CN114478747B - 一种人胰岛素或其类似物的酰化衍生物 - Google Patents
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Abstract
一种人胰岛素或其类似物的酰化衍生物。具体而言,一种人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,该酰化衍生物相较于已有的胰岛素类似物及其酰化衍生物更加长效,且降血糖更加平稳,储存更加稳定。
Description
本申请是申请号为201780005001.7,申请日为2017年08月01日,发明名称为“一种人胰岛素或其类似物的酰化衍生物”的中国专利申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及一种人胰岛素类似物的酰化衍生物。
背景技术
糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是一种常见的代谢内分泌疾病,是由于体内胰岛素绝对或相对缺乏,或靶组织对胰岛素不敏感而引起的慢性高血糖为特征的伴随糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱的临床慢性、全身性代谢综合症。它由遗传和环境因素相互作用而引起,涉及人体各个***,包括心脑血管、肾、眼、神经等脏器并发症,严重危害人类健康,是一种终生疾病。
糖尿病已成为一种常见病、多发病,是继癌症、心脑血管病之后,第三大威胁人类生命的疾病,是全人类的挑战,其对人们生命健康的危害不分种族和国家。据国际糖尿病联盟(IDF)的统计,上个世纪八十年代中期至九十年代中期十年间,糖尿病患者总量增长4倍,达到1.2亿。2007年全球糖尿病患者人数为2.46亿,其中46%为40-59岁劳动力人口。预计到2025年全世界糖尿病患者将增加到3.8亿,占到世界成年人口的7.1%。
使用人胰岛素是治疗糖尿病的一种主要方法,但是人胰岛素作用时间较短,使得病人必须频繁注射,极为不便。因此,人们致力于获得一些能够更长时间作用于人体的胰岛素类似物及其衍生物。其中,使用酰化基团修饰人胰岛素或其类似物,是一种提高其半衰期的有效方法。WO2005012347和WO2013086927分别公开了两类不同的人胰岛素类似物的酰化衍生物,此类衍生物是通过将脂肪酸形式的酰化基团共价连接到人胰岛素类似物的氨基酸上,经过此种修饰后,它们的半衰期相对于现有的胰岛素类似物大大提高。然而,仍然需要提供半衰期更长的胰岛素类似物或其酰化衍生物,以提高治疗效果,并维持血糖平稳。并且现有的酰化胰岛素还存在不稳定的问题,也需要提供更为稳定的胰岛素类似物或其酰化衍生物。
另一方面,生理性胰岛素需求包括基础和餐时(速效),前者提供全天血糖控制,后者主要应对餐后血糖升高。根据其生理特点,理想的餐时胰岛素制剂能在进餐后迅速达峰发挥作用,并能在血糖降到正常水平时降至基础水平,以避免下餐前低血糖。理想的基础胰岛素则应有超长作用时间(在所有患者中持续>24h)、最小幅度胰岛素作用变异性(减少低血糖)和安全性,且能与速效胰岛素结合使用(便利性)。由于速效胰岛素降血糖作用十分迅速,这就要求当基础胰岛素与其合用时应当提供一种较为平缓的降血糖作用,以免二者共同作用时产生低血糖的风险。因此,提供一种具有足够长的作用时间,且初始作用时平缓降血糖的基础胰岛素具有十分迫切的需求。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的人胰岛素类似物的酰化衍生物,其降低血糖的效果更佳持久,且具有更高的稳定性。
本发明提供的一种人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,所述人胰岛素类似物的酰化衍生物具有如下通式如示的结构:
S-W-X-Y-Z
(I)
其中S为B链第30位苏氨酸缺失的人胰岛素;-W-X-Y-Z为胰岛素类似物的酰化修饰基团;
其中W为具有-OC(CH2)nCO-的二酰基结构,其中n为2~10之间整数,该结构以其酰基之一和母体胰岛素或其类似物的A-链或B-链N-末端氨基酸残基的α-氨基或B-链上存在的赖氨酸残基的ε-氨基形成酰胺键;
X为含羧酸基团的二氨基化合物,该化合物以其氨基之一与W中的一个酰基连接形成酰胺键;
Y为-A(CH2)m-,其中m为6-32的整数,优选10-16的整数,特别优选12-14的整数,A不存在或CO-;
Z为-COOH。
优选地,W与B-链上存在的赖氨酸残基的ε-氨基形成酰胺键。优选地,n为2~5之间的整数,优选2。
B链第30位苏氨酸缺失的人胰岛素,是一种人胰岛素类似物,其A、B链的氨基酸序列如下所示:
A链:GIVEQCCTSICSLYQLENYCN SEQ ID NO.1
B链:FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPK SEQ ID NO.2。
X代表的含羧酸基团的二氨基化合物可以为-HN(CH2)pCH(COOH)NH-,其中p为2-10的整数,优选2-6的整数,特别优选2-4的整数,最优选4。
在本发明特别优选的实施方式中,-W-X-Y-Z具有如下结构:
优选
本发明中特别优选的人胰岛素类似物的酰化衍生物可依习惯命名为Nα-(HOOC(CH2)14CO)-Nε-(OCCH2CH2CO-(NεB29-Des(B30)人胰岛素))-Lys-OH,其具有如下式(Ia)的具体结构,
更优选,赖氨酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-赖氨酸-Nε-氧代丁酰基))des(B30)人胰岛素,其具有式(Ib)所示的结构。
本发明还提供了一种制备前述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物的制备方法,其包括使式(III)化合物与B链第30位苏氨酸缺失的人胰岛素的步骤,
R-W-X-Y-Z
(III)
其中R为离去基团,优选活化酯基团,更优选选自
优选的式(III)化合物具体结构可为(IIIa)或(IIIb)所示,
所述的制备方法优选还包括式(III’)化合物脱除羧基保护基得到式(III)化合物的步骤,
其中,X’、Z’分别代表X、Z中所有的羧基被保护基保护的形式,所述的保护基优选C1-C6的烷基,优选C1-C4的烷基,特别优选甲基或特丁基;R如通式(III)中定义。
在本发明特别优选的实施方案中,人胰岛素类似物的酰化衍生物的锌复合物是一种人胰岛素类似物的酰化衍生物的6聚体,其中每个6聚体中包含多于4个锌原子,即6分子酰化胰岛素包含多于4个锌原子;更优选5至8个锌原子,特别优选5个锌原子。
本发明还提供了一种药物组合物,含前述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,还含有药学上可接受的载体。
本发明还提供了前述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物或其药物组合物在制备治疗糖尿病的药物中的用途。
本发明还提供一种药物组合物,除含有上述人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物外,还含有速效胰岛素。
本发明还涉及上述人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物、或含有它们的药物组合物在制备治疗糖尿病的药物中的用途。
本发明还涉及前述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物、或含有它们的药物组合物与速效胰岛素联合在制备治疗糖尿病的药物中的用途。
另外,本发明提供了一种治疗糖尿病的方法,所述方法包括对需要治疗的患者给予前述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物、或含有它们的药物组合物。
本发明提供的另一种治疗糖尿病的方法,所述方法包括对需要治疗的患者给予前述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物、或含有它们的药物组合物和速效胰岛素。本发明还涉及前述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物、或含有它们的药物组合物作为治疗糖尿病的药物。
本发明还涉及前述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物、或含有它们的药物组合物联合速效胰岛素作为治疗糖尿病的药物。
本发明中的糖尿病包括I型糖尿病和II型糖尿病。
附图说明
图1显示STZ大鼠给药后血糖值变化曲线(*P<0.05,**P<0.01vs模型对照组;#P<0.05vs德谷胰岛素)
图2显示0~6小时内STZ大鼠给药后血糖值变化曲线
图3显示给药后0~2、0~4和0~6小时内血糖AUC的比较(*P<0.05,**P<0.01 vsINS-C)
具体实施方式
以下结合实施例进一步描述解释本发明。
实施例1:
赖氨酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-赖氨酸-Nε-氧代丁酰基))des(B30)人胰岛素的制备
1、Nα-(十六烷脂肪二酸)-Nε-(3-酰基丙酸-OSu)赖氨酸的制备
取X01(150g,524.5mmol),室温下加入干燥的THF(2.5L),随后加入催化量的DMF(1.0mL),将草酰氯(49mL)加入到100mL的恒压滴液漏斗中,将草酰氯缓慢滴加到反应瓶中,期间有气体生成,需不断放气,约滴加两小时。滴加完毕后,室温搅拌1.5h,随后减压旋干THF,向反应瓶中加入DCM(800mL)和叔丁醇(500mL),室温下搅拌过夜。旋干叔丁醇和二氯甲烷,加入二氯甲烷(1L),过滤,除去不溶固体。滤液旋干过柱。收集所需成分,旋干,石油醚重结晶,得54g产品X02,同时回收二叔丁酯产物X03。
将X02(28.5g,83.3mmol)溶于DCM(200mL)中,室温下加入N-羟基丁二酰亚胺(5.54g,48.1mmol)和二异丙基碳二酰亚胺(7.6mL),室温搅拌1天,TLC显示基本反应完全。过滤,除去不溶固体,减压旋干溶剂,柱层析纯化,得28.5g X04。
将X04(22g,50.1mmol)溶于干燥的THF(250mL)中,室温搅拌,赖氨酸衍生物(20.5g,55mmol)和三乙胺(21mL)分别加入到反应体系中,室温搅拌24h。硅藻土过滤,THF洗涤三次,旋干溶剂,柱层析纯化,得31g产物X11。
将X11(30.6g,46.3mmol)溶于无水乙醇(200mL)中,室温搅拌,加入6.0g10%Pd/C,随后通入氢气,室温剧烈搅拌反应过夜。硅藻土抽滤,无水乙醇洗涤三次,滤液旋干,得24.5g X12粗品,直接用于下一步反应。
将X12(24g,45.6mmol)溶于干燥THF(200mL)中,加入三乙胺(12.7mL),随后降温至0℃。将丁二酸酐(5.2g,52mmol)分批加入到反应体系中,0℃下继续搅拌30min,随后转移至室温搅拌过夜。减压旋干THF,剩余物溶于二氯甲烷(500mL)中,用5%柠檬酸水溶液(500mL*2)洗涤2次,饱和食盐水洗涤1次,无水硫酸钠干燥。减压旋干溶剂,得29.0g X13粗品,直接用于下一步反应。
将X13(28.5g,45.5mmol)溶于DCM(200mL)中,室温下加入N-羟基丁二酰亚胺(5.54g,48.2mmol)和二异丙基碳二酰亚胺(7.6mL),室温搅拌1天,TLC显示基本反应完全。过滤,除去不溶固体,减压旋干溶剂,柱层析纯化,得28.5g产品X14。
将X14(3.0g,4.1mmol)溶于三氟乙酸(15mL)中,室温搅拌45min,随后低温减压旋干三氟乙酸,加入无水***,有固体析出,过滤,滤饼用无水***洗涤三次,固体干燥后,得1.8g产品X15。
2、赖氨酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-赖氨酸-Nε-氧代丁酰基))des(B30)人胰岛素的制备
取B链第30位苏氨酸缺失的人胰岛素53mg(8mg/mL,50mM Tris HCl pH8.5缓冲液),用1.5M Na2CO3调节pH至约10.75,后用缓冲液(50mM Tris HCl pH8.5缓冲液)定容至4mg/mL。将Nα-(十六烷脂肪二酸)-Nε-(3-酰基丙酸-OSu)赖氨酸(18mg)悬浮于7mL乙腈后,每隔15min将1.75mL本溶液加入到上述B链第30位苏氨酸缺失的人胰岛素溶液中开始反应,分4次加完,同时搅拌。加完后开始计时,反应1h后,用乙酸将溶液pH调节至约7.5,终止反应,获得粗品溶液。采用RP-HPLC对反应过程进行中控。
3、赖氨酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-赖氨酸-Nε-氧代丁酰基))des(B30)人胰岛素的纯化
将上述前体粗品溶液加入水稀释使有机相含量约15%(v:v),用0.45μm滤膜过滤后采用RP-HPLC对其进行纯化得纯化液。
4、赖氨酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-赖氨酸-Nε-氧代丁酰基))des(B30)人胰岛素的超滤及冻干
将上述纯化溶液用超滤膜包***将样品置换至注射用水中,进行冻干获得冻干产物26mg。所得分子结构式如下。
5、赖氨酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-赖氨酸-Nε-氧代丁酰基))des(B30)人胰岛素结构确证
赖氨酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-赖氨酸-Nε-氧代丁酰基))des(B30)人胰岛素实测质谱分子量为6203.37Da,与理论分子量6203.21Da一致。
用V8蛋白酶对INS进行酶解,并对酶解产物进行LC-MS分析,结果显示共产生4个肽段,肽段分子量分别为416.23Da(A1-A4)、2968.29Da(A5-A17,B1-B13)、1376.57Da(A18-A21,B14-B21)和1510.84Da(B22-B29),与理论肽段分子量相符,其中肽段B22-B29为脂肪酸链修饰的肽段。证明修饰位点和预期一致。
实施例2:考察受试药物在STZ诱导的I型糖尿病模型上的降血糖作用
1、供试品
其中,INS-1和INS-2分别代表将赖氨酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-赖氨酸-Nε-氧代丁酰基))des(B30)人胰岛素制备成每个胰岛素衍生物六聚体包含5个Zn和8个Zn的两种不同复合物,其配制方法为本领域常规方法,德谷胰岛素中每六聚体包含5个Zn。
2、供试品配制
供试品避光保存在4℃条件下,取适量受试样品母液600nmol/mL,用溶媒稀释400倍至1.5nmol/mL,剂量为7.5nmol/kg。使用时药物恢复至室温。
3、实验动物
4、实验方法
SPF级大鼠实验室环境饲养7天,均以标准饲料、标准笼喂养,温度20-25℃,湿度40-60%。造模前一天,大鼠禁食16小时,腹腔快速注射STZ(65mg/kg),1小时后,恢复给食。造模后每日给予充足饮水(提供正常的2-3倍的饮水量)、食物,每日换垫料1-2次,保持干燥。在第五天测量空腹血糖(禁食6小时),挑出血糖值>16.7mmol/L的大鼠。根据血糖水平,将其分为4组。
动物分组及给药信息如下:
给药前不禁食,单次皮下注射各药物,对照组用溶媒注射相同体积,给药后全程禁食。给药后1、2、4、6、8、10、12、24小时测定大鼠血糖值。24小时点测完血糖值后,采血制备血清。
所有的数据被录入到Excel文档中,并以Mean±SEM的方式表示。数据统计分析使用Graphpad Prism 6.0软件,单因素或双因素方差分析比较方法,以P<0.05作为显著性差异的判断标准。
5、结果:
SD大鼠注射STZ后第五天,禁食6小时,进行血糖测试,造模成功率达80%。
由图1可见,STZ溶媒组基础血糖值给药前为27.3mmol/L,给药后其血糖值逐步降低,24小时后达到15.1mmol/L,血糖变化值为12.1mmol/L。阳性药德谷胰岛素组给药前后血糖值变化为16.8mmol/L。阳性药物德谷胰岛素组给药后6、8、10、12和24小时时间点,其血糖水平与溶媒阴性对照组比较都具有显著性差异,表明该动物模型及实验方法的有效性。
与溶媒阴性对照组比较,受试药物INS-1和INS-2在给药后24小时内均能显著降低动物的血糖水平,在6、8、10、12和24小时时间点都具有显著性差异,并且血糖水平持续下降,表明其具有良好的长效降糖作用。
试药物INS-1和INS-2对于STZ大鼠,其血糖值随给药后时间的变化曲线基本一致,表明两者的降糖效果类似。在24小时时间点,INS-1和INS-2的降糖效果优于德谷胰岛素组,表明INS-1和INS-2具有更好的长效作用。
实施例3:考察各种长效胰岛素在STZ诱导的I型糖尿病模型上的降血糖作用
1、供试品
其中INS-A代表WO2013086927中的HS061、INS-B代表WO2013086927中的HS067、INS-C代表赖氨酸B29(Nε-(Nα-十六烷脂肪二酸-L-赖氨酸-Nε-氧代丁酰基))des(B30)人胰岛素,所有供试品均使用相同的处方,且使用锌复合物形式,每个胰岛素六聚体包含5个Zn。
2、供试品配制
供试品避光保存在4℃条件下,取适量受试样品母液600nmol/mL,用溶媒稀释80倍至7.5nmol/mL,剂量为7.5nmol/kg。使用时药物恢复至室温。
3、实验动物
4、实验方法
SPF级大鼠实验室环境饲养7天,均以标准饲料、标准笼喂养,温度20-25℃,湿度40-60%。造模前一天,大鼠禁食16小时,腹腔快速注射STZ(65mg/kg),1小时后,恢复给食。造模后每日给予充足饮水(提供正常的2-3倍的饮水量)、食物,每日换垫料1-2次,保持干燥。在第五天测量空腹血糖(禁食6小时),挑出血糖值>16.7mmol/L的大鼠。根据血糖水平随机分为5组。
动物分组及给药信息如下:
给药前不禁食,单次皮下注射各药物,对照组用溶媒注射相同体积,给药后全程禁食。给药后1、2、4、6、8、10、12、24小时测定大鼠血糖值。
所有的数据被录入到Excel文档中,并以Mean±SEM的方式表示。数据统计分析使用SPSS软件,单因素或双因素方差分析比较方法,以P<0.05作为显著性差异的判断标准。
5、结果
STZ溶媒组基础血糖值给药前为27.01mmol/L,给药后其血糖值逐步降低,24小时后达到11.64mmol/L,血糖变化值为15.37mmol/L。阳性药德谷胰岛素组给药前后血糖值变化为19.78mmol/L。阳性药物德谷胰岛素组给药后1、2、4、6、8、10和12小时时间点,其血糖水平与溶媒阴性对照组比较都具有显著性差异,表明该动物模型及实验方法的有效性。
与溶媒阴性对照组比较,受试药物INS-A、INS-B和INS-C在给药后24小时内均能显著降低动物的血糖水平,从血糖值来看,受试药物的血糖值(分别为7.03±1.15、3.57±0.44及4.20±0.72mmol/L)低于溶媒阴性对照组(11.64±3.94mmol/L)。这表明三者均具有较良好的长效降糖作用。重点比较了各组在0~6小时内降低血糖的差异性,具体数值如表1和表2所示:
表1单次给药对STZ诱导的I型糖尿病大鼠血糖的影响(Mean±SEM,n=8)
注:*P<0.05,**P<0.01vs空白溶媒组;$P<0.05,$$P<0.01 vs INS-C。
表2单次给药后0~2、0~4及0~6小时内的血糖AUC值(Mean±SEM,n=8)
注:$P<0.05,$$P<0.01 vs INS-C。
INS-C和德谷胰岛素对于STZ大鼠,给药后INS-C组血糖值下降幅度小于德谷胰岛素,且在给药1小时后显著高于德谷胰岛素组(见图2和表1)。具体数值如表1所示。另由图3和表2可见,INS-C在给药后0~2、0~4和0~6小时内血糖-时间曲线下面积(AUC)均显著高于德谷胰岛素。这表明,若与速效胰岛素联合给药或组成复方制剂给药,INS-C+速效胰岛素在给药后0~6小时内(速效胰岛素发挥降血糖作用的时间段)发生低血糖的风险明显低于德谷胰岛素+速效胰岛素。
INS-C和INS-A对于STZ大鼠,给药后INS-C组血糖值下降幅度小于INS-A,且在给药1、2和4小时后显著高于INS-A组;而在给药10和12小时后则显著低于INS-A组,给药24小时后血糖值也有低于INS-A组的趋势。表明INS-C降血糖速度慢于INS-A,且长效作用也优于INS-A,更符合长效胰岛素的作用特点。此外,由图3可见,INS-C在给药后0~2、0~4和0~6小时内血糖AUC均显著高于INS-A。这表明,若与速效胰岛素联合给药或组成复方制剂给药,INS-C+速效胰岛素在给药后0~6小时内发生低血糖的风险明显低于INS-A+速效胰岛素。
INS-C和INS-B对于STZ大鼠,给药后INS-C组血糖值下降幅度小于INS-B,且在给药1和2小时后显著高于INS-B组,表明INS-C降血糖速度慢于INS-B。此外,由图3可见,INS-C在给药后0~2、0~4和0~6小时内血糖AUC均显著高于INS-B。这表明,若与速效胰岛素联合给药或组成复方制剂给药,INS-C+速效胰岛素在给药后0~6小时内发生低血糖的风险明显低于INS-B+速效胰岛素。
综合24小时和0~6小时内降血糖的效果,INS-C有降糖作用持久且初期降糖平缓的特点,是最为理想的长效胰岛素,特别适合于与速效胰岛素联合或组成复方,从而减少注射次数,提高患者的依从性。
实施例4:犬PK试验(INS-B和INS-C与实施例3中具有相同的含义)
6只雄性比格犬(每组3只)单次皮下注射INS-B或INS-C(3nmol/kg)后,不同时间点采血并分离血清,检测血清中INS-B或INS-C的浓度。结果显示,INS-B在4.7±1.2小时(3只动物分别为4、4和6小时)内达峰,而INS-C则为8小时(三只动物均为8小时)达峰。INS-B和INS-C的半衰期分别为6.0±1.2和7.8±1.1小时。这提示INS-C作用更为平缓且作用时间更长。
实施例5:稳定性比较
INS-A、INS-B、INS-C(各种代号与实施例3含义相同)、德谷胰岛素均按照德谷胰岛素上市处方制备成制剂,然后考察它们的稳定性,使用HPLC测定起始和各时间点主峰纯度以及杂质含量,具体结果如表3所示。从表3可以看出,INS-C的稳定性明显优于INS-A和INS-B;略优于德谷胰岛素。
表3稳定性数据比较
注:由于7天时INS-A和INS-B杂质增长已经过快,所以后续未再测14天数据。
序列表
<110> 江苏恒瑞医药股份有限公司
<120> 一种人胰岛素或其类似物的酰化衍生物
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<151> 2016-08-31
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 21
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 1
Gly Ile Val Glu Gln Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gln Leu
1 5 10 15
Glu Asn Tyr Cys Asn
20
<210> 2
<211> 29
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (29)..(29)
<223> 修饰的人胰岛素类似物B链
<400> 2
Phe Val Asn Gln His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr
1 5 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Lys
20 25
Claims (20)
1.一种人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,所述人胰岛素类似物的酰化衍生物具有如下通式如示的结构:
S-W-X-Y-Z
(I)
其中S为B链第30位苏氨酸缺失的人胰岛素;-W-X-Y-Z为胰岛素类似物的酰化修饰基团;
其中W为具有-OC(CH2)nCO-的二酰基结构,其中n为2~5之间整数,该结构以其酰基之一和母体胰岛素或其类似物的B-链上存在的赖氨酸残基的ε-氨基形成酰胺键;
X为-HN(CH2)pCH(COOH)NH-,p为2-10的整数,该化合物以其氨基之一与W中的一个酰基连接形成酰胺键;
Y为-A(CH2)m-,其中m为6-32的整数,A为CO-;
Z为-COOH。
2.根据权利要求1所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,其中m为10-16的整数。
3.根据权利要求1所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,其中m为12-14的整数。
4.根据权利要求1所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,其中n为2。
5.根据权利要求1所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,其中p为2-6的整数。
6.根据权利要求1所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,其中p为2-4的整数。
7.根据权利要求1所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,其中p为4。
8.根据权利要求1所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物,其中-W-X-Y-Z具有如下结构:
或者
9.Nα-(HOOC(CH2)14CO)-Nε-(OCCH2CH2CO-(NεB29-Des(B30)人胰岛素))-Lys-OH或其锌复合物。
10.一种权利要求1至8任意一项所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物的制备方法,其包括使式(III)化合物与B链第30位苏氨酸缺失的人胰岛素反应的步骤,
R-W-X-Y-Z
(III)
其中R为离去基团。
11.根据权利要求10所述的方法,其中R为活化酯基团。
12.根据权利要求10所述的方法,其中R选自
13.根据权利要求10所述的方法,还包括式(III’)化合物脱除羧基保护基得到式(III)化合物的步骤,
其中,X’、Z’分别代表X、Z中所有的羧基被保护基保护的形式,所述的保护基为C1-C6的烷基;R如权利要求10中定义。
14.根据权利要求13所述的方法,其中所述的保护基为C1-C4的烷基。
15.根据权利要求13所述的方法,其中所述的保护基为甲基或特丁基。
16.根据权利要求1至9任意一项所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物的锌复合物,其中每6分子酰化胰岛素包含多于4个锌原子。
17.一种药物组合物,含有权利要求1至9任意一项所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物或权利要求16所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物的锌复合物,还含有药学上可接受的载体。
18.根据权利要求17所述的药物组合物,还含有速效胰岛素。
19.权利要求1至9任意一项所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物、权利要求16所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物的锌复合物、或权利要求17或18所述的药物组合物在制备治疗糖尿病的药物中的用途。
20.权利要求1至9任意一项所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物或其锌复合物、权利要求16所述的人胰岛素类似物的酰化衍生物的锌复合物、或权利要求17所述的药物组合物与速效胰岛素联合在制备治疗糖尿病的药物中的用途。
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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GR01 | Patent grant | ||
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