CN114224801A - 一种大马士革玫瑰枝叶提取物及其制备方法、组合物及应用 - Google Patents
一种大马士革玫瑰枝叶提取物及其制备方法、组合物及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种大马士革玫瑰枝叶提取物及其制备方法、组合物及应用,涉及玫瑰加工技术领域。一种大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,包括以下步骤:S1:大马士革玫瑰枝叶粉碎后经回流提取、过滤、浓缩为浸膏;S2:浸膏复溶后经两次萃取、浓缩,得到萃取物;S3:萃取物与进行吸附层析处理,浓缩,即得到大马士革玫瑰枝叶提取物。本发明还提供了大马士革玫瑰枝叶提取物和组合物及应用。本发明对大马士革玫瑰枝叶进行开发利用,制备出具有较好抗衰功效的大马士革玫瑰枝叶提取物,增加大马士革玫瑰的附加值。
Description
技术领域
本发明涉及玫瑰加工技术领域,具体而言,涉及一种大马士革玫瑰枝叶提取物及其制备方法、组合物及应用。
背景技术
随着人们生活方式和生活环境的改变,工作和生活节奏的加快,运动量的减少,人们所面临的负担也越来越重,时间长了,身体血液循环的速度就会变得越来越慢,导致皮肤出现老化加快的症状;一般来说,导致我们皮肤老化的一个重要原因是我们身体的胶原蛋白含量越来越少,胶原蛋白对皮肤是非常重要的,其可以让皮肤保持弹性和水嫩。
大马士革玫瑰,学名“突厥蔷薇”(Rosa damascena),蔷薇科蔷薇属,丛生灌木植物,大马士革玫瑰是保加利亚种植的主要的玫瑰品种,也是世界公认的优质玫瑰品种。《别录》中记载大马士革玫瑰有止泄痢腹痛,五脏客热,除邪逆气,疽癞诸恶疮,金疮伤挞,生肉复肌等功效。《纲目》中记载,其有除风热湿热,缩小便,止消渴的功效。
目前,玫瑰花用于生产制造各种产品,但是,每年修剪的大量玫瑰花枝叶只能作为废弃物丢弃在田间,即没有发挥玫瑰枝叶应有的价值,又对环境造成一定的污染。
发明内容
本发明的第一个目的在于提供一种大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,其可以对大马士革玫瑰枝叶进行开发利用,制备出具有较好抗衰功效的大马士革玫瑰枝叶提取物,增加大马士革玫瑰的附加值。
本发明的第二个目的在于提供一种大马士革玫瑰枝叶提取物,其由大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法制备得到。
本发明的第三个目的在于提供一种组合物,其包括大马士革玫瑰枝叶提取物。
本发明的第四个目的在于提供一种组合物的应用,组合物在制备护肤品中应用。
本发明的实施例通过以下技术方案实现:
一种大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1:收集修剪的大马士革玫瑰枝叶,粉碎后按一定比例加入70%乙醇水溶液进行回流提取,提取液经过滤、浓缩为浸膏;
S2:将浸膏复溶后先经石油醚萃取,去除石油醚萃取液;再加入正丁醇萃取,收集正丁醇萃取液浓缩,得到萃取物;
S3:将萃取物与AB-8大孔吸附树脂按比例进行吸附层析处理,收集洗脱液浓缩,即得到大马士革玫瑰枝叶提取物。
进一步地,所述步骤S1中大马士革玫瑰枝叶粉碎料中按1:4~6重量比加入70%乙醇水溶液。
进一步地,所述步骤S1的具体方法为:于50~70℃回流提取3~6h,过滤后于50~60℃减压浓缩。
进一步地,所述步骤S2中浸膏用8~12倍质量纯化水复溶。
进一步地,所述步骤S2中正丁醇萃取液于50~60℃减压浓缩至浸膏状。
进一步地,所述步骤S3中萃取物与吸附树脂的质量比为1:25~35。
进一步地,所述步骤S3的具体方法为:将所述萃取物用8~12倍质量纯化水溶解,并上样到AB-8大孔吸附树脂层析柱中,缓慢加入吸附树脂8~12倍体积的纯化水进行冲柱,再加入吸附树脂10~12倍体积的50%乙醇水溶液进行吸附层析处理。
一种大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法制备得到的大马士革玫瑰枝叶提取物。
一种组合物,包括大马士革玫瑰枝叶提取物。
进一步地,所述组合物包括以下重量百分比的组分:大马士革玫瑰枝叶提取物0.2~2%、水90~92%、羟乙基纤维素0.1~0.2%、丙二醇1~2%、对羟基苯乙酮0.2~0.5%、1,2-己二醇0.1~0.3%和甘油3~6%。
一种组合物在制备护肤品中的应用。
本发明实施例的技术方案至少具有如下优点和有益效果:
1.本发明对大马士革玫瑰枝叶进行开发利用,经回流提取、两次萃取和吸附层析对大马士革玫瑰枝叶进行处理,制得大马士革玫瑰枝叶提取物,具有较好抗衰功效的大马士革玫瑰枝叶提取物,增加大马士革玫瑰的附加值,减少对大马士革玫瑰枝叶的浪费和对环境的污染。
2.本发明制得大马士革玫瑰枝叶提取物,应用于制备组合物,组合物应用于制备护肤品,具有显著的抗衰功效。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例提供的一种大马士革玫瑰枝叶提取物及其制备方法、组合物及应用进行具体说明。
实施例1~4
实施例1~4提供了一种大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1:收集修剪的大马士革玫瑰枝叶,粉碎后大马士革玫瑰枝叶粉碎料中按1:6重量比加入70%乙醇水溶液于60℃回流提取4h,过滤后于60℃减压浓缩为浸膏;
S2:将浸膏用10倍质量纯化水复溶,先按1:1体积比加入石油醚萃取,去除石油醚萃取溶液;在水溶液中按1:1体积比加入正丁醇萃取,收集正丁醇萃取溶液,于60℃减压浓缩至浸膏状,得到萃取物;
S3:将所述萃取物用10倍质量纯化水溶解,并按1:30质量比上样到AB-8大孔吸附树脂层析柱中,缓慢加入吸附树脂10倍体积的纯化水进行冲柱,再加入吸附树脂10倍体积的50%乙醇水溶液进行吸附层析处理,收集洗脱液浓缩至浸膏状,即得到大马士革玫瑰枝叶提取物。
实施例5
实施例5提供了一种大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1:收集修剪的大马士革玫瑰枝叶,粉碎后大马士革玫瑰枝叶粉碎料中按1:4重量比加入70%乙醇水溶液于50℃回流提取3h,过滤后于50℃减压浓缩为浸膏;
S2:将浸膏用8倍质量纯化水复溶,先按1:1体积比加入石油醚萃取,去除石油醚萃取溶液;在水溶液中按1:1体积比加入正丁醇萃取,收集正丁醇萃取溶液,于50℃减压浓缩至浸膏状,得到萃取物;
S3:将所述萃取物用8倍质量纯化水溶解,并按1:25质量比上样到AB-8大孔吸附树脂层析柱中,缓慢加入吸附树脂8倍体积的纯化水进行冲柱,再加入吸附树脂11倍体积的50%乙醇水溶液进行吸附层析处理,收集洗脱液浓缩至浸膏状,即得到大马士革玫瑰枝叶提取物。
实施例6
实施例6提供了一种大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1:收集修剪的大马士革玫瑰枝叶,粉碎后大马士革玫瑰枝叶粉碎料中按1:5重量比加入70%乙醇水溶液于60℃回流提取6h,过滤后于55℃减压浓缩为浸膏;
S2:将浸膏用12倍质量纯化水复溶,先按1:2体积比加入石油醚萃取,去除石油醚萃取溶液;在水溶液中按1:2体积比加入正丁醇萃取,收集正丁醇萃取溶液,于55℃减压浓缩至浸膏状,得到萃取物;
S3:将所述萃取物用12倍质量纯化水溶解,并按1:35质量比上样到AB-8大孔吸附树脂层析柱中,缓慢加入吸附树脂12倍体积的纯化水进行冲柱,再加入吸附树脂12倍体积的50%乙醇水溶液进行吸附层析处理,收集洗脱液浓缩至浸膏状,即得到大马士革玫瑰枝叶提取物。
实施例1~6均还提供一种组合物,分别包括实施例1~6制得的大马士革玫瑰枝叶提取物,配方如表1所示。
表1组合物
对比例1
本对比例提供了一种大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,包括以下步骤:收集修剪的大马士革玫瑰枝叶,粉碎后大马士革玫瑰枝叶粉碎料中按1:6重量比加入70%乙醇水溶液于60℃提取25min,过滤后于60℃减压浓缩为浸膏,即得大马士革玫瑰枝叶提取物。
对比例2
本对比例提供了一种大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1:收集修剪的大马士革玫瑰枝叶,粉碎后大马士革玫瑰枝叶粉碎料中按1:6重量比加入70%乙醇水溶液于60℃提取25min,过滤后于60℃减压浓缩为浸膏;
S2:将浸膏用10倍质量纯化水溶解,并按1:30质量比上样到AB-8大孔吸附树脂层析柱中,缓慢加入吸附树脂10倍体积的纯化水进行冲柱,再加入吸附树脂10倍体积的50%乙醇水溶液进行吸附层析处理,收集洗脱液浓缩至浸膏状,即得到大马士革玫瑰枝叶提取物。
对比例1~2均还提供一种组合物,分别包括对比例1~2制得的大马士革玫瑰枝叶提取物,配方如表2所示。
表2组合物
实验例1
本实验例以FB细胞(人真皮成纤维细胞)为模型细胞,用大马士革玫瑰枝叶提取物进行处理,通过免疫细胞荧光试验检测细胞中COLⅠ(Ⅰ型胶原蛋白)和MMP-1(基质金属蛋白酶1)的表达,考察大马士革玫瑰枝叶提取物对皮肤胶原蛋白合成的作用。
具体试验方法:
(1)接种细胞:取FB细胞用10%FBS DMEM培养基在T175的培养瓶里培养,待细胞密度约80%,用0.05%胰酶消化,1000rpm/min离心5min。重悬接种于铺有细胞爬片的24孔板。
(2)加药处理:24h后吸掉上清液,分别加入实施例1~6制得的组合物和对比例1~2制得的组合物、空白组组合物,每孔加入1mL,并设置三个复孔,置于37℃、5%CO2培养箱孵育48h。空白组组合物包括以下质量百分比的组分:水92%、羟乙基纤维素0.2%、丙二醇2%、对羟基苯乙酮0.5%、1,2-己二醇0.3%和甘油5%。
(3)制片及染色:孵育完毕,弃上清,用PBS洗一遍,每孔加入300μL冰甲醇,于-20℃固定,固定完毕用PBS洗三遍,加入5%BSA于室温封闭1h,封闭完毕弃上清,分别加入COLⅠ和MMP-1一抗于4℃孵育过夜,第二天用PBS洗三遍,加入相应二抗后避光室温孵育1.5h,最后用DAPI染核封片,随后在荧光显微镜下观察拍摄照片。
(4)统计分析:将荧光照片使用Image J软件进行分析,分析得到的数据使用Graphpad prism软件进行统计,结果如表3所示。
表3 FB细胞中COLⅠ和MMP-1表达量
胶原蛋白是皮肤蛋白质的主要成分,在人体真皮中约占蛋白质的90%,其中主要由Ⅰ型胶原蛋白(80%)和少量的Ⅲ型胶原蛋白(10%)组成,胶原蛋白使皮肤有强度和弹性;MMPs是与胶原降解有关的酶,根据其底物不同可分为5类,其中MMP-1是最有效的胶原酶,其作用是降解Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白。
由表3可以看出,和对比例1~2相比,实施例3~6制得的组合物均可显著提升COLⅠ的表达量,其中实施例3制得的组合物使COLⅠ的表达量提升36.8%,实施例4制得的组合物使COLⅠ的表达量提升38%;同时,实施例1~6制得的组合物均可有效抑制MMP-1的表达,其中,实施例2和实施例3可显著抑制MMP-1的表达,实施例2制得的组合物使MMP-1的表达量减少19.3%,实施例3制得的组合物使MMP-1的表达量减少24.1%;对比例1只采用乙醇提取制得大马士革玫瑰枝叶提取物,对比例2只采用乙醇提取和吸附树脂层析制得大马士革玫瑰枝叶提取物;本发明经回流提取、石油醚和正丁醇两次萃取及吸附层析对大马士革玫瑰枝叶进行处理制得的大马士革玫瑰枝叶提取物,其应用于制备组合物,可以显著提高COLⅠ的表达量、显著减少MMP-1的表达量,即具有提高FB细胞胶原蛋白的合成作用,从而对皮肤具有显著的抗衰功效。
综上,本申请提供的一种大马士革玫瑰枝叶提取物及其制备方法、组合物及应用,对大马士革玫瑰枝叶进行开发利用,增加大马士革玫瑰的附加值,其制备出的大马士革玫瑰枝叶提取物用于制备组合物,组合物在制备护肤品中应用,具有显著的抗衰功效。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:收集修剪的大马士革玫瑰枝叶,粉碎后按一定比例加入70%乙醇水溶液进行回流提取,提取液经过滤、浓缩为浸膏;
S2:将浸膏复溶后先经石油醚萃取,去除石油醚萃取液;再加入正丁醇萃取,收集正丁醇萃取液浓缩,得到萃取物;
S3:将萃取物与AB-8大孔吸附树脂按比例进行吸附层析处理,收集洗脱液浓缩,即得到大马士革玫瑰枝叶提取物。
2.根据权利要求1所述的大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中大马士革玫瑰枝叶粉碎料中按1:4~6重量比加入70%乙醇水溶液。
3.根据权利要求1所述的大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,其特征在于,所述步骤S2中浸膏用8~12倍质量纯化水复溶。
4.根据权利要求1所述的大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法,其特征在于,所述步骤S3中萃取物与AB-8大孔吸附树脂的质量比为1:25~35。
5.一种由权利要求1~4任一项所述的大马士革玫瑰枝叶提取物的制备方法制备得到的大马士革玫瑰枝叶提取物。
6.一种组合物,其特征在于,包括权利要求1~4任一项所述的制备方法制备的大马士革玫瑰枝叶提取物或权利要求5所述的大马士革玫瑰枝叶提取物。
7.根据权利要求6所述的组合物,其特征在于,包括以下重量百分比的组分:大马士革玫瑰枝叶提取物0.2~2%、水90~92%、羟乙基纤维素0.1~0.2%、丙二醇1~2%、对羟基苯乙酮0.2~0.5%、1,2-己二醇0.1~0.3%和甘油3~6%。
8.一种权利要求6~7所述的组合物在制备护肤品中的应用。
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