CN114480243A - 应用于无客土矿区的微生物修复方法 - Google Patents

应用于无客土矿区的微生物修复方法 Download PDF

Info

Publication number
CN114480243A
CN114480243A CN202210116263.3A CN202210116263A CN114480243A CN 114480243 A CN114480243 A CN 114480243A CN 202210116263 A CN202210116263 A CN 202210116263A CN 114480243 A CN114480243 A CN 114480243A
Authority
CN
China
Prior art keywords
concentration
days
bacteria
culture
soil
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN202210116263.3A
Other languages
English (en)
Inventor
张春
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qinghai Greenway Environmental Protection Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Qinghai Greenway Environmental Protection Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qinghai Greenway Environmental Protection Biotechnology Co ltd filed Critical Qinghai Greenway Environmental Protection Biotechnology Co ltd
Priority to CN202210116263.3A priority Critical patent/CN114480243A/zh
Publication of CN114480243A publication Critical patent/CN114480243A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/36—Adaptation or attenuation of cells
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
    • B09C1/10—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K17/00—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials
    • C09K17/14—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials containing organic compounds only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C2101/00—In situ
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2101/00—Agricultural use

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Processing Of Solid Wastes (AREA)

Abstract

本发明公开了一种应用于无客土矿区的微生物修复方法，其主要利用硫酸盐还原菌、光合细菌、固氮菌等多种菌种的有机组合，可在裸露岩石和沙质土表面构建健康的底层微生物生态***，其可在光照条件下自我平衡、自我生长，通过分泌胞外聚合物粘附于裸岩及沙质土表面生长，可高效吸收空气中所含水分供给微生物，实现保水、改善生态环境、促进植物根系发展等多种修复功能。修复所产生的硫化物稳定，溶解度很低，环境安全，具备缓冲作用，通过构建底层微生物生态***后，重金属在农田中以硫化矿物形式被固定，农作物可在重金属污染农田高效迅速生长，产出合格农产品。而所用微生物环境友好微生物，可从根本上改善环境生态，具有持久性。

Description

应用于无客土矿区的微生物修复方法
技术领域
本发明涉及环境修复技术领域，具体涉及一种针对无客土矿区的矸石渣微 生物复绿修复方法。
背景技术
我国青海等西部许多地区拥有多种矿产资源，比如，祁连山赋煤带，但其 存在严重的铬污染。铬渣属于重金属危险废物，其中含有的六价铬(Cr6+)易溶 且不稳定，具有强氧化毒性，可以对人体、农作物机体造成损伤。研究表明， 铬渣中含有的铬酸钙(属六价铬)还具有较强的致癌和致突变特性。未经无害 化处置的铬渣，会严重污染地表水、地下水和土壤，对生态环境和人民生命财 产安全构成巨大威胁。为此，许多地方需要实施保护修复项目，以探索形成新 的生态治理体系和治理能力，建成高原高寒矿山生态公园，形成公园运维长效 机制。
然而，青海等高寒高海拔地区存在冻土埋浅、草原湿地等地方地质与气候 条件的限制，同时矿区深部开采挖空导致地陷及水文与地下水通道破坏。另外， 过量煤矸石、煤渣堆场导致草原埋，湿地消失，从根源上破坏了生态。煤矿矸 石及废煤堆中含有较多的黄铁矿、磁黄铁矿、砷黄铁矿、方铅矿、黄铜矿、闪 锌矿、辰砂、雄黄、雌黄等矿物。从地球生物化学角度检视，上述矿物尾矿在 雨水浸泡下，在水、氧气及微生物的作用下，将进一步催化溶出离子态金属并 形成含重金属废水，源源不断地从堆中渗出，进入地下或地表水系。传统的化 学修复法稳定差、见效慢，且项目施工需电力等资源配合，额外消耗了能源。 而仅通过对煤矸石、渣场地的表面生态修复无法实现环境的真正恢复，且现有 的相关微生物技术在短期(三年内)内恢复以往生态难于实现。
由于自养嗜酸铁硫氧化微生物广泛存在，其介导的矿物淋溶过程是自然发 生的，且煤矿堆占地面积大。传统化学固化修复技术(如图2)主要采用化学药 剂与重金属元素发生化学反应，使其不再被雨水浸出或被植物根系吸收，但这 无法避免自养嗜酸微生物介导的酸、铁及重金属淋溶，因此难以应用于重金属 源源不断溶出的污染场地。另外，传统植被修复技术需要利用大量客土覆盖尾 矿库地表后再种植物，这仅能实现堆地表复绿，却无法解决矿堆深部微生物介 导的重金属淋溶问题。而且由于煤矿采坑高陡边坡降雨下的产酸淋溶，导致传 统客土喷播后复绿植被难以生长。
发明内容
本发明要解决的技术问题是针对现有技术的缺陷，提供一种修复过程更高 效、效果更稳定、无需消耗电能、可持续强、环境友好、能够降解和脱毒环境 污染物的应用于无客土矿区的微生物修复方法。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：一种应用于无客土矿区 的微生物修复方法，其特征在于：按以下步骤进行，
(1)在待修复地区进行土壤取样；
(2)微生物驯化和分离：
1)将渣样中土著混合菌按10％的接种量接种到含Cr(VI)(六价铬)浓度为100mg·L-1的富集培养基中，分别于好氧和厌氧条件下30℃培养7天；
2)7天后将所得菌液作为母液传接到含Cr(VI)浓度为200mg·L-1的NB培 养基中，分别于好氧和厌氧条件下30℃培养7天，以此驯化过程定时检测培养 液中Cr(VI)的还原率和细菌数量，直至培养基中Cr(VI)浓度使细菌无法生长；
3)以Cr(VI)的浓度变化梯度100mg·L-1，接种量为10％，置于恒温振荡箱 中培养，调节其温度为30℃，转速为150rpm。
4)定时测定溶液中Cr(VI)的还原率及细菌数量，继续增加其能耐受的Cr(VI) 浓度上限，连续驯化；
5)将驯化完成的细菌选择适合的稀释度，以涂板法于置于固态的富集培养 基上，涂布均匀后倒置培养于30℃的培养箱中3天；
6)观察菌落形态，挑起平板上的单菌落四线三区划线培养；
(3)微生物扩培：挑起微生物单菌落接种到250mL培养基的三角瓶中， 振荡7天，再转接入两个经过灭菌盛有含100mg·L-1Cr(VI)的NB培养基的250 mL三角瓶中培养；富集培养完成后进行扩大培养到100L的塑料瓶中，培养7天 后备用，直到微生物浓度达到107cfu/mL以上，准备添加到修复中试柱子中；
(4)修复：往土柱添加样品和菌液，菌液下层为SRB菌，上层为混合功能 菌；样品添加完毕后，修复组的下层接种硫酸盐还原菌，上层接种好氧功能菌， 对照组添加同样体积去离子水；接种完成后，关闭所有阀门待功能微生物生长7 天后取样进行检测；
(5)检测。
其中，NB培养基中各成分及浓度如下：Biometek1为10g·L-1，Biometek2 为5g·L-1，Biometek3为5g·L-1，Cr(VI)为100mg·L-1，Biometek4为20g·L-1， 蒸馏水300mL，pH为9，培养温度为20℃～35℃。
修复时先设计双重重复共4根土柱，均为柱长2m、直径30cm的PE材质塑 料管，其中两组为修复组，另两组为对照组；修复样品经过1cm2孔径筛分，并 配制均匀；修复组的每根土柱添加110kg样品和50L菌液，菌液下层为SRB菌， 上层为混合功能菌；对照组添加110kg样品和50L水。
修复后的检测从不同取样口取样50mL用于检测，从接种微生物起分别在第 15天、45天和90天从不同取样口取固体样品于4℃保存用于检测。
其中，检测项目包括检测浸出液中六价铬及其他重金属浓度变化、固体样 品中铬的形态结构变化、功能微生物群落结构和微生物总量变化、渗透率变化、 有机质变化及沉淀产物稳定性等。
本发明利用高效的铁还原菌可将Fe3+还原成Fe2+，降低体系环境电位，使环 境电位低于700mV，黄铁矿可做到基本不溶解；在此基础上，利用高效硫酸盐还 原菌还原硫酸根为负二价硫离子，原位与游离金属离子形成金属硫化物沉淀， 而硫化态的重金属在环境中相对稳定，溶度积很小，可以做到环境安全。
微生物修复成本低，无二次污染。且微生物可在修复环境长期存活，修复 效果是稳定和可持续的。微生物修复本身是自我调整过程，生物硫酸盐还原过 程产生的H2S若在局部环境无重金属与之共沉淀，将毒害微生物本身(产物抑 制)，抑制硫酸盐还原过程；产生的H2S若在局部环境有重金属与之共沉淀，使 得H2S减量(产物抑制减轻)，将重启硫酸盐还原过程无二次污染。修复所产生 的硫化物稳定，溶解度很低，环境安全，具备缓冲作用。
在破损生态复绿与修复方面，主要利用硫酸盐还原菌、光合细菌、固氮菌 等多种菌种的有机组合，可在裸露岩石和沙质土表面构建健康的底层微生物生 态***，这一自我平衡的底层生态***可在光照条件下自我平衡、自我生长， 通过分泌胞外聚合物粘附于裸岩及沙质土表面生长，可高效吸收空气中所含水 分供给微生物，实现保水、改善生态环境、促进植物根系发展等多种修复功能。 通过该技术构建底层微生物生态***后，重金属在农田中以硫化矿物形式被固 定，农作物可在重金属污染农田高效迅速生长，最终产出合格农产品。所用的 微生物是环境友好微生物，因此，是一种环境友好的修复技术，能够从根本上改善环境生态，具有持久性。
附图说明
图1为煤矿矸石堆微生物原位成矿修复机理示意图；
图2为煤矿矸石堆重金属溶出机理示意图；
图3为驯化铬去除功能微生物对六价铬的耐受曲线图；
图4为铬去除功能微生物的分离纯化及镜检图谱，其中，a、c、e、g代表 培养皿中微生物和铬盐不同阶段的形态变化，b、d、f、h是相对应前面的革兰 氏染色，目的是为了能在显微镜下观察重金属铬和微生物共存的变化特征，即 观察微生物对重金属铬的管控和在微生物条件下三价铬和六价铬的变化；
图5为铬去除功能微生物的生长曲线；
图6为土柱中试上层Cr6+浓度变化趋势图；
图7为柱子中试上层Cr6+去除率变化图；
图8为柱子中试中层Cr6+浓度变化趋势图；
图9为柱子中试中层Cr6+去除率变化图；
图10为柱子中试底层Cr6+浓度变化趋势图；
图11为柱子中试底层Cr6+去除率变化图；
图12为修复过程的修复组和对照组的修复数据对比框图。
具体实施方式
下面结合附图通过具体实施例对本发明做进一步说明：
所述应用于无客土矿区的微生物修复方法按以下步骤进行，
(1)在待修复地区进行土壤取样；
(2)微生物驯化和分离：
1)将渣样中土著混合菌按10％的接种量接种到含Cr(VI)浓度为100mg·L-1的富集培养基中，分别于好氧和厌氧条件下30℃培养7天；
2)7天后将所得菌液作为母液传接到含Cr(VI)浓度为200mg·L-1的NB培 养基中，分别于好氧和厌氧条件下30℃培养7天，以此驯化过程定时检测培养 液中Cr(VI)的还原率和细菌数量，直至培养基中Cr(VI)浓度使细菌无法生长；
3)以Cr(VI)的浓度变化梯度100mg·L-1，接种量为10％，置于恒温振荡箱 中培养，调节其温度为30℃，转速为150rpm。
4)定时测定溶液中Cr(VI)的还原率及细菌数量，继续增加其能耐受的Cr(VI) 浓度上限，连续驯化；
5)将驯化完成的细菌选择适合的稀释度，以涂板法于置于固态的富集培养 基上，涂布均匀后倒置培养于30℃的培养箱中3天；
6)观察菌落形态，挑起平板上的单菌落四线三区划线培养，如图3和图4；
(3)微生物扩培：挑起微生物单菌落接种到250mL培养基的三角瓶中， 振荡7天，再转接入两个经过灭菌盛有含100mg·L-1Cr(VI)的NB培养基的250 mL三角瓶中培养；富集培养完成后进行扩大培养到100L的塑料瓶中，培养7天 后备用，直到微生物浓度达到107cfu/mL以上，准备添加到修复中试柱子中； 如图5所示。
(4)修复：往土柱添加样品和菌液，菌液下层为SRB菌，上层为混合功能 菌；样品添加完毕后，修复组的下层接种硫酸盐还原菌，上层接种好氧功能菌， 对照组添加同样体积去离子水；接种完成后，关闭所有阀门待功能微生物生长7 天后取样进行检测；
(5)检测。
其中，NB培养基中各成分及浓度如下：Biometek1为10g·L-1，Biometek2 为5g·L-1，Biometek3为5g·L-1，Cr(VI)为100mg·L-1，Biometek4为20g·L-1， 蒸馏水300mL，pH为9，培养温度为20℃～35℃。
修复时先设计双重重复共4根土柱，均为柱长2m、直径30cm的PE材质塑 料管，其中两组为修复组，另两组为对照组；修复样品经过1cm2孔径筛分，并 配制均匀；修复组的每根土柱添加110kg样品和50L菌液，菌液下层为SRB菌， 上层为混合功能菌；对照组添加110kg样品和50L水。
修复后的检测从不同取样口取样50mL用于检测，从接种微生物起分别在第 15天、45天和90天从不同取样口取固体样品于4℃保存用于检测。
其中，检测项目包括检测浸出液中六价铬及其他重金属浓度变化、固体样 品中铬的形态结构变化、功能微生物群落结构和微生物总量变化、渗透率变化、 有机质变化及沉淀产物稳定性等。
结果分析
1、土柱中试上层结果与分析
土柱中试上层Cr6+浓度变化表
Bioremediation-1 Control-1
背景样 528.6 528.6
10天 463.05 477.18
20天 423.7 435.75
30天 399.11 348.11
根据柱子中试上层Cr6+浓度变化表和趋势图，如图6所示，可以看出经过30 天的试验，对照组和修复组分别降低了180.49和129.49，Cr6+浓度均呈下降趋势。 对照组下降幅度比修复组高，原因是每周补充培养基的同时，对照组添加的水 太容易对体系有一定的淋洗作用，造成游离态的铬迁移到体系下层；而修复组 补充的培养基存在有一定浓度的微生物对***淋滤的过程有一定的阻碍作用， 从而呈现修复组中上层铬离子因微生物的吸附和还原作用停留在上层的浓度略 高于对照组。
参照图7，随修复时间增长，体系上层游离态铬的去除率均有增长的趋势， 其中30天内对照组和修复组游离铬的去除率分别高达34.14％和24.49％，修复组 微生物浓度不断增加，对照组比修复组去除率更高的原因同上。
2、柱子中试中层结果与分析
柱子中试中层Cr6+浓度变化表
Bioremediation-2 Control-2
背景样 1057.2 1057.2
10天 952.64 977.31
20天 925.05 956.76
30天 803.47 950.95
根据柱子中试中层Cr6+浓度变化表和趋势图，如图8所示，可以看出经过30天 的试验，对照组和修复组分别降低了106.25和253.53，Cr6+浓度均呈下降趋势。 修复组Cr6+浓度下降幅度比对照组高。
对于中层***中，微生物修复效果与对照组相比较为显著，且微生物浓度也 随修复时间而增加。虽然中层***中仍然有溶液的淋滤作用造成对照组的游离 态铬浓度与初期比较略有下降(去除率增加，)但该过程中10、20和30天的样品 中对照组铬去除率变化较小，表明对照组中层的铬存在一个流动性平衡的状态； 而中层***中修复组因添加微生物对铬的去除随时间的增长而增加，30天游离 态铬的去除率达26.02％，该结果可能与中层的属于一个***的流动层，游离态 铬的浓度在微生物的耐受范围内，通过微生物的吸附和还原作用有效的限制了 中层游离态铬的迁移性，从而实现固化沉淀的效果。如图9所示。
3、柱子中试底层结果与分析
柱子中试底层Cr6+浓度变化表
Bioremediation-3 Control-3
背景样 2643 2643
10天 2381.60 2613.58
20天 2312.625 2563.96
30天 2008.68 2566.73
根据柱子中试底层Cr6+浓度变化表和趋势图，如图10所示，可以看出经过30 天的试验，对照组和修复组分别降低了76.27和634.32，Cr6+浓度均呈下降趋势。 对照组游离态铬浓度变化不大，修复组Cr6+浓度下降幅度比对照组高。
对于底层***属于游离态铬富集的一层，该层较能体现微生物的修复效果， 从检测结果可知，对照组游离态铬的去除率较低，几乎处于误差范围内，这一结 果与底层属于淋滤过程中游离态铬聚集有关。而修复组随时间变化游离态铬的 去除率逐渐增加，30天内底层游离态铬的去除率达18.29％，该结果远低于中层 ***中铬的去除率，同时微生物的浓度也低于中层***。该结果可能与底层游 离态铬浓度过高给微生物造成了一定的压力，该层微生物浓度降低这一结果说 明游离态铬浓度过高微生物的活性受到了限制，甚至可能因铬的毒害性造成微 生物大量的死亡。通过一个月的修复实验可知，从上层中层底层六价铬浓度变 化和去除率变化来看，微生物修复功能菌对铬有明显的固化作用和还原作用。微 生物活性整体呈现上升趋势，但随着气候变化，上升趋势逐渐变缓。
通过修复试验，修复组和对照组出现了明显的试验数据对比，通过图12分 析，游离态铬的去除率为：上层>中层>底层；分别是上层31.14％、中层26.02％、 底层18.29％。微生物活性为：上层>中层>底层，以上检测结果说明微生物修复 游离态铬存在不错的效果。
中试实验的结果与实验室研究的变化趋势一致，现场中试中微生物对可溶性 铬的去除与实验室结果相比还存在一定的偏差，造成这种现象的原因很多，例如 样品本身的理化性质、温度，需氧量，pH，微生物浓度，营养消耗等。
对照组的去除率来自淋洗作用造成游离态的铬迁移到体系下层；修复组的 去除率除了来自菌液淋洗过程的铬的迁移还存在微生物的固化作用。
以上已将本发明做一详细说明，以上所述，仅为本发明之较佳实施例而已， 当不能限定本发明实施范围，即凡依本申请范围所作均等变化与修饰，皆应仍 属本发明涵盖范围内。

Claims (5)

1.一种应用于无客土矿区的微生物修复方法，其特征在于：按以下步骤进行，
(1)在待修复地区进行土壤取样；
(2)微生物驯化和分离：
1)将渣样中土著混合菌按10％的接种量接种到含Cr(VI)浓度为100mg·L-1的富集培养基中，分别于好氧和厌氧条件下30℃培养7天；
2)7天后将所得菌液作为母液传接到含Cr(VI)浓度为200mg·L-1的NB培养基中，分别于好氧和厌氧条件下30℃培养7天，以此驯化过程定时检测培养液中Cr(VI)的还原率和细菌数量，直至培养基中Cr(VI)浓度使细菌无法生长；
3)以Cr(VI)的浓度变化梯度100mg·L-1，接种量为10％，置于恒温振荡箱中培养，调节其温度为30℃，转速为150rpm。
4)定时测定溶液中Cr(VI)的还原率及细菌数量，继续增加其能耐受的Cr(VI)浓度上限，连续驯化；
5)将驯化完成的细菌选择适合的稀释度，以涂板法于置于固态的富集培养基上，涂布均匀后倒置培养于30℃的培养箱中3天；
6)观察菌落形态，挑起平板上的单菌落四线三区划线培养；
(3)微生物扩培：挑起微生物单菌落接种到250mL培养基的三角瓶中，振荡7天，再转接入两个经过灭菌盛有含100mg·L-1Cr(VI)的NB培养基的250mL三角瓶中培养；富集培养完成后进行扩大培养到100L的塑料瓶中，培养7天后备用，直到微生物浓度达到107cfu/mL以上，准备添加到修复中试柱子中；
(4)修复：往土柱添加样品和菌液，菌液下层为SRB菌，上层为混合功能菌；样品添加完毕后，修复组的下层接种硫酸盐还原菌，上层接种好氧功能菌，对照组添加同样体积去离子水；接种完成后，关闭所有阀门待功能微生物生长7天后取样进行检测；
(5)检测。
2.根据权利要求1所述的应用于无客土矿区的微生物修复方法，其特征在于：NB培养基中各成分及浓度如下：Biometek1为10g·L-1，Biometek2为5g·L-1，Biometek3为5g·L-1，Cr(VI)为100mg·L-1，Biometek4为20g·L-1，蒸馏水300mL，pH为9，培养温度为20℃～35℃。
3.根据权利要求1所述的应用于无客土矿区的微生物修复方法，其特征在于：修复时先设计双重重复共4根土柱，均为柱长2m、直径30cm的PE材质塑料管，其中两组为修复组，另两组为对照组；修复样品经过1cm2孔径筛分，并配制均匀；修复组的每根土柱添加110kg样品和50L菌液，菌液下层为SRB菌，上层为混合功能菌；对照组添加110kg样品和50L水。
4.根据权利要求1所述的应用于无客土矿区的微生物修复方法，其特征在于：修复后的检测从不同取样口取样50mL用于检测，从接种微生物起分别在第15天、45天和90天从不同取样口取固体样品于4℃保存用于检测。
5.根据权利要求1所述的应用于无客土矿区的微生物修复方法，其特征在于：检测项目包括检测浸出液中六价铬及其他重金属浓度变化、固体样品中铬的形态结构变化、功能微生物群落结构和微生物总量变化、渗透率变化、有机质变化及沉淀产物稳定性。
CN202210116263.3A 2022-02-07 2022-02-07 应用于无客土矿区的微生物修复方法 Withdrawn CN114480243A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210116263.3A CN114480243A (zh) 2022-02-07 2022-02-07 应用于无客土矿区的微生物修复方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210116263.3A CN114480243A (zh) 2022-02-07 2022-02-07 应用于无客土矿区的微生物修复方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114480243A true CN114480243A (zh) 2022-05-13

Family

ID=81478858

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210116263.3A Withdrawn CN114480243A (zh) 2022-02-07 2022-02-07 应用于无客土矿区的微生物修复方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114480243A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114951245A (zh) * 2022-05-27 2022-08-30 广东桃林生态环境有限公司 一种防止重金属矿业废弃地地表水下渗的方法及其在治理重金属矿业废弃地中的应用
CN115156286A (zh) * 2022-07-01 2022-10-11 贵州师范大学 一种用于重金属低积累型生态修复植物/农作物高效筛选的方法

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114951245A (zh) * 2022-05-27 2022-08-30 广东桃林生态环境有限公司 一种防止重金属矿业废弃地地表水下渗的方法及其在治理重金属矿业废弃地中的应用
CN115156286A (zh) * 2022-07-01 2022-10-11 贵州师范大学 一种用于重金属低积累型生态修复植物/农作物高效筛选的方法
CN115156286B (zh) * 2022-07-01 2024-05-10 贵州师范大学 一种用于重金属低积累型生态修复植物/农作物高效筛选的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106754514B (zh) 一种可持续清淤除黑臭水体的微生物菌剂制备方法
CN101580808B (zh) 一株赤红球菌及其在降解烃类化合物中的应用
CN104874585A (zh) 一种含重金属的酸化金矿矿渣场综合治理方法
CN114480243A (zh) 应用于无客土矿区的微生物修复方法
CN103210714B (zh) 一种用于酸性煤矸石堆场薄层包衣覆盖生态修复方法
Qiu et al. Sulfate reduction and copper precipitation by a Citrobacter sp. isolated from a mining area
CN102021132A (zh) 一种石油污染土壤生物修复菌剂的筛选及修复方法
CN104226679B (zh) 一种采用微生物—植物联合修复煤制气厂污染土壤的方法
Li et al. Some aspects of industrial heap bioleaching technology: From basics to practice
Chen et al. Review of ecological restoration technology for mine tailings in China
Batal et al. Bacteriological tests from the constructed wetland of the Big Five Tunnel, Idaho Springs, Colorado
CN109894470A (zh) 一种矿山土壤生态修复方法
CN100427228C (zh) 一种重金属污染土壤的修复方法
Li et al. Impacts of sewage irrigation on soil properties of farmland in China: A review
CN104803721A (zh) 一种油基钻井废弃物的生物堆肥处理方法
CN104745506A (zh) 一株石油烃降解菌及其应用
Sierra-Alvarez et al. Biological treatment of heavy metals in acid mine drainage using sulfate reducing bioreactors
Zaghloul et al. Modern technologies in remediation of heavy metals in soils
Yang et al. Acid mine drainage remediation with simulated permeable reactive barrier filled with fly ash and its composite materials as reactive media
CN106040740A (zh) 一种利用改良剂和淹水共同作用降低土壤镉活性的方法
Dubey et al. A study of the effect of red mud amendments on the growth of cyanobacterial species
CN104496724A (zh) 用于锰矿污染土壤修复的有机菌肥及其制备方法
Kleinmann Acid mine water treatment using engineered wetlands
Fahruddin et al. Treatment of compost as a source of organic material for bacterial consortium in the removal of sulfate and heavy metal lead (Pb) from acid mine drainage
CN112547784A (zh) 一种高载磷微藻钝化剂修复重金属污染土壤的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20220513

WW01 Invention patent application withdrawn after publication