CN114225012B - 一种测定索玛鲁肽生物活性的方法 - Google Patents
一种测定索玛鲁肽生物活性的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114225012B CN114225012B CN202111539913.7A CN202111539913A CN114225012B CN 114225012 B CN114225012 B CN 114225012B CN 202111539913 A CN202111539913 A CN 202111539913A CN 114225012 B CN114225012 B CN 114225012B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- rat
- feed
- rats
- amount
- feeding
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 62
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims abstract description 187
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims abstract description 84
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 claims abstract description 80
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims abstract description 54
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 52
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 48
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 48
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 34
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 32
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 32
- RJECHNNFRHZQKU-UHFFFAOYSA-N Oelsaeurecholesterylester Natural products C12CCC3(C)C(C(C)CCCC(C)C)CCC3C2CC=C2C1(C)CCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC)C2 RJECHNNFRHZQKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- RJECHNNFRHZQKU-RMUVNZEASA-N cholesteryl oleate Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC[C@H]3[C@@H]1CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)C1 RJECHNNFRHZQKU-RMUVNZEASA-N 0.000 claims abstract description 24
- YUKQRDCYNOVPGJ-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Chemical compound CC(N)=S YUKQRDCYNOVPGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Natural products CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 238000011697 diabetes animal model Methods 0.000 claims abstract description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 22
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 21
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000011664 type 2 diabetes animal model Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 53
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 47
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 40
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 32
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 30
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 27
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 27
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 26
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 26
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 26
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 18
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 17
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 11
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 9
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical group NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 6
- 241000219357 Cactaceae Species 0.000 claims description 5
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 claims description 5
- 238000010276 construction Methods 0.000 claims description 5
- 235000021552 granulated sugar Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 239000010902 straw Substances 0.000 claims description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 claims description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 3
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 2
- 239000010699 lard oil Substances 0.000 claims description 2
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 claims description 2
- 238000011552 rat model Methods 0.000 claims 5
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 claims 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 46
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 abstract description 46
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 abstract description 46
- 238000005220 pharmaceutical analysis Methods 0.000 abstract description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 34
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 24
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 23
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 18
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 18
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 18
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 235000020828 fasting Nutrition 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 7
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 7
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 7
- 235000020927 12-h fasting Nutrition 0.000 description 6
- BRGMHAYQAZFZDJ-PVFLNQBWSA-N N-Acetylglucosamine 6-phosphate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O BRGMHAYQAZFZDJ-PVFLNQBWSA-N 0.000 description 6
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 6
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- -1 N-acetyl-D-glucosamine-6-phosphate sodium citrate Chemical compound 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 4
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 3
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- VGBNZVULWAHGJF-UHFFFAOYSA-N (5-acetamido-3,4,6-trihydroxyoxan-2-yl)methyl dihydrogen phosphate;sodium Chemical compound [Na].CC(=O)NC1C(O)OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O VGBNZVULWAHGJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010088406 Glucagon-Like Peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000018380 Chemical injury Diseases 0.000 description 1
- 229940089838 Glucagon-like peptide 1 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 108010019598 Liraglutide Proteins 0.000 description 1
- YSDQQAXHVYUZIW-QCIJIYAXSA-N Liraglutide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)CC[C@H](NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 YSDQQAXHVYUZIW-QCIJIYAXSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000030136 gastric emptying Effects 0.000 description 1
- 239000003877 glucagon like peptide 1 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 230000002473 insulinotropic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002701 liraglutide Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000003880 negative regulation of appetite Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 229940116540 protein supplement Drugs 0.000 description 1
- 235000005974 protein supplement Nutrition 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/26—Glucagons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/02—Breeding vertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/105—Aliphatic or alicyclic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/142—Amino acids; Derivatives thereof
- A23K20/147—Polymeric derivatives, e.g. peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/158—Fatty acids; Fats; Products containing oils or fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/163—Sugars; Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/50—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for rodents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7008—Compounds having an amino group directly attached to a carbon atom of the saccharide radical, e.g. D-galactosamine, ranimustine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
- Y02P60/80—Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
- Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Birds (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
本发明公开了一种测定索玛鲁肽生物活性的方法，属于药物分析技术领域，具体涉及一种糖尿病动物模型的构建方法，包括：普通喂养阶段，即将健康大鼠采用大鼠维持饲料喂养3‑10 d；高脂喂养阶段，即对经过普通喂养阶段后的大鼠采用高脂饲料喂养15‑35 d；药物注射阶段，即对经过高脂喂养阶段后的大鼠注射STZ（链佐脲菌素）枸橼酸钠液，监测大鼠血糖，血糖高于12 mmol/L时确定该2型糖尿病动物模型建立完毕；高脂饲料为含有微量添加物的大鼠维持饲料，微量添加物为硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯。
Description
技术领域
本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种测定索玛鲁肽生物活性的方法。
背景技术
索玛鲁肽（Semaglutide）是新一代胰高血糖素样肽（GLP-1）受体激动剂，分子式为C187H291N45O59，分子量为4113.58，半衰期约7 d，是基于利拉鲁肽的基本结构而开发的长效剂型。与胰岛素治疗相比，GLP-1RA具有葡萄糖依赖性促胰岛素分泌的特性，可以降低低血糖事件的发生风险，延缓胃排空和中枢性食欲抑制作用，在平稳降低血糖的同时还可以控制体重。索玛鲁肽已于2017年10月获得美国食品药品管理局（FDA）全票通过上市，用于治疗2型糖尿病。
发明内容
索玛鲁肽的生物活性需要2型糖尿病动物进行验证，通过探索研究，发现一种用于构建2型糖尿病动物模型的方法。
本发明的目的在于提供一种糖尿病动物模型的构建方法。
本发明为实现上述目的，构建了一种糖尿病动物模型。
普通喂养阶段：将健康大鼠采用大鼠维持饲料喂养3-10 d；
高脂喂养阶段：对经过普通喂养阶段后的大鼠采用高脂饲料喂养15-35 d；
药物注射阶段：对经过高脂喂养阶段后的大鼠注射STZ（链佐脲菌素）枸橼酸钠溶液，监测大鼠血糖，血糖高于12 mmol/L时确定该2型糖尿病动物模型建立完毕；
高脂饲料为含有微量添加物的大鼠维持饲料，微量添加物为硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯。
优选地，硫代乙酰胺的使用量为大鼠维持饲料的0.01-0.03wt%。
优选地，胆固醇油酸酯的使用量为大鼠维持饲料的0.1-0.8wt%。
优选地，高脂饲料以大鼠维持饲料为主体饲料，配以脂类物质、糖类物质、蛋白添加物、植物粉添加物、微量添加物制备得到；
脂类物质为猪油、大豆油中一种或混合；
糖类物质为蔗糖、果糖、白砂糖中任一种或混合多种；
蛋白添加物为酪蛋白；
植物粉添加物为稻草粉、芦苇粉、仙人掌粉中一种或混合。
