CN114380817A - 苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑化合物及其制法和药物用途 - Google Patents

苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑化合物及其制法和药物用途 Download PDF

Info

Publication number
CN114380817A
CN114380817A CN202011130885.9A CN202011130885A CN114380817A CN 114380817 A CN114380817 A CN 114380817A CN 202011130885 A CN202011130885 A CN 202011130885A CN 114380817 A CN114380817 A CN 114380817A
Authority
CN
China
Prior art keywords
substituted
unsubstituted
benzimidazolyl
thiadiazol
cyclopropyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202011130885.9A
Other languages
English (en)
Inventor
李莉
陈晓光
刘文强
金晶
季鸣
杜婷婷
张倩倩
杨蓓蓓
伏蓉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Materia Medica of CAMS
Original Assignee
Institute of Materia Medica of CAMS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Materia Medica of CAMS filed Critical Institute of Materia Medica of CAMS
Priority to CN202011130885.9A priority Critical patent/CN114380817A/zh
Publication of CN114380817A publication Critical patent/CN114380817A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Abstract

本发明属于药物化学领域。涉及式I所示的苯并咪唑并2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑化合物及其制法和药物用途，其可药用盐，含有一个或多个这个化合物的组合物，和该类化合物作为STAT3信号通路抑制剂在***疾病方面的用途。

Description

苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑化合物及其制法和药物 用途
技术领域
本发明涉及抑制人类肿瘤细胞以及肿瘤免疫治疗的化合物，本发明还涉及所述化合物的合成和该化合物作为有效候选药物，以用于临床治疗癌症的病人。更具体而言，本发明涉及某些抑制STAT3高表达的肿瘤细胞的苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑衍生物，及其在制备预防、缓解和/或治疗乳腺癌、***癌、卵巢癌、肝癌、胃癌、肺癌、结肠癌、食管癌、白血病、人脑胶质瘤、淋巴瘤等癌症的药物中的应用，属于药物化学领域。
背景技术
癌症仍是当今世界危及人类生命健康的最常见、最严重的疾病之一。据统计，癌症在发展中国家已成为第一大致死性疾病，在发达国家已成为继新血管疾病之后的第二大致死性疾病。据统计，2018年全球新增癌症患者约有1819万人，癌症死亡病例约960万，呈逐年增长趋势(CA.Cancer.J.Clin.,2018，68(6),394-424)。
信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator oftranscription protein 3，STAT3)是STATs家族的重要成员，在细胞内的信号传递起着重要的作用。STAT3蛋白广泛存在于各类细胞和组织中，能够被多种细胞因子激活。在正常细胞中，STAT3能够被短暂地激活(Cancers,2014,6(2),926-957)；但在乳腺癌、***癌、卵巢癌、白血病和淋巴瘤等肿瘤细胞中，STAT3被持续激活并大量表达(Clin.Cancer Res.,2002,8(4),945-954)。
STAT3介导的肿瘤发生和发展主要是通过上调抗凋亡基因和细胞增殖基因，如Bcl-XL、生存素、细胞周期蛋白D1等，进而导致肿瘤细胞的存活率增加(J.Biol.Chem.,2003,278(5),2990-2996)。STAT3的过度活化与一系列肿瘤发生发展有关，包括肿瘤细胞侵袭、转移、血管增生以及免疫逃避。
STAT3蛋白通过其705位磷酸化的酪氨酸(p-Y705)与另一STAT3蛋白的SH2结构域形成同源二聚体来发挥转录活化的功能。靶向STAT3 SH2结构域的小分子抑制剂能够通过干扰STAT3蛋白二聚化的结合位点，抑制STAT3的二聚以及STAT3二聚体-DNA复合物的形成，从而达到抑制STAT3功能的作用。与作用于STAT3细胞通路的激酶类抑制相比，靶向STAT3蛋白SH2结构域的抑制剂具有选择性高、作用靶点明确的优点，在癌症治疗中具有重要意义(Eur.J.Med.Chem.,2019,111922)。
发明内容
本专利的设计思路就是将抗肿瘤活性明确但溶解性较差、毒性较大的缩氨硫脲药效团电子等排为2-氨基-1,3,4-噻二唑片段，通过药物化学的拼合原理整合到优势结构小分子杂环苯并咪唑中，以发现新型的高效、低毒的、理化性质适宜的抗肿瘤化合物。
本发明的苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物通式I及其衍生物为新化合物，没有在预防和治疗癌症及其并发症的应用和相关报道。
本发明的一个方面是具有下述结构(通式I)的化合物及其合成过程中所涉及的各种中间体和副产物，其光学异构体、药物可接受的盐、或溶剂合物：
Figure BDA0002735106960000021
式中：
R1是卤素、直链或支链C1-6烷氧基、取代或未取代的C6-12苯氧基、取代或未取代的哌嗪基或取代或未取代的哌啶基，其中，所述取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括直链或支链C1-6烷基、C1-6烷氧基、胺基、卤素、羧基、C1-6的酰氧基、羟基；
R2是氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基取代C1-6烷基、取代或未取代的C3-6环烷基取代的C1-6烷基和取代或未取代的C3-6环烷基，其中，所述取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-6烷基、C1-6烷氧基、胺基；
R3是氢、C1-6烷基、取代和未取代C6-12芳基、取代和未取代的C3-12杂芳基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-6烷基、C1-6烷氧基、胺基、卤素、氰基、C6-12苯氧基、三氟甲基、羧基、C1-6的酰氧基、羟基、C1-6的酰胺基、甲砜基；
R4是氢、C1-6烷基、取代和未取代的C6-12芳基、取代和未取代的C3-12杂芳基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-6烷基、C1-6烷氧基、胺基、卤素、氰基、C6-12苯氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、C1-6的酰氧基、羟基、C1-6的酰胺基。
优选的
R1是氟、氯、溴、直链或支链C1-4烷氧基、取代和未取代的C6-10苯氧基、取代或未取代的哌嗪基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括直链或支链C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、羧基、C1-4的酰氧基、羟基；
R2是氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基取代C1-4烷基、取代或未取代的C3-6环烷基取代的C1-4烷基和C3-6环烷基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基；
R3是氢、C1-4烷基、取代和未取代C6-10芳基、取代和未取代的C3-10杂芳基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、C6-10苯氧基、三氟甲基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基、甲砜基；
R4是氢、C1-4烷基、取代和未取代的C6-10芳基、取代和未取代的C3-10杂芳基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、C6-10苯氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基。
更优选的
R1是氟、氯、溴、直链或支链C1-4烷氧基、取代和未取代的苯氧基、取代和未取代的萘氧基、取代或未取代的哌嗪基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括直链或支链C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、羧基、C1-4的酰氧基、羟基；
R2是氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基取代C1-4烷基、取代或未取代的C3-6环烷基取代的C1-4烷基和C3-6环烷基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基；
R3是氢、C1-4烷基、取代和未取代苯基、取代和未取代萘基、取代和未取代的呋喃基、取代和未取代的噻吩基、取代和未取代的吡咯基、取代和未取代的噁唑基，取代和未取代的噻唑基、取代和未取代的咪唑基、取代和未取代的吡啶基、取代和未取代的嘧啶基、取代和未取代的吡嗪基、取代和未取代的哒嗪基、取代和未取代的苯并咪唑基、取代和未取代的苯并噁唑基、取代和未取代的苯并噻唑基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、苯氧基、萘氧基、三氟甲基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基、甲砜基；
R4是氢、C1-4烷基、取代和未取代苯基、取代和未取代萘基、取代和未取代的呋喃基、取代和未取代的噻吩基、取代和未取代的吡咯基、取代和未取代的噁唑基，取代和未取代的噻唑基、取代和未取代的咪唑基、取代和未取代的吡啶基、取代和未取代的嘧啶基、取代和未取代的吡嗪基、取代和未取代的哒嗪基、取代和未取代的苯并咪唑基、取代和未取代的苯并噁唑基、取代和未取代的苯并噻唑基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、苯氧基、萘氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基。
最优选的
R1是氟、氯、溴、直链或支链C1-4烷氧基、取代和未取代的苯氧基、取代和未取代的萘氧基、取代或未取代的哌嗪基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括直链或支链C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、羧基、C1-4的酰氧基、羟基；
R2是氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基取代C1-4烷基、取代或未取代的C3-6环烷基取代的C1-4烷基和C3-6环烷基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基；
R3是氢、C1-4烷基、取代和未取代苯基、取代和未取代的呋喃基、取代和未取代的噻吩基、取代和未取代的吡咯基、取代和未取代的噁唑基、取代和未取代的噻唑基、取代和未取代的咪唑基、取代和未取代的吡啶基、取代和未取代的嘧啶基、取代和未取代的苯并咪唑基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、苯氧基、三氟甲基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基、甲砜基；
R4是氢、C1-4烷基、取代和未取代苯基、取代和未取代的呋喃基、取代和未取代的噻吩基、取代和未取代的吡咯基、取代和未取代的噁唑基、取代和未取代的噻唑基、取代和未取代的咪唑基、取代和未取代的吡啶基、取代和未取代的嘧啶基、取代和未取代的苯并咪唑基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、苯氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基。
另外，本发明还涉及含有药学有效量的通式Ⅰ化合物或其立体异构体、药学上可接受的盐用于制备预防或***相关疾病和用于制备预防或***相关疾病的药物的应用。
最优选的化合物，包括但不限定于
化合物1：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000051
化合物2：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000052
化合物3：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000053
化合物4：N-(1-环戊基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000061
化合物5：N-(1-丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000062
化合物6：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000063
化合物7：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000064
化合物8：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000071
化合物9：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000072
化合物10：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-异丙基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000073
化合物11：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000074
化合物12：N-(2-(1,3-苯并间二氧杂环戊烯基)-6-氟-5-苯并咪唑)-5-(2-呋喃基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000075
化合物13：N-(1-(环丙基甲基)-6-氟-2-(2-吡咯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-吡啶基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000081
化合物14：N-(6-氟-2-(2-呋喃基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000082
化合物15：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-乙酰氨基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000083
化合物16：N-(6-氟-2-(2-呋喃基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-乙酰氨基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000084
化合物17：N-(1-(3-乙氧基丙基)-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基))-5-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000091
化合物18：N-(1-(叔丁基)-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000092
化合物19：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000093
化合物20：N-(1-环丁基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000094
化合物21：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000101
化合物22：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3，5-二氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000102
化合物23：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-氟5-甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000103
化合物24：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000104
化合物25：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,5-二三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000111
化合物26：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-叔丁基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000112
化合物27：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000113
化合物28：N-(1-环丙基-6-对氟苯氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000114
化合物29：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-甲砜基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000121
化合物30：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-甲酸甲酯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000122
化合物31：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000123
化合物32：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000124
化合物33：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000125
化合物34：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000131
化合物35：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000132
化合物36：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,5二叔丁基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000133
化合物37：N-(1-环丙基-6-N-甲基哌嗪基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000134
化合物38：N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氰基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000135
化合物39：5-甲基-N-(6-甲氧基-2-(2-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000141
化合物40：N-(6-甲氧基-2-(2-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000142
化合物41：5-甲基-N-(6-吗啉基-1-丙基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000143
化合物42：N-(6-吗啉基-1-丙基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000144
化合物43：N-(1-环丙基-2-(2-呋喃基)-6-甲氧基-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000151
化合物44：N-(1-环丙基-2-(3-氟苯基)-6-甲氧基-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000152
化合物45：N-(1-环丙基-2-(3-氟苯基)-6-(4-甲基哌嗪基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000153
化合物46：N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000154
化合物47：N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3，5-二氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000161
化合物48：N-(1-环丙基-6-(4-氟苯氧基)-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000162
化合物49：N-(1-环丙基-6-吗啉基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000163
化合物50：N-(1-环丙基-6-吗啉基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-(3-三氟甲基苯氧基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000164
化合物51：N-(1-环丙基-6-N-甲基-N-环己基胺基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000171
化合物52：N-(1-环丙基-6-N-甲基-N-环己基胺基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure BDA0002735106960000172
另一方面，本发明还涉及通式I结构的化合物完整的制备路线和制备方法：
Figure BDA0002735106960000173
上式中R1-R4定义同上。
以下详述本发明的合成方法。
上述反应中，式(II)可以商品购得，或参照文献制得。由化合物式(II)按照文献(J.Comb.Chem.2004,6,811-821)经过单取代(a)、或双取代(b)、还原(c)、关环(d)，可以得到化合物式(V)即多取代的5-氨基苯并咪唑衍生物。
第五步反应(e)采用的试剂是硫光气、三乙胺，与化合物式(V)的摩尔比分别是1:2～5,优选为1:2.2，溶剂为二氯甲烷等非质子性溶剂，温度为0℃～r.t.，反应时间为0.5～3小时，优选为1小时。第五步反应(f),随后向反应液中加入水合肼。与化合物式(V)的摩尔比分别是1:1～3，优选为1:2；温度为40℃～80℃，优选为60℃；反应时间为1～24小时,优选为3小时,得到化合物式(VI)。
第七步反应(g)采用的试剂为具有相应R4取代基的醛，如呋喃甲醛、吡啶甲醛、2-氟苯甲醛、3,4,5-三甲氧基苯甲醛、4-乙酰氨基苯甲醛、3-氟苯甲醛、3-三氟甲基苯甲醛等，溶剂为乙醇等质子性溶剂，催化剂为5％～8％的CH3COOH,温度为r.t.～80℃，优选为80℃；反应时间为1～24小时，优选为1小时。第八步反应(h)，采用的试剂为FeCl3,与化合物式(VI)的摩尔比分别是1:2～10，优选为1:2.5；温度为40℃～100℃，优选为80℃；反应时间为4～24小时，优选为5小时，得到化合物式(I)。
以上反应因为条件比较温和，反应时间较短，收率稳定，通用性较强，因此有利于采用例如组合化学方法进行化合物库的合成，这种采用组合化学方法合成化合物库的方法也属于本发明的范围。
本领域技术人员可对上述步骤进行变动以提高收率，他们可据本领域的基本知识确定合成的路线，如选择反应物，溶剂和温度。这样的改动或变动均在本发明的范围内。还可以通过使用各种常规保护基以避免副反应的发生从而提高收率。这些常规的保护方法可参见例如Protecting Groups in Organic Synthesis(T.Greene，the Fourth Edition,John Wiley&Sons,Inc.)。
涉及所述化合物通式在制备预防、缓解和/或治疗癌症、炎症、自身免疫性疾病引发的症状的药物中的应用，只要这些苯并咪唑类化合物及其衍生物应用于癌症及其并发症，均属于本发明的化合物保护范围。
所述的癌症尤其是指乳腺癌、***癌、卵巢癌、肝癌、胃癌、肺癌、结肠癌、食管癌、白血病、人脑胶质瘤、淋巴瘤。
本发明中，所述预防、缓解和/或治疗癌症或症状选自抑制STAT3的活性，抑制与STAT3相关的基因表达，抑制乳腺癌、***癌、卵巢癌、肝癌、胃癌、肺癌、结肠癌、食管癌、白血病、人脑胶质瘤和淋巴瘤的增殖、转移的药物作用。
本发明式通过如下技术方案实现：通过人工合成制备获得一系列苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物及其衍生物；利用HEK-BLUE-IL-6细胞模型评价苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物对IL-6-STAT3通路的抑制活性；通过圆二色谱实验评价苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物与STAT3蛋白的相互作用；通过荧光偏振实验进一步评价苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物与STAT3蛋白SH2结构域的靶向性结合活性；通过Western Blot实验评价苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物对STAT3的选择性抑制活性；通过MTT实验评价苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物对肿瘤细胞的抑制活性；通过体内抗肿瘤药效学实验评价苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物在人***癌DU145裸鼠皮下移植瘤模型上的体内抗肿瘤药效。
本发明的苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物通式I在制成任何一种剂型时，均有预防、缓解和/或治疗癌症的药物作用。任何药剂，如果其组分中含有苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物通式I或者仅以苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物通式I单独成分制备成药，在其包装或说明书等标识上或者其他任何宣传品上只要著名或提示具有治疗癌症及其并发症的作用，也属于本发明的保护范围之内。
有益技术效果：
苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物通式I为单体新化合物，具有毒性低、抗肿瘤活性高、制备工艺简单等优点。
具有很好的应用与开发前景，是一种理想的预防和治疗癌症疾病及其并发症的新化合物，可应用于药品的制备。
苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑类化合物具有抑制STAT3蛋白磷酸化活性的作用，具有抑制与STAT3相关的基因表达的作用，具有抑制和杀伤乳腺癌、***癌、卵巢癌、肝癌、胃癌、肺癌、结肠癌和食管癌、白血病、人脑胶质瘤和淋巴瘤的增殖的作用，具有抑制裸鼠异种移植DU145细胞肿瘤体内活性的作用，是一类治疗乳腺癌、***癌、卵巢癌、肝癌、胃癌、肺癌、结肠癌和食管癌白血病、人脑胶质瘤和淋巴瘤方面极有药用价值的新化合物，具有很好的应用与开发前景。
附图说明
图1.STAT3与实施例化合物相互作用的圆二色谱曲线
图2.免疫印迹法检测实施例化合物对DU145细胞p-STAT3的抑制
图3.裸鼠异种移植DU145细胞肿瘤的平均生长曲线
图4.裸鼠异种移植DU145细胞肿瘤的瘤重
具体实施方式
以下举出实施例对本发明作进一步的说明。但本发明并不限于这些实施例。
化学实验部分
熔点用日本Yanaco显微熔点仪测定，温度未经校正。质谱用ThermoFinnigan LCQ-Advantage质谱仪测定。核磁共振氢谱和碳谱用Varian Mercury，300MHz或400MHz核磁共振仪测定，溶剂为CDCl3或DMSO-d6。质谱采用Thermo exactive-orbitrap质谱仪测定。
实施例1 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物1)的制备
步骤一：1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-氨基苯并咪唑
Figure BDA0002735106960000201
将1，5-二氟-2，4-二硝基苯(1mmol,204.1mg)溶于10mL四氢呋喃中，加入N,N-二异丙基乙胺(DIPEA，1.2mmol)，然后缓慢滴加环丙胺(1.1mmol)的2mL四氢呋喃溶液，室温反应。反应完全后，向反应液中加入饱和氯化铵溶液淬灭过量的胺，然后用二氯甲烷萃取、浓缩，即可得到单取代中间体1-氟-5-环丙氨基-2，4-二硝基苯。将单取代中间体1-氟-5-环丙氨基-2，4-二硝基苯(1mmol)溶于溶于5mL乙醇和5mL四氢呋喃混合溶液中，搅拌下加入1.0eq的10％Pd-C和7.5eq的HCOONH4,常温搅拌1h。反应液抽滤至溶有1.2mmol间氟苯甲醛醛的5mL四氢呋喃溶液中，加入1mL乙酸，常温搅拌。HPLC-MS检测至反应完全，减压浓缩，饱和碳酸氢钠溶液调节pH至中性，二氯甲烷萃取，柱层析纯化，乙酸乙酯-石油醚洗脱，得中间体。ESI-MS(m/z):calcd.for C16H13F2N3[M+1]+,285.11，found 286.26。
步骤二：1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-氨基硫脲基苯并咪唑
Figure BDA0002735106960000202
将化合物1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-氨基苯并咪唑(1mmol)溶于5mL无水二氯甲烷中，搅拌下加入2.2mmol的三乙胺，然后冰浴下缓慢滴加1mmol的硫光气，室温反应1h。然后向反应液中加入1mmol的水合肼，加热回流1h。HPLC-MS检测至反应完全，反应液减压浓缩，柱层析纯化，乙酸乙酯-石油醚洗脱，得纯品。ESI-MS(m/z):calcd.for C17H16F2N5[M+1]+,360.11，found 360.30。
步骤三：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物1)
Figure BDA0002735106960000211
将1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-氨基硫脲基苯并咪唑(173mg,0.5mmol)溶于25mL C2H5OH中，加入间三氟甲基苯甲醛(0.5mmol)和乙酸(1mL)，室温反应0.5小时。向反应液中加入FeCl3·6H2O,80℃反应5小时。加入饱和NaHCO3溶液中和，二氯甲烷萃取，萃取液经柱层析纯化，得褐色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C25H17F5N5S[M+1]+,514.1119，found514.1121。1H NMR(300MHz,Acetone-d6)δ10.39(s,1H),8.52(d,J＝7.5,1H),8.18–8.10(m,2H),8.06(dd,J＝8.7Hz,5.6Hz,2H),7.86(d,J＝7.8Hz,1H),7.80–7.71(m,1H),7.62(d,J＝10.9Hz,1H),7.40(t,J＝8.9,2H),3.83–3.75(m,1H),1.15–1.07(m,2H),0.69–0.61(m,2H)。
实施例2 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物2)的制备
Figure BDA0002735106960000212
操作同实施例1，步骤三中用对三氟甲基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺褐色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C25H17F5N5S[M+1]+,514.1119，found 514.1119。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.41(s,1H),8.54(d,J＝7.6Hz,1H),8.07(t,J＝8.0Hz,4H),7.86(d,J＝8.1Hz,2H),7.62(d,J＝10.8Hz,1H),7.40(t,J＝8.8Hz,2H),3.84–3.75(m,1H),1.16–1.06(m,2H),0.71–0.60(m,2H)。
实施例3 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物3)的制备
Figure BDA0002735106960000221
操作同实施例1，步骤三中用3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺灰色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C27H24F2N5O3S[M+1]+,536.1562，found536.1562。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.24(s,1H),8.46(d,J＝7.6Hz,1H),8.06(dd,J＝8.6,5.6Hz,2H),7.61(d,J＝10.8Hz,1H),7.40(t,J＝8.8Hz,2H),7.09(s,2H),3.86(s,6H),3.82–3.74(m,1H),3.72(s,3H),1.16–1.06(m,2H),0.69–0.61(m,2H)。
实施例4 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物4)的制备
Figure BDA0002735106960000222
操作同实施例1，步骤一中用环戊胺代替环丙胺，用间氟苯甲醛代替对氟苯甲醛，步骤三中用3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环戊基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺橙黄色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C29H28F2N5O3S[M+1]+,564.1875，found 564.1874。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.28(s,1H),8.53(d,J＝7.7Hz,1H),7.70–7.58(m,2H),7.52(d,J＝8.2Hz,2H),7.47–7.39(m,1H),7.10(s,2H),4.89–4.72(m,1H),3.87(s,6H),3.72(s,3H),2.26–2.05(m,4H),2.01–1.91(m,2H),1.73–1.58(m,2H)。
实施例5 N-(1-正丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物5)的制备
Figure BDA0002735106960000231
操作同实施例1，步骤一中用正丙胺代替环丙胺，用间氟苯甲醛代替对氟苯甲醛，步骤三中用3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-正丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺白色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C27H24F2N5O3S[M+1]+,538.1719，found 538.1717。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.24(s,1H),8.49(d,J＝7.6Hz,1H),7.81(d,J＝11.1Hz,1H),7.67–7.58(m,3H),7.47–7.38(m,1H),7.10(s,2H),4.28(t,J＝7.3Hz,2H),3.87(s,6H),3.72(s,3H),1.72–1.60(m,2H),0.73(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例6 N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物6)的制备
Figure BDA0002735106960000232
操作同实施例1，步骤一中用间三氟甲基苯甲醛代替对氟苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺白色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C26H17F7N5S[M+1]+,564.1087，found 564.1083。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),8.59(d,J＝7.5Hz,1H),8.35(d,J＝6.9Hz,2H),8.14(d,J＝8.0Hz,2H),7.83(m,2H),7.65(d,J＝10.9Hz,1H),3.94–3.83(m,1H),1.17–1.07(m,2H),0.74–0.65(m,2H)。
实施例7 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物7)的制备
Figure BDA0002735106960000241
操作同实施例1，步骤三中用间氯苯甲醛代替对氟苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺橙黄色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C24H17ClF2N5S[M+1]+,480.0856，found 480.0860。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.36(s,1H),8.53(d,J＝7.4Hz,1H),8.12–8.01(m,3H),7.90(s,1H),7.80(d,1H),7.65–7.49(m,4H),7.40(t,J＝8.8Hz,2H),3.83–3.74(m,1H),1.15–1.07(m,2H),0.69–0.62(m,2H)。
实施例8 N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物8)的制备
Figure BDA0002735106960000242
操作同实施例1，步骤一中用间氟苯甲醛代替对氟苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺白色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C25H17F5N5S[M+1]+,514.1119，found 514.1125。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.41(s,1H),8.56(d,J＝7.7Hz,1H),8.14(d,J＝8.1Hz,2H),7.80(m,4H),7.61(dd,J＝15.1Hz,9.3Hz,2H),7.40(t,J＝7.7Hz,1H),3.88–3.79(m,1H),1.17–1.08(m,2H),0.71–0.64(m,2H)。
实施例9 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物9)的制备
Figure BDA0002735106960000243
操作同实施例1，步骤三中用邻三氟甲基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺白色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C25H17F5N5S[M+1]+,514.1119，found 514.1125。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.29(s,1H),8.58(d,J＝7.7Hz,1H),8.10–8.00(m,2H),7.95(d,J＝7.6Hz,1H),7.80(t,J＝8.7Hz,3H),7.61(d,J＝11.0Hz,1H),7.40(t,J＝8.8Hz,2H),3.84–3.74(m,1H),1.16–1.06(m,2H),0.71–0.61(m,2H)。
实施例10 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-异丙基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物10)的制备
Figure BDA0002735106960000251
操作同实施例1，步骤三中用对异丙基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-异丙基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺白色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C27H24F2N5S[M+1]+,488.1715，found 488.1717。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.21(s,1H),8.54(d,J＝7.4Hz,1H),8.05(dd,J＝8.8Hz,5.5Hz,2H),7.76(d,J＝8.2Hz,2H),7.60(d,J＝10.9Hz,1H),7.43–7.34(m,4H),3.83–3.74(m,1H),2.99–2.89(m,1H),1.23(s,3H),1.22(s,3H),1.14–1.06(m,2H),0.69–0.61(m,2H)。
实施例11 N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物11)的制备
Figure BDA0002735106960000252
操作同实施例1，步骤一中用间氟苯甲醛代替对氟苯甲醛，步骤三中用3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺灰色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.forC27H24F2N5O3S[M+1]+,536.1560，found 536.1562。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.29(s,1H),8.54(d,J＝7.5Hz,1H),7.88(t,J＝9.8Hz,2H),7.67(t,J＝7.9Hz,2H),7.44(m,1H),7.13(s,2H),3.90(s,6H),3.88–3.85(m,1H),3.76(s,3H),1.22–1.11(m,2H),0.76–0.68(m,2H)。
实施例12 N-(2-(3,4-亚甲二氧基苯基)-6-氟-5-苯并咪唑)-5-(2-呋喃基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物12)的制备
Figure BDA0002735106960000261
操作同实施例1，步骤一中，用氨水代替环丙氨，用3,4-亚甲二氧基苯甲醛替代对氟苯甲醛，步骤三中用2-呋喃甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(2-(3,4-亚甲二氧基苯基)-6-氟-5-苯并咪唑)-5-(2-呋喃基)-1,3,4-噻二唑-2-胺褐色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C20H13F2N5O3S[M+1]+,422.0717，found 422.0718。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.36(s,1H),8.60(s,1H),7.91(s,1H),7.75(m,2H),7.53(d,J＝11.6Hz,1H),7.11(s,2H),6.72(s,1H),6.13(s,2H)。
实施例13 N-(1-环丙基甲基-6-氟-2-(2-吡咯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-吡啶基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物13)的制备
Figure BDA0002735106960000262
操作同实施例1，步骤一中，用环丙甲胺代替环丙氨，用2-吡咯甲醛替代对氟苯甲醛，步骤三中用4-吡啶甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基甲基-6-氟-2-(2-吡咯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-吡啶基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C22H19FN7S[M+1]+,432.1398，found 432.1401。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.32(s,1H),11.00(s,1H),8.91–8.75(m,2H),8.15–8.02(m,2H),7.35(s,1H),7.15(s,1H),6.45(s,1H),4.51(s,2H),1.34–1.17(m,2H),0.59–0.34(m,4H)。
实施例14 N-(6-氟-2-(2-呋喃基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物14)的制备
Figure BDA0002735106960000271
操作同实施例1，步骤一中，用氨水代替环丙氨，用2-呋喃甲醛替代对氟苯甲醛，步骤三中用邻氟苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(6-氟-2-(2-呋喃基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C19H12F2N5OS[M+1]+,396.0725，found 396.0724。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.40(s,1H),8.64(d,1H),8.23(m,1H),7.99(s,1H),7.68–7.39(m,4H),7.22(d,J＝3.1Hz,1H),6.78(m,1H)。
实施例15 N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-乙酰氨基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物15)的制备
Figure BDA0002735106960000272
操作同实施例1，步骤一中，用间氟苯甲醛替代对氟苯甲醛，步骤三中用4-乙酰氨基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-乙酰氨基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C27H24F2N5S[M+1]+,488.1715，found 488.1717。HRMS(m/z):found 503.14575[M+1]+；calcd.for502.14601，C26H21F2N6OS。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.22(s,2H),8.58(d,J＝7.6Hz,1H),7.89–7.69(m,6H),7.66–7.57(m,2H),7.47–7.34(m,1H),3.89–3.76(m,1H),2.08(s,3H),1.16–1.07(m,2H),0.72–0.64(m,2H)。
实施例16 N-(6-氟-2-(2-呋喃基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-乙酰氨基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物16)的制备
Figure BDA0002735106960000273
操作同实施例1，步骤一中，用氨水代替环丙氨，用2-呋喃甲醛替代对氟苯甲醛，步骤三中用4-乙酰氨基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-乙酰氨基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C21H26FN6O2S[M+1]+,435.1034，found 435.1028。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.38(s,1H),10.09(s,1H),8.00(s,1H),7.91–7.59(m,2H),7.49(t,J＝10.5Hz,2H),7.29(d,J＝6.6Hz,2H),6.76(s,1H),2.00(s,3H)。
实施例17 N-(1-(3-乙氧基丙基)-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基))-5-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物17)的制备
Figure BDA0002735106960000281
操作同实施例1，步骤一中，用3-乙氧基丙胺代替环丙氨，用间氟苯甲醛替代对氟苯甲醛，步骤三中用3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-(3-乙氧基丙基)-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基))-5-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C29H30F2N5O4S[M+1]+,582.1981，found 582.1981。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),8.49(d,J＝7.5Hz,1H),7.75(d,J＝11.2Hz,1H),7.71–7.57(m,3H),7.48–7.37(m,1H),7.10(s,2H),4.40(s,2H),3.86(s,6H),3.72(s,3H),3.20(q,J＝6.7Hz,4H),1.96–1.87(m,2H),0.98(t,J＝7.0Hz,3H)。
实施例18 N-(1-(叔丁基)-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物18)的制备
Figure BDA0002735106960000282
操作同实施例1，步骤一中，用叔丁胺代替环丙氨，用间氟苯甲醛替代对氟苯甲醛，步骤三中用3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-(叔丁基)-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C28H28F2N5O3S[M+1]+,552.1875，found 552.1878。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.27(s,1H),8.45(d,J＝7.8Hz,1H),7.93(d,J＝12.5Hz,1H),7.56–7.32(m,4H),7.10(s,2H),3.86(s,6H),3.72(s,3H),1.55(s,9H)。
实施例19 N-(1-环丙基-6-氟-2-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物19)的制备
Figure BDA0002735106960000291
操作同实施例1，步骤一中，用3,4,5-三甲氧基苯甲醛替代对氟苯甲醛，步骤三中用间氟苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.forC27H24F2N5O3S[M+1]+,536.1562，found 536.1561。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.36(s,1H),8.51(d,1H),7.74–7.46(m,4H),7.39–7.27(m,3H),3.89(d,J＝7.5Hz,7H),3.77(s,3H),1.21–1.14(m,2H),0.74–0.66(m,2H)。
实施例20 N-(1-环丁基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物20)的制备
Figure BDA0002735106960000292
操作同实施例1，步骤一中，用环丁胺代替环丙胺，用间氟苯甲醛替代对氟苯甲醛，步骤三中用3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丁基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C28H26F2N5O3S[M+1]+,550.1719，found 550.1720。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.28(s,1H),8.52(d,J＝7.7Hz,1H),7.86(d,J＝11.5Hz,1H),7.67–7.58(m,1H),7.56–7.49(m,2H),7.48–7.37(m,1H),7.10(s,2H),5.16–5.01(m,1H),3.87(s,6H),3.72(s,3H),2.69–2.55(m,2H),2.45–2.34(m,2H),1.95–1.70(m,2H)。
实施例21 N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-13，4-噻二唑-2-胺(化合物21)的制备
Figure BDA0002735106960000301
操作同实施例1，步骤一中，用间三氟甲基苯甲醛替代对氟苯甲醛，步骤三中用3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C28H24F4N5O3S[M+1]+,586.1530，found 586.1525。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.27(s,1H),8.52(d,J＝7.1Hz,1H),8.39–8.30(m,J＝7.3Hz,2H),7.92(d,J＝7.6Hz,1H),7.81(t,J＝7.6Hz,1H),7.66(d,J＝10.9Hz,1H),7.09(s,2H),3.87(s,7H),3.72(s,3H),1.17–1.07(m,2H),0.73–0.65(m,2H)。
实施例22 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3，5-二氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物22)的制备
Figure BDA0002735106960000302
操作同实施例1，步骤三中用3,5-二氯苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3，5-二氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C24H16Cl2F2N5S[M+1]+,514.0466，found 514.0471。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.44(s,1H),8.51(d,J＝7.6Hz,1H),8.10–8.01(m,2H),7.88(s,2H),7.74(s,1H),7.61(d,J＝10.9Hz,1H),7.40(t,J＝8.8Hz,2H),3.84–3.74(m,1H),1.15–1.06(m,2H),0.70–0.61(m,2H)。
实施例23 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-氟5-甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物23)的制备
Figure BDA0002735106960000311
操作同实施例1，步骤三中用2-氟-5-甲基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-氟5-甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C25H19F3N5S[M+1]+,478.1308，found 478.1310。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.27(s,1H),8.55(d,J＝7.5Hz,1H),8.10–8.02(m,2H),7.97(d,J＝6.9Hz,1H),7.61(d,J＝10.7Hz,1H),7.35(m,4H),3.82–3.75(m,1H),2.38(s,3H),1.15–1.06(m,2H),0.69–0.61(m,2H)。
实施例24 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物24)的制备
Figure BDA0002735106960000312
操作同实施例1，步骤三中用3-三氟甲基-4-氯苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C25H16ClF5N5S[M+1]+,548.0730，found548.0729。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),8.51(d,J＝7.5Hz,1H),8.22(s,1H),8.15–8.01(m,3H),7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.61(d,J＝10.8Hz,1H),7.40(t,J＝8.8Hz,2H),3.83–3.74(m,1H),1.16–1.07(m,2H),0.69–0.60(m,2H)。
实施例25 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,5-二三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物25)的制备
Figure BDA0002735106960000321
操作同实施例1，步骤三中用3,5-二三氟甲基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,5-二三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C26H16F8N5S[M+1]+,582.0993，found 582.0988。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.53(s,1H),8.52–8.41(m,3H),8.24(s,1H),8.06(s,2H),7.63(d,J＝10.9Hz,1H),7.40(t,J＝8.6Hz,2H),3.85–3.74(m,1H),1.16–1.05(m,2H),0.70–0.58(m,2H)。
实施例26 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-叔丁基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物26)的制备
Figure BDA0002735106960000322
操作同实施例1，步骤三中用对叔丁基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-叔丁基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C28H26F2N5S[M+1]+,502.1872，found 502.1870。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.22(s,1H),8.55(d,1H),8.11–8.02(m,2H),7.77(d,J＝8.2Hz,2H),7.60(d,J＝11.1Hz,1H),7.53(d,J＝8.4Hz,2H),7.40(t,J＝8.6Hz,2H),3.85–3.73(m,1H),1.31(s,9H),1.16–1.06(m,2H),0.69–0.61(m,2H)。
实施例27 N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物27)的制备
Figure BDA0002735106960000331
操作同实施例1，步骤一中用3-三氟甲基-4-氯苯甲醛代替对氟苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C26H16ClF7N5S[M+1]+,598.0698，found598.0699。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),8.59(s,1H),8.47–8.28(m,2H),8.19–8.06(m,2H),7.96–7.57(m,4H),3.93–3.77(m,1H),1.19–1.05(m,2H),0.77–0.63(m,2H)。
实施例28 N-(1-环丙基-6-对氟苯氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物28)的制备
Figure BDA0002735106960000332
操作同实施例1，步骤一中用对三氟甲基苯甲醛代替对氟苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-对氟苯氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C26H17F7N5S[M+1]+,564.1087，found 564.1083。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),8.60(d,J＝7.6Hz,1H),8.26(d,J＝7.9Hz,2H),8.14(d,J＝7.9Hz,2H),7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.87(d,J＝8.0Hz,1H),7.77(t,J＝8.1Hz,1H),7.66(d,J＝10.8Hz,1H),3.91–3.80(m,1H),1.19–1.09(m,2H),0.74–0.63(m,2H)。
实施例29 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-甲砜基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物29)的制备
Figure BDA0002735106960000333
操作同实施例1，步骤一中用对甲砜基苯甲醛代替对氟苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-对氟苯氧基-2-(甲砜基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C26H20F4N5O2S2[M+1]+,574.0989，found 574.0983。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.44(s,1H),8.61(d,J＝7.5Hz,1H),8.30(d,J＝8.3Hz,2H),8.18–8.06(m,4H),7.87(d,J＝8.1Hz,1H),7.78(d,J＝7.7Hz,1H),7.68(d,J＝11.0Hz,1H),3.92–3.82(m,1H),3.33(s,3H),1.20–1.11(m,2H),0.74–0.63(m,2H)。
实施例30 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-甲酸甲酯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物30)的制备
Figure BDA0002735106960000341
操作同实施例1，步骤一中用对氯苯甲醛代替对氟苯甲醛，步骤三中用对甲酸甲酯苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-甲酸甲酯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C26H20ClFN5O2S[M+1]+,520.1005，found 520.1016。1H NMR(400MHz DMSO-d6)δ8.53(d,J＝7.6Hz,1H),8.09–7.97(m,6H),7.62(dd,J＝9.6Hz,5.9,3H),3.89(s,3H),3.83–3.78(m,1H),1.17–1.08(m,2H),0.70–0.62(m,2H)。
实施例31 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物31)的制备
Figure BDA0002735106960000342
操作同实施例1，步骤一中用对氯苯甲醛代替对氟苯甲醛，步骤三中用间羧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C25H18ClFN5O2S[M+1]+,520.1014，found 520.1005。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.40(s,1H),8.55(d,J＝7.4Hz,1H),8.41(d,J＝17.3Hz,1H),8.06(dd,J＝20.2Hz,8.2Hz,4H),7.69–7.58(m,4H),3.80(m,1H),1.12(m,2H),0.67(m,2H)。
实施例32 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物32)的制备
Figure BDA0002735106960000351
操作同实施例1，步骤一中用对三氟甲基苯甲醛代替对氟苯甲醛，步骤三中用对羧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.forC26H18F4N5O2S[M+1]+,540.1112，found 540.1115。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.22(s,1H),10.41(s,1H),8.61(d,J＝7.5Hz,1H),8.25(d,J＝8.1Hz,2H),8.05(d,J＝8.3Hz,2H),7.97(d,J＝8.3Hz,2H),7.92(d,J＝8.2Hz,2H),7.66(d,J＝10.9Hz,1H),3.89–3.81(m,1H),1.19–1.08(m,2H),0.72–0.63(m,2H)。
实施例33 N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物33)的制备
Figure BDA0002735106960000352
操作同实施例1，步骤一中用间三氟甲基苯甲醛代替对氟苯甲醛，步骤三中用对羧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.forC26H18F4N5O2S[M+1]+,540.1112，found 540.1115。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.40(s,1H),8.60(d,J＝7.4Hz,1H),8.38–8.28(m,2H),8.03(d,J＝8.1Hz,2H),7.97–7.86(m,3H),7.81(t,J＝7.7Hz,1H),7.65(d,J＝10.8Hz,1H),3.93–3.83(m,1H),1.16–1.07(m,2H),0.73–0.61(m,2H)。
实施例34 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物34)的制备
Figure BDA0002735106960000361
操作同实施例1，步骤三中用对三氟甲氧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C25H17F5N5OS[M+1]+,530.1068，found 530.1072。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.32(s,1H),8.54(d,J＝7.5Hz,1H),8.10–8.03(m,2H),8.01–7.96(m,2H),7.61(d,J＝10.9Hz,1H),7.50(d,J＝8.1Hz,2H),7.40(t,J＝8.9Hz,2H),3.82–3.75(m,1H),1.15–1.07(m,2H),0.68–0.61(m,2H)。
实施例35 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物35)的制备
Figure BDA0002735106960000362
操作同实施例1，步骤三中用对甲基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C25H20F2N5S[M+1]+,460.1402，found 460.1402。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.21(s,1H),8.54(d,J＝7.5Hz,1H),8.05(dd,J＝8.7Hz,5.5Hz,2H),7.73(d,J＝8.1Hz,2H),7.59(d,J＝10.9Hz,1H),7.39(t,J＝8.8Hz,2H),7.30(t,J＝8.5Hz,2H),3.82–3.74(m,1H),2.36(s,3H),1.15–1.05(m,2H),0.69–0.60(m,2H)。
实施例36 N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,5二叔丁基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物36)的制备
Figure BDA0002735106960000363
操作同实施例1，步骤三中用3,5二叔丁基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛，得到N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,5二叔丁基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C32H34F2N5S[M+1]+,558.2498，found 558.2500。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.22(s,1H),8.48(d,J＝7.4Hz,1H),8.06(dd,J＝8.5Hz,5.6Hz,2H),7.61(dd,J＝6.0Hz,4.6Hz,3H),7.53(s,1H),7.40(t,J＝8.8Hz,2H),3.85–3.73(m,1H),1.33(s,18H),1.09–1.05(m,2H),0.68–0.62(m,2H)。
实施例37 N-(1-环丙基-6-N-甲基哌嗪基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物37)的制备
步骤一：1-环丙基-6-N-甲基哌嗪基-2-(4-氟苯基)-5-氨基苯并咪唑的制备
Figure BDA0002735106960000371
将1，5-二氟-2，4-二硝基苯(1mmol,204.1mg)溶于10mL四氢呋喃中，加入DIPEA(1.1mmol)，然后缓慢滴加环丙胺(1.0mmol)的2mL四氢呋喃溶液，室温反应30min。然后加入DIPEA(1.1mmol)缓慢滴加氮甲基哌嗪(1.1mmol)的2mL四氢呋喃溶液，室温反应。反应完全后，向反应液中加入饱和氯化铵溶液淬灭过量的胺，然后用二氯甲烷萃取、浓缩，即可得到双取代产物2-N-甲基哌嗪基-4-环丙基-1，5-二硝基苯。将2-N-甲基哌嗪基-4-环丙基-1，5-二硝基苯(1mmol)溶于5mL乙醇和5mL四氢呋喃的混合溶液中，搅拌下缓慢加入1mol/L氢氧化钾水溶液，至有黄色沉淀析出，继续搅拌10min。反应液抽滤,大量水洗，干燥，即可得双取代中间体。将其(1mmol)溶于5mL乙醇和5mL四氢呋喃混合溶液中，搅拌下加入1.0eq的10％Pd-C和7.5eq的HCOONH4,常温搅拌1h。反应液抽滤至溶有1.2mmol间氟苯甲醛的5mL四氢呋喃溶液中，加入1mL乙酸，常温搅拌。HPLC-MS检测至反应完全，减压浓缩，饱和碳酸氢钠溶液调节pH至中性，二氯甲烷萃取，柱层析纯化，乙酸乙酯-石油醚洗脱，得化合物1-环丙基-6-N-甲基哌嗪基-2-(4-氟苯基)-5-氨基苯并咪唑。ESI-MS(m/z):calcd.for C21H25FN5[M+1]+,366.21，found 366.19。
步骤二：1-环丙基-6-N-甲基哌嗪基-2-(4-氟苯基)-5-氨基硫脲基苯并咪唑的制备
Figure BDA0002735106960000381
同实施例1，得到1-环丙基-6-N-甲基哌嗪基-2-(4-氟苯基)-5-氨基硫脲基苯并咪唑。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C22H27FN7S[M+1]+,440.20，found 440.26。
步骤三：N-(1-环丙基-6-N-甲基哌嗪基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物37)的制备
Figure BDA0002735106960000382
操作同实施例1，步骤三中对三氟甲基苯甲醛替代间三氟甲基苯甲醛得到N-(1-环丙基-6-N-甲基哌嗪基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺白色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C30H28F4N7S[M+1]+,594.2058，found594.2056。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.70(s,1H),8.16(s,1H),8.08–8.00(m,4H),7.85(d,J＝8.5Hz,2H),7.44–7.34(m,3H),3.84–3.74(m,1H),3.00(s,4H),2.65(s,4H),2.32(s,3H),1.18–1.09(m,2H),0.68–0.60(m,2H)。
实施例38 N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氰基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物38)的制备
Figure BDA0002735106960000383
操作同实施例37，步骤一中双取代用乙醇和四氢呋喃的混合溶液代替四氢呋喃溶液，用氢氧化钾水溶液代替DIPEA，得到双取代产物；步骤三中对三氟甲基苯甲醛替代间三氟甲基苯甲醛得到N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氰基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺白色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C27H22FN6OS[M+1]+,497.1554，found 497.1557。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.88(s,1H),8.47(s,1H),8.26(s,1H),8.18(d,J＝8.0Hz,1H),8.03(dd,J＝8.4Hz,5.7Hz,2H),7.93(d,J＝7.7Hz,1H),7.71(t,J＝7.8Hz,1H),7.38(t,J＝8.8Hz,2H),7.22(s,1H),4.26(q,J＝6.9Hz,2H),3.81–3.73(m,1H),1.45(t,J＝6.9Hz,3H),1.17–1.08(m,2H),0.67–0.60(m,2H)。
实施例39 5-甲基-N-(6-甲氧基-2-(2-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物39)的制备
Figure BDA0002735106960000391
操作同实施例37，步骤一中双取代用甲醇和四氢呋喃的混合溶液代替四氢呋喃溶液，用氢氧化钾水溶液代替DIPEA，得到双取代产物，用邻氟苯甲醛代替对氟苯甲醛；步骤三中用乙醛替代间三氟甲基苯甲醛得到5-甲基-N-(6-甲氧基-2-(2-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺白色固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C17H15FN5OS[M+1]+,356.0973，found 356.0976。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.47(s,1H),9.65(s,1H),8.70(s,1H),8.19(s,1H),7.57–7.21(m,4H),3.93(s,3H),2.55(s,3H)。
实施例40 N-(6-甲氧基-2-(2-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物40)的制备
Figure BDA0002735106960000392
操作同实施例37，步骤一中单取代用氨水代替环丙氨，双取代用甲醇和四氢呋喃的混合溶液代替四氢呋喃溶液，用氢氧化钾水溶液代替DIPEA，得到双取代产物，用邻氟苯甲醛代替对氟苯甲醛；步骤三中用甲醛替代间三氟甲基苯甲醛得到N-(6-甲氧基-2-(2-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C16H13FN5OS[M+1]+,342.0818，found 342.0819。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.64(s,1H),9.85(s,1H),8.86(s,1H),8.74(s,1H),8.20(t,1H),7.58–7.47(m,1H),7.46–7.35(m,2H),7.28(s,1H),3.94(s,3H)。
实施例41 5-甲基-N-(6-吗啉基-1-丙基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物41)的制备
Figure BDA0002735106960000401
操作同实施例37，步骤一中用正丙胺代替环丙氨，用吗啉代替N-甲基哌嗪，用3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替对氟苯甲醛；步骤三中用乙醛替代间三氟甲基苯甲醛得到5-甲基-N-(6-吗啉基-1-丙基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C26H33N6O4S[M+1]+,525.2279，found 525.2275。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.20(s,1H),8.26(s,1H),7.48(s,1H),7.01(s,2H),4.33–4.22(m,2H),3.90–3.71(m,14H),2.91(s,4H),2.54(s,3H),1.82–1.67(m,2H),0.82(t,3H)。
实施例42 N-(6-吗啉基-1-丙基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物42)的制备
Figure BDA0002735106960000402
操作同实施例37，步骤一中用正丙胺代替环丙氨，用吗啉代替N-甲基哌嗪，用3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替对氟苯甲醛；步骤三中用甲醛替代间三氟甲基苯甲醛得到N-(6-吗啉基-1-丙基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C25H31N6O4S[M+1]+,511.2122，found 511.2122。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.41(s,1H),8.82(s,1H),8.27(s,1H),7.49(s,1H),7.01(s,2H),4.28(t,2H),3.91–3.73(m,14H),2.91(t,4H),1.81–1.69(m,2H),0.82(t,J＝7.1Hz,3H)。
实施例43 N-(1-环丙基-2-(2-呋喃基)-6-甲氧基-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物43)的制备
Figure BDA0002735106960000411
操作同实施例37，步骤一中双取代用甲醇和四氢呋喃的混合溶液代替四氢呋喃溶液，用氢氧化钾水溶液代替DIPEA，得到双取代产物，用2-呋喃甲醛代替对氟苯甲醛；步骤三中用3,4,5-三甲氧甲苯甲醛替代间三氟甲基苯甲醛得到N-(1-环丙基-2-(2-呋喃基)-6-甲氧基-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C26H26N5O5S[M+1]+,520.1649，found 520.1649。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),8.44(s,1H),7.94(s,1H),7.26–7.23(m,1H),7.19(s,1H),7.08(s,2H),6.75(s,1H),3.99(s,3H),3.86(s,6H),3.71(s,4H),1.33–1.26(m,2H),0.95–0.89(m,2H)。
实施例44 N-(1-环丙基-2-(3-氟苯基)-6-甲氧基-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物44)的制备
Figure BDA0002735106960000412
操作同实施例37，步骤一中双取代用甲醇和四氢呋喃的混合溶液代替四氢呋喃溶液，用氢氧化钾水溶液代替DIPEA，得到双取代产物，用间氟苯甲醛代替对氟苯甲醛；步骤三中用3,4,5-三甲氧甲苯甲醛替代间三氟甲基苯甲醛得到N-(1-环丙基-2-(3-氟苯基)-6-甲氧基-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C26H26N5O5S[M+1]+,520.1649，found 520.1649。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),8.44(s,1H),7.94(s,1H),7.26–7.23(m,1H),7.19(s,1H),7.08(s,2H),6.75(s,1H),3.99(s,3H),3.86(s,6H),3.71(s,4H),1.33–1.26(m,2H),0.95–0.89(m,2H)。
实施例45 N-(1-环丙基-2-(3-氟苯基)-6-(4-甲基哌嗪基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物45)的制备
Figure BDA0002735106960000421
操作同实施例37，步骤一中用间氟苯甲醛代替对氟苯甲醛，步骤三中用3,4,5-三甲氧甲苯甲醛替代间三氟甲基苯甲醛得到N-(1-环丙基-2-(3-氟苯基)-6-(4-甲基哌嗪基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C32H35FN7O3S[M+1]+,616.2501，found 616.2498。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.36(s,1H),10.04(d,1H),8.70–8.53(m,1H),7.88(d,J＝7.7Hz,1H),7.78–7.62(m,1H),7.56–7.39(m,2H),7.10(s,2H),3.87(m,7H),3.72(s,3H),3.53(m,4H),3.28(m,4H),2.83(s,3H),1.22(m,2H),0.84–0.70(m,2H)。
实施例46 N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物46)的制备
Figure BDA0002735106960000422
操作同实施例37，步骤一中双取代用乙醇和四氢呋喃的混合溶液代替四氢呋喃溶液，用氢氧化钾水溶液代替DIPEA，得到N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.forC27H22F4N5OS[M+1]+,540.1478，found 540.1472。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.88(s,1H),8.48(s,1H),8.17–7.99(m,4H),7.85(d,J＝7.6Hz,1H),7.76(t,J＝8.2Hz,1H),7.38(t,J＝8.7Hz,2H),7.24(s,1H),4.26(q,J＝7.1Hz,2H),3.77(s,1H),1.45(t,J＝6.9Hz,3H),1.17–1.07(m,J＝6.0Hz,2H),0.67–0.59(m,2H)。
实施例47 N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3，5-二氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物47)的制备
Figure BDA0002735106960000431
操作同实施例37，步骤一中双取代用乙醇和四氢呋喃的混合溶液代替四氢呋喃溶液，用氢氧化钾水溶液代替DIPEA；步骤三中用3,5-二氟苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛得到N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3，5-二氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C26H21F3N5OS[M+1]+,508.1413，found 508.1413。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.91(s,1H),8.46(s,1H),8.03(t,2H),7.57(d,J＝6.2Hz,2H),7.38(t,J＝8.9Hz,3H),7.23(s,1H),4.25(q,J＝7.1Hz,2H),3.82–3.71(m,1H),1.44(t,J＝6.9Hz,3H),1.17–1.05(m,2H),0.69–0.58(m,2H)。
实施例48 N-(1-环丙基-6-(4-氟苯氧基)-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物48)的制备
Figure BDA0002735106960000432
操作同实施例37，步骤一中双取代用丙酮溶液代替四氢呋喃溶液，用碳酸钾代替DIPEA，用对氟苯酚代替N-甲基哌嗪得到N-(1-环丙基-6-(4-氟苯氧基)-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.forC31H20F5N5OS[M+1]+,606.1377，found 606.1373。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.23(s,1H),8.64(s,1H),8.16–8.08(m,2H),8.05(dd,J＝8.7Hz,5.5Hz,2H),7.85(d,J＝7.8Hz,1H),7.75(t,J＝7.8Hz,1H),7.40(t,J＝8.8Hz,2H),7.22(dd,J＝16.0Hz,7.4Hz,3H),7.14–7.07(m,2H),3.76–3.68(m,1H),1.07–0.96(m,2H),0.61–0.54(m,2H)。
实施例49 N-(1-环丙基-6-吗啉基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物49)的制备
Figure BDA0002735106960000441
操作同实施例37，步骤一中用吗啉代替N-甲基哌嗪，步骤三中用对三氟甲基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛得到N-(1-环丙基-6-吗啉基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C29H25F4N6OS[M+1]+,581.1741，found 581.1740。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.76(s,1H),8.23(s,1H),8.09–8.00(m,4H),7.84(d,J＝8.3Hz,2H),7.44–7.33(m,3H),3.79(s,5H),2.95(s,4H),1.17–1.10(m,2H),0.69–0.59(m,2H)。
实施例50 N-(1-环丙基-6-吗啉基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-(3-三氟甲基苯氧基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物50)的制备
Figure BDA0002735106960000442
操作同实施例37，步骤一中用吗啉代替N-甲基哌嗪，步骤三中用4-(3-三氟甲基苯氧基)苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛得到N-(1-环丙基-6-吗啉基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-(3-三氟甲基苯氧基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C35H29F4N6O2S[M+1]+,673.2003，found 673.1985。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.65(s,1H),8.22(s,1H),8.03(dd,J＝8.7Hz,5.5Hz,2H),7.65(dd,J＝15.5Hz,7.8Hz,2H),7.59–7.49(m,3H),7.39(dd,J＝16.8Hz,6.9Hz,5H),7.19(d,J＝8.0Hz,1H),3.79(s,5H),2.94(s,4H),1.16–1.08(m,2H),0.67–0.59(m,2H)。
实施例51 N-(1-环丙基-6-N-甲基-N-环己基胺基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物51)的制备
Figure BDA0002735106960000443
操作同实施例37，步骤一中用N-甲基-N-环己基胺代替N-甲基哌嗪，步骤三中用对三氟甲基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛得到N-(1-环丙基-6-吗啉基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-(3-三氟甲基苯氧基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C32H31F4N6S[M+1]+,607.2262，found 607.2261。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.80(s,1H),8.34(s,1H),8.04(t,J＝7.3Hz,4H),7.85(d,J＝8.3Hz,2H),7.45–7.34(m,3H),3.79(s,1H),2.88–2.77(m,1H),2.73(s,3H),1.90–1.79(m,2H),1.76–1.64(m,2H),1.41–1.27(m,2H),1.27–1.20(m,2H),1.16–1.10(m,2H),1.09–1.02(m,2H),0.68–0.57(m,2H)。
实施例52 N-(1-环丙基-6-N-甲基-N-环己基胺基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(化合物52)的制备
Figure BDA0002735106960000451
操作同实施例37，步骤一中用N-甲基-N-环己基胺代替N-甲基哌嗪，步骤三中用对3,4,5-三甲氧基苯甲醛代替间三氟甲基苯甲醛得到N-(1-环丙基-6-吗啉基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-(3-三氟甲基苯氧基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺固体。ESI-HRMS(m/z):calcd.for C34H38FN6O3S[M+1]+,629.2705，found 629.2694。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,1H),8.26(s,1H),8.03(dd,J＝8.8Hz,5.5Hz,2H),7.45–7.33(m,3H),7.09(s,2H),3.86(s,6H),3.82–3.75(m,1H),3.72(s,3H),2.88–2.76(m,1H),2.73(s,3H),1.90–1.79(m,2H),1.68(s,2H),1.38–1.26(m,2H),1.25–1.22(m,2H),1.13–1.10(m,2H),1.09–1.03(m,2H),0.67–0.58(m,2H)。
药理活性部分
体外活性评价：
实验例1：评价实施例化合物对IL-6/JAK/STAT3信号通路的抑制作用
1)原理：利用Invivogen公司稳定表达IL-6受体及可启动子含有STAT3结合区域的分泌胚胎碱性磷酸酶(secreted embryonic alkaline phosphatase，SEAP)报告基因的HEK-Blue IL-6细胞。在IL-6刺激下，细胞质内磷酸化的STAT3形成二聚体转位进入细胞核,结合到SEAP报告基因上启动转录,最终产生可分泌到细胞外的SEAP。细胞培养上清中的SEAP可与定量蓝(Quanti-Blue)反应，通过655nm处的产物吸收即可计算SEAP的生成量，从而反映IL6-STAT3通路的活性。因此，将药物处理细胞后，取上清与Quanti-Blue反应,在655nm检测SEAP的生成量,可以评价化合物对IL-6刺激的STAT3信号通路的抑制作用。
2)实验方法：待细胞密度达到80％时,将贴壁生长的细胞轻轻拍下后,用37℃预热的完全培养基重悬并进行计数。采用无菌96孔细胞培养板，加入细胞悬液(每孔最终细胞数为5×104个)160μL，不同浓度化合物20μL，IL-6细胞因子(终质量浓度1ng/mL)20μL，共200μL体系。阴性对照组为40μL完全培养基和160μL细胞悬液；阳性对照组为IL-6细胞因子(终质量浓度1ng/mL)20μL、完全培养基20μL和细胞悬液160μL。37℃细胞培养箱孵育16h后，从96孔板中每孔吸取20μL溶液转移至另一块96孔板中,加入37℃预热的QUANTI-Blue显色液180μL,在37℃孵育1h后，于655nm波长下进行检测。
3)结果显示，化合物能剂量依赖地抑制IL6/JAK/STAT3通路，且实验具有可重复性。部分化合物的IC50列于表1。
表1.化合物对HEK-Blue细胞IL-6/JAK/STAT3信号通路的抑制活性。
Figure BDA0002735106960000461
Figure BDA0002735106960000471
实验例2：MTT法测定实施例化合物对肿瘤细胞的抑制作用
1)实验方法：将对数生长期的肿瘤细胞株HCT-116、HepG2、BGC-823、A549、U251和DU145细胞用胰酶消化后配制成浓度为每毫升2×104个的细胞液，96孔板每孔接种100μL(2000个细胞)。次日每孔加入不同浓度药物及溶剂对照的新鲜培养基100μL(DMSO终浓度<0.2％),每组设3个平行孔,于37℃继续培养48h后，弃上清，每孔加50μg·mL-1MTT溶液，37℃孵育4h后弃上清,加入DMSO振荡混匀后,用酶标仪在570nm波长下测定其光吸收值。
2)结果显示：实施例化合物能剂量依赖的抑制HCT-116、HepG2、BGC-823、A549、U251和DU145等细胞，且实验具有可重复性。部分实施例化合物的IC50分别是1.02、2.43、2.80、2.92、2.98、3.15、3.32μM。判定苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑衍生物具有抗肿瘤的抑制活性。部分化合物的IC50列于表2。
表2.实施例化合物的MTT法筛选结果
Figure BDA0002735106960000472
实验例3：实施例化合物与STAT3蛋白的结合作用
1)原理：STAT3蛋白在200-260nm下会产生特定的圆二色谱信号，当小分子化合物与STAT3蛋白发生结合后，会引起STAT3蛋白的三维构象发生改变，导致STAT3蛋白的圆二色谱信号发生改变。
2)实验方法：配置浓度为0.01mol/L、pH＝7.4的磷酸盐缓冲液。用该磷酸盐缓冲溶液配置浓度为0.13mg/mL的STAT3蛋白缓冲溶液，37℃水浴1h，检测STAT3蛋白溶液在200-260nm的圆二色谱。配置实施例化合物与STAT3蛋白的混合溶液，在混合液中实施例化合物的浓度为0.65mg/mL，STAT3蛋白的浓度为0.13mg/mL，37℃孵育1h后，检测混合液在200-260nm的圆二色谱。
3)结果显示：实施例化合物与STAT3蛋白共孵育后，STAT3蛋白的圆二色谱有明显差异，表明实施例化合物与STAT3蛋白发生稳定结合(见图1)。
实验例4：荧光偏振法评价实施例化合物与STAT3蛋白SH2结构域的相互作用
1)原理：靶向STAT3蛋白SH2结构域荧光探针序列5-羧基荧光素-GY(PO3H2)LPQTV-NH2受平面偏振光激发时，由于荧光探针分子旋转或翻转偏离这一平面，发射光将位于与激发光不同的偏振面。用垂直的偏振光激发荧光素，可以在垂直的和水平的偏振平面检测发射光光强。如果探针分子与STAT3蛋白SH2结构域结合，分子量会变大，激发时发生的运动极小，发射光偏振程度较高。如果STAT3蛋白SH2结构域被抑制，探针分子的分子量交小，分子旋转或翻转速度快，发射光相对于激发光平面将去偏振化。
2)实验方法：荧光偏振反应体系为50mM NaCl，10mM HEPES，1mM EDTA，0.01％TritonX-100。靶向STAT3蛋白SH2结构域的探针序列为5-carboxyfluorescein-GY(PO3H2)LPQTV-NH2，用DMSO配制，终浓度为10nM。经镍柱纯化的人源STAT3蛋白终浓度为500μM。将80μL化合物，10μL人源STAT3蛋白，5μL实施例化合物加入至黑色不透明96孔板中，室温孵育30min后再加入5μL探针。37℃继续孵育1h后，使用Biotek酶标仪在激发波长为485nm发射波长为528nm的条件下检测各孔的偏振值。实施例的IC50采用Graphpad Prism 8进行计算。
3)结果显示：实施例化合物能够剂量依赖性的抑制靶向STAT3蛋白SH2结构域的探针序列与STAT3蛋白SH2结构域的结合，IC50＝16.29μM，高于阳性药Stattic(IC50＝36.29μM)。结果表明实施例化合物具有靶向抑制STAT3蛋白SH2结构域的活性。
实验例5：免疫印迹法评价实施例化合物对细胞内STAT3蛋白磷酸化的抑制情况
收集对照组和不同浓度实施例化合物处理16h的DU145细胞，用预冷的PBS洗2次，加入适量RIPA裂解液(50mM Tris-HCI、1mM EDTA、1％Triton X-100、150mM NaCl、0.1％SDS、1mM NaF、Na3VO4、蛋白酶抑制剂，pH 7.4)冰上裂解1h后，4℃，12,000rpm离心20min，收集上清，进行蛋白定量，并煮沸变性。取等量蛋白进行10％SDS-PAGE电泳。一抗采用p-STAT3(Tyr705)、STAT3特异性抗体4℃孵育过夜。采用相应的HRP标记的二抗室温孵育2h，洗涤。加入ECL化学发光底物反应液，于凝胶成像***内显影，并保存图像。以β-actin为内参。
结果显示，实施例化合物能够剂量依赖性地抑制DU145细胞中STAT3蛋白705位酪氨酸的磷酸化(见图2)。
体内活性评价：
实验例6：实施例化合物在异种移植瘤模型的抗肿瘤作用
实验动物选用Balb/c裸鼠，18-20g，SPF级，雄性，由斯贝福(北京)生物技术有限公司提供。在无菌条件下从荷瘤种鼠中取出DU145肿瘤组织，切成1mm×1mm大小的瘤块，均匀接种于裸鼠腋背部皮下。7日后待肿瘤生长至100～300mm3后，将动物随机分组，开始给药。腹腔注射每天给药。每周两次称量体重并用游标卡尺测量肿瘤的长度和宽度，给药14天后将裸鼠脱臼处死，剥离肿瘤组织，称重并拍照。最后计算肿瘤抑制率，以肿瘤抑制率评价抗肿瘤作用强度。检测血液指标，评价其安全性。
分组：空白对照组，实施例化合物i.p.50mg/kg组。
药物配制：称取化合物若干，加入少量吐温-80助溶后溶解于无菌生理盐水中。每只动物/每次腹腔给药体积为0.2mL/20g体重。
计算方法：依据《细胞毒类抗肿瘤药物非临床评价的技术指导原则》，进行结果统计和判断：
肿瘤体积(TV)：V＝1/2×a×b2，a和b分别表示瘤体长和宽。
相对肿瘤增殖率T/C(％)：T/C％＝T/C×100％。(T：治疗组肿瘤重量；C：阴性对照组肿瘤重量)。
肿瘤增殖抑制率TGI(％)：TGI％＝(1-T/C)×100％。(T：治疗组肿瘤重量；C：阴性对照组肿瘤重量)。
评价标准：T/C(％)>40％为无效；T/C(％)≤40％，并经统计学处理P<0.05为有效。
实验结果：裸鼠接种DU145肿瘤后，在接种7天后开始分组给药。实施例化合物以腹腔注射50mg/kg的剂量每天给药一次。给药后，实施例化合物与溶剂对照组比较能够抑制肿瘤生长(见图3)。给药14天后处理动物称取肿瘤重量，实施例化合物可抑制肿瘤生长(见图4)。化合物37在异种移植瘤模型的抗肿瘤作用结果见表3。
表3.化合物37在异种移植瘤模型的抗肿瘤作用结果
Figure BDA0002735106960000501

Claims (10)

1.式I所示的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure FDA0002735106950000011
式中：
R1是卤素、直链或支链C1-6烷氧基、取代或未取代的C6-12酚氧基、取代或未取代的哌嗪基或取代或未取代的哌啶基，其中，所述取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括直链或支链C1-6烷基、C1-6烷氧基、胺基、卤素、羧基、C1-6的酰氧基、羟基；
R2是氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基取代C1-6烷基、取代或未取代的C3-6环烷基取代的C1-6烷基和取代或未取代的C3-6环烷基，其中，所述取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-6烷基、C1-6烷氧基、胺基；
R3是氢、C1-6烷基、取代和未取代C6-12芳基、取代和未取代的C3-12杂芳基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-6烷基、C1-6烷氧基、胺基、卤素、氰基、C6-12苯氧基、三氟甲基、羧基、C1-6的酰氧基、羟基、C1-6的酰胺基、甲砜基；
R4是氢、C1-6烷基、取代和未取代的C6-12芳基、取代和未取代的C3-12杂芳基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-6烷基、C1-6烷氧基、胺基、卤素、氰基、C6-12苯氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、C1-6的酰氧基、羟基、C1-6的酰胺基。
2.根据权利要求1的化合物、药学上可接受的盐选自：
R1是氟、氯、溴、直链或支链C1-4烷氧基、取代和未取代的C6-10苯氧基、取代或未取代的哌嗪基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括直链或支链C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、羧基、C1-4的酰氧基、羟基；
R2是氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基取代C1-4烷基、取代或未取代的C3-6环烷基取代的C1-4烷基和C3-6环烷基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基；
R3是氢、C1-4烷基、取代和未取代C6-10芳基、取代和未取代的C3-10杂芳基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、C6-10苯氧基、三氟甲基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基、甲砜基；
R4是氢、C1-4烷基、取代和未取代的C6-10芳基、取代和未取代的C3-10杂芳基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、C6-10苯氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基。
3.根据权利要求2的化合物、药学上可接受的盐选自：
R1是氟、氯、溴、直链或支链C1-4烷氧基、取代和未取代的苯氧基、取代和未取代的萘氧基、取代或未取代的哌嗪基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括直链或支链C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、羧基、C1-4的酰氧基、羟基；
R2是氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基取代C1-4烷基、取代或未取代的C3-6环烷基取代的C1-4烷基和C3-6环烷基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基；
R3是氢、C1-4烷基、取代和未取代苯基、取代和未取代萘基、取代和未取代的呋喃基、取代和未取代的噻吩基、取代和未取代的吡咯基、取代和未取代的噁唑基，取代和未取代的噻唑基、取代和未取代的咪唑基、取代和未取代的吡啶基、取代和未取代的嘧啶基、取代和未取代的吡嗪基、取代和未取代的哒嗪基、取代和未取代的苯并咪唑基、取代和未取代的苯并噁唑基、取代和未取代的苯并噻唑基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、苯氧基、萘氧基、三氟甲基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基、甲砜基；
R4是氢、C1-4烷基、取代和未取代苯基、取代和未取代萘基、取代和未取代的呋喃基、取代和未取代的噻吩基、取代和未取代的吡咯基、取代和未取代的噁唑基，取代和未取代的噻唑基、取代和未取代的咪唑基、取代和未取代的吡啶基、取代和未取代的嘧啶基、取代和未取代的吡嗪基、取代和未取代的哒嗪基、取代和未取代的苯并咪唑基、取代和未取代的苯并噁唑基、取代和未取代的苯并噻唑基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、苯氧基、萘氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基。
4.根据权利要求3的化合物、药学上可接受的盐选自：
R1是氟、氯、溴、直链或支链C1-4烷氧基、取代和未取代的苯氧基、取代和未取代的萘氧基、取代或未取代的哌嗪基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括直链或支链C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、羧基、C1-4的酰氧基、羟基；
R2是氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基取代C1-4烷基、取代或未取代的C3-6环烷基取代的C1-4烷基和C3-6环烷基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基；
R3是氢、C1-4烷基、取代和未取代苯基、取代和未取代的呋喃基、取代和未取代的噻吩基、取代和未取代的吡咯基、取代和未取代的噁唑基、取代和未取代的噻唑基、取代和未取代的咪唑基、取代和未取代的吡啶基、取代和未取代的嘧啶基、取代和未取代的苯并咪唑基，其中，所述的取代或未被取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、苯氧基、三氟甲基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基、甲砜基；
R4是氢、C1-4烷基、取代和未取代苯基、取代和未取代的呋喃基、取代和未取代的噻吩基、取代和未取代的吡咯基、取代和未取代的噁唑基、取代和未取代的噻唑基、取代和未取代的咪唑基、取代和未取代的吡啶基、取代和未取代的嘧啶基、取代和未取代的苯并咪唑基，其中，所述的取代或未取代的取代基选自下述的一个或多个基团，这些基团包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、胺基、氟、氯、溴、氰基、苯氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、羧基、C1-4的酰氧基、羟基、C1-4的酰胺基。
5.根据权利要求1-4任一项的化合物、药学上可接受的盐选自：
化合物1：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000031
化合物2：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000041
化合物3：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000042
化合物4：N-(1-环戊基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000043
化合物5：N-(1-丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000044
化合物6：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000051
化合物7：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000052
化合物8：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000053
化合物9：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000054
化合物10：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-异丙基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000055
化合物11：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000061
化合物12：N-(2-(1,3-苯并间二氧杂环戊烯基)-6-氟-5-苯并咪唑)-5-(2-呋喃基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000062
化合物13：N-(1-(环丙基甲基)-6-氟-2-(2-吡咯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-吡啶基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000063
化合物14：N-(6-氟-2-(2-呋喃基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000064
化合物15：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-乙酰氨基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000071
化合物16：N-(6-氟-2-(2-呋喃基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-乙酰氨基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000072
化合物17：N-(1-(3-乙氧基丙基)-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基))-5-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000073
化合物18：N-(1-(叔丁基)-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000074
化合物19：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000081
化合物20：N-(1-环丁基-6-氟-2-(3-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000082
化合物21：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000083
化合物22：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3，5-二氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000084
化合物23：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(2-氟5-甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000091
化合物24：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000092
化合物25：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,5-二三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000093
化合物26：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-叔丁基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000094
化合物27：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000101
化合物28：N-(1-环丙基-6-对氟苯氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000102
化合物29：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-甲砜基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000103
化合物30：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-甲酸甲酯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000104
化合物31：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氯苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000105
化合物32：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000111
化合物33：N-(1-环丙基-6-氟-2-(3-三氟甲基苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-羧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000112
化合物34：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000113
化合物35：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000114
化合物36：N-(1-环丙基-6-氟-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,5二叔丁基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000115
化合物37：N-(1-环丙基-6-N-甲基哌嗪基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000121
化合物38：N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-氰基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000122
化合物39：5-甲基-N-(6-甲氧基-2-(2-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000123
化合物40：N-(6-甲氧基-2-(2-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000124
化合物41：5-甲基-N-(6-吗啉基-1-丙基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000125
化合物42：N-(6-吗啉基-1-丙基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-5-苯并咪唑基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000131
化合物43：N-(1-环丙基-2-(2-呋喃基)-6-甲氧基-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧甲苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000132
化合物44：N-(1-环丙基-2-(3-氟苯基)-6-甲氧基-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000133
化合物45：N-(1-环丙基-2-(3-氟苯基)-6-(4-甲基哌嗪基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000134
化合物46：N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000141
化合物47：N-(1-环丙基-6-乙氧基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3，5-二氟苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000142
化合物48：N-(1-环丙基-6-(4-氟苯氧基)-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000143
化合物49：N-(1-环丙基-6-吗啉基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000144
化合物50：N-(1-环丙基-6-吗啉基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-(3-三氟甲基苯氧基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000151
化合物51：N-(1-环丙基-6-N-甲基-N-环己基胺基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(4-三氟甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000152
化合物52：N-(1-环丙基-6-N-甲基-N-环己基胺基-2-(4-氟苯基)-5-苯并咪唑基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
Figure FDA0002735106950000153
6.一种药物组合物，其特征在于，含有药学有效量的权利要求1-5任一项的化合物或其药学上可接受盐以及药学上可接受的载体或赋形剂。
7.权利要求1-5任一项的化合物或其药学上可接受的盐在制备抑制STAT3的活性相关药物中的应用。
8.权利要求1-5任一项的化合物或其药学上可接受的盐在制备预防或治疗癌症药物中的应用。
9.根据权利要求8的应用，其特征在于，其中所述的癌症选自乳腺癌、***癌、卵巢癌、肝癌、胃癌、肺癌、结肠癌、食管癌、白血病、人脑胶质瘤或淋巴瘤。
10.制备权利要求1-5任一项的化合物或其药学上可接受的盐的方法，其特征在于，包括如下步骤：
Figure FDA0002735106950000161
a)单取代；b)双取代；c)还原；d)环合；e)形成异氰酸酯；f)形成氨基硫脲基团；g)缩合；h)环合；
其中：
1)式(II)化合物与伯胺发生单取代反应得式(III)化合物；
2)式(III)化合物继续与仲胺或伯醇发生双取代反应得式(IV)化合物；
3)R1为氟原子时，式(III)化合物经钯碳-甲酸铵还原后关环得式(V)化合物；R1不为氟原子时，式(IV)化合物经钯碳-甲酸铵还原后关环得式(V)化合物；
4)式(V)化合物与硫光气反应生成异氰酸酯，再与水合肼反应得式(VI)化合物；
5)式(VI)化合物与醛发生缩合反应，在三氯化铁的作用下成环得式(I)化合物；
其中，R1,R2,R3,R4定义分别同权利要求1-5中任意一项所定义。
CN202011130885.9A 2020-10-21 2020-10-21 苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑化合物及其制法和药物用途 Pending CN114380817A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011130885.9A CN114380817A (zh) 2020-10-21 2020-10-21 苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑化合物及其制法和药物用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011130885.9A CN114380817A (zh) 2020-10-21 2020-10-21 苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑化合物及其制法和药物用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114380817A true CN114380817A (zh) 2022-04-22

Family

ID=81194262

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011130885.9A Pending CN114380817A (zh) 2020-10-21 2020-10-21 苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑化合物及其制法和药物用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114380817A (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1665808A (zh) * 2002-05-06 2005-09-07 沃泰克斯药物股份有限公司 噻二唑或噁二唑及其作为jak蛋白激酶抑制剂的用途
CN102731488A (zh) * 2011-04-02 2012-10-17 中国医学科学院药物研究所 苯并咪唑类衍生物、及其制法和药物组合物与用途
WO2014202763A1 (en) * 2013-06-20 2014-12-24 Ab Science Benzimidazole derivatives as selective proteine kinase inhibitors

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1665808A (zh) * 2002-05-06 2005-09-07 沃泰克斯药物股份有限公司 噻二唑或噁二唑及其作为jak蛋白激酶抑制剂的用途
CN102731488A (zh) * 2011-04-02 2012-10-17 中国医学科学院药物研究所 苯并咪唑类衍生物、及其制法和药物组合物与用途
WO2014202763A1 (en) * 2013-06-20 2014-12-24 Ab Science Benzimidazole derivatives as selective proteine kinase inhibitors

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN114516867B (zh) 一类含氧五元杂环化合物、合成方法、药物组合物及用途
WO2011069039A1 (en) Hydrazone and diacyl hydrazine compounds and methods of use
WO2003043961A2 (en) Modulators of rho c activity
JP6951406B2 (ja) フラバグリン誘導体
JP5649652B2 (ja) 置換ヒドラジド類化合物及びその応用
CN113200969B (zh) 一种PI3Kα选择性抑制剂及其制备方法和应用
JP6876875B2 (ja) Ｐｒｃ２介在の疾患を治療するためのトリアゾロピリミジン、トリアゾロピリジン化合物及びその組成物
KR20140086002A (ko) Fms 키나아제 저해 활성을 갖는 피리다진 접합고리 유도체
KR20160122123A (ko) 저분자 c-myc 억제제들
WO2022107745A1 (ja) Ｃｏｖｉｄ－１９の治療剤又は予防剤
ES2782357T3 (es) Inhibidores de IRE 1 alfa
ES2774975T3 (es) Moduladores de hsp70 y métodos para fabricar y utilizar el mismo
CN115197225B (zh) 一种五元杂环并喹唑啉酮类化合物及其制备方法
CN114920759A (zh) 杂环-三氮唑并噻二唑杂环串联化合物、合成方法、药物组合物及用途
CN114380817A (zh) 苯并咪唑并2-氨基-1,3,4-噻二唑化合物及其制法和药物用途
CN111423379B (zh) 取代3-吲唑类Mcl-1蛋白抑制剂及制备方法和应用
CN106866642B (zh) 含芳基酰腙结构的喹唑啉类化合物及其应用
CA3190787A1 (en) Synthesis of novel imipridone derivatives and their evaluation for their anticancer activity
CN113105459B (zh) 一种***并嘧啶衍生物及其制备方法和应用
US20030171341A1 (en) Modulators of Rho C activity
US20030176474A1 (en) Modulators of Rho C activity
Siwach et al. 1, 2, 3‐Triazole‐based esters and carboxylic acids as nonclassical carbonic anhydrase inhibitors capable of cathepsin B inhibition
US6800634B2 (en) Modulators of Rho C activity
KR101297652B1 (ko) 항암활성을 지닌 카르보아졸계 화합물
CN111233843B (zh) 一种γ-丁烯酸内酯类衍生物及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination