CN114209607A - 一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的方法及组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的方法，方法为将二棕榈酰羟脯氨酸以中和形式应用于组合物中。同时公开了一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，组合物中的二棕榈酰羟脯氨酸以中和形式应用，按重量份数计包含以下组分：油类0.1‑50份、二棕榈酰羟脯氨酸0.08‑5份、螯合剂0.001‑0.2份、保湿剂0.01‑30份、增稠剂0.01‑5.0份、中和剂0.001‑7.5份、防腐剂0.01‑3份以及水20‑99份。属于化妆品技术领域，本发明公开的方法及组合物，既能发挥二棕榈酰羟脯氨酸良好的抗皱抗衰功效，又能提升人体皮肤安全性，降低眼部刺激性。同时中和后的二棕榈酰羟脯氨酸具备一定的乳化能力，可以在减少或不加传统乳化剂的基础上，制备出稳定的乳状液，节约了生产成本，具有良好的市场应用前景。

Description

一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的方法及组合物
技术领域
本发明公开了一种在化妆品中应用合成原料的方法及组合物，具体地说，是一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的方法及组合物，属于化妆品技术领域。
背景技术
众所周知，肌肤老化分自然老化和环境因素导致的老化，一般25岁以后，女性的皮肤的新陈代谢就会日趋缓慢，角质层会渐渐堆积变厚。除了年龄会影响皮肤状况，由于工作、生活压力导致的体内荷尔蒙的变化，环境的污染，紫外线的辐射，不良的饮食习惯以及不恰当的肌肤保养方式均会影响皮肤健康，导致大量自由基的生成，这些活跃的分子基团会引发一系列自由基反应，造成细胞的损伤甚至死亡，从而使肌肤加速衰老。坚持长期正确使用有效的抗衰紧致护肤品，在一定程度上可以有效延缓皮肤衰老的速度。随着经济发展，人们对化妆品需求上升，抗皱化妆品成为备受消费者关注的对象。
在众多抗皱添加剂中，二棕榈酰羟脯氨酸作为羟脯氨酸的载体可以单一形式或与任何有抗皱、减缓皮肤松弛，提升肌肤弹性作用的产品配合使用，在抗皱类化妆品中有很大的应用潜力。二棕榈酰羟脯氨酸能刺激胶原纤维的紧缩，保护弹性纤维对抗酶的降解，捕捉自由基，保护皮肤细胞(如纤维原细胞)，修复皮肤抗老化防御(增加TIMPs)，抑制MMPs的活性，保护胶原质和DEJ结构，具有比维生素C更强的刺激胶原纤维收缩作用和抑制弹性蛋白酶活性的作用，具有理想的皮肤亲和力和刺激胶原纤维收缩，恢复皮肤紧实度作用，并能有效保护弹性蛋白，清除氧自由基，增加皮肤中水份含量等作用。二棕榈酰羟脯氨酸作为油溶性原料，其使用方法通常是与油类互溶加至组合物中，同时添加乳化剂，将其和油类乳化成稳定的乳状液。二棕榈酰羟脯氨酸以这种使用方式添加至组合物中，对人体皮肤具有一定的刺激性，且随着添加量增加，其刺激性也会增加。
因此，研究一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的方法，使得二棕榈酰羟脯氨酸在应用过程中既能发挥良好的抗皱抗衰功效，又能提升人体皮肤安全性，降低眼部刺激性十分有必要。
发明内容
针对上述不足，本发明的目的是提供一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的方法及组合物品，既能发挥二棕榈酰羟脯氨酸良好的抗皱抗衰功效，又能提升人体皮肤安全性，同时中和后的二棕榈酰羟脯氨酸具备一定的乳化能力，可以在减少或不加传统乳化剂的基础上，制备出稳定的乳状液。
为此，本发明提供的第一个技术方案是这样的：
一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的方法，所述方法为将二棕榈酰羟脯氨酸以中和形式应用于组合物中。
本申请同时公开了一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，所述组合物中的二棕榈酰羟脯氨酸以中和形式应用，按重量份数计包含以下组分：油类0.1-50份、二棕榈酰羟脯氨酸0.08-5份、螯合剂0.001-0.2份、保湿剂0.01-30份、增稠剂0.01-5.0份、中和剂0.001-7.5份、防腐剂0.01-3份以及水20-99份。
作为优选，所述油类为椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、生育酚(维生素E)、生育酚乙酸酯、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、新戊二醇二庚酸酯、甘油三(乙基己酸)酯、霍霍巴籽油、角鲨烷、白池花籽油、稻糠油、澳洲坚果籽油、油橄榄果油、葡萄籽油、月桂酸己酯、氢化聚异丁烯、矿油、碳酸二乙基己酯、碳酸二辛酯、燕麦仁油、月桂酸异戊酯、丁二醇二辛酸/二癸酸酯、二辛基醚、己二酸二丁酯、癸二酸二异丙酯、异硬脂醇、琥珀酸二乙氧基乙酯、异壬酸异壬酯、辛酸/癸酸甘油三酯、鲸蜡醇乙基己酸酯、异十三醇异壬酸酯、二C12-13醇苹果酸酯、刺阿干树仁油、牛油果树果脂、甜扁桃油、氢化棕榈仁油、C10-18脂酸甘油三酯类、矿脂、季戊四醇四(乙基己酸)酯、氢化聚癸烯、C12-15醇苯甲酸酯、液体石蜡、棕榈酸异丙酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸乙基己酯、异硬脂醇异硬脂酸酯、十三烷醇偏苯三酸酯、异十二烷、异十六烷、小麦胚芽油、蓖麻籽油、亚麻籽油、鳄梨油、辛基十二醇、辛酸/癸酸/肉豆蔻酸/硬脂酸甘油三酯、三(辛基十二烷醇)柠檬酸酯、C13-14异链烷烃、向日葵籽油、氢化大豆油、低芥酸菜子油、聚异丁烯、狗牙蔷薇果油、辛基十二醇肉豆蔻酸酯、季戊四醇二硬脂酸酯、PPG-3肉豆蔻醇醚、氢化松脂酸甲酯、二异硬脂醇苹果酸酯、椰子油、棕榈油、月见草油、山茶籽油、大豆油、沙棘籽油、扁核木油、C12-13醇乳酸酯、三异癸醇偏苯三酸酯、十一烷、十三烷、氢化蓖麻油、青刺果油中的一种或多种。
作为优选，所述螯合剂为EDTA二钠、EDTA三钠、EDTA四钠、六偏磷酸钠、乙二胺二琥珀酸三钠中的一种或多种。
作为优选，所述保湿剂为甘油、1,3-丁二醇、1,2-己二醇、1,2-戊二醇、2,3-丁二醇、双丙甘醇、甲基丙二醇、丙二醇、1,3-丙二醇、甲基葡糖醇聚醚-10、甲基葡糖醇聚醚-20、聚甘油-10、山梨醇、甘油聚醚-26、聚乙二醇-8、PEG/PPG/聚丁二醇-8/5/3甘油、双甘油、PPG-10甲基葡糖醚、聚甘油-3、小核菌胶、水解小核菌胶、透明质酸、透明质酸钠、水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠、乙酰壳糖胺、琥珀酰聚糖、异戊二醇、聚谷氨酸钠、皱波角叉菜提取物、皱波角叉菜中的一种或多种。
作为优选，所述增稠剂为黄原胶、卡拉胶、纤维素、纤维素胶、羟乙基纤维素、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、卡波姆、丙烯酸(酯)类共聚物、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、聚丙烯酸钠、聚丙烯酸钾、聚丙烯酸酯交联聚合物-6、丙烯酸(酯)类共聚物钠、PEG-240/HDI共聚物双-癸基十四醇聚醚-20醚、丙烯酰胺/丙烯酸铵共聚物、聚丙烯酸酯-13、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、硅酸铝镁、膨润土、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、丙烯酸(酯)类/异癸酸乙烯酯交联聚合物、藻酸钠、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵、聚丙烯酸、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸钠、丙烯酸(酯)类交联聚合物钠-2、丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、聚丙烯酰胺、卡波姆钠、丙烯酸(酯)类/鲸蜡醇聚醚-20甲基丙烯酸酯共聚物、丙烯酸(酯)类/棕榈油醇聚醚-25丙烯酸酯共聚物、结冷胶、丙烯酸(酯)类/丙烯酰胺共聚物、丙烯酸(酯)类/硬脂醇聚醚-20甲基丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酰胺/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物、聚乙二醇-14M、聚丙烯酸钠接枝淀粉、甘油聚丙烯酸酯、丙烯酸(酯)类/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物、改性玉米淀粉、卡波姆钠、司拉氯铵水辉石中的一种或多种。
作为优选，所述中和剂为氢氧化钾、氢氧化钠、精氨酸、氨丁三醇、氨甲基丙醇、三乙醇胺、氨甲基丙二醇、二甲基乙醇胺、二乙基乙醇胺中的一种或多种。
作为优选，所述防腐剂为辛酰羟肟酸、乙基己基甘油、氯苯甘醚、苯氧乙醇、羟苯甲酯、羟苯乙酯、苯甲酸钠、山梨酸钾、o-伞花烃-5-醇、甘油辛酸酯、二氯苯甲醇、1,2-己二醇、1,2-戊二醇、对羟基苯乙酮、辛甘醇中的一种或多种。
作为优选，所述组合物中二棕榈酰羟脯氨酸与中和剂的的重量比为1:(0.002-2.5)。
进一步地，所述组合物中二棕榈酰羟脯氨酸与中和剂的的重量比为1:(0.004-2.1)。
作为优选，按重量份数计还包括聚硅氧烷0.01-20份。
进一步地，所述聚硅氧烷为环五聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷醇、聚甲基硅倍半氧烷、聚二甲基硅氧烷交联聚合物、辛基聚甲基硅氧烷、乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物、苯基聚三甲基硅氧烷、硬脂基聚二甲硅氧烷、二苯基甲硅烷氧基苯基聚三甲基硅氧烷、丙烯酸(酯)类/聚三甲基硅氧烷甲基丙烯酸酯共聚物、乙烯基聚二甲基硅氧烷/聚甲基硅氧烷硅倍半氧烷交联聚合物、鲸蜡基聚二甲基硅氧烷、聚硅氧烷-11、聚甲基硅氧烷、二聚硅氧烷、甲基聚三甲基硅氧烷中的一种或多种。
作为优选，按重量份数计还包含脂肪醇0.01-10份。
进一步地，所述脂肪醇为鲸蜡醇、硬脂醇、山嵛醇、鲸蜡硬脂醇、花生醇、椰油醇、C12-16醇、C14-22醇、C20-22醇中的一种或多种
作为优选，按重量份数计还包含脂肪酸0.01-5份。
进一步地，所述脂肪酸为月桂酸、棕榈酸、肉豆蔻酸、硬脂酸中的一种或多种。
与现有技术相比，本发明具有的有益效果如下：
1、本发明所公布的应用二棕榈酰羟脯氨酸的方法，通过将二棕榈酰羟脯氨酸以中和的方式进行应用，一方面能够减少因为在化妆品组合物中添加二棕榈酰羟脯氨酸而使得组合物的稳定性降低的情况发生，另一方面还可以提升人体皮肤安全性，减少因为在化妆品组合物中添加二棕榈酰羟脯氨酸而使得组合物对皮肤产生刺激的情况发生。
2、本发明所公布的应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，成分类型简单，易于制备，安全温和，同时中和后的二棕榈酰羟脯氨酸具备了一定的乳化能力，可以在减少或不加传统乳化剂的基础上，制备出稳定的乳状液，节约了生产成本，具有良好的市场应用前景。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何人在本发明权利要求保护范围内所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。
下述实施例与对比例中的组分原料无特殊说明均为市售。
实施例1：
一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，包含有如下组分：生育酚乙酸酯0.6克、霍霍巴籽油9克、月桂酸己酯6克、二棕榈酰羟脯氨酸2.49克、棕榈酸0.51克、水249.21克、EDTA二钠0.06克、甘油18克、黄原胶0.45克、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵1.5克、精氨酸0.18克、对羟基苯乙酮1.5克、1,2-己二醇1.5克、丁二醇9克。
实施例2：
一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，包含有如下组分：生育酚乙酸酯0.6克、霍霍巴籽油9克、月桂酸己酯6克、二棕榈酰羟脯氨酸2.49克、棕榈酸0.51克、水249.03克、EDTA二钠0.06克、甘油18克、黄原胶0.45克、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵1.5克、精氨酸0.36克、对羟基苯乙酮1.5克、1,2-己二醇1.5克、丁二醇9克。
实施例3：
一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，包含有如下组分：生育酚乙酸酯0.6克、霍霍巴籽油9克、月桂酸己酯6克、二棕榈酰羟脯氨酸2.49克、棕榈酸0.51克、水248.85克、EDTA二钠0.06克、甘油18克、黄原胶0.45克、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵1.5克、精氨酸0.54克、对羟基苯乙酮1.5克、1,2-己二醇1.5克、丁二醇9克。
实施例4：
一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，包含有如下组分：生育酚乙酸酯0.6克、霍霍巴籽油9克、月桂酸己酯6克、二棕榈酰羟脯氨酸2.49克、棕榈酸0.51克、水248.67克、EDTA二钠0.06克、甘油18克、黄原胶0.45克、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵1.5克、精氨酸0.72克、对羟基苯乙酮1.5克、1,2-己二醇1.5克、丁二醇9克。
对比例1：
一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，包含有如下组分：生育酚乙酸酯0.6克、霍霍巴籽油9克、月桂酸己酯6克、二棕榈酰羟脯氨酸2.49克、棕榈酸0.51克、水249.39克、EDTA二钠0.06克、甘油18克、黄原胶0.45克、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵1.5克、对羟基苯乙酮1.5克、1,2-己二醇1.5克、丁二醇9克。
对比例2：
一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，包含有如下组分：生育酚乙酸酯0.6克、霍霍巴籽油9克、月桂酸己酯6克、二棕榈酰羟脯氨酸4.98克、棕榈酸1.02克、水246.39克、EDTA二钠0.06克、甘油18克、黄原胶0.45克、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵1.5克、对羟基苯乙酮1.5克、1,2-己二醇1.5克、丁二醇9克。
表1、实施例1-4及对比例1-2组分表
Figure BDA0003464808980000051
Figure BDA0003464808980000061
为了证明本发明的效果，对上述实施例及对比例的稳定性、安全性和功效性进行验证，通过高低温稳定性测试、斑贴试验、鸡胚实验、细胞毒性实验、抗皱功效测试等测试来验证说明书中所描述的效果，证明依据本发明所提供的技术方案得到的产品状态稳定、具有抗皱功效，可以有效提升人体皮肤安全性，降低眼部刺激性。
1、稳定性测试：
实验方法：针对实施例1-4与对比例1-2中的样品分别进行光照、耐热、耐寒、常温条件下的稳定性测试。
(1)、光照：将实施例1-4与对比例1-2的测试样品放于光照处，观察样品第0、1、2、4、8周的变化，是否发生变化。
表2样品在光照条件下的测试结果
Figure BDA0003464808980000062
其中，√表示样品状态正常，下同。
从表中可以看出，经过8周时间，实施例1-2与对比例1-2的精华乳在光照条件下气味有轻微差异，实施例3-4在光照条件下状态稳定，没有发生状态变化。说明实施例3-4光照条件下，稳定性优于实施例1-2与对比例1-2。
(2)、耐寒：将实施例1-4与对比例1-2的测试样品置于-15℃培养箱内低温测试，观察样品变化。
表3样品的耐寒测试结果
Figure BDA0003464808980000071
从表中可以看出，经过8周时间，实施例1-4与对比例1-2的精华乳在-15℃条件下状态稳定，没有发生状态变化，说明其耐寒效果佳。
(3)、耐热：将实施例1-4与对比例1-2的测试样品置于45℃培养箱内高温测试，观察样品变化；
表4样品的耐热测试结果
Figure BDA0003464808980000072
Figure BDA0003464808980000081
从表中可以看出，经过8周时间，对比例1-2的精华乳在45℃条件下颜色和气味与常温条件对比有轻微差异，实施例1-2仅气味有轻微差异，实施例3-4没有发生状态变化，说明其耐热效果佳。相对对比例1-2，有中和的耐热效果更佳，且随中和度上升，其耐热效果更好。
(4)、常温：将实施例1-4与对比例1-2的测试样品放于常温中，观察样品变化；
表5样品的常温测试结果
Figure BDA0003464808980000082
从表中可以看出，经过8周时间，实施例1-4与对比例1-2的精华乳在常温条件下状态稳定，没有发生状态变化，说明其在常温条件下具有较好的稳定性。
2、体外眼刺激试验-鸡胚绒毛***试验：
2.1、试验材料
2.1.1、鸡胚：SPF级。
2.1.2、其它材料：电子计时器。
2.2、试验条件：孵化箱温度37.5℃±0.5℃，孵化箱相对湿度55％-70％。
2.3、对照：阴性对照为0.9％的NaCl溶液，阳性对照为0.1mol/LNaOH溶液。
2.4、试验步骤
2.4.1、CAM制备：购买0天龄以内的鸡胚，气室朝上运输至实验室。鸡胚到货后需立即运回，气室朝上置于孵化箱中孵化；第2天时，将鸡胚放平；孵化到4天时照蛋检查，在受精位置做标记，于气孔另一端开一小孔，用注射器抽取蛋清2.5-3ml后用石蜡封口，在受精位置的正上方开一个1*1cm2的小口，检查鸡胚发育情况，弃去未发育或发育不好的鸡胚，检查完毕后用保鲜膜将此开口封住，放回孵化箱继续孵化，每天观察鸡胚发育情况；孵化到14天开始试验。
2.4.2、受试物制备：受试物以未稀释原样终点评价法进行试验；阳性对照和阴性对照采用相同的操作过程。
2.4.3、正式试验：每组至少6只鸡胚，取受试物原样0.4mL直接滴加在CAM表面，作用30min后，观察CAM反应情况，记录反应的程度。
2.4.4、评分程度标准：有充血0.5分；出血、凝血和血管融解的轻微现象0.5分；轻度1分；中度2分；重度3分。
2.4.5、计算终点评分(ES)：每只鸡胚计分＝每只鸡胚观察到的充血、出血、凝血和血管融解程度的和；ES＝6只鸡胚得分的数学总和。根据ES数值对受试物眼刺激进行分类。表2.4.6、根据计算的ES数值对受试物眼刺激性进行分类
表6、根据ES数值对受试物眼刺激性的分类标准
终点评分 刺激性分类
0≤ES＜6 无眼刺激性
6≤ES≤12 轻眼刺激性
12＜ES＜16 中眼刺激性
ES≥16 强眼刺激性
表7、鸡胚绒毛***试验结果
Figure BDA0003464808980000101
由上可知，在不中和的情况下，随二棕榈酰羟脯氨酸浓度增加，对眼刺激性增大；有中和的对比无中和的，鸡胚分数更低，对眼刺激性减小，安全性更佳。
3、人体皮肤封闭型斑贴试验
3.1、测试样品：利用实施例1-4与对比例1-2样品制备例制备的护肤品。
3.2、受试者：选取健康志愿者31名，年龄18～24岁，受试者应符合志愿者入选标准，无过敏性皮炎史，且前一个月也未使用刺激性产品。
3.3、斑试方法：选用合格的斑试器材，以封闭型斑贴试验方法，将受试物约0.020g-0.025g置于斑试器内，外用低致敏胶带贴敷于受试者手臂，24小时后去除受试物，分别于去除后0.5、24、48小时观察皮肤反应，按《化妆品安全技术规范》2015年版中皮肤反应分级标准记录其结果。
表8、鉴定标准表
等级 鉴定标准
0 无刺激、无红斑
1 轻度红斑
2 红斑
3 红斑、丘疹、水泡
4 严重附浮肿、大泡
表9、皮肤反应结果记录表
Figure BDA0003464808980000111
Figure BDA0003464808980000121
由封闭型斑贴测试结果可知，不中和的情况下，随二棕榈酰羟脯氨酸浓度增加，对人体皮肤刺激性增大；有中和的安全性更佳，且随中和度增加，安全性更佳。
4、细胞抗皱测试：Ⅰ型胶原蛋白含量测定
4.1、试验目的及原理：胶原蛋白是细胞外基质最重要的组成成份，使皮肤具有伸展性，可以补充皮肤各层所需的营养。随着年龄的增长和外界环境的影响，一方面胶原蛋白的合成能力逐渐降低，另一方面体内胶原蛋白酶的产生增多，蛋白降解加速，最终导致皮肤表层变薄，失去水分和弹性，形成皱纹。因此，降低体内胶原蛋白酶的产生速度或抑制其活性，或者促进皮肤胶原蛋白的合成能力均有助于减缓皮肤皱纹的产生或使皱纹变得不明显。同时，及时给皮肤补充水分，也有助于保持皮肤屏障正常，促进抗皱的效果。人真皮成纤维细胞能在体内合成Ⅰ型前胶原并分泌至胞外。Ⅰ型前胶原在末端前胶原肽酶的作用下，端肽分离后，聚合形成胶原纤维。因此，人真皮成纤维细胞可以作为研究化妆品促进Ⅰ型胶原蛋白合成的细胞模型，通过测定给药后，空白组与实验组Ⅰ型胶原蛋白含量上调率，评价受试物是否具有促进胶原蛋白合成的功效。
4.2、实验试剂与材料：DMEM基础培养基；胎牛血清；胰蛋白酶/EDTA溶液；PBS；MTT；人Ⅰ型胶原蛋白ELISA试剂盒；
4.3、主要仪器设备：二氧化碳培养箱；倒置显微镜；水平离心机；酶标仪；紫外交联仪。
4.4、实验方法：调整HFF-1细胞悬液浓度加入96孔板中，37℃、5％CO2条件下培养24h。弃去旧培养基，用UVB诱导造模，辐照结束后每孔加入100μL含样品的DMEM培养基，同时设培养基空白对照组和含TGF-β的培养基为阳性对照组，置于37℃、5％CO2条件下培养24h±2h。培养结束后，弃去细胞上清液，反复冻融细胞，收集细胞冻融液，按照ELISA试剂盒说明书进行人I型胶原蛋白含量测定。
4.5、结果计算：以标准品浓度为横坐标，OD450值为纵坐标，制作标准曲线，根据样品的OD450值，带入标准曲线，可得实验组胶原蛋白的含量。最终取各组3个复孔的平均值作为最终胶原蛋白结果。
用GraphPadPrism或其他统计学软件进行统计及显著性分析，计算P值，P＜0.05表示具有显著性差异，否则无统计学差异。
胶原蛋白上调率计算公式：上调率(％)＝(T/C-1)×100％
其中：T——实验组胶原蛋白平均值
C——空白/溶剂组胶原蛋白平均值
4.6、结果判定：每批次实验均设置阳性对照和空白对照。当阳性对照组的蛋白含量与空白对照组相比上调率≥20％，且组间复孔的OD值的变异系数CV值≤20％时，试验有效。样品组的胶原蛋白含量与空白对照相比，具有显著性差异(P＜0.05)，且样品组的胶原蛋白含量均高于空白组时，可判定样品具有抗皱功效，否则样品判为无抗皱功效。
表10、Ⅰ型胶原蛋白含量测定结果表
Figure BDA0003464808980000141
结合细胞抗皱功效测试，从实施例1-4与对比例1结果看出中和比不中和的胶原蛋白上调率更高，说明抗皱效果更佳。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的方法，其特征在于，所述方法为将二棕榈酰羟脯氨酸以中和形式应用于组合物中。
2.一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，其特征在于，所述组合物中的二棕榈酰羟脯氨酸以中和形式应用，按重量份数计包含以下组分：油类0.1-50份、二棕榈酰羟脯氨酸0.08-5份、螯合剂0.001-0.2份、保湿剂0.01-30份、增稠剂0.01-5.0份、中和剂0.001-7.5份、防腐剂0.01-3份以及水20-99份。
3.根据权利要求2所述的一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，其特征在于，所述组合物中二棕榈酰羟脯氨酸与中和剂的的重量比为1:(0.002-2.5)。
4.根据权利要求2所述的一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，其特征在于，按重量份数计还包括聚硅氧烷0.01-20份。
5.根据权利要求2所述的一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，其特征在于，按重量份数计还包含脂肪醇0.01-10份。
6.根据权利要求2所述的一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，其特征在于，按重量份数计还包含脂肪酸0.01-5份。
7.根据权利要求4所述的一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，其特征在于，所述聚硅氧烷为环五聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷醇、聚甲基硅倍半氧烷、聚二甲基硅氧烷交联聚合物、辛基聚甲基硅氧烷、乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物、苯基聚三甲基硅氧烷、硬脂基聚二甲硅氧烷、二苯基甲硅烷氧基苯基聚三甲基硅氧烷、丙烯酸(酯)类/聚三甲基硅氧烷甲基丙烯酸酯共聚物、乙烯基聚二甲基硅氧烷/聚甲基硅氧烷硅倍半氧烷交联聚合物、鲸蜡基聚二甲基硅氧烷、聚硅氧烷-11、聚甲基硅氧烷、二聚硅氧烷、甲基聚三甲基硅氧烷中的一种或多种。
8.根据权利要求5所述的一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，其特征在于，所述脂肪醇为鲸蜡醇、硬脂醇、山嵛醇、鲸蜡硬脂醇、花生醇、椰油醇、C12-16醇、C14-22醇、C20-22醇中的一种或多种。
9.根据权利要求6所述的一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，其特征在于，所述脂肪酸为月桂酸、棕榈酸、肉豆蔻酸、硬脂酸中的一种或多种。
10.根据权利要求3所述的一种应用二棕榈酰羟脯氨酸的组合物，其特征在于，所述中和剂为氢氧化钾、氢氧化钠、精氨酸、氨丁三醇、氨甲基丙醇、三乙醇胺、氨甲基丙二醇、二甲基乙醇胺、二乙基乙醇胺中的一种或多种。
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