CN114085266B - 基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物、制备方法及用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了基于棕榈酰四肽‑7的肽缀合衍生物、制备方法及用途，涉及生物肽及其衍生物合成技术领域。该肽缀合衍生物，其氨基酸序列为：Pal‑Gly‑Gln‑Pro‑Arg‑R；上述R为结构中含有氨基的化合物，通过酰胺键与棕榈酰四肽‑7结构中的羧基缀合；上述R包括丙舒硫胺。本发明制得的基于棕榈酰四肽‑7的肽缀合衍生物具有更加优异的抗炎症和抗辐射活性，进一步增加胶原蛋白的生成，改善皮肤弹性；且具有更加明显的抗敏效果，促进自身快速透皮吸收，对皮肤产生更佳的修复效果。

Description

基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物、制备方法及用途
技术领域
本发明属于生物肽及其衍生物合成技术领域，具体涉及基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物、制备方法及用途。
背景技术
在对皮肤微观结构和机理的进一步认识中发现，皮肤细胞的增殖、更新、代谢及炎症过程均由特定序列的寡肽调控，因此将特定生物活性肽引入到皮肤护理中，可以从根源上预防和修复各种皮肤问题。由于不同类型的肽含有氨基酸的数量、种类不同，其活性也呈现多样性，从而形成了多种功效的寡肽，具有促进胶原蛋白生成、抗自由基氧化、消炎修复、抗水肿、促进毛发再生、美白等美容效果。由于该类产品显著的美容效果，越来越多有效的生物活性肽应用于药妆品行业中。
然而，直接应用寡肽化合物仍存在一些缺陷，无法达到理想的效果，故而需对其进行修饰处理等。众所周知，将能适当地改变肽的性质的基团缀合到肽上，可以改变肽的性质和特征。棕榈酰四肽-7（Palmitoyl Tetrapeptide-7）又称为棕榈酰四肽-3，其氨基酸序列为Pal-Gly-Gln-Pro-Arg，缩写为Pal-GQPR，属于信号肽中棕榈酰寡肽系列多肽中的一种。这类小分子寡肽具有无毒、高生物活性、特定的生化生理机制、高同源性且易吸收的特点，从本质上解决各类皮肤问题，从而备受化妆品行业的关注。目前，国际上关于棕榈酰四肽-7合成方案的研究本就不多，对其进行衍生或缀合更是寥寥无几。
发明内容
本发明的目的在于提供基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物、制备方法及用途，该肽缀合衍生物具有更加优异的抗炎症和抗辐射活性，进一步增加胶原蛋白的生成，改善皮肤弹性；且具有更加明显的抗敏效果，促进自身快速透皮吸收，对皮肤产生更佳的修复效果。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物，其氨基酸序列为：Pal-Gly-Gln-Pro-Arg-R；
上述R为结构中含有氨基的化合物，通过酰胺键与棕榈酰四肽-7结构中的羧基缀合；
上述R包括丙舒硫胺。本发明制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物，由丙舒硫胺通过酰胺化反应衍生化棕榈酰四肽-7而得，提供更加优异的功效。本发明制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物具有更高的抗炎症活性，能够更加高效率的抑制过量白细胞介素的生成，从而抑制部分不必要炎症反应，尤其在化妆品产品中添加的其它组分可能会导致炎症反应时发挥作用；且还能够抑制皮肤在受到紫外线辐射时产生白细胞介素，具有更加优异的抗辐射效果。同时能够进一步促进胶原蛋白的生成，显著改善皮肤弹力，增强皮肤的自我愈合和再生能力。此外，本发明制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物具有更高的透明质酸酶抑制活性，单独使用时抗敏效果更加明显。本发明制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物可广泛用作功能性美容护肤产品的原材料，功能活性显著提升，且具有更优的透皮吸收活性，在应用时能够显著降低其添加使用量；能够应用于比较敏感的肤质，对皮肤具有良好的抗敏修复效果。
一种制备上述基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的方法，包括：使棕榈酰四肽-7与丙舒硫胺在缩合剂的作用下发生缩合反应。
在本发明的一个优选实施方式中，缩合剂包括DCC、DPPA、DEPC中的一种；连同缩合剂一起使用的试剂包括有机碱或活化剂；有机碱为三乙胺；活化剂为DMAP或HOSu；缩合反应中用到的溶剂包括二氯甲烷、氯仿、THF、DMF、甲醇、乙酸乙酯中的至少一种。
更进一步的，基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的制备方法，具体包括：
将棕榈酰四肽-7溶于甲醇溶液中，并且向其中加入缩合剂，室温下反应2~3 h，接着加入丙舒硫胺和三乙胺，室温下搅拌反应15~20 h；接着减压蒸馏除去溶剂，加入饱和碳酸氢钠溶液，然后将其用二***洗涤两次，水相通过加入1 M硫酸氢钠水溶液调节至pH为2~3，用乙酸乙酯萃取三次，取有机相依次用蒸馏水和饱和氯化钠水溶液洗涤，最后用无水硫酸钠干燥、减压浓缩得到基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物。
在本发明的一个优选实施方式中，棕榈酰四肽-7与甲醇溶液的料液比为1 g∶4.5~7 mL；缩合剂与棕榈酰四肽-7的摩尔比为1.1~1.3∶1；丙舒硫胺与棕榈酰四肽-7的摩尔比为1.1~1.5∶1；三乙胺与棕榈酰四肽-7的摩尔比为2.05~2.4∶1。
一种美容产品，包含上述基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物。
在本发明的一个优选实施方式中，基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物还可以美容上可接受的盐或醇凝胶的形式存在。其中，将基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物与醇复合制得醇凝胶，可借助醇体系脱去油脂的作用，降低透皮阻力，将有利于功效性的肽及其衍生物渗透穿过角质层，更好发挥其对皮肤的修复功效。
在本发明的一个优选实施方式中，上述产品中基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物或美容上可接受的盐或醇凝胶添加量为产品总重量的0.001~1 wt%。
在本发明的一个优选实施方式中，美容上可接受的盐包括但不限于，盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、苯磺酸盐、柠檬酸盐。
在本发明的一个优选实施方式中，上述产品可以被制备为但不仅限于诸如乳液、营养霜、润肤乳、面膜、美容液、肌底液、精油等之类的制剂。
上述基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶，其为以醇为分散系的凝胶，包括：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物，和
至少一种低级醇和/或多元醇。
在本发明的一个优选实施方式中，低级醇包括乙醇、丙醇、己醇或叔丁醇中的一种或多种；多元醇包括乙二醇、丙二醇、1,2-丁二醇、甘油、麦芽糖醇、山梨醇、泛醇中的一种或多种。
在本发明的一个优选实施方式中，多元醇中还加入异戊酰紫草素，添加量为0.5~3mg/mL。本发明在醇凝胶的制备过程中加入异戊酰紫草素，作用于皮肤可有效增强其透皮吸收的功效，使得生物活性物质能够更快更多的进入皮肤发挥其功效，增强对皮肤的改善修复效果；且在异戊酰紫草素存在的情况下，制得的醇凝胶具有更加优异的稳定性，在较为苛刻的条件下存储28 d后，仍然具有优异的活性。此外，异戊酰紫草素与基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物复配使用时，能够显著增加肽缀合衍生物的功效，对其抗炎症反应、抗辐射、促胶原蛋白生成活性以及抗敏效果具有良好的增益作用。
上述醇凝胶的制备方法，具体包括：
取基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物与醇混合，搅拌、升温溶解后放置于40~55℃下，静置老化2~10 h即得醇凝胶。
在本发明的一个优选实施方式中，上述醇凝胶中基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的浓度为1.6~12.5 mg/mL。
本发明还公开了上述肽缀合衍生物或醇凝胶在减少皮肤炎症反应、增加皮肤弹性以及增强皮肤抗辐射能力中的用途。
本发明又公开了上述肽缀合衍生物在制备增加皮肤弹性以及增强皮肤抗辐射能力的美容产品中的用途。
相比于现有技术，本发明具有如下有益效果：
本发明制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物具有更高的抗炎症活性，能够更加高效率的抑制过量白细胞介素的生成，从而抑制部分不必要炎症反应，且还能够抑制皮肤在受到紫外线辐射时产生白细胞介素，具有更加优异的抗辐射效果；能够进一步促进胶原蛋白的生成，显著改善皮肤弹力；具有更高的透明质酸酶抑制活性，单独使用时抗敏效果更加明显。此外，本发明制得衍生物能够以醇凝胶形式存在于美容化妆品中，在醇凝胶的制备过程中加入异戊酰紫草素，增强了皮肤透皮吸收的功效，更好的发挥功能肽的功效；且制得的醇凝胶具有更加优异的稳定性；同时，异戊酰紫草素与基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物复配使用时，能够显著增加肽缀合衍生物的功效。本发明制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物可广泛用作功能性美容护肤产品的原材料，功能活性显著提升，且具有更优的透皮吸收活性，在应用时能够显著降低其添加使用量；能够应用于比较敏感的肤质，对皮肤具有良好的抗敏修复效果。
因此，本发明提供了基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物、制备方法及用途，该肽缀合衍生物具有更加优异的抗炎症和抗辐射活性，进一步增加胶原蛋白的生成，改善皮肤弹性；且具有更加明显的抗敏效果，促进自身快速透皮吸收，对皮肤产生更佳的修复效果。
附图说明
图1为本发明实施例1中制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的化学结构式；
图2为本发明实施例1中制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的质谱图。
具体实施方式
以下结合具体实施方式和附图对本发明的技术方案作进一步详细描述：
实施例1：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的制备：
将棕榈酰四肽-7溶于甲醇溶液（料液比为1 g∶6 mL）中，并且向其中加入DCC（与棕榈酰四肽-7的摩尔比为1.2∶1），室温下反应2.5 h，接着加入丙舒硫胺（与棕榈酰四肽-7的摩尔比为1.25∶1）和三乙胺（与棕榈酰四肽-7的摩尔比为2.2∶1），室温下搅拌反应18 h；接着减压蒸馏除去溶剂，加入饱和碳酸氢钠（与甲醇/三乙胺混合溶液等体积）溶液，然后将其用二***（与甲醇/三乙胺混合溶液等体积）洗涤两次，水相通过加入1 M硫酸氢钠水溶液调节至pH为2.5，用乙酸乙酯（2倍体积量的甲醇/三乙胺混合溶液）萃取三次，取有机相依次用蒸馏水（2倍体积量的甲醇/三乙胺混合溶液）和饱和氯化钠水溶液（2倍体积量的甲醇/三乙胺混合溶液）洗涤，最后用无水硫酸钠干燥、减压浓缩得到基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物，产率87.1%。其结构式如图1所示。
1H NMR(400 MHz, CDCl3) δppm：9.08(s, 1H, O=C-H), 8.74(s, 1H, Py-H), 5.10(s, 2H, Py-CH 2), 4.68(t, 2H, CH-CH2-CH2-O=C-NH2 & H2N-C=NH-NH-CH2-CH2-CH2-CH),4.52(dd, 1H, O=C-CH-N-C=O), 4.16(s, 2H, O=C-NH-CH 2-O=C-NH2), 3.70(t, 2H, -CH 2-CH2-C=C), 3.67、3.50 (m, 2H, O=C-N-CH 2-CH2-CH2-CH-C=O), 2.71(t, 2H, H2N-C=NH-NH-CH 2-CH2-CH2-CH), 2.64(t, 2H, S-S-CH 2-CH2), 2.59(s, 3H, Py-CH 3), 2.36(s, 3H, C=C-CH 3), 2.45、2.22 (m, 2H, O=C-N-CH2-CH2-CH 2-CH-C=O), 2.28(t, 2H, -CH 2-C=C),2.18(m, 2H, CH 2-CH2-O=C-NH), 2.14(t, 2H, CH 2-O=C-NH2), 2.11、1.95(m, 2H, O=C-N-CH2-CH 2-CH2-CH-C=O), 2.25、1.68、1.48~1.54(28H, -CH 2), 1.89(m, 2H, H2N-C=NH-NH-CH2-CH2-CH 2-CH), 1.64(m, 2H, H2N-C=NH-NH-CH2-CH 2-CH2-CH), 1.38(m, 2H, S-S-CH2-CH 2), 0.98(t, 3H, S-S-CH2-CH2-CH 3), 0.90(t, 3H, -CH 3)。
HRMS（ESI）：Calcd for C49H84N12O8S2，m/z [M+H]+，1032.60。如图2所示。
实施例2：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备：
取基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物与醇混合，搅拌、升温溶解后放置于45℃下，静置老化6.5 h即得醇凝胶；其中基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的浓度为6.2 mg/mL。
本实施例所用醇为乙醇、山梨醇的混合物，体积比为2.5∶1。
实施例3：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备与实施例2的区别在于：基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的浓度为3.6 mg/mL；所用醇为丙醇和泛醇的混合物，两者体积比为3∶1。
实施例4：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备与实施例2的区别在于：基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的浓度为8.4 mg/mL；所用醇为叔丁醇和丙二醇的混合物，两者体积比为1∶1。
实施例5：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备与实施例2的区别在于：基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的浓度为2.1 mg/mL；所用醇为己醇和麦芽糖醇的混合物，两者体积比为2∶1。
实施例6：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备与实施例2的区别在于：所用醇中还加入异戊酰紫草素，添加量为1.2 mg/mL。
实施例7：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备与实施例6的区别在于：所用醇中还加入(2S,5R)-5-氟胞嘧啶-1-基-[1,3]-氧硫杂环戊烷，添加量为0.9 mg/mL。
实施例8：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备与实施例2的区别在于：所用醇中还加入(2S,5R)-5-氟胞嘧啶-1-基-[1,3]-氧硫杂环戊烷，添加量为0.9 mg/mL。
实施例9：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备与实施例6的区别在于：采用棕榈酰四肽-7替代基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物。
实施例10：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备与实施例7的区别在于：采用棕榈酰四肽-7替代基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物。
实施例11：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备与实施例8的区别在于：采用棕榈酰四肽-7替代基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物。
对比例1：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶的制备与实施例2的区别在于：采用棕榈酰四肽-7替代基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物。
试验例1：
细胞白介素抑制活性测试
测试对象人角质形成细胞（HaCat）。
测试方法：将HaCat细胞以密度为2.5×105个/mL/孔接种于12孔板中，培养基为在4℃下保存2周的含10% FBS的MEM培养基，培养箱中继续培养24 h；然后取出培养板，弃去原培养液，每孔加入1 mL测试样品溶液，即用上述培养基配置成1.0 wt%浓度的测试样品溶液，并利用终浓度10 μg/mL的脂多糖LPS刺激；同时设置模型组和空白对照组，模型组为仅利用终浓度10 μg/mL的脂多糖LPS刺激，空白对照组为加入1 mL完全培养基，不加脂多糖LPS刺激。培养24 h后去除原培养液，加入1 mL新鲜培养液，继续培养24 h。结束后收集上清液，-80℃保存，细胞因子采用ELISA试剂盒进行测定，研究对炎症因子（IL-6、IL-8）的释放情况。测试条件为：温度37±0.5℃，湿度92%和5% CO2浓度。
实验分组：实验组，M1组：实施例1制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物；M2组：异戊酰紫草素；M3组：实施例1制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物+异戊酰紫草素（两者质量比为5.17∶1）。对照组：棕榈酰四肽-7。
测试结果如表1所示：
表1 抗炎活性测试结果
Figure 100002_DEST_PATH_IMAGE001
从表1中数据可以看出，空白组为正常细胞内的IL-6和IL-8炎症因子相对含量为100%，经LPS刺激角质形成细胞后，模型组的IL-6和IL-8的水平较空白组显著升高，表明建模成功。M1组处理后细胞内IL-6和IL-8的水平明显低于对照组，表明本发明制得的肌肽衍生物具有更加优异的抗炎症反应活性。M3组的结果明显好于M1组和M2组，表明采用异戊酰紫草素和基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物复配使用，抗炎症效果更佳，异戊酰紫草素的存在对衍生物具有增益效果。
试验例2：
促胶原蛋白生成活性测试
实验对象：人新生的皮肤成纤维细胞，接种于含有10%胎牛血清的DMEM培养基的24孔板中，浓度为5×104个/孔，将其置于37℃和5% CO2条件下培养24 h；接着弃去原有的培养基，加入无血清的DMEM培养基替换，继续培养24 h后，加入样品溶液进行处理，加入的最终浓度达到5 μg/mL。接着培养48 h，收集细胞培养基，采用胶原蛋白测量试剂盒（TakaraShuzo Co.，Ltd.，Japan）测量培养基中原胶原蛋白的量。测试具体操作包括：在均匀涂覆初次胶原蛋白抗体的96孔板中加入收集到的细胞培养基，在37℃下进行抗原-抗体反应达3h；然后除去细胞培养基，每孔用PBS洗涤四次；之后加入显色物质并在室温下温育15 min，加入1 N硫酸溶液停止反应；最后用分光光度计测量在450 nm的吸光度。其中标准曲线的绘制使用标准溶液制备，然后计算出原胶原蛋白的产生量。
实验分组：实验组，M1组：实施例1制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物；M2组：异戊酰紫草素；M3组：实施例1制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物+异戊酰紫草素（两者质量比为5.17∶1）。对照组，N1组：不添加样品溶液；N2组：棕榈酰四肽-7。
结果分析
测试结果如表2所示：
表2 促胶原蛋白生成测试结果
Figure 264050DEST_PATH_IMAGE002
从表2中数据可以看出，M1组样品溶液处理后，原胶原蛋白含量明显高于N2组处理后的，表明本发明制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物具有更高的促胶原蛋白生成活性，能够更好的促进皮肤自我愈合和再生。M3组的结果明显好于M1组和M2组，表明采用异戊酰紫草素和基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物复配使用，进一步增加了皮肤中胶原蛋白的生成，异戊酰紫草素起到增效的作用。
试验例3：
透明质酸酶抑制活性测试
取0.1 mL 0.25 M的CaCl2溶液和0.5 mL透明质酸酶液（用pH为5.6的醋酸缓冲溶液溶解，1250 U/mL）于37℃下水浴恒温反应20 min；加入受试样品液（用pH为5.6的醋酸缓冲溶液稀释为1 wt%）0.5 mL，继续保温20 min；再加入0.5 mL透明质酸钠溶液（用pH为5.6的醋酸缓冲溶液溶解，0.5 mg/mL），37℃水浴恒温反应30 min后取出，在常温下放置5 min；接着加入0.1 mL 0.4 M的NaOH溶液和0.5 mL乙酰丙酮溶液，于沸水浴中加热15 min后立即转移至冰水水浴冷却5 min；滴加1.0 mL埃尔利希试剂，并用3.0 mL无水乙醇稀释，室温放置20 min显色，用分光光度计测定波长为540 nm处吸光度值。按照下列式子计算透明质酸酶抑制率：
透明质酸酶抑制率=[(A-B)-(C-D)]/(A-B)×100%
式中，A为对照溶液吸光度值（用醋酸缓冲溶液代替样品溶液）；B为对照空白溶液吸光度值（用醋酸缓冲溶液代替样品溶液及酶液）；C为试样溶液吸光度值；D为试样空白溶液吸光度值（用醋酸缓冲溶液代替酶液）。
实验分组：实验组，M1组：实施例1制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物；M2组：异戊酰紫草素；M3组：实施例1制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物+异戊酰紫草素（两者质量比为5.17∶1）。对照组，棕榈酰四肽-7。
结果分析
测试结果如表3所示：
表3 透明质酸酶抑制活性测试结果
Figure DEST_PATH_IMAGE003
从表3中数据可以看出，M1组样品溶液处理后，透明质酸酶抑制率明显高于对照组处理后的，表明本发明制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物具有更高的透明质酸酶抑制活性，抗敏效果更加明显。M3组的结果明显好于M1组和M2组，表明采用异戊酰紫草素和基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物复配使用，进一步增强了对透明质酸酶的抑制效果，异戊酰紫草素起到增效的作用。此外，M2组的实验结果表明异戊酰紫草素对透明质酸酶也具有一定的抑制作用。
试验例4：
抗辐射活性测试
雌性ICR小鼠随机分为模型组、正常组、对照组和各实验组共6组（实验分组同试验例1），每组5只，模型组和假手术组（对照组）给予相同体积的蒸馏水处理。除正常组外，其余各组均剃去背部的毛；实验组涂抹2 mL样品溶液（浓度25 mg/mL）。每日用UVA灯管照射，持续8周，造成小鼠光老化模型。8周时处死动物，取下背部脱毛处的全层皮肤，测定SOD活性。
表4 抗辐射活性测试结果
Figure 181190DEST_PATH_IMAGE004
从表4中数据可以看出，M1组处理后SOD活性明显高于对照组，表明本发明制得的肌肽衍生物具有良好的抗辐射活性。M3组的结果明显好于M1组和M2组，表明采用异戊酰紫草素和基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物复配使用，抗辐射效果更佳，异戊酰紫草素的存在对衍生物具有增益效果。
试验例5：
醇凝胶透皮吸收活性评价
实验对象
Sprague Dawley雄性大鼠（市购），体重180~200 g。取大鼠，颈椎处死后用电须刀剃除鼠毛，剪下腹部皮肤并除去皮下脂肪层、血管及其它残留物，然后用生理盐水洗净、保证其完整性，生理盐水漂洗后置于-20℃冰箱中冷冻保存备用。
实验测试方法
采用改进的卧式Franz扩散装置进行实验。操作具体为：将大鼠皮肤固定在供给室和接收室之间，并将皮肤角质层面向供给室，设置有效渗透面积为1.20 cm2；接着在供给室内加入4.5 mL样品，在接收室加入4.5 mL PBS缓冲液，且保证供给室和接收室的液面完全没过皮肤的最上缘；然后在32℃恒温条件下、310 r/min转速不断搅拌，并于第10、20、40、60、80、100、120 min时用移液器吸取接收室的溶液0.1 mL作为测试液，同时补加等量的PBS，用紫外分光光度计测定活性物质含量。每个样品的透皮实验重复5次。根据累积透皮渗透量-时间曲线拟合计算得到样品的透皮速率。
实验分组：实验组，P1组：实施例1制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物（加入量与P2组醇凝胶中所含衍生物量相同）；P2组：实施例2制的醇凝胶；P3组：实施例3制的醇凝胶；P4组：实施例4制的醇凝胶；P5组：实施例5制的醇凝胶；P6组：实施例6制的醇凝胶；P7组：实施例7制的醇凝胶；P8组：实施例8制的醇凝胶；P9组：实施例9制的醇凝胶；P10组：实施例10制的醇凝胶；P11组：实施例11制的醇凝胶。对照组，D1组：棕榈酰四肽-7；D2：对比例1制的醇凝胶。
透皮速率的测试结果如表5所示：
表5 透皮吸收性能测试结果
Figure DEST_PATH_IMAGE005
从表5中数据可以看出，P1组处理的透皮速率明显好于D1组处理的，表明本发明制得的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物具有更加优异的透皮吸收效果，增强其对皮肤的护理作用。P2组的效果好于P1组，表明采用肽衍生物与醇复合制得醇凝胶，能够有效提升生物活性物质的透皮吸收效果。P6的效果明显好于P2组，表明醇凝胶中异戊酰紫草素的存在，可进一步提升其透皮吸收的效果。此外，P7组的效果好于P6组和P8组，且P10组的效果明显好于P9组和P11组，表明异戊酰紫草素和(2S,5R)-5-氟胞嘧啶-1-基-[1,3]-氧硫杂环戊烷同时存在对生物活性物质透皮吸收效果提升作用更佳。
试验例6：
热稳定性测试
测试方法：将样品在（40±1）℃的温度和（75±0.5）%的相对湿度的严苛条件下在密封状态下储存，并且通过高效液相色谱法分析相对于在第0 d的活性成分含量的初始值，得到在第7 d、14 d和28 d之后各个样品中的活性成分的百分比。
对对比例1、实施例2~11制得的醇凝胶进行上述测试，结果如表6所示：
表6 水热稳定性测试结果
Figure 23244DEST_PATH_IMAGE006
从表6中数据可以看出，实施例6制得醇凝胶在苛刻条件下存储28 d后，仍然具有优异的活性，要好于实施例1的，表明醇凝胶中异戊酰紫草素的存在，可有效增强醇凝胶的存储稳定性。此外，实施例7的效果好于实施例6和实施例8的，且实施例10的效果明显好于实施例9和实施例11的，表明异戊酰紫草素和(2S,5R)-5-氟胞嘧啶-1-基-[1,3]-氧硫杂环戊烷同时存在对醇凝胶稳定性的增强效果更佳。
上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (8)

1.基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物，其氨基酸序列为：Pal-Gly-Gln-Pro-Arg-R；
所述R为结构中含有氨基的化合物，通过酰胺键与棕榈酰四肽-7结构中的羧基缀合；
所述R包括丙舒硫胺；
所述基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的化学结构如下所示：
Figure DEST_PATH_IMAGE001
；
所述基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物的制备方法，包括：使棕榈酰四肽-7与丙舒硫胺在缩合剂的作用下发生缩合反应。
2.根据权利要求1所述的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物，其特征在于：所述缩合剂为DCC；连同缩合剂一起使用的试剂包括三乙胺；缩合反应中用到的溶剂为甲醇。
3.一种美容产品，包含权利要求1所述的基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物。
4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于：所述基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物还以其美容上可接受的盐或醇凝胶的形式存在。
5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于：所述基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物醇凝胶为以醇为分散系的凝胶，包括：
基于棕榈酰四肽-7的肽缀合衍生物，和
至少一种低级醇和/或多元醇。
6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于：所述低级醇包括乙醇、丙醇、己醇或叔丁醇中的一种或多种；
所述多元醇包括乙二醇、丙二醇、1,2-丁二醇、甘油、麦芽糖醇、山梨醇、泛醇中的一种或多种。
7.根据权利要求5所述的产品，其特征在于：所述多元醇中还加入异戊酰紫草素。
8.权利要求1所述肽缀合衍生物在制备增加皮肤弹性以及增强皮肤抗辐射能力的美容产品中的用途。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006117607A (ja) * 2004-10-22 2006-05-11 Seiren Co Ltd 皮膚外用剤
WO2013149323A1 (en) * 2012-04-02 2013-10-10 Ntegrity Natural products for skin care
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20170083068A (ko) * 2014-11-03 2017-07-17 스텔라 앤드 닷 엘엘씨 피부관리 제제 및 요법

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006117607A (ja) * 2004-10-22 2006-05-11 Seiren Co Ltd 皮膚外用剤
WO2013149323A1 (en) * 2012-04-02 2013-10-10 Ntegrity Natural products for skin care
CN106999401A (zh) * 2014-12-16 2017-08-01 赛德玛公司 肽化合物、包含它们的组合物和所述化合物，特别是化妆品的用途
CN107823092A (zh) * 2017-12-06 2018-03-23 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 一种抗衰老多肽组合物、其制备方法及应用

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