优选地，高脂饲料中脂类物质的使用量为大鼠维持饲料的20-40wt%。
优选地，高脂饲料中糖类物质的使用量为大鼠维持饲料的12-36wt%。
优选地，高脂饲料中蛋白添加物的使用量为大鼠维持饲料的3-9wt%。
优选地，高脂饲料中植物粉添加物的使用量为大鼠维持饲料的2-6wt%。
优选地，药物注射阶段大鼠采用高脂饲料喂养。
优选地，STZ枸橼酸钠溶液的注射剂量为8-24 mg/kg。STZ（链佐脲菌素）是糖尿病动物模型造模中常用的化学损伤药物，已知注射剂量在50 mg/kg以上便可以得到典型症状的糖尿病动物模型，更严重的会导致造模动物的死亡，而小剂量注射又容易导致糖尿病动物模型造模失败。本发明意外发现一种糖尿病动物模型的新型构建方法，通过含有硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯的高脂饲料喂养，仅需要小剂量的STZ便可以成功造模糖尿病动物。硫代乙酰胺可以对动物肝造成损伤，而极低剂量并不会对造模动物造成严重的肝损伤，而本发明发现，在使用极少量硫代乙酰胺、胆固醇油酸酯作为微量添加物引入高脂饲料后，再辅以注射少量STZ即能成功得到糖尿病动物模型，表明硫代乙酰胺、胆固醇油酸酯与STZ在本发明方法的使用下具有构建糖尿病动物模型的作用。
优选地，大鼠注射STZ枸橼酸钠溶液前采用医用乙醇消毒腹部，腹腔注射。
优选地，STZ枸橼酸钠溶液配制时，采用0.01-0.3 M的枸橼酸钠缓冲液配制得到1-15 mg/mL的STZ枸橼酸钠溶液。
更优选地，N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液配制时，采用0.01-0.3 M的枸橼酸钠缓冲液配制得到1-15 mg/mL的N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液。
更优选地，药物注射阶段中，在注射完STZ枸橼酸钠溶液后，可以继续注射N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液，注射剂量为0.3-3.6 mg/kg。STZ枸橼酸钠溶液与N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液联合使用提高了糖尿病动物模型的成功率，并降低了糖尿病动物的死亡率。
本发明的目的在于提供一种测定索玛鲁肽生物活性的方法。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种测定索玛鲁肽生物活性的方法，包括：对经过上述方法构建的2型糖尿病大鼠采用含有索玛鲁肽的大鼠维持饲料喂养5-10 d，通过监测糖尿病大鼠的血糖来测定索玛鲁肽的生物活性。索玛鲁肽生物活性的方法是在构建成功2型糖尿病大鼠后，在稳定、可控的条件下测试索玛鲁肽生物活性，通过改变糖尿病动物模型构建方法中的变量，得到糖尿病程度不同的大鼠并验证对应的索玛鲁肽生物活性。本发明的重点为糖尿病动物模型的构建。
优选地，大鼠维持饲料中加入索玛鲁肽的量为0.001-0.003wt%。
优选地，大鼠的每日喂食量为体重的5-10wt%。
本发明采用含硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯的高脂饲料喂养大鼠，并注射STZ枸橼酸钠溶液，成功构建得到糖尿病大鼠，具有如下有益效果：本发明成功得到2型糖尿病大鼠，造模成功率高（70-100%），大鼠死亡率低（3-20%）。因此，本发明建立了一种测定索玛鲁肽生物活性的方法。
附图说明
图1为大鼠血糖升高率图；
图2为大鼠体重下降率图；
图3为糖尿病大鼠造模成功率图；
图4为大鼠死亡率图。
具体实施方式
以下结合具体实施方式和附图对本发明的技术方案作进一步详细描述。
实施例1：一种糖尿病动物模型的构建方法
实施动物：SPF级健康Wistar大鼠，体重200 g。饲养环境：室温25℃，相对湿度为60%。
普通喂养阶段：将健康大鼠采用大鼠维持饲料喂养7 d，每日喂食量为体重的8wt%。最后一天禁食12 h，割尾取血并分离血清；测量空腹血糖、空腹胰岛素水平。
高脂喂养阶段：对经过普通喂养阶段后的大鼠采用高脂饲料喂养21 d，每日喂食量为体重的8wt%。最后一天禁食12 h，割尾取血并分离血清；测量空腹血糖、空腹胰岛素水平。
高脂饲料包含大鼠维持饲料、脂类物质、糖类物质、蛋白添加物、植物粉添加物、微量添加物。脂类物质为猪油，使用量为大鼠维持饲料的30wt%；糖类物质为白砂糖，使用量为大鼠维持饲料的20wt%；蛋白添加物为酪蛋白，使用量为大鼠维持饲料的6wt%；植物粉添加物为稻草粉，使用量为大鼠维持饲料的5wt%；微量添加物为硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯，使用量分别为大鼠维持饲料的0.02wt%和0.25wt%。
STZ枸橼酸钠溶液：用0.05 M的枸橼酸钠缓冲液配制10 mg/mL的STZ枸橼酸钠溶液。
药物注射阶段：对经过高脂喂养阶段后的大鼠腹腔注射15 mg/kg STZ（链佐脲菌素）枸橼酸钠溶液，采用大鼠维持饲料继续喂养，监测大鼠血糖，当血糖高于16.8 mmol/L时即可确定该2型糖尿病动物模型建立完毕。此阶段大鼠继续采用高脂饲料喂养，每日喂食量为体重的8wt%。
实施例2：一种糖尿病动物模型的构建方法
本实施例与实施例1相比，不同之处仅在于，高脂饲料中作为微量添加物的硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯的使用量分别为大鼠维持饲料的0.02wt%和0.45wt%。
实施例3：一种糖尿病动物模型的构建方法
本实施例与实施例1相比，不同之处仅在于，高脂饲料中作为微量添加物的硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯的使用量分别为大鼠维持饲料的0.02wt%和0.6wt%。
实施例4：一种糖尿病动物模型的构建方法
实施动物：SPF级健康Wistar大鼠，体重200 g。饲养环境：室温25℃，相对湿度为60%。
普通喂养阶段：将健康大鼠采用大鼠维持饲料喂养7 d，每日喂食量为体重的8wt%。最后一天禁食12 h，割尾取血并分离血清；测量空腹血糖、空腹胰岛素水平。
高脂喂养阶段：对经过普通喂养阶段后的大鼠采用高脂饲料喂养21 d，每日喂食量为体重的8wt%。最后一天禁食12 h，割尾取血并分离血清；测量空腹血糖、空腹胰岛素水平。
高脂饲料包含大鼠维持饲料、脂类物质、糖类物质、蛋白添加物、植物粉添加物、微量添加物。脂类物质为猪油，使用量为大鼠维持饲料的30wt%；糖类物质为白砂糖，使用量为大鼠维持饲料的20wt%；蛋白添加物为酪蛋白，使用量为大鼠维持饲料的6wt%；植物粉添加物为稻草粉，使用量为大鼠维持饲料的5wt%；微量添加物为硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯，使用量分别为大鼠维持饲料的0.02wt%和0.6wt%。
STZ枸橼酸钠溶液：用0.05 M的枸橼酸钠缓冲液配制10 mg/mL的STZ枸橼酸钠溶液。
N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液：用0.05 M的枸橼酸钠缓冲液配制10mg/mL的N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液。
药物注射阶段：对经过高脂喂养阶段后的大鼠腹腔注射15 mg/kg STZ（链佐脲菌素）枸橼酸钠溶液和0.42 mg/kg N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液，采用大鼠维持饲料继续喂养，监测大鼠血糖，当血糖高于16.8 mmol/L时即可确定该2型糖尿病动物模型建立完毕。此阶段大鼠继续采用高脂饲料喂养，每日喂食量为体重的8wt%。
实施例5：一种糖尿病动物模型的构建方法
本实施例与实施例4相比，不同之处仅在于，药物注射阶段中，N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液的注射剂量为1.3 mg/kg。
实施例6：一种糖尿病动物模型的构建方法
本实施例与实施例4相比，不同之处仅在于，药物注射阶段中，N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液的注射剂量为2.5 mg/kg。
实施例7：一种糖尿病动物模型的构建方法
本实施例与实施例1相比，不同之处仅在于高脂饲料的成分及用量。
高脂饲料包含大鼠维持饲料、脂类物质、糖类物质、蛋白添加物、植物粉添加物、微量添加物。脂类物质为猪油，使用量为大鼠维持饲料的30wt%；糖类物质为蔗糖，使用量为大鼠维持饲料的20wt%；蛋白添加物为酪蛋白，使用量为大鼠维持饲料的6wt%；植物粉添加物为稻草粉，使用量为大鼠维持饲料的5wt%；微量添加物为硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯，使用量分别为大鼠维持饲料的0.02wt%和0.6wt%。
实施例8：一种糖尿病动物模型的构建方法
本实施例与实施例1相比，不同之处仅在于高脂饲料的成分及用量。
高脂饲料包含大鼠维持饲料、脂类物质、糖类物质、蛋白添加物、植物粉添加物、微量添加物。脂类物质为猪油，使用量为大鼠维持饲料的30wt%；糖类物质为白砂糖，使用量为大鼠维持饲料的20wt%；蛋白添加物为酪蛋白，使用量为大鼠维持饲料的6wt%；植物粉添加物为芦苇粉，使用量为大鼠维持饲料的5wt%；微量添加物为硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯，使用量分别为大鼠维持饲料的0.02wt%和0.6wt%。
实施例9：一种糖尿病动物模型的构建方法
本实施例与实施例1相比，不同之处仅在于高脂饲料的成分及用量。
高脂饲料包含大鼠维持饲料、脂类物质、糖类物质、蛋白添加物、植物粉添加物、微量添加物。脂类物质为猪油，使用量为大鼠维持饲料的30wt%；糖类物质为白砂糖，使用量为大鼠维持饲料的20wt%；蛋白添加物为酪蛋白，使用量为大鼠维持饲料的6wt%；植物粉添加物为仙人掌粉，使用量为大鼠维持饲料的5wt%；微量添加物为硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯，使用量分别为大鼠维持饲料的0.02wt%和0.6wt%。
实施例10：一种糖尿病动物模型的构建方法
本实施例与实施例1相比，不同之处仅在于高脂饲料的成分及用量。
高脂饲料包含大鼠维持饲料、脂类物质、糖类物质、蛋白添加物、植物粉添加物、微量添加物。脂类物质为猪油，使用量为大鼠维持饲料的30wt%；糖类物质为蔗糖，使用量为大鼠维持饲料的20wt%；蛋白添加物为酪蛋白，使用量为大鼠维持饲料的6wt%；植物粉添加物为仙人掌粉，使用量为大鼠维持饲料的5wt%；微量添加物为硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯，使用量分别为大鼠维持饲料的0.02wt%和0.6wt%。
实施例11：一种测定索玛鲁肽生物活性的方法
索玛鲁肽治疗阶段：对2型糖尿病大鼠用含有0.002wt%索玛鲁肽的大鼠维持饲料喂养7 d，每日喂食量为体重的8wt%。监测大鼠的体重、血糖指标。
本实施例的2型糖尿病大鼠来自实施例3。
实施例12：一种测定索玛鲁肽生物活性的方法
索玛鲁肽治疗阶段：对2型糖尿病大鼠用含有0.002wt%索玛鲁肽的大鼠维持饲料喂养7 d，每日喂食量为体重的8wt%。监测大鼠的体重、血糖指标。
本实施例的2型糖尿病大鼠来自实施例6。
实施例13：一种测定索玛鲁肽生物活性的方法
索玛鲁肽治疗阶段：对2型糖尿病大鼠用含有0.002wt%索玛鲁肽的大鼠维持饲料喂养7 d，每日喂食量为体重的8wt%。监测大鼠的体重、血糖指标。
本实施例的2型糖尿病大鼠来自实施例8。
实施例14：一种测定索玛鲁肽生物活性的方法
索玛鲁肽治疗阶段：对2型糖尿病大鼠用含有0.002wt%索玛鲁肽的大鼠维持饲料喂养7 d，每日喂食量为体重的8wt%。监测的大鼠体重、血糖指标。
本实施例的2型糖尿病大鼠来自实施例9。
实施例15：一种测定索玛鲁肽生物活性的方法
实施动物：SPF级健康Wistar大鼠，体重200 g。饲养环境：室温25℃，相对湿度为60%。
普通喂养阶段：将健康大鼠采用大鼠维持饲料喂养7 d，每日喂食量为体重的8wt%。最后一天禁食12 h，割尾取血并分离血清；测量空腹血糖、空腹胰岛素水平。
高脂喂养阶段：对经过普通喂养阶段后的大鼠采用高脂饲料喂养21 d，每日喂食量为体重的8wt%。最后一天禁食12 h，割尾取血并分离血清；测量空腹血糖、空腹胰岛素水平。
高脂饲料包含大鼠维持饲料、脂类物质、糖类物质、蛋白添加物、植物粉添加物、微量添加物。脂类物质为猪油，使用量为大鼠维持饲料的30wt%；糖类物质为蔗糖，使用量为大鼠维持饲料的20wt%；蛋白添加物为酪蛋白，使用量为大鼠维持饲料的6wt%；植物粉添加物为仙人掌粉，使用量为大鼠维持饲料的5wt%；微量添加物为硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯，使用量分别为大鼠维持饲料的0.02wt%和0.6wt%。
STZ枸橼酸钠溶液：用0.05 M的枸橼酸钠缓冲液配制10 mg/mL的STZ枸橼酸钠溶液。
N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液：用0.05 M的枸橼酸钠缓冲液配制10mg/mL的N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液。
药物注射阶段：对经过高脂喂养阶段后的大鼠腹腔注射15 mg/kg STZ（链佐脲菌素）枸橼酸钠溶液和2.5 mg/kg N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液，采用大鼠维持饲料继续喂养，监测大鼠血糖，当血糖高于16.8 mmol/L时即可确定该2型糖尿病动物模型建立完毕。此阶段大鼠继续采用高脂饲料喂养，每日喂食量为体重的8wt%。
索玛鲁肽治疗阶段：对上述2型糖尿病大鼠采用含有0.002wt%索玛鲁肽的大鼠维持饲料喂养7 d，每日喂食量为体重的8wt%。监测大鼠体重、血糖指标。
本发明中实施例11-15中大鼠喂养含有索玛鲁肽的大鼠维持饲料后，通过对体重、血糖指标的前后比较便可以得出索玛鲁肽的效果。本发明方法可以将索玛鲁肽替换为任何具有降血糖效果的物质来验证该物质对糖尿病动物的治疗作用。
对比例1：
本对比例与实施例3相比，不同之处仅在于高脂饲料中未加入胆固醇油酸酯。
对比例2：
本对比例与实施例3相比，不同之处仅在于高脂饲料中未加入硫代乙酰胺。
对比例3：
本对比例与实施例3相比，不同之处仅在于高脂饲料中未加入硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯。
对比例4：
本对比例与实施例3相比，不同之处仅在于，药物注射阶段中，将STZ枸橼酸钠溶液替换为未加入STZ的枸橼酸钠溶液。
对比例5：
本对比例与实施例6相比，不同之处仅在于，药物注射阶段中，将STZ枸橼酸钠溶液替换为未加入STZ的枸橼酸钠溶液。
试验例1：
1.大鼠血糖检测
以下大鼠均在喂食180 min后采样检测血糖。
以实施例1的造模方法为参照设置大鼠正常对照组，不同之处在于，采用大鼠维持饲料喂养，药物注射阶段中，将STZ枸橼酸钠溶液替换为未加入STZ的枸橼酸钠溶液。
以实施例1的造模方法为参照设置高脂对照组，不同之处在于，高脂饲料中未加入硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯，并在药物注射阶段中，将STZ枸橼酸钠溶液替换为未加入STZ的枸橼酸钠溶液。
以实施例1的造模方法为参照设置正常STZ对照组，不同之处在于，采用大鼠维持饲料喂养，药物注射阶段中，将STZ枸橼酸钠溶液的注射量调整为50 mg/kg。本领域中可以确定，上述剂量可以造成大鼠胰岛β细胞损伤，得到糖尿病2型大鼠。
正常对照组大鼠喂养至8周，血糖最高处于5.1±0.5 mmol/L。高脂对照组大鼠喂养至8周，血糖最高处于6.8±0.9 mmol/L。正常STZ对照组大鼠喂养至8周，血糖最低处于13.8±1.5 mmol/L。因此，将血糖值大于12 mmol/L的大鼠列入构建成功的模型。
采用不同实施例及对比例中的造模方法对大鼠进行喂养及处理，以高脂对照组大鼠的血糖水平6.8mmol/L作为血糖检测的基准，则造模成功（血糖水平为12 mmol/L）时血糖升高率至少需要达到76.47%。各实施例和方法构建的大鼠的血糖升高率结果如图1所示，A为实施例1，B为实施例2，C为实施例3，D为实施例4，E为实施例5，F为实施例6，G为实施例7，H为实施例8，I为实施例9，J为实施例10，K为对比例1，L为对比例2，M为对比例3，N为对比例4，O为对比例5，其中，对比例1-5方法构建的大鼠血糖升高率均不超过15%，而实施例1-10法构建的大鼠血糖升高率均超过120%，因此实施例1-10均已成功构建糖尿病大鼠。实施例3与对比例1-4比较可以发现，只有高脂饲料中含有硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯，并且对大鼠注射STZ枸橼酸钠溶液，才能成功构建得到糖尿病大鼠。本发明对比例1-3表明，仅注射15 mg/kgSTZ枸橼酸钠溶液但高脂饲料中并未使用硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯，也不能成功得到糖尿病大鼠。
2.大鼠体重检测
以高脂饲料喂养后的体重作为基准，药物注射后继续喂养一段时间后的体重作为对比分析大鼠体重的变化。
采用不同实施例及对比例中的造模方法对大鼠进行喂养及处理，经过普通喂养和高脂喂养后，大鼠的平均体重为350±30 g，以此体重为基准，同药物注射阶段注射完STZ枸橼酸钠溶液后第7 d的体重进行对比，体重下降率如图2所示，A为实施例1，B为实施例2，C为实施例3，D为实施例4，E为实施例5，F为实施例6，G为实施例7，H为实施例8，I为实施例9，J为实施例10，K为对比例1，L为对比例2，M为对比例3，N为对比例4，O为对比例5。实施例1-10的体重下降率均为正值，表明造模成功的糖尿病大鼠继续喂养后体重下降，下降率在6%以上；对比例1-5的体重下降率均为负值，表明未造模成功的大鼠继续喂养后体重增加，增加率（下降率的绝对值）在6%以上。
3.造模成功率
大鼠在喂食180 min后采样检测血糖，各实施例及对比例均检测3组，每组10只。
采用不同实施例及对比例中的造模方法对大鼠进行喂养及处理，对比例1-5的方法喂养的大鼠均未造模成功，实施例1-10的方法喂养的大鼠大部分造模成功，小部分未造模成功的包含死亡的大鼠以及血糖值低于12 mmol/L的大鼠。本申请各方法的造模成功率如图3所示，A为实施例1，B为实施例2，C为实施例3，D为实施例4，E为实施例5，F为实施例6，G为实施例7，H为实施例8，I为实施例9，J为实施例10，因对比例1-5的方法喂养的大鼠均未造模成功，所以未计入对比，其中，实施例1方法的造模成功率为70%，实施例2方法的造模成功率为73.33%，实施例3方法的造模成功率为76.67%。实施例3与对比例1-4对比可知，只有高脂饲料中含有硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯并注射STZ枸橼酸钠溶液才能成功构建得到糖尿病大鼠；实施例4-6与实施例3对比可知，药物注射阶段中，STZ枸橼酸钠溶液与N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液联合使用时造模成功率可以进一步提高。
本发明造模方法的糖尿病大鼠造模成功率高，可达70-100%。
4.大鼠死亡率
采用不同实施例及对比例中的造模方法对大鼠进行喂养及处理，对比例1-5的方法喂养的大鼠均未死亡，而实施例1-10中均有大鼠死亡。本申请各方法的大鼠死亡率如图4示，A为实施例1，B为实施例2，C为实施例3，D为实施例4，E为实施例5，F为实施例6，G为实施例7，H为实施例8，I为实施例9，J为实施例10，因对比例1-5的方法喂养的大鼠均未死亡，所以未计入上述对比，其中，实施例1-2方法的大鼠死亡率为13.33%，实施例3方法的大鼠死亡率为16.67%，实施例4方法的大鼠死亡率为6.67%，实施例5-6方法的大鼠死亡率为3.33%。实施例4-6与实施例3对比可知，药物注射阶段中，STZ枸橼酸钠溶液与N-乙酰-D-葡糖胺-6-磷酸钠盐枸橼酸钠溶液联合使用时大鼠死亡率会有一定程度的降低。
本发明造模方法的大鼠死亡率低，可低至3-20%。
以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。
Claims (4)
1.一种2型糖尿病大鼠模型的构建方法，包括：
按糖尿病动物模型的构建方法构建2型糖尿病大鼠模型，所述大鼠采用高脂饲料喂养，并配合STZ枸橼酸钠液注射；所述高脂饲料为含有微量添加物的大鼠维持饲料，微量添加物为硫代乙酰胺和胆固醇油酸酯；所述STZ枸橼酸钠液的注射剂量为15-24 mg/kg；
所述硫代乙酰胺的使用量为大鼠维持饲料的0.02wt%；所述胆固醇油酸酯的使用量为大鼠维持饲料的0.25-0.6wt%；
所述糖尿病动物模型的构建方法为：
普通喂养阶段：将健康大鼠采用大鼠维持饲料喂养3-10 d；
高脂喂养阶段：对经过普通喂养阶段后的大鼠采用高脂饲料喂养21-35 d；
药物注射阶段：对经过高脂喂养阶段后的大鼠注射STZ枸橼酸钠液，监测大鼠血糖，血糖高于16.8 mmol/L时确定该2型糖尿病动物模型建立完毕；
所述高脂饲料以大鼠维持饲料为主体饲料，配以脂类物质、糖类物质、蛋白添加物、植物粉添加物、微量添加物制备得到；
所述脂类物质为猪油、大豆油中一种或混合；
所述糖类物质为蔗糖、果糖、白砂糖中任一种或混合多种；
所述蛋白添加物为酪蛋白；
所述植物粉添加物为稻草粉、芦苇粉、仙人掌粉中一种或混合；
所述高脂饲料中，脂类物质的使用量为大鼠维持饲料的20-40wt%，糖类物质的使用量为大鼠维持饲料的12-36wt%，蛋白添加物的使用量为大鼠维持饲料的3-9wt%，植物粉添加物的使用量为大鼠维持饲料的2-6wt%。
2.根据权利要求1所述的一种2型糖尿病大鼠模型的构建方法：所述药物注射阶段大鼠采用高脂饲料喂养。
3.根据权利要求1所述的一种2型糖尿病大鼠模型的构建方法：所述大鼠注射STZ枸橼酸钠液前采用医用乙醇消毒腹部，腹腔注射。
4.根据权利要求1所述的一种2型糖尿病大鼠模型的构建方法，其特征是：所述大鼠的每日喂食量为体重的5-10wt%。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111539913.7A CN114225012B (zh) | 2021-12-16 | 2021-12-16 | 一种测定索玛鲁肽生物活性的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111539913.7A CN114225012B (zh) | 2021-12-16 | 2021-12-16 | 一种测定索玛鲁肽生物活性的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114225012A CN114225012A (zh) | 2022-03-25 |
| CN114225012B true CN114225012B (zh) | 2022-10-25 |
Family
ID=80756807
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111539913.7A Active CN114225012B (zh) | 2021-12-16 | 2021-12-16 | 一种测定索玛鲁肽生物活性的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114225012B (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013138964A1 (zh) * | 2012-03-19 | 2013-09-26 | 中国人民解放军第二军医大学 | 异瑞香新素化合物在制备抗糖尿病药物中的应用 |
| CN107929311A (zh) * | 2017-12-19 | 2018-04-20 | 电子科技大学 | 一种2型糖尿病动物模型的建立方法 |
| CN108606957A (zh) * | 2016-12-13 | 2018-10-02 | 南京星银药业集团有限公司 | 一种含索马鲁肽的口服缓释制剂及其制备方法 |
| CN109221011A (zh) * | 2018-11-07 | 2019-01-18 | 任慧雯 | 一种通过饮食和stz诱导建立的sd大鼠肥胖和糖尿病研究模型的方法 |
| CN111557273A (zh) * | 2020-07-02 | 2020-08-21 | 贵州中医药大学 | 一种低温及饮食节律调控诱导2型糖尿病动物模型的方法 |
| CN111905097A (zh) * | 2020-08-23 | 2020-11-10 | 中国药科大学 | 一种口服降糖肽在制备治疗或预防糖尿病并发心血管疾病药物中的应用 |
-
2021
- 2021-12-16 CN CN202111539913.7A patent/CN114225012B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013138964A1 (zh) * | 2012-03-19 | 2013-09-26 | 中国人民解放军第二军医大学 | 异瑞香新素化合物在制备抗糖尿病药物中的应用 |
| CN108606957A (zh) * | 2016-12-13 | 2018-10-02 | 南京星银药业集团有限公司 | 一种含索马鲁肽的口服缓释制剂及其制备方法 |
| CN107929311A (zh) * | 2017-12-19 | 2018-04-20 | 电子科技大学 | 一种2型糖尿病动物模型的建立方法 |
| CN109221011A (zh) * | 2018-11-07 | 2019-01-18 | 任慧雯 | 一种通过饮食和stz诱导建立的sd大鼠肥胖和糖尿病研究模型的方法 |
| CN111557273A (zh) * | 2020-07-02 | 2020-08-21 | 贵州中医药大学 | 一种低温及饮食节律调控诱导2型糖尿病动物模型的方法 |
| CN111905097A (zh) * | 2020-08-23 | 2020-11-10 | 中国药科大学 | 一种口服降糖肽在制备治疗或预防糖尿病并发心血管疾病药物中的应用 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Kidney involvement in a nongenetic rat model of type 2 diabetes;Danda, RS等;《KIDNEY INTERNATIONAL》;20051231;第68卷(第6期);第2562-2571页 * |
| Potentiation of carbon tetrachloride hepatotoxicity and lethality in type 2 diabetic rats;Sharmilee P Sawant等;《J Pharmacol Exp Ther》;20031110;第308卷(第2期);第694-704页 * |
| 不同剂量STZ与高脂饲料联合诱导糖尿病小鼠模型;杨书榕等;《上海交通大学学报（农业科学版）》;20141231;第32卷(第6期);第78-82页 * |
| 糖肝康对硫代乙酰胺所致慢性肝损伤模型大鼠肝脏组织结构和Resistin表达的影响;钱秋海等;《中医学报》;20160201;第31卷(第2期);第238-242页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114225012A (zh) | 2022-03-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Silvestre et al. | Selective amylin inhibition of the glucagon response to arginine is extrinsic to the pancreas | |
| Kraegen et al. | A potent in vivo effect of ciglitazone on muscle insulin resistance induced by high fat feeding of rats | |
| WO2006086727A2 (en) | Treating diabetes with glucagon-like peptide-1 secretagogues | |
| CN107929311B (zh) | 一种2型糖尿病动物模型的建立方法 | |
| CN102100906A (zh) | 一种艾塞那肽的药用制剂及其制备方法 | |
| Battell et al. | Other models of type I diabetes | |
| Kitabchi et al. | Accelerated insulin degradation: an alternate mechanism for insulin resistance | |
| CN107952064A (zh) | 含有聚乙二醇洛塞那肽的药物制剂及其制备方法 | |
| CN114225012B (zh) | 一种测定索玛鲁肽生物活性的方法 | |
| JP2009058500A (ja) | 血糖値を降下させる物質の評価方法、スクリーニング方法及び製造方法 | |
| Adamkiewicz et al. | Alloxan diabetes and dextran" anaphylactoid" inflammation | |
| JPWO2010004916A1 (ja) | 血糖低下剤及びそれを添加してなる糖尿病の予防又は症状改善のための飲食品 | |
| THOMPSON et al. | Hypoglycemic effects of saccharin in experimental animals | |
| CN113575516B (zh) | 一种ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法 | |
| Horn et al. | Evaluation of an insulin zinc suspension for control of naturally occurring diabetes mellitus in dogs | |
| Colella et al. | Glucose utilization in islets of hyperglycemic rat models with impaired glucose-induced insulin secretion | |
| McCandless et al. | Alloxan diabetes in sheep under fasting and non-fasting conditions | |
| Dahl et al. | Adrenocortical function after prolonged salt restriction in hypertension | |
| Unger et al. | Glucagon in diabetes mellitus | |
| CN110476877A (zh) | 一种β细胞中特异性Raptor敲除同时GFP示踪的小鼠的制备方法 | |
| KR101235115B1 (ko) | 티모사포닌 ａ－ⅲ을 함유하는 제2형 당뇨병 예방 및치료용 조성물 | |
| Swingle et al. | Maintenance of adrenalectomized dogs with 9 alpha halo adrenal and other steroids | |
| CN115176758B (zh) | 一种非人灵长类动物1型糖尿病模型的建立方法 | |
| CN115136928B (zh) | 一种树鼩ⅱ型糖尿病快速的造模方法 | |
| CN114404568B (zh) | 一种丝胶蛋白多肽注射制剂及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 312000 No. 8, Hengyi Branch Road, Sanjie Town, Shengzhou City, Shaoxing City, Zhejiang Province Applicant after: Zhejiang Pai peptide biological Co.,Ltd. Address before: 312400 No.8, Hengyi Branch Road, Sanjie Town, Shengzhou City, Shaoxing City, Zhejiang Province Applicant before: ZHEJIANG PEPTITES BIOTECH Co.,Ltd. |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |