CN115267039B - 一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法 - Google Patents
一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115267039B CN115267039B CN202210900580.4A CN202210900580A CN115267039B CN 115267039 B CN115267039 B CN 115267039B CN 202210900580 A CN202210900580 A CN 202210900580A CN 115267039 B CN115267039 B CN 115267039B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- field horsetail
- thin layer
- equisetum
- layer plate
- canine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000195950 Equisetum arvense Species 0.000 title claims abstract description 121
- 241000282465 Canis Species 0.000 title claims abstract description 58
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 37
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 60
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims abstract description 42
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims abstract description 27
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 18
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims abstract description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 72
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 46
- 244000085625 Equisetum Species 0.000 claims description 37
- 239000005768 Equisetum arvense L. Substances 0.000 claims description 34
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 27
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 26
- 238000007689 inspection Methods 0.000 claims description 23
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 14
- 229940057838 polyethylene glycol 4000 Drugs 0.000 claims description 12
- JCAYXDKNUSEQRT-UHFFFAOYSA-N 2-aminoethoxyboronic acid Chemical compound NCCOB(O)O JCAYXDKNUSEQRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 claims description 11
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 claims description 11
- 125000006267 biphenyl group Chemical group 0.000 claims description 11
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N phenylbenzene Natural products C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- ROAYSRAUMPWBQX-UHFFFAOYSA-N ethanol;sulfuric acid Chemical compound CCO.OS(O)(=O)=O ROAYSRAUMPWBQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 10
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 10
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 9
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 9
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 7
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 7
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 7
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 7
- 241000195955 Equisetum hyemale Species 0.000 claims description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 2
- 231100000206 health hazard Toxicity 0.000 abstract description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000195952 Equisetaceae Species 0.000 description 2
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- VYTVPRWAGRDIIR-UHFFFAOYSA-N 2-aminoethyl diphenyl borate Chemical compound C=1C=CC=CC=1OB(OCCN)OC1=CC=CC=C1 VYTVPRWAGRDIIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 241000183368 Equisetum palustre Species 0.000 description 1
- 208000012671 Gastrointestinal haemorrhages Diseases 0.000 description 1
- 206010018612 Gonorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 1
- 208000034507 Haematemesis Diseases 0.000 description 1
- 208000000616 Hemoptysis Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000446313 Lamella Species 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 208000001780 epistaxis Diseases 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 208000001786 gonorrhea Diseases 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 208000035861 hematochezia Diseases 0.000 description 1
- 208000014617 hemorrhoid Diseases 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 208000007106 menorrhagia Diseases 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 208000000143 urethritis Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
- G01N30/94—Development
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
本发明涉及一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，以解决问荆和犬问荆目前仅靠外观区分困难，易导致误用造成人身健康危害的技术问题。该方法包括：1、获取问荆样本溶液和犬问荆样本溶液；2、在薄层板上点样；3、按照体积比为乙酸乙酯：甲酸：冰乙酸：水＝(6～7：0.5～1：0.5～1：0.75～1.25)配置展开剂并在展开缸内预饱和；4、将薄层板置于展开缸内，且展开剂液面在点样原点以下；5、显色和检视，确定问荆和犬问荆各自的特征斑点，实现对问荆和犬问荆的鉴别。本发明提供方法操作简单，特异性强，样本用量小。
Description
技术领域
本发明涉及问荆和犬问荆的鉴别，具体涉及一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法。
背景技术
问荆为木贼科木贼属植物问荆Equisetum arvense L.的全草，夏、秋季采收，割取全草，置通风处阴干，或鲜用。具有清热、凉血、解毒、利尿的功效；主治吐血，衄血，便血，倒经，咳嗽气喘，淋病等症，兼有止痛消肿的功能；问荆始载于《本草拾遗》，在《中药大辞典》、《中华本草》中都有记载，是一味常用的中药材。犬问荆为木贼科木贼属植物问荆Equisetumpalustre L.的全草，6～8月割取地上部分，去杂质，晒干；具有清热消炎，止血，利尿的功效，用于治尿道炎、肠出血、痔出血、咯血、咳血等症；也还用于风湿性关节炎，痛风，动脉粥样硬化。问荆和犬问荆虽然都可以当药用，其功效也有相同的部分，在用药方面有些地方还将其混用。但近年来的研究发现，问荆主要含有黄酮类成分，而犬问荆主要含有生物碱类成分；且在历史应用方面，问荆的应用明显大于犬问荆。同时，随着研究的深入，人们发现犬问荆对动物和人有一定的毒性，可严重损害人和动物运动的协调性，有很多地方，现在已将犬问荆视作问荆的伪品来看待。
目前，问荆和犬问荆的区别还主要靠外观形状，《中国植物志》记载，问荆的不育枝外形似犬问荆，只是问荆的侧枝多而纤细柔软，且较长，有锐背仅3-4条，背上有横纹。问荆和犬问荆在性状上如此相似，在外观上很难区分，这给人们正确的用药和人身健康的危害带来了很大的问题，亟需一种快速简单的方法来区分问荆和犬问荆。
发明内容
本发明目的在于解决问荆和犬问荆目前仅靠外观区分困难，易导致误用造成人身健康危害的技术问题，提出一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，该方法通过薄层色谱对问荆和犬问荆进行鉴别，为正确的使用问荆和犬问荆，保证问荆和犬问荆的质量提供可靠的方法。
本发明的技术方案为：
一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，其特殊之处在于，包括以下步骤：
S1、获取样本溶液：分别取问荆和犬问荆药材原料药材，粉粹后过筛获得问荆粉末和犬问荆粉末，各粉末取质量为m分别放置在容器中，向各个容器中分别加入质量为5m～10m的乙醇，乙醇的质量分数为70-95％，搅拌均匀后均进行超声处理30～60分钟，将乙醇混悬液过滤，收集滤液获得问荆样本溶液和犬问荆样本溶液；
S2、薄层点样：将步骤S1获取的问荆样本溶液和犬问荆样本溶液分别点于同一薄层板的同一高度线的不同位置，形成点样原点；
S3、配置展开剂：按照体积比为乙酸乙酯：甲酸：冰乙酸：水＝(6～7：0.5～1：0.5～1：0.75～1.25)配置展开剂；取配置好的展开剂置于展开缸中，密封展开缸，预饱和15～20分钟；
S4、展开：将预饱和完成的展开缸打开后，迅速将薄层板放入展开缸中，使薄层板斜靠在展开缸内侧壁，且展开缸中的展开剂液面在点样原点以下；当展开剂的前沿距离点样原点6cm～10cm时，将薄层板取出；
S5、显色和检视：将步骤S4中取出的薄层板，吹干后，向薄层板喷以显色剂，显色后确定问荆和犬问荆各自的特征斑点，实现对问荆和犬问荆的鉴别。
进一步地，步骤S5中，向薄层板喷以显色剂具体为，先喷以浓度为8～12g/L的二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液，再喷以浓度为40～60g/L聚乙二醇4000甲醇溶液，放置20～40min，在紫外365nm下检视；检视结果为，Rf值为0.05～0.22的位置有犬问荆的特征斑点；Rf值为0.50～0.78的位置有问荆的特征斑点；
或在薄层板上喷以体积浓度为5％～10％硫酸乙醇溶液显色剂显色后，在100～110℃下加热3～5分钟，放至常温后在紫外365nm下检视；检视结果为，Rf值为0.05～0.22的位置有犬问荆的特征斑点；Rf值为0.53～0.68的位置有问荆的特征斑点。
进一步地，步骤S5中，向薄层板喷以显色剂具体为，先喷以浓度为8～12g/L的二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液，再喷以浓度为40～60g/L聚乙二醇4000甲醇溶液，放置20～40min，在紫外365nm下检视；检视结果为，Rf值为0.05～0.22的位置有犬问荆的特征斑点；Rf值为0.50～0.78的位置有问荆的特征斑点；
再在上述检视完的薄层板上，喷以体积浓度为5％～10％硫酸乙醇溶液显色剂显色后，在100～110℃下加热3～5分钟，放至常温后在紫外365nm下检视；检视结果为，Rf值为0.05～0.22的位置有犬问荆的特征斑点；Rf值为0.53～0.68的位置有问荆的特征斑点。
进一步地，步骤S5中，所述二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液的浓度为10g/L，聚乙二醇4000甲醇溶液的浓度为50g/L；硫酸乙醇溶液的体积浓度为10％。
进一步地，步骤S1具体为，分别取问荆和犬问荆药材原料药材，粉粹后过80目筛获得问荆粉末和犬问荆粉末，各粉末取质量为m分别放置在容器中，向两个容器中加入质量为8m～10m的质量浓度为70％乙醇，搅拌均匀后均进行超声处理60分钟，将乙醇混悬液通过微孔滤膜过滤，收集滤液获得问荆样本溶液和犬问荆样本溶液。
进一步地，步骤S3中，乙酸乙酯、甲酸、冰乙酸和水的体积比为6.5：0.75：0.75：1。
进一步地，步骤S2中，所述点样原点距薄层板下边缘1.0～1.5cm。
进一步地，步骤S3中，所述展开缸为双槽展开缸，展开缸的尺寸为10×10cm或20×10cm或10×20cm；双槽展开缸的双槽中展开剂的剂量相同。
进一步地，步骤S4中，具体为，当展开剂的前沿距离点样原点8～10cm时，将薄层板取出。
本发明的有益效果：
1、本发明采用乙酸乙酯，甲酸，冰乙酸，水以(6～7：0.5～1：0.5～1：0.75～1.25)的体积比混合配制得到展开剂，使用该展开剂对样本溶液进行薄层色谱分析，斑点分离效果好，各样品特征斑点突出，且没有斑点拖尾和斑点扩散现象，结果对比明显，容易判断。
2、本发明采用乙醇溶液直接对原料药材进行超声处理，过滤，滤液作为检测溶液，样品前处理简单，成本低，易于操作。
3、采用薄层色谱对问荆和犬问荆进行鉴别，用样量小，操作简单，特异性强，同时根据问荆和犬问荆的特征斑点，为分析问荆和犬问荆的特征性成分提供研究思路。
4、在对展开后的薄层板进行显色时采用两种不同的显色方法对展开结果进行检视，确定不同显色方式下问荆和犬问荆各自的特征斑点，使结果相互佐证，增加鉴别结果的准确性。
附图说明
图1为本发明用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法实施例中采用二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液和聚乙二醇4000甲醇溶液进行显色的检视图；
图2为本发明用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法实施例中采用硫酸乙醇溶液进行显色的检视图。
具体实施方式
以下实施例中薄层板的下边缘和上边缘，定义为在展开过程中，位于上端的是上边缘，位于下端的是下边缘。
实施例一
S1、获取样本溶液：分别取问荆和犬问荆药材原料药材，粉粹后过80目筛获得问荆粉末和犬问荆粉末，各粉末取质量为m分别放置在容器中，向各个容器中分别加入质量为6m的乙醇，乙醇的质量分数为70％，搅拌均匀后均进行超声处理60分钟，将乙醇混悬液通过微孔滤膜过滤，收集滤液获得问荆样本溶液和犬问荆样本溶液；
S2、薄层点样：将步骤S1获取的问荆样本溶液和犬问荆样本溶液分别点于同一硅胶G薄层板的同一高度线的不同位置，形成点样原点，点样原点距薄层板下边缘1.0cm；
S3、配置展开剂：按照体积比为乙酸乙酯：甲酸：冰乙酸：水＝(6：0.5：0.5：0.75)配置展开剂；取配置好的展开剂置于10×10cm双槽展开缸中，双槽中的展开剂剂量相等，可根据步骤S2中的点样高度线评估双槽中展开剂的液面高度，保证双槽中展开剂的液面高度低于展开状态下点样原点的高度；密封展开缸，预饱和15分钟；
S4、展开：将预饱和完成的展开缸打开后，迅速将薄层板放入展开缸中，使薄层板斜靠在展开缸内侧壁，且展开缸中的展开剂液面在点样原点以下；当展开剂的前沿距离点样原点6cm时，将薄层板取出；
S5、显色和检视：将步骤S4中取出的薄层板，吹干后，向薄层板喷以显色剂，显色后确定问荆和犬问荆各自的特征斑点，实现对问荆和犬问荆的鉴别，具体的，采用显色方法一：在薄层板上喷以浓度为8g/L的二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液，再喷以浓度为60g/L聚乙二醇4000甲醇溶液，放置30min，在紫外365nm下检视；参见图1，本实施例中，一共对5种样本进行薄层色谱分析，图1中1号为犬问荆对照药材，2号为问荆对照药材，3号为问荆市售样品一，4号为问荆市售样品二，5号为犬问荆市售样品三，每个样本进行重复设置两个点样点；具体检视结果为，Rf值为0.05～0.22的位置有犬问荆的特征斑点；Rf值为0.50～0.78的位置有问荆的特征斑点；在采用显色方法一进行检视后，可继续采用显色方法二：在上述检视后的薄层板上喷以体积浓度为5％硫酸乙醇溶液显色剂显色后，在100～110℃下加热3～5分钟，放至常温后在紫外365nm下检视；参见图2，检视结果为，Rf值为0.05～0.22的位置有犬问荆的特征斑点；Rf值为0.53～0.68的位置有问荆的特征斑点。可以理解的是，可以单独用显色方法一，也可以单独用显色方法二，也可以先用显色方法一再用显色方法二。
实施例二
S1、获取样本溶液：分别取问荆和犬问荆药材原料药材，粉粹后过80目筛获得问荆粉末和犬问荆粉末，各粉末取质量为m分别放置在容器中，向各个容器中分别加入质量为8m的乙醇，乙醇的质量分数为75％，搅拌均匀后均进行超声处理30分钟，将乙醇混悬液通过微孔滤膜过滤，收集滤液获得问荆样本溶液和犬问荆样本溶液；
S2、薄层点样：将步骤S1获取的问荆样本溶液和犬问荆样本溶液分别点于同一硅胶G薄层板的同一高度线的不同位置，形成点样原点，点样原点距薄层板下边缘1.5cm；
S3、配置展开剂：按照体积比为乙酸乙酯：甲酸：冰乙酸：水＝(6.5：0.75：0.75：1)配置展开剂；取配置好的展开剂置于10×10cm双槽展开缸中，双槽中的展开剂剂量相等，可根据步骤S2中的点样高度线评估双槽中展开剂的液面高度，保证双槽中展开剂的液面高度低于展开状态下点样原点的高度；密封展开缸，预饱和20分钟；
S4、展开：将预饱和完成的展开缸打开后，迅速将薄层板放入展开缸中，使薄层板斜靠在展开缸内侧壁，且展开缸中的展开剂液面在点样原点以下；当展开剂的前沿距离点样原点8cm时，将薄层板取出；
S5、显色和检视：将步骤S4中取出的薄层板，吹干后，向薄层板喷以显色剂，显色后确定问荆和犬问荆各自的特征斑点，实现对问荆和犬问荆的鉴别。具体的，采用显色方法一：在薄层板上喷以浓度为10g/L的二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液，再喷以浓度为50g/L聚乙二醇4000甲醇溶液，放置30min，在紫外365nm下检视；在采用显色方法一进行检视后，可继续采用显色方法二：在上述检视后的薄层板上喷以体积浓度为10％硫酸乙醇溶液显色剂显色后，在100～110℃下加热3～5分钟，放至常温后在紫外365nm下检视；本实施例中上述两种方式的检视结果与实施例一接近。
实施例三
S1、获取样本溶液：分别取问荆和犬问荆药材原料药材，粉粹后过80目筛获得问荆粉末和犬问荆粉末，各粉末取质量为m分别放置在容器中，向各个容器中分别加入质量为10m的乙醇，乙醇的质量分数为95％，搅拌均匀后均进行超声处理40分钟，将乙醇混悬液通过微孔滤膜过滤，收集滤液获得问荆样本溶液和犬问荆样本溶液；
S2、薄层点样：将步骤S1获取的问荆样本溶液和犬问荆样本溶液分别点于同一硅胶G薄层板的同一高度线的不同位置，形成点样原点，点样原点距薄层板下边缘1.2cm；
S3、配置展开剂：按照体积比为乙酸乙酯：甲酸：冰乙酸：水＝(7：1：1：1.25)配置展开剂；取配置好的展开剂置于10×10cm双槽展开缸中，双槽中的展开剂剂量相等，可根据步骤S2中的点样高度线评估双槽中展开剂的液面高度，保证双槽中展开剂的液面高度低于展开状态下点样原点的高度；密封展开缸，预饱和15分钟；
S4、展开：将预饱和完成的展开缸打开后，迅速将薄层板放入展开缸中，使薄层板斜靠在展开缸内侧壁，且展开缸中的展开剂液面在点样原点以下；当展开剂的前沿距离点样原点8cm时，将薄层板取出；
S5、显色和检视：将步骤S4中取出的薄层板，吹干后，向薄层板喷以显色剂，显色后确定问荆和犬问荆各自的特征斑点，实现对问荆和犬问荆的鉴别，具体的，采用显色方法一：在薄层板上喷以浓度为12g/L的二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液，再喷以浓度为40g/L聚乙二醇4000甲醇溶液，放置30min，在紫外365nm下检视；在采用显色方法一进行检视后，可继续采用显色方法二：在上述检视后的薄层板上喷以体积浓度为8％硫酸乙醇溶液显色剂显色后，在100～110℃下加热3～5分钟，放至常温后在紫外365nm下检视；本实施例中上述两种方式的检视结果与实施例一接近。
实施例四
S1、获取样本溶液：分别取问荆和犬问荆药材原料药材，粉粹后过80目筛获得问荆粉末和犬问荆粉末，各粉末取质量为m分别放置在容器中，向各个容器中分别加入质量为5m的乙醇，乙醇的质量分数为85％，搅拌均匀后均进行超声处理40分钟，将乙醇混悬液通过微孔滤膜过滤，收集滤液获得问荆样本溶液和犬问荆样本溶液；
S2、薄层点样：将步骤S1获取的问荆样本溶液和犬问荆样本溶液分别点于同一硅胶G薄层板的同一高度线的不同位置，形成点样原点，点样原点距薄层板下边缘1.4cm；
S3、配置展开剂：按照体积比为乙酸乙酯：甲酸：冰乙酸：水＝(6.3：0.8：0.6：1.15)配置展开剂；取配置好的展开剂置于10×10cm双槽展开缸中，双槽中的展开剂剂量相等，可根据步骤S2中的点样高度线评估双槽中展开剂的液面高度，保证双槽中展开剂的液面高度低于展开状态下点样原点的高度；密封展开缸，预饱和20分钟；
S4、展开：将预饱和完成的展开缸打开后，迅速将薄层板放入展开缸中，使薄层板斜靠在展开缸内侧壁，且展开缸中的展开剂液面在点样原点以下；当展开剂的前沿距离点样原点10cm时，将薄层板取出；
S5、显色和检视：将步骤S4中取出的薄层板，吹干后，向薄层板喷以显色剂，显色后确定问荆和犬问荆各自的特征斑点，实现对问荆和犬问荆的鉴别，具体的，采用显色方法一：在薄层板上喷以浓度为9.5g/L的二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液，再喷以浓度为55g/L聚乙二醇4000甲醇溶液，放置30min，在紫外365nm下检视；在采用显色方法一进行检视后，可继续采用显色方法二：在上述检视后的薄层板上喷以体积浓度为6％硫酸乙醇溶液显色剂显色后，在100～110℃下加热3～5分钟，放至常温后在紫外365nm下检视；本实施例中上述两种方式的检视结果与实施例一接近。
实施例五
S1、获取样本溶液：分别取问荆和犬问荆药材原料药材，粉粹后过80目筛获得问荆粉末和犬问荆粉末，各粉末取质量为m分别放置在容器中，向各个容器中分别加入质量为8m的乙醇，乙醇的质量分数为70％，搅拌均匀后均进行超声处理30分钟，将乙醇混悬液通过微孔滤膜过滤，收集滤液获得问荆样本溶液和犬问荆样本溶液；
S2、薄层点样：将步骤S1获取的问荆样本溶液和犬问荆样本溶液分别点于同一硅胶G薄层板的同一高度线的不同位置，形成点样原点，点样原点距薄层板下边缘1.0cm；
S3、配置展开剂：按照体积比为乙酸乙酯：甲酸：冰乙酸：水＝(6.8：0.6：0.8：0.85)配置展开剂；取配置好的展开剂置于10×10cm双槽展开缸中，双槽中的展开剂剂量相等，可根据步骤S2中的点样高度线评估双槽中展开剂的液面高度，保证双槽中展开剂的液面高度低于展开状态下点样原点的高度；密封展开缸，预饱和20分钟；
S4、展开：将预饱和完成的展开缸打开后，迅速将薄层板放入展开缸中，使薄层板斜靠在展开缸内侧壁，且展开缸中的展开剂液面在点样原点以下；当展开剂的前沿距离点样原点10cm时，将薄层板取出；
S5、显色和检视：将步骤S4中取出的薄层板，吹干后，向薄层板喷以显色剂，显色后确定问荆和犬问荆各自的特征斑点，实现对问荆和犬问荆的鉴别，具体的，采用显色方法一：在薄层板上喷以浓度为10g/L的二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液，再喷以浓度为50g/L聚乙二醇4000甲醇溶液，放置30min，在紫外365nm下检视；在采用显色方法一进行检视后，可继续采用显色方法二：在上述检视后的薄层板上喷以体积浓度为10％硫酸乙醇溶液显色剂显色后，在100～110℃下加热3～5分钟，放至常温后在紫外365nm下检视；本实施例中上述两种方式的检视结果与实施例一接近。
本发明提供了一种问荆和犬问荆的薄层色谱方法，得到了两种药材的薄层色谱检视图，实际应用过程中，将需要鉴别区分的样品进行同样的薄层色谱操作，将获取的检视图与本发明的薄层色谱检视图进行比较，就可以实现该样本是问荆或犬问荆的鉴别，该方法采样量小，操作简单，且具有特异性。
Claims (8)
1.一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、获取样本溶液：分别取问荆和犬问荆药材原料药材，粉粹后过筛获得问荆粉末和犬问荆粉末，各粉末取质量为m分别放置在容器中，向各个容器中分别加入质量为5m～10m的乙醇，乙醇的质量分数为70-95％，搅拌均匀后均进行超声处理30～60分钟，将乙醇混悬液过滤，收集滤液获得问荆样本溶液和犬问荆样本溶液；
S2、薄层点样：将步骤S1获取的问荆样本溶液和犬问荆样本溶液分别点于同一薄层板的同一高度线的不同位置，形成点样原点；
S3、配置展开剂：按照体积比为乙酸乙酯：甲酸：冰乙酸：水＝(6～7：0.5～1：0.5～1：0.75～1.25)配置展开剂；取配置好的展开剂置于展开缸中，密封展开缸，预饱和15～20分钟；
S4、展开：将预饱和完成的展开缸打开后，迅速将薄层板放入展开缸中，使薄层板斜靠在展开缸内侧壁，且展开缸中的展开剂液面在点样原点以下；当展开剂的前沿距离点样原点6～10cm时，将薄层板取出；
S5、显色和检视：将步骤S4中取出的薄层板，吹干后，向薄层板喷以显色剂，显色后确定问荆和犬问荆各自的特征斑点，实现对问荆和犬问荆的鉴别；
步骤S5中，向薄层板喷以显色剂具体为，先喷以浓度为8～12g/L的二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液，再喷以浓度为40～60g/L聚乙二醇4000甲醇溶液，放置20～40min，在紫外365nm下检视；
再在上述检视完的薄层板上，继续喷以体积浓度为5％～10％硫酸乙醇溶液显色剂显色后，在100～110℃下加热3～5分钟，放至常温后在紫外365nm下检视。
2.根据权利要求1所述的用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤S5中，向薄层板喷以显色剂具体为，先喷以浓度为8～12g/L的二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液，再喷以浓度为40～60g/L聚乙二醇4000甲醇溶液，放置20～40min，在紫外365nm下检视；检视结果为，Rf值为0.05～0.22的位置有犬问荆的特征斑点；Rf值为0.50～0.78的位置有问荆的特征斑点；
再在上述检视完的薄层板上，喷以体积浓度为5％～10％硫酸乙醇溶液显色剂显色后，在100～110℃下加热3～5分钟，放至常温后在紫外365nm下检视；检视结果为，Rf值为0.05～0.22的位置有犬问荆的特征斑点；Rf值为0.53～0.68的位置有问荆的特征斑点。
3.根据权利要求2所述的用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤S5中，所述二苯硼酸-2-氨基乙酯甲醇溶液的浓度为10g/L，聚乙二醇4000甲醇溶液的浓度为50g/L；硫酸乙醇溶液的体积浓度为10％。
4.根据权利要求3的用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤S1具体为，分别取问荆和犬问荆药材原料药材，粉粹后过80目筛获得问荆粉末和犬问荆粉末，各粉末取质量为m分别放置在容器中，向两个容器中加入质量为8m～10m的质量浓度为70％乙醇，搅拌均匀后均进行超声处理60分钟，将乙醇混悬液通过微孔滤膜过滤，收集滤液获得问荆样本溶液和犬问荆样本溶液。
5.根据权利要求4所述的用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤S3中，乙酸乙酯、甲酸、冰乙酸和水的体积比为6.5：0.75：0.75：1。
6.根据权利要求5所述的用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤S2中，所述点样原点距薄层板下边缘1.0～1.5cm。
7.根据权利要求6所述的用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤S3中，所述展开缸为双槽展开缸，展开缸的尺寸为10×10cm或20×10cm或10×20cm；双槽展开缸的双槽中展开剂的剂量相同。
8.根据权利要求7所述的用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤S4中，具体为，当展开剂的前沿距离点样原点8～10cm时，将薄层板取出。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210900580.4A CN115267039B (zh) | 2022-07-28 | 2022-07-28 | 一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210900580.4A CN115267039B (zh) | 2022-07-28 | 2022-07-28 | 一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115267039A CN115267039A (zh) | 2022-11-01 |
| CN115267039B true CN115267039B (zh) | 2024-04-26 |
Family
ID=83770466
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210900580.4A Active CN115267039B (zh) | 2022-07-28 | 2022-07-28 | 一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115267039B (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102512461A (zh) * | 2011-12-08 | 2012-06-27 | 江苏博益生物科技有限公司 | 一种问荆硅化物的制备方法 |
| UA78128U (ru) * | 2012-08-30 | 2013-03-11 | Государственное Учреждение «Институт Фармакологии И Токсикологии Намн Украины» | Способ стандартизации травы хвоща полевого (Equisetum arvense L.) в многокомпонентных растительных смесях |
| CN104069156A (zh) * | 2014-06-30 | 2014-10-01 | 潘宝珍 | 一种治疗鼻炎的药物组合物及其制备方法与应用 |
| CN111122805A (zh) * | 2020-01-13 | 2020-05-08 | 贵州盛世龙方制药股份有限公司 | 一种大驳骨药材的质量控制方法 |
-
2022
- 2022-07-28 CN CN202210900580.4A patent/CN115267039B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102512461A (zh) * | 2011-12-08 | 2012-06-27 | 江苏博益生物科技有限公司 | 一种问荆硅化物的制备方法 |
| UA78128U (ru) * | 2012-08-30 | 2013-03-11 | Государственное Учреждение «Институт Фармакологии И Токсикологии Намн Украины» | Способ стандартизации травы хвоща полевого (Equisetum arvense L.) в многокомпонентных растительных смесях |
| CN104069156A (zh) * | 2014-06-30 | 2014-10-01 | 潘宝珍 | 一种治疗鼻炎的药物组合物及其制备方法与应用 |
| CN111122805A (zh) * | 2020-01-13 | 2020-05-08 | 贵州盛世龙方制药股份有限公司 | 一种大驳骨药材的质量控制方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| C. Haris Saslis-Lagoudakis et al..Identification of common horsetail (Equisetum arvense L. * |
| Equisetaceae) using Thin Layer Chromatography versus DNA barcoding.Scientific Reports.2015,第1-12页. * |
| Structural and quantitative analysis of Equisetum alkaloids;Luise Cramer et al.;Phytochemistry;20150327;第116卷;第269-282页 * |
| 林问荆山柰素的薄层鉴别及含量测定;刘计权等;山西医药杂志;20110331;第40卷(第3期);第219-221页 * |
| 问荆药材中异槲皮苷的定性和定量分析方法;崔业波等;中国药物评价;20161220;第33卷(第6期);第485-489页 * |
| 黄酮类组分微波萃取与传统水煎提取的比较;冯怡等;中成药;20051025;第27卷(第10期);第1138-1140页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115267039A (zh) | 2022-11-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103575893B (zh) | 一种快速检测贝类毒素的方法 | |
| CN113278088B (zh) | 一种具有显著肠粘膜修复活性的羊栖菜多糖及其制备方法与应用 | |
| CN110243642A (zh) | 一种人畜粪便中提取微塑料的方法 | |
| CN111239399A (zh) | 一种检测丙溴磷的试纸条及方法 | |
| CN108776219A (zh) | 一种快速检测细交链格孢酮酸的免疫层析试纸条 | |
| CN115267039B (zh) | 一种用于区别问荆和犬问荆的薄层色谱鉴别方法 | |
| Zghoul et al. | Reconstructed skin equivalents for assessing percutaneous drug absorption from pharmaceutical formulations | |
| CN102680693B (zh) | 软骨藻酸胶体金免疫层析试纸条的制备方法 | |
| CN107727787B (zh) | 一种鉴别雪胆品种的薄层色谱鉴别方法 | |
| CN110907585B (zh) | 一种用于鉴别南非醉茄根提取物掺假的薄层检测方法 | |
| CN115926013B (zh) | 一种葛仙米多糖及其制备方法 | |
| CN104606263B (zh) | 一种马齿苋的提取物及其质量检测方法 | |
| WO1997034568A2 (en) | Antipsoriatic compositions, method of making, and method of using | |
| DE4229013C2 (de) | Verfahren und Vorrichtung zur in-vitro-Prüfung von Einwirkungen auf biologische Strukturen | |
| CN115232220A (zh) | 一种灵芝多糖及其提取方法和应用 | |
| CN105461822A (zh) | 一种提取蚕沙中有效成分的方法 | |
| CN101491630A (zh) | 分清五淋丸的质量控制方法 | |
| CN110426486A (zh) | 中药制剂中浙麦冬的鉴别方法 | |
| CN106770885B (zh) | 一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法 | |
| CN103543235B (zh) | 一种快速鉴别延胡索生熟饮片的方法 | |
| CN109100462B (zh) | 天然植物抗球虫饲料添加剂的薄层色谱鉴别方法 | |
| CN110818811A (zh) | 一种从水仙鳞茎中提取分离高粘度水仙多糖的方法 | |
| CN108918750A (zh) | 一种中药复方中薏苡仁的鉴别方法 | |
| CN109370254A (zh) | 一种从黑蚂蚁中制备高色价蚂蚁黑色素的方法 | |
| CN204374176U (zh) | 一种天然过敏原检测剂制备仪 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |