CN114907991A - 一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物、香蕉秸秆腐熟剂、香蕉秸秆有机肥和应用 - Google Patents
一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物、香蕉秸秆腐熟剂、香蕉秸秆有机肥和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物、香蕉秸秆腐熟剂、香蕉秸秆有机肥和应用，属于农业废弃物利用技术领域。所述复合微生物包括灰略红链霉菌三炬‑09、东方伊萨酵母三炬‑06、枯草芽孢杆菌三炬‑07、赖氨酸芽孢杆菌三炬‑12、长枝木霉三炬‑08、甲基营养型芽孢杆菌三炬‑04。采用本发明提供的复合微生物用于农作物秸秆的快熟腐熟，腐熟后的秸秆可以作为有机肥料直接在田地里面使用，作为下一茬的基肥，该肥料具备较高的价值，属于优质的有机肥。
Description
技术领域
本发明涉及农业废弃物利用技术领域，尤其涉及一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物、香蕉秸秆腐熟剂、香蕉秸秆有机肥和应用。
背景技术
香蕉秸秆属于低价值的农业废弃物，其在收获后砍伐下来时，含水量在95％左右，具有大量的水，因此干物质相对来说极少，若利用后的物质按照重量来看，价值很低，若按照切碎后、在晒干、再粉碎，付出与收益不对等，因此处理会陷入尴尬的境地，因此处理香蕉秸秆必须做到前期简单，不费时少费力；同样不可否认，香蕉富含钾元素，在秸秆中含有超大量的钾元素(秸秆重量(湿重)的1.7％是钾)，将香蕉秸秆制备成香蕉用的有机肥那么价值还是很大的。
秸秆在田里不处理存在的弊端：1.茎秆还田前期，回田后堆肥发酵产热、产酸、腐烂以及占用土中的氮素等其他元素，与植物形成竞争关系，导致植物生产受挫，甚至伤害到植物本体。由于生物固定会引起微生物和作物间竞争氮素，导致香蕉幼苗生长不良。2.香蕉茎秆在腐解过程中产生的有机酸，累积到一定浓度时会危害作物的生长。旱地通气较好，有机酸不易积累；嫌气条件下，尤其在透水性差的水田施用高量香蕉茎秆时易发生；3.田间自然腐熟无法控制，控制不当会导致整个田间环境失衡。
申请号为CN201810110922-有机肥料及其制备方法中记载了，1.香蕉秸秆是通过破碎、晒干以及粉碎之后进行利用；作为香蕉秸秆来说，本身为了解决农业废弃物，以求最方便最简单的方式进行处理，通过这一系列的操作，其操作的成本就远远大于实际产生的意义了；原料利用繁琐；2.使用生石灰为了是后续将产品调至碱性；以及让其吸水、并放热升温；3.生产过程没有发酵的过程，也是香蕉秸秆干了之后跟其它的原料混合，虽然说放30天，其没有发酵的意义。因此需要如何快速腐熟香蕉秸秆，并直接还田做基肥使用。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物、香蕉秸秆腐熟剂、香蕉秸秆有机肥和应用，采用本发明提供的复合微生物用于农作物秸秆的快熟腐熟，腐熟后的秸秆可以作为有机肥料直接在田地里面使用，作为下一茬的基肥，该肥料具备较高的价值，属于优质的有机肥。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物，包括灰略红链霉菌(Streptomycesgriseorubens)三炬-09、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)三炬-06、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)三炬-07、赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sp.)三炬-12、长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)三炬-08、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)三炬-04；
所述灰略红链霉菌三炬-09保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10247；
所述东方伊萨酵母三炬-06保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.2012470；
所述枯草芽孢杆菌三炬-07保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10248；
所述赖氨酸芽孢杆菌三炬-12保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.2015313；
所述长枝木霉三炬-08保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10144；
所述甲基营养型芽孢杆菌三炬-04保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.2012169。
优选的，所述灰略红链霉菌三炬-09、东方伊萨酵母三炬-06、枯草芽孢杆菌三炬-07、赖氨酸芽孢杆菌三炬-12、长枝木霉三炬-08和甲基营养型芽孢杆菌三炬-04的菌数量比为1:1:8:1:3:3。
本发明还提供了一种培养上述技术方案所述复合微生物的培养基，当培养灰略红链霉菌三炬-09时，所述培养基包括固体培养基和液体培养基，所述固体培养基包括麦麸、谷壳、香蕉秸秆和玉米粉，所述麦麸、谷壳、香蕉秸秆和玉米粉的质量比为40:25:25:10；所述液体培养基以水为溶剂，每升包括：玉米淀粉10g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.05g、氯化钠0.05g、硫酸亚铁0.01g、硫酸铵3g，pH值为7.2；
当培养东方伊萨酵母三炬-06时，所述培养基包括固体培养基和液体培养基，所述固体培养基包括麦麸、酒糟渣、香蕉秸秆和玉米粉，所述麦麸、酒糟渣、香蕉秸秆和玉米粉的质量比为40:25:25:10；所述液体培养基以水为溶剂，每升包括：小麦粉10g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.05g、硫酸亚铁0.01g，pH值为6.8；
当培养长枝木霉三炬-08时，所述培养基包括固体培养基和液体培养基，所述固体培养基包括麦麸、甘蔗渣、香蕉秸秆和玉米粉，所述麦麸、甘蔗渣、香蕉秸秆和玉米粉的质量比为40:25:25:10；所述液体培养基以水为溶剂，每升包括：马铃薯粉10g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、蔗糖10g，自然pH值；
当培养枯草芽孢杆菌三炬-07时，所述培养基为液体培养基，以水为溶剂，每升包括：葡萄糖5g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.5g、硫酸锰0.1g、硫酸铵2g、硫酸亚铁0.01g，pH值为7.2；
当培养甲基营养型芽孢杆菌三炬-04时，所述培养基为液体培养基，以水为溶剂，每升包括：蔗糖5g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.5g、硫酸铵2g、硫酸亚铁0.01g，pH值为6.8；
当培养赖氨酸芽孢杆菌三炬-12时，所述培养基为液体培养基，以水为溶剂，每升包括：黄豆粉5g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.5g、硫酸锰0.1g、硫酸铵2g、硫酸亚铁0.01g，pH值为6.8。
本发明还提供了一种香蕉秸秆腐熟剂，包括上述技术方案所述的复合微生物和基质。
优选的，所述香蕉秸秆腐熟剂中灰略红链霉菌三炬-09的菌含量为1亿CFU/g；
所述东方伊萨酵母三炬-06的菌含量为1亿CFU/g；
所述枯草芽孢杆菌三炬-07的菌含量为8亿CFU/g；
所述赖氨酸芽孢杆菌三炬-12的菌含量为1亿CFU/g；
所述长枝木霉三炬-08的菌含量为3亿CFU/g；
所述甲基营养型芽孢杆菌三炬-04的菌含量为3亿CFU/g。
本发明还提供了一种香蕉秸秆有机肥，将动物粪便、菇渣和香蕉秸秆经上述技术方案所述的香蕉秸秆腐熟剂发酵，得到香蕉秸秆有机肥。
优选的，所述动物粪便的体积与菇渣的体积、香蕉秸秆的体积、香蕉秸秆腐熟剂的质量比为0.25m3:0.75m3:1m3:2kg。
优选的，所述发酵的方法包括：将所述动物粪便、菇渣、香蕉秸秆和香蕉秸秆腐熟剂混合，得到混合料；
将所述混合料进行好氧发酵，得到发酵料；所述好氧发酵的条件包括：好氧发酵温度为65℃，每天2次4h通气，好氧发酵时间为20d；
将所述发酵料堆放60d，每隔15d翻堆1次，得到香蕉秸秆有机肥。
本发明还提供了上述技术方案所述的香蕉秸秆腐熟剂在香蕉秸秆还田中的应用。
优选的，所述应用包括：
将香蕉秸秆粉碎，得到粉碎物；
将所述粉碎物平铺于田间，再将所述香蕉秸秆腐熟剂撒施在粉碎物上，所述平铺的厚度为10cm；
所述香蕉秸秆腐熟剂的用量为2kg/亩。
本发明提供了的有益效果：
1.提供的复合微生物用于农作物秸秆的快熟腐熟；
2.腐熟后的秸秆可以作为有机肥料直接在田地里面使用，作为下一茬的基肥；
3.香蕉秸秆有机肥具备较高的价值，属于优质的有机肥；
4.香蕉秸秆腐熟剂中微生物活性好，针对性强，腐熟彻底；产品稳定性上，货架期长，菌在存放过程中不会快速死亡；
5.在培养基的选择上，通过液体使用香蕉秸秆汁为发酵提供一定的氮源和全部的钾源，在固体发酵的培养上，添加块状的香蕉秸秆，都是为了提高菌在香蕉秸秆上的适应性；
6.在培养温度上比普通的培养温度提高，有利于在腐熟剂中中高温下的存活性，菌具备更强的适应性。
保藏说明
灰略红链霉菌三炬-09，拉丁文为Streptomyces griseorubens，于2014年12月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所，邮政编码100101，保藏编号为CGMCC NO.10247；
东方伊萨酵母三炬-06，拉丁文为Issatchenkia orientalis，于2012年11月21日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，地址为中国武汉武汉大学，邮编为430072，保藏编号为CCTCC NO.2012470；
枯草芽孢杆菌三炬-07，拉丁文为Bacillus subtilis，于2014年12月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所，邮政编码100101，保藏编号为CGMCC NO.10248；
赖氨酸芽孢杆菌三炬-12，拉丁文为Lysinibacillus sp.，于2015年5月18日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，地址为中国武汉武汉大学，邮编为430072，保藏编号为CCTCC NO.2015313；
长枝木霉三炬-08，拉丁文为Trichoderma longibrachiatum，于2014年12月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所，邮政编码100101，保藏编号为CGMCC NO.10144；
甲基营养型芽孢杆菌三炬-04，拉丁文为Bacillus methylotrophicus，于2012年5月16日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，地址为中国武汉武汉大学，邮编为430072，保藏编号为CCTCC NO.2012169。
具体实施方式
本发明提供了一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物，包括灰略红链霉菌(Streptomycesgriseorubens)三炬-09、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)三炬-06、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)三炬-07、赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sp.)三炬-12、长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)三炬-08、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)三炬-04；
所述灰略红链霉菌三炬-09保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10247；
所述东方伊萨酵母三炬-06保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.2012470；
所述枯草芽孢杆菌三炬-07保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10248；
所述赖氨酸芽孢杆菌三炬-12保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.2015313；
所述长枝木霉三炬-08保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10144；
所述甲基营养型芽孢杆菌三炬-04保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.2012169。
在本发明中，所述灰略红链霉菌三炬-09、东方伊萨酵母三炬-06、枯草芽孢杆菌三炬-07、赖氨酸芽孢杆菌三炬-12、长枝木霉三炬-08和甲基营养型芽孢杆菌三炬-04的菌数量比优选为1:1:8:1:3:3。
本发明还提供了一种培养上述技术方案所述复合微生物的培养基，当培养灰略红链霉菌三炬-09时，所述培养基包括固体培养基和液体培养基，所述固体培养基包括麦麸、谷壳、香蕉秸秆和玉米粉，所述麦麸、谷壳、香蕉秸秆和玉米粉的质量比为40:25:25:10；所述液体培养基以水为溶剂，每升包括：玉米淀粉10g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.05g、氯化钠0.05g、硫酸亚铁0.01g、硫酸铵3g，pH值为7.2；
当培养东方伊萨酵母三炬-06时，所述培养基包括固体培养基和液体培养基，所述固体培养基包括麦麸、酒糟渣、香蕉秸秆和玉米粉，所述麦麸、酒糟渣、香蕉秸秆和玉米粉的质量比为40:25:25:10；所述液体培养基以水为溶剂，每升包括：小麦粉10g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.05g、硫酸亚铁0.01g，pH值为6.8；
当培养长枝木霉三炬-08时，所述培养基包括固体培养基和液体培养基，所述固体培养基包括麦麸、甘蔗渣、香蕉秸秆和玉米粉，所述麦麸、甘蔗渣、香蕉秸秆和玉米粉的质量比为40:25:25:10；所述液体培养基以水为溶剂，每升包括：马铃薯粉10g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、蔗糖10g，自然pH值；
当培养枯草芽孢杆菌三炬-07时，所述培养基为液体培养基，以水为溶剂，每升包括：葡萄糖5g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.5g、硫酸锰0.1g、硫酸铵2g、硫酸亚铁0.01g，pH值为7.2；
当培养甲基营养型芽孢杆菌三炬-04时，所述培养基为液体培养基，以水为溶剂，每升包括：蔗糖5g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.5g、硫酸铵2g、硫酸亚铁0.01g，pH值为6.8；
当培养赖氨酸芽孢杆菌三炬-12时，所述培养基为液体培养基，以水为溶剂，每升包括：黄豆粉5g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.5g、硫酸锰0.1g、硫酸铵2g、硫酸亚铁0.01g，pH值为6.8。
在培养基的选择上，通过液体使用香蕉秸秆汁为发酵提供一定的氮源和全部的钾源，在固体发酵的培养上，添加块状的香蕉秸秆，都是为了提高菌在香蕉秸秆上的适应性；在培养温度上比普通的培养温度提高，有利于在腐熟剂中中高温下的存活性，菌具备更强的适应性。在本发明中，所述香蕉秸秆优选为香蕉秸秆块，规格为横切面上3-5cm的块即可。本发明对所述香蕉秆汁的制备方法没有特殊限定，采用常规即可。
本发明还提供了一种香蕉秸秆腐熟剂，包括上述技术方案所述的复合微生物和基质。
在本发明中，所述香蕉秸秆腐熟剂中灰略红链霉菌三炬-09的菌含量优选为1亿CFU/g；所述东方伊萨酵母三炬-06的菌含量优选为1亿CFU/g；所述枯草芽孢杆菌三炬-07的菌含量优选为8亿CFU/g；所述赖氨酸芽孢杆菌三炬-12的菌含量优选为1亿CFU/g；所述长枝木霉三炬-08的菌含量优选为3亿CFU/g；所述甲基营养型芽孢杆菌三炬-04的菌含量优选为3亿CFU/g。
在本发明中，所述基质优选包括轻钙粉、玉米淀粉和滑石粉中的一种或几种。
在本发明中，所述灰略红链霉菌三炬-09、东方伊萨酵母三炬-06分别以物料粉的形式添加到香蕉秸秆腐熟剂中，长枝木霉三炬-08以孢子粉的形式添加到香蕉秸秆腐熟剂中，枯草芽孢杆菌三炬-07、甲基营养型芽孢杆菌三炬-04和赖氨酸芽孢杆菌三炬-12分别以菌粉形式添加到香蕉秸秆腐熟剂中，制备方法见表1和表2。
表1灰略红链霉菌三炬-09、东方伊萨酵母三炬-06和长枝木霉三炬-08制备
表2枯草芽孢杆菌三炬-07、甲基营养型芽孢杆菌三炬-04和赖氨酸芽孢杆菌三炬-12制备
香蕉秸秆腐熟剂的配比见表3。
表3香蕉秸秆腐熟剂的配比
本发明还提供了一种香蕉秸秆有机肥，将动物粪便、菇渣和香蕉秸秆经上述技术方案所述的香蕉秸秆腐熟剂发酵，得到香蕉秸秆有机肥。
在本发明中，所述动物粪便优选包括猪粪。在本发明中，所述菇渣优选包括秀珍菇渣或木耳菇渣。在本发明中，所述动物粪便的体积与菇渣的体积、香蕉秸秆的体积、香蕉秸秆腐熟剂的质量比优选为0.25m3:0.75m3:1m3:2kg。在本方中，所述发酵的方法优选包括：将所述动物粪便、菇渣、香蕉秸秆和香蕉秸秆腐熟剂混合，得到混合料；将所述混合料进行好氧发酵，得到发酵料；所述好氧发酵的条件包括：好氧发酵温度为65℃，每天2次4h通气，好氧发酵时间为20d；将所述发酵料堆放60d，每隔15d翻堆1次，得到香蕉秸秆有机肥。在本发明中，所述发酵料的温度优选为50℃时，再堆放。
本发明还提供了上述技术方能所述的香蕉秸秆腐熟剂在香蕉秸秆还田中的应用。
在本发明中，所述应用优选包括：将香蕉秸秆粉碎，得到粉碎物；将所述粉碎物平铺于田间，再将所述香蕉秸秆腐熟剂撒施在粉碎物上，所述平铺的厚度为10cm；所述香蕉秸秆腐熟剂的用量为2kg/亩。在本发明中，所述香蕉秸秆腐熟剂优选与尿素共同使用，所述尿素的使用量优选为5kg/亩，所述尿素为发酵提供氮源。
为了进一步说明本发明，下面结合实例对本发明进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
香蕉秸秆腐熟剂的制备见表4-6。
表4灰略红链霉菌三炬-09、东方伊萨酵母三炬-06和长枝木霉三炬-08制备
表5枯草芽孢杆菌三炬-07、甲基营养型芽孢杆菌三炬-04和赖氨酸芽孢杆菌三炬-12制备
香蕉秸秆腐熟剂的配比见表6。
表6香蕉秸秆腐熟剂的配比
基质为轻钙粉40％、玉米淀粉20％、草木灰15％、腐殖酸土20％和白炭黑5％，均为占基质的质量百分比。
在本发明中，所述香蕉秸秆腐熟剂的水分控制在5％以下。
实施例2
香蕉秸秆腐熟剂的腐熟效果实验：
1.材料与方法
1.1三炬香蕉秸秆腐熟剂秸秆样品、试验所在农田与试验时间
实施例1制备的香蕉秸秆腐熟剂。市场上购买的常规的香蕉秸秆腐熟剂(福建三炬生物科技股份有限公司按照中国专利CN201510067182.9制备)；
秸秆样品取自漳州市南靖县靖城镇靖城村收获的香蕉秸秆。试验所在农田为靖城镇靖城村，试验时间为2020年9-12月。
1.2仪器设备与耗材
1mm孔径25×35cm尼龙网袋，精度0.01g电子天平，鼓风干燥器(温度可控制85±2℃)。
1.3样品的准备
对于秸秆失重率法，选取重量相同的香蕉秸秆，将其横切碎至3-5cm小块，用尼龙网袋分装，每袋100g，共备50袋(5*10)。
1.4样品腐解处理
对于秸秆失重率法，试验设10组处理，同样包括未还田1组、还田未施用腐熟剂3组(10d、20d、30d)还田且施用腐熟剂3组(10d、20d、30d)，每个处理设5个重复，即每组含5个尼龙网袋，每个尼龙网袋含100g秸秆段(装入时)。对于还田且施用腐熟剂组的样品，先按照腐熟剂使用说明处理，而后与还田未使用腐熟剂组的样品，一起分散埋入距农田土表5～10cm的土层中。
对于还田且施腐熟剂组的样品，先按照腐熟剂使用说明处理，而后与还田未使用腐熟剂组的样品，一起分散埋入距农田土表5-10cm的土层中。
表7分组情况
| 试验组 | 标记 | 还田情况 | 腐熟剂 | 腐熟剂来源 |
| 空白组 | O | 未还田 | 未添加 | - |
| 对照组 | CK | 还田 | 未添加 | - |
| 实验组 | X1 | 还田 | 添加 | 实施例1制备 |
| 实验对照组 | X2 | 还田 | 添加 | 市场外购 |
1.5还田地块土壤指标状况
土壤容重:1.45g/cm3、全氮:1.12g/kg、有机质:11.5g/kg、碱解氮:41mg/kg、有效磷:15.8mg/kg、速效钾:148mg/kg、pH8.1、水分:40％。
1.6取样检测
对于秸秆失重率法，在相应时间点，每组取出5个尼龙网袋(全部)，用自来水轻柔冲洗秸秆段，直至滴下的水无色，即已将泥土等异物冲洗干净，然后将秸秆段至于烘箱85℃烘干6h，取出用天平称重。
1.7数据处理
对于秸秆失重率法，共有10组处理，每组5个重复，初始数据为秸秆处理后干重值，先计算未还田组平均干重值N，再计算还田未施用腐熟剂组秸秆失重率Wck＝(Mo-Mck)/Mo×100％、还田且施用腐熟剂组Wx＝(Mo-Mx)/Mo×100％。对于还田组，进而可计算各组失重率平均值，包括Wck 10d、Wck 20d、Wck 30d、Wx 10d、Wx 20d、Wx 30d，以及未施用腐熟剂组的平均失重率Wck AVE＝(Wck 10d+Wck 20d+Wck 30d)/3、施用腐熟剂组Wx AVE＝(Wx 10d+Wx 20d+Wx 30d)/3。
二、结果与分析
2.1施用香蕉秸秆腐熟剂对秸秆失重率的影响
对于秸秆失重率法，根据表8数据进一步计算可知，未还田组秸秆干重的平均值Mo＝65.63g。还田组的失重率如表9所示，未施用腐熟剂组的平均失重率Wck AVE＝30.2％。施用三炬腐熟剂组Wx1 AVE＝50.3％，Wx1 AVE>Wck AVE。分别针对Wck 10d与Wx1 10d，Wck 20d与Wx1 20d，Wck 30d与Wx1 30d三组处理数据进行检验，结果如表10所示，P值均小于0.05，说明对于还田组，施用腐熟剂组(10d)的失重率与未施用腐熟剂组(10d)存在显著差异，对于腐解20d、30d的情况，亦是如此。
相对于市场上外购的香蕉秸秆腐熟剂来说，Wx2 AVE＝43.8％，Wx1 AVE>Wx2 AVE。分别针对Wx2 10d与Wx1 10d，Wx2 20d与Wx1 20d，Wx2 30d与Wx1 30d三组处理数据进行检验，结果如表10所示，P值均小于0.05，说明对于三炬的腐熟剂而言，其在(10d)的失重率与市场外购的腐熟剂(10d)存在显著差异，对于腐解20d、30d的情况，亦是如此。
根据农业部微生物肥料和食用菌菌种质量监督检验测试中心相关规定，对于还田样品，施用腐熟剂组与未施用腐熟剂组的失重率具有显著差异，可判定所用腐熟剂具有腐熟效果。基于此，腐解第10d、20d、30d，皆可确证三炬香蕉秸秆腐熟剂具有腐熟效果。
表8香蕉秸秆干重(单位：克)
表9香蕉秸秆失重率(％)
表10秸秆失重率t检验P值结果
| 组对组 | P值 |
| W<sub>ck</sub><sup>10d</sup>与W<sub>x1</sub><sup>10d</sup> | 2.67*10<sup>-8</sup> |
| W<sub>ck</sub><sup>20d</sup>与W<sub>x1</sub><sup>20d</sup> | 1.03*10<sup>-6</sup> |
| W<sub>ck</sub><sup>30d</sup>与W<sub>x1</sub><sup>30d</sup> | 9.95*10<sup>-9</sup> |
| W<sub>x1</sub><sup>10d</sup>与W<sub>x2</sub><sup>10d</sup> | 8.57*10<sup>-5</sup> |
| W<sub>x1</sub><sup>20d</sup>与W<sub>x2</sub><sup>20d</sup> | 1.08*10<sup>-5</sup> |
| W<sub>x1</sub><sup>30d</sup>与W<sub>x2</sub><sup>30d</sup> | 2.39*10<sup>-9</sup> |
若P＜0.01，则两组数据是极显著差异性；
若0.01＜P＜0.05，则两组数据是显著差异性；
若P＞0.05，则两组数据是非显著差异性。
实施例3
香蕉秸秆腐熟剂在香蕉上的肥效试验
供试香蕉 品种为天宝蕉。
供试土壤 试验地土壤为赤红壤，0-60cm土层有机质25.69g/kg、全氮0.86g/kg、碱解氮65.27mg/kg、有效磷14.11mg/kg、速效钾92.32mg/kg、pH值5.10。土壤肥力水平中等。
试验设计 试验釆用随机区组排列，设4个处理，4次重复，每个小区选30株，面积约200平方。同类腐熟剂为福建三炬生物科技股份有限公司按照中国专利CN201510067182.9制备。
表11实验设计
施肥与管理记载
试验田在上一轮香蕉收获后，将香蕉秸秆切碎(长度3cm以下)均匀平铺于田间(厚度为10cm)，待香蕉苗种植后，将秸秆腐熟剂及尿素混合拌匀后均匀撒施在秸秆上(秸秆腐熟剂及尿素亩用量分别2kg和5kg，与香蕉基肥施用结合起来，施肥时注意不要将尿素直接撒到香蕉苗上，防止烧苗)，紧接着灌水,保持土壤含水量达到60％，确保香蕉秸秆充分吸足水分，后续管理按常规操作，其它田间管理相同。
常规施肥：
香蕉于2020年3月10日定植；蕉株移栽前每株以0.2千克金狮马平衡型(20-20-20)复合肥施于种植穴内，上面铺5-10㎝碎土，然后移栽；蕉株移栽后第1-2片新叶展开后，假茎高50㎝施肥。要求每星期施一次0.15千克尿素冲施。当植株假茎超过50㎝后，结合培土开始撒施，施肥为金狮马高氮型(35-5-10)复合肥为主。
在香蕉孕蕾期，每月进行三次土壤撒施追肥，每次的施肥量0.15kg金狮马高氮型(35-5-10)复合肥和0.1kg硫酸钾，每次追肥后要及时喷灌；在果实生长发育期，重施金狮马高钾型(14-10-36)复合肥，每株用量0.25千克，再配合0.3千克的氯化钾来施用。在果实生长的前半期每月进行三次土壤撒施追肥，后半期至少一个月两次追肥，但是收获前20-30天要停止施肥；
为便于对照管理，统一将果梳数控制在9梳。
香蕉于8分熟度的情况下进行采收，大约在2021年5月20日左右时间，实测香蕉产量，每小区选取10株外观相当的进行测产计算。
3结果分析
3.1香蕉的产量
不同处理香蕉产量情况表(见表12)，处理1每亩平均产量是2888.75kg，比处理2每亩平均产量2686.5kg增产7.53％；比处理3每亩平均产量2616.5kg增产10.41％；比处理4每亩平均产量1097.75kg增产163.15％。处理2比处理3每亩平均产量增产2.68％，比处理4每亩平均产量增产144.73％。
表12不同处理香蕉产量情况表
对试验处理小区产量方差分析(见表13)，F＝1407.0＞F0.01＝5.95，说明处理间产量差异达极显著水平。
表13产量方差分析表
| 变异来源 | 平方和 | 自由度 | 均方 | F值 | F<sub>0.05</sub> | F<sub>0.01</sub> |
| 处理间 | 611.9 | 3 | 204.0 | 1407.0 | 3.49 | 5.95 |
| 区组内 | 1.7 | 12 | 0.1 | |||
| 总变异 | 613.6 | 15 |
多重比较结果表明(见表14)：处理1与处理2产量差异达显著水平，处理1与处理3、处理4产量差异均达极显著水平；处理2与处理3产量无差异，处理2与处理4产量差异极显著；处理3与处理4产量差异极显著。香蕉秸秆有机肥+80％常规施肥可极显著提高香蕉产量，这可能是供试肥料中的香蕉秸秆原料，提高香蕉根际对肥料的适应性，增加肥料利用率，促进根系生长，从而增加作物营养，促进产量的提高。
表14多重比较
注：LSD0.05＝1.0kg/小区，LSD0.01＝1.8kg/小区，“*”表示经LSD0.05检验为差异显著，“**”表示经LSD0.01检验为差异极显著。
4结论
使用实施例1提供的香蕉秸秆腐熟剂处理香蕉秸秆，可以促进香蕉的生长和增产，与同类腐熟剂相比增幅在7.53％；与不使用腐熟剂相比较，增产10.41％；产品增产效果明显。产品具有应用推广价值。
实施例4
香蕉秸秆有机肥的制备：猪粪、秀珍菇菇渣、香蕉秸秆和实施例1提供的香蕉秸秆腐熟剂混合后按照有机肥生产工艺按照曝氧发酵工艺，其中猪粪的体积与菇渣的体积、香蕉秸秆的体积、香蕉秸秆腐熟剂的质量比为0.25m3:0.75m3:1m3:2kg；发酵工艺为：发酵温度为65℃，每天2次4h通气，好氧发酵时间为20d；再堆放60d，每隔15d翻堆1次，制备出来的合格的香蕉秸秆有机肥。
实施例5
香蕉秸秆有机肥在香蕉上的肥效试验
供试香蕉 品种为天宝蕉。
供试土壤 试验地土壤为赤红壤，0-60cm土层有机质20.37g/kg、全氮0.98g/kg、碱解氮86.45mg/kg、有效磷12.22mg/kg、速效钾100.36mg/kg、pH值4.98。土壤肥力水平中等。
试验设计 试验釆用随机区组排列，设4个处理，4次重复，每个小区选30株，面积约200平方。
表15试验设计
普通有机肥：猪粪和秀珍菇菇渣按照体积比1:3的比例投料，使用实施例1香蕉秸秆腐熟剂，按照有机肥生产工艺按照曝氧发酵工艺，制备出来的合格的有机肥。发酵工艺为：发酵温度为65℃，每天2次4h通气，好氧发酵时间为20d；再堆放60d，每隔15d翻堆1次。
施肥与管理记载
有机肥：处理1与处理2将所述的有机肥于香蕉定植时一并埋入坑底，可与香蕉根部接触，每颗香蕉苗放6kg，小区每次施用200kg。施肥量按照常规施肥的80％进行，生长期间其它管理方法一致。
常规施肥：香蕉于2020年4月12日定植；蕉株移栽前每株以0.2千克金狮马平衡型(20-20-20)复合肥施于种植穴内，上面铺5-10㎝碎土，然后移栽；蕉株移栽后第1-2片新叶展开后，假茎高50㎝施肥。要求每星期施一次0.15千克尿素冲施。当植株假茎超过50㎝后，结合培土开始撒施，施肥为金狮马高氮型(35-5-10)复合肥为主。
在香蕉孕蕾期，每月进行三次土壤撒施追肥，每次的施肥量0.15kg金狮马高氮型(35-5-10)复合肥和0.1kg硫酸钾，每次追肥后要及时喷灌；在果实生长发育期，重施金狮马高钾型(14-10-36)复合肥，每株用量0.25千克，再配合0.3千克的氯化钾来施用。在果实生长的前半期每月进行三次土壤撒施追肥，后半期至少一个月两次追肥，但是收获前20-30天要停止施肥；
为便于对照管理，统一将果梳数控制在9梳。
香蕉于8分熟度的情况下进行采收，大约在2021年6月25日左右时间，实测香蕉产量，每小区选取10株外观相当的进行测产计算。
3结果分析
3.1香蕉的产量
不同处理香蕉产量情况表(见表16)，处理1每亩平均产量是2950.25kg，比处理2每亩平均产量2701.75kg增产9.2％；比处理3每亩平均产量2520.75kg增产17.04％；比处理4每亩平均产量1068.5kg增产176.11％。处理2比处理3每亩平均产量增产7.18％，比处理4每亩平均产量增产152.85％。
表16不同处理香蕉产量情况表
对试验处理小区产量方差分析(见表17)，F＝2299＞F0.01＝5.95，说明处理间产量差异达极显著水平。
表17产量方差分析表
| 变异来源 | 平方和 | 自由度 | 均方 | F值 | F<sub>0.05</sub> | F<sub>0.01</sub> |
| 处理间 | 644.7 | 3 | 214.9 | 2299.1 | 3.49 | 5.95 |
| 区组内 | 1.1 | 12 | 0.1 | |||
| 总变异 | 645.9 | 15 |
多重比较结果表明(见表18)：处理1与处理2产量差异达显著水平，处理1与处理3、处理4产量差异均达极显著水平；处理2与处理3产量无差异，处理2与处理4产量差异极显著；处理3与处理4产量差异极显著。香蕉秸秆有机肥+80％常规施肥可极显著提高香蕉产量，这可能是供试肥料中的香蕉秸秆原料，提高香蕉根际对肥料的适应性，增加肥料利用率，促进根系生长，从而增加作物营养，促进产量的提高。
表18多重比较
注：LSD0.05＝0.8kg/小区，LSD0.01＝1.5kg/小区，“*”表示经LSD0.05检验为差异显著，“**”表示经LSD0.01检验为差异极显著。
4结论
使用香蕉秸秆制备的有机肥其效果比常规的有机肥从增产的效果比较会更好，增幅在9.2％；与常规的施肥相比较，使用了香蕉秸秆制备的有机肥其效果可以增产17.04％；因此可以判定香蕉秸秆有机肥对于香蕉种植具有增产的效果。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，并非对本发明作任何形式上的限制。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种腐熟香蕉秸秆的复合微生物，其特征在于，包括灰略红链霉菌(Streptomycesgriseorubens)三炬-09、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)三炬-06、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)三炬-07、赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sp.)三炬-12、长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)三炬-08、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)三炬-04；
所述灰略红链霉菌三炬-09保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10247；
所述东方伊萨酵母三炬-06保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.2012470；
所述枯草芽孢杆菌三炬-07保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10248；
所述赖氨酸芽孢杆菌三炬-12保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.2015313；
所述长枝木霉三炬-08保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10144；
所述甲基营养型芽孢杆菌三炬-04保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.2012169。
2.根据权利要求1所述的复合微生物，其特征在于，所述灰略红链霉菌三炬-09、东方伊萨酵母三炬-06、枯草芽孢杆菌三炬-07、赖氨酸芽孢杆菌三炬-12、长枝木霉三炬-08和甲基营养型芽孢杆菌三炬-04的菌数量比为1:1:8:1:3:3。
3.一种培养权利要求1或2所述复合微生物的培养基，其特征在于，当培养灰略红链霉菌三炬-09时，所述培养基包括固体培养基和液体培养基，所述固体培养基包括麦麸、谷壳、香蕉秸秆和玉米粉，所述麦麸、谷壳、香蕉秸秆和玉米粉的质量比为40:25:25:10；所述液体培养基以水为溶剂，每升包括：玉米淀粉10g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.05g、氯化钠0.05g、硫酸亚铁0.01g、硫酸铵3g，pH值为7.2；
当培养东方伊萨酵母三炬-06时，所述培养基包括固体培养基和液体培养基，所述固体培养基包括麦麸、酒糟渣、香蕉秸秆和玉米粉，所述麦麸、酒糟渣、香蕉秸秆和玉米粉的质量比为40:25:25:10；所述液体培养基以水为溶剂，每升包括：小麦粉10g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.05g、硫酸亚铁0.01g，pH值为6.8；
当培养长枝木霉三炬-08时，所述培养基包括固体培养基和液体培养基，所述固体培养基包括麦麸、甘蔗渣、香蕉秸秆和玉米粉，所述麦麸、甘蔗渣、香蕉秸秆和玉米粉的质量比为40:25:25:10；所述液体培养基以水为溶剂，每升包括：马铃薯粉10g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、蔗糖10g，自然pH值；
当培养枯草芽孢杆菌三炬-07时，所述培养基为液体培养基，以水为溶剂，每升包括：葡萄糖5g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.5g、硫酸锰0.1g、硫酸铵2g、硫酸亚铁0.01g，pH值为7.2；
当培养甲基营养型芽孢杆菌三炬-04时，所述培养基为液体培养基，以水为溶剂，每升包括：蔗糖5g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.5g、硫酸铵2g、硫酸亚铁0.01g，pH值为6.8；
当培养赖氨酸芽孢杆菌三炬-12时，所述培养基为液体培养基，以水为溶剂，每升包括：黄豆粉5g、香蕉杆汁20g、过磷酸钙2g、硫酸镁0.5g、氯化钠0.5g、硫酸锰0.1g、硫酸铵2g、硫酸亚铁0.01g，pH值为6.8。
4.一种香蕉秸秆腐熟剂，其特征在于，包括权利要求1～2任一项所述的复合微生物和基质。
5.根据权利要求4所述的香蕉秸秆腐熟剂，其特征在于，所述香蕉秸秆腐熟剂中灰略红链霉菌三炬-09的菌含量为1亿CFU/g；
所述东方伊萨酵母三炬-06的菌含量为1亿CFU/g；
所述枯草芽孢杆菌三炬-07的菌含量为8亿CFU/g；
所述赖氨酸芽孢杆菌三炬-12的菌含量为1亿CFU/g；
所述长枝木霉三炬-08的菌含量为3亿CFU/g；
所述甲基营养型芽孢杆菌三炬-04的菌含量为3亿CFU/g。
6.一种香蕉秸秆有机肥，其特征在于，将动物粪便、菇渣和香蕉秸秆经权利要求3～5任一项所述的香蕉秸秆腐熟剂发酵，得到香蕉秸秆有机肥。
7.根据权利要求6所述的香蕉秸秆有机肥，其特征在于，所述动物粪便的体积与菇渣的体积、香蕉秸秆的体积、香蕉秸秆腐熟剂的质量比为0.25m3:0.75m3:1m3:2kg。
8.根据权利要求6所述的香蕉秸秆有机肥，其特征在于，所述发酵的方法包括：将所述动物粪便、菇渣、香蕉秸秆和香蕉秸秆腐熟剂混合，得到混合料；
将所述混合料进行好氧发酵，得到发酵料；所述好氧发酵的条件包括：好氧发酵温度为65℃，每天2次4h通气，好氧发酵时间为20d；
将所述发酵料堆放60d，每隔15d翻堆1次，得到香蕉秸秆有机肥。
9.权利要求3～5任一项所述的香蕉秸秆腐熟剂在香蕉秸秆还田中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述应用包括：
将香蕉秸秆粉碎，得到粉碎物；
将所述粉碎物平铺于田间，再将所述香蕉秸秆腐熟剂撒施在粉碎物上，所述平铺的厚度为10cm；
所述香蕉秸秆腐熟剂的用量为2kg/亩。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Chen Xiaoyan Inventor after: Chen Yiping Inventor after: Yang Fengshun Inventor after: Li Yingwu Inventor after: Fu Ruizhou Inventor after: Zhai Xiucai Inventor after: Luo Maoxi Inventor after: Chen Qinghai Inventor after: Wang Jinling Inventor after: Liu Yuzhen Inventor after: Li Ximing Inventor before: Chen Xiaoyan Inventor before: Yang Fengshun Inventor before: Li Yingwu Inventor before: Zhai Xiucai Inventor before: Luo Maoxi Inventor before: Chen Qinghai Inventor before: Wang Jinling Inventor before: Liu Yuzhen Inventor before: Li Ximing Inventor before: Chen Yiping |
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| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |