CN113908111A - 一种含脐带干细胞外泌体的眼膜贴及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种含脐带干细胞外泌体的眼膜贴及其制备方法，该眼膜贴的精华液包含以下质量份的组分：外泌体脂质体0.05‑0.1％、卡波姆0.05‑0.15％、抗菌剂0.5‑1.5％、酵母提取物0.5‑1.5％、透明质酸0.5‑1％、乙二胺四乙酸二钠0.1‑0.3％、丁香提取物0.1‑1.0％、胶原蛋白0.5‑1.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷或鲸蜡硬脂醇2‑3％、小麦芽胚油3‑4％、聚二甲基硅氧烷2‑3％、辛酸三酸甘油酯或癸酸三酸甘油酯2‑3％、角鲨烷3‑5％、生育酚0.1‑1.0％、霍霍巴油1‑3％、海藻糖1‑3％、丙二醇2‑3％、甘油5‑7％，其余为无菌水。该眼膜贴可解决眼部皮肤的干燥、皱纹、眼袋、黑眼圈等问题。

Description

一种含脐带干细胞外泌体的眼膜贴及其制备方法
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种含脐带干细胞外泌体的眼膜贴及其制备方法。
背景技术
眼部皮肤厚度仅有0.25-0.55mm，缺少皮脂腺和汗腺，所以油脂分泌少，缺乏自身的滋润能力，容易干燥；同时眼部皮肤缺少弹性蛋白和胶原蛋白的支撑，更容易出现细纹、皱纹等现象，加上每天人类会进行上万次的眨眼，一连串的眼部肌肉动作带动眼部皮肤的拉扯，多重原因的叠加造成“脸老眼先衰”的现象，眼部皮肤更容易衰老。但是由于眼部皮肤的敏感脆弱，很多面部使用的产品不适用于眼部。
眼膜是一种吸附精华液并覆盖在眼部的眼膜布，精华液中保湿剂、封闭剂可为眼部皮肤补水、防止水分蒸发，使角质层充水柔软，方便眼膜中功效成分进入皮肤，从而改善眼部皮肤。脐带干细胞培养上清中含有大量细胞活性物质，可以促进细胞活化，加速皮肤修护，提升细胞自我更新能力。两者结合使用的眼贴膜可以保证脐带干细胞提取物中功效成分进入肌肤深层。而现有市场上添加脐带干细胞提取物的眼膜贴还比较空白。
发明内容
针对上述现有技术，本发明提供一种含脐带干细胞外泌体的眼膜贴及其制备方法，以填补市场上添加脐带干细胞提取物的眼膜贴空白，将能激发皮肤自我更新的细胞因子与眼贴膜结合，内外兼顾修复眼部皮肤。
为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：提供一种含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，该眼膜贴包括眼膜布和浸润于所述眼膜布上的精华液；所述精华液以总质量100份计，包含以下质量份的组分：外泌体脂质体0.05-0.1％、卡波姆0.05-0.15％、抗菌剂0.5-1.5％、酵母提取物0.5-1.5％、透明质酸0.5-1％、乙二胺四乙酸二钠0.1-0.3％、丁香提取物0.1-1.0％、胶原蛋白0.5-1.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷或鲸蜡硬脂醇2-3％、小麦芽胚油3-4％、聚二甲基硅氧烷2-3％、辛酸三酸甘油酯或癸酸三酸甘油酯2-3％、角鲨烷3-5％、生育酚0.1-1.0％、霍霍巴油1-3％、海藻糖1-3％、丙二醇2-3％、甘油5-7％，其余为无菌水。
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
进一步，精华液以总质量100份计，包含以下质量份的组分：外泌体脂质体0.05-0.1份、卡波姆0.05-0.15份、抗菌剂0.5-1.5份、酵母提取物0.5-1.5份、透明质酸0.5-1份、乙二胺四乙酸二钠0.1-0.3份、丁香提取物0.1-1.0份、胶原蛋白0.5-1.5份、鲸蜡硬脂基葡糖苷或鲸蜡硬脂醇2-3份、小麦芽胚油3-4份、聚二甲基硅氧烷2-3份、辛酸三酸甘油酯或癸酸三酸甘油酯2-3份、角鲨烷3-5份、生育酚0.1-1.0份、霍霍巴油1-3份、海藻糖1-3份、丙二醇2-3份、甘油5-7份，其余为无菌水。
进一步，无菌水替换为玫瑰纯露。
进一步，外泌体脂质体由以下步骤制得：将磷脂和胆固醇按液料比4～6mL:1～2g混合后，溶解于***中，其后蒸发以去除***，至混合溶液在容器底部形成均匀薄膜层后停止；再向容器中加入脐带干细胞外泌体重悬液，震荡至薄膜均匀包裹脐带干细胞外泌体重悬液即可。
进一步，脐带干细胞外泌体重悬液由以下步骤制得：
(1)新鲜脐带用含青霉素或链霉素的生理盐水浸洗，排除残余血渍后，剔除脐带中的血管，然后剥离脐带中的华通氏胶，再将其剪碎成碎片；
(2)将所得碎片接种于含DMEM培养基的培养瓶中培养，当细胞融合达到70-80％时进行细胞传代；
(3)收集传代至第3-5代时的培养液上清，转移上清离心去除活细胞后，再次离心去除死细胞；
(4)取离心后的上清过滤，收集滤液；
(5)滤液超速离心去掉上清，再用PBS重悬，然后再次超速离心去掉上清，所得滤液用PBS重悬，即得。
进一步，步骤(5)中超速离心条件为4℃、100000xg下离心70min。
进一步，酵母提取物经过以下步骤制得：酵母经破壁处理后进行抽提，再经生物酶解，即得。
进一步，丁香提取物经过以下步骤制得：丁香粉与色拉油按料液比1g:1～3mL混合后，浸提5～6天，过滤，即得。
本发明还提供了上述含脐带干细胞外泌体的眼膜贴的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鲸蜡硬脂基葡糖苷或鲸蜡硬脂醇、小麦芽胚油、聚二甲基硅氧烷、辛酸三酸甘油酯或癸酸三酸甘油酯、角鲨烷、生育酚和霍霍巴油混合，得B相液体；
(2)将海藻糖、丙二醇、甘油和无菌水混合后，搅拌均匀，得A相液体；
(3)将B相液体加热至70-80℃，并加入A相液体中，进行均质乳化；
(4)当(3)中所得液体温度降至40-45℃时，加入卡波姆、抗菌剂、酵母提取物、透明质酸、乙二胺四乙酸二钠、丁香提取物和胶原蛋白，搅拌混合均匀；
(5)当(4)中所得液体温度降至20-25℃时，加入外泌体脂质体，搅拌混合均匀，得眼贴膜精华液；
(6)将眼膜布浸泡在眼贴膜精华液中封装即可。
本发明的有益效果是：干细胞培养上清中的外泌体富含多种信号蛋白细胞因子，这些信号蛋白和细胞因子能激活皮肤细胞的自我修护和更新能力，如细胞信号蛋白Wnt4/Wnt11能促进皮肤相关的成纤维细胞、角质化细胞再生，同时分泌胶原蛋白、弹性纤维蛋白和基质成分达到修复皮肤功能；表皮细胞生长因子，能向表皮细胞发出增殖信号，促进细胞的新陈代谢。脂质体拥有和细胞结构类似的磷脂双分子层结构，采用脂质体包裹外泌体可以有效保护外泌体的活性。
本发明将外泌体脂质体与其他组分配合使用，内外兼顾，如保湿剂中吸水剂类的甘油、丙二醇，仿生剂类的海藻糖、透明质酸，油脂封闭剂类的聚二甲基硅氧烷、辛酸/癸酸甘油三酯、角鲨烷、霍霍巴油，多种组分配合使用，既可以吸收环境中水分、结合皮肤中的水分，又可以成膜防止水分蒸发，三重保湿提升保湿效果。本发明中还添加了自由基清除剂生育酚和丁香提取物，保护皮肤免受自由基的侵害。本发明采用生物纤维面膜纸具超强的亲肤性，拥有能够贴入皱纹与皮丘深处的包覆能力，且紧贴皮肤不易脱落，提升眼贴膜的吸收性。本发明着重于眼部皮肤的特点，将能激发皮肤自我更新的细胞因子与眼贴膜结合，内外兼顾修复眼部皮肤的干燥、皱纹、眼袋、黑眼圈等问题。本发明眼膜为乳液型眼膜贴，添加亲脂成分，比起水剂型眼膜贴跟滋润，养护效果更好。
附图说明
图1为使用实施例1中眼贴膜一个月后的前后对比图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
实施例1
一种含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，包括眼膜布和浸润于眼膜布上的精华液；眼膜布采用生物纤维面膜纸；精华液以总质量100份计，包含以下质量份的组分：外泌体脂质体0.1份、卡波姆0.1份、抗菌剂1.0份、酵母提取物1.0份、透明质酸1.0份、乙二胺四乙酸二钠0.2份、丁香提取物0.5份、胶原蛋白1.0份、鲸蜡硬脂基葡糖苷2.5份、小麦芽胚油3.5份、聚二甲基硅氧烷2.5份、辛酸三酸甘油酯2.5份、角鲨烷4份、生育酚0.5份、霍霍巴油2份、海藻糖2份、丙二醇2.5份、甘油6份，其余为无菌水。
其中，外泌体脂质体由以下步骤制得：将磷脂和胆固醇按液料比4:1混合后，溶解于***中，其后蒸发以去除***，至混合溶液在容器底部形成均匀薄膜层后停止；再向容器中加入脐带干细胞外泌体重悬液，震荡至薄膜均匀包裹脐带干细胞外泌体重悬液，即得；其中，脐带干细胞外泌体重悬液由以下步骤制得：
(1)新鲜脐带用含青霉素的生理盐水浸洗，排除残余血渍后，剔除脐带中的血管，然后剥离脐带中的华通氏胶，再将其剪碎成1mm3大小的碎片；
(2)将所得碎片接种于含DMEM培养基的培养瓶中于37℃、5％CO2的饱和湿度下培养，当细胞融合达到75％时按1:2进行细胞传代；
(3)收集传代至第4代时的培养液上清，转移上清于离心管中在4℃、300xg下离心10min去除活细胞后，再次在4℃、2000xg下离心10min去除死细胞；
(4)取离心后的上清用0.22μm的过滤器过滤，收集滤液；
(5)滤液于离心管中在4℃、100000xg下离心70min去掉上清，再用PBS重悬，然后再次于离心管中在4℃、100000xg下离心70min去掉上清，所得滤液用PBS重悬收集，即得。
其中，酵母提取物经过以下步骤制得：酵母于破壁机中破壁处理10min后进行抽提，再经生物酶酶解，即得。
其中，丁香提取物经过以下步骤制得：丁香粉与色拉油按料液比1g:1mL混合后，浸提5天，再用70目滤布过滤，即得。
本实施例中含脐带干细胞外泌体的眼膜贴经过以下步骤制得：
(1)将鲸蜡硬脂基葡糖苷、小麦芽胚油、聚二甲基硅氧烷、辛酸三酸甘油酯、角鲨烷、生育酚和霍霍巴油混合后，得B相液体；
(2)将海藻糖、丙二醇、甘油和无菌水混合后，搅拌均匀，得A相液体；
(3)将B相液体加热至75℃后缓慢加入A相液体中，并进行均质乳化；
(4)当(3)中所得液体温度降至42℃时，加入卡波姆、抗菌剂、酵母提取物、透明质酸、乙二胺四乙酸二钠、丁香提取物和胶原蛋白，搅拌混合均匀；
(5)当(4)中所得液体温度降至23℃时，加入外泌体脂质体，搅拌混合均匀，得眼贴膜精华液；
(6)将眼膜布浸泡在眼贴膜精华液中封装，即得。
实施例2
一种含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，分为眼膜布和精华液两部分；眼膜布采用生物纤维面膜纸；精华液以总质量100份计，包含以下质量份的组分：外泌体脂质体0.05份、卡波姆0.15份、抗菌剂0.5份、酵母提取物1.5份、透明质酸0.5份、乙二胺四乙酸二钠0.1份、丁香提取物1.0份、胶原蛋白1.5份、鲸蜡硬脂醇2份、小麦芽胚油4份、聚二甲基硅氧烷3份、癸酸三酸甘油酯2份、角鲨烷3份、生育酚0.1份、霍霍巴油1份、海藻糖3份、丙二醇2份、甘油7份、其余为玫瑰纯露。
其中，外泌体脂质体由以下步骤制得：将磷脂和胆固醇按液料比5:1混合后，溶解于***中，其后蒸发以去除***，至混合溶液在容器底部形成均匀薄膜层后停止；再向容器中加入脐带干细胞外泌体重悬液，震荡至薄膜均匀包裹脐带干细胞外泌体重悬液即可；
其中，脐带干细胞外泌体重悬液由以下步骤制得：
(1)新鲜脐带用含链霉素的生理盐水浸洗，排除残余血渍后，剔除脐带中的血管，然后剥离脐带中的华通氏胶，再将其剪碎成1mm3大小的碎片；
(2)将所得碎片接种于含DMEM培养基的培养瓶中于37℃、5％CO2的饱和湿度下培养，当细胞融合达到70％时按1:2进行细胞传代；
(3)收集传代至第3代时的培养液上清，转移上清于离心管中在4℃、300xg下离心10min去除活细胞后，再次在4℃、2000xg下离心10min去除死细胞；
(4)取离心后的上清用0.22μm的过滤器过滤，收集滤液；
(5)滤液于离心管中在4℃、100000xg下离心70min去掉上清，再用PBS重悬，然后再次于离心管中在4℃、100000xg下离心70min去掉上清，所得滤液用PBS重悬收集即可。
其中，酵母提取物经过以下步骤制得：酵母于破壁机中破壁处理15min后进行抽提，再经生物酶酶解，即得。
其中，丁香提取物经过以下步骤制得：丁香粉与色拉油按料液比1g：2mL混合后，浸提6天，再用80目滤布过滤，即得。
上述含脐带干细胞外泌体的眼膜贴的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鲸蜡硬脂醇、小麦芽胚油、聚二甲基硅氧烷、癸酸三酸甘油酯、角鲨烷、生育酚和霍霍巴油混合后，得B相液体；
(2)将海藻糖、丙二醇、甘油和玫瑰纯露混合后，搅拌均匀，得A相液体；
(3)将B相液体加热至70℃后缓慢加入A相液体中，并进行均质乳化；
(4)当(3)中所得液体温度降至40℃时，加入卡波姆、抗菌剂、酵母提取物、透明质酸、乙二胺四乙酸二钠、丁香提取物和胶原蛋白，搅拌混合均匀；
(5)当(4)中所得液体温度降至20℃时，加入外泌体脂质体，搅拌混合均匀，得眼贴膜精华液；
(6)将眼膜布浸泡在眼贴膜精华液中封装，即得。
实施例3
一种含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，分为眼膜布和精华液两部分；眼膜布采用生物纤维面膜纸；精华液以总质量100份计，包含以下质量份的组分：外泌体脂质体0.75份、卡波姆0.05份、抗菌剂1.5份、酵母提取物0.5份、透明质酸0.75份、乙二胺四乙酸二钠0.3份、丁香提取物0.1份、胶原蛋白0.5份、鲸蜡硬脂醇3份、小麦芽胚油3份、聚二甲基硅氧烷2份、癸酸三酸甘油酯3份、角鲨烷5份、生育酚1.1份、霍霍巴油3份、海藻糖1份、丙二醇3份、甘油5份、其余为无菌水。
其中，外泌体脂质体由以下步骤制得：将磷脂和胆固醇按液料比6:2混合后，溶解于***中，其后蒸发以去除***，至混合溶液在容器底部形成均匀薄膜层后停止；再向容器中加入脐带干细胞外泌体重悬液，震荡至薄膜均匀包裹脐带干细胞外泌体重悬液，即得；其中，脐带干细胞外泌体重悬液由以下步骤制得：
(1)新鲜脐带用含链霉素的生理盐水浸洗，排除残余血渍后，剔除脐带中的血管，然后剥离脐带中的华通氏胶，再将其剪碎成1mm3大小的碎片；
(2)将所得碎片接种于含DMEM培养基的培养瓶中于37℃、5％CO2的饱和湿度下培养，当细胞融合达到80％时按1:2进行细胞传代；
(3)收集传代至第5代时的培养液上清，转移上清于离心管中在4℃、300xg下离心10min去除活细胞后，再次在4℃、2000xg下离心10min去除死细胞；
(4)取离心后的上清用0.22μm的过滤器过滤，收集滤液；
(5)滤液于离心管中在4℃、100000xg下离心70min去掉上清，再用PBS重悬，然后再次于离心管中在4℃、100000xg下离心70min去掉上清，所得滤液用PBS重悬收集，即得。
其中，酵母提取物经过以下步骤制得：酵母于破壁机中破壁处理20min后进行抽提，再经生物酶酶解，即得。
其中，丁香提取物经过以下步骤制得：丁香粉与色拉油按料液比1g:3mL混合后，浸提5.5天，再用60目滤布过滤，即得。
上述含脐带干细胞外泌体的眼膜贴的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鲸蜡硬脂醇、小麦芽胚油、聚二甲基硅氧烷、癸酸三酸甘油酯、角鲨烷、生育酚和霍霍巴油混合后，得B相液体；
(2)将海藻糖、丙二醇、甘油和无菌水混合后，搅拌均匀，得A相液体；
(3)将B相液体加热至80℃后缓慢加入A相液体中，并进行均质乳化；
(4)当(3)中所得液体温度降至45℃时，加入卡波姆、抗菌剂、酵母提取物、透明质酸、乙二胺四乙酸二钠、丁香提取物和胶原蛋白，搅拌混合均匀；
(5)当(4)中所得液体温度降至25℃时，加入外泌体脂质体，搅拌混合均匀，得眼贴膜精华液；
(6)将眼膜布浸泡在眼贴膜精华液中封装，即得。
对比例
一种眼膜贴，包括眼膜布和浸润于眼膜布上的精华液；眼膜布采用生物纤维面膜纸；精华液以总质量100份计，包含以下质量份的组分：卡波姆0.1份、抗菌剂1.0份、酵母提取物1.0份、透明质酸1.0份、乙二胺四乙酸二钠0.2份、丁香提取物0.5份、胶原蛋白1.0份、鲸蜡硬脂基葡糖苷2.5份、小麦芽胚油3.5份、聚二甲基硅氧烷2.5份、辛酸三酸甘油酯2.5份、角鲨烷4份、生育酚0.5份、霍霍巴油2份、海藻糖2份、丙二醇2.5份、甘油6份，其余为无菌水。
其中，酵母提取物经过以下步骤制得：酵母于破壁机中破壁处理10min后进行抽提，再经生物酶酶解，即得。
其中，丁香提取物经过以下步骤制得：丁香粉与色拉油按料液比1g:1mL混合后，浸提5天，再用70目滤布过滤，即得。
本实施例中的眼膜贴经过以下步骤制得：
(1)将鲸蜡硬脂基葡糖苷、小麦芽胚油、聚二甲基硅氧烷、辛酸三酸甘油酯、角鲨烷、生育酚和霍霍巴油混合后，得B相液体；
(2)将海藻糖、丙二醇、甘油和无菌水混合后，搅拌均匀，得A相液体；
(3)将B相液体加热至75℃后缓慢加入A相液体中，并进行均质乳化；
(4)当(3)中所得液体温度降至42℃时，加入卡波姆、抗菌剂、酵母提取物、透明质酸、乙二胺四乙酸二钠、丁香提取物和胶原蛋白，搅拌混合均匀，得眼贴膜精华液；
(6)将眼膜布浸泡在眼贴膜精华液中封装，即得。
实验例
实验方法：实验者分别使用实施例1和对比例中眼贴膜各1个月。
使用实施例1和对比例中眼贴膜后的体验问卷结果如下：
Figure BDA0003297564100000101
Figure BDA0003297564100000111
图1为使用实施例1中眼贴膜一个月后的前后对比图，使用频率为3天一次。
虽然结合实施例对本发明的具体实施方式进行了详细地描述，但不应理解为对本专利的保护范围的限定。在权利要求书所描述的范围内，本领域技术人员不经创造性劳动即可作出的各种修改和变形仍属本专利的保护范围。

Claims (9)

1.一种含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，其特征在于，所述眼膜贴包括眼膜布和浸润于所述眼膜布上的精华液；所述精华液以总质量100份计，包含以下质量份的组分：外泌体脂质体0.05-0.1％、卡波姆0.05-0.15％、抗菌剂0.5-1.5％、酵母提取物0.5-1.5％、透明质酸0.5-1％、乙二胺四乙酸二钠0.1-0.3％、丁香提取物0.1-1.0％、胶原蛋白0.5-1.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷或鲸蜡硬脂醇2-3％、小麦芽胚油3-4％、聚二甲基硅氧烷2-3％、辛酸三酸甘油酯或癸酸三酸甘油酯2-3％、角鲨烷3-5％、生育酚0.1-1.0％、霍霍巴油1-3％、海藻糖1-3％、丙二醇2-3％、甘油5-7％，其余为无菌水。
2.根据权利要求1所述的含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，其特征在于，所述精华液以总质量100份计，包含以下质量份的组分：外泌体脂质体0.05-0.1份、卡波姆0.05-0.15份、抗菌剂0.5-1.5份、酵母提取物0.5-1.5份、透明质酸0.5-1份、乙二胺四乙酸二钠0.1-0.3份、丁香提取物0.1-1.0份、胶原蛋白0.5-1.5份、鲸蜡硬脂基葡糖苷或鲸蜡硬脂醇2-3份、小麦芽胚油3-4份、聚二甲基硅氧烷2-3份、辛酸三酸甘油酯或癸酸三酸甘油酯2-3份、角鲨烷3-5份、生育酚0.1-1.0份、霍霍巴油1-3份、海藻糖1-3份、丙二醇2-3份、甘油5-7份，其余为无菌水。
3.根据权利要求1或2所述的含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，其特征在于：所述无菌水替换为玫瑰纯露。
4.根据权利要求1或2所述的含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，其特征在于，所述外泌体脂质体由以下步骤制得：将磷脂和胆固醇按液料比4～6mL:1～2g混合后，溶解于***中，其后蒸发以去除***，至混合溶液在容器底部形成均匀薄膜层后停止；再向容器中加入脐带干细胞外泌体重悬液，震荡至薄膜均匀包裹脐带干细胞外泌体重悬液即可。
5.根据权利要求4所述的含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，其特征在于，所述脐带干细胞外泌体重悬液由以下步骤制得：
(1)新鲜脐带用含青霉素或链霉素的生理盐水浸洗，排除残余血渍后，剔除脐带中的血管，然后剥离脐带中的华通氏胶，再将其剪碎成碎片；
(2)将所得碎片接种于含DMEM培养基的培养瓶中培养，当细胞融合达到70-80％时进行细胞传代；
(3)收集传代至第3-5代时的培养液上清，转移上清离心去除活细胞后，再次离心去除死细胞；
(4)取离心后的上清过滤，收集滤液；
(5)滤液超速离心去掉上清，再用PBS重悬，然后再次超速离心去掉上清，所得滤液用PBS重悬，即得。
6.根据权利要求5述的含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，其特征在于：所述步骤(5)中超速离心条件为4℃、100000xg下离心70min。
7.根据区权利要求1或2所述的含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，其特征在于，所述酵母提取物经过以下步骤制得：酵母经破壁处理后进行抽提，再经生物酶解，即得。
8.根据区权利要求1或2所述的含脐带干细胞外泌体的眼膜贴，其特征在于，所述丁香提取物经过以下步骤制得：丁香粉与色拉油按料液比1g:1～3mL混合后，浸提5～6天，过滤，即得。
9.根据权利要求1～8所述的含脐带干细胞外泌体的眼膜贴的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将鲸蜡硬脂基葡糖苷或鲸蜡硬脂醇、小麦芽胚油、聚二甲基硅氧烷、辛酸三酸甘油酯或癸酸三酸甘油酯、角鲨烷、生育酚和霍霍巴油混合，得B相液体；
(2)将海藻糖、丙二醇、甘油和无菌水混合后，搅拌均匀，得A相液体；
(3)将B相液体加热至70-80℃，并加入A相液体中，进行均质乳化；
(4)当(3)中所得液体温度降至40-45℃时，加入卡波姆、抗菌剂、酵母提取物、透明质酸、乙二胺四乙酸二钠、丁香提取物和胶原蛋白，搅拌混合均匀；
(5)当(4)中所得液体温度降至20-25℃时，加入外泌体脂质体，搅拌混合均匀，得眼贴膜精华液；
(6)将眼膜布浸泡在眼贴膜精华液中封装即可。
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