CN114634898A - 一种微生物组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种微生物组合物及其制备方法和应用。本发明提供了一种微生物组合物，包括耐热链霉菌、产左聚糖微杆菌、产紫青霉、地衣芽孢杆菌和嗜热侧孢霉菌。本发明将耐热链霉菌、产左聚糖微杆菌、产紫青霉、地衣芽孢杆菌和嗜热侧孢霉菌组合，真菌和细菌协同作用，能够促进植物生长，加速凋落物的分解，而且还不会与环境中的微生物发生拮抗效应，能够较稳定的在环境中存在。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种微生物组合物及其制备方法和应用。
背景技术
微生物能够通过提供良好的土壤生物活性来帮助补充和保持长期的土壤肥力；抑制致病土壤生物；刺激根部***周围的微生物活性以增加植物量并且提高植物健康情况；帮助释放必需的营养物，例如，氮、磷和钾；改善土壤孔隙度、保水性和通风性；并且减少土壤板结和腐蚀。
目前，微生物在促进植物生长中具有巨大应用潜力，然而，在微生物被加入土壤中以后，微生物群体的保持和生长是挑战性的，其功能稳定性差，如何使微生物稳定存在于环境中，增强微生物功能，是亟待解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种微生物组合物，本发明提供的微生物组合物能够较稳定的存在于环境中，不仅能促进植物生长，还能够加速凋落物分解。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明提供了一种微生物组合物，包括耐热链霉菌、产左聚糖微杆菌、产紫青霉、地衣芽孢杆菌和嗜热侧孢霉菌。
优选的，所述微生物组合物中，所述耐热链霉菌、产左聚糖微杆菌、产紫青霉、地衣芽孢杆菌和嗜热侧孢霉菌的活菌数比为1～2：1～2：1～2：1～2：1～2。
优选的，所述微生物组合物的剂型包括液体剂。
本发明还提供了上述技术方案所述的微生物组合物在凋落物分解和/或促进植物生长中的应用。
优选的，所述植物包括生态修复用植物。
本发明还提供了一种促进凋落物分解的方法，将上述技术方案所述微生物组合物喷洒于待分解的凋落物上。
本发明还提供了一种促进植物生长的方法，将上述技术方案所述微生物组合物与植物种子拌种；所述微生物组合物的与植物种子的质量比为0.5～3:1000。
本发明还提供了上述技术方案所述的微生物组合物的液体制剂的制备方法，包括以下步骤：分别制备耐热链霉菌培养液、产左聚糖微杆菌培养液、产紫青霉培养液、地衣芽孢杆菌培养液和嗜热侧孢霉菌培养液，混合得所述微生物组合物的液体制剂。
优选的，所述液体制剂中，所述耐热链霉菌、产紫青霉和嗜热侧孢霉菌的有效活菌数的和大于106cfu/ml；
所述产左聚糖微杆菌和地衣芽孢杆菌的有效活菌数的和大于108cfu/ml。
优选的，所述液体制剂中，所述耐热链霉菌、产紫青霉、嗜热侧孢霉菌、产左聚糖微杆菌和地衣芽孢杆菌的有效活菌数的比为1：1：1：1：1。
本发明提供了一种微生物组合物，包括耐热链霉菌(Streptomycesthermotolerans)、产左聚糖微杆菌(Microbacterium laevaniformans)、产紫青霉(Penicilliumpurpurogenum)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和嗜热侧孢霉菌(Sporotrichum thermophile)。本发明将耐热链霉菌、产左聚糖微杆菌、产紫青霉、地衣芽孢杆菌和嗜热侧孢霉菌组合，真菌和细菌协同作用，具有促进植物生长，腐生加速凋落物分解的作用，不会与环境中的微生物发生拮抗效应，能够较稳定的在环境中存在。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为育苗一年后长柄扁桃幼苗生长情况，其中上方为使用本发明微生物组合物后的长柄扁桃幼苗，下方为仅施用培养基后的长柄扁桃幼苗。
具体实施方式
本发明提供了一种微生物组合物，包括耐热链霉菌(Streptomycesthermotolerans)、产左聚糖微杆菌(Microbacterium laevaniformans)、产紫青霉(Penicillium purpurogenum)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和嗜热侧孢霉菌(Sporotrichum thermophile)。
在本发明中，所述耐热链霉菌、产左聚糖微杆菌、产紫青霉、地衣芽孢杆菌和嗜热侧孢霉菌的活菌数比优选为1～2：1～2：1～2：1～2：1～2，进一步优选为1：1：1：1：1。
本发明在具体实施过程中，无需限定为特定的菌株，满足上述技术方案限定的菌株类型，制备微生物组合物即可。
在本发明中，所述微生物组合物的剂型优选包括液体剂、粉剂或颗粒剂，进一步优选为液体剂。
本发明将耐热链霉菌、产左聚糖微杆菌、产紫青霉、地衣芽孢杆菌和嗜热侧孢霉菌组合，真菌和细菌协同作用，能够促进植物生长，加速凋落物的分解。
本发明还提供了上述微生物组合物在凋落物分解和/或促进植物生长中的应用。
在本发明中，所述植物优选包括生态修复用植物。本发明所述生态修复用植物优选包括田菁、胡枝子、苜蓿或长柄扁桃。
当本发明将上述微生物组合物用于促进凋落物分解时，优选将所述微生物组合物喷洒于待分解的凋落物上。
当本发明将上述微生物组合物用于促进植物生长时，优选将所述微生物组合物与植物种子拌种。本发明所述微生物组合物的与植物种子的质量比优选为0.5～3:1000，进一步优选为1～2:1000，更优选为1.5:1000。
本发明还提供了上述微生物组合物的液体制剂的制备方法，包括以下步骤：分别制备耐热链霉菌培养液、产左聚糖微杆菌培养液、产紫青霉培养液、地衣芽孢杆菌培养液和嗜热侧孢霉菌培养液，混合得所述微生物组合物的液体制剂。
本发明分别制备耐热链霉菌培养液、产左聚糖微杆菌培养液、产紫青霉培养液、地衣芽孢杆菌培养液和嗜热侧孢霉菌培养液。本发明对所述耐热链霉菌培养液、产左聚糖微杆菌培养液、产紫青霉培养液、地衣芽孢杆菌培养液和嗜热侧孢霉菌培养液的制备方法没有严格要求，直接将涉及的微生物菌种接种到各自的常用培养基，经微生物发酵法制备即可。
在本发明中，培养所述耐热链霉菌的培养基优选为MS培养基，培养的温度优选为28～30℃，进一步优选为29℃，培养的时间优选为3～7d，进一步优选为4～6d，更优选为5d；培养所述产左聚糖微杆菌的培养基优选为营养肉汤，培养的温度优选为30℃，培养的时间优选为3～7d，进一步优选为4～6d，更优选为5d；培养所述产紫青霉的培养基优选为PDA液体，培养条件优选为27℃，24～48h，进一步优选为30～45h，更优选为35～40h；培养地衣芽孢杆菌的培养基优选为营养肉汤，培养的温度优选为30℃，培养的时间优选为3～7d，进一步优选为4～6d，更优选为5d；培养所述嗜热侧孢霉菌的培养基优选为PDA液体，培养的温度优选为30℃，培养的时间优选为48h。
本发明在具体实施过程中，对所述MS培养基、营养肉汤和PDA培养基的来源没有严格要求，可常规购买或者自行配置。
本发明将所述耐热链霉菌培养液、产左聚糖微杆菌培养液、产紫青霉培养液、地衣芽孢杆菌培养液和嗜热侧孢霉菌培养液，混合得所述微生物组合物的液体制剂。本发明所述液体制剂中所述耐热链霉菌、产紫青霉和嗜热侧孢霉菌的有效活菌数的和大于106cfu/ml；所述产左聚糖微杆菌和地衣芽孢杆菌的有效活菌数的和大于108cfu/ml。
在本发明所述液体制剂中，所述耐热链霉菌、产紫青霉、嗜热侧孢霉菌、产左聚糖微杆菌和地衣芽孢杆菌的有效活菌数的比优选为1：1：1：1：1。
为了进一步说明本发明，下面结合附图对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
(1)利用MS培养基培养基培养耐热链霉菌，得有效活菌数106cfu/mL的耐热链霉菌培养液；
利用营养肉汤培养基培养产左聚糖微杆菌，得有效活菌数108cfu/mL的产左聚糖微杆菌培养液；
利用PDA液体培养基培养产紫青霉，得有效活菌数106cfu/mL的产紫青霉培养液；
利用营养肉汤培养基培养地衣芽孢杆菌，得有效活菌数108cfu/mL的地衣芽孢杆菌培养液；
利用PDA液体培养基培养嗜热侧孢霉菌，得有效活菌数106cfu/mL的嗜热侧孢霉菌培养液。
(2)将步骤(1)2mL耐热链霉菌培养液、2mL产左聚糖微杆菌培养液、2mL产紫青霉培养液、2mL地衣芽孢杆菌培养液和2mL嗜热侧孢霉菌培养液混合，得微生物液体制剂。
实施例2
(1)利用MS培养基培养基培养耐热链霉菌，得有效活菌数106cfu/mL的耐热链霉菌培养液；
利用营养肉汤培养基培养产左聚糖微杆菌，得有效活菌数108cfu/mL的产左聚糖微杆菌培养液；
利用PDA液体培养基培养产紫青霉，得有效活菌数106cfu/mL的产紫青霉培养液；
利用营养肉汤培养基培养地衣芽孢杆菌，得有效活菌数108cfu/mL的地衣芽孢杆菌培养液；
利用PDA液体培养基培养嗜热侧孢霉菌，得有效活菌数106cfu/mL的嗜热侧孢霉菌培养液。
(2)将步骤(1)2mL耐热链霉菌培养液、3mL产左聚糖微杆菌培养液、3mL产紫青霉培养液、2mL地衣芽孢杆菌培养液和2mL嗜热侧孢霉菌培养液混合，得微生物液体制剂。
实施例3
(1)利用MS培养基培养基培养耐热链霉菌，得有效活菌数106cfu/mL的耐热链霉菌培养液；
利用营养肉汤培养基培养产左聚糖微杆菌，得有效活菌数108cfu/mL的产左聚糖微杆菌培养液；
利用PDA液体培养基培养产紫青霉，得有效活菌数106cfu/mL的产紫青霉培养液；
利用营养肉汤培养基培养地衣芽孢杆菌，得有效活菌数108cfu/mL的地衣芽孢杆菌培养液；
利用PDA液体培养基培养嗜热侧孢霉菌，得有效活菌数106cfu/mL的嗜热侧孢霉菌培养液。
(2)将步骤(1)2mL耐热链霉菌培养液、2mL产左聚糖微杆菌培养液、2mL产紫青霉培养液、3mL地衣芽孢杆菌培养液和4mL嗜热侧孢霉菌培养液混合，得微生物液体制剂。
对比例1
(1)将2mLMS培养基培养基、将4mL营养肉汤培养基和将4mLPDA液体培养基混合，得培养基混合液；
对比例2
同实施例1，区别在于将利用营养肉汤培养基培养产左聚糖微杆菌，得有效活菌数108cfu/mL的产左聚糖微杆菌培养液(a)，替换为营养肉汤培养基培养枯草芽孢杆菌，得有效活菌数的108cfu/mL枯草芽孢杆菌菌培养液(b)，然后取2mL(b)与其他培养液混合，得液体制剂。
对比例3
同实施例1，区别在于将利用营养肉汤培养基培养地衣芽孢杆菌菌，得有效活菌数108cfu/mL的地衣芽孢杆菌培养液(c)，替换为利用营养肉汤培养基培养枯草芽孢杆菌，得有效活菌数的108cfu/mL枯草芽孢杆菌(d)，然后取2mL(d)与其他培养液混合，得液体制剂。
测试例1
采用分解袋法分解长柄扁桃落叶，具体的，收集2000g尚未分解的新鲜长柄扁桃落叶，放在70℃烘箱中烘干。
称取50g烘干后长柄扁桃落叶，装入用孔径为0.5mm的尼龙网制成的分解袋(规格为15cm×20cm)，将分解袋放在内蒙古苏尼特右旗长柄扁桃保护区样地内，自分解袋上方30cm处向下喷施实施例1得到的液体制剂，作为处理1；
称取50g烘干后长柄扁桃落叶，装入用孔径为0.5mm的尼龙网制成的分解袋(规格为15cm×20cm)，将分解袋放在样地内，自分解袋上方30cm处向下喷施实施例2得到的液体制剂，作为处理2；
称取50g烘干后长柄扁桃落叶，装入用孔径为0.5mm的尼龙网制成的分解袋(规格为15cm×20cm)，将分解袋放在样地内，自分解袋上方30cm处向下喷施实施例3得到的液体制剂，作为处理3；
称取50g烘干后长柄扁桃落叶，装入用孔径为0.5mm的尼龙网制成的分解袋(规格为15cm×20cm)，将分解袋放在样地内，自分解袋上方30cm处向下喷施对比例1得到的培养基混合物，作为处理4；
称取50g烘干后长柄扁桃落叶，装入用孔径为0.5mm的尼龙网制成的分解袋(规格为15cm×20cm)，将分解袋放在样地内，自分解袋上方30cm处向下喷施对比例2得到的培养基-生物炭混合物，作为处理5；
称取50g烘干后长柄扁桃落叶，装入用孔径为0.5mm的尼龙网制成的分解袋(规格为15cm×20cm)，将分解袋放在样地内，喷施对比例3得到的液体制剂，作为处理6；
分别在处理1～6组处理90d、180d、270d和360d时，回收分解袋，将其表面杂物清除，同样在70℃烘箱中烘干称重，计算失重率，实验结果如下表1。
表1不同组合对长柄扁桃落叶失重率的影响
根据表1可以看出，施用本发明提供的液体制剂180d后，长柄扁桃落叶失重率达50％，施用270d后，长柄扁桃落叶失重率达90％，360d后长柄扁桃落叶完全分解，并且高于其他处理方案。
测试例2
选择600粒长柄扁桃种子，平均分为6组，每组100粒，准确称量第1组长柄扁担种子的质量，按长柄扁桃种子质量的0.5‰喷施实施例1得到的液体制剂，拌种，常温晾干；准确称量第2组长柄扁担种子的质量，按长柄扁桃种子质量的0.5‰喷施实施例2得到的液体制剂，拌种，常温晾干；准确称量第3组长柄扁担种子的质量，按长柄扁桃种子质量的0.5‰喷施实施例3得到的液体制剂，拌种，常温晾干；准确称量第4组长柄扁担种子的质量，按长柄扁桃种子质量的0.5‰喷施对比例1得到的液体制剂，拌种，常温晾干；准确称量第5组长柄扁担种子的质量，按长柄扁桃种子质量的0.5‰喷施对比例2得到的液体制剂，拌种，常温晾干；准确称量第6组长柄扁担种子的质量，按长柄扁桃种子质量的0.5‰喷施对比例3得到的液体制剂，拌种，常温晾干。
将1～6组处理后的种子播种到育苗基质(珍珠岩：蛭石(v:v)＝1：1)，按照正常程序育苗，一年后检测每组处理后种子的保存率(即对100粒种子进行育苗，一年后幼苗存活数量)和地上干物质量(单株)，统计结果如下表2，图1为育苗一年后长柄扁桃幼苗生长情况。
表2不同处理方式对长柄扁桃种子育苗的影响
| 处理方式 | 种子数量 | 地上生物量(g/株) | 保存率(％) |
| 处理1 | 100 | 3.68 | 100 |
| 处理2 | 100 | 3.72 | 100 |
| 处理3 | 100 | 3.80 | 100 |
| 处理4 | 100 | 1.25 | 80 |
| 处理5 | 100 | 2.08 | 90 |
| 处理6 | 100 | 2.32 | 92 |
根据表2可以看出，施用本发明提供的液体制剂后，能够提高长柄扁桃种子的地上生物量，提高保存率。
测试例3
分别选择50株测试例2处理1～6得到的长柄扁桃幼苗，移栽至，进行大田培养，移栽3个月后，统计移栽成活率，结果如下表3。
表3不同处理方式下长柄扁桃幼苗移栽成活情况
根据表3可以看出，将经施用本发明提供的液体制剂得到的长柄扁桃种子幼苗移栽至大田时，移栽成活率高，移栽成活率提高了50％。
由以上实施例可知本发明提供的微生物组合物能够较稳定的存在于环境中，不仅能促进植物生长，还能够加速凋落物分解。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。
Claims (10)
1.一种微生物组合物，其特征在于，包括耐热链霉菌(Streptomycesthermotolerans)、产左聚糖微杆菌(Microbacterium laevaniformans)、产紫青霉(Penicillium purpurogenum)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和嗜热侧孢霉菌(Sporotrichum thermophile)。
2.根据权利要求1所述的微生物组合物，其特征在于，所述微生物组合物中，所述耐热链霉菌、产左聚糖微杆菌、产紫青霉、地衣芽孢杆菌和嗜热侧孢霉菌的活菌数比为1～2：1～2：1～2：1～2：1～2。
3.根据权利要求1所述的微生物组合物，其特征在于，所述微生物组合物的剂型包括液体剂。
4.权利要求1～3任一项所述的微生物组合物在凋落物分解和/或促进植物生长中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述植物包括生态修复用植物。
6.一种促进凋落物分解的方法，其特征在于，将权利要求1～3任一项所述微生物组合物喷洒于待分解的凋落物上。
7.一种促进植物生长的方法，其特征在于，将权利要求1～3任一项所述微生物组合物与植物种子拌种；所述微生物组合物的与植物种子的质量比为0.5～3:1000。
8.权利要求1～3任一项所述的微生物组合物的液体制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备耐热链霉菌培养液、产左聚糖微杆菌培养液、产紫青霉培养液、地衣芽孢杆菌培养液和嗜热侧孢霉菌培养液，混合得所述微生物组合物的液体制剂。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述液体制剂中，所述耐热链霉菌、产紫青霉和嗜热侧孢霉菌的有效活菌数的和大于106cfu/ml；
所述产左聚糖微杆菌和地衣芽孢杆菌的有效活菌数的和大于108cfu/ml。
10.根据权利要求8或9所述的制备方法，其特征在于，所述液体制剂中，所述耐热链霉菌、产紫青霉、嗜热侧孢霉菌、产左聚糖微杆菌和地衣芽孢杆菌的有效活菌数的比为1：1：1：1：1。
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|---|---|---|---|---|
| CN103981107A (zh) * | 2014-06-03 | 2014-08-13 | 天津市农业资源与环境研究所 | 一种多功能农用微生物菌剂及其使用方法和效果 |
| CN108130295A (zh) * | 2018-01-16 | 2018-06-08 | 柳州市宏华生物肥有限公司 | 一种生物有机肥发酵菌剂 |
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