CN114642239B - 一种提升ddgs营养品质的方法及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种提升DDGS营养品质的方法及其应用。具体包括以下步骤:将枯草芽孢杆菌发酵菌液与由DDGS、米曲霉发酵产物和发酵包混合组成的发酵底物进行混合发酵,制备得到发酵后的DDGS;其中,发酵包中包括碳酸钙、粪肠球菌和毕次酵母。本发明中的发酵方法可以降低DDGS中霉菌毒素的含量,增加DDGS在饲料中的占比,且本发明中的发酵方法可以将DDGS中难分解的NSP、纤维素和大分子蛋白质转化为单糖、多糖和小肽等易于吸收的营养物质,提高了DDGS的吸收利用率。此外,DDGS的价格低廉,使用DDGS代替价格较高的豆粕和棉粕等,可以降低饲料的成本。

Description

一种提升DDGS营养品质的方法及其应用
技术领域
本发明属于生物发酵技术领域,具体涉及了一种提升DDGS营养品质的方法及其应用。
背景技术
玉米干酒糟及可溶物(DDGS)是玉米谷物加工业的副产品,是玉米谷物提取酒精和油后的植物蛋白质饲料。在DDGS中含有较高含量的蛋白质、脂肪、有效磷及其他营养成分,在动物饲料中可以代替玉米、豆粕等其他昂贵的饲料原料,DDGS的使用不仅可以促进动物健康生长,提高动物产品的质量,还可以降低饲料的成本。然而,在实际的应用中,DDGS依然存在一些问题。
首先,DDGS中的霉菌毒素含量较高,霉菌毒素的含量过高,会对动物的生长产生影响,因此,限制了DDGS在饲料中的添加量。此外,DDGS中的蛋白质、脂肪和糖等营养成分多以大分子的形式存在,不能被单胃动物所吸收利用。而且饲料存在适口性差的问题,因此,需要加入各种糖酶来改善饲料的品质,这些进一步限制了DDGS在饲料中的消化利用率。
因此,急需寻找一种可以对DDGS进行处理的方法,通过使用该方法不仅可以降低DDGS中的霉菌毒素含量,还可以提高DDGS中各种营养物质的利用率,从而可以使DDGS资源更加有效的利用,使用范围进一步拓宽,从而进一步降低饲料的成本。
发明内容
本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此,本发明提出了一种提升DDGS营养品质的方法及其应用,本发明中的发酵方法可以有效较低DDGS中的霉菌毒素的含量,提高DDGS中非淀粉多糖(NSP)、纤维素和大分子蛋白质的利用,此外,使用本发明中的发酵方法处理后的DDGS中的含水量低,适口性好,可以进一步提高DDGS在饲料中的占比。
本发明的第一方面,提供了一种DDGS的发酵方法,具体包括以下步骤:
将枯草芽孢杆菌发酵菌液和由DDGS、米曲霉发酵产物和发酵包组成的发酵底物进行混合发酵,制备得到发酵后的DDGS。
根据本发明第一方面的内容,在本发明的一些实施方式中,所述发酵包中包括碳酸钙、粪肠球菌和毕次酵母。
在本发明的一些优选实施方式中,按照重量百分比计,所述由DDGS、米曲霉发酵产物和发酵包组成的发酵底物中包括60~85%的DDGS、10~35%的米曲霉发酵产物和1~5%的发酵包。
在本发明的一些优选实施方式中,所述枯草芽孢杆菌发酵菌液的制备步骤为:将枯草芽孢杆菌接种于培养基中,其中,接种量为0.5~2wt%,培养温度为35℃~40℃,转速为160~200r/min,培养时间为18~24h。
在本发明的一些更优选的实施方式中,所述培养基中包括玉米粉5~15g/L、豆粕粉10~30g/L、麸皮1~10g/L、葡萄糖1~10g/L、酵母膏1~10g/、氯化钠1~5g/L、磷酸氢二钾1~5g/L、硫酸锰0.1~0.5g/L和硫酸镁0.2~1g/L。
在本发明的一些更优选的实施方式中,所述培养基按照本领域的常规技术手段进行制备。
在本发明的一些优选实施方式中,所述米曲霉发酵产物的制备方法为:将米曲霉接种于发酵底物中,接种量为0.5~2wt%,发酵底物含水量为45%~48%,发酵温度为25~30℃,发酵时间为36~48h,发酵方式为浅层发酵。
在本发明的一些更优选实施方式中,按照重量百分比计,所述用于米曲霉发酵的发酵底物中包括30~70%的豆粕、10~50%的DDGS和5~20%的碳源。
在本发明的一些更优选的实施方式中,所述碳源为大豆糖蜜和玉米淀粉中的至少一种。
在本发明的一些更优选实施方式中,所述米曲霉发酵产物中米曲霉的孢子数为1×109~3×109cfu/g。
在本发明的一些更优选的实施方式中,所述米曲霉发酵产物中蛋白酶的活性为800~1200U/g。
在本发明的一些更优选实施方式中,所述米曲霉发酵产物中木聚糖酶的活性为1000~1500U/g。
在本发明的一些优选的实施方式中,按照重量百分比计,所述枯草芽孢杆菌发酵菌液的添加量为所述发酵底物的18~25%。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述枯草芽孢杆菌发酵菌液中有效活菌数为1×109~3×109cfu/mL。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述枯草芽孢杆菌发酵菌液中蛋白酶活性为1200~1500U/mL。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述枯草芽孢杆菌发酵菌液中脂肪酶活性为40~60U/mL。
在本发明的一些优选实施方式中,按照重量百分比计,所述发酵包中包括50~70%的碳酸钙、10~25%的粪肠球菌和10~25%的毕次酵母。
在本发明的一些更优选的实施方式中,所述粪肠球菌的有效活菌数为5×108cfu/g。
在本发明的一些更优选的实施方式中,所述毕次酵母的有效活菌数为1×109cfu/g。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述枯草芽孢杆菌发酵菌液与由DDGS、米曲霉发酵产物和发酵包混合组成的发酵底物混合后,其水含量为26%~33%。
在本发明的一些更优选的实施方式中,所述混合发酵为有氧发酵。
在本发明的一些更优选的实施方式中,所述混合发酵在装有呼吸阀的装置中进行。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述混合发酵的温度为25~33℃。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述混合发酵的时间为10~15天。
本发明中的DDGS的发酵方法中,利用了米曲霉和枯草芽孢杆菌产生的丰富的酶系对DDGS中的霉菌素进行长时间缓慢地降解,本发明中的发酵方法相比直接添加蛋白酶、木聚糖酶等酶制剂而言,本发明的发酵方法中产酶微生物分泌的消化酶对发酵底物更具有针对性、酶系更丰富,且不同的酶之间是具有协同效应的,同时对霉菌素产生了降解的作用。使用本发明中的发酵方法制备的DDGS的霉菌毒素含量低,可以增加其在各种饲料中的添加比例,进一步降低饲料的成本。此外,本发明中的发酵方法还可以将NSP和纤维素等难分解地大分子物质分解为可小分子可消化吸收的单糖和多糖,将大分子蛋白质降解为小肽等易于吸收的营养物质,进一步促进动物的生长。
本发明中的发酵方法采用两级分步发酵,可以协调好厌氧菌和好氧菌的生长,在保障霉菌毒素降解率的前提下,降低发酵过程物料的有氧降解的损耗,发酵后的产品不需要烘干就可以直接用于配料,生产成本低;厌氧发酵时间长,发酵充分且安全性高,DDGS品质改善明显,不会造成污染,利于大规模使用。
本发明的第二方面,一种用于发酵DDGS的发酵产品,所述产品中包括枯草芽孢杆菌发酵菌液、米曲霉发酵产物和发酵包。
根据本发明第二方面的内容,在本发明的一些优选的实施方式中,按照重量百分比计,所述发酵产品中包括45~60%枯草芽孢杆菌发酵菌液、35~50%的米曲霉发酵产物和2~6%的发酵包。
在本发明的一些实施方式中,所述发酵包包括碳酸钙、粪肠球菌和毕次酵母。
在本发明的一些优选的实施方式中,按照重量百分比计,所述发酵包中包括50~70%的碳酸钙、10~25%的粪肠球菌和10~25%的毕次酵母。
在本发明的一些优选的实施方式中,按照重量份数计,所述发酵包中包括50~70%的碳酸钙、10~25%的粪肠球菌和10~25%的毕次酵母。
本发明的第三方面,本发明第二方面所述的发酵产品在制备饲料添加剂中的应用。
根据本发明第三方面的内容,在本发明的一些实施方式中,所述饲料为猪饲料、禽类饲料和水产饲料。
本发明的有益效果是:
(1)本发明中的发酵方法可以降低DDGS中霉菌毒素的含量,增加DDGS在饲料中的占比,此外,本发明中的发酵方法可以将DDGS中难分解的NSP、纤维素和大分子蛋白质转化为单糖、多糖和小肽等易于吸收的营养物质,提高了DDGS的吸收利用率,DDGS价格低廉,使用DDGS代替价格较高的豆粕和棉粕等,可以降低饲料的成本;
(2)本发明中的发酵方法可以产生醇香味,能够改善DDGS的适口性,进一步提高DDGS在饲料中的占比;且使用本发明中的发酵方法处理后的DDGS中含有丰富的益生菌及有益代谢产物,能够对动物的肠道发挥益生作用,达到动物保健的效果;
(3)在本发明的发酵方法中,发酵后的产品中含水率为28~33%,具有较好的流散性,因此,发酵后不需要继续烘干即可直接用于配方饲料的生产,不但节省大量烘干过程的能耗及人工,还可以避免烘干对维生素、氨基酸等营养物质的破坏。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明,本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的,并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是,在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
本实施例中的枯草芽孢杆菌购自中国工业微生物菌种保藏管理中心,编号为CICC40176。
本实施例中的米曲霉购自河南省工业微生物菌种工程技术研究中心,编号为BNCC223758。
本实施例中酶活性的测定按照本领域的常规技术手段进行测试,具体参见GBT28715-2012、GBT23874-2009或GBT5523-2008。
实施例1
(1)枯草芽孢杆菌的培养:
按照本领域的常规技术手段对枯草芽孢杆菌进行培养,其中,培养基中包含1L的蒸馏水,10g玉米粉,15g豆粕粉,5g麸皮,5g葡萄糖,3g酵母膏,2g氯化钠,2g磷酸氢二钾,0.2g硫酸锰,0.6g硫酸镁。枯草芽孢杆菌的接种量为1wt%,培养温度为37℃,转速为180r/min,培养时间为20h。
所得枯草芽孢培养液中,枯草芽孢杆菌的有效活菌数为2.1×109cfu/g,蛋白酶的活性为1360u/mL,脂肪酶的活性为52u/mL。
(2)米曲霉一级发酵物的制备:
按照本领域的常规技术手段对米曲霉进行发酵,其中发酵底物中包括30kg的豆粕、15kg的DDGS和5kg的大豆糖蜜。将米曲霉接种于发酵底物中进行一级发酵,接种量为1wt%,使用洁净水调整发酵底物的水含量为45%~48%,在28℃下浅层发酵45h。
米曲霉发酵后的产物中米曲霉的孢子数为1.2×109cfu/g,蛋白酶的活性为960U/g,木聚糖酶的活性为1120U/g。
(3)混菌二级发酵:
以DDGS为主要的二级发酵底物,在DDGS中加入步骤(2)中的米曲霉一级发酵产物和碳酸钙、毕次酵母和粪肠球菌共同组成二级发酵底物。其中,DDGS为70kg、米曲霉一级发酵物13.5kg、碳酸钙0.9kg、毕次酵母0.3kg、粪肠球菌0.3kg。加入20kg步骤(1)中的枯草芽孢杆菌培养液,调整二级发酵底物的水含量为30%,经过螺带混合机混合均匀后使用打散机进行打散,装入呼吸袋进行密封发酵,发酵的温度为28℃,发酵的时间为14天。
对比例1
对比例1中的制备方法同实施例1,其区别在于步骤(3)的混菌二级发酵中,将米曲霉一级发酵产物替换为13.5kg未接种米曲霉的发酵底物。
对比例2
对比例2中的制备方法同实施例1,其区别在于步骤(3)的混菌二级发酵中,将米曲霉一级发酵产物替换为13.5kg未接种米曲霉的发酵底物、0.2kg蛋白酶和0.3kg木聚糖酶的混合物,其中蛋白酶的活性为10万U/g,木聚糖酶的活性为5万U/g。
对比例3
对比例3中的制备方法同实施例1,其区别在于步骤(3)的混菌二级发酵中,将枯草芽孢杆菌培养液替换为20kg未接种枯草芽孢杆菌的培养基。
对比例4
对比例4中的制备方法同实施例1,其区别在于步骤(3)的混菌二级发酵中,将枯草芽孢杆菌培养液替换为20kg未接种枯草芽孢杆菌的培养基、0.3kg蛋白酶和0.02kg脂肪酶的混合物,其中蛋白酶的活性为10万U/g,脂肪酶的活性为10万U/g。
对比例5
对比例5中的制备方法同实施例1,其区别在于步骤(3)的混菌二级发酵中,将米曲霉一级发酵产物替换为13.5kg未接种米曲霉的发酵底物、0.2kg蛋白酶和0.3kg木聚糖酶的混合物,其中蛋白酶的活性为10万U/g,木聚糖酶的活性为5万U/g;将枯草芽孢杆菌培养液替换为20kg未接种枯草芽孢杆菌的培养基、0.3kg蛋白酶和0.02kg脂肪酶的混合物,其中蛋白酶的活性为10万U/g,脂肪酶的活性为10万U/g。
DDGS降解情况的测试
检测了未发酵的DDGS、实施例1和对比例1~5中制备的DDGS发酵产物中的粗蛋白(GBT6432-2018)、粗纤维(GBT6434-2006)、真蛋白(T/NAIA 060-2021)、粗脂肪(GB/T 6433-2006)、酸溶蛋白(NY/T 3801-2020)、NSP(参照贺永惠等著《饲料中非淀粉多糖的测定方法》)等营养指标以及黄曲霉毒素B1(GB/T 36858-2018)的含量。
检测结果如表1所示,从表1中可以明显看出,相比于未发酵的DDGS,使用本发明实施例中的发酵方法发酵后的DDGS产物中的粗蛋白含量从27.3%增加至36.8%,真蛋白含量从76.4%增加至95.1%,粗脂肪从8.4%降低至1.6%,粗纤维从7.8%降低至3.3%,酸溶蛋白从12.9%提升至27.2%,NSP从32.6%降低至13.1%,黄曲霉毒素B1从49.5μg/kg降低至12.8μg/kg。对比例1~5中制备的发酵后的DDGS中的粗蛋白、真蛋白和醇溶蛋白的含量均低于本发明实施例1中所制备的DDGS,而粗脂肪、粗纤维、NSP和黄曲霉毒素的含量明显高于实施例1中的DDGS。表明,本发明实施例1中的发酵方法可以使DDGS中的大分子物质得到有效的降解,有利于DDGS中营养物质的吸收,黄曲霉毒素B1也大幅降低,使得发酵后的DDGS在猪禽料中大比例运用成为可能。
表1 DDGS发酵前后物质含量的比较(以风干物质计)
Figure BDA0003565095400000061
DDGS发酵前后消化率的测试
DDGS发酵前后消化率的测试通过模仿单胃动物的消化测定。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可以从商业途径获得。
下述实施例中所用到的材料的具体来源如表2所示。
表2 DDGS发酵前后消化率的测试中所用到的材料的来源统计表
Figure BDA0003565095400000071
一、样品的准备
1、测试样品的处理
取未发酵的DDGS、本发明实施例1中发酵后的DDGS产物、对比例1~5发酵后的DDGS产物各200g,置于电热恒温箱中烘干,其中,烘干的温度为(65±1)℃,烘干时间为24h,烘干后的样品使用植物粉碎机或者研钵进行粉碎,粉碎后使用试验筛进行过筛处理,处理后的样品密封保存备用。
2、模拟样品的准备
(1)胃缓冲液的制备
称取10.36g的氯化钠、0.98g的氯化钾和4g的消化稳定剂,放入2000mL的烧杯中,加入1800mL的去离子水进行溶解,并用2mol/L的盐酸调节溶液的pH值为2(39℃)。冷却后将上述溶液转入2000mL容量瓶,并用去离子水定容。
(2)小肠缓冲液的制备
称取8.32g的无水磷酸氢二钠、40.96g的无水磷酸二氢钠、11.55g的氯化钠、2.45g的氯化钾、青霉素160万U(本发明的测试中青霉素为0.969g)和8g消化稳定剂,放入2000mL的烧杯中,加入1800mL的去离子水进行溶解,并用1mol/L的磷酸或1mol/L的氢氧化钠调节溶液的pH值为6.44(39℃)。冷却后将上述溶液转入2000mL容量瓶,并用去离子水定容。
(3)大肠缓冲液的制备
称取7.99g的无水磷酸氢二钠、41.23g的无水磷酸二氢钠、11.98g的氯化钠、1.82g的氯化钾、青霉素160万U(本发明的测试中青霉素为0.969g)和8g消化稳定剂,放入2000mL的烧杯中,加入1800mL的去离子水进行溶解,并用1mol/L的磷酸或1mol/L的氢氧化钠调节溶液的pH值为6.42(39℃)。冷却后将上述溶液转入2000mL容量瓶,并用去离子水定容。
(4)模拟胃液的制备
模拟胃液(胃蛋白酶活性737.5U/mL):根据KLANS/X 1001-2010描述的胃蛋白酶活性测定方法,测定胃蛋白酶的活性。然后,根据模拟胃液中胃蛋白酶的浓度为737.5U/mL,称取84.38KU的胃蛋白酶溶解于250mL的pH为2.0的盐酸溶液中(39℃下标定pH),缓慢搅拌直至溶解,临用前配制。
(5)模拟小肠液的制备
模拟小肠液(淀粉酶活性221.43U/mL,胰蛋白酶活性69.10U/mL,糜蛋白酶活性8.68U/mL):根据KLANS/X 1002-2010描述的α-淀粉酶活性测定方法,KLANS/X 1003-2010描述的胰蛋白酶活性测定方法,KLANS/X 1004-2010描述的糜蛋白酶活性测定方法,测定猪肠液酶粉剂试剂级淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶中相应消化酶的活性。然后,根据模拟肠液中这三种消化酶的活性,分别称(量)取淀粉酶53.59KU,胰蛋白酶16.72KU,糜蛋白酶2.10KU溶解于22mL去离子水中,并缓慢搅拌直至溶解,临用前配制。
(6)模拟大肠液的制备
根据GB/T 23881-2009描述的纤维素酶活性的测定方法,测定试剂级的纤维素酶中相应消化酶的活性。称取11U纤维素酶溶解于22mL,并缓慢搅拌直至溶解。最终制得的纤维素酶的浓度为0.04U/mL,临用前配制。
二、实验方案的设计
DDGS发酵前后消化率的测试中所用到的透析袋购自美国Viskase公司,型号为MEMBRA-CEL MD34-14,透析袋的截留分子量14000道尔顿,扁平直径为44mm。透析袋的前处理步骤为:将透析袋截成25cm的小段。在2000mL的质量体积分数为2%的碳酸氢钠和1mmol/L的乙二胺四乙酸二钠溶液(pH=8)的混合液中将透析袋煮沸10分钟。倒掉混合溶液后,用蒸馏水进行清洗3~5次。将清洗后的透析袋置于1mmol/L的乙二胺四乙酸二钠溶液(pH=8)中继续煮沸10分钟。倒掉废液后,加入去离子水保存于4℃冰箱中备用。使用前在透析管内装满水,然后排出,彻底清洗透析袋。
将1000mL胃缓冲液、1000mL小肠前段缓冲液、1000mL小肠后段缓冲液分别倒入缓冲液瓶,放入单胃动物仿生消化***的缓冲液控温储存室,并将***的管道与缓冲液瓶连接好。在仿生消化***的控制软件中,设置单胃动物仿生消化***的预热时间为60min;混合频率设置为180rpm,缓冲液流速设置为120mL/min;模拟消化室、缓冲液控制室、管路保温室的温度均设置为39℃;消化液保温室的温度设置为5℃;(胃消化时间设置4h,胃缓冲液排空时间设置4min,胃消化阶段清洗液(去离子水)体积设置1500mL/次,清洗时间设置40min,清洗次数设置3次;胃-小肠缓冲液切换循环时间设置30min,小肠消化时间设置16h,小肠缓冲液排空时间设置4min,浓缩模拟小肠液注入体积设置为2.2mL、补充浓缩模拟小肠液体积设置为2mL,洗液(去离子水)体积设置1500mL/次,清洗时间设置40min,清洗次数设置3次。
小肠-大肠缓冲液切换循环时间设置30min,大肠消化时间设置6h,浓缩模拟大肠液注入体积设置为2.2mL、补充浓缩模拟大肠液体积设置为2mL,洗液(去离子水)体积设置1500mL/次,清洗时间设置40min,清洗次数设置6次)。
消化结束后,将透析袋内的未消化残渣无损失地转移到已知绝干重量的90mm培养皿中(此过程需要将透析袋从模拟消化器中取出,纵向剪开用去离子水冲洗)。将装有未消化残渣的培养皿在65℃烘干至无水痕后,再在105℃下烘至恒重,称量烘干后的重量(即样品消化后干物质质量),计算干物质消化率。将培养皿中的消化残渣全部刮下,转移至已知绝干重量的培养皿进行蛋白质含量检测(记为样品消化后蛋白质含量)。
三、检测指标
(1)干物质消化率:
Figure BDA0003565095400000091
(2)蛋白质的消化率:
Figure BDA0003565095400000092
四、结果分析
DDGS以及实施例1和对比例1~5发酵后的DDGS的干物质消化率和蛋白质消化率的结果如表3所示。从表3中可以看出,实施例1中发酵处理后的DDGS相比于未经过发酵处理的DDGS,干物质消化率提高了27.79%。蛋白质消化率提高了23.2%。相比较而言,对比例1~5中的DDGS的干物质消化率和蛋白质消化率均低于实施例1中的DDGS。以上结果表明,采用本发明实施例中的发酵方式对DDGS进行发酵处理可以大幅度提高DDGS中营养物质的消化利用率,有利于降低成本,节约资源。
表3 未发酵的DDGS和实施例1、对比例1~5处理后的DDGS的干物质和蛋白质的消化率统计表
Figure BDA0003565095400000101
上述实施例1为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种降低DDGS中黄曲霉毒素B1的发酵方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)枯草芽孢杆菌的培养:
将枯草芽孢杆菌接种于培养基中,其中,接种量为0.5~2wt%,培养温度为35℃~40℃,转速为160~200r/min,培养时间为18~24h,得到枯草芽孢杆菌发酵菌液;
其中,所述培养基中包括玉米粉5~15g/L、豆粕粉10~30g/L、麸皮1~10g/L、葡萄糖1~10g/L、酵母膏1~10g/、氯化钠1~5g/L、磷酸氢二钾1~5g/L、硫酸锰0.1~0.5g/L和硫酸镁0.2~1g/L;
(2)米曲霉发酵产物的制备:
将米曲霉接种于发酵底物中,接种量为0.5~2wt%,发酵底物含水量为45%~48%,发酵温度为25~30°C,发酵时间为36~48h,发酵方式为浅层发酵,得到米曲霉发酵产物;
其中,米曲霉的发酵底物中包括30~70%的豆粕、10~50%的DDGS和5~20%的碳源;
(3)混菌发酵:
将枯草芽孢杆菌发酵菌液和由DDGS、米曲霉发酵产物和发酵包组成的发酵底物进行混合发酵,制备得到发酵后的DDGS;
其中,所述混合发酵为有氧发酵,混合发酵的温度为25~33℃,混合发酵的时间为10~15天;
按照重量百分比计,所述发酵底物中包括60~85%的DDGS、10~35%的米曲霉发酵产物和1~5%的发酵包;
所述发酵包中包括50~70%的碳酸钙、10~25%的粪肠球菌和10~25%的毕次酵母;
所述枯草芽孢杆菌发酵菌液的添加量为所述发酵底物的18~25%。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌发酵菌液中有效活菌数为1×109~3×109cfu/mL,蛋白酶活性为1200~1500U/mL,脂肪酶活性为40~60U/mL。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述米曲霉发酵产物中米曲霉孢子数为1×109~3×109cfu/g,蛋白酶的活性为800~1200U/g,木聚糖酶活性为1000~1500U/g。
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