CN114343045B - 一种保健压片糖果及其制备方法 - Google Patents

一种保健压片糖果及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种保健压片糖果及其制备方法，包括以下步骤：将糊精与水混合拌匀，加入β‑葡聚糖组合物、中药营养物、辅料混合拌匀后制粒，得到混合物颗粒；将混合物颗粒干燥、冷却至室温，再与硬脂酸镁混合拌匀，压片，得到所述保健压片糖果。本发明的保健压片糖果风味独特、口感好，有谷物发酵的香味、甜度适中，还具有安神理气、舒心解郁、降糖降压的保健效果。

Description

一种保健压片糖果及其制备方法
技术领域
本发明属于保健食品技术领域，具体涉及一种保健压片糖果及其制备方法。
背景技术
糖果作为一种受欢迎的休闲食品，如今人们不仅只关注它的口感、风味，还注重其营养组成是否有利健康、对人体是否有益。糖果的功能性、保健性成为研究热点。功能性糖果在满足味觉感受和提供热量外，还具有一些附加的功能，例如补充维生素的果味糖果、助消化健胃的糖果、润喉解暑的糖果、富含益生菌的奶味糖果等。
中国专利CN105685350A公开了一种糖果，属于保健食品，由以下原料组成：葡聚糖、麦芽糖醇、葡萄糖、蔗糖、橄榄油、小麦、小米以及甜瓜子制备而成，该发明的糖果口感细腻爽滑，可以帮助消除口腔异味，清新口气；中国专利CN105961793A公开了一种调节免疫力的压片糖果及其制备方法，括以下步骤：称取原料麦绿素粉、酵母β-葡聚糖粉过筛；将上述原料放入三维混合机充分混合均匀，之后倒入压片机料斗中进行压片即得，该发明的压片糖果可以调节人体酸碱平衡，增强人体抗氧化能力，提高人体免疫力，对于降低血脂血糖有一定的作用；但是上述糖果中含有的葡聚糖水溶性不佳，利用率较低，难以发挥好的保健功效。
发明内容
针对上述现有技术中存在的不足，本发明提供了一种保健压片糖果及其制备方法。
一种保健压片糖果的制备方法，包括以下步骤：
按照重量份计，将10-12份糊精与15-25份水混合拌匀，加入β-葡聚糖组合物60-70份、辅料20-25份，混合拌匀后制粒，制粒筛网为16-20目筛，得到混合物颗粒，将混合物颗粒在50-60℃干燥10-15h后，自然冷却至室温，再与0.5-1份硬脂酸镁混合拌匀，投入压片机内压片，得到保健压片糖果。
所述糊精选自麦芽糊精、β-环糊精中的至少一种。
所述辅料选自木糖醇、山梨糖醇、壳寡糖中的至少一种。
β-葡聚糖的生物活性与功能同其溶解度、分子量、分支度、空间构象均有影响。目前β-葡聚糖保健食品中以酵母β-葡聚糖的应用最为广泛，提取自酵母细胞壁，具有清除毒素、修复细胞、增强免疫力等保健功能。其主要结构为β-(1-3)-(1-6)糖苷键连接的多支链三螺旋结构生物活性高，但分子量较大，水溶性不好，影响吸收，进而影响其在生物体内发挥保健功能的效果。
燕麦中含有丰富的膳食纤维，不溶性和可溶性两种皆有。其中可溶性膳食纤维β-葡聚糖的含量明显高于其他谷物，具有调节血糖、降低血脂等保健功能。青稞β-葡聚糖是青稞籽粒胚乳细胞壁的主要成分，除具有降血糖等作用外，还具有增加胃动力、防止高原病等独特的保健功能。燕麦和青稞中β-葡聚糖主要结构为，由β-(1-3)和β-(1-4)糖苷键连接而成线性单螺旋结构多糖，水溶性较酵母β-葡聚糖更好。青稞还含有一种专门的胆固醇抑制因子。
食用菌β-葡聚糖与酵母β-葡聚糖结构类似，主要是由β-(1-3)-(1-6)糖苷键连接的葡聚糖。但不同的食用菌中β-葡聚糖结构又有区别，例如：裂褶菌β-葡聚糖较其他菌的β-葡聚糖分子量更大，但为天然水溶性。
所述β-葡聚糖组合物的制备方法，包括以下步骤：
1)将燕麦、青稞在80-90℃烘干10-16h后，分别粉碎并过20-40目筛，再按照重量比(1-2):(3-4)混合，得到混合干粉；
2)按照料液比1g:(10-20)mL将混合干粉加水搅拌均匀，70-75℃保温10-15min，自然冷却至室温，得到混合液，混合液经酶处理，得到酶解液；
3)将酵母粉、无机盐、维生素B1、酶解液按照重量比(6-10):(1-2):(0.008-0.015):(700-900)混合，得到液体培养基；
4)将食用菌接种于PDA平板培养基上，24-26℃恒温箱中培养15-25h，得到待用菌种，然后取待用菌种用水稀释至OD值为0.2-0.4的菌悬液；
5)按照重量份计，取10-12份菌悬液接种到400-650份步骤3)制备的液体培养基中，在24-26℃、80-120rpm条件下恒温振荡培养8-10d，得到发酵终产物；
6)将发酵终产物在4000-8000rpm离心20-30min，分别收集上层清液A和沉淀物A；
7)将沉淀物A、NaCl与水按照料液比1g:(0.3-0.5)g:(10-15)mL配置成悬浊液，调节pH至4.5-5.5，45-55℃保温20-24h，然后加热至100℃，在600-800W、30-50kHz超声条件下辅助自溶4-6h，自然冷却至室温后，4000-8000rpm离心20-30min，得到上层清液B和沉淀物C，沉淀物C用水抽滤冲洗至洗液为中性，得到沉淀物D，再经酶-碱纯化处理，得到上层清液C和β-葡聚糖Ⅱ；
8)将步骤6)所得上层清液A和步骤7)所得上层清液B、上层清液C合并，121℃高压灭菌10-20min，调节pH至4.4-4.6，2-4℃静置10-12h后，在6000-10000rpm离心10-20min，除去沉淀，得到上层清液D，将上层清液D在70-75℃、50-60rpm条件下真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/3-1/2，加入无水乙醇至溶液中乙醇的质量浓度为70-75％，2-4℃静置10-12h后，在4000-8000rpm离心10-20min，得到沉淀物Ⅰ，真空40-50℃烘干20-30h，得到β-葡聚糖Ⅰ；
9)将上述β-葡聚糖Ⅰ和β-葡聚糖Ⅱ混合，得到β-葡聚糖组合物。
本发明利用青稞、燕麦酶解后获得β-葡聚糖，而其他物质如淀粉转化为葡萄糖、蛋白质转化为氨基酸，作为碳源、氮源为后续食用菌发酵提供营养。食用菌生长过程中消耗葡萄糖和氨基酸，转化为β-葡聚糖部分溶解与发酵液，部分储存在菌体细胞壁中，同时降低葡萄糖和氨基酸等物质在发酵液中的含量，获得非水溶性β-葡聚糖的同时，提高发酵液中水溶性β-葡聚糖的得率和纯度。
将食用菌超声辅助自溶，部分水溶性β-葡聚糖释出，并入发酵液中经纯化处理得到水溶性β-葡聚糖，提高得率，并有助于提高后续酶-碱纯化的效果。然后将自溶沉淀物采用酶-碱纯化处理，提高β-葡聚糖纯度。酶处理结束后的溶液中也含有β-葡聚糖，并入发酵液，进一步提高β-葡聚糖得率和纯度。最后用碱处理沉淀物，获得非水溶性β-葡聚糖，与前述水溶性β-葡聚糖合并，获得β-葡聚糖组合物。
绣球菌β-葡聚糖生成量高，以非水溶性β-葡聚糖为主，裂褶菌则以水溶性β-葡聚糖为主，且生长繁殖过程中能产生以苹果酸为主的有机酸类物质，维持发酵环境的弱酸性，有利于绣球菌的生长，并带来果香味，丰富保健压片糖果的滋味。
所述酶处理包括以下步骤：
S1.调节混合液的pH至10-11，添加碱性蛋白酶，添加量为3-5U/g混合干粉，摇匀，得到酶解预备液A；
S2.将酶解预备液A放入恒温振荡水浴锅，45-60℃、120-180rpm条件下恒温振荡提取3-4h，在121℃高压灭酶10-20min，得到一次酶解液；
S3.调节蛋白酶解液的pH至6-7，添加α-淀粉酶，添加量为6-10U/g混合干粉，摇匀，得到酶解预备液B；
S4.将酶解预备液B放入恒温振荡水浴锅，45-65℃、120-180rpm条件下恒温振荡提取3-4h，在121℃高压灭酶10-20min，6000-10000rpm离心10-20min取上清液，得到酶解终产物。
所述酶-碱纯化处理，包括以下步骤：
K1.沉淀物D与水按照料液比1g:(4-6)mL混合，调节pH至6-7，添加木瓜蛋白酶，添加量为6-10U/g沉淀物D，在55-60℃酶解5-10h后，在6000-10000rpm离心10-20min，得到上层清液C和沉淀物X；
K2.将沉淀物X按照料液比1g：(2-3)mL与2-5wt％氢氧化钠水溶液混合，在60-80℃反应3-4h，4000-8000rpm离心20-30min，得到沉淀物Y，沉淀物Y用水抽滤冲洗至洗液为中性，再经-35-(-30)℃真空冷冻干燥18-24h，得到β-葡聚糖Ⅱ。
所述无机盐为KH2PO4，MgSO4的混合物。
所述食用菌选自鹿茸菇、绣球菌、裂褶菌中的至少一种。
优选的，所述食用菌为绣球菌和裂褶菌的混合物。
进一步优选的，所述食用菌由绣球菌和裂褶菌按照重量比(2-3):(1-1.2)组成。
优选的，所述保健压片糖果的制备方法中还添加了1-2重量份中药营养物。
所述中药营养物由以下方法制备而成：
将养心草、黄芪、沙棘、五味子、樱桃在50-60℃烘干20-25h后，分别粉碎并过50-100目筛，再按照重量比(1-2):(1-2):(2-3):(3-5):(3-5)混合，得到中药干粉；按照料液比1g:(5-10)mL将中药干粉加溶剂搅拌均匀，65-70℃保温浸提60-100min，所述溶剂依次为水、无水乙醇，各浸提一次，收集浸提液，减压浓缩，喷雾干燥，得到所述中药营养物。
本发明的中药营养物通过优选养心草、黄芪、沙棘、五味子、樱桃五种原料提取活性成分制得，不仅能够辅助提升压片糖果的降糖降压的功效，还能够起到安神理气、舒心解郁、增强人体免疫力的作用。其中，养心草，选用晾干的全草作为原料，养心草中含有甾醇、黄酮、萜类等活性成分，具有很好的抗氧化、清除自由基的能力，还能辅助降低血脂血压，促进血循环，保护心血管，安神养心。黄芪，选用晾干的黄芪根作为原料，黄芪含有皂苷类、黄酮类、多糖等活性成分，具有很好的抗氧化、抗菌的能力，还能补气抗疲劳，保肝、降血糖、增强人体免疫力。沙棘，选用晾干的沙棘果实作为原料，沙棘果实含有丰富的维生素类、黄酮类等活性成分，具有很好的清除氧自由基、抗辐射的能力，还能促进造血细胞生长，保肝，增强人体免疫力，养心。五味子，选用晾干的五味子果实作为原料，五味子果实含有五味子素类、多糖、维生素等活性成分，具有很好的抗氧化、抗衰老、抗炎的能力，还能生津益气，增强人体免疫力，养五脏。樱桃，选用晾干的中国樱桃的果实作为原料，樱桃含有维生素、胡萝卜素、多糖等活性成分，具有很好的清除自由基、抗衰老的能力，还能益气解毒，增强人体免疫力，舒心解郁。
本发明的有益效果：本发明的保健压片糖果风味独特、口感好，有谷物发酵的香味、甜度适中，还具有安神理气、舒心解郁、降糖降压的保健效果。采用青稞、燕麦作为原料依次经过酶解、食用菌发酵等获得β-葡聚糖，再分离纯化、复配得到β-葡聚糖组合物，作为压片糖果的主要成分之一。β-葡聚糖组合物中β-葡聚糖成分丰富，兼具不同分子结构、不同聚合度的水溶性和非水溶性β-葡聚糖成分，相互协同，生物活性高且功效全面。
具体实施方式
实施例、对比例所用原料如下：
青稞，Hordeum vulgare L.var.Nudum Hook.f.，产地：西藏岗巴县。
燕麦，Avena sativa L.，产地：内蒙古武川县。
裂褶菌，Schizophyllum commune Fr.，编号：CICC 2591，购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
绣球菌，Sparassis crispa，保藏编号：YUMCC sp3，购自中国典型培养物保藏管理中心。
酵母粉，食品级，目数：80-100，购自扶风斯诺特生物科技有限公司。
碱性蛋白酶，食品级，酶活力：20万U/g，购自河南中辰生物科技有限公司。
木瓜蛋白酶，食品级，酶活力：10万U/g，购自河南中辰生物科技有限公司。
α-淀粉酶，食品级，酶活力：2万U/g，购自河南中辰生物科技有限公司。
β-葡聚糖酶，型号：R706622，酶活力：50U/mg，购自成都欧恩瑞思化学试剂有限公司。
PDA平板培养基，货号：021050，购自广东环凯微生物科技有限公司。
麦芽糊精，型号：食品级，货号：861，购自河南兴源化工产品有限公司。
β-环糊精，型号：食品级，货号：242，购自河南兴源化工产品有限公司。
实施例1
保健压片糖果的制备方法，包括以下步骤：
按照重量份计，将12份糊精与20份水混合拌匀，加入β-葡聚糖组合物68份、辅料22份，混合拌匀后制粒，制粒筛网为16目筛，得到混合物颗粒，将混合物颗粒在55℃干燥13h后，自然冷却至室温，再与0.8份硬脂酸镁混合拌匀，投入压片机内压成500mg圆片，得到保健压片糖果。
所述糊精由麦芽糊精与β-环糊精按照重量比2:1组成。
所述辅料由木糖醇、山梨糖醇按照重量比2:1组成。
所述β-葡聚糖组合物的制备方法，包括以下步骤：
1)将燕麦、青稞在85℃烘干12h后，分别粉碎并过40目筛，再按照重量比1:3混合，得到混合干粉；
2)按照料液比1g:15mL将混合干粉加水搅拌均匀，72℃保温10min，自然冷却至室温，得到混合液，混合液经酶处理，得到酶解终产物；
3)按照重量份计，将酵母粉、无机盐、维生素B1、酶解终产物按照重量比8:1.5:0.01:800混合，得到液体培养基；
4)将食用菌接种于PDA平板培养基上，25℃恒温箱中培养24h，得到待用菌种，然后取待用菌种用水稀释至OD值为0.3的菌悬液；
5)按照重量份计，取10份菌悬液接种到500份步骤3)制备的液体培养基中，在25℃、100rpm条件下恒温振荡培养8d，得到发酵终产物；
6)将发酵终产物在6000rpm离心20min，收集上层清液A；
7)将上层清液A在121℃高压灭菌15min后，pH至4.5，3℃静置10h后，在8000rpm离心15min，除去沉淀，得到上层清液B，将上层清液B在72℃、60rpm条件下真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/2，加入无水乙醇至溶液中乙醇的质量浓度为70％，3℃静置12h后，在6000rpm离心15min，得到沉淀物Ⅰ，真空45℃烘干24h，得到β-葡聚糖组合物。
所述酶处理包括以下步骤：
S1.调节混合液的pH至10.5，添加碱性蛋白酶，添加量为4U/g混合干粉，摇匀，得到酶解预备液A；
S2.将酶解预备液A放入恒温振荡水浴锅，50℃、140rpm条件下恒温振荡提取3h，在121℃高压灭酶15min，得到一次酶解液；
S3.调节一次酶解液的pH至7，添加α-淀粉酶，添加量为8U/g混合干粉，摇匀，得到酶解预备液B；
S4.将酶解预备液B放入恒温振荡水浴锅，55℃、120rpm条件下恒温振荡提取4h，在121℃高压灭酶15min，8000rpm离心15min取上清液，得到酶解终产物。
所述无机盐由KH2PO4和MgSO4按照重量比2:1组成。
所述食用菌为绣球菌。
实施例2
保健压片糖果的制备方法，包括以下步骤：
按照重量份计，将12份糊精与20份水混合拌匀，加入β-葡聚糖组合物68份、辅料22份，混合拌匀后制粒，制粒筛网为16目筛，得到混合物颗粒，将混合物颗粒在55℃干燥13h后，自然冷却至室温，再与0.8份硬脂酸镁混合拌匀，投入压片机内压成500mg圆片，得到保健压片糖果。
所述糊精由麦芽糊精与β-环糊精按照重量比2:1组成。
所述辅料由木糖醇、山梨糖醇按照重量比2:1组成。
所述β-葡聚糖组合物的制备方法，包括以下步骤：
1)将燕麦、青稞在85℃烘干12h后，分别粉碎并过40目筛，再按照重量比1:3混合，得到混合干粉；
2)按照料液比1g:15mL将混合干粉加水搅拌均匀，72℃保温10min，自然冷却至室温，得到混合液，混合液经酶处理，得到酶解终产物；
3)按照重量份计，将酵母粉、无机盐、维生素B1、酶解终产物按照重量比8:1.5:0.01:800混合，得到液体培养基；
4)将食用菌接种于PDA平板培养基上，25℃恒温箱中培养24h，得到待用菌种，然后取待用菌种用水稀释至OD值为0.3的菌悬液；
5)按照重量份计，取10份菌悬液接种到500份步骤3)制备的液体培养基中，在25℃、100rpm条件下恒温振荡培养8d，得到发酵终产物；
6)将发酵终产物在6000rpm离心20min，收集沉淀物A；
7)将沉淀物A、NaCl与水按照料液比1g:0.4g:14mL配置成悬浊液，调节pH至5，50℃保温20h，然后加热至100℃，在800W、40kHz超声条件下辅助自溶5h，自然冷却至室温后，6000rpm离心25min，得到沉淀物C，沉淀物C用水抽滤冲洗至洗液为中性，得到沉淀物D，再经酶-碱纯化处理，得到β-葡聚糖组合物。
所述酶-碱纯化处理，包括以下步骤：
K1.沉淀物D与水按照料液比1g:5mL混合，调节pH至6.5，添加木瓜蛋白酶，添加量为8U/g沉淀物D，在55℃酶解6h后，在8000rpm离心15min，得到沉淀物X；
K2.将沉淀物X按照料液比1g：3mL与4wt％氢氧化钠水溶液混合，在70℃反应3h，6000rpm离心20min，得到沉淀物Y，沉淀物Y用水抽滤冲洗至洗液为中性，再经-35℃真空冷冻干燥20h，得到β-葡聚糖组合物。
所述酶处理同实施例1。
所述无机盐由KH2PO4和MgSO4按照重量比2:1组成。
所述食用菌为绣球菌。
实施例3
保健压片糖果的制备方法，包括以下步骤：
按照重量份计，将12份糊精与20份水混合拌匀，加入β-葡聚糖组合物68份、辅料22份，混合拌匀后制粒，制粒筛网为16目筛，得到混合物颗粒，将混合物颗粒在55℃干燥13h后，自然冷却至室温，再与0.8份硬脂酸镁混合拌匀，投入压片机内压成500mg圆片，得到保健压片糖果。
所述糊精由麦芽糊精与β-环糊精按照重量比2:1组成。
所述辅料由木糖醇、山梨糖醇按照重量比2:1组成。
所述β-葡聚糖组合物的制备方法，包括以下步骤：
1)将燕麦、青稞在85℃烘干12h后，分别粉碎并过40目筛，再按照重量比1:3混合，得到混合干粉；
2)按照料液比1g:15mL将混合干粉加水搅拌均匀，72℃保温10min，自然冷却至室温，得到混合液，混合液经酶处理，得到酶解终产物；
3)按照重量份计，将酵母粉、无机盐、维生素B1、酶解终产物按照重量比8:1.5:0.01:800混合，得到液体培养基；
4)将食用菌接种于PDA平板培养基上，25℃恒温箱中培养24h，得到待用菌种，然后取待用菌种用水稀释至OD值为0.3的菌悬液；
5)按照重量份计，取10份菌悬液接种到500份步骤3)制备的液体培养基中，在25℃、100rpm条件下恒温振荡培养8d，得到发酵终产物；
6)将发酵终产物在6000rpm离心20min，分别收集上层清液A和沉淀物A；
7)将沉淀物A、NaCl与水按照料液比1g:0.4g:14mL配置成悬浊液，调节pH至5，50℃保温20h，然后加热至100℃，在800W、40kHz超声条件下辅助自溶5h，自然冷却至室温后，6000rpm离心25min，得到上层清液B和沉淀物C，沉淀物C用水抽滤冲洗至洗液为中性，得到沉淀物D，再经酶-碱纯化处理，得到上层清液C和β-葡聚糖Ⅱ；
8)将步骤6)所得上层清液A和步骤7)所得上层清液B、上层清液C合并，在121℃高压灭菌15min后，调节pH至4.5，3℃静置10h后，在8000rpm离心15min，除去沉淀，得到上层清液D，将上层清液D在72℃、60rpm条件下真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/2，加入无水乙醇至溶液中乙醇的质量浓度为70％，3℃静置12h后，在6000rpm离心15min，得到沉淀物Ⅰ，真空45℃烘干24h，得到β-葡聚糖Ⅰ；
9)将步骤8)所得β-葡聚糖Ⅰ和步骤7)所得β-葡聚糖Ⅱ混合，得到β-葡聚糖组合物。
所述酶处理包括以下步骤：
S1.调节混合液的pH至10.5，添加碱性蛋白酶，添加量为4U/g混合干粉，摇匀，得到酶解预备液A；
S2.将酶解预备液A放入恒温振荡水浴锅，50℃、140rpm条件下恒温振荡提取3h，在121℃高压灭酶15min，得到一次酶解液；
S3.调节一次酶解液的pH至7，添加α-淀粉酶，添加量为8U/g混合干粉，摇匀，得到酶解预备液B；
S4.将酶解预备液B放入恒温振荡水浴锅，55℃、120rpm条件下恒温振荡提取4h，在121℃高压灭酶15min，8000rpm离心15min取上清液，得到酶解终产物。
所述酶-碱纯化处理，包括以下步骤：
K1.沉淀物D与水按照料液比1g:5mL混合，调节pH至6.5，添加添加木瓜蛋白酶，添加量为8U/g沉淀物D，在55℃酶解6h后，在8000rpm离心15min，得到上层清液C和沉淀物X；
K2.将沉淀物X按照料液比1g：3mL与4wt％氢氧化钠水溶液混合，在70℃反应3h，6000rpm离心20min，得到沉淀物Y，沉淀物Y用水抽滤冲洗至洗液为中性，再经-35℃真空冷冻干燥20h，得到β-葡聚糖Ⅱ。
所述无机盐由KH2PO4和MgSO4按照重量比2:1组成。
所述食用菌为绣球菌。
实施例4
与实施例3相同，区别仅在于：所述β-葡聚糖组合物的制备方法，包括以下步骤：
1)将燕麦、青稞在85℃烘干12h后，分别粉碎并过40目筛，再按照重量比1:3混合，得到混合干粉；
2)按照料液比1g:15mL将混合干粉加水搅拌均匀，72℃保温10min，自然冷却至室温，得到混合液，混合液经酶处理，得到酶解终产物；
3)按照重量份计，将酵母粉、无机盐、维生素B1、酶解终产物按照重量比8:1.5:0.01:800混合，得到液体培养基；
4)将食用菌接种于PDA平板培养基上，25℃恒温箱中培养24h，得到待用菌种，然后取待用菌种用水稀释至OD值为0.3的菌悬液；
5)按照重量份计，取10份菌悬液接种到500份步骤3)制备的液体培养基中，在25℃、100rpm条件下恒温振荡培养8d，得到发酵终产物；
6)将发酵终产物在6000rpm离心20min，分别收集上层清液A和沉淀物A；
7)将沉淀物A、NaCl与水按照料液比1g:0.4g:14mL配置成悬浊液，调节pH至5，50℃保温20h，然后加热至100℃，在800W、40kHz超声条件下辅助自溶5h，自然冷却至室温后，6000rpm离心25min，得到上层清液B和沉淀物C，沉淀物C用水抽滤冲洗至洗液为中性，得到沉淀物D，再经酶-碱纯化处理，得到上层清液C和β-葡聚糖Ⅱ；
8)将步骤6)所得上层清液A和步骤7)所得上层清液B、上层清液C合并，在121℃高压灭菌15min后，调节pH至4.5，3℃静置10h后，在8000rpm离心15min，除去沉淀，得到上层清液D，将上层清液D在72℃、60rpm条件下真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/2，加入无水乙醇至溶液中乙醇的质量浓度为70％，3℃静置12h后，在6000rpm离心15min，得到沉淀物Ⅰ，真空45℃烘干24h，得到β-葡聚糖Ⅰ；
9)将步骤8)所得β-葡聚糖Ⅰ和步骤7)所得β-葡聚糖Ⅱ混合，得到β-葡聚糖组合物。
所述酶处理同实施例3。
所述酶-碱纯化处理同实施例3。
所述无机盐由KH2PO4和MgSO4按照重量比2:1组成。
所述食用菌为裂褶菌。
实施例5
与实施例3相同，区别仅在于：所述β-葡聚糖组合物的制备方法，包括以下步骤：
1)将燕麦、青稞在85℃烘干12h后，分别粉碎并过40目筛，再按照重量比1:3混合，得到混合干粉；
2)按照料液比1g:15mL将混合干粉加水搅拌均匀，72℃保温10min，自然冷却至室温，得到混合液，混合液经酶处理，得到酶解终产物；
3)按照重量份计，将酵母粉、无机盐、维生素B1、酶解终产物按照重量比8:1.5:0.01:800混合，得到液体培养基；
4)将食用菌接种于PDA平板培养基上，25℃恒温箱中培养24h，得到待用菌种，然后取待用菌种用水稀释至OD值为0.3的菌悬液；
5)按照重量份计，取10份菌悬液接种到500份步骤3)制备的液体培养基中，在25℃、100rpm条件下恒温振荡培养8d，得到发酵终产物；
6)将发酵终产物在6000rpm离心20min，分别收集上层清液A和沉淀物A；
7)将沉淀物A、NaCl与水按照料液比1g:0.4g:14mL配置成悬浊液，调节pH至5，50℃保温20h，然后加热至100℃，在800W、40kHz超声条件下辅助自溶5h，自然冷却至室温后，6000rpm离心25min，得到上层清液B和沉淀物C，沉淀物C用水抽滤冲洗至洗液为中性，得到沉淀物D，再经酶-碱纯化处理，得到上层清液C和β-葡聚糖Ⅱ；
8)将步骤6)所得上层清液A和步骤7)所得上层清液B、上层清液C合并，在121℃高压灭菌15min后，调节pH至4.5，3℃静置10h后，在8000rpm离心15min，除去沉淀，得到上层清液D，将上层清液D在72℃、60rpm条件下真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/2，加入无水乙醇至溶液中乙醇的质量浓度为70％，3℃静置12h后，在6000rpm离心15min，得到沉淀物Ⅰ，真空45℃烘干24h，得到β-葡聚糖Ⅰ；
9)将步骤8)所得β-葡聚糖Ⅰ和步骤7)所得β-葡聚糖Ⅱ混合，得到β-葡聚糖组合物。
所述酶处理同实施例3。
所述酶-碱纯化处理同实施例3。
所述无机盐由KH2PO4和MgSO4按照重量比2:1组成。
所述食用菌由绣球菌和裂褶菌按照重量比2:1组成。
实施例6
保健压片糖果的制备方法，包括以下步骤：
按照重量份计，将12份糊精与20份水混合拌匀，加入β-葡聚糖组合物68份、中药营养物2份、辅料20份，混合拌匀后制粒，制粒筛网为16目筛，得到混合物颗粒，将混合物颗粒在55℃干燥13h后，自然冷却至室温，再与0.8份硬脂酸镁混合拌匀，投入压片机内压成500mg圆片，得到保健压片糖果。
所述糊精由麦芽糊精与β-环糊精按照重量比2:1组成。
所述辅料由木糖醇、山梨糖醇按照重量比2:1组成。
所述β-葡聚糖组合物的制备方法，包括以下步骤：
1)将燕麦、青稞在85℃烘干12h后，分别粉碎并过40目筛，再按照重量比1:3混合，得到混合干粉；
2)按照料液比1g:15mL将混合干粉加水搅拌均匀，72℃保温10min，自然冷却至室温，得到混合液，混合液经酶处理，得到酶解终产物；
3)按照重量份计，将酵母粉、无机盐、维生素B1、酶解终产物按照重量比8:1.5:0.01:800混合，得到液体培养基；
4)将食用菌接种于PDA平板培养基上，25℃恒温箱中培养24h，得到待用菌种，然后取待用菌种用水稀释至OD值为0.3的菌悬液；
5)按照重量份计，取10份菌悬液接种到500份步骤3)制备的液体培养基中，在25℃、100rpm条件下恒温振荡培养8d，得到发酵终产物；
6)将发酵终产物在6000rpm离心20min，分别收集上层清液A和沉淀物A；
7)将沉淀物A、NaCl与水按照料液比1g:0.4g:14mL配置成悬浊液，调节pH至5，50℃保温20h，然后加热至100℃，在800W、40kHz超声条件下辅助自溶5h，自然冷却至室温后，6000rpm离心25min，得到上层清液B和沉淀物C，沉淀物C用水抽滤冲洗至洗液为中性，得到沉淀物D，再经酶-碱纯化处理，得到上层清液C和β-葡聚糖Ⅱ；
8)将步骤6)所得上层清液A和步骤7)所得上层清液B、上层清液C合并，在121℃高压灭菌15min后，调节pH至4.5，3℃静置10h后，在8000rpm离心15min，除去沉淀，得到上层清液D，将上层清液D在72℃、60rpm条件下真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/2，加入无水乙醇至溶液中乙醇的质量浓度为70％，3℃静置12h后，在6000rpm离心15min，得到沉淀物Ⅰ，真空45℃烘干24h，得到β-葡聚糖Ⅰ；
9)将步骤8)所得β-葡聚糖Ⅰ和步骤7)所得β-葡聚糖Ⅱ混合，得到β-葡聚糖组合物。
所述酶处理包括以下步骤：
S1.调节混合液的pH至10.5，添加碱性蛋白酶，添加量为4U/g混合干粉，摇匀，得到酶解预备液A；
S2.将酶解预备液A放入恒温振荡水浴锅，50℃、140rpm条件下恒温振荡提取3h，在121℃高压灭酶15min，得到一次酶解液；
S3.调节一次酶解液的pH至7，添加α-淀粉酶，添加量为8U/g混合干粉，摇匀，得到酶解预备液B；
S4.将酶解预备液B放入恒温振荡水浴锅，55℃、120rpm条件下恒温振荡提取4h，在121℃高压灭酶15min，8000rpm离心15min取上清液，得到酶解终产物。
所述酶-碱纯化处理，包括以下步骤：
K1.沉淀物D与水按照料液比1g:5mL混合，调节pH至6.5，添加添加木瓜蛋白酶，添加量为8U/g沉淀物D，在55℃酶解6h后，在8000rpm离心15min，得到上层清液C和沉淀物X；
K2.将沉淀物X按照料液比1g：3mL与4wt％氢氧化钠水溶液混合，在70℃反应3h，6000rpm离心20min，得到沉淀物Y，沉淀物Y用水抽滤冲洗至洗液为中性，再经-35℃真空冷冻干燥20h，得到β-葡聚糖Ⅱ。
所述无机盐由KH2PO4和MgSO4按照重量比2:1组成。
所述食用菌由绣球菌和裂褶菌按照重量比2:1组成。
所述中药营养物由以下方法制备而成：
将养心草、黄芪、沙棘、五味子、樱桃在60℃烘干20h后，分别粉碎并过80目筛，再按照重量比1.5:1.5:2:3:3混合，得到中药干粉；按照料液比1g:8mL将中药干粉加溶剂搅拌均匀，68℃保温浸提90min，所述溶剂依次为水、无水乙醇，各浸提一次，收集浸提液，减压浓缩，喷雾干燥，得到所述中药营养物。
实施例6的保健压片糖果添加了中药营养物，该中药营养物通过优选养心草、黄芪、沙棘、五味子、樱桃五种原料提取活性成分制得，不仅能够辅助提升压片糖果的降糖降压的功效，还能够起到安神理气、舒心解郁、增强人体免疫力的作用。
测试例1
降血压效果测试：选择60名收缩压在160-180mmHg之间的男性高血压患者，随机分为6组，每组10人；给每人每天供给相同的食物和饮水，另按组分别供给实施例1-6制备的保健压片糖果，每天3次，每次500mg。分别测量各组在0天、7天的收缩压，取平均值，计算变化值。血压的测量统一在早上8点，当天未进食时进行。
表1：降血压效果测试结果
7天后血压变化值/(mmHg)
实施例1 -18
实施例2 -16
实施例3 -22
实施例4 -24
实施例5 -27
实施例6 -29
整体效果来看，服用保健压片糖果后降血压效果明显，各实施例效果不同。实施例1仅收集了上层清液A中的β-葡聚糖，主要为燕麦、青稞酶解后生成的水溶性β-葡聚糖，和少量食用菌生长代谢产生的水溶性β-葡聚糖，易于被生物体吸收，起到降血压效果；实施例2仅收集了沉淀物A中的β-葡聚糖，主要为食用菌生长代谢产生的非水溶性β-葡聚糖，生物活性高，但大部分不便于生物体吸收，因此降血压效果与实施例1差别不大；实施例3同时收集上层清液A和沉淀物A，并将沉淀物A制备非水溶性β-葡聚糖过程中得到的上层清液B和上层清液C并入上层清液A，得到水溶性β-葡聚糖，提高水溶性β-葡聚糖得率；最后将获得的水溶性β-葡聚糖和非水溶性β-葡聚糖混合得到β-葡聚糖组合物，其中兼有燕麦、青稞、食用菌中的水溶性、非水溶性的β-葡聚糖，不同结构的β-葡聚糖协同作用，提高降血压的保健效果。实施例4以裂褶菌替换绣球菌进行发酵，非水溶性β-葡聚糖得率较低，β-葡聚糖组合物中多为水溶性β-葡聚糖，更易吸收，但没有绣球菌中生物活性更高的非水溶性β-葡聚糖结构，因此效果与实施例3相近。实施例5将实施例3、4中分别单独使用的绣球菌和裂褶菌复配进行培养，裂褶菌的代谢产物能促进绣球菌的生长，同时提高水溶性和非水溶性β-葡聚糖的得率和纯度，提高生物活性。
测试例2
黏度测试：分别将实施例1-5制备的β-葡聚糖组合物按照料液比1g:80mL溶解于DMSO/水混合溶液中得到样本溶液，DMSO与水的体积比为1:5，控制温度为25℃，用NDJ-5S黏度计1号转子，设定转速12r/min，测试样本溶液黏度。
表2：β-葡聚糖组合物黏度测试结果
黏度/(mPa·s)
实施例1 25
实施例2 42
实施例3 33
实施例4 31
实施例5 27
β-葡聚糖组合物的黏度与其功能有很大关系。实施例1的β-葡聚糖基本全来自燕麦、青稞水溶性β-葡聚糖，实施例2β-葡聚糖来自食用菌的非水溶性β-葡聚糖，其聚合度、分子量相对较大，且水溶性不好，黏性明显更大。实施例3同时含有实施例1来自燕麦、青稞水溶性β-葡聚糖和实施例2来自食用菌的非水溶性β-葡聚糖，黏度介于实施例1和实施例2之间。实施例4与实施例3相比，用裂褶菌代替绣球菌发酵，由于裂褶菌主要为水溶性β-葡聚糖，非水溶性β-葡聚糖少，但大分子糖链间相互作用力更大，因此黏度与实施例3相当、略有下降。实施例5将裂褶菌和绣球菌复配，获得的β-葡聚糖组合物中β-葡聚糖纯度更高，溶解度更好，黏度降低。

Claims (6)

1.一种保健压片糖果的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
按照重量份计，将糊精10-12份与水15-25份混合拌匀，加入β-葡聚糖组合物60-70份、中药营养物1-2份、辅料20-25份，混合拌匀后制粒，得到混合物颗粒，将混合物颗粒干燥、冷却至室温，再与0.5-1份硬脂酸镁混合拌匀，压片，得到所述保健压片糖果；
所述中药营养物由以下方法制备而成：
将养心草、黄芪、沙棘、五味子、樱桃烘干后，分别粉碎过筛，再按照重量比（1-2）:（1-2）:（2-3）:（3-5）:（3-5）混合，得到中药干粉；按照料液比1g:（5-10）mL将中药干粉加溶剂搅拌均匀，65-70℃保温浸提60-100min，所述溶剂依次为水、无水乙醇，各浸提一次，收集浸提液，减压浓缩，喷雾干燥，得到所述中药营养物；
所述β-葡聚糖组合物的制备方法，包括以下步骤：
1）将燕麦、青稞烘干后，分别粉碎过筛，再按照重量比（1-2）:（3-4）混合，得到混合干粉；
2）按照料液比1g:（10-20）mL将混合干粉加水搅拌均匀，70-75℃保温10-15min，自然冷却至室温，得到混合液，混合液经酶处理，得到酶解液；
3）将酵母粉、无机盐、维生素B1、酶解液按照重量比（6-10）:（1-2）:（0.008-0.015）:（700-900）混合，得到液体培养基；
4）将食用菌接种于PDA平板培养基上，24-26℃恒温箱中培养15-25h，得到待用菌种，然后取待用菌种用水稀释得到菌悬液；所述食用菌由绣球菌和裂褶菌按照重量比(2-3):(1-1.2)组成；
5）按照重量份计，取10-12份菌悬液接种到400-650份步骤3）制备的液体培养基中，在24-26℃、80-120rpm条件下恒温振荡培养8-10d，得到发酵终产物；
6）将发酵终产物在4000-8000rpm离心20-30min，分别收集上层清液A和沉淀物A；
7）将沉淀物A、NaCl与水配置成悬浊液，保温，然后超声辅助自溶，离心，得到上层清液B和沉淀物C，沉淀物C用水抽滤冲洗至洗液为中性，得到沉淀物D，再经酶-碱纯化处理，得到上层清液C和β-葡聚糖Ⅱ；
8）将步骤6）所得上层清液A和步骤7）所得上层清液B、上层清液C合并，灭菌，调节pH至4.4-4.6，静置，离心，除去沉淀，得到上层清液D，将上层清液D浓缩，加入无水乙醇静置，离心，得到沉淀物Ⅰ，烘干，得到β-葡聚糖Ⅰ；
9）将上述β-葡聚糖Ⅰ和β-葡聚糖Ⅱ混合，得到β-葡聚糖组合物；
所述酶-碱纯化处理，包括以下步骤：
K1.沉淀物D与水按照料液比1g:（4-6）mL混合，调节pH至6-7，添加木瓜蛋白酶，添加量为6-10U/g沉淀物D，在55-60℃酶解5-10h后，在6000-10000rpm离心10-20min，得到上层清液C和沉淀物X；
K2.将沉淀物X按照料液比1g：（2-3）mL与2-5wt%氢氧化钠水溶液混合，在60-80℃反应3-4h，4000-8000rpm离心20-30min，得到沉淀物Y，沉淀物Y用水抽滤冲洗至洗液为中性，再经-35~-30℃真空冷冻干燥18-24h，得到β-葡聚糖Ⅱ。
2.如权利要求1所述保健压片糖果的制备方法，其特征在于，所述步骤7）具体为：将沉淀物A、NaCl与水按照料液比1g:（0.3-0.5）g:（10-15）mL配置成悬浊液，调节pH至4.5-5.5，45-55℃保温20-24h，然后加热至100℃，在600-800W、30-50kHz超声条件下辅助自溶4-6h，自然冷却至室温后，4000-8000rpm离心20-30min，得到上层清液B和沉淀物C，沉淀物C用水抽滤冲洗至洗液为中性，得到沉淀物D，再经酶-碱纯化处理，得到上层清液C和β-葡聚糖Ⅱ。
3.如权利要求1所述保健压片糖果的制备方法，其特征在于，所述步骤8）具体为：将步骤6）所得上层清液A和步骤7）所得上层清液B、上层清液C合并，121℃高压灭菌10-20min，调节pH至4.4-4.6，2-4℃静置10-12h后，在6000-10000rpm离心10-20min，除去沉淀，得到上层清液D，将上层清液D在70-75℃、50-60rpm条件下真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/3-1/2，加入无水乙醇至溶液中乙醇的质量浓度为70-75%，2-4℃静置10-12h后，在4000-8000rpm离心10-20min，得到沉淀物Ⅰ，真空40-50℃烘干20-30h，得到β-葡聚糖Ⅰ。
4.如权利要求1所述保健压片糖果的制备方法，其特征在于，所述糊精选自麦芽糊精、β-环糊精中的至少一种；所述辅料选自木糖醇、山梨糖醇、壳寡糖中的至少一种。
5.如权利要求1所述保健压片糖果的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
按照重量份计，将12份糊精与20份水混合拌匀，加入β-葡聚糖组合物68份、中药营养物2份、辅料20份，混合拌匀后制粒，制粒筛网为16目筛，得到混合物颗粒，将混合物颗粒在55℃干燥13h后，自然冷却至室温，再与0.8份硬脂酸镁混合拌匀，投入压片机内压成500mg圆片，得到保健压片糖果；
所述糊精由麦芽糊精与β-环糊精按照重量比2:1组成；
所述辅料由木糖醇、山梨糖醇按照重量比2:1组成；
所述β-葡聚糖组合物的制备方法，包括以下步骤：
1）将燕麦、青稞在85℃烘干12h后，分别粉碎并过40目筛，再按照重量比1:3混合，得到混合干粉；
2）按照料液比1g:15mL将混合干粉加水搅拌均匀，72℃保温10min，自然冷却至室温，得到混合液，混合液经酶处理，得到酶解终产物；
3）按照重量份计，将酵母粉、无机盐、维生素B1、酶解终产物按照重量比8:1.5:0.01:800混合，得到液体培养基；
4）将食用菌接种于PDA平板培养基上，25℃恒温箱中培养24h，得到待用菌种，然后取待用菌种用水稀释至OD值为0.3的菌悬液；
5）按照重量份计，取10份菌悬液接种到500份步骤3）制备的液体培养基中，在25℃、100rpm条件下恒温振荡培养8d，得到发酵终产物；
6）将发酵终产物在6000rpm离心20min，分别收集上层清液A和沉淀物A；
7）将沉淀物A、NaCl与水按照料液比1g:0.4g:14mL配置成悬浊液，调节pH至5，50℃保温20h，然后加热至100℃，在800W、40kHz超声条件下辅助自溶5h，自然冷却至室温后，6000rpm离心25min，得到上层清液B和沉淀物C，沉淀物C用水抽滤冲洗至洗液为中性，得到沉淀物D，再经酶-碱纯化处理，得到上层清液C和β-葡聚糖Ⅱ；
8）将步骤6）所得上层清液A和步骤7）所得上层清液B、上层清液C合并，在121℃高压灭菌15min后，调节pH至4.5，3℃静置10h后，在8000rpm离心15min，除去沉淀，得到上层清液D，将上层清液D在72℃、60rpm条件下真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/2，加入无水乙醇至溶液中乙醇的质量浓度为70%，3℃静置12h后，在6000rpm离心15min，得到沉淀物Ⅰ，真空45℃烘干24h，得到β-葡聚糖Ⅰ；
9）将步骤8）所得β-葡聚糖Ⅰ和步骤7）所得β-葡聚糖Ⅱ混合，得到β-葡聚糖组合物；
所述酶处理包括以下步骤：
S1.调节混合液的pH至10.5，添加碱性蛋白酶，添加量为4U/g混合干粉，摇匀，得到酶解预备液A；
S2.将酶解预备液A放入恒温振荡水浴锅，50℃、140rpm条件下恒温振荡提取3h，在121℃高压灭酶15min，得到一次酶解液；
S3.调节一次酶解液的pH至7，添加α-淀粉酶，添加量为8U/g混合干粉，摇匀，得到酶解预备液B；
S4.将酶解预备液B放入恒温振荡水浴锅，55℃、120rpm条件下恒温振荡提取4h，在121℃高压灭酶15min，8000rpm离心15min取上清液，得到酶解终产物；
所述酶-碱纯化处理，包括以下步骤：
K1.沉淀物D与水按照料液比1g:5mL混合，调节pH至6.5，添加木瓜蛋白酶，添加量为8U/g沉淀物D，在55℃酶解6h后，在8000rpm离心15min，得到上层清液C和沉淀物X；
K2.将沉淀物X按照料液比1g：3mL与4wt%氢氧化钠水溶液混合，在70℃反应3h，6000rpm离心20min，得到沉淀物Y，沉淀物Y用水抽滤冲洗至洗液为中性，再经-35℃真空冷冻干燥20h，得到β-葡聚糖Ⅱ；
所述无机盐由KH2PO4和MgSO4按照重量比2:1组成；
所述食用菌由绣球菌和裂褶菌按照重量比2:1组成；
所述中药营养物由以下方法制备而成：
将养心草、黄芪、沙棘、五味子、樱桃在60℃烘干20h后，分别粉碎并过80目筛，再按照重量比1.5:1.5:2:3:3混合，得到中药干粉；按照料液比1g:8mL将中药干粉加溶剂搅拌均匀，68℃保温浸提90min，所述溶剂依次为水、无水乙醇，各浸提一次，收集浸提液，减压浓缩，喷雾干燥，得到所述中药营养物。
6.一种保健压片糖果，其特征在于，采用权利要求1-5任一项所述方法制备而成。
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