CN114262712B - 一种普通小麦基因TaGRF5及其应用 - Google Patents

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CN114262712B CN202210084632.5A CN202210084632A CN114262712B CN 114262712 B CN114262712 B CN 114262712B CN 202210084632 A CN202210084632 A CN 202210084632A CN 114262712 B CN114262712 B CN 114262712B
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Abstract

本发明涉及一种普通小麦基因TaGRF5及其应用,所述小麦基因TaGRF5的cDNA序列如SEQ ID NO.1所示,或为与SEQ ID NO.1完全互补配对的序列,或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的序列。该基因全长为1321 bp,编码368个氨基酸,蛋白分子量为39.89 kDa。通过功能研究发现,上述TaGRF5基因能够提高植物光合能力,使植株对盐胁迫和干旱胁迫表现出极高的耐受性。本发明对提高小麦光合作用、增强植株抗逆性、增加产量有重要意义。

Description

一种普通小麦基因TaGRF5及其应用
技术领域
本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种普通小麦基因TaGRF5及其应用。
背景技术
小麦是我国的三大主粮之一,保障其稳产、高产与国家粮食安全、经济社会发展,甚至国家长治久安密切相关。小麦在生长发育过程中,不可避免会遇到高盐、干旱、高温和氧化损伤等非生物胁迫,对小麦的生长发育和产量产生不利影响。同时,光合作用也是决定小麦产量潜力的一个重要因素,同样影响着小麦籽粒发育过程,并最终决定小麦的产量和品质。因此,培育产量高、抗性强的小麦品种对于保障粮食安全具有重要意义。
生长调控因子GRFs是植物特有的转录因子家族,其在调控植物的叶片生长、根和种子发育、开花机制、逆境响应等生命过程中起到至关重要的作用。其中GRF5对植物细胞***、叶绿体的增殖、光合作用和叶片的寿命均有促进作用。
发明内容
基于此,本发明提供一种普通小麦基因TaGRF5,通过基因克隆得到该基因cDNA全长序列,构建过量表达载体遗传转化拟南芥和小麦植株后进行功能验证,发现所TaGRF5基因能够提高拟南芥和小麦植株的光合效率,并增强了抗旱性和抗盐性,可用于培育高产、抗逆的植物新品种。
本发明采用的具体方案为:
本发明的目的一是提供一种普通小麦基因TaGRF5,所述普通小麦基因TaGRF5的cDNA序列编码如SEQ ID NO .2所示的氨基酸。
优选地,所述普通小麦基因TaGRF5的cDNA序列为SEQ ID NO .1所示的碱基序列或与SEQ ID NO .1所示的碱基序列完全互补配对的序列。
本发明的目的二是提供一种由上述普通小麦基因TaGRF5编码的表达蛋白,所述表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO .2所示。
本发明的目的三是提供一种重组表达载体,所述重组表达载体上包含所述普通小麦基因TaGRF5的基因序列。在本发明的实施例中,所述重组表达载体为pCAMBIA1300-TaGRF5。
本发明的目的四是提供一种转化子,所述转化子是将所述重组表达载体转入受体细胞中所得。在本发明的实施例中,所述受体细胞为农杆菌。
本发明的目的四是提供所述普通小麦基因TaGRF5、其编码的表达蛋白、所述重组表达载体或所述转化子在提高植株光合作用或/和提高植物抗逆性能中的应用。
优选地,所述抗逆性能包括抗盐性和抗旱性。
本发明的目的六是提供一种提高植物光合作用或/和抗盐抗旱性能的方法,所述方法为:首先构建植物重组表达载体,所述重组表达载体上连接有所述普通小麦基因TaGRF5的全长克隆,然后将所述重组表达载体转入到目标植株中,获得阳性植株。
在其中一些实施例中,所述植物为拟南芥或小麦。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
本发明提供了一种小麦基因TaGRF5,并构建了所述TaGRF5基因的重组表达载体。通过基因克隆、过表达载体构建和遗传转化对TaGRF5基因的功能进行了鉴定。研究发现所述TaGRF5基因能够提高植株的光合作用以及抗逆特性。将上述TaGRF5基因的重组表达载体转化进入拟南芥和小麦中,通过该基因的过量表达,提高了过表达植株的光合作用、抗盐和抗旱性能。本发明提供的TaGRF5基因可广泛应用于提高生物体的光合作用以及抗逆能力,在高产、抗逆的植物品种培育方面具有广阔的应用价值。
附图说明
图1是小麦GRF5染色体定位图;
图2是小麦GRF5基因的cDNA扩增结果图;
图3是正常生长的拟南芥野生型和转基因株系的表型比较(A)、叶绿素含量(B)、叶长(C)、叶宽(D)、莲座叶片数(E)、Fv/Fm(F)、Fv/Fo(G)、PIABS(H)对比图;
图4是 TaGRF5过量表达转基因拟南芥幼苗提高了盐胁迫下(0和150 mmol L- 1NaCl)的萌发率(A、C),脯氨酸含量(B),生长情况和根长(D、E)结果图;
图5是盐胁迫下野生型和转基因拟南芥成株的表型(A)、丙二醛含量(B)、脯氨酸含量(C)、叶绿素含量(D)对比图;
图6是盐胁迫下野生型和转基因拟南芥成株叶绿素荧光参数变化对比图;
图7是TaGRF5过量表达转基因拟南芥提高了干旱胁迫下(0、150 mmol L-1和250mmol L-1 mannitol)的萌发率(A、B),生长情况(C),根长(D),脯氨酸含量(E)结果图;
图8是干旱胁迫下野生型和转基因拟南芥成株的表型(A)、丙二醛含量(B)、脯氨酸含量(C)、叶绿素含量(D)对比图;
图9是干旱胁迫下野生型和转基因拟南芥成株叶绿素荧光参数变化对比图;
图10是正常生长的野生型和转基因小麦表型比较(A、B)、叶绿素含量(C)、叶长(D)、叶宽(E)、单茎叶面积(F)、Fv/Fm(G)、Fv/Fo(H)、PIABS(I)对比图;
图11是盐胁迫下野生型和转基因小麦成株的表型(A、B) 、丙二醛含量(C)、脯氨酸含量(D)、叶绿素含量(E)对比图;
图12是盐胁迫下野生型和转基因小麦成株叶绿素荧光参数变化对比图;
图13是干旱胁迫下野生型和转基因小麦成株的表型(A、B) 、丙二醛含量(C)、脯氨酸含量(D)、叶绿素含量(E)对比图;
图14是干旱胁迫下野生型和转基因小麦成株叶绿素荧光参数变化对比图。
具体实施方式
一种提高植物光合作用和抗盐抗旱性能的方法,所述方法为先构建出植物重组表达载体,载体上连接有小麦基因TaGRF5的全长克隆,然后将上述重组表达载体转入拟南芥和小麦中,利用转化植株研究小麦基因TaGRF5在植物逆境响应和遗传改良中的应用。
在实施例中,所述提高植物光合作用和抗盐抗旱性能的方法包括以下步骤:
(1) 将上述小麦基因TaGRF5的cDNA序列***pCAMBIA1300载体中,得到pCAMBIA1300- TaGRF5重组表达载体;
(2)将步骤(1)中的pCAMBIA1300-TaGRF5重组表达载体转化农杆菌GV3101,筛选出阳性农杆菌;
(3)用步骤(2)中的阳性农杆菌侵染植物,得到光合作用和抗盐抗旱性能增强的植物。
在实施例中,通过以下方法获得所述小麦基因TaGRF5的cDNA:
(1)取小麦新鲜叶片,提取得到总RNA;
(2)将步骤(1)获得的RNA进行反转录,得到cDNA;
(3)以步骤(2)获得的cDNA为模板,利用如SEQ ID NO .3所示的上游引物和SEQ IDNO .4所示的下游引物进行PCR扩增,得到小麦基因TaGRF5的cDNA序列。
下面将参照实施例对本发明进行更全面的描述。需要理解的是以下实施例仅是为了起到说明的目的,本发明并不限于本文所描述的实施例。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下,可以对本发明进行各种修改和替换。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的各种常用试剂,如无特殊说明,均为市售产品。
实施例1 小麦TaGRF5基因的克隆。
以小麦品种中国春(Triticum aestivum L.)叶片的cDNA为模板,克隆位于小麦7D染色体的TaGRF5基因(图1),具体方法如下:
1.小麦叶片总RNA的提取
使用RNAiso Plus(Takara)试剂提取中国春叶片的总RNA:
(1)称取0.2g小麦叶片,放入事先液氮冷却好的研钵中,在液氮中用研杵轻轻研磨,直至液氮即将挥发完时,快速充分研磨,反复2-3次,使样品成为粉末;
(2)将粉末状的样品加入到装有1mL 预冷Trizol的1.5mL离心管中,剧烈振荡,充分混匀,使样品均匀分散在Trizol中,冰上静止5min;
(3)12000rpm,4℃离心15min;
(4) 吸取上清800-900μL至另外一个新的1.5mL离心管中,加入300μL氯仿,剧烈振荡5min。12000rpm,4℃离心15min;
(5)吸取上清500μL左右至新离心管中(切勿吸到中下层),加入1mL无水乙醇,-20℃放置1h;
(6)12000rpm,4℃离心15min,管底形成沉淀;
(7)弃去上清,加入1mL 75%乙醇洗涤。12000rpm,4℃离心15min;
(8)弃去上清,加入1mL 75%乙醇洗涤。12000rpm,4℃离心15min;
(9)弃去上清,倒扣在滤纸上5-10min,晾干乙醇;
(10)加入100μL DEPC水,冰上放置1h,充分溶解。-80℃保存备用。
2.TaGRF5基因cDNA第一条链的合成
按照PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit(Takara)的操作说明进行。
反应体系1:Oligo dT Primer(50 μM)1μL,dNTP Mixture(10 mM each)1μL,总RNA5μg,RNase Free dH2O补足至10μL。
将反应体系1在65℃保温 5 min 后,冰上迅速冷却。
反应体系2:反应体系1 10μL,5X PrimeScript Buffer 4μL,RNase Inhibitor(40U/μL) 0.5μL,PrimeScript RTase(200 U/μl) 1μL,RNase Free dH2O补足至20μL。
将上述反应液缓慢混匀后按下列条件进行反转录反应:30℃ 10 min,42℃30min,95℃保温5 min使酶失活,冰上放置。
3.克隆TaGRF5的编码区序列
以步骤2得到的中国春的叶片cDNA为模板,利用特异性引物(SEQ ID NO .5-6)扩增TaGRF5基因(图2)。
PCR扩增的反应程序:95℃,10min;95℃、30s,55℃、30s,72℃、1.5min,35个循环;72℃、10min。
PCR扩增的反应体系(Takara公司产品):DNA聚合酶rTaq 0.25μL,cDNA模板5μL,10×PCR Buffer(Mg2+ plus) 5μL,dNTPs 4μL,正向引物(10μM)2μL,反向引物(10μM)2μL,ddH2O补足至50μL。
4.大肠杆菌转化及测序
PCR产物切胶回收、纯化后按照Takara公司pMD™ 19-T Vector Cloning Kit所述的方法将PCR产物连接到pMD™ 19-T载体上,连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α,阳性克隆经过筛选检测后测序获得TaGRF5基因序列。
所述普通小麦基因TaGRF5的cDNA序列如SEQ ID NO .1所示,或所述普通小麦基因TaGRF5为编码氨基酸序列如SEQ ID NO .2所示的序列。该基因全长为1321 bp,编码368个氨基酸,蛋白分子量为39.89 kDa。
实施例2 TaGRF5基因的过量表达载体的构建。
构建TaGRF5基因的过量表达载体的具体方法如下:
(1)将实施例1中得到的PCR产物经过胶回收、纯化后用Kpn I和Xba I限制性内切酶双酶切;
(2)将pCAMBIA1300载体用Kpn I和Xba I限制性内切酶双酶切;
(3)将双酶切后的扩增片段与pCAMBIA1300载体用T4DNA连接酶连接;
(4)转化大肠杆菌挑选阳性单菌落,并用特异引物进行PCR验证后扩大繁殖,提取质粒送公司测序。测序由生工生物工程(上海)股份有限公司完成,测序结果正确的质粒即为TaGRF5基因的重组表达载体pCAMBIA1300-TaGRF5
实施例3 TaGRF5基因在拟南芥中过量表达可提高拟南芥的光合效率及逆境耐受性。
1. TaGRF5基因在拟南芥中过量表达的具体操作如下:
(1)将构建正确的pCAMBIA1300- TaGRF5载体质粒转化农杆菌感受态,挑选阳性单菌落,进行菌落PCR验证;
(2)将PCR验证正确的单克隆用农杆菌介导的花序侵染法转化到拟南芥中;
待成熟收获种子(T1)经含有潮霉素的MS培养基筛选后,挑选抗潮霉素株系,自交成熟后单株收取T2代种子;
(3)将T2代种子种植于含潮霉素的培养基上,挑选表现出3:1的分离比率的植株移植于营养土中,以成活株系的基因组DNA和RNA反转录的cDNA为模板进行PCR扩增验证,验证为阳性植株的成熟后单株收获种子(T3);
(4)T3代拟南芥种子按单株在含潮霉素的培养基上鉴定,不发生分离的为纯合植株,可用于后续各项试验分析。
2. TaGRF5基因在拟南芥中过量表达可提高拟南芥的光合效率
将正常培养的野生型和转TaGRF5拟南芥培养4周后,观察其生长状况,并测定相关参数。
①OE拟南芥株系叶片颜色比WT更为浓绿(图3A),通过测定叶绿素含量表明,WT的叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素均显著低于OE株系(图3B)。
②OE株系生物量显著高于WT,表现为WT拟南芥的叶长、叶宽和莲座叶片数均显著低于OE株系(图3C-E)。
③WT和OE拟南芥株系的PSII最大光化学效率Fv/Fm和PSII潜在活性Fv/Fo差异不显著,但在性能指标PIABS上,WT显著低于OE株系(图3F-H)。
3. TaGRF5基因在拟南芥中过量表达可提高拟南芥的耐盐性
(1)过量表达TaGRF5拟南芥幼苗耐盐性鉴定
TaGRF5过量表达转基因拟南芥幼苗提高了对盐胁迫的耐受性。
①将T3代野生型(WT)和过量表达(OE)拟南芥种子分别种植于正常(CK)和含150mmol L-1NaCl的MS培养基上观察其生长状况并统计其萌发率。正常MS培养基中,WT和OE拟南芥幼苗的生长情况和种子的萌发率差异不显著,而在含NaCl的培养基中,OE拟南芥三个株系明显比WT长势好且发芽率高(图4A、C)。
②正常和盐胁迫条件下WT和OE拟南芥三个株系全苗脯氨酸含量测定,结果如图4B所示,正常生长条件下OE5的脯氨酸含量最高,其次是WT和OE2,OE7脯氨酸含量最低;盐胁迫后WT中脯氨酸积累量显著低于OE株系,且三个株系脯氨酸含量平均值分别为WT的1.93、7.01和2.90倍。
③正常培养7 d的WT和OE拟南芥分别转移到正常和含NaCl的方形MS培养基上,垂直生长7 d后测量相应根长。结果如图4D-E,正常培养后WT拟南芥根长显著短于OE拟南芥的三个株系,OE三个株系的根长平均值分别为WT的1.23、1.54和1.43倍。
(2)过量表达TaGRF5拟南芥成株耐盐性鉴定
用300 mmol L-1 NaCl和清水处理6 d。
①WT莲座叶片逐渐变黄,而OE株系叶片无明显变化(图5A)
②生理指标测定,正常生长及盐处理条件下,WT丙二醛的含量均显著高于OE株系(图5B),而脯氨酸含量则均显著低于OE株系(图5C)。
③叶绿素含量测定,正常生长及盐处理条件下,WT中的叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量均显著低于OE株系(图5D)。
④叶绿素荧光参数测定,盐胁迫6 d后,WT拟南芥Fv/Fm、Fv/Fo和PIABS值降低,其中Fv/Fo和PIABS值较对照分别下降43.69%和82.76%,且显著低于OE株系(图6)。
4. TaGRF5基因在拟南芥中过量表达可提高拟南芥的抗旱性。
(1)过量表达TaGRF5拟南芥幼苗抗旱性鉴定。
①将T3代WT和OE拟南芥种子分别种植于正常(CK)、150 mmol L-1和250 mmol L-1甘露醇(mannitol)的MS培养基上观察其生长状况并统计其萌发率。正常MS培养基中,WT和OE拟南芥的生长情况和萌发率差异不显著,但在150 mmol L-1甘露醇培养基中,拟南芥种子萌发7 d后,WT萌发率为41.03%,而OE2、OE5和OE7的萌发率分别为65%,80.20%和68.03%(图7A、B),且OE拟南芥三个株系幼苗的生长状况比WT长势好。在250 mmol L-1甘露醇培养基中,WT和OE株系萌发率均受到影响有所下降,其中WT下降幅度最大(图7C)。
②正常和不同干旱胁迫条件下WT和OE株系全苗脯氨酸含量测定,如图7E所示,在150 mmol L-1甘露醇胁迫下, WT积累量较少且显著低于OE株系,OE三个株系脯氨酸含量平均值分别为WT的1.37、2.21和1.29倍;在250 mmol L-1甘露醇胁迫下,WT和OE株系脯氨酸积累量增加,WT拟南芥脯氨酸含量显著低于OE株系,且高浓度甘露醇条件下明显提高了OE拟南芥三个株系脯氨酸的积累量,平均值分别为WT的1.41、2.58和1.86倍。
③WT和OE拟南芥在正常和含150 mmol L-1和250 mmol L-1甘露醇MS方形培养皿垂直生长7 d后测量根长。如图7D,在150 mmol L-1甘露醇培养基中,OE根系生长几乎不受影响,根长显著长于WT且更健壮,平均根长分别为WT的1.75、2.63和2.07倍;在250 mmol L-1甘露醇培养基中,WT和OE拟南芥根系生长均受到影响,WT根系生长几乎停滞,且根长显著短于OE株系,OE三个株系根长分别为WT的2.44、3.46和2.41倍。
(2)过量表达TaGRF5拟南芥成株抗旱性鉴定
用30% PEG和清水分别持续浇灌WT和OE拟南芥6 d。
①WT拟南芥莲座叶片边卷曲,且逐渐萎蔫变黄,而OE株系叶片变化不大(图8A)。
②生理指标测定,正常生长及干旱处理条件下,WT丙二醛的含量均显著高于OE株系(图8B),而脯氨酸含量在正常条件下无显著差异,干旱6d后WT显著低于OE株系(图8C)。
③叶绿素含量测定,正常生长及干旱处理条件下,WT中的叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量均显著低于OE株系(图8D)。
④叶绿素荧光参数测定,干旱胁迫6 d后,WT株系Fv/Fm、Fv/Fo值显著低于OE株系,WT株系PIABS值较对照下降10.56%,而OE株系呈增加趋势(图9)。
实施例4 TaGRF5基因在小麦中过量表达可提高小麦的光合效率及逆境耐受性。
1. TaGRF5基因在小麦中过量表达的具体操作如下:
(1)将构建正确的pCAMBIA1300- TaGRF5载体质粒转化农杆菌感受态,挑选阳性单菌落,进行菌落PCR验证;
(2)将PCR验证正确的单克隆用农杆菌介导的侵染法转化到小麦愈伤组织中;
(3)用CTAB法提取TaGRF5基因过量表达小麦株系的基因组DNA进行PCR鉴定。
2. TaGRF5基因在小麦中过量表达可提高小麦的光合效率。
将正常培养的野生型和转TaGRF5小麦培养4周后,观察其生长状况,并测定相关参数。
①叶绿素含量测定,WT的叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素均显著低于OE株系(图10C)。
②OE株系生物量显著高于WT,表现为WT小麦的叶长、叶宽和单茎叶面积均显著低于OE株系(图10D-F)。
③WT和OE小麦株系的PSII最大光化学效率Fv/Fm和PSII潜在活性Fv/Fo差异不显著,但在性能指标PIABS上,WT显著低于OE株系(图10G-I)。
3. TaGRF5基因在小麦中过量表达可提高小麦的耐盐性。
(1)过量表达TaGRF5小麦植株耐盐性鉴定
用300 mmol L-1 NaCl和清水处理6 d。
①在正常条件和盐处理下,WT根长均显著低于OE株系(图11A、B)
②生理指标测定,正常生长及盐处理条件下,WT丙二醛的含量均显著高于OE株系(图11C),盐处理6d后分别是OE三个株系的1.16、1.15和1.10倍。而脯氨酸含量则均显著低于OE株系(图11D),且三个株系脯氨酸含量平均值分别为WT的1.22、1.33和1.25倍。
③叶绿素含量测定,正常生长及盐处理条件下,WT中的叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量均显著低于OE株系(图11E);
④叶绿素荧光参数测定,盐胁迫6 d后,WT和OE株系的Fv/Fm、Fv/Fo和PIABS值均降低,其中WT植株较对照分别下降15.19%、32.45%和34.56%,且显著低于OE株系(图12)。
4. TaGRF5基因在小麦中过量表达可提高小麦的抗旱性。
(1)过量表达TaGRF5小麦植株抗旱性鉴定
用30% PEG和清水分别持续浇灌WT和OE小麦6 d。
①在正常条件和干旱处理下,WT根长和叶长均显著低于OE株系(图13A、B)。
②生理指标测定,正常生长及干旱处理条件下,WT丙二醛的含量均显著高于OE株系(图13C),而脯氨酸含量显著低于OE株系(图13D),且三个株系脯氨酸含量平均值分别为WT的1.19、1.17和1.23倍。
③叶绿素含量测定,正常生长及干旱处理条件下,WT中的叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量均显著低于OE株系(图13E)。
④叶绿素荧光参数测定,干旱胁迫6 d后,WT和OE株系的Fv/Fm、Fv/Fo和PIABS值均降低,且显著低于OE株系(图14)。
综上所述,TaGRF5过量表达能够显著增加拟南芥和小麦植株的生物量、提高光合效率和增强抗逆性。
需要说明的是,以上所述的实施方案应理解为说明性的,而非限制本发明的保护范围,本发明的保护范围以权利要求书为准。对于本领域技术人员而言,在不背离本发明实质和范围的前提下,对本发明作出的一些非本质的改进和调整仍属于本发明的保护范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 河南科技大学
<120> 一种普通小麦基因TaGRF5及其应用
<130> 1
<160> 6
<170> PatentIn version 3.3
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<211> 1321
<212> DNA
<213> 小麦
<400> 1
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ggtttaagag caaaaccctt gcgtgtcgat gttgttggcg gagataagag gaacctgtag 1320
c 1321
<210> 2
<211> 368
<212> PRT
<213> 小麦
<400> 2
Met Leu Ser Ser Ser Ala Ala Met Gly Met Gly Leu Gly Gly Tyr Gly
1 5 10 15
Gln Gln Gln Gln Gln Gln Met Gln Met Gln Met Gln Arg Gly Ala Glu
20 25 30
Pro Val Phe Thr Pro Ala Gln Trp Ala Glu Leu Glu Gln Gln Ala Leu
35 40 45
Ile Tyr Lys Tyr Leu Met Ala Gly Val Pro Val Pro Pro Asp Leu Leu
50 55 60
Leu Pro Ile Arg Pro His Pro Ala Gly Ala Ala Gly Thr Thr Phe Ser
65 70 75 80
Phe Ala Asn Pro Ala Ala Ser Pro Phe Tyr His His His His Pro Ser
85 90 95
Met Ser Tyr Tyr Ala Tyr Tyr Gly Lys Lys Leu Asp Pro Glu Pro Trp
100 105 110
Arg Cys Arg Arg Thr Asp Gly Lys Lys Trp Arg Cys Ser Lys Glu Ala
115 120 125
His Pro Asp Ser Lys Tyr Cys Glu Arg His Met His Arg Gly Arg Asn
130 135 140
Arg Ser Arg Lys Pro Val Glu Ser Lys Ser Ala Ser Pro Ala His Gln
145 150 155 160
Ser Gln Gln Pro Gln Leu Ser Ala Val Thr Ser Ala Ala Arg Asp Ala
165 170 175
Glu Pro Leu Pro Ser Leu Pro Ala Gly Ala Lys Thr His Gly Leu Ser
180 185 190
Leu Gly Gly Ala Gly Ser Ser Gln Met His Val Asp Ala Ser Ser Tyr
195 200 205
Gly Gly Lys Tyr Ser Leu Gly Ala Lys Ser Asp Val Gly Glu Leu Ser
210 215 220
Phe Phe Ser Gly Ala Ser Gly Asn Asn Asn Arg Gly Phe Thr Ile Asp
225 230 235 240
Ser Pro Thr Asp Ser Ser Trp His Ser Met Gly Ser Ser Leu Thr Pro
245 250 255
Tyr Gln Leu Ser Lys Pro Arg Asp Ser Gly Leu Met Gln Gly Gly Phe
260 265 270
Ser Tyr Ser His Phe Glu Pro Ser Gln Glu Leu Gly Gln Val Thr Ile
275 280 285
Ala Ser Leu Ser His Ser Gln Glu Gln Asp Arg Arg Ser Phe Gly Gly
290 295 300
Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ala Gly Leu Met Gly Asn Val Lys
305 310 315 320
Gln Glu Asn Gln Pro Leu Arg Pro Phe Phe Asp Glu Trp Pro Gly Arg
325 330 335
Arg Asp Ser Trp Ser Glu Met Asp Asp Glu Arg Ser Asn Gly Thr Ser
340 345 350
Phe Ser Thr Thr Gln Leu Ser Ile Ser Ile Pro Met Pro Arg Cys Asp
355 360 365
<210> 3
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 3
gaggagccgg acctgttgtt a 21
<210> 4
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 4
gctacaggtt cctcttatct c 21
<210> 5
<211> 29
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 5
ggggtaccga ggagccggac ctgttgtta 29
<210> 6
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 6
gctctagata caggttcctc ttatctc 27

Claims (2)

1.普通小麦基因TaGRF5在提高植株光合作用或/和提高植物抗逆性能中的应用,其特征在于:所述抗逆性能包括抗盐性和抗旱性;所述普通小麦基因TaGRF5的cDNA序列如SEQID NO .1所示,其编码如SEQ ID NO .2所示的氨基酸。
2.一种提高植物光合作用或/和抗盐抗旱性能的方法,其特征在于,所述方法为:首先构建植物重组表达载体,所述重组表达载体上连接有普通小麦基因TaGRF5的全长克隆,然后将所述重组表达载体转入到目标植株中,获得阳性植株;
所述普通小麦基因TaGRF5的cDNA序列如SEQ ID NO .1所示。
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