CN114231539B - 柳枝稷SBP-box类转录因子PvSPL6的应用及其重组载体 - Google Patents

柳枝稷SBP-box类转录因子PvSPL6的应用及其重组载体 Download PDF

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Abstract

本发明涉及柳枝稷SBP‑box类转录因子PvSPL6的应用及其重组载体，属于植物基因工程技术领域，柳枝稷SBP‑box类转录因子PvSPL6能够调控柳枝稷开花时间、茎节长度和生物量产量。本发明还提供了重组载体为过表达pANIC6B‑PvSPL6或抑制表达pANIC8B‑PvSPL6‑RNAi，重组载体pANIC6B‑PvSPL6及pANIC8B‑PvSPL6‑RNAi转入柳枝稷后对柳枝稷的开花时间、茎节长度以及生物量产量都具有影响。与野生型相比，所获得的PvSPL6转录本抑制表达的转基因植物(PvSPL6‑RNAi)的开花时间延迟了约40天，茎节长度增加了约50％，生物量增加了63％。

Description

柳枝稷SBP-box类转录因子PvSPL6的应用及其重组载体
技术领域
本发明属于植物基因工程技术领域，公开了一种涉及植物未知功能的SBP- box类转录因子PvSPL6在延迟柳枝稷开花时间、增加茎节长度及增加生物量产量方面的应用。
背景技术
柳枝稷(Panicum virgatum L.)，属于多年生C4高大草本植物，主要用作能源草和牧草。作为一类重要的纤维生物质资源，增加其生物量和可发酵糖产量以提高柳枝稷生物质能的开发利用具有重要的实际应用价值。柳枝稷全基因组测序的完成、表达芯片数据库的公布以及转化体系的完善，为功能基因的挖掘和验证提供了资源保证。
开花时间是决定能源草生物量的重要性状。禾本科植物由营养生长进入生殖生长后，生物量基本不再增加，此时的营养供应更多地流向花序。因此，对柳枝稷和其他能源作物的开花时间进行调控是提高其生物量产量的关键途径。研究表明，植物开花时间的分子调控是一种复杂的外源性和内源性因子协同调控(Park et al,Molecular interactionsbetween flowering time and abiotic stress pathways.Int Rev Cell Mol Biol,2016,327:371-412)。年龄途径作为五大开花途径(光周期途径、春化途径、赤霉素途径、自主途径、年龄途径)中能够在非诱导条件下调控植物开花的一种新机制，近年来得到了广泛的关注。MiR156 及其靶基因SQUAMOSA PROMOTER BINDING-LIKEs(SPLs)是年龄途径的关键调控枢纽。SPL基因编码了一类植物特异转录因子，并在单子叶和双子叶植物中保守(Yanget al,Comparative study of SBP-box gene family in Arabidopsis and rice.Gene,2007,407:1-11)。在拟南芥中，几乎所有miR156靶向的SPL基因都是植物开花过渡的加速因子，例如，AtSPL3通过调控AP1等影响开花， AtSPL9通过参与miR172途径调控开花，AtSPL10通过调控AGL79影响开花等 (Gao et al,miR156/SPL10 modulates lateral rootdevelopment,branching and leaf morphology in Arabidopsis by silencingAGAMOUS-LIKE 79.Front Plant Sci,2018, 8:2226)。然而，柳枝稷中已鉴定的参与开花调控的SPL只有PvSPL7和8(Gou et al,SPL7 and SPL8 represent a novel floweringregulation mechanism in switchgrass.New Phytol,2019,222:1610-1623)。
发明内容
本发明要解决的技术问题在于提供一种抑制柳枝稷SBP-box类转录因子 PvSPL6在延迟柳枝稷开花、增加植物生物量产量方面的应用，以解决目前能源植物生物量改良基因资源库不足，不能同时满足能源作物株型改良以及增加产量分子设计的需求问题。
本发明是通过如下技术方案来实现的：
一种柳枝稷SBP-box类转录因子PvSPL6的编码基因；其核苷酸序列如 SEQ IDNO.1所示。所述基因编码的SBP-box类蛋白PvSPL6，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
一种抑制柳枝稷PvSPL6基因转录本水平的RNA干扰的区段，其核苷酸序列如SEQID NO.3所示。
本发明的第一个目的是提供一种柳枝稷SBP-box类转录因子PvSPL6的编码基因的应用，所述基因如SEQ ID NO.1所示，所述应用为过表达PvSPL6在调控柳枝稷提前开花、缩短茎节长度和减少生物量方面的应用，抑制表达 PvSPL6在调控柳枝稷推迟开花时间、增加茎节长度和生物量上的应用。
本发明的第二个目的是提供含有柳枝稷SBP-box类转录因子PvSPL6基因的重组载体，所述重组载体为pANIC6B-PvSPL6，其中含有SEQ ID NO.1。
本发明的第三个目的是提供含有柳枝稷SBP-box基因转录本水平的RNA 干扰区段的重组载体，所述重组载体为pANIC8B-PvSPL6-RNAi，其中含有 SEQ ID NO.3，所述的SEQID NO.3为SEQ ID NO.1中的一部分。
本发明的核心特点和发明理念包括：
1、开花时间是影响能源草生物量的一个重要因素。通过植物基因工程延迟能源草开花时间从而提高生物量是其中一个重要研究方向。本发明利用基因工程的手段，针对能源植物柳枝稷的PvSPL6基因，分别通过过表达和RNA干扰表达技术对SBP-box类转录因子PvSPL6在柳枝稷体内的表达水平进行调控和功能验证，其中干扰PvSPL6转录本水平可获得开花时间延迟、茎节长度增加且生物量产量增加的转基因柳枝稷植株，这对于柳枝稷和其他禾本科植物的遗传育种和定向分子设计具有重要的指导意义。
2、本发明从调控柳枝稷开花时间相关基因着手，通过先进的基因工程技术同时对植物生物量产量进行调控，为牧草和能源作物生物量遗传改良和分子育种提供了新靶标。
本发明与现有技术相比的有益效果如下：
1、本发明中获得的柳枝稷SBP-box类转录因子PvSPL6基因是调控柳枝稷开花时间、茎节长度及茎节数目等性状的重要基因，这对于通过分子定向设计获得理想能源植物株型具有重要贡献；
2、本发明中过表达PvSPL6使得柳枝稷开花时间提前、茎节长度缩短，且生物量产量降低；抑制柳枝稷SPL6的转录本水平，能够显著延迟柳枝稷开花时间、增加柳枝稷的茎节长度和生物量，对于能源植物和禾本科牧草的生物量遗传改良具有重要的参考意义；
3、本发明中所产生的遗传改良植物能够整合到常规育种项目，从而为能源植物及禾本科牧草作物的品种培育提供新的种质资源。
附图说明
图1柳枝稷中SBP-box类转录因子PvSPL6(A)及PvSPL6-RNAi(B)的 PCR扩增电泳图；
图2柳枝稷pANIC6B-PvSPL6过表达(A)和pANIC8B-PvSPL6-RNAi干扰表达(B)载体简图；
图3PvSPL6过表达(A)和干扰表达(B)转基因柳枝稷PCR鉴定结果。 1#-12#：PvSPL6过表达转基因柳枝稷植株；1’#-11’#+：PvSPL6干扰表达转基因柳枝稷植株；WT：野生型柳枝稷植株；M：DL 2000DNA maker。
图4PvSPL6过表达(A)和干扰表达(B)转基因柳枝稷植株中PvSPL6 基因qRT-PCR结果。Control表示野生型柳枝稷植株，PvSPL6OE-67/-71/-76分别表示三个独立的阳性过表达转基因株系，PvSPL6RNAi-1/-6/-7分别表示三个独立的阳性干扰表达转基因株系。
图5PvSPL6阳性转基因植株表型。Control表示野生型柳枝稷植株， PvSPL6OE表示阳性过表达株系，PvSPL6RNAi表示阳性干扰表达株系。
图6PvSPL6阳性转基因植株的开花时间(A)和茎节长度(B)测定。Control表示野生型柳枝稷植株，PvSPL6OE-67/-71/-76分别表示三个独立的阳性过表达转基因株系，PvSPL6RNAi-1/-6/-7分别表示三个独立的阳性干扰表达转基因株系。
图7PvSPL6阳性转基因植株生物量测定。Control表示野生型柳枝稷植株，PvSPL6OE-67/-71/-76分别表示三个独立的阳性过表达转基因株系， PvSPL6RNAi-1/-6/-7分别表示三个独立的阳性干扰表达转基因株系。
具体实施方式
下面结合具体实施例和附图对本发明作进一步详细说明。下述实施例中所用的材料、试剂和分子标记探针等，如无特殊说明，均可从公司通过商业途径购买。
实施例1：PvSPL6及PvSPL6-RNAi序列的扩增
根据Phytozome(https://phytozome.jgi.doe.gov)网站中已公布的柳枝稷基因组信息，分别在PvSPL6全长序列的两侧设计引物(PvSPL6-F和PvSPL6-R)，以及PvSPL6基因非保守区段设计引物(PvSPL6-RNAi-F和PvSPL6-RNAi-R) 以柳枝稷的cDNA为模板，用上述引物进行PCR扩增。
所述引物序列如下：
PvSPL6-F：atgagagctaagcaagctagc
PvSPL6-R：ttatctgatctggaagtggttccgt
PvSPL6-RNAi-F：cccttgcttcgtgtcatcgt
PvSPL6-RNAi-R：tgccgtagcagggttctgtc
PCR反应体系为：2μL cDNA，25μL 2×Buffer，4μL 10pM dNTP，10μM 的正/反向引物各2μL，0.5μL 5U/μL PrimerSTAR HS DNA聚合酶和14.5μL ddH2O。在冰上加样后混匀。PCR反应条件为：98℃ 3min；98℃ 5sec，56℃ 15sec；72℃ 30sec，35个循环；72℃ 5min。
将PCR扩增产物进行1％琼脂糖凝胶电泳检测，分别得到大小约为650bp (图1A)和250bp(图1B)的片段，对扩增片段进行凝胶回收(使用 Promega凝胶回收试剂盒)，常规测序(北京六合华大基因科技有限公司)。测序结果显示，扩增获得的长片段含有一个完整的开放阅读框，全长为642个碱基，序列如SEQ ID NO.1所示，其编码蛋白含有243个氨基酸残基，序列如 SEQ ID NO.2所示。短片段长度为275个碱基，序列如SEQ ID NO.3所示。
PvSPL6的编码基因：
atgagagctaagcaagctagcaagcgcggctcccgaactgcacctccacctcgccggctctcctcgatcggctcgtcccc cgacggcgccgccatggaccgcaagggcacctcgagctcggcggcggcgtccatggccgcgctcgccgccgccgccgcggccggccagggccagccgacctccggccaggccaacggggcgctgtcgtcgccgcatgcggaggaggacgag aaccctgctacggcagccgccgtgagcggtggcggcgcctccggctcctcggacccggtggccgcgaggaggggagcggcgggcggcggcccgagctgccaggtggagcggtgcgccgccgacctacacgatgcgaggcggtactaccgga ggcacaaggtgtgcgagccgcactccaaggagctcgccgtgctcgtcgccggcctccgccagcgcttctgccagcaatgcagccggttccatgagctgttggagttcgacggcgacaagcgcagctgccgccggcgcctggaggggcacaacgca cggcgccggaggagctcggcggataggcacggcggcagcggcggcgaccaggacggccggagccacccagggaacccgtcacggaaccacttccagatcagataa
蛋白PvSPL6的氨基酸序列：
MRAKQASKRGSRTAPPPRRLSSIGSSPDGAAMDRKGTSSSAAASMAALAAA AAAGQGQPTSGQANGALSSPHAEEDENPATAAAVSGGGASGSSDPVAARRGA AGGGPSCQVERCAADLHDARRYYRRHKVCEPHSKELAVLVAGLRQRFCQQCSRFHELLEFDGDKRSCRRRLEGHNARRRRSSADRHGGSGGDQDGRSHPGNPS RNHFQIR
PvSPL6的干扰片段的核苷酸序列：
cccttgcttcgtgtcatcgtcctccgctcatgagagctaagcaagctagcaagcgcggctcccgaactgcacctccacctc gccggctctcctcgatcggctcgtcccccgacggcgccgccatggaccgcaagggcacctcgagctcggcggcggcgtccatggccgcgctcgccgccgccgccgcggccggccagggccagccgacctccggccaggccaacggggcgctgt cgtcgccgcatgcggaggaggacgagaaccctgctacggca
实施例2：重组载体构建及在烟草细胞中瞬时表达观察亚细胞定位
以上述得到的全长序列片段为模板，设计PvSPL6带有与表达载体 pCABIA1300-cGFP无缝连接的接头引物，用高保真酶扩增该片段；用限制性内切酶HindIII酶切表达载体pCABIA1300-cGFP。回收PvSPL6基因片段和pCABIA1300-cGFP载体片段。再利用无缝连接酶(购自Vazyme公司)将回收的两个片段进行同源重组连接。连接产物用热激法转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。挑取单克隆菌落，在含有卡纳霉素的液体LB培养基中扩增培养，进行 PCR扩增检测和测序验证，得到重组质粒pCABIA1300-PvSPL6-cGFP。
将构建成功的重组载体pCABIA1300-PvSPL6-cGFP转化到农杆菌EHA105 中并保存菌种。将上述菌液通过烟草瞬时表达技术注射烟草进行亚细胞定位观察。荧光共聚焦结果显示，与典型的转录因子不同，PvSPL6除了能定位于烟草细胞核外，还可以定位于细胞膜，暗示了该基因除了作为转录因子发挥功能外，还可能具有其它重要的生物学功能。
实施例3：PvSPL6转基因柳枝稷植物的获得
分别设计过量表达及干扰表达载体中连接入门载体引物：PvSPL6-pGWC-F 和PvSPL6-pGWC-R、PvSPL6-RNAi-pGWC-F和PvSPL6-RNAi-pGWC-R，引物末端引入AhdI酶切位点和入门载体pGWC酶切位点后18个碱基(无缝连接接头序列)，以得到的PvSPL6全长序列为模板，用上述引物进行PCR扩增。
所述引物序列如下：
PvSPL6-pGWC-F：aaagcaggctttgactttatgagagctaagcaagctagc
PvSPL6-pGWC-R：gctgggtctagagacttttatctgatctggaagtggttccgt；
PvSPL6-RNAi-pGWC-F：aaagcaggctttgactttcccttgcttcgtgtcatcgt
PvSPL6-RNAi-pGWC-R：gctgggtctagagactttgccgtagcagggttctgtc；
其中，下划线为无缝连接接头序列。
回收上述扩增片段。用限制性内切酶AhdI酶切pGWC载体，并回收。利用无缝连接酶(购自Vazyme公司)将回收的两个片段进行同源重组连接，并采用热激法转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。挑取单克隆菌落，在卡那霉素抗性的LB培养基中扩增培养，测序。试剂盒提取测序正确的重组菌株质粒，使用Gateway技术，分别将重组质粒酶切回收片段转入过量表达载体pANIC6B 和干扰表达载体pANIC8B(图2)。重组反应为：100ng酶切回收片段，50ngpANIC6B/pANIC8B载体质粒，1μL LR酶(Invitrogen，货号11791020)，然后用ddH2O补足至10μL。25℃培养6h，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞并得到测序正确的阳性重组菌株质粒pANIC6B-PvSPL6及pANIC8B-PvSPL6-RNAi，转化农杆菌EHA105。
采用农杆菌介导的柳枝稷胚性愈伤的遗传转化方法(Xi et al, Agrobacterium-mediated transformation of switchgrass and inheritance of thetransgenes.Bioenergy Research,2009,2:275-283)将pANIC6B-PvSPL6及 pANIC8B-PvSPL6-RNAi分别导入低地型野生型柳枝稷Alamo，获得抗性苗。使用过量表达载体通用引物ZmUbq-F与全长基因的下游引物PvSPL6-R检测全长基因，使用干扰表达载体通用引物Guslink-F与干扰片段的下游引物PvSPL6- RNAi-R、Guslink-R与PvSPL6-RNAi-R检测干扰片段，使用抗潮霉素基因的上下游引物(hph3+hph4)检测潮霉素基因，最终确定阳性转基因株系(图3)。
实施例4：转基因植株分子鉴定
取上述鉴定转基因阳性植株嫩茎组织，用TriZol Reagent试剂盒 (Invitrogen公司，货号15596026)提取总RNA，琼脂糖凝胶电泳和核酸分析仪(NanoDrop)检测总RNA的含量和纯度，取1.0μg总RNA做逆转录反应，采用逆转录酶(Promega公司，货号M1701)反转为cDNA，逆转录反应步骤参考该使用说明。以上述cDNA为模板，使用引物PvSPL6-qRT-F和PvSPL6- qRT-R进行荧光定量PCR检测，内参基因为柳枝稷Ubiquitin(UBQ)基因。引物序列如下：
PvUBQ-F：ttcgtggtggccagtaag
PvUBQ-R：agagaccagaagacccaggtacag
PvSPL6-qRT-F：caggtgattaagcaggtaccct
PvSPL6-qRT-R：ggcacaggcgaacgaattac
实时荧光定量PCR反应体系为20μL，其中正/反向引物各1μL，cDNA模板2μL，SYBRGreen qRT Master Mix(购自宝生物工程有限公司)10μL， ddH2O补足至20μL。实时荧光定量PCR仪使用Roche480，使用两步法反应。检测结果表明，于野生型Control相比，过表达植株PvSPL6OE-67、 PvSPL6OE-71和PvSPL6OE-76中PvSPL6的表达量均显著上升(图4中的A)；相反的，干扰表达植株PvSPL6RNAi-1、PvSPL6RNAi-6和PvSPL6RNAi-7中 PvSPL6的表达量均显著下降(图4中的B)。
实施例5：转基因植株开花时间、茎节长度和生物量测定
取生长六个月的柳枝稷植株进行开花时间、茎节长度和生物量的测定。与野生型相比，PvSPL6过表达植株出现了明显的开花时间提前了约30天，茎节长度减少了约30％，茎节数目减少，进而导致植株矮化(图5)；而PvSPL6干扰表达植株开花时间相比于野生型柳枝稷表现出显著延迟(约40天)，且茎节长度增加了约50％，茎节数目增多，植株高度则相应增加(图5)。分别收集 Control、PvSPL6OE-67/-71/-76和PvSPL6RNAi-1/6/7生长六个月大小的植株地上部材料，测定其鲜重。结果表明，与野生型相比，PvSPL6过表达株系的干物质生物量产量降低了约56％，PvSPL6干扰表达株系的干物质生物量产量增加了约63％(图7)。
本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
序列表
<110> 中国水产科学研究院黄海水产研究所
<120> 柳枝稷SBP-box类转录因子PvSPL6的应用及其重组载体
<160> 15
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 642
<212> DNA
<213> Panicum virgatum L.(柳枝稷)
<400> 1
atgagagcta agcaagctag caagcgcggc tcccgaactg cacctccacc tcgccggctc 60
tcctcgatcg gctcgtcccc cgacggcgcc gccatggacc gcaagggcac ctcgagctcg 120
gcggcggcgt ccatggccgc gctcgccgcc gccgccgcgg ccggccaggg ccagccgacc 180
tccggccagg ccaacggggc gctgtcgtcg ccgcatgcgg aggaggacga gaaccctgct 240
acggcagccg ccgtgagcgg tggcggcgcc tccggctcct cggacccggt ggccgcgagg 300
aggggagcgg cgggcggcgg cccgagctgc caggtggagc ggtgcgccgc cgacctacac 360
gatgcgaggc ggtactaccg gaggcacaag gtgtgcgagc cgcactccaa ggagctcgcc 420
gtgctcgtcg ccggcctccg ccagcgcttc tgccagcaat gcagccggtt ccatgagctg 480
ttggagttcg acggcgacaa gcgcagctgc cgccggcgcc tggaggggca caacgcacgg 540
cgccggagga gctcggcgga taggcacggc ggcagcggcg gcgaccagga cggccggagc 600
cacccaggga acccgtcacg gaaccacttc cagatcagat aa 642
<210> 2
<211> 213
<212> PRT
<213> 柳枝稷(Panicum virgatum L.)
<400> 2
Met Arg Ala Lys Gln Ala Ser Lys Arg Gly Ser Arg Thr Ala Pro Pro
1 5 10 15
Pro Arg Arg Leu Ser Ser Ile Gly Ser Ser Pro Asp Gly Ala Ala Met
20 25 30
Asp Arg Lys Gly Thr Ser Ser Ser Ala Ala Ala Ser Met Ala Ala Leu
35 40 45
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Gly Gln Gly Gln Pro Thr Ser Gly Gln Ala
50 55 60
Asn Gly Ala Leu Ser Ser Pro His Ala Glu Glu Asp Glu Asn Pro Ala
65 70 75 80
Thr Ala Ala Ala Val Ser Gly Gly Gly Ala Ser Gly Ser Ser Asp Pro
85 90 95
Val Ala Ala Arg Arg Gly Ala Ala Gly Gly Gly Pro Ser Cys Gln Val
100 105 110
Glu Arg Cys Ala Ala Asp Leu His Asp Ala Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg
115 120 125
His Lys Val Cys Glu Pro His Ser Lys Glu Leu Ala Val Leu Val Ala
130 135 140
Gly Leu Arg Gln Arg Phe Cys Gln Gln Cys Ser Arg Phe His Glu Leu
145 150 155 160
Leu Glu Phe Asp Gly Asp Lys Arg Ser Cys Arg Arg Arg Leu Glu Gly
165 170 175
His Asn Ala Arg Arg Arg Arg Ser Ser Ala Asp Arg His Gly Gly Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Gln Asp Gly Arg Ser His Pro Gly Asn Pro Ser Arg Asn
195 200 205
His Phe Gln Ile Arg
210
<210> 4
<211> 275
<212> DNA
<213> 柳枝稷(Panicum virgatum L.)
<400> 4
cccttgcttc gtgtcatcgt cctccgctca tgagagctaa gcaagctagc aagcgcggct 60
cccgaactgc acctccacct cgccggctct cctcgatcgg ctcgtccccc gacggcgccg 120
ccatggaccg caagggcacc tcgagctcgg cggcggcgtc catggccgcg ctcgccgccg 180
ccgccgcggc cggccagggc cagccgacct ccggccaggc caacggggcg ctgtcgtcgc 240
cgcatgcgga ggaggacgag aaccctgcta cggca 275
<210> 4
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
atgagagcta agcaagctag c 21
<210> 5
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
ttatctgatc tggaagtggt tccgt 25
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
cccttgcttc gtgtcatcgt 20
<210> 7
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
tgccgtagca gggttctgtc 20
<210> 8
<211> 39
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
aaagcaggct ttgactttat gagagctaag caagctagc 39
<210> 9
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
gctgggtcta gagactttta tctgatctgg aagtggttcc gt 42
<210> 10
<211> 38
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
aaagcaggct ttgactttcc cttgcttcgt gtcatcgt 38
<210> 11
<211> 37
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 11
gctgggtcta gagactttgc cgtagcaggg ttctgtc 37
<210> 12
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 12
ttcgtggtgg ccagtaag 18
<210> 13
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 13
agagaccaga agacccaggt acag 24
<210> 14
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 14
caggtgatta agcaggtacc ct 22
<210> 15
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 15
ggcacaggcg aacgaattac 20

Claims (1)

1.一种柳枝稷SBP-box类转录因子PvSPL6的编码基因的应用，其特征在于所述基因如SEQ ID NO.1所示，所述应用为过表达PvSPL6在调控柳枝稷提前开花、缩短茎节长度和减少生物量方面的应用，抑制表达PvSPL6在调控柳枝稷推迟开花时间、增加茎节长度和生物量上的应用。
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