若干清洗液进液管道、若干智能清洗装置、若干清洗液排液管道、若干清洗液排液管道控制装置、滤菌筛网、若干第一磁力搅拌转子、若干智能试剂输送***、若干液体体积监测***及温控***、若干液体体积监测装置、若干废液排液管道,所述智能投料***固定连接于无菌超净台体的底端,若干所述液体试剂储存罐和试剂废液缸固定连接于智能投料***的底端,所述智能给水***固定连接于若干液体试剂储存罐的左侧,所述清洗液储存罐和清洗液废液缸均固定连接于若干试剂废液缸的右侧,若干所述给水管道的一端分别固定连接于若干液体试剂储存罐的侧壁和清洗液储存罐的侧壁,若干所述给水管道的另一端固定连接于智能给水***的侧壁,所述试剂进液管道的一端均固定连接于液体试剂储存罐的底端,所述试剂进液管道控制装置均固定连接于试剂进液管道的另一端,所述试剂排液管道的一端均固定连接于试剂废液缸的侧壁,所述试剂排液管道控制装置均固定连接于试剂排液管道的另一端,所述清洗液进液管道的一端均固定连接于清洗液储存罐的底端,所述智能清洗装置均固定连接于清洗液进液管道的另一端,所述清洗液排液管道的一端均固定连接于清洗液废液缸的侧壁,所述清洗液排液管道控制装置均固定连接于清洗液排液管道的另一端,所述滤菌筛网固定连接于给水管道的内壁,所述第一磁力搅拌转子均转动安装于液体试剂储存罐的底端,所述智能试剂输送***均固定连接于试剂进液管道的一端,所述液体体积监测***及温控***均固定连接于液体试剂储存罐的底端,所述液体体积监测装置均固定连接于试剂废液缸的底端,所述废液排液管道的一端均固定连接于试剂废液缸的底端。
可选的,所述机械臂***包括水平移动臂、前后移动臂、上下移动臂、机械臂抓钩、前后移动臂滑槽、机械臂抓钩滑槽和水平移动臂轨道,所述水平移动臂轨道固定安装于主机的内侧,所述水平移动臂滑动连接于水平移动臂轨道的侧壁,所述前后移动臂滑槽开设于水平移动臂的侧壁,所述前后移动臂的侧壁通过与前后移动臂滑槽相契合滑动连接于水平移动臂的侧壁,所述机械臂抓钩滑槽开设于前后移动臂的侧壁,所述上下移动臂的侧壁通过与机械臂抓钩滑槽相契合滑动连接于前后移动臂的侧壁,所述机械臂抓钩固定连接于上下移动臂的底端。
可选的,所述甩干装置包括甩干腔、第二固定座、甩干装置主机和高速转子,所述第二固定座的底端固定连接于主机的内侧底端,所述甩干腔的底端固定连接于第二固定座的顶端,所述甩干装置主机固定安装于第二固定座的内壁,所述高速转子转动安装于甩干腔的内壁。
可选的,所述灭菌装置包括灭菌腔、第三固定座、通风阀门、低温等离子灭菌射频激发装置、真空泵和过氧化氢储存腔,所述第三固定座的底端固定连接于主机的内侧底端,所述灭菌腔的底端固定连接于第三固定座的顶端,所述通风阀门固定连接于灭菌腔的侧壁,所述低温等离子灭菌射频激发装置、真空泵和过氧化氢储存腔均均匀分布安装于第三固定座的内壁。
可选的,所述试剂进液管道控制装置和试剂排液管道控制装置均固定连接于脱细胞料筒的底端且分别通过试剂进液管道和试剂排液管道与液体试剂储存罐和试剂废液缸相连通。
可选的,所述智能清洗装置和清洗液排液管道控制装置均分别固定连接于脱细胞料筒和甩干腔的底端且分别通过清洗液进液管道和清洗液排液管道与清洗液储存罐和清洗液废液缸相连通。
一种程序性组织移植物脱细胞装置的使用方法,具体包括以下步骤:
S1:在无菌环境下分离、获取猪小肠粘膜下层组织,根据临床移植需求,使用无菌器械修剪组织,使用组织收集框装载组织,浸泡于无菌、等渗透压磷酸盐缓冲液(PBS)中;
S2:向智能投料***内装载适量的试剂原料,开启电源,打开紫外灯,照射30分钟;
S3:开启智能给水***及智能投料***,自动配制脱细胞试剂,包括磷酸盐缓冲液(PBS)、0.25% EDTA -胰酶溶液、0.5%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液、0.5%TritonX-100溶液;液体试剂储存罐底部的第一磁力搅拌转子搅拌溶液,促进原料完全溶解,分散均匀,并且,储存罐底部的温控装置启动,根据脱细胞试剂温度的需求,自动调节温度,本发明中,0.25%EDTA -胰酶溶液要求温度为4度,其余溶液为常温25度;
S4:脱细胞试剂由智能试剂输送***输送至相应的脱细胞料筒内,脱细胞料筒内的第二磁力搅拌转子运转,带动脱细胞试剂流动,从而提高脱细胞效果,并且,脱细胞料筒的温控装置开启,将脱细胞试剂维持在工作温度;
S5:将组织收集框放置于1号脱细胞料筒内(PBS溶液),设定脱细胞参数,具体参数如下:
1号脱细胞料筒:PBS溶液,室温,2小时
2号脱细胞料筒:0.25 EDTA -胰酶溶液,4度,12小时
3号脱细胞料筒:PBS溶液,室温,2小时
4号脱细胞料筒:0.5%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液,室温,12小时,中间自动更换一次溶液
5号脱细胞料筒:0.5%TritonX-100溶液,室温,12小时,中间自动更换一次溶液
6号脱细胞料筒:PBS溶液,室温,48小时,每隔12小时自动更换一次溶液
开启脱细胞程序,1号脱细胞料筒处理结束后,由机械臂抓取组织收集框,转移至2号脱细胞料筒,随后依次转移至3号脱细胞料筒、4号脱细胞料筒、5号脱细胞料筒、6号脱细胞料筒;
S6:脱细胞试剂处理完毕后,由机械臂将组织转移至甩干装置,高速转子以10000转每分钟的速度进行甩干操作,彻底去除组织表面残留液体;
S7:甩干结束后,由机械臂将组织转移至灭菌装置,灭菌装置顶部设有密封装置,保证整个灭菌腔完全密封,灭菌装置的真空泵自动启动,抽空灭菌腔内的空气;***自动向灭菌腔内注入浓度60%的过氧化氢溶液,此时,过氧化氢溶液瞬间气化并扩散至灭菌腔内的每个角落;随后射频激发装置启动,过氧化氢分子在射频激发下产生等离子体,从而完全杀灭微生物;灭菌结束后,通风阀门开启,使经过过滤的空气进入灭菌腔,当灭菌腔内达到正常大气压时,灭菌结束,并且,在空气进入灭菌腔的同时,预警***开启,提醒工作人员灭菌即将结束;
S8:随后由机械臂将灭菌后的组织转移至传送带上;
S9:将脱细胞及灭菌后的猪小肠粘膜下层组织包装在特定的无菌容器内,放入冻干机内进行冻干操作,获得冻干的脱细胞猪小肠粘膜下层膜片;
S10:脱细胞过程结束后,自动进入仪器清洗程序,清洗液储存罐内的清洗液被输送至脱细胞料筒及甩干装置,智能清洗装置启动,智能清洗装置含有高压旋转喷头,可快速清洗料筒侧壁各个角落,同时,超声装置启动,加强清洗功能;
S11:清洗完毕后,由清洗液排液管道控制装置控制清洗液,统一排出至清洗液废液缸内,重复三次清洗操作。
3.有益效果
相比于现有技术,本发明的优点在于:
(1)本方案通过设置无菌超净台***,通过紫外灯对整个操作环境进行消毒灭菌,通过抽风***可减弱微生物的附着,降低污染风险,从而达到有效对组织收集框内的组织进行杀菌消毒,保证在无菌环境下完成脱细胞操作的目的;
(2)通过设置自动进料***,通过智能投料***根据设定的脱细胞试剂浓度及体积,精确控制原料投放量,通过智能给水***可向液体试剂储存罐、清洗液储存罐中提供清洁去离子水;给水管道内含有滤菌筛网,保证进入储存罐内的液体为无菌的,通过智能投料***及智能给水***完成自动配制,储存罐底部设有磁力搅拌装置及磁力搅拌子,可对液体试剂进行搅拌混匀,其次,储存罐底部设有智能试剂输送***,通过储存罐的试剂输送管道与脱细胞料筒的试剂进液管道相连,向相应的脱细胞料筒内输送试剂,而且,储存罐底部设有液体体积监测***,实时监测储存罐内剩余试剂体积,若剩余试剂体积低于下限,则智能给水***及智能投料***开放,自动配制新的溶液,其次,储存罐底部的温控***可对溶液进行加热或降温处理,并且,废液缸底部设有液体体积监测***,实时监测废液缸内液体体积,若废液量超出上限,则通过废液排液管道排除;从而达到有效精确控制原料投放量,而且可自动配制脱细胞试剂溶液,所有液体试剂的加入或排空均为全自动操作,无需人工操作,降低受污染风险以及人工称量误差的目的;
(3)通过设置灭菌装置,通过低温等离子灭菌射频激发装置可激发特定的电场射频,将过氧化氢分解产生等离子体,通过真空泵抽空灭菌腔内的空气,形成真空,通过过氧化氢储存腔储存过氧化氢液体(灭菌使用的过氧化氢浓度为60%),通过通风阀门待灭菌结束后,可过滤外界空气,进入灭菌腔,恢复至正常气压,从而达到脱细胞结束后,自动进入低温等离子灭菌程序,有效对脱细胞组织进行杀菌消毒,无需单独取出使用专用的灭菌仪器进行灭菌,降低转移过程中受污染风险的目的;
(4)通过设置机械臂***,通过水平移动臂实现机械臂的水平移动,通过前后移动臂实现机械臂的前后移动,通过上下移动臂实现机械臂的上下移动,从而达到精确抓取组织收集框,精确控制组织的转移的目的;
(5)通过设置脱细胞***,通过操作主板控制脱细胞过程,可控制脱细胞过程中的温度、时间、搅拌速度、超声处理参数等,以及对试剂溶液的更换,脱细胞料筒的清洗、甩干装置的参数、灭菌装置的参数进行设置,通过预警***当设备出现故障、脱细胞试剂溶液低于下限或高于上限、脱细胞过程即将结束(一般指距离灭菌结束还剩5分钟)时,预警***会发出报警,从而达到实现了程序性、全自动组织移植物脱细胞处理,提高工作效率的目的。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案,下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图
图1为本发明的结构示意图;
图2为本发明无菌超净台***的结构示意图;
图3为本发明传送带的结构示意图;
图4为本发明脱细胞***的结构示意图;
图5为本发明自动进料***的结构示意图;
图6为本发明自动进料***的放大图;
图7为本发明输送管道的连接示意图;
图8为本发明脱细胞装置的结构示意图;
图9为本发明机械臂***的结构示意图;
图10为本发明甩干装置的结构示意图;
图11为本发明灭菌装置的结构示意图;
图12为本发明使用方法流程图。
图中标号说明:
1、无菌超净台***;101、无菌超净台体;102、紫外灯;103、照明灯;104、抽风***;105、传送带;2、脱细胞***;201、主机;202、顶盖;203、操作主板;204、料筒指示板;205、开关按钮;206、预警***;3、自动进料***;301、智能投料***;302、智能给水***;303、给水管道;304、液体试剂储存罐;305、试剂废液缸;306、清洗液储存罐;307、清洗液废液缸;308、试剂进液管道;309、试剂进液管道控制装置;310、试剂排液管道;311、试剂排液管道控制装置;312、清洗液进液管道;313、智能清洗装置;314、清洗液排液管道;315、清洗液排液管道控制装置;316、滤菌筛网;317、第一磁力搅拌转子;318、智能试剂输送***;319、液体体积监测***及温控***;320、液体体积监测装置;321、废液排液管道;4、脱细胞装置;401、脱细胞料筒;402、第一固定座;403、第二磁力搅拌转子;404、超声装置及温控装置;5、机械臂***;501、水平移动臂;502、前后移动臂;503、上下移动臂;504、机械臂抓钩;505、前后移动臂滑槽;506、机械臂抓钩滑槽;507、水平移动臂轨道;6、甩干装置;601、甩干腔;602、第二固定座;603、甩干装置主机;604、高速转子;7、灭菌装置;701、灭菌腔;702、第三固定座;703、通风阀门;704、低温等离子灭菌射频激发装置;705、真空泵;706、过氧化氢储存腔;8、悬吊杆;9、组织收集框。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
请参阅图1、图2、图3,本发明提供一种程序性组织移植物脱细胞装置,包括无菌超净台***1;无菌超净台***1包括无菌超净台体101、紫外灯102、照明灯103、抽风***104和传送带105,无菌超净台体101为类L型结构,紫外灯102、照明灯103和抽风***104均匀分布安装于无菌超净台体101的垂直端面,通过设置紫外灯102对整个操作环境进行消毒灭菌,通过设置照明灯103可清晰观察不同组织移植物,通过设置抽风***104减弱微生物的附着,降低污染风险,传送带105活动安装于无菌超净台体101的水平端面;通过设置传送带105将组织运出,随后进行下一步产品包装阶段。
在一些实施例中,参阅图1、图4、图8,无菌超净台***1的顶端设置有脱细胞***2;脱细胞***2包括主机201、顶盖202、操作主板203、料筒指示板204、开关按钮205、预警***206和若干脱细胞装置4,主机201的底端固定连接于无菌超净台体101的顶端,通过设置主机201包含操作中所有仪器设备的电器等零部件,顶盖202转动连接于主机201的顶端,操作主板203固定连接于主机201的顶端,通过设置操作主板203控制脱细胞过程,可控制脱细胞过程中的温度、时间、搅拌速度、超声处理参数等,以及对试剂溶液的更换,脱细胞料筒401的清洗、甩干装置6的参数、灭菌装置7的参数进行设置,料筒指示板204固定连接于主机201的前端,通过设置料筒指示板204可显示每个料筒内的成分、残余试剂溶液的体积,开关按钮205固定连接于主机201的顶端,通过设置开关按钮205控制仪器的开关,预警***206固定连接于主机201的后端,通过设置预警***206当设备出现故障、脱细胞试剂溶液低于下限或高于上限、脱细胞过程即将结束(一般指距离灭菌结束还剩5分钟)时,预警***206会发出报警,若干脱细胞装置4固定连接于主机201的内侧底端;脱细胞装置4包括脱细胞料筒401、第一固定座402、第二磁力搅拌转子403和超声装置及温控装置404,第一固定座402的底端固定连接于主机201的内侧底端,脱细胞料筒401的底端固定连接于第一固定座402的顶端,通过设置脱细胞料筒401装有不同的脱细胞试剂,第二磁力搅拌转子403转动安装于脱细胞料筒401的内侧底端,通过设置第二磁力搅拌转子403进行转动搅拌,超声装置及温控装置404固定安装于第一固定座402的内壁,脱细胞料筒401的顶端活动连接有悬吊杆8,通过设置悬吊杆8方便钩取,悬吊杆8的底端固定连接有组织收集框9;通过设置组织收集框9方便对组织移植物进行盛放。
在一些实施例中,参阅图1、图5、图6、图7、图10,无菌超净台***1的底端设置有自动进料***3;自动进料***3包括智能投料***301、智能给水***302、若干给水管道303、若干液体试剂储存罐304、若干试剂废液缸305、清洗液储存罐306、清洗液废液缸307、若干试剂进液管道308、若干试剂进液管道控制装置309、若干试剂排液管道310、若干试剂排液管道控制装置311、若干清洗液进液管道312、若干智能清洗装置313、若干清洗液排液管道314、若干清洗液排液管道控制装置315、滤菌筛网316、若干第一磁力搅拌转子317、若干智能试剂输送***318、若干液体体积监测***及温控***319、若干液体体积监测装置320、若干废液排液管道321,智能投料***301固定连接于无菌超净台体101的底端,通过设置智能投料***301可预先将脱细胞试剂原料储存于智能投料腔内,智能投料***301可根据设定的脱细胞试剂浓度及体积,精确控制原料投放量,并将原料投放到液体储存罐中,若干液体试剂储存罐304和试剂废液缸305固定连接于智能投料***301的底端,通过设置液体试剂储存罐304将脱细胞使用的试剂预先在储存罐中配制,通过设置试剂废液缸305收集每个脱细胞试剂废液,智能给水***302固定连接于若干液体试剂储存罐304的左侧,通过设置智能给水***302向液体试剂储存罐304、清洗液储存罐306中提供清洁去离子水,清洗液储存罐306和清洗液废液缸307均固定连接于若干试剂废液缸305的右侧,通过设置清洗液储存罐306对清洗液进行储存,通过设置清洗液废液缸307收集清洗后的废液,若干给水管道303的一端分别固定连接于若干液体试剂储存罐304的侧壁和清洗液储存罐306的侧壁,若干给水管道303的另一端固定连接于智能给水***302的侧壁,试剂进液管道308的一端均固定连接于液体试剂储存罐304的底端,试剂进液管道控制装置309均固定连接于试剂进液管道308的另一端,试剂排液管道310的一端均固定连接于试剂废液缸305的侧壁,试剂排液管道控制装置311均固定连接于试剂排液管道310的另一端;试剂进液管道控制装置309和试剂排液管道控制装置311均固定连接于脱细胞料筒401的底端且分别通过试剂进液管道308和试剂排液管道310与液体试剂储存罐304和试剂废液缸305相连通;清洗液进液管道312的一端均固定连接于清洗液储存罐306的底端,智能清洗装置313均固定连接于清洗液进液管道312的另一端,通过设置智能清洗装置313含有高压旋转喷头,可快速清洗甩干机侧壁各个角落,清洗液排液管道314的一端均固定连接于清洗液废液缸307的侧壁,清洗液排液管道控制装置315均固定连接于清洗液排液管道314的另一端;通过设置清洗液排液管道控制装置315控制清洗废液由清洗液排液管道314排出,智能清洗装置313和清洗液排液管道控制装置315均分别固定连接于脱细胞料筒401和甩干腔601的底端且分别通过清洗液进液管道312和清洗液排液管道314与清洗液储存罐306和清洗液废液缸307相连通;滤菌筛网316固定连接于给水管道303的内壁,通过设置滤菌筛网316保证进入储存罐内的液体为无菌的,第一磁力搅拌转子317均转动安装于液体试剂储存罐304的底端,通过设置第一磁力搅拌转子317对液体试剂进行搅拌混匀,智能试剂输送***318均固定连接于试剂进液管道308的一端,通过设置智能试剂输送***318通过储存罐的试剂输送管道与脱细胞料筒401的试剂进液管道308相连,向相应的脱细胞料筒401内输送试剂,液体体积监测***及温控***319均固定连接于液体试剂储存罐304的底端,液体体积监测装置320均固定连接于试剂废液缸305的底端,废液排液管道321的一端均固定连接于试剂废液缸305的底端;通过液体体积监测***及温控***319和液体体积监测装置320实时监测储存罐内剩余试剂体积,同时对溶液进行加热或降温处理。
在一些实施例中,参阅图1、图4、图10,脱细胞***2的内侧底端设置有甩干装置6和灭菌装置7;甩干装置6包括甩干腔601、第二固定座602、甩干装置主机603和高速转子604,第二固定座602的底端固定连接于主机201的内侧底端,甩干腔601的底端固定连接于第二固定座602的顶端,甩干装置主机603固定安装于第二固定座602的内壁,通过设置甩干装置主机603包含相关电器部件,高速转子604转动安装于甩干腔601的内壁;通过设置高速转子604带动内部组织收集框9高速转动,可达到10000-20000转每分钟。
在一些实施例中,参阅图1、图4、图11,灭菌装置7包括灭菌腔701、第三固定座702、通风阀门703、低温等离子灭菌射频激发装置704、真空泵705和过氧化氢储存腔706,第三固定座702的底端固定连接于主机201的内侧底端,灭菌腔701的底端固定连接于第三固定座702的顶端,通风阀门703固定连接于灭菌腔701的侧壁,通过设置通风阀门703待灭菌结束后,可过滤外界空气,进入灭菌腔701,恢复至正常气压,低温等离子灭菌射频激发装置704、真空泵705和过氧化氢储存腔706均均匀分布安装于第三固定座702的内壁;通过设置低温等离子灭菌射频激发装置704可激发特定的电场射频,将过氧化氢分解产生等离子体,通过设置真空泵705抽空灭菌腔701内的空气,形成真空,通过设置过氧化氢储存腔706储存过氧化氢液体(灭菌使用的过氧化氢浓度为60%)。
进一步的,请再次参阅图1、图4、图9,脱细胞***2的内侧设置有机械臂***5;机械臂***5包括水平移动臂501、前后移动臂502、上下移动臂503、机械臂抓钩504、前后移动臂滑槽505、机械臂抓钩滑槽506和水平移动臂轨道507,水平移动臂轨道507固定安装于主机201的内侧,通过设置水平移动臂轨道507供水平机械臂在X轴上的水平移动,水平移动臂501滑动连接于水平移动臂轨道507的侧壁,通过设置水平移动臂501实现机械臂的水平移动,控制机械臂在X轴上的移动,前后移动臂滑槽505开设于水平移动臂501的侧壁,通过设置前后移动臂滑槽505供机械臂在滑槽内的移动,前后移动臂502的侧壁通过与前后移动臂滑槽505相契合滑动连接于水平移动臂501的侧壁,通过设置前后移动臂502实现机械臂的前后移动,控制机械臂在Y轴上的移动,机械臂抓钩滑槽506开设于前后移动臂502的侧壁,通过设置机械臂抓钩滑槽506供机械臂抓钩504上下移动,上下移动臂503的侧壁通过与机械臂抓钩滑槽506相契合滑动连接于前后移动臂502的侧壁,通过设置上下移动臂503实现机械臂的上下移动,控制机械臂在Z轴上的移动,机械臂抓钩504固定连接于上下移动臂503的底端;通过设置机械臂抓钩504用于抓取装载有组织移植物的组织收集框9。
S1:在无菌环境下分离、获取猪小肠粘膜下层组织,根据临床移植需求,使用无菌器械修剪组织,使用组织收集框9装载组织,浸泡于无菌、等渗透压磷酸盐缓冲液(PBS)中;
S2:向智能投料***301内装载适量的试剂原料,开启电源,打开紫外灯102,照射30分钟;从而达到有效对组织收集框9内的组织进行杀菌消毒,保证在无菌环境下完成脱细胞操作的目的;
S3:开启智能给水***302及智能投料***301,自动配制脱细胞试剂,包括磷酸盐缓冲液(PBS)、0.25% EDTA -胰酶溶液、0.5%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液、0.5%TritonX-100溶液;液体试剂储存罐304底部的第一磁力搅拌转子317搅拌溶液,促进原料完全溶解,分散均匀,并且,储存罐底部的温控装置启动,根据脱细胞试剂温度的需求,自动调节温度,本发明中,0.25% EDTA -胰酶溶液要求温度为4度,其余溶液为常温25度;达到有效精确控制原料投放量,而且可自动配制脱细胞试剂溶液的目的;
S4:脱细胞试剂由智能试剂输送***318输送至相应的脱细胞料筒401内,达到所有液体试剂的加入或排空均为全自动操作的目的,脱细胞料筒401内的第二磁力搅拌转子403运转,带动脱细胞试剂流动,从而提高脱细胞效果,并且,脱细胞料筒401的温控装置开启,将脱细胞试剂维持在工作温度;
S5:将组织收集框9放置于1号脱细胞料筒401内(PBS溶液),设定脱细胞参数,具体参数如下:
1号脱细胞料筒401:PBS溶液,室温,2小时
2号脱细胞料筒401:0.25 EDTA -胰酶溶液,4度,12小时
3号脱细胞料筒401:PBS溶液,室温,2小时
4号脱细胞料筒401:0.5%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液,室温,12小时,中间自动更换一次溶液
5号脱细胞料筒401:0.5%TritonX-100溶液,室温,12小时,中间自动更换一次溶液
6号脱细胞料筒401:PBS溶液,室温,48小时,每隔12小时自动更换一次溶液
开启脱细胞程序,1号脱细胞料筒401处理结束后,由机械臂抓取组织收集框9,转移至2号脱细胞料筒401,随后依次转移至3号脱细胞料筒401、4号脱细胞料筒401、5号脱细胞料筒401、6号脱细胞料筒401;达到通过机械臂在XYZ轴上的移动,精确抓取组织收集框9,精确控制组织转移的目的;
S6:脱细胞试剂处理完毕后,由机械臂将组织转移至甩干装置6,高速转子604以10000转每分钟的速度进行甩干操作,彻底去除组织表面残留液体;
S7:甩干结束后,由机械臂将组织转移至灭菌装置7,灭菌装置7顶部设有密封装置,保证整个灭菌腔701完全密封,灭菌装置7的真空泵705自动启动,抽空灭菌腔701内的空气;***自动向灭菌腔701内注入浓度60%的过氧化氢溶液,此时,过氧化氢溶液瞬间气化并扩散至灭菌腔701内的每个角落;随后射频激发装置启动,过氧化氢分子在射频激发下产生等离子体,从而完全杀灭微生物;灭菌结束后,通风阀门703开启,使经过过滤的空气进入灭菌腔701,当灭菌腔701内达到正常大气压时,灭菌结束,并且,在空气进入灭菌腔701的同时,预警***206开启,提醒工作人员灭菌即将结束;从而达到在脱细胞结束后,有效自动进入低温等离子灭菌程序的目的;
S8:随后由机械臂将灭菌后的组织转移至传送带105上;通过传送带105实现自动输送的目的;
S9:将脱细胞及灭菌后的猪小肠粘膜下层组织包装在特定的无菌容器内,放入冻干机内进行冻干操作,获得冻干的脱细胞猪小肠粘膜下层膜片;
S10:脱细胞过程结束后,自动进入仪器清洗程序,清洗液储存罐306内的清洗液被输送至脱细胞料筒401及甩干装置6,智能清洗装置313启动,智能清洗装置313含有高压旋转喷头,可快速清洗料筒侧壁各个角落,同时,超声装置启动,加强清洗功能;
S11:清洗完毕后,由清洗液排液管道控制装置315控制清洗液,统一排出至清洗液废液缸307内,重复三次清洗操作,从而达到实现了程序性、全自动组织移植物脱细胞处理,提高工作效率的目的。
以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节,也不限制该发明仅为所述的具体实施方式。显然,根据本说明书的内容,可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例,是为了更好地解释本发明的原理和实际应用,从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。
Claims (9)
1.一种程序性组织移植物脱细胞装置,其特征在于,包括无菌超净台***(1),所述无菌超净台***(1)的顶端设置有脱细胞***(2),所述无菌超净台***(1)的底端设置有自动进料***(3),所述脱细胞***(2)的内侧底端设置有甩干装置(6)和灭菌装置(7),所述脱细胞***(2)的内侧设置有机械臂***(5);
所述无菌超净台***(1)包括无菌超净台体(101)、紫外灯(102)、照明灯(103)、抽风***(104)和传送带(105),所述无菌超净台体(101)为类L型结构,所述紫外灯(102)、照明灯(103)和抽风***(104)均匀分布安装于无菌超净台体(101)的垂直端面,所述传送带(105)活动安装于无菌超净台体(101)的水平端面。
2.根据权利要求1所述的一种程序性组织移植物脱细胞装置,其特征在于:所述脱细胞***(2)包括主机(201)、顶盖(202)、操作主板(203)、料筒指示板(204)、开关按钮(205)、预警***(206)和若干脱细胞装置(4),所述主机(201)的底端固定连接于无菌超净台体(101)的顶端,所述顶盖(202)转动连接于主机(201)的顶端,所述操作主板(203)固定连接于主机(201)的顶端,所述料筒指示板(204)固定连接于主机(201)的前端,所述开关按钮(205)固定连接于主机(201)的顶端,所述预警***(206)固定连接于主机(201)的后端,若干所述脱细胞装置(4)固定连接于主机(201)的内侧底端。
3.根据权利要求2所述的一种程序性组织移植物脱细胞装置,其特征在于:所述脱细胞装置(4)包括脱细胞料筒(401)、第一固定座(402)、第二磁力搅拌转子(403)和超声装置及温控装置(404),所述第一固定座(402)的底端固定连接于主机(201)的内侧底端,所述脱细胞料筒(401)的底端固定连接于第一固定座(402)的顶端,所述第二磁力搅拌转子(403)转动安装于脱细胞料筒(401)的内侧底端,所述超声装置及温控装置(404)固定安装于第一固定座(402)的内壁,所述脱细胞料筒(401)的顶端活动连接有悬吊杆(8),所述悬吊杆(8)的底端固定连接有组织收集框(9)。
4.根据权利要求1所述的一种程序性组织移植物脱细胞装置,其特征在于:所述自动进料***(3)包括智能投料***(301)、智能给水***(302)、若干给水管道(303)、若干液体试剂储存罐(304)、若干试剂废液缸(305)、清洗液储存罐(306)、清洗液废液缸(307)、若干试剂进液管道(308)、若干试剂进液管道控制装置(309)、若干试剂排液管道(310)、若干试剂排液管道控制装置(311)、若干清洗液进液管道(312)、若干智能清洗装置(313)、若干清洗液排液管道(314)、若干清洗液排液管道控制装置(315)、滤菌筛网(316)、若干第一磁力搅拌转子(317)、若干智能试剂输送***(318)、若干液体体积监测***及温控***(319)、若干液体体积监测装置(320)、若干废液排液管道(321),所述智能投料***(301)固定连接于无菌超净台体(101)的底端,若干所述液体试剂储存罐(304)和试剂废液缸(305)固定连接于智能投料***(301)的底端,所述智能给水***(302)固定连接于若干液体试剂储存罐(304)的左侧,所述清洗液储存罐(306)和清洗液废液缸(307)均固定连接于若干试剂废液缸(305)的右侧,若干所述给水管道(303)的一端分别固定连接于若干液体试剂储存罐(304)的侧壁和清洗液储存罐(306)的侧壁,若干所述给水管道(303)的另一端固定连接于智能给水***(302)的侧壁,所述试剂进液管道(308)的一端均固定连接于液体试剂储存罐(304)的底端,所述试剂进液管道控制装置(309)均固定连接于试剂进液管道(308)的另一端,所述试剂排液管道(310)的一端均固定连接于试剂废液缸(305)的侧壁,所述试剂排液管道控制装置(311)均固定连接于试剂排液管道(310)的另一端,所述清洗液进液管道(312)的一端均固定连接于清洗液储存罐(306)的底端,所述智能清洗装置(313)均固定连接于清洗液进液管道(312)的另一端,所述清洗液排液管道(314)的一端均固定连接于清洗液废液缸(307)的侧壁,所述清洗液排液管道控制装置(315)均固定连接于清洗液排液管道(314)的另一端,所述滤菌筛网(316)固定连接于给水管道(303)的内壁,所述第一磁力搅拌转子(317)均转动安装于液体试剂储存罐(304)的底端,所述智能试剂输送***(318)均固定连接于试剂进液管道(308)的一端,所述液体体积监测***及温控***(319)均固定连接于液体试剂储存罐(304)的底端,所述液体体积监测装置(320)均固定连接于试剂废液缸(305)的底端,所述废液排液管道(321)的一端均固定连接于试剂废液缸(305)的底端。
5.根据权利要求2所述的一种程序性组织移植物脱细胞装置,其特征在于:所述机械臂***(5)包括水平移动臂(501)、前后移动臂(502)、上下移动臂(503)、机械臂抓钩(504)、前后移动臂滑槽(505)、机械臂抓钩滑槽(506)和水平移动臂轨道(507),所述水平移动臂轨道(507)固定安装于主机(201)的内侧,所述水平移动臂(501)滑动连接于水平移动臂轨道(507)的侧壁,所述前后移动臂滑槽(505)开设于水平移动臂(501)的侧壁,所述前后移动臂(502)的侧壁通过与前后移动臂滑槽(505)相契合滑动连接于水平移动臂(501)的侧壁,所述机械臂抓钩滑槽(506)开设于前后移动臂(502)的侧壁,所述上下移动臂(503)的侧壁通过与机械臂抓钩滑槽(506)相契合滑动连接于前后移动臂(502)的侧壁,所述机械臂抓钩(504)固定连接于上下移动臂(503)的底端。
6.根据权利要求2所述的一种程序性组织移植物脱细胞装置,其特征在于:所述甩干装置(6)包括甩干腔(601)、第二固定座(602)、甩干装置主机(603)和高速转子(604),所述第二固定座(602)的底端固定连接于主机(201)的内侧底端,所述甩干腔(601)的底端固定连接于第二固定座(602)的顶端,所述甩干装置主机(603)固定安装于第二固定座(602)的内壁,所述高速转子(604)转动安装于甩干腔(601)的内壁。
7.根据权利要求4所述的一种程序性组织移植物脱细胞装置,其特征在于:所述试剂进液管道控制装置(309)和试剂排液管道控制装置(311)均固定连接于脱细胞料筒(401)的底端且分别通过试剂进液管道(308)和试剂排液管道(310)与液体试剂储存罐(304)和试剂废液缸(305)相连通。
8.根据权利要求4所述的一种程序性组织移植物脱细胞装置,其特征在于:所述智能清洗装置(313)和清洗液排液管道控制装置(315)均分别固定连接于脱细胞料筒(401)和甩干腔(601)的底端且分别通过清洗液进液管道(312)和清洗液排液管道(314)与清洗液储存罐(306)和清洗液废液缸(307)相连通。
9.根据权利要求1-9任一项所述的一种程序性组织移植物脱细胞装置的使用方法,其特征在于:具体包括以下步骤:
S1:在无菌环境下分离、获取猪小肠粘膜下层组织,根据临床移植需求,使用无菌器械修剪组织,使用组织收集框(9)装载组织,浸泡于无菌、等渗透压磷酸盐缓冲液中;
S2:向智能投料***(301)内装载适量的试剂原料,开启电源,打开紫外灯(102),照射30分钟;
S3:开启智能给水***(302)及智能投料***(301),自动配制脱细胞试剂,包括磷酸盐缓冲液、0.25% EDTA -胰酶溶液、0.5%十二烷基硫酸钠溶液、0.5%TritonX-100溶液;液体试剂储存罐(304)底部的第一磁力搅拌转子(317)搅拌溶液,促进原料完全溶解,分散均匀,并且,储存罐底部的温控装置启动,根据脱细胞试剂温度的需求,自动调节温度,本发明中,0.25% EDTA -胰酶溶液要求温度为4度,其余溶液为常温25度;
S4:脱细胞试剂由智能试剂输送***(318)输送至相应的脱细胞料筒(401)内,脱细胞料筒(401)内的第二磁力搅拌转子(403)运转,带动脱细胞试剂流动,从而提高脱细胞效果,并且,脱细胞料筒(401)的温控装置开启,将脱细胞试剂维持在工作温度;
S5:将组织收集框(9)放置于1号脱细胞料筒(401)内磷酸盐缓冲液,设定脱细胞参数,具体参数如下:
1号脱细胞料筒(401):磷酸盐缓冲液溶液,室温,2小时
2号脱细胞料筒(401):0.25 EDTA -胰酶溶液,4度,12小时
3号脱细胞料筒(401):磷酸盐缓冲液溶液,室温,2小时
4号脱细胞料筒(401):0.5%十二烷基硫酸钠溶液,室温,12小时,中间自动更换一次溶液
5号脱细胞料筒(401):0.5%TritonX-100溶液,室温,12小时,中间自动更换一次溶液
6号脱细胞料筒(401):PBS溶液,室温,48小时,每隔12小时自动更换一次溶液
开启脱细胞程序,1号脱细胞料筒(401)处理结束后,由机械臂抓取组织收集框(9),转移至2号脱细胞料筒(401),随后依次转移至3号脱细胞料筒(401)、4号脱细胞料筒(401)、5号脱细胞料筒(401)、6号脱细胞料筒(401);
S6:脱细胞试剂处理完毕后,由机械臂将组织转移至甩干装置(6),高速转子(604)以10000转每分钟的速度进行甩干操作,彻底去除组织表面残留液体;
S7:甩干结束后,由机械臂将组织转移至灭菌装置(7),灭菌装置(7)顶部设有密封装置,保证整个灭菌腔完全密封,灭菌装置(7)的真空泵(705)自动启动,抽空灭菌腔(701)内的空气;***自动向灭菌腔(701)内注入浓度60%的过氧化氢溶液,此时,过氧化氢溶液瞬间气化并扩散至灭菌腔(701)内的每个角落;随后射频激发装置启动,过氧化氢分子在射频激发下产生等离子体,从而完全杀灭微生物;灭菌结束后,通风阀门(703)开启,使经过过滤的空气进入灭菌腔(701),当灭菌腔(701)内达到正常大气压时,灭菌结束,并且,在空气进入灭菌腔(701)的同时,预警***(206)开启,提醒工作人员灭菌即将结束;
S8:随后由机械臂将灭菌后的组织转移至传送带(105)上;
S9:将脱细胞及灭菌后的猪小肠粘膜下层组织包装在特定的无菌容器内,放入冻干机内进行冻干操作,获得冻干的脱细胞猪小肠粘膜下层膜片;
S10:脱细胞过程结束后,自动进入仪器清洗程序,清洗液储存罐(306)内的清洗液被输送至脱细胞料筒(401)及甩干装置(6),智能清洗装置(313)启动,智能清洗装置(313)含有高压旋转喷头,可快速清洗料筒侧壁各个角落,同时,超声装置启动,加强清洗功能;
S11:清洗完毕后,由清洗液排液管道控制装置(315)控制清洗液,统一排出至清洗液废液缸(307)内,重复三次清洗操作。
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- 2022-09-28 CN CN202211186334.3A patent/CN115287181A/zh active Pending
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