CN114848689A - 一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用 - Google Patents

一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114848689A
CN114848689A CN202210511893.0A CN202210511893A CN114848689A CN 114848689 A CN114848689 A CN 114848689A CN 202210511893 A CN202210511893 A CN 202210511893A CN 114848689 A CN114848689 A CN 114848689A
Authority
CN
China
Prior art keywords
organic solvent
layer
huperzia serrata
water layer
ethanol
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202210511893.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114848689B (zh
Inventor
张玉波
王国才
陈能花
吴忠南
罗钉
唐庆
占昭春
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jinan University
Original Assignee
Jinan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jinan University filed Critical Jinan University
Priority to CN202210511893.0A priority Critical patent/CN114848689B/zh
Publication of CN114848689A publication Critical patent/CN114848689A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114848689B publication Critical patent/CN114848689B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/11—Pteridophyta or Filicophyta (ferns)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开了一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用。所述的制备方法，包含如下步骤：(1)取中药千层塔，用乙醇提取，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入酸调节整个混悬体系的pH值至2～3，静置后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；(3)取酸水层，向酸水层中加入碱，调节酸水层的pH值至9～10，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位。由该方法制备得到的千层塔有效部位具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用；因此，将其用于开发预防和治疗老年痴呆的药物具有广阔的应用前景。

Description

一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗 老年痴呆作用的药物中的应用
技术领域
本发明涉及天然药物化学技术领域，具体涉及一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用。
背景技术
千层塔为石杉科石杉属植物蛇足石杉，以全草入药；其具有散瘀止血、清热解毒以及消肿止痛之功效；主治跌打损伤、瘀血肿痛、内伤吐血；外用治痈疖肿毒、毒蛇咬伤以及烧烫伤。
阿尔茨海默病(AD)是一种起病隐匿的进行性发展的神经***退行性疾病；65岁以前发病者，称早老性痴呆；65岁以后发病者称老年性痴呆。乙酰胆碱酯酶抑制剂，又称为抗胆碱酯酶药，是通过对乙酰胆碱酯酶的可逆性抑制，达到使乙酰胆碱(ACh)在突触处的积累，延长并且增加了乙酰胆碱的作用；在临床上广泛用于抗老年性痴呆。
因此，开发对乙酰胆碱酯酶具有抑制作用的药物是开发预防或治疗老年痴呆作用的药物的方向之一。现有技术从千层塔中分离得到了单体化合物石杉碱甲，研究表明，其对乙酰胆碱酯酶具有明显的抑制作用，对老年痴呆症有显著疗效。
然而，千层塔中是否还有其它有效成分具有乙酰胆碱酯酶具有抑制作用，现有技术的报道较少。因此，以中药千层塔为原料，进一步开发对乙酰胆碱酯酶具有抑制作用的有效部位或单体化合物，为开发预防或治疗老年痴呆的药物提供更多的选择，具有重要的应用价值。
发明内容
为了克服现有技术中存在的至少之一的技术问题，本发明首先提供了一种千层塔有效部位的制备方法。研究表明，由本发明所述方法制备得到的千层塔有效部位具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用。
本发明所要解决上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：
一种千层塔有效部位的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：
(1)取中药千层塔，用乙醇提取，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；
(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入酸调节整个混悬体系的pH值至2～3，静置后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；
(3)取酸水层，向酸水层中加入碱，调节酸水层的pH值至9～10，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位。
优选地，步骤(1)中的乙醇是指体积分数为70～95％的乙醇水溶液。
优选地，步骤(1)中千层塔与乙醇的用量比为1g:8～20mL。
最优选地，步骤(1)中千层塔与乙醇的用量比为1g:12mL。
优选地，步骤(1)中所述的提取是指采用冷浸法提取，提取时间为3～10d。
最优选地，所述的提取时间为7d。
优选地，步骤(2)中千层塔总浸膏与水的用量比为1g:15～30mL。
最优选地，步骤(2)中千层塔总浸膏与水的用量比为1g:20mL。
优选地，步骤(2)中有机溶剂A为二氯甲烷；步骤(3)中有机溶剂B为二氯甲烷。
本发明提供了一种全新的千层塔有效部位的制备方法；发明人在大量的实验中发现，该方法步骤(2)和(3)的pH值控制以及有机溶剂A和有机溶剂B的选择是一个整体的方案，其共同对于制备得到的千层塔有效部位是否具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用起着决定性作用。
发明人在大量的研究中发现：当步骤(2)中的pH值控制在2～3，步骤(3)中的pH值控制在9～10，有机溶剂A和B同时选用二氯甲烷时制备得到的千层塔有效部位具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用。若步骤(2)和(3)的pH值在其它范围，或有机溶剂A和B选用其它有机溶剂制备得到的千层塔有效部位其对乙酰胆碱酯酶抑制作用要显著小于本发明，甚至制备不到具有乙酰胆碱酯酶抑制作用的有效部位。
优选地，步骤(2)中有机溶剂A为二氯甲烷；步骤(3)中有机溶剂B为由二氯甲烷和***组成的混合溶剂。
发明人在进一步研究中惊奇的发现：当步骤(2)中的pH值控制在2～3，步骤(3)中的pH值控制在9～10，有机溶剂A选用二氯甲烷，有机溶剂B选用二氯甲烷和***的组合时制备得到的千层塔有效部位具有更加优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用；其对乙酰胆碱酯酶的抑制作用与有机溶剂B仅仅选用二氯甲烷时制备得到的千层塔有效部相比，得到了进一步地大幅提高。
其中，二氯甲烷和***的体积比为4～6:1；最优选地，二氯甲烷和***的体积比为5:1。
优选地，步骤(2)中有机溶剂A的体积用量与水的体积用量比为1～2:1；步骤(3)中有机溶剂B的体积与酸水层的体积比为1～2:1。
优选地，步骤(2)中的酸为浓盐酸；步骤(3)中的碱为氨水。
本发明还提供了一种由上述制备方法制备得到的千层塔有效部位。
本发明还提供了一种上述千层塔有效部位在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用。
本发明还提供了一种上述千层塔有效部位在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用。
有益效果：本发明提供了一种全新的千层塔有效部位的制备方法，由该方法制备得到的千层塔有效部位具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用。因此，将该千层塔有效部位用于开发预防和治疗老年痴呆的药物具有广阔的应用前景。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例对本发明并不做任何形式的限定。
实施例1千层塔有效部位的制备
(1)取中药千层塔，用乙醇(采用体积分数为95％的乙醇水溶液)采用冷浸法在室温下提取7d，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；
其中，千层塔与乙醇的用量比为1g:12mL；
(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入浓盐酸调节整个混悬体系的pH值至2.5，静置10h后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；
其中，千层塔总浸膏与水的用量比为1g:20mL；有机溶剂A的体积用量与水的体积用量比为2:1；所述的有机溶剂A选用二氯甲烷；
(3)取酸水层，向酸水层中加入氨水，调节酸水层的pH值至9.5，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位；
其中，有机溶剂B的体积与酸水层的体积比为2:1；所述的有机溶剂B选用二氯甲烷。
实施例2千层塔有效部位的制备
(1)取中药千层塔，用乙醇(采用体积分数为70％的乙醇水溶液)采用冷浸法在室温下提取10d，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；
其中，千层塔与乙醇的用量比为1g:20mL；
(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入浓盐酸调节整个混悬体系的pH值至2，静置10h后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；
其中，千层塔总浸膏与水的用量比为1g:15mL；有机溶剂A的体积用量与水的体积用量比为2:1；所述的有机溶剂A选用二氯甲烷；
(3)取酸水层，向酸水层中加入氨水，调节酸水层的pH值至9，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位；
其中，有机溶剂B的体积与酸水层的体积比为2:1；所述的有机溶剂B选用二氯甲烷。
实施例3千层塔有效部位的制备
(1)取中药千层塔，用乙醇(采用体积分数为80％的乙醇水溶液)采用冷浸法在室温下提取5d，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；
其中，千层塔与乙醇的用量比为1g:8mL；
(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入浓盐酸调节整个混悬体系的pH值至3，静置10h后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；
其中，千层塔总浸膏与水的用量比为1g:30mL；有机溶剂A的体积用量与水的体积用量比为1:1；所述的有机溶剂A选用二氯甲烷；
(3)取酸水层，向酸水层中加入氨水，调节酸水层的pH值至10，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位；
其中，有机溶剂B的体积与酸水层的体积比为1:1；所述的有机溶剂B选用二氯甲烷。
实施例4千层塔有效部位的制备
(1)取中药千层塔，用乙醇(采用体积分数为95％的乙醇水溶液)采用冷浸法在室温下提取7d，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；
其中，千层塔与乙醇的用量比为1g:12mL；
(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入浓盐酸调节整个混悬体系的pH值至2.5，静置10h后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；
其中，千层塔总浸膏与水的用量比为1g:20mL；有机溶剂A的体积用量与水的体积用量比为2:1；所述的有机溶剂A选用二氯甲烷；
(3)取酸水层，向酸水层中加入氨水，调节酸水层的pH值至9.5，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位；
其中，有机溶剂B的体积与酸水层的体积比为2:1；所述的有机溶剂B选用由体积比为5:1的二氯甲烷和***组成的混合有机溶剂。
对比例1千层塔有效部位的制备
(1)取中药千层塔，用乙醇(采用体积分数为95％的乙醇水溶液)采用冷浸法在室温下提取7d，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；
其中，千层塔与乙醇的用量比为1g:12mL；
(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入浓盐酸调节整个混悬体系的pH值至4，静置10h后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；
其中，千层塔总浸膏与水的用量比为1g:20mL；有机溶剂A的体积用量与水的体积用量比为2:1；所述的有机溶剂A选用氯仿；
(3)取酸水层，向酸水层中加入氨水，调节酸水层的pH值至11，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位；
其中，有机溶剂B的体积与酸水层的体积比为2:1；所述的有机溶剂B选用氯仿。
对比例1与实施例1的区别在于，步骤(2)和(3)中的pH值不同，以及有机溶剂A和B不同；对比例1步骤(2)中的pH值控制在4，步骤(3)中的pH值控制在11，有机溶剂A和B同时选用氯仿；而实施例1步骤(2)中的pH值控制在2.5，步骤(3)中的pH值控制在9.5，有机溶剂A和B同时选用二氯甲烷。
对比例2千层塔有效部位的制备
(1)取中药千层塔，用乙醇(采用体积分数为95％的乙醇水溶液)采用冷浸法在室温下提取7d，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；
其中，千层塔与乙醇的用量比为1g:12mL；
(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入浓盐酸调节整个混悬体系的pH值至4，静置10h后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；
其中，千层塔总浸膏与水的用量比为1g:20mL；有机溶剂A的体积用量与水的体积用量比为2:1；所述的有机溶剂A选用乙酸乙酯；
(3)取酸水层，向酸水层中加入氨水，调节酸水层的pH值至11，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位；
其中，有机溶剂B的体积与酸水层的体积比为2:1；所述的有机溶剂B选用乙酸乙酯。
对比例1与实施例1的区别在于，步骤(2)和(3)中的pH值不同，以及有机溶剂A和B不同；对比例1步骤(2)中的pH值控制在4，步骤(3)中的pH值控制在11，有机溶剂A和B同时选用乙酸乙酯；而实施例1步骤(2)中的pH值控制在2.5，步骤(3)中的pH值控制在9.5，有机溶剂A和B同时选用乙酸乙酯。
对比例3千层塔有效部位的制备
(1)取中药千层塔，用乙醇(采用体积分数为95％的乙醇水溶液)采用冷浸法在室温下提取7d，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；
其中，千层塔与乙醇的用量比为1g:12mL；
(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入浓盐酸调节整个混悬体系的pH值至2.5，静置10h后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；
其中，千层塔总浸膏与水的用量比为1g:20mL；有机溶剂A的体积用量与水的体积用量比为2:1；所述的有机溶剂A选用二氯甲烷；
(3)取酸水层，向酸水层中加入氨水，调节酸水层的pH值至9.5，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位；
其中，有机溶剂B的体积与酸水层的体积比为2:1；所述的有机溶剂B选用由体积比为5:1的二氯甲烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂。
对比例3与实施例4的区别在于，有机溶剂B的选用不同，对比例3中有机溶剂B选用的是由二氯甲烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂；而实施例4中有机溶剂B选用的是由二氯甲烷和***组成的混合有机溶剂。
对比例4千层塔有效部位的制备
(1)取中药千层塔，用乙醇(采用体积分数为95％的乙醇水溶液)采用冷浸法在室温下提取7d，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；
其中，千层塔与乙醇的用量比为1g:12mL；
(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入浓盐酸调节整个混悬体系的pH值至2.5，静置10h后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；
其中，千层塔总浸膏与水的用量比为1g:20mL；有机溶剂A的体积用量与水的体积用量比为2:1；所述的有机溶剂A选用二氯甲烷；
(3)取酸水层，向酸水层中加入氨水，调节酸水层的pH值至9.5，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位；
其中，有机溶剂B的体积与酸水层的体积比为2:1；所述的有机溶剂B选用由体积比为5:1的二氯甲烷和环己烷组成的混合有机溶剂。
对比例4与实施例4的区别在于，有机溶剂B的选用不同，对比例4中有机溶剂B选用的是由二氯甲烷和环己烷组成的混合有机溶剂；而实施例4中有机溶剂B选用的是由二氯甲烷和***组成的混合有机溶剂。
实验例
将实施例1～4以及对比例1～4制备得到的千层塔有效部位用DMSO溶解，制成2mg/mL的待测溶液；用于测试实施例1～4以及对比例1～4制备得到的千层塔有效部位对乙酰胆碱酯酶抑制率。
取96孔板，每孔分别加入待测溶液10μL、pH值为8.0的Tris-HCl缓冲溶液40μL以及乙酰胆碱酯酶溶液10μL(用pH值为8.0的Tris-HCl缓冲溶液配制，浓度为1000U/mL)；空白对照组用等量的pH值为8.0的Tris-HCl缓冲溶液替代待测溶液；然后于37℃下在摇床中孵育10min；接着加入显色剂DTNB溶液20μL(用pH值为8.0的Tris-HCl缓冲溶液配制，浓度为0.1mM)以及底物碘化乙酰硫代胆碱溶液10μL(用pH值为8.0的Tris-HCl缓冲溶液配制，浓度为0.2mM)，接着于37℃下在摇床中继续孵育10min；孵育结束后，用酶标仪测定412nm下的吸光度；计算待测溶液对于乙酰胆碱酯酶的抑制率；测试结果见表1。
表1.本发明千层塔有效部位对乙酰胆碱酯酶的抑制作用
Figure BDA0003639645650000081
从表1实验数据可以看出，实施例1～3制备得到的千层塔有效部位其在2mg/mL浓度时对乙酰胆碱酯酶抑制率达到了60％以上。这说明：采用本发明方法制备得到的千层塔有效部位具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用。
从表1实验数据可以看出，实施例1制备得到的千层塔有效部位，其对乙酰胆碱酯酶抑制率远远高于对比例1和2制备得到的千层塔有效部位。而对比1和2与实施例1的区别在于，步骤(2)和(3)的pH值不同以及有机溶剂A和B不同；这说明：该方法步骤(2)和(3)的pH值控制以及有机溶剂A和有机溶剂B的选择是一个整体的方案，其共同对于制备得到的千层塔有效部位是否具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用起着决定性作用；上述研究表明：只有当步骤(2)中的pH值控制在2～3，步骤(3)中的pH值控制在9～10，有机溶剂A和B同时选用二氯甲烷时制备得到的千层塔有效部位才具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用；步骤(2)和(3)在其它pH值条件下以及有机溶剂A和B采用其它有机溶剂时制备得到的千层塔有效部位并不具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用。
从表1实验数据可以看出，实施例4制备得到的千层塔有效部位其在2mg/mL浓度时对乙酰胆碱酯酶抑制率达到了91.8％；与实施例1制备得到的千层塔有效部位得到了进一步大幅地提高，具有十分优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用。这说明：当步骤(2)中的pH值控制在2～3，步骤(3)中的pH值控制在9～10，有机溶剂A选用二氯甲烷，有机溶剂B选用二氯甲烷和***的组合时制备得到的千层塔有效部位具有更加优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用；其对乙酰胆碱酯酶抑制作用与有机溶剂B仅仅选用二氯甲烷时制备得到的千层塔有效部相比，得到了进一步地大幅提高。
从表1实验数据可以看出，对比例3和4制备得到的千层塔有效部位，其与实施例1相比，其对乙酰胆碱酯酶抑制作用并未得到明显的提高，甚至还有所降低；这说明：有机溶剂B必须选用由二氯甲烷和***组成的组合时才能进一步大幅提高制备得到的千层塔有效部位对乙酰胆碱酯酶的抑制作用，才能使得制备得的千层塔有效部位具有更加优异的乙酰胆碱酯酶抑制作用；而有机溶剂B选用其它有机溶剂的组合，并不能提高或显著提高制备得到的千层塔有效部位对乙酰胆碱酯酶的抑制作用。

Claims (10)

1.一种千层塔有效部位的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：
(1)取中药千层塔，用乙醇提取，将提取液浓缩去除乙醇后得千层塔总浸膏；
(2)将千层塔总浸膏加水混悬，然后加入酸调节整个混悬体系的pH值至2～3，静置后加入有机溶剂A进行萃取得有机溶剂A层和酸水层；
(3)取酸水层，向酸水层中加入碱，调节酸水层的pH值至9～10，静置后加入有机溶剂B进行萃取得有机溶剂B层和碱水层；取有机溶剂B层浓缩干燥后得千层塔有效部位。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中的乙醇是指体积分数为70～95％的乙醇水溶液；
步骤(1)中千层塔与乙醇的用量比为1g:8～20mL；
最优选地，步骤(1)中千层塔与乙醇的用量比为1g:12mL。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的提取是指采用冷浸法提取，提取时间为3～10d；
最优选地，所述的提取时间为7d。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中千层塔总浸膏与水的用量比为1g:15～30mL；
最优选地，步骤(2)中千层塔总浸膏与水的用量比为1g:20mL。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中有机溶剂A为二氯甲烷；步骤(3)中有机溶剂B为二氯甲烷。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中有机溶剂A为二氯甲烷；步骤(3)中有机溶剂B为由二氯甲烷和***组成的混合溶剂。
其中，二氯甲烷和***的体积比为4～6:1；最优选地，二氯甲烷和***的体积比为5:1。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中有机溶剂A的体积用量与水的体积用量比为1～2:1；步骤(3)中有机溶剂B的体积与酸水层的体积比为1～2:1。
8.权利要求1～7任一项所述的制备方法制备得到的千层塔有效部位。
9.权利要求8所述的千层塔有效部位在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用。
10.权利要求8所述的千层塔有效部位在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用。
CN202210511893.0A 2022-05-12 2022-05-12 一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用 Active CN114848689B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210511893.0A CN114848689B (zh) 2022-05-12 2022-05-12 一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210511893.0A CN114848689B (zh) 2022-05-12 2022-05-12 一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114848689A true CN114848689A (zh) 2022-08-05
CN114848689B CN114848689B (zh) 2023-04-07

Family

ID=82636822

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210511893.0A Active CN114848689B (zh) 2022-05-12 2022-05-12 一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114848689B (zh)

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU7217696A (en) * 1995-10-11 1997-04-30 Medichem S.A. New polycyclic aminopyridine compounds which are acetylcholinesterase inhibitors, process for preparing them and their use
WO1999011625A1 (en) * 1997-09-03 1999-03-11 Macro Hi-Tech Jv, Ltd. Huperzine a derivatives
CN102600226A (zh) * 2012-04-09 2012-07-25 重庆市秀山红星中药材开发有限公司 千层塔石杉总碱的提取方法
CN103820332A (zh) * 2014-02-07 2014-05-28 福建中医药大学 蛇足石杉内生真菌及其产石杉碱甲的方法和应用
CN105399672A (zh) * 2014-09-16 2016-03-16 上海虹晶生物科技有限公司 可逆性乙酰胆碱酯酶抑制剂石杉碱甲的合成方法
CN107115430A (zh) * 2017-06-21 2017-09-01 芜湖耄智生物科技有限公司 含有石杉碱甲的中药饮及其制备方法
CN109200051A (zh) * 2017-07-03 2019-01-15 南京和博生物医药有限公司 石杉碱甲及其类似物作为治疗炎症性疾病药物的用途
CN110078667A (zh) * 2019-04-28 2019-08-02 云南汉德生物技术有限公司 一种提取石杉碱甲的方法
CN112759599A (zh) * 2021-01-25 2021-05-07 暨南大学 一种地胆草有效部位及其在制备具有抗呼吸道合胞病毒作用的药物中的应用
CN113354643A (zh) * 2021-07-09 2021-09-07 上海健康医学院 一种千层塔碱化合物、其制备方法及其应用

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU7217696A (en) * 1995-10-11 1997-04-30 Medichem S.A. New polycyclic aminopyridine compounds which are acetylcholinesterase inhibitors, process for preparing them and their use
WO1999011625A1 (en) * 1997-09-03 1999-03-11 Macro Hi-Tech Jv, Ltd. Huperzine a derivatives
CN102600226A (zh) * 2012-04-09 2012-07-25 重庆市秀山红星中药材开发有限公司 千层塔石杉总碱的提取方法
CN103820332A (zh) * 2014-02-07 2014-05-28 福建中医药大学 蛇足石杉内生真菌及其产石杉碱甲的方法和应用
CN105399672A (zh) * 2014-09-16 2016-03-16 上海虹晶生物科技有限公司 可逆性乙酰胆碱酯酶抑制剂石杉碱甲的合成方法
CN107115430A (zh) * 2017-06-21 2017-09-01 芜湖耄智生物科技有限公司 含有石杉碱甲的中药饮及其制备方法
CN109200051A (zh) * 2017-07-03 2019-01-15 南京和博生物医药有限公司 石杉碱甲及其类似物作为治疗炎症性疾病药物的用途
CN110078667A (zh) * 2019-04-28 2019-08-02 云南汉德生物技术有限公司 一种提取石杉碱甲的方法
CN112759599A (zh) * 2021-01-25 2021-05-07 暨南大学 一种地胆草有效部位及其在制备具有抗呼吸道合胞病毒作用的药物中的应用
CN113354643A (zh) * 2021-07-09 2021-09-07 上海健康医学院 一种千层塔碱化合物、其制备方法及其应用

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
N CALLIZOT，等: "Huperzia serrata Extract \'NSP01\' With Neuroprotective Effects-Potential Synergies of Huperzine A and Polyphenols" *
QING TANG，等: "Five matrine-type alkaloids from Sophora tonkinensis" *
匡广凯，等: "地胆草的化学成分研究" *
张卫刚，等: "响应面法设计优化石杉碱甲提取工艺研究" *
张馨，等: "千层塔中石杉碱甲的提取工艺优化" *
李军，等: "千层塔中三萜成分的研究" *
李昂，等: "珍稀蕨类植物蛇足石杉药用有效成分研究进展" *
马燮，等: "微波辅助萃取蛇足石杉总生物碱的工艺研究" *

Also Published As

Publication number Publication date
CN114848689B (zh) 2023-04-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Xiu et al. Pancreatic islet regeneration by ephedrine in mice with streptozotocin-induced diabetes
US20090186110A1 (en) Guava extract
CN102526135A (zh) 一种缬草制剂及其制备方法
CN107641128A (zh) 一种高效提取河豚毒素的方法
DE3109335C2 (de) Ebelacton A und B, Verfahren zu deren Herstellung und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Mittel
WO2008145064A1 (fr) Procédé d'obtention d'un extrait contenant du séquoyitol à partir d'une espèce du genre trifolium, de soja et de ginkgo biloba, et utilisation de celui-ci
CN114848689B (zh) 一种千层塔有效部位及其制备方法与在制备具有预防或治疗老年痴呆作用的药物中的应用
CN104224863B (zh) 金钱草总黄酮在制备治疗高尿酸血症药物中的应用
US5464620A (en) Pharmaceutical composition for treating gastrointestinal disease
WO2004039759A1 (fr) Compose naturel servant dans le traitement de diabetes, sa preparation et son utilisation
DE60109018T2 (de) Kavalactone als Hemmer der TNF-alpha Produktion
CN114869920B (zh) 一种具有乙酰胆碱酯酶抑制作用的千层塔提取物及其制备方法与应用
CN108815207A (zh) 蜈蚣草提取物在制备治疗早老性痴呆症药物中的应用
EP1395270B1 (de) Verwendung von phyllanthusbestandteilen zur herstellung eines arzneimittels zur prävention oder behandlung von infekten durch resistente hepatitis b-viren
CN101433575B (zh) 一种乌桕种子提取物及其制备方法
CN104027477A (zh) 金花茶叶活性部位，其制备方法及其用途
CN105732402A (zh) 从油菜籽粕中制备芥子碱硫氰酸盐及应用
CN107737155A (zh) 一种凉粉草提取物及其制备方法和应用
CN110872240A (zh) 全蝎中胍类生物碱钳蝎碱甲和/或钳蝎碱乙的提取方法及医药用途
CN106727732B (zh) 蛹虫草提取物及其制备方法和应用
CN1160088C (zh) 药物组合物和化妆品组合物的萃取方法
CN111662349A (zh) 密蒙花提取物、其制备方法及用途
CN111467330A (zh) 一种抗痴呆的药物
CN1057300C (zh) 一种儿茶素的葡萄糖甙化合物及其制备方法和用途
CN115300586B (zh) 一种抗尿酸盐肾沉积的中药组合物及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant