CN113975289A - 褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用 - Google Patents
褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113975289A CN113975289A CN202111382619.XA CN202111382619A CN113975289A CN 113975289 A CN113975289 A CN 113975289A CN 202111382619 A CN202111382619 A CN 202111382619A CN 113975289 A CN113975289 A CN 113975289A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- polysaccharide
- sulfated
- aging
- sargassum
- brown algae
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 94
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 94
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 92
- 241000199919 Phaeophyceae Species 0.000 title claims abstract description 24
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 27
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 23
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 claims abstract description 22
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims abstract description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 16
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 12
- 230000006870 function Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 230000032677 cell aging Effects 0.000 claims abstract description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 57
- 241000195474 Sargassum Species 0.000 claims description 25
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 claims description 15
- 230000009758 senescence Effects 0.000 claims description 15
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 15
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 claims description 14
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 claims description 14
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 claims description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 12
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 11
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 claims description 11
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 claims description 11
- 101000697844 Arabidopsis thaliana Thiosulfate sulfurtransferase 16, chloroplastic Proteins 0.000 claims description 9
- 241001262105 Sargassum muticum Species 0.000 claims description 9
- 241000593522 Sargassum thunbergii Species 0.000 claims description 9
- 241001261506 Undaria pinnatifida Species 0.000 claims description 9
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 claims description 9
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims description 8
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 8
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 claims description 8
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 8
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims description 8
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 claims description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 6
- 230000010094 cellular senescence Effects 0.000 claims description 6
- 241000264279 Sargassum fusiforme Species 0.000 claims description 5
- 241000512259 Ascophyllum nodosum Species 0.000 claims description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 4
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 claims description 4
- 101000582950 Homo sapiens Platelet factor 4 Proteins 0.000 claims description 3
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 claims description 3
- 102100030304 Platelet factor 4 Human genes 0.000 claims description 3
- 108700012920 TNF Proteins 0.000 claims description 3
- 230000008439 repair process Effects 0.000 claims description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 claims description 2
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 claims description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 claims 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 claims 1
- 230000000979 retarding effect Effects 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 60
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 28
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 20
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 description 19
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L magnesium chloride Substances [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 18
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 18
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 18
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 14
- DBTMGCOVALSLOR-DEVYUCJPSA-N (2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](CO)O[C@H](O)[C@@H]2O)O)O[C@H](CO)[C@H]1O DBTMGCOVALSLOR-DEVYUCJPSA-N 0.000 description 13
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 229920001543 Laminarin Polymers 0.000 description 13
- 239000005717 Laminarin Substances 0.000 description 13
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 13
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 10
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 10
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 9
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 9
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 8
- 102100040250 Transcription elongation factor A protein-like 1 Human genes 0.000 description 7
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 7
- 229920000855 Fucoidan Polymers 0.000 description 6
- 102100024458 Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A Human genes 0.000 description 5
- 241000593520 Sargassum hemiphyllum Species 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 241000015177 Saccharina japonica Species 0.000 description 4
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 4
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 3
- 241001466453 Laminaria Species 0.000 description 3
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 3
- 241001475537 Sargassum integerrimum Species 0.000 description 3
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(4-bromopyrazol-1-yl)ethyl]isoindole-1,3-dione Chemical compound C1=C(Br)C=NN1CCN1C(=O)C2=CC=CC=C2C1=O WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 2
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 2
- 241000195480 Fucus Species 0.000 description 2
- 230000010190 G1 phase Effects 0.000 description 2
- 230000010337 G2 phase Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 101000733249 Homo sapiens Tumor suppressor ARF Proteins 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- -1 sal ammoniac polysaccharide Chemical class 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 description 1
- 229940123587 Cell cycle inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 1
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 102000013698 Cyclin-Dependent Kinase 6 Human genes 0.000 description 1
- 108010025468 Cyclin-Dependent Kinase 6 Proteins 0.000 description 1
- 102000003903 Cyclin-dependent kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000266 Cyclin-dependent kinases Proteins 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 230000037057 G1 phase arrest Effects 0.000 description 1
- 230000037060 G2 phase arrest Effects 0.000 description 1
- 108010093031 Galactosidases Proteins 0.000 description 1
- 102000002464 Galactosidases Human genes 0.000 description 1
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 206010018429 Glucose tolerance impaired Diseases 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 108010034791 Heterochromatin Proteins 0.000 description 1
- 102100039869 Histone H2B type F-S Human genes 0.000 description 1
- 101000858088 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 1
- 101001035372 Homo sapiens Histone H2B type F-S Proteins 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 208000001280 Prediabetic State Diseases 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 102000013530 TOR Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010065917 TOR Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 108010070626 acid beta-galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000025084 cell cycle arrest Effects 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 230000009087 cell motility Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 210000004458 heterochromatin Anatomy 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 230000016507 interphase Effects 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 201000009104 prediabetes syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 210000004129 prosencephalon Anatomy 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008943 replicative senescence Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 108091035539 telomere Proteins 0.000 description 1
- 210000003411 telomere Anatomy 0.000 description 1
- 102000055501 telomere Human genes 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229940126672 traditional medicines Drugs 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/737—Sulfated polysaccharides, e.g. chondroitin sulfate, dermatan sulfate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
本发明公开了一种褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用,用于解决现有抗衰老药物副作用大,效果一般的问题,其中褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用通过增强细胞活力,延缓细胞衰老,改善胰岛β细胞的衰老相关蛋白的表达,改善胰岛β细胞的功能的方式,达到抗衰老的目的。
Description
技术领域
本发明涉及药学领域,具体涉及一种褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用。
背景技术
进入21世纪后,人类面临人口老龄化的严峻挑战,许多国家(包括我国) 已经进入人口老龄化社会,≥60岁的老年人占总人口的10%以上。目前,我国老年人(包括一部分中年人)受到衰老的严重困扰,直接影响他们的健康状况和生活质量。如何完整地阐明衰老的发病机理,如何提高老年人的健康状况和生活质量,是当前研究者们需要着重解决的问题。近年来,随着科技的发展, 研究手段的不断提高,现代人们研究的焦点是这些中草药的西医抗衰老机制及药用潜力,正展现出巨大的诱人前景。
细胞衰老是指细胞在应激后导致的不可逆的永久性细胞周期停滞状态。细胞损伤本身并不直接导致明显的衰老迹象,而是当损伤累积和达到一定的限度,细胞停止增殖,导致肉眼可见的组织衰弱和生理上的衰老表型。一些衰老诱导因素(包括DNA损伤、致癌突变、活性代谢产物、高促***原和营养信号增加mTOR活动、蛋白毒性压力)可以单独或协同作用于细胞,通过p16INK4a/Rb、p53/p21通路或其他路径导致细胞衰老。这些可能导致普遍的基因表达变化和染色质重塑(异染色质的形成),这些是SASP、衰老相关生长停滞以及形态学变化的基础。
研究表明衰老和糖尿病是有关联的。糖尿病及糖尿病前期的患病率随着年龄显著增长,胰岛β细胞随着年龄增加增殖潜能显著下降,增加了糖尿病在老人中的患病比例,提示糖尿病是一种与年龄密切相关的疾病。随着年龄增长,胰岛β细胞分泌功能降低,细胞再生能力降低,会导致胰岛β细胞衰老积聚,从而导致葡萄糖耐量降低和糖尿病的发生。同时衰老也会导致的胰岛β细胞凋亡增加,进一步影响胰岛β细胞功能。胰岛β细胞的衰老不仅与年龄有关,还受到其他因素的影响,比如肥胖和糖脂代谢异常会使体内的衰老细胞数量增加,加速细胞衰老。当细胞发生衰老时,具有衰老表型的通用标志物,衰老相关的酸性β-半乳糖苷酶活性,p21Cis1, p16Ink4a在衰老细胞中表达增加,同时Ki67阳性细胞的比例明显降低,胰岛的代偿性增生受到抑制,衰老相关的分泌谱(SASP)分泌因子也是增加的。虽然胰岛β细胞衰老和糖尿病的关系非常明确,衰老胰岛细胞引起糖尿病的关注相对较少,制约了其药物开发的进程。
我国中药资源丰富,目前用于抗衰老的药物也很多,其中的中药多糖具有良好的抗衰老活性。相比于传统药物,多糖类药物本身并非药品,没有任何毒性,但确能带来多方面的药理活性,在人们越来越关注药物毒性的今天,多糖能够有效对抗化学药物治标不治本的多种慢性病。而海洋类多糖是来源于独特的海洋生态环境的生物,其合成的组分具有鲜明的海洋特色和独特的化学特征,并呈现独特药理活性,其安全性高、毒副作用小等,成为药物开发的新趋势。
海洋褐藻中的多糖种类繁多,结构复杂多样,仅硫酸多糖就包括三大类,一类是岩藻聚糖硫酸酯(也称为褐藻多糖硫酸酯),是由岩藻糖为组成单糖的硫酸多糖组分,另一类是由岩藻糖和半乳糖组成的硫酸多糖,即半乳岩藻聚糖硫酸酯,此外褐藻中还普遍存在一类富含糖醛酸的低硫酸化杂聚糖,其单糖组成比较复杂,包含甘露糖、葡萄糖醛酸、岩藻糖、半乳糖等多种单糖,在对褐藻中的硫酸多糖组分通过阴离子凝胶色谱进行分级纯化时,一般含葡萄糖醛酸的低硫酸化杂聚糖组分会被低浓度的电解质首先洗脱下来。由于化学特性差异较大,低硫酸化杂聚糖与岩藻聚糖硫酸酯生物活性差异很大。例如,Croci等报道了褐藻Laminaria saccharina中分离到两种硫酸多糖,一种属于低硫酸化杂聚糖,称为岩藻甘露葡萄糖醛酸聚糖 (Fucomannoglucuronans),另一种为岩藻聚糖,他们对两种不同多糖的活性比较研究后得出结论为,是岩藻聚糖而不是岩藻甘露葡萄糖醛酸聚糖决定了褐藻Laminaria saccharina中硫酸多糖的生物活性,包括抗凝血、抗肿瘤、抗炎等活性。(Fucans,but not fucomannoglucuronans,determine the biological activitiesofsulfated polysaccharides from Laminaria saccharina brown seaweed,PLoSONE2011,6(2):1-10)。前期我们发现低硫酸化杂聚糖在治疗帕金森病方面具有显著功效,在治疗和/或预防2型糖尿病方面也具有显著功效,本发明进一步发现了硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(结构与低硫酸化杂聚糖相似)在抗衰老中的显著作用。
发明内容
本发明目的在于克服现有技术的不足,根据多次细胞实验,阐明了褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖的新应用及其作用机制,并进行了试验验证。
本发明是通过以下技术方案实现的:
为实现上述目的,本发明提供一种褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用,其特征在于,所述褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖通过增强细胞活力,延缓细胞衰老,改善胰岛β细胞的衰老相关蛋白的表达,改善胰岛β细胞的功能的方式,达到抗衰老的目的。
优选的,上述增强细胞活力为增强β细胞系的活力。
优选的,上述延缓细胞衰老为修复细胞周期变化。
优选的,上述改善胰岛β细胞的衰老相关蛋白的表达为降低衰老相关蛋白p53、p21和p16的表达,同时缓解衰老相关分泌表型IL-1β, TNFa,CXCL4和CXCL10。
优选的,上述改善胰岛β细胞的功能为修复胰岛细胞胰岛素合成损伤。
优选的,上述的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖主要组成单糖包括葡萄糖醛酸、甘露糖、半乳糖和岩藻糖;其水解硫酸基含量为2%-12%,岩藻糖含量3%-10%,糖醛酸含量20-40%。
所述硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖具有如下结构特征:
(1)组成糖包括:甘露糖,葡萄糖醛酸,半乳糖,岩藻糖;
(2)甘露糖和葡糖糖醛酸以α(1→4)糖苷键连接;葡萄糖醛酸和甘露糖以β(1→2)糖苷键连接;
(3)葡萄糖醛酸和葡萄糖醛酸之间以β(1→3)糖苷键连接;
(4)半乳糖主要以β(1→6)糖苷键连接;
(5)岩藻糖以α(1→3)糖苷键连接,C2或C4位硫酸化;或以支链形式以α(1→3)糖苷键连接甘露糖;
(6)包含如下结构单元(Ⅰ),(Ⅱ),(Ⅲ),(IV)不同结构单元之间相互交替连接;
其中R1为H或硫酸基,R2为硫酸化岩藻糖残基。
优选的,上述的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖来源于海洋褐藻,海洋褐藻包括海带、裙带菜、半叶马尾藻、鼠尾藻、全缘马尾藻、羊栖菜、硇洲马尾藻、莫氏马尾藻、海黍子中的一种或多种。
优选的,上述的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖分子量为 1kD~1000kD。
优选的,上述应用方法为施用有效量的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖作为药物。
优选的,上述药物为药学上可接受载体或剂型。
本发明同时提供一种褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖的制备方法,制备方法如下:采用水提的方法提取海洋褐藻中的水溶性多糖;再经过低浓度酸降解和酒精醇沉获得稀酸稳定的水溶性多糖,最后再用高浓度酸降解和酒精醇沉获得强酸稳定的水溶性多糖。
与现有技术相比,本发明的有益效果在于:
(1)本发明具有显著抗衰老的作用,毒副作用小,安全有效,可以用于制备抗衰老药物。
(2)本发明经过研究后发现,褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老有非常好的治疗效果,目前还没有其他学院或机构在此方向上有所研究,本发明方案的技术进步性较大,有利于市场推广。
附图说明
图1为不同SFGG的SA-beta-gal染色
图2为细胞活力图;其中A为SFGG-SJ加入对MIN6细胞活力的影响;B为H2O2处理后,加入SFGG-SJ对细胞活力的影响。
图3为SFGG-SJ对H2O2造成的细胞周期变化图;其中S为: DNA合成期;G1为:DNA合成前期;G2为:DNA合成后期;
图4为SFGG-SJ处理后细胞衰老相关蛋白的表达;
图5为SFGG-SJ处理后衰老相关分泌表型的变化;
图6为SFGG-SJ处理后的衰老模型。
具体实施方式
下面结合实施例,更具体地说明本发明的内容。应当理解,本发明的实施并不局限于下面的实施例,对本发明所做的任何形式上的变通或改变都落入本发明保护范围;且下述实施例中的方法,如无特别说明,均为本领域的常规方法。
实施例1:海带来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SJ)的制备
(1)将1kg海带,用15倍质量的水在高压锅中提取3小时,控制温度100-105℃;提取1次。除去藻体,合并提取液,用硅藻土抽滤,滤液浓缩,加入2mol/L MgCl2使MgCl2终质量浓度为0.05 mol/L,同时加入无水乙醇,使乙醇终重量浓度为20%,搅拌生成沉淀,离心除去沉淀,用截留分子量为3500Da透析袋透析2 天,浓缩透析袋内溶液,冻干得海带多糖A,得率为1.5%。
(2)将海带多糖A溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.1mol/L,80度水浴中,搅拌 2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得海带多糖B,得率为53.5%。
(3)将海带多糖B溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.5mol/L,80度水浴中,搅拌降解2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得海带多糖C,得率为40.4%。
(4)取海带多糖C(0.5g)溶于4毫升0.2M碳酸氢铵,上样到以 Bio-Gel P-10为载体的柱层析,0.2M碳酸氢铵为流动相,收集洗脱组分,洗脱组分浓缩,上样到以Sephadex G10为载体的柱层析脱盐,洗脱液浓缩,冻干得海带来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SJ),得率为80.5%。对SFGG-SJ组分进行化学组分分析,单糖比例分析,硫酸根含量和分子量等分析,结果如下表1所示。
实施例2:海带来源的低分子量岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖 (DSFGG-SJ)的制备
(1)将海带多糖A溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入30mM抗坏血酸和30mM过氧化氢,常温反应2小时。将该反应液用截留分子量为3500Da的透析袋分别在自来水和蒸馏水透析,之后浓缩,冻干。得到低分子量海带多糖D。
(2)将低分子量海带多糖D溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.1mol/L,80度水浴中,搅拌2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得海带多糖E,得率为55.7%。
(3)将海带多糖E溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入 4mol/L盐酸使其终浓度为0.5mol/L,80度水浴中,搅拌降解2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得海带多糖F,得率为48.5%。
(4)取海带多糖F(0.5g)溶于4毫升0.2M碳酸氢铵,上样到以 Bio-Gel P-10为载体的柱层析,0.2M碳酸氢铵为流动相,收集洗脱组分,洗脱组分浓缩,上样到以Sephadex G10为载体的柱层析脱盐,洗脱液浓缩,冻干得海带来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(DSFGG-SJ),得率为85.3%。对DSFGG-SJ组分进行化学组分分析,单糖比例分析,硫酸根含量和分子量等分析,结果如下表1所示。
实施例3:半叶马尾藻来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SH) 的制备
(1)将1kg半叶马尾藻,用15倍质量的水在高压锅中提取3小时,控制温度100-105℃;提取1次。除去藻体,合并提取液,用硅藻土抽滤,滤液浓缩,加入2mol/L MgCl2使MgCl2终质量浓度为0.05mol/L,同时加入无水乙醇,使乙醇终重量浓度为20%,搅拌生成沉淀,离心除去沉淀,用截留分子量为3500Da透析袋透析2天,浓缩透析袋内溶液,冻干得半叶马尾藻多糖A,得率为4.6%。
(2)将半叶马尾藻多糖A溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.1mol/L,80度水浴中,搅拌2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得半叶马尾藻多糖B,得率为60.5%。
(3)将半叶马尾藻多糖B溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.5mol/L,80度水浴中,搅拌降解2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得半叶马尾藻多糖SFGG-SH,得率为43.3%。对SFGG-SJ组分进行化学组分分析,单糖比例分析,硫酸根含量和分子量等分析,结果如下表1所示。
实施例4:羊栖菜来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SF) 的制备
(1)将1kg羊栖菜,用15倍质量的水在高压锅中提取3小时,控制温度100-105℃;提取1次。除去藻体,合并提取液,用硅藻土抽滤,滤液浓缩,加入2mol/L MgCl2使MgCl2终质量浓度为0.05 mol/L,同时加入无水乙醇,使乙醇终重量浓度为20%,搅拌生成沉淀,离心除去沉淀,用截留分子量为3500Da透析袋透析2 天,浓缩透析袋内溶液,冻干得羊栖菜多糖A,得率为3.5%。
(2)将羊栖菜多糖A溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.1mol/L,80度水浴中,搅拌 2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得羊栖菜多糖B,得率为40.5%。
(3)将羊栖菜多糖B溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.5mol/L,80度水浴中,搅拌降解2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得半叶马尾藻多糖SFGG-SF,得率为 33.3%。对SFGG-SF组分进行化学组分分析,单糖比例分析,硫酸根含量和分子量等分析,结果如下表1所示。
实施例5:鼠尾藻来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-ST) 的制备
(1)将1kg鼠尾藻,用15倍质量的水在高压锅中提取3小时,控制温度100-105℃;提取1次。除去藻体,合并提取液,用硅藻土抽滤,滤液浓缩,加入2mol/L MgCl2使MgCl2终质量浓度为0.05 mol/L,同时加入无水乙醇,使乙醇终重量浓度为20%,搅拌生成沉淀,离心除去沉淀,用截留分子量为3500Da透析袋透析2 天,浓缩透析袋内溶液,冻干得鼠尾藻多糖A,得率为5.8%。
(2)将鼠尾藻多糖A溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.1mol/L,80度水浴中,搅拌 2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得鼠尾藻多糖B,得率为37.3%。
(3)将鼠尾藻多糖B溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.5mol/L,80度水浴中,搅拌降解2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得鼠尾藻多糖SFGG-ST,得率为31.2%。对SFGG-ST组分进行化学组分分析,单糖比例分析,硫酸根含量和分子量等分析,结果如下表1所示。
实施例6:裙带菜来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-UP) 的制备
(1)将1kg裙带菜,用15倍质量的水在高压锅中提取3小时,控制温度100-105℃;提取1次。除去藻体,合并提取液,用硅藻土抽滤,滤液浓缩,加入2mol/L MgCl2使MgCl2终质量浓度为0.05 mol/L,同时加入无水乙醇,使乙醇终重量浓度为20%,搅拌生成沉淀,离心除去沉淀,用截留分子量为3500Da透析袋透析2 天,浓缩透析袋内溶液,冻干得裙带菜多糖A,得率为2.5%。
(2)将裙带菜多糖A溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.1mol/L,80度水浴中,搅拌 2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得裙带菜多糖B,得率为38.2%。
(3)将裙带菜多糖B溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.5mol/L,80度水浴中,搅拌降解2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得裙带菜多糖SFGG-UP,得率为30.8%。对SFGG-UP组分进行化学组分分析,单糖比例分析,硫酸根含量和分子量等分析,结果如下表1所示。
实施例7:海黍子来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SHO) 的制备
(1)将1kg海黍子,用15倍质量的水在高压锅中提取3小时,控制温度100-105℃;提取1次。除去藻体,合并提取液,用硅藻土抽滤,滤液浓缩,加入2mol/L MgCl2使MgCl2终质量浓度为0.05 mol/L,同时加入无水乙醇,使乙醇终重量浓度为20%,搅拌生成沉淀,离心除去沉淀,用截留分子量为3500Da透析袋透析2 天,浓缩透析袋内溶液,冻干得海黍子多糖A,得率为1.8%。
(2)将海黍子多糖A溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.1mol/L,80度水浴中,搅拌 2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得海黍子多糖B,得率为43.2%。
(3)将海黍子多糖B溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.5mol/L,80度水浴中,搅拌降解2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得海黍子多糖SFGG-SHO,得率为35.2%。对SFGG-SHO组分进行化学组分分析,单糖比例分析,硫酸根含量和分子量等分析,结果如下表1所示。
实施例8:硇洲马尾藻来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SN) 的制备
(1)将1kg硇洲马尾藻,用15倍质量的水在高压锅中提取3小时,控制温度100-105℃;提取1次。除去藻体,合并提取液,用硅藻土抽滤,滤液浓缩,加入2mol/L MgCl2使MgCl2终质量浓度为0.05mol/L,同时加入无水乙醇,使乙醇终重量浓度为20%,搅拌生成沉淀,离心除去沉淀,用截留分子量为3500Da透析袋透析2天,浓缩透析袋内溶液,冻干得硇洲马尾藻多糖A,得率为5.5%。
(2)将硇洲马尾藻多糖A溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.1mol/L,80度水浴中,搅拌2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得硇洲马尾藻多糖B,得率为50.2%。
(3)将硇洲马尾藻多糖B溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.5mol/L,80度水浴中,搅拌降解2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得硇洲马尾藻多糖SFGG-SN,得率为41.3%。对SFGG-SN组分进行化学组分分析,单糖比例分析,硫酸根含量和分子量等分析,结果如下表1所示。
实施例9:全缘马尾藻来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SI) 的制备
(1)将1kg全缘马尾藻,用15倍质量的水在高压锅中提取3小时,控制温度100-105℃;提取1次。除去藻体,合并提取液,用硅藻土抽滤,滤液浓缩,加入2mol/L MgCl2使MgCl2终质量浓度为0.05mol/L,同时加入无水乙醇,使乙醇终重量浓度为20%,搅拌生成沉淀,离心除去沉淀,用截留分子量为3500Da透析袋透析2天,浓缩透析袋内溶液,冻干得全缘马尾藻多糖A,得率为4.2%。
(2)将全缘马尾藻多糖A溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.1mol/L,80度水浴中,搅拌2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得全缘马尾藻多糖B,得率为46.1%。
(3)将全缘马尾藻多糖B溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.5mol/L,80度水浴中,搅拌降解2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得全缘马尾藻多糖SFGG-SI,得率为39.8%。对SFGG-SI组分进行化学组分分析,单糖比例分析,硫酸根含量和分子量等分析,结果如下表1所示。
实施例10:莫氏马尾藻来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖 (SFGG-SM)的制备
(1)将1kg莫氏马尾藻,用15倍质量的水在高压锅中提取3小时,控制温度100-105℃;提取1次。除去藻体,合并提取液,用硅藻土抽滤,滤液浓缩,加入2mol/L MgCl2使MgCl2终质量浓度为0.05mol/L,同时加入无水乙醇,使乙醇终重量浓度为20%,搅拌生成沉淀,离心除去沉淀,用截留分子量为3500Da透析袋透析2天,浓缩透析袋内溶液,冻干得莫氏马尾藻多糖A,得率为5.2%。
(2)将莫氏马尾藻多糖A溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.1mol/L,80度水浴中,搅拌2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得莫氏马尾藻多糖B,得率为37.3%。
(3)将莫氏马尾藻多糖B溶于水配成浓度为1%(质量浓度)的溶液,加入4mol/L盐酸使其终浓度为0.5mol/L,80度水浴中,搅拌降解2小时,然后用氢氧化钠中和,浓缩,倒入等体积无水乙醇中。离心,红外烤干获得莫氏马尾藻多糖SFGG-SM,得率为35.2%。对SFGG-SM组分进行化学组分分析,单糖比例分析,硫酸根含量和分子量等分析,结果如下表1所示。
实施例11:褐藻来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG)对MIN6细胞活力的影响
MIN6是小鼠的胰岛β细胞系,胰岛素分泌功能好,是研究胰岛功能作用的常用细胞系。过氧化氢预处理胰岛β细胞MIN6后,加入实施例1-10中 100μg/ml SFGG进行药物处理24h,CCK8检测细胞活力。表2总结了实施例1-10中SFGG能改善过氧化氢导致的MIN6细胞活力降低。
表2不同SFGG处理后MIN6细胞活力
实施例12:褐藻来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG)延缓MIN6细胞衰老
用过氧化氢预处理MIN6细胞后,加入实施例1-10中100μg/ml浓度的 SFGG进行药物处理24h,如图1所示,衰老相关半乳糖苷酶SA-β-gal染色可以明显的看出SFGG能够明显减少衰老的细胞。
实施例13:海带来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SJ)增强MIN6 细胞活力
用过氧化氢预处理MIN6细胞后,加入实施例1中不同浓度的多糖进行药物处理24h,图2结果显示不同浓度的SFGG-SJ对细胞没有毒性作用;过氧化氢处理后,随着SFGG-SJ的浓度增大,可以改善MIN6细胞活力。
实施例14:海带来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SJ)延缓MIN6 细胞衰老
如图3所示,进一步对细胞周期的检测发现SFGG-SJ能够改善H2O2造成的细胞周期变化,细胞周期的间期分为三期、即DNA合成前期(G1期)、 DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期):
(1)G1期(first gap)从有丝***到DNA复制前的一段时期,又称合成前期,此期主要合成RNA和核糖体。该期特点是物质代谢活跃,迅速合成RNA和蛋白质,细胞体积显著增大。这一期的主要意义在于为下阶段S 期的DNA复制作好物质和能量的准备。
(2)S期(synthesis)即DNA合成期,在此期,除了合成DNA外,同时还要合成组蛋白。DNA复制所需要的酶都在这一时期合成。
(3)G2期(second gap)期为DNA合成后期,是有丝***的准备期。在这一时期,DNA合成终止,大量合成RNA及蛋白质,包括微管蛋白和促成熟因子等。
由图3的结果可知,加入SFGG-SJ后,可以改善H2O2引起的细胞周期变化,从而达到修复的作用。
实施例15:海带来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SJ)改善MIN6 细胞的衰老相关蛋白的表达
在正常人类细胞,p53或者p21基因失活可以延长细胞的复制性寿命,提示这条通路与细胞衰老有密切关系。p53介导了细胞对DNA损伤反应, p53既能介导由端粒缩短导致的复制性衰老,也能介导应激导致的早老,它的下游靶分子是p21。p21是cyclin依赖的蛋白激酶的抑制剂,能抑制细胞周期,使细胞进入不可逆性生长停滞。p21是广谱的细胞周期抑制剂,通过特异性抑制cyclinD1-CDK4/CDK6、cyclinE-CDK2、cyclinA-CDK2的蛋白激酶活性,既可导致G1期停滞也可以导致G2期停滞。
p16INK4a是一种非常重要的抑癌蛋白,可通过抑制癌细胞的***和诱导癌细胞的死亡而减少癌症的发生,因此它的缺失或异常将增加患癌症的概率. 最新的研究却发现,p16INK4a还有另外一个重要作用,通过诱发老龄哺乳动物干细胞功能下降而促使衰老的产生,至少在骨髓,前脑,胰岛细胞和角化细胞等类型细胞中被证实。利用实施案例1中的SFGG-SJ处理H2O2引起的衰老模型。衰老相关蛋白p53,p21,p16也随着浓度增大减少。综上可以说明SFGG-SJ 可以随着浓度的增大,延缓MIN6细胞的衰老。同时QPCR的结果也显示衰老相关的代谢表型也得到恢复。
如图4所示,Western blot检测细胞中衰老相关蛋白p53、p21和p16的表达,结果显示,SFGG-SJ处理能修复H2O2引起的衰老,衰老相关蛋白p53, p21,p16也随着浓度增大减少。
如图5所示,qPCR检测细胞中IL-1β,TNFa,CXCL4和CXCL10等衰老相关分泌表型,结果可知,所述衰老相关的代谢表型也得到恢复。
实施例16:海带来源的岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖(SFGG-SJ)改善MIN6 细胞的功能
利用实施案例1中的SFGG-SJ处理H2O2引起的衰老模型,随着SFGG-SJ 浓度的增大,细胞内的胰岛素的水平是增强的。所以SFGG-SJ可以逆转H2O2造成的胰岛细胞胰岛素合成损伤。
DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚):是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。
Insulin(胰岛素)是由胰脏内的胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。
Merge:上述两个荧光图合成。
如图6所示,随着SFGG-SJ浓度的增加(25→200),细胞内的胰岛素水平是显著增强的,而H2O2能引起胰岛素合成损伤,说明SFGG-SJ可以逆转/ 修复H2O2造成的胰岛细胞胰岛素合成损伤。
Claims (10)
1.一种褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用,其特征在于,所述褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖通过增强细胞活力,延缓细胞衰老,改善胰岛β细胞的衰老相关蛋白的表达,改善胰岛β细胞的功能的方式,达到抗衰老的目的。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述增强细胞活力为增强β细胞系的活力。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述延缓细胞衰老为修复细胞周期变化。
4.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述改善胰岛β细胞的衰老相关蛋白的表达为降低衰老相关蛋白p53、p21和p16的表达,同时缓解衰老相关分泌表型IL-1β,TNFa,CXCL4和CXCL10。
5.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述改善胰岛β细胞的功能为修复胰岛细胞胰岛素合成损伤。
6.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖具有如下特征:其主要组成单糖包括甘露糖、葡萄糖醛酸、岩藻糖和半乳糖,其水解硫酸基含量为2%-12%,岩藻糖含量3%-10%,糖醛酸含量20-40%。
所述硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖具有如下结构特征:
(1)组成糖包括:甘露糖,葡萄糖醛酸,半乳糖,岩藻糖;
(2)甘露糖和葡糖糖醛酸以α(1→4)糖苷键连接;葡萄糖醛酸和甘露糖以β(1→2)糖苷键连接;
(3)葡萄糖醛酸和葡萄糖醛酸之间以β(1→3)糖苷键连接;
(4)半乳糖主要以β(1→6)糖苷键连接;
(5)岩藻糖以α(1→3)糖苷键连接,C2或C4位硫酸化;或以支链形式以α(1→3)糖苷键连接甘露糖;
(6)包含如下结构单元(Ⅰ),(Ⅱ),(Ⅲ),(IV)不同结构单元之间相互交替连接;
其中R1为H或硫酸基,R2为硫酸化岩藻糖残基。
7.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖来源于海洋褐藻,海洋褐藻包括海带、裙带菜、半叶马尾藻、鼠尾藻、全缘马尾藻、羊栖菜、硇洲马尾藻、莫氏马尾藻、海黍子中的一种或多种。
8.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖分子量为1kD~1000kD。
9.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述应用方法为施用有效量的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖作为药物,所述药物为药学上可接受载体或剂型。
10.一种褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖的制备方法,其特征在于,制备方法如下:采用水提的方法提取海洋褐藻中的水溶性多糖;再经过低浓度酸降解和酒精醇沉获得稀酸稳定的水溶性多糖,最后再用高浓度酸降解和酒精醇沉获得强酸稳定的水溶性多糖。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111382619.XA CN113975289A (zh) | 2021-11-19 | 2021-11-19 | 褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111382619.XA CN113975289A (zh) | 2021-11-19 | 2021-11-19 | 褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113975289A true CN113975289A (zh) | 2022-01-28 |
Family
ID=79749672
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202111382619.XA Pending CN113975289A (zh) | 2021-11-19 | 2021-11-19 | 褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN113975289A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115417934A (zh) * | 2022-09-02 | 2022-12-02 | 威海迪普森生物科技有限公司 | 一种高含量岩藻低聚糖海带提取物的制备方法 |
CN115844928A (zh) * | 2022-12-16 | 2023-03-28 | 中国科学院上海药物研究所 | 海藻硫酸多糖及其制备方法和用途 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103539863A (zh) * | 2012-07-12 | 2014-01-29 | 中国科学院海洋研究所 | 褐藻来源的富含葡萄糖醛酸的低硫酸化杂聚糖在制备治疗帕金森病药物和保健品中的应用 |
-
2021
- 2021-11-19 CN CN202111382619.XA patent/CN113975289A/zh active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103539863A (zh) * | 2012-07-12 | 2014-01-29 | 中国科学院海洋研究所 | 褐藻来源的富含葡萄糖醛酸的低硫酸化杂聚糖在制备治疗帕金森病药物和保健品中的应用 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JIANDONG WU等: "Structural Study of Sulfated Fuco-Oligosaccharide Branched Glucuronomannan from Kjellmaniella crassifolia by ESI-CID-MS/MS", 《JOURNAL OF CARBOHYDRATE CHEMISTRY》 * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115417934A (zh) * | 2022-09-02 | 2022-12-02 | 威海迪普森生物科技有限公司 | 一种高含量岩藻低聚糖海带提取物的制备方法 |
CN115417934B (zh) * | 2022-09-02 | 2023-09-26 | 威海迪普森生物科技有限公司 | 一种高含量岩藻低聚糖海带提取物的制备方法 |
CN115844928A (zh) * | 2022-12-16 | 2023-03-28 | 中国科学院上海药物研究所 | 海藻硫酸多糖及其制备方法和用途 |
CN115844928B (zh) * | 2022-12-16 | 2024-03-01 | 中国科学院上海药物研究所 | 海藻硫酸多糖及其制备方法和用途 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN113975289A (zh) | 褐藻来源的硫酸化岩藻半乳甘露葡萄糖醛酸多糖在抗衰老的应用 | |
Jing-Wen et al. | A polysaccharide purified from Radix Adenophorae promotes cell activation and pro-inflammatory cytokine production in murine RAW264. 7 macrophages | |
CN106084087A (zh) | 一种瓜蒌多糖的制备方法 | |
Xie et al. | Physicochemical characterization and hypoglycemic potential of a novel polysaccharide from Polygonatum sibiricum Red through PI3K/Akt mediated signaling pathway | |
CN102432620A (zh) | 一种白藜芦醇四聚体化合物及其制备方法和应用 | |
CN103099832B (zh) | 假丝酵母对三七的生物转化方法 | |
CN108164614A (zh) | 一种具有免疫调节作用的大石花菜多糖的制备方法及结构部分表征及其应用 | |
CN1965894B (zh) | 一种具免疫活性的夏枯草多糖组合物及其制备方法和应用 | |
CN112321737B (zh) | 平菇多糖硒苷-ⅱ及其制备和在制备特异性杀伤非小肺腺癌的药物中的应用 | |
CN110218262B (zh) | 褐藻来源的富含葡萄糖醛酸的低硫酸化杂聚糖在制备治疗2型糖尿病药物中的应用 | |
CN112274529A (zh) | 一种平菇多糖硒苷-ⅲ抗癌活性成分在用于制备抗胃癌的药物中的应用 | |
CN115894735B (zh) | 一种老鹰茶酸性多糖及其提取纯化方法和抗癌应用 | |
CN116240256A (zh) | 一种人参糖肽及其制备工艺 | |
CN1190098A (zh) | 人参分组皂甙的制备方法,其药物组合物及应用 | |
CN114933663B (zh) | 民族药双参低分子量水溶性提取物、均一多糖、寡糖、总多糖及其制备方法和应用 | |
CN115010823B (zh) | 一种调节肠道菌群的车前子多糖及其制备方法与应用 | |
CN113480674B (zh) | 一种黑茶多糖-ⅰ活性成分及其制备方法和在抗癌中应用 | |
CN105777854A (zh) | 硫酸依替米星的药物组合物及其在生物医药中的应用 | |
CN115844928A (zh) | 海藻硫酸多糖及其制备方法和用途 | |
CN112237588B (zh) | 一种平菇多糖硒苷-ⅲ抗癌活性成分在制备抗***癌的药物中的应用 | |
CN102716162A (zh) | 一种人参二醇组皂苷的制备技术及方法 | |
CN113248630A (zh) | 一种岩藻多糖组合物、其制备方法和用途 | |
CN107213176B (zh) | 一种八仙花叶提取物及其药物组合物、制备方法和应用 | |
CN101486755A (zh) | 守宫糖肽及制备方法和其医药应用 | |
CN117247472B (zh) | 一种褐藻多糖及其制备方法与应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20220128 |
|
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |