CN114073707A - 治疗***性红斑狼疮的组合物和方法 - Google Patents
治疗***性红斑狼疮的组合物和方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114073707A CN114073707A CN202110961633.9A CN202110961633A CN114073707A CN 114073707 A CN114073707 A CN 114073707A CN 202110961633 A CN202110961633 A CN 202110961633A CN 114073707 A CN114073707 A CN 114073707A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- patient
- compound
- pharmaceutical composition
- need
- administered
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D471/04—Ortho-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/63—Compounds containing para-N-benzenesulfonyl-N-groups, e.g. sulfanilamide, p-nitrobenzenesulfonyl hydrazide
- A61K31/635—Compounds containing para-N-benzenesulfonyl-N-groups, e.g. sulfanilamide, p-nitrobenzenesulfonyl hydrazide having a heterocyclic ring, e.g. sulfadiazine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
- A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
Abstract
本发明公开了使用调节Bcl‑2家族蛋白活性的化合物或药物组合物治疗***性红斑狼疮的方法。在一些方法中，待治疗的患者被诊断患有狼疮性肾炎。在一些方法中，将化合物或药物组合物以足以引起一种或多种效果的治疗有效剂量给予有需要的患者：患者尿液中蛋白质的***减少、在患者中血清抗dsDNA自身抗体水平降低，患者皮肤病变严重程度降低，患者***病严重程度降低，患者肾小球肾炎严重程度降低，患者血管炎严重程度降低，患者外周血单核细胞(PMBC)面板中淋巴细胞计数减少，患者脾脏淋巴细胞计数减少，患者肾脏淋巴细胞浸润减少。
Description
技术领域
本公开涉及使用Bcl-2抑制剂化合物或包含其的组合物治疗***性红斑狼疮(SLE)的方法。
背景技术
细胞凋亡，即程序性细胞死亡的过程，是组织稳态的基本生物学过程。在哺乳动物中，它已被证明可以调节早期胚胎发育。在生命的后期，细胞死亡是一种默认机制，通过这种机制，潜在危险的细胞(例如携带癌性缺陷的细胞)被移除。已知几种凋亡途径。最重要的细胞凋亡途径之一涉及Bcl-2蛋白家族，它们是细胞凋亡的线粒体(也称为“内在”)途径的关键调节剂。参见Danial和Korsmeyer,Cell 116:205-219(2004)。结构同源域BH1、BH2、BH3和BH4是Bcl-2家族蛋白的特征。Bcl-2蛋白质家族可以进一步分为三个亚家族，具体取决于每个蛋白质包含多少同源域及其生物学活性，即是否具有促凋亡或抗凋亡功能。
Bcl-2蛋白的第一亚组包含具有所有四个同源结构域的蛋白，即BH1、BH2、BH3和BH4。它们的一般作用是抗细胞凋亡，即防止细胞开始细胞死亡过程。Bcl-2、Bcl-w、Bcl-xL、Mcl-1和Bfl-1/A1等蛋白质是该第一亚组的成员。属于Bcl-2蛋白第二亚组的蛋白质包含三个同源结构域BH1、BH2和BH3，并具有促凋亡作用。第二个亚组的两个主要代表性蛋白质是Bax和Bak。Bcl-2蛋白的第三个亚组由仅包含BH3结构域的蛋白质组成，该亚组的成员通常被称为“BH3-only蛋白”。它们对细胞的生物学作用是促凋亡的。Bim、Bid、Bad、Bik、Noxa、Hrk、Bmf和Puma是这第三个蛋白质亚家族的例子。Bcl-2家族蛋白调节细胞死亡的确切机制尚不完全清楚。在Bcl-2家族蛋白调节细胞死亡的一个假设中，BH3-only蛋白进一步分类为“激活剂”，例如Bim和Bid，或“敏化剂”，例如Bad、Bik、Noxa、Hrk，Bmf和Puma，蛋白质取决于它们的调节功能。
组织稳态的关键之一是在细胞中Bcl-2蛋白的三个亚群之间实现相互作用的平衡。研究阐明了Bcl-2家族蛋白的促凋亡和抗凋亡亚群相互作用以允许细胞进行程序性细胞死亡的机制。在细胞中接收细胞内或细胞外信号后，会发生BH3-only蛋白的翻译后或转录激活。BH3-only蛋白是凋亡级联反应的主要诱导剂，其中一个步骤包括激活细胞线粒体膜上的促凋亡蛋白Bax和Bak。在激活已经锚定在线粒体膜上或迁移到该膜的Bax和/或Bak后，Bax和/或Bak寡聚化以导致线粒体外膜透化(MOMP)、细胞色素C的释放和下游激活效应半胱天冬酶，最终导致细胞凋亡。一些研究人员假设某些BH3-only蛋白质，例如Puma、Bim、Bid，是“激活剂”，因为这些蛋白质直接与促凋亡蛋白Bax和Bak结合以启动MOMP，而其他BH3-only蛋白质，例如Bad，Bik和Noxa是“敏化剂”，通过结合抗凋亡蛋白(例如Bcl-2、Bcl-xL、Bcl-w、Mcl-1)并置换和“释放”“激活剂”BH3-only蛋白，随后结合并激活促凋亡蛋白，例如Bax、Bak，以诱导细胞死亡。其他研究表明，抗凋亡蛋白直接参与和隔离Bax和Bak，所有BH3-only蛋白都通过与抗凋亡蛋白结合来调节这种相互作用，例如Bcl-2、Bcl-xL、Bcl-w、Mcl-1、这导致释放Bax和Bak。参见Adams和Cory,Oncogene 26:1324-1337(2007)和Willis等人,Science 315:856-859(2007)。尽管抗凋亡和促凋亡Bcl-2家族蛋白调节细胞凋亡的确切相互作用仍在研究中，但有大量科学证据表明，抑制BH3-only蛋白与抗凋亡Bcl结合的化合物-2家族蛋白促进细胞凋亡。
失调的细胞凋亡途径涉及许多重要疾病的病理学，例如神经退行性疾病(细胞凋亡上调)，例如阿尔茨海默病；和增殖性疾病(下调的细胞凋亡)，例如癌症、自身免疫性疾病和促血栓形成病症。
特别地，Bcl-2可能是治疗自身免疫性疾病包括***性红斑狼疮(SLE)的有吸引力的治疗靶点。例如，由Bcl-2功能不当导致的诊断为SLE的患者的细胞凋亡失调可能导致自身反应性免疫细胞存活，从而导致SLE相关并发症，包括狼疮性肾炎，这是晚期SLE的最常见表现。一些研究表明，与来自健康淋巴组织的活化淋巴细胞相比，肾浸润B和T细胞Bcl-2表达水平异常升高。参见，例如，Ko等人，Arthritis&Rheumatology 68:2740-2751(2016)。
持续需要选择性抑制一种类型或一部分Bcl-2蛋白活性的小分子，以治疗增殖性疾病，例如自身免疫性疾病，包括***性红斑狼疮。
发明内容
本文公开了治疗患者的***性红斑狼疮的方法，包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中A、E和Y如本文所定义。
本文还公开了治疗患者的***性红斑狼疮的方法，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含如上所述的式(I)化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体。
在一个实施方案中，一种治疗患者***性红斑狼疮的方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体，其中：
A选自由以下组成的组：
E选自：
一个碳原子，其中是一个双键；
-C(H)-，其中是单键；和
一个氮原子，其中是一个单键；
Y选自-C(H)-和-O-；
R1选自氢和-N(R7a)(R7b)；
R2、R3、R4、R5和R6各自独立地选自氢、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C3-6环烷基、杂环、任选取代的杂芳基、(杂环)烷基；
R7a选自任选取代的C1-6烷基和任选取代的(杂环)烷基；和
R7b选自氢和C1-4烷基。
在一个实施方案中，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物，其进一步由式(II)给出：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体。
在一个实施方案中，该方法包括给予有需要的患者治疗有效量的选自下组的化合物：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或互变异构体。
在一个实施例中，用于制造药物的化合物是:
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或互变异构体。
在一个实施方案中，用于制造药物的化合物选自如本文所述的由表1中列举的化合物组成的一组化合物。
在一个实施例中，(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺用于制造用于治疗需要的患者的***性红斑狼疮的药物。
在一个实施方案中，该药物用于治疗被诊断为狼疮肾炎的患者的***性红斑狼疮。
在一个实施方案中，该化合物或药物组合物用于制造用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中，将所述化合物或药物组合物以足以引发从以下组中选择的一个或多个效应的剂量投与需要其的患者：患者尿液中蛋白质***减少，患者血清抗双链DNA自身抗体水平降低，患者的皮肤损伤严重程度降低，患者的***病严重程度降低，患者的肾小球肾炎严重程度降低，患者的血管炎严重程度降低，患者外周血单个核细胞(PMBC)的淋巴细胞计数减少，患者脾脏淋巴细胞数量减少，患者肾脏淋巴细胞浸润减少。
在一个实施方案中，该化合物或药物组合物用于制备用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中该化合物或药物组合物以足以减少患者尿液中蛋白质***的剂量给药给有需要的患者。
在一个实施方案中，该化合物或药物组合物用于制备用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中该化合物或药物组合物以足以降低患者血清抗dsDNA自身抗体水平的剂量投与有需要的患者。
在一个实施例中，该化合物或药物组合物用于制备用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中该化合物或药物组合物以足以降低患者皮肤损伤严重程度的剂量施用于需要该化合物或药物组合物的患者。
在一个实施方案中，该化合物或药物组合物用于制备用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中该化合物或药物组合物以足以降低患者***病严重程度的剂量投与有需要的患者。
在一个实施方案中，该化合物或药物组合物用于制备用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中该化合物或药物组合物以足以降低患者肾小球肾炎严重程度的剂量投与有需要的患者。
在一个实施方案中，该化合物或药物组合物用于制备用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中该化合物或药物组合物以足以降低患者国际肾炎严重程度的剂量施用于需要该化合物或药物组合物的患者。
在一个实施例中，该化合物或药物组合物用于制备用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中该化合物或药物以足以降低患者血管炎严重程度的剂量施用于需要该化合物或药物的患者。
在一个实施方案中，该化合物或药物组合物用于制造用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中，将所述化合物或药物组合物以足以减少取自患者的外周血单核细胞(PMBC)组中的淋巴细胞计数的剂量投与需要该化合物或药物组合物的患者。
在一个实施方案中，该化合物或药物组合物用于制备用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中该化合物或药物组合物以足以减少患者脾脏中淋巴细胞计数的剂量，施用于需要该化合物或药物组合物的患者。
在一个实施方案中，该化合物或药物组合物用于制造用于治疗***性红斑狼疮的药物，其中该化合物或药物组合物以足以减少患者肾脏中淋巴细胞浸润的剂量施用于需要该化合物或药物组合物的患者。
在一个实施方案中，用于治疗有需要的***性红斑狼疮患者的化合物包含式(I)化合物：
或其医药上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体，其中：
A从以下组中选择：
E从以下组中选择：
碳原子，其中为双键；
–C(H)-其中为单键；和
-氮原子，其中为单键；
Y从–C(H)-和–O-中选择；
R1选自氢和-N(R7a)(R7b)；
R2、R3、R4、R5和R6各自独立地选自氢、任选经取代的C1-6烷基、任选经取代的C3-6环烷基、杂环、任选经取代的杂芳基、(杂环)烷基；
R7a选自任选取代的C1-6烷基和任选取代的(杂环)烷基；和
R7b选自氢和C1-4烷基。
在一个实施方案中，用于治疗有需要的***性红斑狼疮患者的化合物包含式(I)化合物，其进一步由式(II)给出：
或其医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体。
在一个实施方案中，用于治疗有需要的患者的***性红斑狼疮的化合物包含选自以下化合物：
或其医药上可接受的盐、溶剂化物、水合物或互变异构体。
在一个实施方案中，用于治疗有需要的***性红斑狼疮患者的化合物包括：
或其医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物或互变异构体。
在一个实施方案中，用于治疗有需要的***性红斑狼疮患者的化合物包括：
或其医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物或互变异构体。
在一个实施方案中，用于治疗有需要的***性红斑狼疮患者的化合物包括从表1所述化合物组成的组中选择的化合物，如本文所述。
在一个实施方案中，用于治疗有需要的***性红斑狼疮患者的化合物包含(S)-N-((4-(((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺。
在一个实施方案中，该化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中该患者被诊断为患有狼疮性肾炎。
在一个实施方案中，该化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中，将所述化合物或药物组合物以足以引发从以下组中选择的一个或多个效应的剂量投与需要其的患者：患者尿液中蛋白质***减少，患者血清抗双链DNA自身抗体水平降低，患者的皮肤损伤严重程度降低，患者的***病严重程度降低，患者的肾小球肾炎严重程度降低，患者的血管炎严重程度降低，患者外周血单个核细胞(PMBC)的淋巴细胞计数减少，患者脾脏淋巴细胞数量减少，患者肾脏淋巴细胞浸润减少。
在一个实施方案中，所述化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中所述化合物或药物组合物以足以减少患者尿液中蛋白质***的剂量给药，给有需要的患者。
在一个实施方案中，所述化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中所述化合物或药物组合物以足以降低患者血清抗dsDNA自身抗体水平的剂量，投与有需要的患者。
在一个实施方案中，该化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中该化合物或药物组合物以足以降低患者皮肤损伤严重程度的剂量，施用于需要该化合物或药物组合物的患者。
在一个实施方案中，该化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中该化合物或药物组合物以足以降低患者***病严重程度的剂量，施用于需要该化合物或药物组合物的患者。
在一个实施方案中，所述化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中所述化合物或药物组合物以足以降低患者肾小球肾炎严重程度的剂量，投与有需要的患者。
在一个实施方案中，该化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中该化合物或药物组合物以足以降低患者国际性肾炎严重程度的剂量，施用于需要该化合物或药物组合物的患者。
在一个实施方案中，所述化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中所述化合物或药物以足以降低患者血管炎严重程度的剂量，投与有需要的患者。
在一个实施方案中，该化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中该化合物或药物组合物以足以减少从患者身上取得的外周血单个核细胞(PMBC)面板中的淋巴细胞计数的剂量，投与有需要的患者。
在一个实施方案中，该化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中该化合物或药物组合物以足以减少患者脾脏中淋巴细胞计数的剂量，施用给需要该化合物或药物组合物的患者。
在一个实施方案中，该化合物用于治疗患者的***性红斑狼疮，其中该化合物药物组合物以足以减少患者肾脏中淋巴细胞浸润的剂量，给药给有需要的患者。
附图说明
图1是显示用溶媒对照或化合物1处理后MRL/lpr小鼠尿液中蛋白质浓度随时间变化的线形图。
图2是显示用溶媒对照或化合物1治疗后MRL/lpr小鼠中血清抗dsDNA自身抗体水平的条形图。
图3是显示MRL/lpr小鼠在用赋形剂或化合物1治疗后随时间推移的皮肤损伤评分的折线图。
图4是显示用溶媒对照或化合物1治疗后MRL/lpr小鼠中***评分随时间变化的线形图。
图5是一系列柱状图，显示了用溶媒对照或化合物1治疗后MRL/lpr小鼠的肾小球肾炎、间质性肾炎、血管炎和总狼疮性肾炎病理评分。
]图6是一个条形图，显示了外周血单个核细胞(PMBC)面板中的淋巴细胞计数，该面板在使用溶媒或化合物1药物治疗后，取自MRL/lpr小鼠。
图7是柱状图，显示了用溶媒对照或化合物1治疗后，MRL/lpr小鼠脾脏中的淋巴细胞计数。
图8是一系列图，显示了在用溶媒对照或化合物1治疗后，MRL/lpr小鼠肾脏中的淋巴细胞计数。
具体实施方式
本发明涉及能够调节Bcl-2家族蛋白质的化合物或其医药上可接受的盐、溶剂化物、水合物、互变异构体和立体异构体。能够调节Bcl-2家族蛋白的化合物可用于治疗、预防或改善与Bcl-2家族蛋白活性相关的疾病和紊乱。
在一些方面，本发明的特征在于通过向需要的患者投与治疗有效量的能够调节Bcl-2家族蛋白的化合物来治疗或改善患者的***性红斑狼疮(SLE)的方法，或包含能够调节Bcl-2家族蛋白质的化合物的药物组合物。
定义
在本发明中，术语“烷基”本身或作为另一个基团的一部分使用时，指未经取代的直链或支链脂肪族碳氢化合物，其含有一到十二个碳原子，即C1-12烷基，或指定的碳原子数，例如C1烷基，如甲基，C2烷基，如乙基，C3烷基如丙基或异丙基，C1-3烷基如甲基、乙基、丙基或异丙基等。在一个实施例中，烷基为直链C1-6烷基。在另一实施例中，烷基为支链C3-6烷基。在另一实施例中，烷基为直链C1-4烷基。在另一实施例中，烷基为支链C3-4烷基。在另一实施例中，烷基为直链或支链C3-4烷基。在另一实施例中，烷基部分或完全氘化，即，烷基的一个或多个氢原子被氘原子取代。非限制性示例性C1-12烷基包括甲基、-CD3、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、异丁基、3-戊基、己基、庚基、辛基、壬基和癸基。非限制性示例性C1-4烷基包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基和异丁基。非限制性示例性C1-4基团包括甲基、乙基、丙基、异丙基和叔丁基。
在本发明中，术语“任选被取代的烷基”指未被取代或被一个、两个或三个取代基取代的烷基，这些取代基独立地选自卤代、硝基、氰基、羟基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、，和任选取代的芳基。在一个实施例中，任选经取代的烷基被两个取代基取代。在另一实施例中，任选经取代的烷基被一个取代基取代。在另一实施例中，任选经取代的烷基为未经取代的。非限制性示例性任选取代烷基包括–CH2Ph、–CH2CH2NO2、–CH2CH2OH，–CH2CH2OCH3和–CH2CH2F。
在本发明中，术语“环烷基”本身或作为另一个基团的一部分使用是指未取代的饱和或部分不饱和，例如，含有一个或两个双键，含有一个至三个环且具有三个至十二个碳原子的环状脂肪烃，即C3-12环烷基，或指定碳的数量。在一个实施例中，环烷基具有两个环。在一个实施例中，环烷基具有一个环。在另一实施例中，环烷基为C3-8环烷基。在另一实施例中，环烷基为C3-6环烷基。在另一实施例中，环烷基为C3-5环烷基。非限制性示例性环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、降冰片基、十氢萘、金刚烷基、环己烯基、环戊烯基、环戊酮、螺环[3.3]庚烷和双环[3.3.1]壬烷。
在本发明中，术语“任选经取代的环烷基”指未经取代或被一个、两个或三个取代基取代的环烷基，该取代基独立地选自卤代、硝基、氰基、羟基、烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、，二烷基氨基、卤代烷基和杂环。在一个实施例中，任选经取代的环烷基被两个取代基取代。在另一实施例中，任选经取代的环烷基由一个取代基取代。在另一实施例中，任选经取代的环烷基为未经取代的。
在本发明中，术语“卤代烷基”指由一个或多个氟、氯、溴和/或碘原子取代的烷基。在一个实施例中，烷基被一个、两个或三个氟原子和/或氯原子取代。在另一实施例中，卤代烷基为C1-4卤代烷基。非限制性示例性卤代烷基包括氟甲基、2-氟乙基、二氟甲基、三氟甲基、五氟乙基、1,1-二氟乙基、2,2-二氟乙基、2,2-三氟乙基、3,3,3-三氟丙基、4,4,4-三氟丁基和三氯甲基。
在本发明中，术语“烷氧基”本身或作为另一基团的一部分使用时，指连接到末端氧原子的任选取代烷基。在一个实施例中，烷氧基是连接到末端氧原子的C1-6烷基。在另一实施例中，烷氧基是连接到末端氧原子的C1-4烷基。非限制性示例性烷氧基包括甲氧基、乙氧基和叔丁氧基。
在本发明中，术语“杂环”本身或作为另一基团的一部分使用时，是指未取代的饱和和部分不饱和，例如，含有一个或两个双键，含有一个、两个或三个环的环状基团，具有三到十四个环成员，即3到14个环成员，即3-14元杂环，其中一个环的至少一个碳原子被杂原子取代。术语“杂环”意指包括环状脲基(例如咪唑烷基-2-酮)、环状酰胺基(例如β-内酰胺、γ-内酰胺、δ-内酰胺和ε-内酰胺)以及环状氨基甲酸酯基(例如恶唑烷基-2-酮)。在一个实施例中，杂环基是包含一个环和一个或两个氧原子和/或氮原子的4、5、6、7或8元环基。在一个实施例中，杂环基团是包含一个环和一个或两个氮原子的5-或6-成员环状基团。在一个实施例中，杂环基团是包含两个环和一个或两个氮原子的8、9、10、11或12元环基团。在一个实施例中，杂环基团是包含一个环和一个氧原子的四元或五元环基团。杂环可以通过碳原子或氮原子选择性地连接到分子的其余部分。非限制性示例性杂环基团包括1,4-二氧六环，2-氧吡咯烷-3-基，2-咪唑烷酮，哌啶基，吗啉基，哌嗪基，吡咯烷基，8-氮杂双环[3.2.1]辛烷(去甲托烷)，6-氮杂螺环[2.5]辛烷，6-氮杂螺环[3.4]辛烷，吲哚酰，吲哚酰-2-酮和1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮。
在本发明中，本文所用术语“任选取代杂环”本身或另一基团的一部分指未经取代或被一个、两个或三个取代基取代的杂环，该取代基独立地选自卤代、硝基、氰基、羟基、烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、，二烷基氨基、卤代烷基和杂环。
在本发明中，术语“(杂环)烷基”本身或作为另一个基团的一部分使用时，指被一个任选取代的杂环基团取代的烷基。在一个实施例中，(杂环)烷基为经一个任选经取代的4至6元杂环基取代的C1-4烷基。杂环可以通过碳原子或氮原子与烷基连接。非限制性示例性(杂环)烷基包括：
如本文所用，术语“杂芳基”指5到14个环原子，包含从N、O和S组成的组中选择的一个或多个环杂原子，剩余的环原子为C。示例包括但不限于糠基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡唑基、嘧啶基、咪唑基、异恶唑基、恶唑基、恶二唑基、吡嗪基、噻吩-2-基、异噻唑基、噻唑基、噻唑基、噻二唑基、***基、三嗪基。
如本文所用，术语“任选经取代的杂芳基”系指未经取代或被一个、两个或三个独立选自卤代、硝基、氰基、羟基、烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、卤代烷基和杂环的取代基取代的杂芳基。
在本发明中，冠词“a”和“an”用于指代该冠词的一个或多个语法宾语(例如，指至少一个)。举例来说，“一个元素”指一个或多个元素。
除非另有说明，否则本公开中使用的术语“和/或”是指“和”或“或”。
本文中使用的术语“大约”包括所述数字±10％。因此，“大约10”意味着9到11。
如本文所用，术语“异构体”指具有相同组成和分子量但物理和/或化学性质不同的化合物。结构差异可能在于构成(例如几何异构体)或旋转偏振光平面的能力(立体异构体)。关于立体异构体，本发明化合物可具有一个或多个不对称碳原子，并可作为外消旋体、外消旋混合物或单个对映体或非对映体出现。
如本文所用，术语“立体异构体”或“立体异构体形式”是单个分子的所有异构体的通用术语，这些异构体仅在空间中的原子方向不同。它包括具有一个以上手性中心的化合物的对映体和异构体，它们彼此不是镜像(非对映体)。
术语“手性中心”或“不对称碳原子”指连接有四个不同基团的碳原子。
术语“对映体”和“对映体”是指不能叠加在其镜像上的分子，因此具有光学活性，其中对映体使偏振光平面朝一个方向旋转，而其镜像化合物使偏振光平面朝相反方向旋转。
术语“外消旋体”是指等量对映体的混合物，且该混合物具有光学活性。
术语“绝对构型”指手性分子实体(或基团)原子的空间排列及其立体化学描述，例如R或S。
除非另有说明，本发明中使用的立体化学术语，和约定或与Pure&Appl中描述的一致，Chem 68:2193(1996)，。
术语“对映体过量”或“ee”是指一种对映体与另一种对映体相比的含量。对于R和S对映体的混合物，对映体过量百分比定义为|R-S|*100，其中R和S是混合物中对映体的摩尔分数或重量分数，R+S＝l。已知手性物质的旋光度后，对映体过量百分比定义为([α]obs/[α]max)*100，其中[α]obs是对映体混合物的旋光度，[α]max是纯对映体的旋光度。对映体过量的测定可以使用多种分析技术，包括核磁共振波谱、手性柱色谱或光学旋光法。
术语“对映体纯的”或“对映体纯的”是指手性物质的样品，其所有分子(在检测限内)具有相同的手性意义。在一个实施方案中，具有一个或多个手性中心的本公开化合物是对映纯的。
术语“对映体富集的”或“对映体富集的”是指对映体过量大于50％，例如约60％或更多、约70％或更多、约80％或更多的手性物质的样品，大约90％或更多、大约95％或更多、大约98％或更多、或大约99％或更多。富含对映体的化合物可以是对映体纯的。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指在目标患者(例如哺乳动物)中生理耐受的本公开化合物的任何盐，例如通过与酸或碱反应获得，例如人类)。
术语“盐”等的使用意在同样适用于本发明化合物的对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、位置异构体和外消旋体的盐。
如本文所用，术语“溶剂化物”是本公开的化合物与溶剂分子例如二溶剂化物、单溶剂化物或半溶剂化物的组合、物理缔合和/或溶剂化，其中溶剂分子的比率与本公开的化合物的比例分别为约2:1、约1:1或约1:2。这种物理结合涉及不同程度的离子键和共价键，包括氢键。在某些情况下，可以分离溶剂化物，例如当一种或多种溶剂分子结合到结晶固体的晶格中时。因此，“溶剂化物”包括溶液相和可分离的溶剂化物。
“患者”或“受试者”是哺乳动物，例如人、小鼠、大鼠、豚鼠、狗、猫、马、牛、猪或非人灵长类动物，例如猴子、黑猩猩、狒狒或恒河猴。
如本文所用，术语“治疗”、“治疗”、“治疗”等是指消除、减轻或改善疾病或病症和/或与其相关的症状。尽管不排除，治疗疾病或病症并不需要完全消除疾病、病症或与之相关的症状。术语“治疗”和同义词涵盖向需要此类治疗的受试者施用治疗有效量的本公开的化合物。治疗可以是针对症状的，例如，以抑制症状。它可以在短期内实现，针对中期，或者可以是长期治疗，例如在维持治疗的背景下。
本公开中使用的术语“施用”、“施用”或“施用”是指直接向受试者施用公开的化合物、公开的化合物的药学上可接受的盐或组合物、药学上可接受的盐可在受试者体内形成等量活性化合物的化合物或组合物给予受试者。
如本文所用，术语“预防”、“预防”和“预防”是指预防疾病或病症和/或其伴随症状的发作或阻止受试者患上疾病的方法。如本文所用，“预防”、“预防”和“预防”还包括延迟疾病和/或其伴随症状的发作并降低受试者患疾病的风险。术语“预防”、“预防”和“预防”可以包括“预防性治疗”，其是指降低在患有以下疾病的受试者中重新发展疾病或病症或先前控制的疾病或病症复发的可能性没有，但有风险或易患疾病或病症，或疾病或病症的复发。
如本文所用，术语“治疗有效量”或“有效剂量”是指当通过本公开的方法施用时足以有效活性成分的量，递送活性成分的用于治疗有需要的个体感兴趣的病症或疾病的成分。在增殖性疾病的情况下，例如对于自身免疫性疾病，治疗有效量的药剂可以减少(即，在一定程度上延缓并优选停止)不需要的细胞增殖。
本公开中使用的术语“载体”或“溶媒对照”包括载体、赋形剂和稀释剂，是指材料、组合物或载体，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包封材料，包括将药剂从对象的一个器官或身体的一部分携带或运输到另一个器官或身体的一部分。
在本公开中，术语“Bcl-2蛋白”或“Bcl-2蛋白家族”是指以下蛋白中的任何一种或多种：Bax、Bak、Bid、Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1、Bcl-w、Bfl-l/Al、Bim、Puma、Bad、Bik/Blk、Noxa、Bmf、Hrk/DP5和Beclin-1。参见Cold Spring Harb Perspect Biol 2013；5：a008714。
术语“疾病”或“病症”或“病症”表示通常被认为是病理病症或功能的紊乱和/或异常，并且可以以特定体征、症状和/或故障。本公开的化合物抑制Bcl-2蛋白，例如Bcl-2和/或Bcl-xL，并且可用于治疗或预防疾病、病症或病症，例如过度增殖性疾病，其中Bcl-2蛋白的抑制提供了益处。
术语“增殖性疾病”是指动物中局部增殖细胞群不受正常生长的通常限制控制的任何病症。在一个实施方案中，增殖性疾病是自身免疫性疾病，例如。***性红斑狼疮。
在一些实施方案中，本公开的化合物可用于治疗“Bcl-2蛋白介导的病症”，例如Bcl-2介导的病症和/或Bcl-xL介导的病症。Bcl-2蛋白介导的疾病是已知Bcl-2蛋白在其中起作用的任何病理状况。在一个实施方案中，Bcl-2介导的病症是增殖性疾病。在一个实施方案中，Bcl-2介导的病症是***性红斑狼疮。
披露的化合物
在一个方面，本发明涉及式(I)化合物：
或其医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
A从以下组中选择：
E从以下组中选择：碳原子，其中
为双键；–C(H)-其中
为单键；和
-氮原子，其中
为单键；Y从–C(H)-和–O-中选择；R1选自氢和-N(R7a)(R7b)；
R2、R3、R4、R5和R6各自独立地选自氢、任选经取代的C1-6烷基、任选经取代的C3-6环烷基、杂环、任选经取代的杂芳基、(杂环)烷基；
R7a选自任选取代的C1-6烷基和任选取代的(杂环)烷基；和R7b选自氢和C1-4烷基。
在一些实施例中，A是
在一些实施例中，A是
在一些实施例中，A是
在一些实施例中，A是
在一些实施例中，A是
在一些实施例中，A是
在一些实施例中，E是碳原子，其中
是双键。在一些实施例中，E是-C(H)-，其中是单键。在一些实施例中，E是氮原子，其中
是单键。
在一些实施例中，R1是氢。在一些实施例中，R1是-N(R7a)(R7b)。
在一些实施例中，R2是任选取代的C1-6烷基。在一些实施例中，R2是任选取代的C1-4烷基。在一些实施例中，R2是任选取代的C3烷基。在一些实施例中，R2是异丙基。在一些实施例中，R2是任选取代的C3-6环烷基。在一些实施例中，R2是任选取代的C3-5环烷基。在一些实施例中，R2是环丙基。在一些实施例中，R2是任选取代的杂芳基。在一些实施例中，R2是吡啶基。
在一些实施例中，R3是(杂环)烷基。在一些实施例中，R3是
在一些实施例中，R4是(杂环)烷基。在一些实施例中，R4是
在一些实施例中，R5是(杂环)烷基。在一些实施例中，R5是
在一些实施例中，R5是杂环。在一些实施例中，R5是四氢-2H-吡喃基。
在一些实施例中，R6是(杂环)烷基。在一些实施例中，R6是
在一些实施例中，R6是杂环。在一些实施例中，R6是四氢-2H-吡喃基。
在一些实施例中，R7a为任选取代的C1-6烷基。在一些实施例中，R7a是任选地经取代的C1-4烷基。在一些实施例中，R7a是任选地经取代的甲基。在一些实施例中，R7a为甲基。在一些实施例中，R7a为任选取代(杂环)烷基。在一些实施例中，R7a是
在一些实施例中，R7a是
在一些实施例中，R7a是
在一些实施例中，R7b为氢。在一些实施例中，R7b为C1-4烷基。在一些实施例中，R7b为C1-3烷基。在一些实施例中，R7b为甲基。
在一些实施例中，本发明涉及选自表1的式(I)化合物或其医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体。
式(I)化合物可含有一个或多个不对称中心，因此可产生对映异构体、非对映异构体和其他立体异构形式。本公开旨在涵盖所有此类可能形式的使用，包括外消旋和拆分形式，以及它们的混合物。考虑到本公开，可以根据本领域已知的方法分离各个立体异构体，例如对映异构体。当本文所述的化合物包含烯属双键或其他几何不对称中心时，除非另有说明，否则它们旨在包括E和Z几何异构体。所有互变异构体也旨在包含在本公开中。测定结果可以反映为外消旋形式、对映异构纯形式或立体化学方面的任何其他形式收集的数据。本公开的化合物的单个立体异构体可以例如基本上不含其他异构体，或者可以例如作为外消旋体或与所有其他或其他选择的立体异构体混合。
在一些实施方案中，具有一个或多个手性中心的式(I)化合物是对映体富集的。
此外，本公开包括所有几何和位置异构体。例如，如果式(I)化合物包含双键或稠环，则顺式和反式以及混合物都包含在本公开的范围内。如果化合物含有双键，除非另有说明，否则取代基可以是E或Z构型。如果化合物含有双取代的环烷基，除非另有说明，否则环烷基取代基可具有顺式或反式构型。
在一些实施例中，本公开内容涉及式(I)的化合物，其进一步由式(II)给出：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体。
在一些实施方案中，本公开内容涉及选自化合物(1)和化合物(2)的式(II)化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或互变异构体。
在一些实施方案中，本公开内容涉及化合物(1)
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或互变异构体。
在一些实施方案中，本公开内容涉及化合物(2)
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或互变异构体。
在一些实施例中，本发明涉及化合物(1)和化合物(2)。
在一些实施例中，本发明涉及一种选自：(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺；和
(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺，
或其医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物或互变异构体。
在一些实施例中，本发明涉及(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺，或医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物或其互变异构体。
在一些实施例中，本发明涉及(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺，或医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物或其互变异构体。
在一些实施例中，本发明涉及(S)-N-((4-((1,4-二恶烷-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺和(R)-N-((4-((1,4-二恶烷-2-基)甲基)-3-硝基苯基)[1-吡咯-2-)((1,4-)苯甲基)亚砜基)的混合物，3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺，或其医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物或互变异构体。
本发明包含通过一个或多个原子被具有不同原子质量或质量数的原子替换而进行同位素标记(即放射性标记)的式(I)化合物。可并入所公开化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、硫和氯的同位素，例如分别为2H(或氘(D))、3H、11C、13C、14C、15N、18O、17O、35S和36C1，例如3H、11C和14C。在一个实施例中，提供了一种组合物，其中式(I)化合物内位置处的基本上所有原子均被具有不同原子质量或质量数的原子取代。在另一个实施例中，提供了一种组合物，其中取代式(I)化合物内位置处的部分原子，即，式(I)化合物在具有不同原子质量或质量数的原子的位置富集。式(I)的同位素标记化合物可通过本领域已知的方法制备。
本发明包括式(I)化合物的盐的制备和使用，包括无毒的药学上可接受的盐。医药上可接受的加成盐的实例包括无机和有机酸加成盐和碱性盐。医药上可接受的盐包括但不限于金属盐，例如钠盐、钾盐、铯盐等；碱土金属，如钙盐、镁盐等；有机胺盐，例如三乙胺盐、吡啶盐、吡啶盐、乙醇胺盐、三乙醇胺盐、二环己基胺盐、N，N’-二苄基乙二胺盐等；无机酸盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐等；有机酸盐，例如柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、扁桃酸盐、乙酸盐、二氯乙酸盐、三氟乙酸盐、草酸盐、甲酸盐等；磺酸盐，例如甲烷磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐等；以及氨基酸盐，例如精氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸等。
当本发明化合物含有相对酸性官能团时，可通过将此类化合物的中性形式与足量的所需碱(纯碱或合适的惰性溶剂)接触来获得碱加成盐。从医药上可接受的无机碱衍生的盐包括铝、铵、钙、铜、铁(III)、铁(II)、锂、镁、锰、钾、钠、锌等。从医药上可接受的有机碱衍生的盐包括伯胺、仲胺、叔胺和季胺的盐，包括取代胺、环胺、天然胺等，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡胺、葡萄糖胺、组氨酸、肼胺、异丙胺、赖氨酸、甲基葡胺、吗啉、哌嗪、哌啶、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、，三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三胺等。
当本发明化合物含有相对基本的功能性时，可通过将此类化合物的中性形式与足量的所需酸(纯酸或合适的惰性溶剂)接触来获得酸加成盐。适用于制备医药上可接受的酸加成盐的酸包括乙酸、抗坏血酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、富马酸、葡萄糖酸、葡萄糖酸、谷氨酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、异硫酸、乳酸、乳糖酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲烷磺酸、粘液、，萘磺酸、烟酸、硝酸、pamoic、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸等。
本发明化合物可形成酸加成盐或碱加成盐，其可为医药上可接受的盐。
本发明涉及式(I)化合物溶剂化物的制备和使用。溶剂化物通常不会显著改变化合物的生理活性或毒性，因此可作为药理等效物发挥作用。式(I)化合物可与医药上可接受的溶剂(例如水、甲醇、乙醇等)以溶剂化形式存在，且本发明旨在包括式(I)化合物的溶剂化形式和未溶剂化形式。
在一些实施例中，溶剂化物为水合物。“水合物”涉及溶剂分子为水的溶剂化物的特定亚组。溶剂化物通常可以作为药理等效物发挥作用。本领域已知溶剂化物的制备。例如，见M。Caira等人，J。药剂师。Sci.，93(3)：601-611(2004)，描述了氟康唑与乙酸乙酯和水的溶剂化物的制备。溶剂化物、半溶剂化物、水合物等的类似制备由E。Cvan Tonder等人，AAPS Pharm。Sci。《技术规范》，第5(1)条：第12(2004)条和A。L宾厄姆等人，化学。公社。603-604(2001).制备溶剂化物的典型、非限制性过程将涉及在高于20℃的温度下将式(I)化合物溶解在所需溶剂(有机、水或其混合物)中。至约25℃，然后以足以形成晶体的速率冷却溶液，并通过已知方法(例如过滤)分离晶体。红外光谱等分析技术可用于确认溶剂化物晶体中溶剂的存在。
式(I)化合物能够调节Bcl-2家族蛋白的活性。在一些实施例中，式(I)化合物能够调节Bcl-2和/或Bcl-2的活性Bcl-xL。在一些实施例中，式(I)化合物能够抑制Bcl-2和/或Bcl-xL。
化合物(1)，(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺，能够调节Bcl-2家族蛋白质的活性。在一些实施例中，化合物(1)能够调节Bcl-2和/或Bcl-xL的活性。在一些实施例中，化合物(1)能够抑制Bcl-2和/或Bcl-xL。
化合物(2)，(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺，能够调节Bcl-2家族蛋白的活性。在一些实施例中，化合物(2)能够调节Bcl-2和/或Bcl-xL的活性。在一些实施例中，化合物(2)能够抑制Bcl-2和/或Bcl-xL。
本发明包括发现式(I)化合物及其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体和互变异构体，或包含式(I)化合物的药物组合物，-用于治疗与Bcl-2家族蛋白活性相关的疾病或紊乱，如***性红斑狼疮等增殖性疾病。
本发明包括发现化合物(1)，(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺，以及医药上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体，其互变异构体或包含化合物(1)的药物组合物可用于治疗与Bcl-2家族蛋白活性相关的疾病或病症，例如增殖性疾病，如***性红斑狼疮。
本发明包括发现化合物(2)，(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺，以及医药上可接受的盐、立体溶剂化物、水合物、异构体，其互变异构体或包含化合物(2)的药物组合物可用于治疗与Bcl-2家族蛋白活性相关的疾病或紊乱，例如增殖性疾病，如***性红斑狼疮。
本发明化合物的制备方法
本发明的化合物可通过多种方法制备，包括标准化学。下面给出的示例中描述了合适的合成路线。
本发明的化合物，即式(i)化合物，或其医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，可通过有机合成领域已知的方法制备，如部分实例中描述的合成方案所述。在下面描述的方案中，众所周知，根据一般原理或化学，在必要时使用敏感或反应性基团的保护基团。根据有机合成标准方法(T。W格林和P。GMWuts，“有机合成中的保护基团”，第三版，威利，纽约，1999年)。使用本领域技术人员容易理解的方法，在化合物合成的方便阶段去除这些基团。选择过程、反应条件及其执行顺序应与式(I)化合物的制备一致。
本领域技术人员将认识到式(I)化合物中存在立体中心。因此，本发明包括两种可能的立体异构体(除非在合成中另有指示和/或规定)，并且不仅包括外消旋化合物，还包括单个对映体和/或非对映体。除非另有说明，当化合物需要作为单一对映体或非对映体时，可通过立体定向合成或最终产物或任何方便中间体的拆分获得。最终产品、中间体或起始材料的分辨率可受到本领域已知的任何合适方法的影响。例如，见E。L埃利尔，S。H威伦和L。NMander(Wiley-lnterscience，1994年)。
鉴于本发明，本发明的化合物使用本领域技术人员已知的方法制备，或通过以下一般方案中所示的说明性方法制备。例如，美国专利10221174中公开了制备本发明化合物的方法，其内容全部并入本文。
在下面给出的一般方案1-4中，Y、R2和R4a的定义如下：
Y ＝ CH2或O
R2 ＝ –NO2
通用方案1
在通用方案1中，化合物A在碱(例如三乙胺)存在下与R4aNH2反应得到化合物B。
通用方案2
在通用方案2中，4-溴-2-氟苯甲酸甲酯与化合物C反应得到化合物D，并且化合物D的酯被水解得到化合物E。化合物E与来自通用方案1的化合物B偶联得到化合物F。
通用方案3
在通用方案3中，化合物G转化为化合物H。
通用方案4
在通用方案4中，来自通用方案3的化合物H与Boc保护的哌啶反应得到化合物J，并且去除Boc基团得到化合物K。化合物K与2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-氟苯甲酸甲酯反应生成化合物L，化合物L的酯水解生成化合物M。化合物M与来自通用方案1的化合物B偶联，得到式(I)化合物，其中E为氮原子，其中
为单键。
通用方案5
在通用方案5中，来自通用方案3的化合物H与4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶得到化合物I。化合物I与来自通用方案2的化合物F偶联得到式(I)化合物，其中E是碳原子并且其中
是双键。
使用本公开化合物的方法
式(I)化合物是Bcl-2蛋白例如Bcl-2和/或Bcl-xL的抑制剂，因此，在一些实施方案中，所述化合物是可用于研究由Bcl-2蛋白质介导的体外或体内程的工具化合物。在体外，式(I)的工具化合物可用于研究Bcl-2家族蛋白抑制对纯化蛋白、细胞提取物、完整细胞和细胞系模型等的影响。在体内，式(I)的工具化合物可用于研究Bcl-2家族蛋白抑制在细胞系衍生的异种移植物、患者衍生的异种移植物、敲入小鼠模型、敲除小鼠模型中的作用，之类的。
式(I)化合物是Bcl-2蛋白例如Bcl-2和/或Bcl-xL的抑制剂，因此可以治疗许多由Bcl-2蛋白介导的疾病、紊乱或病症或通过向受试者施用这些化合物来预防。因此，本公开内容总体上涉及一种用于治疗或预防对患有以下疾病的动物中的Bcl-2蛋白(例如Bcl-2和/或Bcl-xL)的抑制有反应的疾病、紊乱或病症的方法，或处于患该疾病、紊乱或病症的风险中，该方法包括向动物施用有效量的一种或多种本公开的化合物。
在一个实施方案中，本公开的化合物具有小于约10μM的Bcl-2和/或Bcl-xL IC50。在另一个实施方案中，本公开的化合物具有小于约5μM的Bcl-2和/或Bcl-xL IC 50。在另一个实施方案中，本公开的化合物具有小于约1μM的Bcl-2和/或Bcl-xL IC 50。在另一个实施方案中，本公开的化合物具有小于约0.5μM的Bcl-2和/或Bcl-xL IC 50。在另一个实施方案中，本公开的化合物具有Bcl-2和/或Bcl-xL IC50小于约0.1μM。在另一个实施方案中，本公开的化合物具有小于约0.05μM的Bcl-2和/或Bcl-xL IC 50。在另一个实施方案中，本公开的化合物具有小于约0.025μM的Bcl-2和/或Bcl-xL IC 50。在另一个实施方案中，本公开的化合物具有小于约0.010μM的Bcl-2和/或Bcl-xL IC 50。在另一个实施方案中，本公开的化合物具有小于约0.005μM的Bcl-2和/或Bcl-xL IC 50。在另一个实施方案中，本公开的化合物具有小于约0.0025μM的Bcl-2和/或Bcl-xL IC 50。在另一个实施方案中，本公开的化合物具有小于约0.001μM的Bcl-2和/或Bcl-xL IC 50。
本公开内容还涉及在有需要的动物例如人中抑制Bcl-2家族蛋白的方法，该方法包括向动物施用治疗有效量的至少一种所披露的化合物。在另一个实施方案中，本公开内容涉及在有需要的动物例如人中抑制Bcl-2家族蛋白的方法，该方法包括向动物施用治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含至少本公开的一种化合物。
本公开内容还涉及一种在有需要的动物例如人中抑制Bcl-2的方法，该方法包括向动物施用治疗有效量的至少一种本公开内容的化合物。在另一个实施方案中，本公开内容涉及在有需要的动物例如人中抑制Bcl-2的方法，该方法包括向动物施用治疗有效量的包含至少一种所披露的化合物的药物组合物。
本公开进一步涉及抑制有需要的动物例如人中的Bcl-xL的方法，该方法包括向动物施用治疗有效量的至少一种本公开的化合物。在另一个实施方案中，本公开内容涉及在有需要的动物例如人中抑制Bcl-xL的方法，该方法包括向动物施用治疗有效量的包含至少一种披露的化合物的药物组合物。
在一个方面，本公开提供了一种治疗或预防受试者例如人的增殖性疾病的方法，包括给予治疗有效量的本公开化合物或包含至少一种化合物的药物组合物的披露。在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗、预防或改善受试者的自身免疫性疾病的方法，例如人，包括给予治疗有效量的本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物。
本公开提供了一种治疗或改善受试者的***性红斑狼疮的方法，例如人，包括向有需要的患者施用治疗有效量的本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物。在一个实施方案中，患者被进一步诊断为患有狼疮性肾炎。在一个实施例中，患者被诊断为具有升高的循环水平抗dsDNA抗体。
本公开的化合物可以以不存在任何其他组分的原始化学品的形式施用于受试者。本公开的化合物还可以作为包含与一种或多种合适的药学上可接受的载体组合的化合物的药物组合物的一部分施用于受试者。此类载体可选自药学上可接受的赋形剂和助剂。术语“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括任何标准的药用载体、溶剂、表面活性剂或赋形剂。合适的药学上可接受的赋形剂包括水性赋形剂和非水性赋形剂。Remington’s Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,第19版中描述了标准药物载体及其制剂。1995年。
本公开范围内的药物组合物包括其中本公开的化合物与一种或多种药学上可接受的载体组合的所有组合物。在一个实施方案中，本公开的化合物以有效实现其预期治疗目的的量存在于组合物中。虽然个体需要可能有所不同，但确定每种化合物的有效量的最佳范围在本领域技术范围内。通常，本公开的化合物可以以每千克哺乳动物体重约0.0025至约1500mg的剂量或等量的药学上可接受的盐、水合物的剂量口服施用于哺乳动物，例如人、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，每天治疗特定疾病。给予哺乳动物的本公开化合物的有用口服剂量为每千克哺乳动物体重约0.0025至约200mg，或其等量的药学上可接受的盐或溶剂化物。对于肌内注射，剂量通常约为口服剂量的二分之一。在一些实施方案中，每天一次施用本公开的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体。
单位口服剂量可包含约0.01mg至约1g本公开的化合物，例如约0.01mg至约500mg、约0.01mg至约250mg、约0.01mg至约100mg、0.01mg至约50mg，例如约0.1mg至约10mg的化合物。单位剂量可以每天给药一次或多次，例如作为一种或多种片剂或胶囊剂，每剂含有约0.01mg至约1g的化合物，或等量的药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或其互变异构体。
在一些实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以引起选自下组的一种或多种作用的剂量施用于有需要的患者患者尿液中蛋白质***减少，患者血清抗dsDNA自身抗体水平降低，患者皮肤病变严重程度降低，患者***病严重程度降低，患者肾小球肾炎严重程度降低，患者血管炎严重程度降低，患者外周血单核细胞(PMBC)组中淋巴细胞计数减少，患者脾脏淋巴细胞计数减少，患者肾脏淋巴细胞浸润减少。
在一个实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以减少患者尿液中蛋白质***的剂量给予有需要的患者。
在一个实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以降低患者血清抗自身dsDNA抗体水平的剂量给予有需要的患者。
在一个实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以降低患者皮肤损伤严重程度的剂量给予有需要的患者。
在一个实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以降低患者***病严重程度的剂量给予有需要的患者。
在一个实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以降低患者肾小球肾炎严重程度的剂量给予有需要的患者。
在一个实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以降低患者的国际肾炎严重程度的剂量给予有需要的患者。
在一个实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以降低患者血管炎严重性的剂量给予有需要的患者。
在一个实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以减少外周血单核细胞中的淋巴细胞计数的剂量给予有需要的患者。PMBC)从患者身上取下的面板。
在一个实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以减少患者脾脏中淋巴细胞计数的剂量施用于有需要的患者。
在一个实施方案中，将本公开的化合物或包含至少一种本公开的化合物的药物组合物以足以减少患者肾脏中淋巴细胞浸润的剂量施用于有需要的患者。
本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物可以施用于可能体验本公开的化合物的有益效果的任何患者或受试者。此类患者或受试者中最重要的是哺乳动物，例如人类和伴侣动物，但本公开内容并非旨在受到如此限制。在一个实施例中，患者或受试者是人。
本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物可以通过实现其预期目的的任何方式给药。例如，可以通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内、经皮、鼻内、经粘膜、直肠、***内或口腔内途径，或通过吸入给药。给药剂量和给药途径将根据特定受试者的情况并考虑诸如年龄、性别、健康和接受者的体重、待治疗的病症或障碍、同时治疗的种类、如果有的话，治疗的频率，以及所需效果的性质。
在一个实施方案中，本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物可以口服给药。在另一个实施方案中，本公开的药物组合物可以口服给药并配制成片剂、糖衣丸、胶囊或口服液体制剂。在一个实施方案中，口服制剂包含本公开的化合物的挤出的多颗粒。
或者，本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物可以直肠给药，并配制成栓剂。
或者，本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物可以通过注射给药。
或者，可以透皮施用本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物。
或者，本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物可以通过吸入或通过鼻内或经粘膜给药来给药。
或者，本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物可以通过***内途径给药。
本公开的药物组合物可包含重量约0.01至99％，例如约重量0.25至75％的本公开化合物，例如约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％，或约75％(重量)的本公开化合物。
本公开的药物组合物可包含一种或多种式(I)化合物。在一些实施方案中，药物组合物含有上述结构的化合物1和化合物2，或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或互变异构体。在一个实施方案中，所述药物组合物包含纯度为至少90％的前述结构的化合物1或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或互变异构体，其中所述组合物包含小于10％，例如小于9％、小于8％、小于7％、小于6％、小于5％、小于4％、小于3％、小于2％或小于1％的上述化合物2结构体。
本公开的药物组合物以根据本公开本身已知的方式制造，例如，通过常规混合、制粒、糖衣丸制造、溶解、挤出或冻干过程。因此，口服药物组合物可通过将活性化合物与固体赋形剂混合，任选研磨所得混合物并加工颗粒混合物，如果需要或必要，在加入合适的助剂后获得片剂或糖衣丸芯。
合适的赋形剂包括填充剂例如糖类(例如，乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇)、纤维素制剂、磷酸钙(例如磷酸三钙或磷酸氢钙)，以及粘合剂例如淀粉糊(使用例如，玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉或马铃薯淀粉)、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮。如果需要，可以加入一种或多种崩解剂，例如上述淀粉以及羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐，例如海藻酸钠。
助剂通常是流量调节剂和润滑剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其盐(例如硬脂酸镁或硬脂酸钙)和聚乙二醇。糖衣丸芯具有耐胃液的合适涂层。为此，可以使用浓缩的糖溶液，其可以任选地包含***树胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。为了生产耐胃液的包衣，可以使用合适的纤维素制剂的溶液，例如邻苯二甲酸乙酰纤维素或邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素。染料或颜料可以添加到片剂或糖衣丸包衣中，例如，用于识别或表征活性化合物剂量的组合。
可口服使用的其他药物制剂的实例包括由明胶制成的推入式胶囊，或由明胶和增塑剂如甘油或山梨糖醇制成的软密封胶囊。推入式胶囊可包含颗粒形式的化合物，其可与填充剂如乳糖、粘合剂如淀粉和/或润滑剂如滑石或硬脂酸镁和任选的稳定剂混合，或以挤出的多颗粒。在软胶囊中，活性化合物优选溶解或悬浮在合适的液体中，例如脂肪油或液体石蜡。此外，可以添加稳定剂。
用于直肠给药的可能药物制剂包括例如栓剂，其由一种或多种活性化合物与栓剂基质的组合组成。合适的栓剂基质包括天然和合成的甘油三酯和石蜡烃等。也可以使用由活性化合物与基质材料例如液体甘油三酯、聚乙二醇或石蜡烃的组合组成的明胶直肠胶囊。
适合肠胃外给药的制剂包括水溶性形式的活性化合物的水溶液，例如水溶性盐、碱性溶液或酸性溶液。或者，可以将活性化合物的悬浮液制备成油性悬浮液。用于诸如悬浮液的合适的亲脂性溶剂或赋形剂可包括脂肪油(例如，芝麻油)、合成脂肪酸酯(例如，油酸乙酯)、甘油三酯或聚乙二醇例如聚乙二醇-400(PEG-400).水性悬浮液可包含一种或多种物质以增加悬浮液的粘度，包括例如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇和/或葡聚糖。悬浮液可任选地包含稳定剂。
在另一个实施方案中，本公开提供了包含本公开的化合物(或包含本公开的化合物的药物组合物)的试剂盒，所述试剂盒以有利于它们用于实践本公开的方法的方式包装。在一个实施方案中，试剂盒包括包装在容器例如密封瓶或器皿中的本公开化合物(或包含本公开化合物的药物组合物)，标签贴在容器上或包括在试剂盒中描述了使用化合物或组合物来实践本公开的方法。在一个实施方案中，化合物或组合物被包装在单位剂型中。该试剂盒还可包括适合于根据预期给药途径给药组合物的装置。
在另一个实施方案中，将本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物与第二治疗剂联合施用于受试者。第二治疗剂不同于本公开的化合物。本公开的化合物和第二治疗剂可以同时或依次给药以达到期望的效果。在一些实施方案中，在施用本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物之前施用第二治疗剂。在一些实施方案中，在本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物之后施用第二治疗剂。在一些实施方案中，第二治疗剂与本公开的化合物或包含本公开的化合物的药物组合物同时施用。此外，本公开的化合物和第二治疗剂可以作为单一组合物或两种分开的组合物施用。
以提供其所需治疗效果的量施用第二治疗剂。每种第二治疗剂的有效剂量范围是本领域已知的，并且在这样的确定范围内将第二治疗剂施用于有需要的个体。
本公开的化合物和第二治疗剂可以作为单一单位剂量一起给药或分开作为多单位剂量给药，其中本公开的化合物在第二治疗剂之前给药，反之亦然。可以施用一剂或多剂本公开的化合物和/或一剂或多剂的第二治疗剂。因此，本公开的化合物可以与一种或多种第二治疗剂联合使用，例如但不限于自身免疫性疾病治疗剂。
在一些实施方案中，第二治疗剂是自身免疫性疾病治疗剂。
在一些实施例中，第二治疗剂是***性红斑狼疮治疗剂。例如，***性红斑狼疮治疗剂可包括但不限于非甾体抗炎药、抗疟药、类固醇、免疫抑制剂和脱氢表雄酮(DHEA)。
用作***性红斑狼疮治疗剂的非甾体抗炎药的非限制性实例包括塞来昔布、二氟尼柳、依托度酸、布洛芬、吲哚美辛、美洛昔康、midrin、萘布酮、萘普生、恶丙嗪、吡罗昔康、水杨酸、、三水杨酸胆碱镁和酮洛芬。
用作***性红斑狼疮治疗剂的抗疟药的非限制性实例包括羟氯喹、氯喹和奎纳克林。
用作***性红斑狼疮治疗剂的类固醇的非限制性实例包括***、***龙、氢化可的松、甲基***龙、***、曲安西龙和局部类固醇。
用作***性红斑狼疮治疗剂的免疫抑制剂的非限制性实例包括硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、环孢菌素、甲氨蝶呤、来氟米特、环磷酰胺、苯丁酸氮芥和氮芥。
如本领域所述，制备和施用上述第二治疗活性剂，其中一种或多种可以与本公开的化合物组合使用。
实施例
实施例1-中间体的合成
中间体1：1-环丁烯基萘丙-2-酮的合成
向环丁酮(5.0g，71.4mmol)在甲苯(200ml)中的溶液中加入1-(三苯基磷酰苯胺)-2-丙酮(22.7g，71.4mmol)，混合物回流过夜。在减压下去除溶剂，并通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/己烷1/10-1/5)纯化残余物，以提供黄色油状1-环丁烯基丙烷-2-酮(5.0g)。1hnmr(400mhz，CDCl3)δ5.95-5.93(m，1H)，3.19-3.13(m，2H)，2.91-2.84(m，2H)，2.21(s，3H)，2.21-2.11(m，2H)。
中间体2：螺环[3.5]壬烷-6,8-二酮的合成
将甲醇钠(41.4g，30％甲醇)添加到甲醇(150ml)中的1-环丁烯基丙烷-2-酮(23.1g，0.21mol)和丙二酸甲酯(30.3g，0.23mol)溶液中。将混合物在氮气下加热至回流4h并浓缩。所得残渣在70℃的2N氢氧化钾(200ml)中水解4小时。用乙酸乙酯(100ml)提取混合物，然后用1N盐酸滴定至pH 3-5。将所得溶液加热至70℃ 5小时，并用乙酸乙酯(100ml x3)萃取。将合并的有机层在硫酸镁上干燥并浓缩以提供黄色固体形式的螺环[3.5]壬烷-6,8-二酮(19.8g，62.3％)。该产品直接用于下一步，无需进一步纯化。1hnmr(400mhz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，5.17(s，1H)，2.50-2.35(m，4H)，1.92-1.79(m，2H)，1.79-1.72(m，4H)。
中间体3：8-异丁氧基螺环[3.5]非-7-烯-6-酮
向螺环[3.5]壬烷-6,8-二酮(19.8g，0.13mol)在甲苯(150ml)中的溶液中添加4-甲苯磺酸(248mg，0.0013mol)和异丁醇(14.5g，0.2mol)。将混合物加热至回流，并通过共沸蒸馏除去水。在真空下去除溶剂，并通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/汽油醚1/10-1/3)纯化残余物，以提供淡黄色油状8-异丁氧基螺环[3.5]非7-烯-6-酮(25.0g，92.7％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ5.31(s，1H)，3.59(d，J＝6.8Hz，2H)，2.51(s，2H)，2.45(s，2H)，2.12-1.96(m，1H)，1.93-1.83(m，6H)，0.99(d，J＝6.8Hz，6H)。
中间体4：
螺环[3.5]非-7-烯-6-酮的合成
在室温下，向8-异丁氧基螺环[3.5]非7-烯-6-酮(25.0g，0.12mol)甲苯溶液(100mL)中逐滴添加红色
(40mL，70％甲苯，0.18mol)。将混合物加热至45℃4h，然后用1N盐酸淬火。过滤混合物，并通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/汽油醚1/10)浓缩和纯化滤液，以提供淡黄色油状螺环[3.5]非-7-烯-6-酮(9.0g，55％)。
中间体5：螺环[3.5]壬-6-酮的合成
螺环[3.5]非7-烯-6-酮(9.0g)在1atm氢气下氢化，由10％Pd/C(1.0g)的甲醇(80ml)溶液5.5小时。通过过滤除去Pd/C并且将滤液浓缩以提供呈无色油状的螺[3.5]壬烷-6-酮(8.8g，96.4％)，其无需进一步纯化而直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.38(s,2H),2.23-2.20(m,2H),1.89-1.75(m,10H)。
中间体6：6-氧代吡咯[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯的合成
在室温下向四氢呋喃(150mL)中的氢化钠(5.1g，0.13mol)悬浮液中添加碳酸甲酯(28.7g，0.32mol)，然后在四氢呋喃(30mL)中添加螺环[3.5]壬-6-酮。将混合物回流2h。用饱和氯化铵水溶液淬火反应，并用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。用盐水冲洗并浓缩合并的有机层。所得残渣通过硅胶柱色谱法纯化，得到淡黄色油状6-氧代吡咯[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(4.0g，32％)。
中间体7：6-((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺环[3.5]非-6-烯-7-羧酸甲酯的合成
将碳酸钾(5.6g，0.04mol)和N，N-二(三氟甲基磺酰基)苯胺(7.9g，0.022mol)添加到四氢呋喃(25mL)中的6-氧代吡咯[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(4.0g，0.02mol)溶液中。将混合物在室温下搅拌过夜，用水稀释，并用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。用饱和盐水冲洗合并的有机层，用硫酸镁干燥并浓缩。通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/汽油醚1/50-1/10)纯化所得残留物，以提供作为浅黄色油的6-((三氟甲基)磺酰)氧基)螺环[3.5]非6-烯-7-羧酸甲酯(5.0g，76％)。
中间体8：6-(4-氯苯基)螺[3.5]非-6-烯-7-羧酸甲酯的合成
在1,2-二甲氧基乙烷(30ml)和甲醇(15ml)中，将6-((三氟甲基磺酰)氧基)螺环[3.5]非6-烯-7-羧酸甲酯(5.0g，0.015mol)、4-氯苯基硼酸(2.58g，0.017mol)、脑脊液(4.63g，0.03mol)和钯(PPh3)4(173mg，0.15mol)的混合物在氮气下加热至70℃ 2h。在减压下去除溶剂，并通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/汽油醚1/10)纯化残余物，得到无色油状6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非6-烯-7-羧酸甲酯(4.0g，92％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.30(d，J＝8.5Hz，2H)，7.06(d，J＝8.5Hz，2H)，3.48(s，3H)，2.50-2.44(m，2H)，2.43(t，J＝2.3(2.3或6.3？)Hz，2H)，2.02-1.80(m，6H)，1.74(t，J＝6.3Hz，2H)。
中间体9：(6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲醇的合成
向6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非6-烯-7-羧酸甲酯(4.0g，0.014mol)四氢呋喃(20mL)溶液中添加LiBH4(910mg，0.042mol)四氢呋喃溶液(10毫升)。将混合物在室温下搅拌过夜，用1N含水盐酸淬火，并用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。用盐水冲洗合并的有机层，用硫酸镁干燥并浓缩。通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/汽油醚1/10-1/3)纯化所得残留物，以白色固体形式提供(6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非6-烯-7-基)甲醇(3.0g，81.7％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.31(d，J＝8.4Hz，2H)，7.09(d，J＝8.4Hz，2H)，3.93(d，J＝4.2Hz，2H)，2.37-2.26(m，2H)，2.01-1.77(m，8H)，1.74(t，J＝6.3Hz，2H)。
中间体10：7-(氯甲基)-6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯的合成
向二氯甲烷(20mL)中的(6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非6-烯-7-基)甲醇(3.5g，0.013mol)和三甲胺(2.7g，0.026mol)溶液中逐滴添加甲基磺酰氯(3.0g，0.026mol)。将混合物在室温下搅拌5小时。在减压下去除溶剂，并通过硅胶柱层析纯化残余物，以提供7-(氯甲基)-6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯(2.75克，75.5％)为黄色油。核磁共振氢谱(400MHz，CDCl3)δ7.31(d，J＝8.4Hz，2H)，7.09(d，J＝8.5Hz，2H)，3.93(s，2H)，2.34-2.25(m，4H)，1.97-1.78(m，6H)，1.74(t，J＝6.3Hz，2H)。
中间体11：2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酸甲酯的合成
将1-(三异丙基硅基)-1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-醇(1,91g)、4-溴-2-氟苯甲酸甲酯(1,70g)和K3P04(1,86g)在二聚体(20mL)中的混合物在115℃下搅拌1h。冷却反应，用乙酸乙酯(100mL)稀释，用水冲洗，然后用盐水冲洗，然后浓缩。通过硅胶色谱法(乙酸乙酯/己烷1/3)纯化残余物以提供甲基2-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酸酯(1.8g)，白色固体。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ9.28(s，1H)，8.18(d，J＝2.5Hz，1H)，7.79(d，J＝8.4Hz，1H)，7.62(d，J＝2.5Hz，1H)，7.40-6.96(m，2H)，6.96(d，J＝1.7Hz，1H)，6.51-6.48(m，1H)，3.89(s，3H)。
中间体12：2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酸的合成
向2-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酸甲酯(300mg，0.867mmol)在二氧六环(10mL)中的溶液中添加1N NaOH(2.2mL，2.2mmol)，并在室温下搅拌该混合物2h。混合物用1NHCI酸化，用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，然后用无水硫酸镁干燥。减压蒸发得到无色油状粗2-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酸。该产品直接用于下一步，无需进一步纯化。
中间体13：2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴-N-((3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)苯基)磺酰)苯甲酰胺的合成
至2-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酸(100mg，在DCM(10mL)中添加0.3mmol)的3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)苯磺酰胺(95mg，0.3mmol)、DMAP(55mg，0.45mmol)和EDCI(115mg，0.6mmol)，并在室温下搅拌该混合物24h。在减压下去除溶剂，并通过硅胶色谱(DCM/MeOH 95/5)纯化残余物，以提供作为黄色油的2-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴代-(3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)苯基)磺酰)苯甲酰胺(80mg)。MS m/z 630[m+H]+。
中间体14：(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H)的合成-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酰胺
至2-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酸(100mg，在DCM(10mL)中添加(S)-4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯磺酰胺(95mg，0.3mmol)、DMAP(55mg，0.45mmol)和EDCI(115mg，0.6mmol)，并在室温下搅拌混合物24h。在减压下去除溶剂，并通过硅胶色谱(DCM/MeOH 95/5)纯化残余物，以提供(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H)-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酰胺。1hnmr(400mhz，DMSO-d6)δ11.79(s，1H)，8.59-8.52(m，2H)，8.05(d，J＝2.6Hz，1h)，7.85(dd，J＝9.2，2.4Hz，1h)，7.66(d，J＝2.6Hz，1h)，7.59-7.49(m，1H)、7.48(d，J＝8.2赫兹，1H)、7.34(dd，J＝8.2，1.8赫兹，1H)、7.12(d，J＝9.2赫兹，1H)、6.88(d，J＝1.8赫兹，1H)、6.50-6.40(m，1H)、3.83-3.37(m，2H)、3.72-3.56(m，2H)、3.56-3.42(m，2H)、3.37-3.01(m，3H)。
中间体15：(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酰胺的合成
将(R)-4-((1,4-二氧六环-2-基)氨基)-3-硝基苯磺酰胺(95mg，0.3mmol)、DMAP(55mg，0.45mmol)和EDCI(115mg，0.6mmol)添加到DCM(10mL)中的2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酸溶液中，并在室温下搅拌该混合物24h。在减压下去除溶剂，并通过硅胶色谱(DCM/MeOH 95/5)纯化残余物，以提供(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴代苯甲酰胺。11.79(s，1H)，8.59-8.48(d，J＝8.2赫兹，1H)，7.48(d，J＝8.2赫兹，1H)，7.34(dd，J＝8.34(dd，J＝8.2.2，1.8，1.34(dd，J＝8.8，J＝8.34(dd，J＝8.2.2.2，1.2，1赫兹，1H，1H，1H)，7.34(dd，7.34(dd，J＝8，J＝8，J＝8，J＝8.8.8，8，J＝8.2.2.2.2，1.2，1.2，1.2，1.2，1.2，1.2，1.2，1.2，1.2，1.2，1.2，1.2，1.2，1.8，1.8，1.8，1.8，1.8，2H)，3.72-3.56(m，2H)，3.56-3.42(m，2H)，3.37-3.01(m，3H)。
中间体16：叔丁基-4-(3-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(乙氧羰基)苯基)哌嗪-1-羧酸酯的合成
2-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-氟苯甲酸乙酯(2,1g，将二甲基亚砜中的N-Boc-哌嗪(2.61g，0.014mol)和磷酸氢二钾(2.44g，0.014mol)加热至135℃过夜。向反应混合物中添加水，并用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取混合物。用盐水洗涤合并的有机层，通过硅胶柱层析浓缩和纯化，以提供作为白色固体的4-(3-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(乙氧羰基)苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.4g，73％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.42(br s，1H)，8.20(d，J＝2.5Hz，1H)，7.95(d，J＝8.9Hz，1H)，7.53(d，J＝2.5赫兹，1H)，7.37(dd，J＝3.5，2.5赫兹，1H)，6.66(dd，J＝8.9，2.5赫兹，1H)，6.46(dd，J＝3.5，2.0赫兹，1H)，6.36(d，J＝2.5赫兹，1H)，4.28(q，J＝7.1赫兹，2H)，3.55-3.50(m，4H)，3.21-3.17(m，4H)，1.47(s，9H)，1.26(t，J＝7.1赫兹，3H)。
中间体17：2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯的合成
将三氟乙酸(6mL)添加到二氯甲烷(10mL)中的4-(3-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(乙氧羰基)苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.1g)溶液中，并在室温下搅拌该混合物3h。在减压下去除溶剂，并在下一步骤中直接使用粗2-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯(2.5g)，无需进一步纯化。
中间体18：2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯的合成
将碳酸钾(1.26g，9mmol)、碘化钾(100mg，0.6mmol)和2-((1H-吡咯[2.3-b]吡啶-5-基)氧基-4-(哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯(1.53g，3mmol)添加到N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中的7-(氯甲基)-6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非6-烯(851mg，3mmol)溶液中。将混合物在室温下搅拌过夜。用水稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/汽油醚1/5-1/1)浓缩和纯化，以提供2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯(1.3g，71％)作为白色固体。1.98(s，1H)，7.51(d，J＝2.6赫兹，1H)7.51(d，J＝2.6赫兹，1H)，7.51(d，J＝2.6赫兹，18.38(t，J＝3.38(t，J＝3.5赫兹，J＝3.38(t，J＝3.6赫兹，J＝3.5赫兹，1H，1H，1H)，8.20(d，J＝2.20(d，J＝2.6赫兹，J＝2.6赫兹，J＝2.6赫兹，J＝2.6＝2.6赫兹，1，1，1H，1H，1H，1H，1H，1H，1H，1H)，8，(d，1.20，(d，J＝2.7.20(d，J＝2.7.20(d，J＝2.7，J＝2.6)(d，J＝2.6＝2.6＝2.6＝2.3.5,2.0Hz，1H)，6.32(d，J＝2.5Hz，1H)，4.26(q，J＝7.1Hz，2H)，3.20-3.12(m，4H)，2.77(s，2.31-2.17(m，8H)，1.98-1.72(m，6H)，1.68(t，J＝6.3赫兹，2H)，1.25(t，J＝7.1赫兹，3H)。
中间体19：2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸的合成
将2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯(1.3g，2.1mmol)和2N氢氧化钾(12mL，0.042mol)在二恶烷(15mL)中的溶液加热至60℃过夜。混合物用1N含水盐酸中和至pH 7，并用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，在硫酸镁上干燥，并浓缩以提供作为白色固体的2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸(1.1g，88.7％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.34(s,1H),8.19(d,J＝2.6Hz,1H),8.02(d,J＝9.0Hz,1H),7.63(d,J＝2.6Hz,1H),7.38-7.34(m,1H),7.27(d,J＝8.3Hz,2H),6.96(d,J＝8.3Hz,2H),6.63(dd,J＝9.0,2.4Hz,1H),6.44(dd,J＝3.5,1.5Hz,1H),6.22(d,J＝2.4Hz,1H),3.81(s,2H),3.17-3.10(m,4H),2.80(s,2H),2.30-2.20(m,6H),1.98-1.72(m,6H),1.67(t,J＝6.3Hz,2H)。
中间体20：1-(氧杂环丁-3-亚基)丙烷-2-酮的合成
向DCM(300ml)中的氧杂环丁-3-酮(20.6g，0.28mol)溶液中添加1-(三苯基磷酰苯胺)丙烷-2-酮(98.6g，0.31mol)。将混合物在室温下搅拌过夜。减压移除DCM，直到固体沉淀。通过过滤去除固体，并通过硅胶柱色谱(乙酰乙酸乙酯/庚烷1/5～1/3)浓缩和纯化滤液，以提供黄色油状1-(氧杂环丁-3-亚乙基)丙烷-2-酮(23.3g，74.3％)。
中间体21：2-氧杂螺[3.5]壬烷-6,8-二酮的合成
将甲醇钠(41.3g，30％甲醇溶液)添加到1-(氧杂环丁-3-亚基)丙烷-2-酮(23.3g，0.21mol)和丙二酸甲酯(30.2g，0.23mol)在甲醇(150ml)中的溶液中。将混合物在氮气下加热至回流1小时。在减压下去除溶剂，得到6-羟基-8-氧代-2-氧代吡咯[3.5]非-6-烯-5-羧酸甲酯，在下一步直接使用，无需纯化。向KOH(2mol/L，200ml)水溶液中添加6-羟基-8-氧代-2-氧代吡咯[3.5]非-6-烯-5-羧酸甲酯。在室温下搅拌30分钟后，用乙酸乙酯(150ml x3)萃取水溶液。用1N盐酸将水层调节至pH 3-5，并在50℃下加热4h。在减压下去除水，并通过硅胶柱层析纯化残余物，以提供2-奥沙匹罗[3.5]壬烷-6,8-二酮(2.5g，77.0％)为淡黄色固体。该产品直接用于下一步，无需进一步纯化。
中间体22：8-异丁氧基-2-氧杂螺[3.5]壬-7-烯-6-酮的合成
将TsOH(238mg，0.0016mol)和异丁醇(18g，0.24mol)添加到甲苯(150ml)中的2-氧杂吡咯[3.5]壬烷-6,8-二酮(25g，0.16mol)溶液中。在室温下搅拌1小时后，反应完成。在减压下去除溶剂，并通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/汽油醚1/5～1/3)纯化残余物，以提供淡黄色油状8-异丁氧基-2-奥沙匹罗[3.5]非-7-烯-6-酮(6g，43％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ5.34(s，1H)，4.47(d，J＝6.1Hz，2H)，4.45(d，J＝6.1Hz，2H)，3.60(d，J＝6.8Hz，2H)，2.80(s，2H)，2.68(s，2H)，2.09-2.01(m，1H)，0.98(d，J＝6.8Hz，6H)。
中间体23：2-奥沙匹罗[3.5]非-7-烯-6-酮的合成
将红色
(40.4g，70％在甲苯中)逐滴添加到甲苯(100ml)中的8-异丁氧基-2-奥沙匹罗[3.5]非7-烯-6-酮(14.7g，0.07mol)溶液中。将混合物加热至45℃2h，并用1N HCI溶液淬火。通过硅胶柱色谱法(乙酰乙酸乙酯/汽油醚1/10～1/5)浓缩和纯化混合物，得到无色油状2-奥沙匹罗[3.5]非-7-烯-6-酮(8.8g，91％)。该产品直接用于下一步，无需进一步纯化。
中间体24：2-氧杂螺[3.5]壬-6-酮的合成
向四氢呋喃(80ml)中的2-氧杂吡咯[3.5]非-7-烯-6-酮(8.8g)溶液中添加Pd/C(1g)。该混合物在室温下在1atm氢气下氢化2h。反应完成后，通过过滤去除Pd/C，并浓缩溶液，以提供无色油状2-奥沙匹罗[3.5]壬-6-酮(8.0g，89.6％)。该产品直接用于下一步，无需进一步纯化。
中间体25：6-氧代-2-氧杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯的合成
将碳酸甲酯(25.7g，0.28mol)逐滴添加到氮下四氢呋喃(150ml)中的氢化钠(4.6g，0.11mol)悬浮液中。滴加完成后，将混合物加热至回流。然后添加2-奥沙匹罗[3.5]壬-6-酮(11.2g，0.057mol)在四氢呋喃(30ml)中的溶液。反应在回流下加热2h，用饱和氯化铵水溶液淬火，并用乙酸乙酯(100ml x 3)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，减压浓缩，并通过硅胶柱色谱法纯化残余物，得到无色油状6-氧代-2-氧代吡咯[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(4.5g，69％)。该产品直接用于下一步，无需进一步纯化。
中间体26：6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2-氧杂吡咯[3.5]非-6-烯-7-羧酸甲酯的合成
向DMF(30ml)中的6-氧代-2-氧代吡咯[3.5]壬烷-7-羧酸甲酯(4.5g，0.02mol)和碳酸钾(6.3g，0.046mol)的悬浮液中添加N，N-二(三氟甲基磺酰基)苯胺(8.9g，0.025mol)。将混合物在室温下搅拌过夜，用水稀释，并用乙酸乙酯(100ml x 3)萃取。用盐水冲洗合并的有机层，在MgSO4上干燥，并在减压下浓缩。残渣通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/汽油醚1/10～1/3)纯化，得到淡黄色油状的6-((三氟甲基)磺酰基)氧基-2-氧基-2-氧基吡咯[3.5]非-6-烯-7-羧酸甲酯(6.6g，86％)。该产品直接用于下一步，无需进一步纯化。
中间体27：6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-羧酸甲酯的合成
将4-氯苯基硼酸(3.13g，0.02mol)、CsF(6.08g，0.04mol)和Pd(PPh3)4(231mg)添加到1,2-二甲氧基乙烷(30ml)和甲醇(10ml)中的6-((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2-氧基吡咯[3.5]非6-烯-7-羧酸甲酯(6.6g，0.02mol)溶液中，0.2mmol)，并将混合物在氮气下加热至70℃ 30min。在减压下去除溶剂，并通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/汽油醚1/5-1/3)纯化残余物，以提供作为浅黄色固体的6-(4-氯苯基)-2-氧杂吡咯[3.5]非6-烯-7-羧酸甲酯(5.1g，87.3％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.33(d，J＝8.4Hz，2H)，7.07(d，J＝8.4Hz，2H)，4.54(d，J＝5.6Hz，2H)，4.48(d，J＝5.6Hz，2H)，3.48(s，3H)，2.74-2.70(m，2H)，2.55-2.50(m，2H)，2.04(t，J＝6.4Hz，2H)。
中间体28:(6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基)甲醇的合成
在室温下，将LiBH4(475mg，0.022mol)在四氢呋喃(10ml)中逐滴添加到6-(4-氯苯基)-2-氧杂吡咯[3.5]非-6-烯-7-羧酸甲酯(2.1g，0.0072mol)在四氢呋喃(20ml)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌4h，用1N HCI溶液淬火，并用乙酸乙酯(100ml x 3)萃取。用盐水冲洗合并的有机层，在MgSO4上干燥并浓缩。通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/汽油醚1/5-1/1)纯化残余物，以提供白色固体形式的(6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基)甲醇(1.5g，78.9％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.34(d，J＝8.4Hz，2H)，7.07(d，2H，J＝8.4Hz)，4.54(d，2H，J＝6.0Hz)，4.46(d，2H，J＝5.6Hz)，3.93(s，2H)，2.62(s，2H)，2.40-2.33(m，2H)，2.03(t，2H，J＝6.4Hz)。
中间体29：7-(氯甲基)-6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯的合成
向二氯甲烷(15ml)中的(6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基)甲醇(1.5g，5.7mmol)和三乙胺(836mg，8.6mmol)溶液中添加甲基磺酰氯(980mg，8.6mmol)，并在室温下将混合物搅拌3.5h。在减压下去除溶剂，并通过硅胶柱层析纯化残余物，以提供7-(氯甲基)-6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯(1.4克，87.0％)，白色固体。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.35(d，2H，J＝8.4Hz)、7.16(d，2H，J＝8.4Hz)、4.53(d，2H，J＝6.0Hz)、4.45(d，2H，J＝5.6Hz)、3.86(s，2H)、2.64(s，2H)、2.40-2.33(m，2H)、2.03(t，2H，J＝6.4Hz)。
中间体30：2-((1H-吡咯基[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-((4-((6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯的合成
向2-((1H吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯溶液(382mg，0.82mmol)在DMF(10ml)中添加7-(氯甲基)-6-(4-氯苯基)-2-氧杂吡咯[3.5]非-6-烯(200mg，0.75mmol)、碳酸钾(310mg，2.25mmol)、二苯乙酸(290mg，2.25mmol)和碘化钾(24.9mg，0.15mmol)，并在室温下将混合物搅拌过夜。用水稀释混合物，并用乙酸乙酯(50mlx 3)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/汽油醚1/5-1/1)浓缩和纯化，以提供2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)-2-氧基吡咯[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯(370mg，80.6％)作为白色固体。MS m/z613[m+H]+。
中间体31：2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸的合成
向二氧六环(10mL)中的2-(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基-4-(4-(6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基)甲基哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯(370mg，0.6mmol)溶液中添加2N氢氧化钾(6mL，12mmol)，并在60℃下搅拌该混合物过夜。该溶液用1N盐酸中和至pH7，并用乙酸乙酯(100ml x 3)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，在硫酸镁上干燥并浓缩以提供作为白色固体的2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸(1.1g，88.7％)。MS m/z 585[m+H]+。
中间体32：2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(1-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌啶-4-基)苯甲酸甲酯的合成
向7-(氯甲基)-6-(4-氯苯基)螺[3.5]非-6-烯(850mg，3.04mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10ml)中加入碳酸钾(1.26g,2.2mmol)、碘化钾(100mg,0.61mmol)和甲基2-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(哌啶-4-基)苯甲酸酯(1.0g，3.34mmol)将混合物在室温下搅拌过夜。然后用水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤并浓缩。所得残余物通过硅胶柱色谱纯化，得到甲基2-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(1-((6-(4-氯苯基)螺[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌啶-4-基)苯甲酸酯(1.0克，55.2％)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.39(br s,1H),8.19(d,J＝2.6Hz,1H),7.87(d,J＝8.1Hz,1H),7.57(d,J＝2.6Hz,1H),7.39(dd,J＝3.5,2.5Hz,1H),7.30-7.23(m,2H),7.04-6.93(m,3H),6.72(d,J＝1.6Hz,1H),6.49(dd,J＝3.5,2.0Hz,1H),3.87(s,3H),2.81-2.75(m,2H),2.73-2.71(m,2H),2.28(s,2H),2.25-2.15(m,2H),1.98-1.76(m,6H),1.75-1.51(m,9H)。
实例2-合成(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺(化合物2)
2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基吡咯[2,3-b]吡啶-5-基-5-基-5-基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸(R)-4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯磺酰胺、EDCI和4-(N，N-二甲氨基)吡啶和二氯甲烷的混合物在室温下反应，然后在室温下加入水过夜。用二氯甲烷萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，通过硅胶色谱法浓缩和纯化以提供(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺。7.99(d，J＝2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2H，2h2h)，7.51(d，J＝2.4赫兹，1H)，7.51(d，J＝2.51(d，J＝2.4赫兹，2.51(d，J＝2.4赫兹，2.4)7.51(d，J＝2.51(d，J＝2，J＝2.4赫兹，J＝2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2H，2.4赫兹，1H)，2个H)，1)，7.84(dd)7.84)7.84(dd，7.84(dd，7.84(dd，J＝9，J＝9，J＝9.2.2.2.2.2.2，J＝9，J＝9，2.2.2.2.2，2，2.2，2，76(dd，J＝8.9,2.3赫兹，1小时)，6.40(d，J＝3.3赫兹，1小时)，6.36(d，J＝2.3Hz，1h)，3.87(dd，J＝11.8，4.2Hz，3H)，3.83-3.70(m，3H)，3.67(s，2H)，3.62(dd，J＝11.7，2.9Hz，1h)，3.51-3.41(m，2H)，3.40-3.35(m，1h)，3.29(dq，J＝3.2，1.6Hz，1h)，2.41(s，2H)，2.26(s，2H)，2.00-1.77(m，6H)。
实例3-合成(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺(化合物1)
；2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基吡咯[2,3-b]吡啶-5-基-5-基-5-基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸(S)-4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯磺酰胺、EDCI和4-(N，N-二甲氨基)吡啶和二氯甲烷的混合物，在室温下反应，随后加入水过夜。用二氯甲烷萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，通过硅胶色谱法浓缩和纯化以提供(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺。7.99(d，J＝2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2H，2h2h)，7.51(d，J＝2.4赫兹，1H)，7.51(d，J＝2.51(d，J＝2.4赫兹，2.51(d，J＝2.4赫兹，2.4)7.51(d，J＝2.51(d，J＝2，J＝2.4赫兹，J＝2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2.4赫兹，2H，2.4赫兹，1H)，2H)，1)，7.84(dd)7.84)7.84(dd，7.84(dd，7.84(dd，J＝9，J＝9，J＝9.2.2.2.2.2.2，J＝9，J＝9，2.2.2.2.2，2，2.2，2，76(dd，J＝8.9,2.3赫兹，1小时)，6.40(d，J＝3.3赫兹，1H)，6.36(d，J＝2.3Hz，1h)，3.87(dd，J＝11.8，4.2Hz，3H)，3.83-3.70(m，3H)，3.67(s，2H)，3.62(dd，J＝11.7，2.9Hz，1h)，3.51-3.41(m，2H)，3.40-3.35(m，1h)，3.29(dq，J＝3.2，1.6Hz，1h)，2.41(s，2H)，2.26(s，2H)，2.00-1.77(m，6H)。
实例4-合成(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(1-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯甲酰胺
(R)-N-((4-(((1,4-二恶烷-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯并[将2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-溴苯甲酰胺在1,2-二甲氧基乙烷(10毫升)和水(1毫升)中加入1-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶，Pd(dppf)Cl2和K2CO3，并将混合物在80℃ 12小时。将反应冷却至室温并用水稀释。混合物用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取，经无水MgSO 4干燥并浓缩。残余物通过C18反相制备型HPLC纯化，得到(R)-N-((4-(((1,4-二恶烷-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(1-((6-(4-氯苯基)螺[3.5]壬-6-烯-7-基)甲基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯甲酰胺。1H-NMR(400mhz，甲醇-d4)δ8.68(d，7.88(dd，J＝9.3，2.3赫兹，2.3赫兹，2.3赫兹，1H，1H)7.88(dd，J＝9.3，2.3赫兹，2.3赫兹，1H，7.63(d，J＝8.2赫兹，1H，8.63(d，J＝8.2赫兹，J＝8.2.2赫兹，1H)，7.63(d，J＝8.63(d，J＝8.2赫兹，J＝8.2赫兹，8.2赫兹，1H，1H，1H，1H，1H，1H，1H)，7.6(d，1.3.6(d，J＝8.3.3.2赫兹，8.2赫兹，1H)，7.6(d，J＝8.2赫兹，J＝8.2赫兹，8.3.2赫兹，1H)，7.3(d，J＝8.3.2.2.2.2.2，1 1H)，6.41(d，J＝3.5赫兹，1H)，5.94-5.90(m，1H)，3.95-3.40(m，14H)、3.15-3.03(m，1H)、2.68-2.45(m，2H)、2.43(s，2H)、2.30-2.20(m，2H)、2.03-1.77(m，8H)。
实施例5-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(1-((6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)苯基)磺酰)苯甲酰胺的合成
使用类似于针对实施例4所述的程序制备标题化合物。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.70(d,J＝2.3Hz,1H),7.99(d,J＝2.5Hz,1H),7.90(dd,J＝9.2,2.3Hz,1H),7.61(d,J＝8.2Hz,1H),7.57(d,J＝2.5Hz,1H),7.48(d,J＝3.5Hz,1H),7.31(d,J＝8.4Hz,2H),7.20-7.10(m,3H),6.96(d,J＝9.2Hz,1H),6.82(d,J＝1.6Hz,1H),6.44(d,J＝3.5Hz,1H),5.93-5.86(m,1H),4.53(d,J＝5.9Hz,2H),4.49(d,J＝5.9Hz,2H),4.00-3.90(m,2H),3.77-3.33(m,7H),3.26(d,J＝7.0Hz,2H),3.15-3.00(m,1H),2.70-2.65(m,7H)2H),2.63-2.25(m,4H),2.07(t,J＝6.3Hz,2H),2.00-1.85(m,1H),1.75-1.65(m,2H),1.46-1.30(m,2H))。
实施例6-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(1-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)苯甲酰胺的合成
使用类似于针对实施例4所述的程序制备标题化合物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.71(t,J＝1.9Hz,1H),8.00-7.95(m,1H),7.90(dd,J＝9.3,1.9Hz,1H),7.63(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),7.56-7.50(m,1H),7.46(dd,J＝3.5,1.4Hz,1H),7.33-7.26(m,2H),7.18-7.06(m,3H),6.96(dd,J＝9.3,1.4Hz,1H),6.81(s,1H),6.43(dd,J＝3.5,1.5Hz,1H),5.93-5.86(m,1H),4.00-3.94(m,2H),3.83-3.36(m,7H),3.26(d,J＝7.0Hz,2H),3.10-3.04(m,1H),2.67-2.40(m,4H),2.30-2.24(m,2H),2.02-1.77(m,9H),1.74-1.67(m,2H),1.45-1.30(m,2H)。
实施例7-合成(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(1-((6-(4-氯苯基)-2-氧杂吡咯[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯甲酰胺
使用类似于针对实施例4所述的程序制备标题化合物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.68(d,J＝2.3Hz,1H),7.99(d,J＝2.5Hz,1H),7.89(dd,J＝9.2,2.3Hz,1H),7.65(d,J＝8.2Hz,1H),7.54(d,J＝2.5Hz,1H),7.48(d,J＝3.4Hz,1H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),7.21-7.16(m,1H),7.13(d,J＝8.4Hz,2H),6.95(d,J＝9.3Hz,1H),6.86(d,J＝1.6Hz,1H),6.43(d,J＝3.5Hz,1H),5.94-5.90(m,1H),4.60-4.43(m,4H),3.95-3.40(m,14H),3.15-3.00(m,1H),2.80-2.60(m,4H),2.38-2.25(m,2H),2.08(t,J＝6.3Hz,2H)。
实施例8-合成(R)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)-2-氧杂吡咯[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺
2-((1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)-2-氧杂螺[3.5])非6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸(290mg，0.5mmol)，(R)-4-((((1,4-二恶烷-2-基)甲基)氨基))-3-硝基苯磺酰胺(236mg,0.75mmol)、EDCI(191mg,1mmol)、4-(N,N-二甲氨基)吡啶(591mg,0.75mmol)的混合物，在二氯甲烷(15ml)的溶液中在室温下搅拌过夜。真空除去溶剂，所得残余物通过硅胶柱纯化，得到(R)-N-((4-(((1,4-二恶烷-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)-2-氧杂螺[3.5]非-)6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺(150mg，34.1％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.67(d,J＝2.3Hz,1H),7.99(d,J＝2.3Hz,1H),7.85(dd,J＝9.3,2.3Hz,1H),7.64(d,J＝8.8Hz,1H),7.52(d,J＝2.3Hz,1H),7.45(d,J＝3.5Hz,1H),7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.13(d,J＝8.4赫兹，2H),6.95(d,J＝9.3Hz,1H),6.76(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.41(d,J＝3.5Hz,1H),6.34(d,J＝2.4Hz,1H),4.54(d,J＝5.9Hz,2H),4.48(d,J＝5.9Hz,2H),3.93-3.35(m,19H),2.70-2.65(m,2H),2.33(s,2H),2.08(t,J＝6.3Hz,2H)。
实施例9-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)苯基)磺酰)苯甲酰胺的合成
2-((1H-吡咯基[2,3-b]吡啶-5-基吡咯基[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基-甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸(250mg,0.43mmol),3-nitro-4-(((四氢-2H-pyran-4-yl)methyl)amino)苯磺酰胺(202mg,0.64mmol)、EDCI(164mg,0.86mmol)、4-(N,N-二甲氨基)吡啶(78mg,0.64mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液在室温下搅拌过夜，然后通过浓缩。所得残余物通过硅胶色谱纯化，得到2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)-2-奥沙匹罗[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)甲基)氨基)苯基)磺酰)苯甲酰胺(150mg，39.6％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.70(d,J＝2.3Hz,1H),8.01(d,J＝2.6Hz,1H),7.87(dd,J＝9.2,2.3Hz,1H),7.66(d,J＝8.8Hz,1H),7.56(d,J＝2.6Hz,1H),7.47(d,J＝3.5Hz,1H),7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.13(d,J＝8.4Hz,2H),6.97(d,J＝9.2Hz,1H),6.76(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.43(d,J＝3.5Hz,1H),6.32(d,J＝2.4Hz,1H),4.54(d,J＝5.9Hz,2H),4.48(d,J＝5.9Hz,2H),4.03-3.94(m,2H),3.67(s,2H),3.55-3.27(m,12H),2.69(s,2H),2.35-2.25(m,2H),2.08(t,J＝6.3Hz,2H),2.05-1.93(m,1H),1.76-1.69(m,2H),1.45-1.35(m,2H)。
实施例10-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)苯基)磺酰)苯甲酰胺的合成
2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸(1.75g，3mmol)，3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)苯磺酰胺(1.43g，4.5mmol)，EDCI(1,550mg二甲基吡啶，4.5mmol)和二氯甲烷(40ml)在室温下反应过夜，然后添加水。用二氯甲烷萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，通过硅胶柱浓缩和纯化，以提供2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基]吡啶-5-基)吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基-1-苯甲酰胺(1.7g，64.4％)，为黄色固体。
1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.70(d,J＝2.3Hz,1H),8.01(d,J＝2.7Hz,1H),7.87(d,J＝9.2,2.3Hz,1H),7.66(d,J＝8.9Hz,1H),7.55(d,J＝2.7Hz,1H),7.47(d,J＝3.4Hz,1H),7.38(d,J＝8.4Hz,2H),7.10(d、J＝8.4Hz,2H),6.97(d,J＝9.2Hz,1H),6.77(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),6.44(d,J＝3.4Hz,1H),6.34(d,J＝2.4Hz,1H),4.02-3.94(m,3H),3.66(s,3H),3.49-3.38(m,2H),3.41-3.25(m,7H),2.42(s,3H),2.26(s,3H),2.00-1.67(m,4H),1.45-1.38(m,2H)。
实施例11-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((3-硝基苯基)磺酰基)苯甲酰胺的合成
使用类似于实施例10所述的程序制备标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),9.47(s,1H),8.62(d,J＝2.2Hz,1H),8.44(d,J＝8.3Hz,1H),8.27(d,J＝7.9Hz,1H),8.02-7.97(m,1H),7.84-7.75(m,1H),7.56-7.43(m,3H)),7.40(d,J＝8.3Hz,2H),7.11(d,J＝8.3Hz,2H),6.72(d,J＝8.9Hz,1H),6.40-6.35(m,1H),6.30(s,1H),3.80-3.65(m,2H),3.55(s,2H),3.28-2.95(m,4H),2.82-2.65(m,2H),2.31(s),2H),2.22-2.15(m,2H),1.93-1.60(m,8H)。
实施例12-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((4-(甲氨基)-3-硝基苯基)磺酰)苯甲酰胺的合成
使用类似于针对实施例10所述的程序制备标题化合物。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.78(d,J＝2.3Hz,1H),8.05(d,J＝2.6Hz,1H),7.96(dd,J＝9.2,2.3Hz,1H),7.80(d,J＝8.9Hz,1H),7.61(d,J＝2.6Hz,1H),7.46(d,J＝3.5Hz,1H),7.34(d,J＝8.4Hz,2H),7.01(d,J＝8.4Hz,2H),6.90(d,J＝9.2Hz,1H),6.68(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),6.46(d,J＝3.5Hz,1H),6.18(d,J＝2.4Hz,1H),3.60(s,2H),3.50-3.12(m,8H),3.06(s,3H)),2.38(s,2H),2.30-2.16(m,2H),1.97-1.73(m,8H)。
实施例13 2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((4-(二甲氨基)-3-硝基苯基)磺酰)苯甲酰胺的合成
使用类似于针对实施例10所述的程序制备标题化合物。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.41(d,J＝2.2Hz,1H),8.08(d,J＝2.5Hz,1H),7.91(dd,J＝9.4,2.3Hz,1H),7.81(d,J＝8.9Hz,1H),7.68(d,J＝2.3Hz,1H),7.48(d,J＝3.5Hz,1H),7.34(d,J＝8.0Hz,2H),7.04(d,J＝9.4Hz,1H),7.01(d,J＝8.0Hz,2H),6.71-6.63(m,1H),6.51(d,J＝3.5Hz,1H),6.15(d,J＝1.9Hz,1H),3.59(s,2H),3.52-3.20(m,8H),2.98(s,6H),2.38(s,2H),2.25-2.17(m,2H),1.96-1.72(m,8H)。
实施例14-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(1-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌啶-4-基)-N-((3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)苯基)磺酰)苯甲酰胺的合成
2-((1H-吡咯基[2,3-b]吡啶-5-基吡咯基[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(1-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌啶-4-基)苯甲酸(200mg，0.34mmol)，3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)苯磺酰胺(162，0.52mmol)，ED68，0.63mmol，在室温下将0.52mmol)的二氯甲烷(15ml)搅拌过夜，然后通过硅胶柱层析进行纯化，得到2-((1H-吡咯[2，3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(1-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌啶-4-基)-N-((3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)氨基)苯基)磺酰)苯甲酰胺(170mg，57.3％)，黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.94(s,1H),11.64(s,1H),8.50-8.42(m,2H),7.97(d,J＝2.6Hz,1H),7.76(dd,J＝9.2,2.2Hz,1H),7.52-7.36(m,5H),7.11(d,J＝7.9Hz,2H),6.99(d,J＝9.2Hz,1H),6.91-6.86(m,1H),6.55(s,1H),6.37(s,1H),3.89-3.79(m,2H),3.35-2.90(m,10H),2.32-2.10(m,5H),1.95-1.15(m,17H)。
实施例15-式(I)化合物抑制Bcl-2和Bcl-XL
分别命名为Flu-BIM、Flu-BAK和Flu-BID的荧光素标记的BIM(81-106)、BAK(72-87)和BID(79-99)肽用作荧光Bcl-2 FP检测中的探针，分别为Bcl-XL和Mcl-1。通过监测由固定浓度的荧光探针和浓度增加直至完全饱和的蛋白质组成的混合物的总荧光偏振值，Flu-BIM到Bcl-2、Flu-BAK到Bcl-XL和Flu-BID的Kd值对Mcl-1的测定分别为0.55±0.15nM、4.4±0.8nM和6.9±0.9nM。使用Infinite M-1000读板器(Tecan U.S.,Research TrianglePark,N.C.)在Microfluor 96孔黑色圆底板(Thermo Scientific)中测量荧光偏振值。向每个孔中加入1nM Flu-BIM，或在测定缓冲液(100mM磷酸钾，pH 7.5、100μg/mL牛γ-球蛋白、0.02％叠氮化钠、Invitrogen、0.01％Triton X-100和4％DMSO)。将板混合并在室温下轻轻摇动孵育1小时以确保平衡。以毫偏振单位(mP)为单位的偏振值是在485nm的激发波长和530nm的发射波长下测量的。然后使用Graphpad Prism 5.0软件(Graphpad Software，SanDiego，CA)通过拟合作为蛋白质浓度的函数的S形剂量依赖性FP增加来计算平衡解离常数(Kd)。
本公开的代表性化合物对Bcl-2、Bcl-XL和Mcl-1的Ki值是从竞争性结合实验中确定的，其中将抑制剂的系列稀释液加入含有固定浓度荧光探针的96孔板中和每个孔中的蛋白质。将DMSO中的5μL测试抑制剂和测定缓冲液中120μL预孵育的蛋白质/探针复合物的混合物加入测定板中，并在室温下轻轻摇动温育2小时。蛋白质和探针的最终浓度对于Bcl-2测定为1.5nM和1nM，对于Bcl-xL测定为10nM和2nM，对于Mcl-1测定分别为20nM和2nM。仅含有蛋白质/探针复合物(相当于0％抑制)的阴性对照和仅含有游离探针(相当于100％抑制)的阳性对照包含在每个测定板中。如上所述测量荧光偏振值。IC50值通过竞争曲线的非线性回归拟合确定。使用Nikolovska-Coleska et al.,Analytical Biochemistry 332:261-73(2004)中描述的方程计算竞争性抑制剂的Ki值，基于测量的IC50值、蛋白质探针的值和浓度竞争性分析中的蛋白质和探针。还使用Huang,Journal of Biomolecular Screening8:34-38(2003)的方程计算Kd值。
表2
实施例16-SLE的MRL/lpr小鼠模型
雌性MRL/MpJ-Fas lpr/J小鼠(18-20g，7-8周龄)获自The Jackson Laboratory。这些小鼠是淋巴增殖自发突变(Faslpr)的纯合子，并表现出全身性自身免疫、与异常T细胞增殖相关的大量***病、关节炎和免疫复合物肾小球肾病。因此，这些小鼠可用作研究***性红斑狼疮(SLE)的模型。
将动物在具有12-h光照/12-h黑暗循环的温度控制环境中圈养和处理。根据尿蛋白浓度和体重，将总共36只小鼠随机分为3组，然后用载体(po,qd)、30mg/kg化合物1(po,qd)或100mg治疗10周/kg化合物1(po,qd)。涉及动物护理和使用的协议和程序由药明康德(上海)有限公司(中国上海)的动物护理机构和使用委员会(IACUC)批准。
实施例17-化合物1剂量依赖性降低SLE小鼠模型中的尿蛋白水平
使用考马斯亮蓝(CBB)测定和尿蛋白检测试剂盒(南京建成生物技术研究所，江苏，中国)，每两周在每只小鼠中单独评估尿蛋白。如图1所示，媒介物组小鼠的尿蛋白水平从
从第8周的304.4±110.0mg/L到第18周的1376.1±391.4mg/L。用化合物1治疗剂量依赖性地降低了尿蛋白水平。30mg/kg化合物1显着抑制尿蛋白水平的增加(p<0.05，与载体组相比)，在研究结束时(第18周)在尿液中检测到536.1±146.8mg/L的蛋白。此外，在整个实验过程中，100mg/kg化合物1保持尿蛋白水平(第18周时为266.8±37.7mg/L；p<0.0001，与载体组相比)。总之，化合物1剂量依赖性地改善小鼠自发性SLE模型中的狼疮性肾炎。
实施例18-化合物1剂量依赖性地降低SLE小鼠模型中的血清抗dsDNA自身抗体水平
通过ELISA测量抗dsDNA自身抗体水平。简而言之，将96孔平板用10μg/mL小牛胸腺ds-DNA(Sigma-Aldrich，MA，USA)在4℃下包被过夜。用含有0.05％Tween 20(PBS-T)的PBS洗涤并用1％牛血清白蛋白封闭后，加入血清样品(4000倍稀释)并在室温下孵育1小时。然后在室温下加入山羊抗小鼠IgG-HRP偶联物(Invitrogen，CA，USA)1小时，然后用PBS-T洗涤3次。最后，加入超TMB-ELISA底物溶液(Pierce Biotechnology，IL，USA)，再孵育30分钟，反应停止后记录405nm处的OD值。如图2所示，在研究结束时，MRL/lpr小鼠的血清抗dsDNA自身抗体水平降低至76.8％(p<0.05，vs载体组)和56.4％(p<0.0001，vs载体组)分别用30mg/kg化合物1或100mg/kg化合物1处理后的载体组。上述结果与化合物1降低尿蛋白的治疗效果一致。
实施例19-化合物1剂量依赖性降低皮肤损伤严重程度SLE小鼠模型
从第12周开始每周对皮肤损伤进行评分，并使用评分***从0到4(0-正常；1-直径在2-4mm之间的小损伤；2-损伤面积<0.5平方厘米；3-病变面积在0.5cm2至1cm2之间；4-病灶面积>1cm2)。如图3所示，MRL/lpr小鼠在第13周出现皮肤损伤，病理评分在研究结束时(第18周)达到2.1±0.2。用30mg/kg和100mg/kg的化合物1治疗在第18周显着降低皮肤损伤评分(p＜0.0001，相对于载体组)。
实施例20-化合物1剂量依赖性地减少***病SLE小鼠模型
在整个研究过程中每周对***进行评分，并使用基于***直径的评分***从0到6表示(0-正常；1-1cm在一个部位；2-＜1cm在两个站点；三个站点中3-＜1cm；一个站点中4-＞1cm，两个站点中＜1cm)；5-＞1cm在两个站点，＜1cm在一个站点；6-＞1cm在三个部位)。如图4所示，MRL/lpr小鼠在第9周出现***病，病理评分在研究结束时(第18周)达到4.5±0.4。当小鼠分别用30mg/kg和100mg/kg化合物1治疗时，***病评分降低至2.7±0.4和1.6±0.4(p<0.0001，相对于载体组)。
实施例21-化合物1剂量依赖性地改善SLE小鼠模型中狼疮性肾炎的病理评分
在研究结束时，收集脾和***并称重。肾脏用***固定，石蜡包埋，切成5μm厚的切片，用苏木精和伊红染色。组织病理学评分以不知情的方式在显微镜下进行评估，见下文。
以不知情的方式在显微镜下评估组织病理学评分。膜性肾小球肾炎评分(GN评分)使用0到4的评分进行评估(0-正常；1-轻度、局灶性或早期增殖；2-中度或明确增殖和基质增加；3-弥漫性和局灶性或弥漫性增殖；4-伴有新月体/硬化的严重弥漫性增殖)。对于炎症和坏死，肾间质性肾炎评分(IN评分)从0到4分级(0-正常；1-偶发性、局灶性或小袋单核细胞(MNC，10-14个细胞)；2-MNC的局灶浸润(15-30个细胞)；3-MNC的多灶性和广泛浸润；4-具有广泛坏死的MNC严重浸润)。此外，血管炎评分为0到4分(0-正常；1-偶尔出现MNC的血管周围浸润；2-多灶性MNC血管周围浸润但无坏死；3-有/无坏死的MNC多灶性血管周围浸润；4-多灶性或MNC的弥漫性血管周围浸润，伴有广泛的坏死)。
如图5中所见，媒介物组中的MRL/lpr小鼠在第18周发生中度至重度肾小球肾炎、间质性肾炎和血管炎，这由约3.0的病理学评分表明。用化合物1的治疗剂量依赖性地降低了所有三个方面的病理评分。值得注意的是，当小鼠用100mg/kg化合物1治疗时，在个体和总分中都实现了统计显着性。
实施例22-化合物1显着减少SLE小鼠模型中PMBC、脾脏和肾脏中的淋巴细胞数量
在研究结束时(第18周)从小鼠中收获脾脏和肾脏并消化成单细胞悬液。裂解全血中的红细胞后获得外周血单个核细胞(PBMC)。细胞用以下荧光标记抗体染色：PerCP-Cyanine5.5偶联抗小鼠CD8a(BD Biosciences)、AF700偶联抗小鼠CD3(BD Biosciences)、PE-eFluor610偶联抗小鼠B220(BD Biosciences)、e506偶联抗小鼠CD45(BDBiosciences)、BV605偶联抗小鼠CD138(BioLegend)和BV711偶联抗小鼠CD4(BioLegend)。
基于前向散射(FCS)和侧向散射(SSC)，所有细胞主要在活淋巴细胞上门控。在流式细胞仪(BD FACSCalibur，美国)上分析样品以计算每种亚型淋巴细胞的数量。如图6和图7所示，用100mg/kg化合物1处理后，总淋巴细胞(CD45+)、T细胞(CD45+CD3+)、CD4+T细胞(CD45+CD3+CD4+)、CD8+T细胞的数量(CD45+CD3+CD8+)、双阴性T细胞(CD45+CD3+CD4-CD8-)、B细胞(CD45+CD3-B220+)、活化B细胞(CD45+CD3-B220+CD69+)、浆母细胞(CD45+CD3-B220+CD138+)、浆细胞(CD45+CD3-B220-CD138+)和CD138+细胞(CD45+CD3-CD138+)显着减少。
值得注意的是，与其他淋巴细胞相比，双阴性T细胞的减少最为显着。不受理论束缚，分泌自身抗体的浆母细胞和浆细胞数量减少可能是实施例7的血清抗dsDNA自身抗体结果降低和观察到的狼疮性肾炎严重程度降低的原因。渗入肾脏的淋巴细胞数量如图8所示。用100mg/kg化合物1处理显着减少了肾脏中促炎性CD4+T细胞和双阴性T细胞的数量。不受理论的束缚，促炎性CD4+细胞和双阴性T细胞的浸润减少可能是在治疗狼疮性肾炎中观察到的功效的部分原因。
本公开使得相关领域的技术人员能够根据多个和变化的实施例来制造和使用在此提供的发明。本领域技术人员容易想到的本公开的各种变更、修改和改进，包括某些变更、修改、替换和改进也是本公开的一部分。因此，前述描述是通过示例来说明本文提供的发现。此外，上述描述和实施例是本发明的示例而非限制。因此，本发明的范围在所附权利要求中阐述。
本文引用的所有专利和出版物均通过引用全文并入本文。
Claims (63)
1.一种治疗患者***性红斑狼疮的方法，包括向有需要的患者给药治疗有效量的式(I)化合物：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体，其中：A选自由以下组成的组：
E选自：一个碳原子，其中
是一个双键；
-C(H)-，其中
是单键；和
一个氮原子，其中
是一个单键；
Y选自-C(H)-和-O-；
R1选自氢和-N(R7a)(R7b)；
R2、R3、R4、R5和R6各自独立地选自氢、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C3-6环烷基、杂环、任选取代的杂芳基、(杂环)烷基；
R7a选自任选取代的C1-6烷基和任选取代的(杂环)烷基；和
R7b选自氢和C1-4烷基。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物进一步由式(II)给出：
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述化合物选自由以下组成的组：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或互变异构体。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述化合物是
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或互变异构体。
5.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述化合物是
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或互变异构体。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述化合物选自表1所列化合物。
7.一种治疗患者***性红斑狼疮的方法，包括给予有需要的患者治疗有效量的包含式(I)化合物的药物组合物：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体，其中：
A选自由以下组成的组：
E选自：
一个碳原子，其中
是一个双键；
-C(H)-，其中是
单键；和
一个氮原子，其中
是一个单键；
Y选自-C(H)-和-O-；
R1选自氢和-N(R7a)(R7b)；
R2、R3、R4、R5和R6各自独立地选自氢、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C3-6环烷基、杂环、任选取代的杂芳基、(杂环)烷基；
R7a选自任选取代的C1-6烷基和任选取代的(杂环)烷基；和
R7b选自氢和C1-4烷基。
8.如权利要求7所述的方法，其中所述药物组合物包含进一步由式(II)给出的化合物：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体。
9.如权利要求7或8所述的方法，所述药物组合物包含选自由以下组成的组的化合物：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体。
10.如权利要求7-9中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含
11.如权利要求7-9中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含
12.如权利要求7所述的方法，其中该药物组合物包含选自由表1所述化合物组成之组之化合物。
13.一种治疗***性红斑狼疮患者的方法，包括向需要的患者投与治疗有效量的化合物，其中该化合物为(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2，3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺。
14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中该患者被诊断为患有狼疮性肾炎。
15.如权利要求1-14中任一项所述的方法，其中将所述化合物或药物组合物以足以引起一种或多种选自下组的作用的剂量施用于有需要的患者：患者尿液蛋白***减少、患者血清抗dsDNA自身抗体水平降低、患者皮肤病变严重程度降低、患者***病严重程度降低、患者肾小球肾炎严重程度降低、患者血管炎严重程度降低、取自患者的外周血单核细胞(PMBC)淋巴细胞计数减少，减少了患者脾脏中的淋巴细胞计数，并减少了患者肾脏的淋巴细胞浸润。
16.如权利要求1-15中任一项所述的方法，其中将所述化合物或药物组合物以足以减少患者尿液中蛋白质***的剂量给予有需要的患者。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中将所述化合物或药物组合物以足以降低所述患者的血清抗-dsDNA自身抗体水平的剂量施用于有需要的患者。
18.如权利要求1-17中任一项所述的方法，其中将所述化合物或药物组合物以足以降低患者皮肤损伤严重程度的剂量给予有需要的患者。
19.如权利要求1-18中任一项所述的方法，其中将所述化合物或药物组合物以足以降低患者***病严重程度的剂量给予有需要的患者。
20.如权利要求1-19中任一项所述的方法，其中将所述化合物或药物组合物以足以降低患者肾小球肾炎严重程度的剂量给予有需要的患者。
21.根据权利要求1-20中任一项所述的方法，其中将所述化合物或药物组合物以足以降低所述患者的国际肾炎的严重程度的剂量施用于有此需要的患者。
22.如权利要求1-21中任一项所述的方法，其中将所述化合物或药物以足以降低患者血管炎严重程度的剂量给予有需要的患者。
23.根据权利要求1-22中任一项所述的方法，其中将所述化合物或药物组合物以足以减少取自患者的外周血单核细胞(PMBC)淋巴细胞计数面板中的的剂量，施用于有需要的患者。
24.如权利要求1-23中任一项所述的方法，其中将所述化合物或药物组合物以足以减少患者脾脏中淋巴细胞计数的剂量施用于有需要的患者。
25.如权利要求1-24中任一项所述的方法，其中将所述化合物药物组合物以足以减少患者肾脏中淋巴细胞浸润的剂量给予有需要的患者。
26.式(I)化合物的用途：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体，用于制备用于治疗有需要的患者的***性红斑狼疮的药物，其中：
A选自由以下组成的组：
E选自：
一个碳原子，其中是一个双键；
-C(H)-，其中
是单键；和
一个氮原子，其中
是一个单键；
Y选自-C(H)-和-O-；
R1选自氢和-N(R7a)(R7b)；
R2、R3、R4、R5和R6各自独立地选自氢、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C3-6环烷基、杂环、任选取代的杂芳基、(杂环)烷基；
R7a选自任选取代的C1-6烷基和任选取代的(杂环)烷基；和
R7b选自氢和C1-4烷基。
27.如权利要求26所述的方法，其中所述化合物进一步由式(II)给出：
28.权利要求26或27的用途，其中所述化合物选自：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体。
29.权利要求26-28任一项的用途，其中所述化合物是
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体。
30.如权利要求26-28中任一项所述的用途，其中所述化合物是
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体。
31.权利要求26的用途，其中所述化合物选自表1中列举的化合物。
32.(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]壬-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺在制备用于治疗需要它的患者的***性红斑狼疮的药物中的使用。
33.根据权利要求26-32中任一权利要求所述的用途，其中所述患者被诊断为患有狼疮性肾炎。
34.根据权利要求26-33中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物或药物组合物以足以引发从以下组中选择的一个或多个效应的剂量施用于需要其的患者：减少患者尿液中的蛋白质***，降低患者中的血清抗双链DNA自身抗体水平，患者的皮肤损伤严重程度降低，患者的***病严重程度降低，患者的肾小球肾炎严重程度降低，患者的血管炎严重程度降低，患者外周血单个核细胞(PMBC)的淋巴细胞计数减少，患者脾脏淋巴细胞数量减少，患者肾脏淋巴细胞浸润减少。
35.根据权利要求26-34中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物或药物组合物以足以减少所述患者尿液中蛋白质***的剂量施用于需要其的患者。
36.根据权利要求26-35中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物或药物组合物以足以降低患者血清抗双链DNA自身抗体水平的剂量施用于需要该化合物或药物组合物的患者。
37.根据权利要求26-36中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物或药物组合物以足以降低患者皮肤损伤严重程度的剂量施用于需要其的患者。
38.根据权利要求26-37中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物或药物组合物以足以降低患者***病严重程度的剂量施用于需要其的患者。
39.根据权利要求26-38中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物或药物组合物以足以降低患者肾小球肾炎严重程度的剂量施用于需要其的患者。
40.根据权利要求26-39中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物或药物组合物以足以降低所述患者的国际性肾炎的严重程度的剂量施用于所述有需要的患者。
41.根据权利要求26-40中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物或药物以足以降低患者血管炎严重程度的剂量施用于需要其的患者。
42.根据权利要求26-41中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物或药物组合物以足以减少取自患者的外周血单个核细胞(PMBC)组中的淋巴细胞计数的剂量投与需要该化合物或药物组合物的患者。
43.根据权利要求26-42中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物或药物组合物以足以减少所述患者脾脏中的淋巴细胞计数的剂量投与所述患者。
44.根据权利要求26-43中任一权利要求所述的用途，其中所述化合物药物组合物以足以减少患者肾脏中淋巴细胞浸润的剂量施用于需要其的患者。
45.一种用于治疗有需要的***性红斑狼疮患者的化合物，其包含式(I)化合物：
或其医药上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体或互变异构体，其中：
A从以下组中选择：
E从以下组中选择：碳原子，其中
为双键；
–C(H)-其中为
单键；和-氮原子，其中
为单键；
Y从–C(H)-和–O-中选择；
R1选自氢和-N(R7a)(R7b)；
R2、R3、R4、R5和R6各自独立地选自氢、任选经取代的C1-6烷基、任选经取代的C3-6环烷基、杂环、任选经取代的杂芳基、(杂环)烷基；
R7a选自任选取代的C1-6烷基和任选取代的(杂环)烷基；和
R7b选自氢和C1-4烷基。
46.如请求项45之用途化合物，其中该化合物进一步由式(II)给出：
或其医药上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体。
47.如请求项45或46之用途之化合物，其中该化合物选自以下组：
或其医药上可接受的盐、溶剂化物、水合物或互变异构体。
48.如请求项45-47中任一项之用途之化合物，其中该化合物系
或其医药上可接受的盐、溶剂化物、水合物或互变异构体。
49.如请求项45-47中任一项之用途之化合物，其中该化合物系
或其医药上可接受的盐、溶剂化物、水合物或互变异构体。
50.如权利要求45所述的化合物，其特征在于，所述化合物选自由表1中列举的化合物组成的组。
51.一种用于治疗患者***性红斑狼疮的化合物，其中该化合物为(S)-N-((4-((1,4-二氧六环-2-基)甲基)氨基)-3-硝基苯基)磺酰基)-2-((1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基)-4-(4-((6-(4-氯苯基)螺环[3.5]非-6-烯-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺。
52.如权利要求45-51中任一项所述的用途的化合物，其中所述患者被诊断为患有狼疮性肾炎。
53.用于权利要求45-52中任一项的化合物，其中所述化合物或药物组合物以足以引起一种或多种选自下组的作用的剂量施用于有需要的患者：减少蛋白质的***在患者尿液中，患者血清抗dsDNA自身抗体水平降低，患者皮肤病变严重程度降低，患者***病严重程度降低，患者肾小球肾炎严重程度降低，患者血管炎严重程度降低，淋巴细胞减少取自患者的外周血单核细胞(PMBC)面板中的计数减少了患者脾脏中的淋巴细胞计数，并减少了患者肾脏的淋巴细胞浸润。
54.如权利要求45-53中任一项所述的用途的化合物，其中将所述化合物或药物组合物以足以减少患者尿液中蛋白质***的剂量施用于有需要的患者。
55.如权利要求45-54中任一项所述的用途，其中所述化合物或药物组合物以足以降低患者血清抗dsDNA自身抗体水平的剂量施用于有需要的患者。
56.如权利要求45-55中任一项所述的用途的化合物，其中将所述化合物或药物组合物以足以降低患者皮肤损伤严重程度的剂量给予有需要的患者。
57.如权利要求45-56中任一项所述的用途的化合物，其中将所述化合物或药物组合物以足以降低患者***病严重程度的剂量给予有需要的患者。
58.如权利要求45-57中任一项所述的用途的化合物，其中将所述化合物或药物组合物以足以降低患者肾小球肾炎严重程度的剂量给予有需要的患者。
59.如权利要求45-58中任一项所述的用途的化合物，其中将所述化合物或药物组合物以足以降低患者国际性肾炎严重程度的剂量给予有需要的患者。
60.如权利要求45-59中任一项所述的用途的化合物，其中将所述化合物或药物以足以降低患者血管炎严重程度的剂量施用于有需要的患者。
61.用于权利要求45-60中任一项的化合物，其中所述化合物或药物组合物以足以减少取自外周血单核细胞(PMBC)组中的淋巴细胞计数的剂量施用于有需要的患者。
62.根据权利要求45-61中任一项所述的用途的化合物，其中所述化合物或药物组合物以足以减少患者脾脏中淋巴细胞计数的剂量施用于有需要的患者。
63.如权利要求45-62中任一项所述的用途的化合物，其中将所述化合物药物组合物以足以减少患者肾脏中淋巴细胞浸润的剂量施用于有需要的患者。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNPCT/CN2020/110516 | 2020-08-21 | ||
| CN2020110516 | 2020-08-21 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114073707A true CN114073707A (zh) | 2022-02-22 |
Family
ID=80283415
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110961633.9A Pending CN114073707A (zh) | 2020-08-21 | 2021-08-20 | 治疗***性红斑狼疮的组合物和方法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20230301989A1 (zh) |
| EP (1) | EP4199924A1 (zh) |
| JP (1) | JP2023539114A (zh) |
| CN (1) | CN114073707A (zh) |
| WO (1) | WO2022037684A1 (zh) |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012071374A1 (en) * | 2010-11-23 | 2012-05-31 | Abbott Laboratories | Methods of treatment using selective bcl-2 inhibitors |
| US20140275082A1 (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-18 | Abbvie Inc. | Apoptosis-inducing agents for the treatment of cancer and immune and autoimmune diseases |
| EP4129999A1 (en) * | 2016-08-05 | 2023-02-08 | The Regents Of The University Of Michigan | N-(phenylsulfonyl)benzamides and related compounds as bcl-2 inhibitors |
| AU2019314819A1 (en) * | 2018-07-31 | 2020-10-22 | Ascentage Pharma (Suzhou) Co., Ltd. | Combination product of Bcl-2 inhibitor and chemotherapeutic agent and use thereof in the prevention and/or treatment of diseases |
| CN110772521A (zh) * | 2018-07-31 | 2020-02-11 | 苏州亚盛药业有限公司 | Bcl-2抑制剂或Bcl-2/Bcl-xL抑制剂与BTK抑制剂的组合产品及其用途 |
| WO2020103921A1 (en) * | 2018-11-23 | 2020-05-28 | Ascentage Pharma (Suzhou) Co., Ltd. | Pharmaceutical composition and use thereof |
| TWI770503B (zh) * | 2019-05-13 | 2022-07-11 | 大陸商蘇州亞盛藥業有限公司 | 用於預測bcl-2/bcl-xl抑制劑對癌症的功效的方法和組合物 |
| TW202114692A (zh) * | 2019-07-02 | 2021-04-16 | 大陸商蘇州亞盛藥業有限公司 | 一種含有mTOR抑制劑的藥物組合及其應用 |
| TWI772992B (zh) * | 2019-12-03 | 2022-08-01 | 大陸商蘇州亞盛藥業有限公司 | 作為bcl-2抑制劑的n-(苯基磺醯基)苯甲醯胺及相關化合物 |
-
2021
- 2021-08-20 JP JP2023512108A patent/JP2023539114A/ja active Pending
- 2021-08-20 EP EP21857772.4A patent/EP4199924A1/en active Pending
- 2021-08-20 CN CN202110961633.9A patent/CN114073707A/zh active Pending
- 2021-08-20 US US18/042,252 patent/US20230301989A1/en active Pending
- 2021-08-20 WO PCT/CN2021/113832 patent/WO2022037684A1/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20230301989A1 (en) | 2023-09-28 |
| WO2022037684A1 (en) | 2022-02-24 |
| EP4199924A1 (en) | 2023-06-28 |
| JP2023539114A (ja) | 2023-09-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2021078301A1 (zh) | 蛋白降解剂及其在疾病治疗中的应用 | |
| TWI642667B (zh) | 吡啶並嘧啶類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用 | |
| ES2942308T3 (es) | Compuestos y su uso como inhibidores de BACE1 | |
| AU2015341913A1 (en) | Pharmaceutical compound | |
| US10889584B2 (en) | Bicyclic bis-heteroaryl derivatives as modulators of protein aggregation | |
| RU2626890C2 (ru) | Производные адамантила, полезные для лечения jnk-опосредованного расстройства | |
| JP6420738B2 (ja) | ジヒドロピリダジン−３，５−ジオン誘導体 | |
| AU2013235117A1 (en) | Spirocyclic dihydro-thiazine and dihydro-oxazine bace inhibitors, and compositions and uses thereof | |
| ES2803650T3 (es) | Compuestos heterocíclicos útiles como inhibidores de TNF | |
| ES2963652T3 (es) | Compuestos espirocíclicos de alquenos como moduladores del receptor x farnesoide | |
| ES2806780T3 (es) | Compuestos como antagonistas de CRTH2 y usos de los mismos | |
| EP4121422A1 (en) | Indazole based compounds and associated methods of use | |
| JP2022521536A (ja) | イミダゾピリジニル化合物及び神経変性障害の処置のためのその使用 | |
| EP4308557A1 (en) | Indazole based compounds and associated methods of use | |
| EA033827B1 (ru) | Производные бензимидазола в качестве антигистаминных агентов | |
| KR20190046851A (ko) | 7-치환된 1-아릴-나프티리딘-3-카르복실산 아미드 및 그의 용도 | |
| JP5916975B1 (ja) | ナトリウム依存性リン酸トランスポーター阻害剤を含有する医薬 | |
| CN114073707A (zh) | 治疗***性红斑狼疮的组合物和方法 | |
| EP2981264A1 (en) | Inhibitors of bruton's tyrosine kinase | |
| CA3230941A1 (en) | Ahr agonists | |
| CN114073703B (zh) | 用于治疗非酒精性脂肪肝炎的组合物和方法 | |
| WO2023215471A1 (en) | Tetrahydroisoquinoline heterobifunctional bcl-xl degraders | |
| WO2024026083A1 (en) | Targeted protein degradation of parp14 for use in therapy |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |