CN115089645B - 抑制trpv1通路减少皮肤刺激的组合物及护肤品 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,包括山茶花提取物和马齿苋提取物,其中所述山茶花提取物和马齿苋提取物的质量比例为0.01‑10:0.01‑10。本发明抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,包括有能够抑制TRPV1通路的山茶花提取物和马齿苋提取物,两者共同作用,能够提升对刺激反应的阈值,减少皮肤敏感反应,降低由于TRPV1通道激活引起的皮肤的刺痛,瘙痒和灼热感。
Description
技术领域
本发明属于日用化妆品技术领域,具体涉及一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,还涉及一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的护肤品。
背景技术
皮肤是覆盖人体表面的器官,是最重要的器官之一,具有从外部环境和刺激中保护人体和维持水分平衡的作用。当皮肤收到较强刺激时,可能会造成皮肤表面屏障受损从而引起一系列免疫反应,同时,皮肤表面的神经末梢接受刺激的信号传到给神经元,引起一系列的感觉如刺痛,瘙痒,灼热等。神经末梢接受刺激信号有一定的阈值,如刺激低于阈值则不会产生相应的信号传导而产生反应。当神经反应过度时可能引起超敏反应,收到轻微的刺激既能引起刺痛,瘙痒,灼热等反应。敏感性皮肤可能由于屏障受损使神经末梢暴露或者神经末梢过度活跃而对于轻微的干扰引起较强烈的反应。
瞬时感受器电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloidsubfamily1,TRPV1)通道是一种非选择性阳离子通道,激活后可使细胞外钙离子内流,导致细胞内钙离子浓度增高,进而介导一系列生理或病理反应。近年来,发现TRPV1通道在刺痛,瘙痒,灼热方面有重要影响。通过外源性的给予TRPV1拮抗剂,能够有效的减少皮肤的应激反应,改善皮肤屏障。
茶花(学名:Camellia sp.)又名山茶花,其中700多种已被发现的可促进人体健康的化合物,包括黄酮,多酚等多种成分,山茶花已被证明具有多种生理活性,山茶花提取物可抑制酪氨酸酶的生成,从而可以匀净肤色,可以抵御由于UVB引起的光老化,可以减少环境污染造成的皮肤损伤。
马齿苋又名蚂蚱菜,是一味常用的中药,其嫩茎叶也可入菜。含有丰富的氨基酸,蛋白质,多糖等成分。有研究表明其其提取物及化学成分主要有抗炎、抗糖尿病、抗氧化、抗癌、抗菌等生物活性,在皮肤方面可以减少泛红,助于皮肤屏障的改善。
基于此,本发明提供一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,能够抑制由于TRPV1通道激活引起的皮肤的刺痛,瘙痒和灼热。
发明内容
本发明第一目的在于提供一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,解决的技术问题是现有化妆品较少有通过抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的不足。
本发明第二目的在于提供一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的护肤品。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的:
一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,包括山茶花提取物和马齿苋提取物,其中所述山茶花提取物和马齿苋提取物的质量比例为0.01-10:0.01-10。
进一步地,所述山茶花提取物和马齿苋提取物的质量比例为1-10:1-10。
本发明抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物中山茶花提取物含有丰富的多酚以及黄酮类化合物,具有很好的抗氧化活性。马齿苋提取物含有丰富的黄酮,生物碱和多糖,具有很好的抗菌,抗氧化和抗炎作用。本发明选取山茶花提取物和马齿苋提取物,对于TRPV1通道均具有抑制作用,可以提升对刺激反应的阈值,减少皮肤敏感反应。两种提取物组合在一起,对于抑制由于TRPV1通道激活引起的皮肤刺痛,瘙痒和灼热,具有协同增效作用。
本发明中,所述山茶花提取物原儿茶酸含量不低于1%。
本发明可以做以下改进,所述山茶花提取物通过以下步骤制得:
(1)将山茶花干燥,除杂,粉碎至20-100目备用;
(2)加入10-30倍重量的水和乙醇混合物,在常压下回流煎煮,过滤,将滤液进行减压蒸馏浓缩至山茶花重量的80%-200%,得到粗提物;
(3)加入10-20%粗提物重量的吸附剂,微波震荡至无色后过滤,取滤液继续减压蒸馏至干燥,得山茶花提取物。
进一步地,水和乙醇混合物中水和乙醇的体积比例为20:80-80:20。
优选地,水和乙醇的体积比例为40:60-60:40。
回流煎煮的温度为80-95℃。
本发明中,所述马齿苋提取物多糖含量不低于10%。
本发明还可以做以下改进,所述马齿苋提取物通过以下步骤制得:
(1)将马齿苋干燥,除杂,粉碎至20-100目备用;
(2)加入10-60倍重量的水和乙醇混合物,在常压下回流煎煮,过滤,将滤液进行减压蒸馏浓缩至马齿苋重量的80%-200%,得到粗提物;
(3)加入10-20%粗提物重量的吸附剂,微波震荡至无色后过滤,取滤液继续减压蒸馏至干燥,得马齿苋提取物。
进一步地,加入的水和乙醇混合物与马齿苋的重量比为40-60倍。
进一步地,水和乙醇的体积比例为10:90-90:20。
优选地,水和乙醇的体积比例为70:30-90:20。
进一步地,回流煎煮的温度为80-95℃。
优选地,回流煎煮温度为90-95℃。
一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的护肤品,包括上述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物。
进一步地,所述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的护肤品还包括以下质量百分比的组分:甘油1%-5%,丁二醇1%-5%,尿囊素0.1%-1%,增稠剂0.1%-1%,透明质酸钠0.01%-0.5%,角鲨烷0.1%-5%,乳化剂0.5%-1.5%和余量水。
本发明中,所述增稠剂为卡波姆及其中和剂,黄原胶,丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物(共聚物)中的一种或多种。
所述乳化剂为oliem 1000,Montanov L中的一种或多种。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
(1)本发明抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,包括有能够抑制TRPV1通路的山茶花提取物和马齿苋提取物,两者共同作用,能够提升对刺激反应的阈值,减少皮肤敏感反应,降低由于TRPV1通道激活引起的皮肤的刺痛,瘙痒和灼热感。
(2)本发明抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物结合其在化妆品中的应用,能够更广泛的应用于化妆品和药物中,解决多种皮肤问题。
附图说明
图1为空白对照(BC)的TRPV1蛋白荧光检测图;
图2为阴性对照(NC)的TRPV1蛋白荧光检测图;
图3为阴性对照(4-叔丁基环己醇)的TRPV1蛋白荧光检测图;
图4为对比例1的TRPV1蛋白荧光检测图;
图5为对比例2的TRPV1蛋白荧光检测图;
图6为实施例1抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物的TRPV1蛋白荧光检测图;
图7为实施例2抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物的TRPV1蛋白荧光检测图;
图8为实施例3抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物的TRPV1蛋白荧光检测图;
图9为不同受试工作液的TRPV1蛋白含量检测结果图;
图10为对比例1护肤品辣椒素灼热结果图;
图11为对比例2护肤品辣椒素灼热结果图;
图12为实施例1护肤品辣椒素灼热结果图;
图13为实施例2护肤品辣椒素灼热结果图;
图14为实施例3护肤品辣椒素灼热结果图。
具体实施方式
以下结合具体的实施例对本发明作进一步的说明,以便本领域技术人员更好理解和实施本发明的技术方案。以下实施例中,山茶花提取物原儿茶酸含量不低于1%,马齿苋提取物多糖含量不低于10%。
山茶花提取物通过以下步骤制得:
(1)将山茶花干燥,除杂,粉碎至20-100目备用;
(2)加入10-30倍重量的水和乙醇混合物,其中水和乙醇的体积比例为50:50,在常压下85℃回流煎煮,过滤,将滤液进行减压蒸馏浓缩至山茶花重量的150%,得到粗提物;
(3)加入15%粗提物重量的吸附剂活性炭粒,微波震荡至无色后过滤,取滤液继续减压蒸馏至干燥,得山茶花提取物。
马齿苋提取物通过以下步骤制得:
(1)将马齿苋干燥,除杂,粉碎至20-100目备用;
(2)加入40-60倍重量的水和乙醇混合物,其中水和乙醇的体积比例为80:20,在常压下90℃回流煎煮,过滤,将滤液进行减压蒸馏浓缩至马齿苋重量的150%,得到粗提物;
(3)加入20%粗提物重量的吸附剂活性炭粒,微波震荡至无色后过滤,取滤液继续减压蒸馏至干燥,得马齿苋提取物。
实施例1
一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物(Redsnow Relief),包括山茶花提取物和马齿苋提取物,其中山茶花提取物质量百分比为0.0125%,马齿苋提取物质量百分比为0.004375%。
上述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物的制备方法,包括以下步骤:将山茶花提取物粉末溶于水中制成含有山茶花提取物1%的溶液,记为山茶花提取物redsnow,取马齿苋提取物粉末溶于水中,制成含有马齿苋提取物3.5%的溶液,记为马齿苋提取物protulaca,将山茶花提取物redsnow稀释到质量分数为0.025%,马齿苋提取物protulaca稀释到质量分数0.00875%,然后进行等量混合,得到抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物(Redsnow Relief)。
一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的护肤品,由以下质量百分比的成分组成:
实施例2
一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物(Redsnow Relief),包括山茶花提取物和马齿苋提取物,其中山茶花提取物质量百分比为0.006%,马齿苋提取物质量百分比为0.021%。
上述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物的制备方法,包括以下步骤:将山茶花提取物粉末溶于水中制成含有山茶花提取物1%的溶液,记为山茶花提取物redsnow,取马齿苋提取物粉末溶于水中,制成含有马齿苋提取物3.5%的溶液,记为马齿苋提取物protulaca,将山茶花提取物redsnow稀释到质量分数为0.012%,马齿苋提取物protulaca稀释到质量分数0.042%,然后进行等量混合,得到抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物(Redsnow Relief)。
一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的护肤品,由以下质量百分比的成分组成:
实施例3
一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物(Redsnow Relief),包括山茶花提取物和马齿苋提取物,其中山茶花提取物质量百分比为0.0006%,马齿苋提取物质量百分比为0.021%。
上述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物的制备方法,包括以下步骤:将山茶花提取物粉末溶于水中制成含有山茶花提取物1%的溶液,记为山茶花提取物redsnow,取马齿苋提取物粉末溶于水中,制成含有马齿苋提取物3.5%的溶液,记为马齿苋protulaca,将山茶花提取物redsnow稀释到质量分数为0.0012%,马齿苋提取物protulaca稀释到质量分数0.042%,然后进行等量混合,得到抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物(RedsnowRelief)。
一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的护肤品,由以下质量百分比的成分组成:
对比例1
一种组合物,包括山茶花提取物质量百分数为0.0125%。通过以下步骤制得:将山茶花提取物粉末溶于水中制成含有山茶花提取物1%的溶液,记为山茶花提取物redsnow,将山茶花提取物redsnow稀释到质量分数为0.0125%得到。
一种含上述组合物的护肤品,其与实施例1不同之处在于没有马齿苋提取物,以及山茶花提取物和水的含量不同。
对比例2
一种组合物,包括马齿苋提取物质量分数为0.004375%。通过以下步骤制得:取马齿苋提取物粉末溶于水中,制成含有马齿苋提取物3.5%的溶液,记为马齿苋protulaca,将马齿苋提取物protulaca稀释到质量分数0.004375%得到。
一种含上述组合物的护肤品,其与实施例1不同之处在于没有山茶花提取物,马齿苋提取物和水的含量不同。
性能测试
1、对角质形成细胞的TRPV1受体蛋白的测试
角质形成细胞是皮肤表层发现的最主要的细胞,构成了皮肤表皮细胞的90%。通过抑制表皮细胞的表达,从而减少皮肤对于刺激引起的TRPV1通路的激活。对于TRPV1通路的抑制验证采用角质形成细胞检验TRPV1受体(蛋白)含量的检测测方法,通过测试抑制TRPV1受体蛋白的表达来检测TRPV1通路的抑制。
首先检测山茶花提取物redsnow和马齿苋提取物protulaca的细胞毒性浓度,具体结果见表1和表2。
表1山茶花提取物redsnow的细胞毒性浓度情况
表2马齿苋提取物protulaca的细胞毒性浓度情况
由表1、表2数据可知,试验浓度山茶花提取物redsnow不高于1.25%,马齿苋提取物protulaca不高于0.625%。
按1.8×105个/孔的接种密度接种角质形成细胞至6孔板,培养箱(37℃、5%CO2)中孵育过夜。受试工作液使用情况如下表3所示。
表3受试工作液使用情况表
根据上述表测试方案,待6孔板中细胞铺板率达到40%~50%时,进行分组给药,每孔给药量为2mL,每组设3个复孔。给药完成后将6孔板放置在培养箱(37℃、5%CO2)中孵育培养24h。
TRPV1检测:用4%的多聚甲醛进行固定处理,固定30min后,进行辣椒素受体(TRPV1)的免疫荧光检测,显微镜下拍照观察,采集图片并分析。
应用GraphPad Prism作图,结果表示为Mean±SD。各组间比较采用t-test统计分析。统计分析均为双尾。P<0.05认为具有显著差异,P<0.01认为具有极显著差异。
基于测试方案,依据免疫荧光操作步骤,开展TRPV1检测,检测结果TRPV1蛋白荧光检测图如图1-图8所示,变化趋势如图9所示。其中(#代表NC组相对于BC组有显著性差异,*表示p<0.05,**表示p<0.01,***表示p<0.001)从图中可以看出,单独使用山茶花提取物与马齿苋提取物对于TRPV1均有抑制作用。而当两者以一定比例复配时,具有协同增效,抑制效果更明显,其中实施例2的效果最好。这表明这两组植物提取物的组合物能够有效的抑制TRPV1通道,从而达到减少皮肤刺激的作用。
2、人体辣椒素试验
辣椒素是经典的激活TRPV1的刺激物,当人体接触到辣椒素时会产生刺痛,灼热和红肿的现象。本试验过程采用0.01%的辣椒素作为刺激源,对两侧鼻唇沟部位进行刺激后单侧使用测试样品并对比空白处的改善情况。其中测试样品分别实施例1-3以及对比例1-2制备的护肤品。
试验时,在受试者两侧鼻唇沟处同时敷贴浸透50μL 0.01%辣椒素水溶液的滤纸片(直径约0.8cm),当受试者感受到两侧鼻唇沟处的感觉分值均≥3分(中度感觉及以上)时,去除滤纸。由测试人员在其中一侧测试区域涂抹测试样品,涂样量为50μL,另一侧不做处理(空白对照)。在使用样品前(辣椒素刺激后,样品使用前)、使用样品后0.5min、5min、10min、15min、20min和30min,由受试者主观评价两侧鼻唇沟处的灼痛感,按5分法进行评分,评分标准为:0分为没有感觉,1分为勉强可以觉察,2分为轻度可以觉察,3分为中度可以觉察,4分为重度可以觉察,5分为疼痛。具体结果见图10-图14。
从图10-14可以看出,对比例与实施例对于辣椒素造成的灼热感都有一定的改善,其中实施例相对于对比例的减少刺激反应的效果更好,其中实施例2的效果最好,5min时灼痛感相对空白明显减轻。
以上实施实例对本发明不同的实施过程进行了详细的阐述,但是本发明的实施方式并不仅限于此,所属技术领域的普通技术人员依据本发明中公开的内容,均可实现本发明的目的,任何基于本发明构思基础上做出的改进和变形均落入本发明的保护范围之内,具体保护范围以权利要求书记载的为准。
Claims (7)
1.一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,其特征在于,活性成分由山茶花提取物和马齿苋提取物组成,其中所述山茶花提取物和马齿苋提取物的质量比例为1-10:1;所述山茶花提取物原儿茶酸含量不低于1%;所述马齿苋提取物多糖含量不低于10%。
2.根据权利要求1所述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,其特征在于,所述山茶花提取物通过以下步骤制得:
(1)将山茶花干燥,除杂,粉碎至20-100目备用;
(2)加入10-30倍重量的水和乙醇混合物,在常压下回流煎煮,过滤,将滤液进行减压蒸馏浓缩至山茶花重量的80%-200%,得到粗提物;
(3)加入10-20%粗提物重量的吸附剂,微波震荡至无色后过滤,取滤液继续减压蒸馏至干燥,得山茶花提取物。
3.根据权利要求2所述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,其特征在于,水和乙醇混合物中水和乙醇的体积比例为20:80-80:20;回流煎煮的温度为80-95℃。
4.根据权利要求1-3任一项所述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,其特征在于,所述马齿苋提取物通过以下步骤制得:
(1)将马齿苋干燥,除杂,粉碎至20-100目备用;
(2)加入10-60倍重量的水和乙醇混合物,在常压下回流煎煮,过滤,将滤液进行减压蒸馏浓缩至马齿苋重量的80%-200%,得到粗提物;
(3)加入10-20%粗提物重量的吸附剂,微波震荡至无色后过滤,取滤液继续减压蒸馏至干燥,得马齿苋提取物。
5.根据权利要求4所述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物,其特征在于,水和乙醇混合物中水和乙醇的体积比例为20:80-80:20;回流煎煮的温度为80-95℃。
6.一种抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的护肤品,其特征在于,包括权利要求1-5任一项所述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的组合物。
7.根据权利要求6所述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的护肤品,其特征在于,所述抑制TRPV1通路减少皮肤刺激的护肤品还包括以下质量百分比的组分:甘油1%-5%,丁二醇1%-5%,尿囊素0.1%-1%,增稠剂0.1%-1%,透明质酸钠0.01%-0.5%,角鲨烷0.1%-5%,乳化剂0.5%-1.5%和余量水。
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KR20210113490A (ko) * | 2020-03-05 | 2021-09-16 | 주식회사 현대바이오랜드 | 마치현, 애엽 및 홍경천의 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 피부보호 및 피부자극 완화용 화장료 조성물 |
CN113491651A (zh) * | 2020-04-07 | 2021-10-12 | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 | 一种含山茶提取物的舒缓修护面膜精华液及其制备方法和应用 |
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Title |
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基于H1R、PAR-2 /TRPV1 痒信号通路探讨马齿苋对急性湿疹的干预作用;葛一漫等;中国免疫学杂志;第34卷;210-213 * |
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