CN113683657A - 齐墩果烷型三萜皂苷及其制备方法与用途 - Google Patents

齐墩果烷型三萜皂苷及其制备方法与用途 Download PDF

Info

Publication number
CN113683657A
CN113683657A CN202111139210.5A CN202111139210A CN113683657A CN 113683657 A CN113683657 A CN 113683657A CN 202111139210 A CN202111139210 A CN 202111139210A CN 113683657 A CN113683657 A CN 113683657A
Authority
CN
China
Prior art keywords
glc
rha
xyl
ara
compound
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202111139210.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113683657B (zh
Inventor
高慧敏
王智民
陈两绵
孙玉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Materia Medica of CAMS
Original Assignee
Institute of Materia Medica of CAMS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Materia Medica of CAMS filed Critical Institute of Materia Medica of CAMS
Priority to CN202111139210.5A priority Critical patent/CN113683657B/zh
Publication of CN113683657A publication Critical patent/CN113683657A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113683657B publication Critical patent/CN113683657B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J63/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by expansion of only one ring by one or two atoms
    • C07J63/008—Expansion of ring D by one atom, e.g. D homo steroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一种下式I的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物或其药学上可接受的盐、酯、外消旋体、R‑异构体、S‑异构体、同位素标记物、溶剂化物、代谢产物或前药，其制备工艺简单、重现性好、纯度高，具有较好的抗炎活性。
Figure DDA0003279545470000011

Description

齐墩果烷型三萜皂苷及其制备方法与用途
技术领域
本发明涉及中药化学领域，涉及齐墩果烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法，本发明还涉及齐墩果烷型三萜皂苷类化合物在治疗炎性疾病、病症和/或损伤方面的用途。
背景技术
炎症反应是在身体受到感染因子侵袭、抗原攻击或者物理、化学或外伤损害后恢复和维持稳态的努力。局部性炎症限于特定部位，可表现出不同的症状，包括发红、肿胀、发热和疼痛。炎症通常是生物体清除有害刺激和引发组织愈合过程的保护性尝试。但是，未充分控制的炎症可以导致多种疾病，不论受试者的年龄如何。
目前临床上常用的抗炎药主要是非甾体类抗炎药(NSAIDs)，其通过阻断环氧化酶-2(COX-2)的作用来减少炎症，但是于此同时这种药物还同时阻断了COX-1的作用。COX-1的主要作用就是保护胃粘膜，因此COX-1的作用阻断就会产生胃部刺激性。因此，NSAIDs具有解热、镇痛、消炎、抗风湿等作用，但其副作用主要在胃肠道，其次是肝肾，且易产生耐药性，易成瘾，以及具有免疫抑制副作用等。近年对抗炎药物的探索研究中，中药已越来越凸显其药效好、无成瘾性、不良反应少等优势，引起人们的重视。
金银花的传统药理作用为清热解毒，主治热毒血痢，痈肿疔疮，喉痹，多种感染性疾病等。现代药理学研究显示，金银花清热解毒活性突出，但由于传统观点认为金银花不含或少含三萜皂苷类成分，所以研究常以金银花中的酚酸和黄酮类成分为主要物质基础展开金银花清热解毒活性的研究，而对于金银花中三萜皂苷类成分的活性研究报道较少。
本发明通过研究发现金银花中的一类具有全新化学结构的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物具有较好的抗炎作用，可能在预防或/和治疗炎性疾病和病症中具有广阔前景。金银花中的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物本身药理活性广泛，来自于天然植物，安全可靠，目前未见本发明所涉及的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物用于治疗或/和预防炎性疾病和病症的相关报道。
发明内容
本发明的主要目的是提供一种疗效确切、不良反应少、天然安全的治疗炎性疾病和病症的药物，以解决现有技术中的常见的药物胃肠道反应明显、易产生耐药性、易成瘾，以及具有免疫抑制副作用的问题。
为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种下式I的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物或其药学上可接受的盐、酯、外消旋体、R-异构体、S-异构体、同位素标记物、溶剂化物、代谢产物或前药，
Figure BDA0003279545450000021
其中R1是氢、羟基、卤素、C1-12烷基、C1-12卤代烷基或羟甲基，R2是氢、C1-12烷基、C1-12卤代烷基或含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha的糖或其酰化衍生物的碳水化合物，R3是含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha、Xyl的糖或其酰化衍生物的碳水化合物。
进一步地，R1是C1-12烷基或羟甲基，R2是氢或含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha的糖或其酰化衍生物的碳水化合物，R3是含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha、Xyl的糖或其酰化衍生物的碳水化合物。
进一步地，R1是甲基或羟甲基，R2是氢、Ara、Rha(1→2)Ara或Glc(1→2)Ara，R3是Rha(1→2)[Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)Glc、Xyl(1→3)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Xyl(1→3)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[Glc(1→6)]Glc、Rha(1→2)[3-O-Ac-Glc(1→6)]Glc、3-O-Ac-Xyl(1→6)Glc或Xyl(1→6)Glc。
进一步地，R1是甲基或羟甲基，R2是Ara或Rha(1→2)Ara，R3是Rha(1→2)[Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)Glc、Xyl(1→3)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Xyl(1→3)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc或Rha(1→2)[3-O-Ac-Glc(1→6)]Glc。
进一步地，R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Xyl(1→3)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Xyl(1→3)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[3-O-Ac-Glc(1→6)]Glc；或者R1＝甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Ara，R3＝Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Ara，R3＝Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Ara，R3＝Rha(1→2)Glc。
根据本发明的另一方面，提供了一种药物制剂，包含上述三萜皂苷类化合物和药学上可接受的辅料。
进一步地，该药物制剂的剂型是液体剂型或固体剂型。进一步地，该液体剂型是糖浆剂、注射溶液、悬浮液或乳剂。进一步地，该固体剂型是片剂、锭剂、胶囊、滴丸、丸剂、颗粒剂、粉剂、霜剂或栓剂。进一步地，该辅料选自以下中的一种或多种：调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、粘合剂、增稠剂和增溶剂。
进一步地，该药物制剂进一步包括一种或多种抗炎药。进一步地，该抗炎药为非甾体类抗炎药。进一步地，该非甾体类抗炎药选自以下中的一种或多种：阿司匹林、对乙酰氨基酚、吲哚美辛、萘普生、萘普酮、双氯芬酸、布洛芬、尼美舒利、罗非昔布和塞来昔布。
根据本发明的另一方面，提供了一种制备上述三萜皂苷类化合物的方法，其中该方法包括如下步骤：
(1)取适量的金银花药材作为原料，使用40％～95％的乙醇水溶液进行冷浸、渗漉、回流或超声提取，得到提取液；
(2)对该提取液进行浓缩，得到浓缩液；
(3)利用大孔吸附树脂分离该浓缩液，洗脱剂依次为水、35％至45％乙醇水溶液，65％至75％乙醇水溶液和约95％乙醇水溶液，收集65％至75％乙醇水溶液的洗脱液经浓缩干燥后得到总皂苷提取物；以及
(4)该总皂苷提取物经过硅胶柱层析，得到式I的三萜皂苷类化合物。
进一步地，该步骤(1)中的该金银花药材为金银花的栽培品九丰一号；进一步地，该步骤(1)中的该提取的方法为渗漉法；进一步地，该步骤(1)中的该乙醇水溶液的浓度为约50％；进一步地，该步骤(2)中的该浓缩的方法为减压旋蒸法；进一步地，该步骤(3)中的该洗脱剂依次为水、约40％乙醇水溶液，约70％乙醇水溶液和约95％乙醇水溶液。进一步地，该步骤(3)中的该大孔吸附树脂为HPD100大孔吸附树脂。进一步地，该步骤(4)中的该硅胶为粒度100至400目的正向硅胶。进一步地，该正向硅胶柱层析的洗脱流动相为二氯甲烷-甲醇-水体积比为3.6:(1.1～1.4):0.1的混合溶剂。进一步地，该步骤(4)进一步包括重结晶步骤、反向硅胶柱层析步骤和/或半制备HPLC分离步骤。进一步地，该反向硅胶柱层析步骤是ODS柱层析步骤。进一步地，该反向硅胶柱层析步骤的洗脱剂是40％至70％甲醇，优选地40％至60％甲醇。进一步地，该半制备HPLC分离步骤的流动相为乙腈-0.1％甲酸水(30∶70)、乙腈-0.1％甲酸水(31∶69)、乙腈-0.1％甲酸水(32∶68)、乙腈-0.1％甲酸水(35∶65)和/或甲醇-0.1％甲酸水(65∶35)。进一步地，该半制备HPLC分离步骤的检测波长为203nm。进一步地，该半制备HPLC分离步骤的流速为3mL·min-1。
根据本发明的另一方面，提供了一种上述三萜皂苷类化合物或上述药物制剂在制备用于治疗和/或预防炎症的药物中的用途。
进一步地，该炎症为一氧化氮介入的炎症反应。进一步地，该一氧化氮是由巨噬细胞释放的。进一步地，该一氧化氮是由细菌脂多糖诱导的巨噬细胞释放的。
本发明的有益效果：
传统认为金银花不含或少含皂苷类成分，从而对金银花的皂苷类成分研究较少。目前为止，从金银花中共分离到33个皂苷类成分，其中有21个为2005年前的研究。2005年后的12个皂苷类成分中有4个从忍冬藤中分离得到。我们前期研究比较金银花各栽培品种间的质量，发现金银花的栽培品九丰一号与其他栽培品种比较，化学成分差异较为明显，不同产地的九丰一号样品中均含有丰富皂苷类成分，为了明确九丰一号中的皂苷成分类型，本研究采用柱层析、结晶、制备HPLC等手段对九丰一号的总皂苷提取物进行单体化合物的分离和纯化，基于波谱技术进行化合物的结构鉴定，从而丰富金银花的化学成分。我们研究发现，从九丰一号中提取分离得到的一类具有新的化学结构的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物具有明显的抗炎效果，且其制备工艺简单、重现性好、纯度高，将其开发为治疗炎症疾病和病症的药物可以扩大金银花的应用范围，提高金银花植物资源的利用价值。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，还可以根据这些附图获得其他的附图，而并不超出本申请要求保护的范围。
图1是从金银花栽培品九丰一号中提取分离得到总皂苷提取物的流程简图。
图2是从九丰一号的总皂苷提取物分离得到化合物的流程简图。
图3是式I的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物结构图。
具体实施方式
下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
本发明有预期地涵盖所有的选择余地、变体和同等物，这些可能如权利要求所定义的那样包含在现有发明领域。所属领域的技术人员将识别许多类似或等同于在此所描述的方法和物质，这些可以应用于本发明的实践中去。本发明绝非限于方法和物质的描述。
本文所述的发明可以包括一个或多个数值范围(例如粒度，浓度等)。将数值范围理解为包括所述范围内的全部值，包括限定所述范围的值，和临近所述范围且产生与限定所述范围边界的值紧邻的值相同或基本上相同结果的值。
在一定程度上，具体实施方式和/或权利要求中使用术语“包含”、“包括(including，includes)”和“具有(having，has，with)”或其变体，这些术语意在包括与术语“包含(comprising)”类似的方式。
正如背景技术部分所描述的，现有的用于治疗炎性疾病和病症的常见的药物胃肠道反应明显、易产生耐药性、易成瘾，以及具有免疫抑制副作用的问题。为了解决上述问题，本发明提供了一种下式I的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物或其药学上可接受的盐、酯、外消旋体、R-异构体、S-异构体、同位素标记物、溶剂化物、代谢产物或前药，
Figure BDA0003279545450000061
其中R1是氢、羟基、卤素、C1-12烷基、C1-12卤代烷基或羟甲基，R2是氢、C1-12烷基、C1-12卤代烷基或含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha的糖或其酰化衍生物的碳水化合物，R3是含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha、Xyl的糖或其酰化衍生物的碳水化合物。
在一种优选的实施方式中，该药学上可接受的盐包括无机酸盐或有机酸盐。
在一种优选的实施方式中，该药学上可接受的盐选自下组：盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、甲酸盐、乙酸盐、己二酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、马来酸盐、草酸盐、水杨酸盐、酒石酸盐，或其组合。
在一种优选的实施方式中，本发明所使用的术语“酯”是指本发明的式I的化合物在体内(in vivo)水解的酯并且包括容易在人体内分解留下母体化合物或其盐的酯。合适的酯基包括例如衍生自药学上可接受的脂肪族羧酸(尤其链烷酸、链烯酸、环链烷酸和链烷二酸)的酯基，其中各烷基或烯基部分宜具有6个以下碳原子。
在一种优选的实施方式中，本发明的式I的化合物具有不对称中心、手性轴和手性平面，并且可以以外消旋体、R-异构体或S-异构体的形式存在。本领域技术人员能够采用常规技术手段由外消旋体拆分获得R-异构体和/或S-异构体。
在一种优选的实施方式中，本发明的同位素标记物为含2H、3H、10B、13C、14C、13N、15N、18O、26Mg、32P、34S、35S、37Cl、41K、45Ca、54Fe、57Fe和65Cu中的至少一种的水溶性化合物。
在一种优选的实施方式中，本发明所使用的术语“溶剂化物”是指一个或多个溶剂分子与本发明的式I的化合物所形成的缔合物。形成溶剂化物的溶剂包括，但并不限于，水，异丙醇，乙醇，甲醇，二甲亚砜，乙酸乙酯，乙酸，氨基乙醇。
在一种优选的实施方式中，本发明所使用的术语“代谢产物”是指具体的式I的化合物或其盐在体内通过代谢作用所得到的产物。一个化合物的代谢产物可以通过所属领域公知的技术来进行鉴定，其活性可以通过如本发明所描述的那样采用试验的方法进行表征。这样的产物可以是通过给药化合物经过氧化，还原，水解，酰氨化，脱酰氨作用，酯化，脱脂作用，酶裂解等等方法得到。相应地，本发明包括化合物的代谢产物，包括将本发明的化合物与哺乳动物充分接触一段时间所产生的代谢产物。
在一种优选的实施方式中，本发明所使用的术语“前药”，代表一个化合物在体内转化为式I所示的化合物。这样的转化受前体药物在血液中水解或在血液或组织中经酶转化为母体结构的影响。本发明前体药物类化合物可以是酯，在现有的发明中酯可以作为前体药物的有苯酯类，脂肪族(C1-24)酯类，酰氧基甲基酯类，碳酸酯，氨基甲酸酯类和氨基酸酯类。例如本发明里的一个化合物包含羟基，即可以将其酰化得到前体药物形式的化合物。其他的前体药物形式包括磷酸酯，如这些磷酸酯类化合物是经母体上的羟基磷酸化得到的。
在一种优选的实施方式中，R1是C1-12烷基或羟甲基，R2是氢或含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha的糖或其酰化衍生物的碳水化合物，R3是含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha、Xyl的糖或其酰化衍生物的碳水化合物。
术语“C1-12烷基”是指具有1-12个碳原子的直链或支化饱和烃基，例如甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基、1-甲基丙基、2-甲基丙基和1,1-二甲基乙基；术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘；术语“碳水化合物”可以是含还原糖基的单糖、低聚糖和淀粉，包括未加工的、改性的、抗性的、乙酰化的、丙酰化的和丁基化的。
在一种优选的实施方式中，R1是甲基或羟甲基，R2是氢、Ara、Rha(1→2)Ara或Glc(1→2)Ara，R3是Rha(1→2)[Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)Glc、Xyl(1→3)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Xyl(1→3)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[Glc(1→6)]Glc、Rha(1→2)[3-O-Ac-Glc(1→6)]Glc、3-O-Ac-Xyl(1→6)Glc或Xyl(1→6)Glc。
其中Ara(或写成ara)为α-L-***糖；Glc(或写成glc)为β-D-葡萄糖；Rha(或写成rha)为α-L-鼠李糖；Xyl(或写成xyl)为β-D-木糖。Ac代表乙酰化。上述的化合物不仅是化合物本身，适当时也可以是立体异构体(包括光学异构体，例如对映体和外消旋体)。
在一种优选的实施方式中，R1是甲基或羟甲基，R2是Ara或Rha(1→2)Ara，R3是Rha(1→2)[Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)Glc、Xyl(1→3)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Xyl(1→3)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc或Rha(1→2)[3-O-Ac-Glc(1→6)]Glc。
在一种优选的实施方式中，R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Xyl(1→3)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Xyl(1→3)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[3-O-Ac-Glc(1→6)]Glc；或者R1＝甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Ara，R3＝Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Ara，R3＝Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Ara，R3＝Rha(1→2)Glc。
根据本发明的另一方面，提供了一种药物制剂，包含上述三萜皂苷类化合物和药学上可接受的辅料。
在一种优选的实施方式中，该药物制剂的剂型是液体剂型或固体剂型。在一种优选的实施方式中，该液体剂型是糖浆剂、注射溶液、悬浮液或乳剂。在一种优选的实施方式中，该固体剂型是片剂、锭剂、胶囊、滴丸、丸剂、颗粒剂、粉剂、霜剂或栓剂。在一种优选的实施方式中，该辅料选自以下中的一种或多种：调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、粘合剂、增稠剂和增溶剂。
其中，调味剂的非限制性实例包括但不限于糖醇，例如山梨糖醇、木糖醇；单糖，包括蔗糖、葡萄糖、果糖和乳糖；山梨糖醇、甘露糖醇、甘油、木糖醇、赤藓醇、麦芽糖醇糖浆、异麦芽糖醇、乳糖醇；以及糖的混合物，包括葡萄糖浆；转化糖浆、高含糖量的糖浆；以及麦芽或麦芽提取物；崩解剂可以包括但不限于下述的一种或多种：交联羧甲基纤维素钠、羧甲纤维素钙、交聚维酮、海藻酸、海藻酸钠、海藻酸钾、海藻酸钙、离子交换树脂、基于食品酸和碱性碳酸盐组分的泡腾***、粘土、滑石、淀粉、预明胶化的淀粉、淀粉羟乙酸钠、纤维素絮状物、羧甲基纤维素、羟基丙基纤维素、硅酸钙、金属碳酸盐、碳酸氢钠、柠檬酸钙和磷酸钙；防腐剂可以是山梨酸钾、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸及其盐、对羟基苯甲酸的其他酯诸如对羟基苯甲酸丁酯，醇类诸如乙醇或苯甲醇，酚类化学物质诸如苯酚，或四价化合物诸如苯扎氯铵；润滑剂的非限制性实例包括但不限于硬脂酸钙、低芥子酸菜籽油、甘油基棕榈酸硬脂酸酯、氢化植物油、泊咯沙姆、聚乙二醇、聚乙烯醇、苯甲酸钠、月桂基硫酸钠、硬脂酰基富马酸钠、灭菌的玉米淀粉、滑石粉和硬脂酸锌；湿润剂可以包括但不限于下述的一种或多种：玉米淀粉、马铃薯淀粉、玉米淀粉、和改性淀粉、交联羧甲纤维素钠、交联聚维酮、羟基乙酸淀粉钠和它们的混合物；粘合剂可以包括但不限于下述的一种或多种：多种纤维素、交联的聚乙烯吡咯烷酮和微晶纤维素；增稠剂可以是聚丙烯酸酯和聚丙烯酸酯共聚物树脂，例如聚丙烯酸和聚丙烯酸/甲基丙烯酸树脂；或者纤维素和纤维素衍生物，包括烷基纤维素如甲基-、乙基-、和丙基-纤维素；增溶剂可以包括但不限于下述的一种或多种：乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-烷基吡咯烷酮、N-羟基烷基吡咯烷酮、N-烷基哌啶酮、维生素E和维生素E衍生物。
在一种优选的实施方式中，该药物制剂进一步包括一种或多种抗炎药。在一种优选的实施方式中，该抗炎药为非甾体类抗炎药。
其中，非甾体类抗炎药是指一类不含甾体结构而具有抗炎、镇痛和解热作用的药物。
在一种优选的实施方式中，该非甾体类抗炎药选自以下中的一种或多种：阿司匹林、对乙酰氨基酚、吲哚美辛、萘普生、萘普酮、双氯芬酸、布洛芬、尼美舒利、罗非昔布和塞来昔布。
其中，阿司匹林属于环氧化酶抑制剂，可以阻断***素转换为花生四烯酸，从而能减少炎症介质产生而发挥抗炎作用；对乙酰氨基酚抑制中枢神经******素合成的作用与阿司匹林相似，但抗炎作用较弱；吲哚美辛通过对环氧化酶的抑制减少***素的合成来起到抗炎作用。
根据本发明的另一方面，提供了一种制备上述三萜皂苷类化合物的方法，其中该方法包括如下步骤：
(1)取适量的金银花药材作为原料，使用40％～95％的乙醇水溶液进行冷浸、渗漉、回流或超声提取，得到提取液；
(2)对该提取液进行浓缩，得到浓缩液；
(3)利用大孔吸附树脂分离该提取液，洗脱剂依次为水、35％至45％乙醇水溶液，65％至75％乙醇水溶液和约95％乙醇水溶液，收集65％至75％乙醇水溶液的洗脱液经浓缩干燥后得到总皂苷提取物；以及
(4)该总皂苷提取物经过硅胶柱层析，得到式I的三萜皂苷类化合物。
在一种优选的实施方式中，该步骤(1)中的该金银花药材为金银花的栽培品九丰一号；在一种优选的实施方式中，该步骤(1)中的该提取的方法为渗漉法；在一种优选的实施方式中，该步骤(1)中的该乙醇水溶液的浓度为约50％。
术语“约”或“大约”是指在本领域技术人员所测定的特定值的可接收的误差范围内，该误差范围部分取决于如何测量或测定所述值，即，测量***的限制。例如，根据本领域的实践操作，“约”可以是1或高于1的标准偏差范围内。可选地，“约”可指给定值的高达10％，优选地高达5％，以及更优选地高达1％的范围。除非另有说明，在本发明中描述特定值的情况下，可假定术语“约”是指特定值的可接受的误差范围内。
在一种优选的实施方式中，该步骤(2)中的该浓缩的方法为减压旋蒸法；该步骤(3)中的该洗脱剂依次为水、约40％乙醇水溶液，约70％乙醇水溶液和约95％乙醇水溶液。在一种优选的实施方式中，该步骤(3)中的该大孔吸附树脂为HPD100大孔吸附树脂。在一种优选的实施方式中，该步骤(4)中的该硅胶为粒度100至400目的正向硅胶。在一种优选的实施方式中，正向硅胶柱层析的洗脱流动相为二氯甲烷-甲醇-水体积比为3.6:(1.1～1.4):0.1的混合溶剂。在一种优选的实施方式中，该步骤(4)进一步包括重结晶步骤、反向硅胶柱层析步骤和/或半制备HPLC分离步骤。在一种优选的实施方式中，该反向硅胶柱层析步骤是ODS柱层析步骤。在一种优选的实施方式中，该反向硅胶柱层析步骤的洗脱剂是40％至70％甲醇，优选地40％至60％甲醇。在一种优选的实施方式中，该半制备HPLC分离步骤的流动相为乙腈-0.1％甲酸水(30∶70)、乙腈-0.1％甲酸水(31∶69)、乙腈-0.1％甲酸水(32∶68)、乙腈-0.1％甲酸水(35∶65)和/或甲醇-0.1％甲酸水(65∶35)。在一种优选的实施方式中，该半制备HPLC分离步骤的检测波长为203nm。进一步地，该半制备HPLC分离步骤的流速为3mL·min-1。
该反向硅胶柱层析步骤的洗脱剂和该半制备HPLC分离步骤的流动相根据实际情况进行选择，可以是不同流动相之间的组合。
根据本发明的另一方面，提供了一种上述三萜皂苷类化合物或上述药物制剂在制备用于治疗和/或预防炎症的药物中的用途。
本发明对于金银花栽培品九丰一号提取与分离获得的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物1-19及其类似物对脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞释放NO抑制率范围为约25％至约55％。
如本文所用，术语“炎症”是指由发炎导致的任何疾病或者其症状包括发炎的那些疾病。举例说明，一种由发炎导致的炎症可以是一种脓毒性休克，同时一种其症状包括发炎的炎症可以是类风湿性关节炎。本发明的炎症包括但不限于：心血管疾病、类风湿性关节炎、多发性硬化症、Crohn′s疾病、炎症性肠病、***性红斑狼疮、多肌炎、脓毒性休克、移植物抗宿主病、哮喘、鼻炎、牛皮癣与癌症相关的恶病质和湿疹。
在一种优选的实施方式中，该炎症为一氧化氮介入的炎症反应。
其中，正常情况下内皮源性NO具有抑制炎症反应的作用，病理情况下诱导型NO合成酶合成大量的NO则有细胞毒作用，加重炎症反应。
在一种优选的实施方式中，该一氧化氮是由巨噬细胞释放的。
在一种优选的实施方式中，该一氧化氮是由细菌脂多糖诱导的巨噬细胞释放的。
其中，LPS是革兰阴性菌细胞壁的主要成分，也是其致病的主要物质基础。LPS是诱导单核/巨噬细胞活化、成熟的主要物质，可通过刺激单核/巨噬细胞产生并释放大量的一氧化氮(NO)、IL-1β以及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)等炎症因子参与机体急性期应答，引起机体炎性损伤。
本发明还涉及治疗和/或预防炎症的方法，其包括向有此需要的个体给药治疗有效量的上述药物组合物或药物制剂的步骤。
如本文所用，术语“治疗”指的是任何有益于人或非人动物的方案。因此，治疗可以是关于已存在的病症或者可以是预防性的(预防性治疗)。治疗可包括治愈、减轻或预防效应；术语“有效量”是指对病人给药的剂量或药量，以及对病人给药的频度，这些可由本领域的普通技术人员根据现有技术的应用和通过观察在有效治疗疾病或状况的类似条件下获得的结果很容易地确定。为了确定有效量或剂量，专职诊断医师要考虑许多因素，其包括但不限于：所采用的化合物的作用效果和持续时间；接受治疗的疾病的特征和严重程度，以及接受治疗的病人的性别、年龄、体重和一般健康状况和个体反应；以及本领域技术人员已知的相关情况。一般而言，其含量为体重的大约0.01mg/kg至大约100mg/kg的范围内，通常在体重的大约1mg/kg至大约20mg/kg的范围内。
需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将结合实施例来详细说明本发明。
以下结合具体实施例对本发明作进一步详细描述，这些实施例不能理解为限制本申请所要求保护的范围。
实施例
1实验材料
Bruker Avance 600MHz核磁共振波谱仪(瑞士Bruker)，Waters Acquity UPLC H-CLASS超高液相色谱***(美国Waters公司)，Xevo G2-S QTOF四级杆高分辨飞行时间质谱仪(美国Waters公司)，半制备高效液相色谱仪(美国Alltech公司)，Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪(日本岛津)，Agilent1200高效液相色谱仪(美国安捷伦)配3300蒸发光散射器(美国Alltech公司)和GCK3308全自动空气源(北京中惠普分析技术研究所)，BSA2245-CW分析天平(赛多利斯科学仪器有限公司)，EYELA旋转蒸发仪(SB-1100上海爱朗仪器有限公司)，SK10GT型超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)，Sigma 1-14小型台式离心机(德国Sigma公司)，真空干燥箱(DZF-6053上海一恒科学仪器有限公司)，LGL-25C冷冻干燥机(北京四环公司)。色谱柱：Agilent C18柱(5μm，9.4×250mm)(美国安捷伦)，Kromasil C18柱(5μm，4.6×250mm)(瑞典AKZO NOBEL公司)，Waters ACQUITY UPLC C18柱(1.7μm，2.1×100mm)(美国Waters公司)。薄层层析硅胶板、100-200目正向硅胶(青岛海洋化工厂)，ODS反向硅胶填料(日本YMC公司)，所用试剂为化学纯或分析纯。酸水解糖对照品：L-***糖(批号3872，纯度＞98％)、D-***糖(批号3871，纯度＞98％)、L-木糖(批号860，纯度＞98％)均购自中科华检科技有限公司；D-葡萄糖(批号110833-201908，纯度99.8％)、D-木糖(批号111508-200404，纯度＞98％)均购自中国食品药品检定研究院；L-葡萄糖(纯度＞99％)、L-鼠李糖(纯度＞98％)、D-鼠李糖(纯度＞98％)均购自北京索莱宝科技有限公司。
2实验方法
2.1提取与分离
将金银花栽培品九丰一号药材2Kg，用50％乙醇进行渗漉提取，减压旋蒸对提取液进行浓缩，浓缩液上样至HPD100大孔吸附树脂，分别用水、40％乙醇、70％乙醇和95％乙醇依次进行洗脱，得到金银花总皂苷提取物(70％乙醇洗脱部位，23.8g)。
取金银花总皂苷提取物(15.1g)用甲醇溶解，采用100-200目正向硅胶进行色谱分离。二氯甲烷-甲醇-水(3.6-1.1-0.1，3.6-1.4-0.1)洗脱，TLC检识(显色剂：10％的硫酸乙醇溶液，展开剂：二氯甲烷-甲醇-水3.6-1.1-0.1)，合并相似馏分，得到6个馏分G1～G6。
G1(2.93g)经ODS柱层析(40％-60％甲醇)，TLC检识，合并相似馏分，得到18个组分G1-1～G1-18。组分G1-15(0.16g)甲醇溶液经半制备HPLC分离，流动相为乙腈-0.1％甲酸水(30∶70)，检测波长203nm，流速3mL·min-1，得到化合物1(9.65mg)(tR 13min)、2(4.66mg)(tR 20min)、3(51.7mg)(tR 31min)、4(13.9mg)(tR 34min)、5(9.04mg)(tR 37min)和6(40.4mg)(tR 41min)；组分G1-16(0.08g)甲醇溶液经半制备HPLC分离，流动相为乙腈-0.1％甲酸水(31∶69)，检测波长203nm，流速3mL·min-1，得到化合物4(31.5mg)(tR 24min)、6(34.6mg)(tR 31min)和7(7.81mg)(tR 35min)。
G2(0.57g)经ODS柱层析(40％-70％甲醇)，TLC检识，合并相似馏分，得到12个组分G2-1～G2-12。组分G2-8(0.04g)和G2-9(0.21g)甲醇溶液经半制备HPLC分离，流动相为乙腈-0.1％甲酸水(30∶70)，检测波长203nm，流速3mL·min-1，分别得到化合物8(32.3mg)(tR9.5min)和12(14.4mg)(tR 18min)。
G3(3.55g)浓缩后析出白色粉末，经重结晶富集化合物1(1.63g)。
G4(1.65g)经ODS柱层析(40％-60％甲醇)，TLC检识，合并相似馏分，得到18个组分G4-1～G4-18。组分G4-13(0.55g)甲醇溶液经半制备HPLC分离，流动相为乙腈-0.1％甲酸水(30∶70)，检测波长203nm，流速3mL·min-1，得到G4-13-F1(化合物2，153.9mg)(tR 20.0min)和G4-13-F2；G4-13-F2继续经半制备HPLC，流动相为甲醇-0.1％甲酸水(65∶35)，检测波长203nm，流速3mL·min-1，得到化合物9(12.1mg)(tR 14min)和10(40.0mg)(tR 18.5min)；组分G4-18(0.09g)甲醇溶液经半制备HPLC分离，流动相为乙腈-0.1％甲酸水(35∶65)，检测波长203nm，流速3mL·min-1，得到化合物11(36.3mg)(tR 12min)。
G5(0.84g)经ODS柱层析(40％-70％甲醇)，TLC检识，合并相似馏分，得到13个组分G5-1～G5-13。组分G5-10(0.12g)甲醇溶液经半制备HPLC分离，流动相为乙腈-0.1％甲酸水(31：69)，检测波长203nm，流速3mL·min-1，得到化合物13(71.40mg)(tR 28min)和14(3.74mg)(tR 16min)；组分G5-12(0.05g)甲醇溶液经半制备HPLC分离，流动相为乙腈-0.1％甲酸水(32∶68)，检测波长203nm，流速3mL·min-1，得到化合物15(8.92mg)(tR32min)、16(4.56mg)(tR 25min)、17(6.84mg)(tR 31min)、18(2.93mg)(tR 13min)和19(1.44mg)(tR 9min)。
G6(0.13g)甲醇溶液经半制备HPLC分离，流动相为乙腈-0.1％甲酸水(31：69)，检测波长203nm，流速3mL·min-1，富集化合物14(55.5mg)(tR 16min)。
2.2酸水解皂苷单体化合物
2.2.1溶液的配制
三氟乙酸(TFA)溶液的配制：取7.5mL TFA于50mL的容量瓶中，加水定容，配制成2mol·L-1的TFA溶液。
2.2.2方法
分别取编号为1-19的单体样品约2mg加入2mL 2mol·L-1TFA溶液，放入烘箱中110℃水解3小时，冷却室温，乙酸乙酯萃取3次，每次2ml，去除有机相，水层减压干燥。样品溶于乙腈-水(87：13)，离心(12000r·min-1，10min)后取上清液进液相。HPLC-ELSD色谱条件：色谱柱：Welch Ultimate XB-NH2(5μm，4.6×250mm)，流动相为乙腈-水(87：13)等度洗脱，流速1mL·min-1，柱温箱35℃；检测器为蒸发光散射检测器，漂移管温度为70℃，载气流量2.5L·min-1，流速为2mL·min-1。
3化合物结构解析
3.1化合物信息
通过1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HMBC、TOCSY、1H-1H-COSY和LC-MS等波谱技术，共鉴定出19个三萜皂苷类化合物，具体化合物见表1。
表1从金银花栽培品九丰一号中分离得到的三萜皂苷类化合物
Figure BDA0003279545450000151
Figure BDA0003279545450000161
注：*新化合物；△为首次从金银花中分离获得。
3.2新化合物的结构解析
化合物2：白色无定形粉末，易溶于甲醇、水、吡啶，Molish反应阳性，酸水解检出D-葡萄糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-***糖。HR-ESI-MS负离子显示：1231.6107[M-H]-，1277.6179[M+HCOO]-，二级质谱出现1189.6003[M-H-Ac]-，749.4474[M-H-Ac-Xyl-Glc-Rha]-，603.3886[M-H-Ac-Xyl-Glc-Rha-Rha]-，471.3479[M-H-Ac-Xyl-Glc-Rha-Rha-Ara]-，综合质谱数据可推测出化合物2分子量为1232，分子式为C60H96O26。1H NMR(600MHz,C5D5N)中δ5.44(s,1H)为12位烯氢，δ0.86(3H,s,Me-29)，1.00(3H,s,Me-30)，1.01(3H,s,Me-25)，1.04(3H,s,Me-24)，1.12(3H,s,Me-26)，1.20(3H,s,Me-27)为苷元上6个甲基质子信号。13CNMR中δ123.4，144.9表明该化合物为齐墩果烷型的三萜皂苷。δ64.8(C-23)的信号及氢谱中的质子信号δ4.14(H-23a)和3.66(H-23b)表明C-23位有羟基取代。δ5.11(1H,d,J＝6.2Hz)，5.05(1H,d,J＝7.9Hz)，6.12(1H,d,J＝8.0Hz)，6.26(1H,s)，6.57(1H,s)分别为***糖、木糖、葡萄糖和两个鼠李糖的端基氢信号。1.65(3H,d,J＝6.1Hz)，1.77(3H,d,J＝6.2Hz)为两个鼠李糖6位的甲基峰。HMBC谱中显示1个糖基的端基质子信号δ6.12(Glc-H-1)与δ177.0存在远程相关，1个糖基的端基质子信号δ5.11(Ara-H-1)与δ81.9(C-3)存在远程相关，以上信息表示有Glc与Ara分别与C-28、C-3位相连。δ6.57(Rha′-H-1)与δ76.3(Glc-C-2)相关，δ6.26(Rha-H-1)与δ76.6(Ara-C-2)相关，δ5.05(Xyl-H-1)与δ69.4(Glc-C-6)相关，进一步确证了糖的连接顺序和连接位置，连接位置同化合物1(忍冬苦苷B)。相较于忍冬苦苷B，化合物2含有乙酰基，乙酰基与δ5.53相关。TOCSY谱归属糖上的氢信号，显示δ5.53为木糖上的氢信号，即乙酰基连接在木糖上。综合1H-1H-COSY和HSQC谱，δ5.53与Xyl-C-2相连，Xyl-H-2向低场移动，Xyl-C-2发生酰化位移，δ5.53与δ5.05(Xyl-H-1)、δ4.14(Xyl-H-3)耦合，所以推断乙酰基与Xyl的C-2位相连。根据以上波谱数据确定化合物2的结构，经过文献和SciFinder查询确定为新化合物，鉴定该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[2-O-Ac-β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为忍冬苦苷K。
化合物3：白色无定形性粉末，易溶于甲醇、水、吡啶，Molish反应阳性。酸水解检出D-葡萄糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-***糖。HR-ESI-MS负离子显示：1231.6113[M-H]-，1227.6196[M+HCOO]-。二级质谱出现1189.6001[M-H-Ac]-，749.4483[M-H-Ac-Xyl-Glc-Rha]-，603.3902[M-H-Ac-Xyl-Glc-Rha-Rha]-，471.3470[M-H-Ac-Xyl-Glc-Rha-Rha-Ara]-，综合质谱数据可推测出化合物3分子量为1232，分子式为C60H96O26。1H NMR(600MHz,C5D5N)中δ5.46(1H,s)为12位烯氢，δ0.87(3H,s,Me-29)，0.94(3H,s,Me-30)，1.03(3H,s,Me-25)，1.05(3H,s,Me-24)，1.14(3H,s,Me-26)，1.27(3H,s,Me-27)为苷元上6个甲基质子信号。13CNMR中δ123.3，144.6表明该化合物为齐墩果烷型的三萜皂苷，δ64.3(C-23)的信号及氢谱中的质子信号δ4.18(H-23a)，3.70(H-23b)表明C-23位有羟基取代。δ5.11(1H,d,J＝6.2Hz)，4.88(1H,d，J＝7.4Hz)，6.14(1H,d,J＝8.0Hz)，6.27(1H,s)，6.54(1H,s)分别为***糖、木糖、葡萄糖和两个鼠李糖的端基氢信号。δ1.66(3H,d,J＝6.1Hz)，1.77(3H,d,J＝6.1Hz)为鼠李糖6位的甲基峰。HMBC谱中显示1个糖基的端基质子信号δ6.14(Glc-H-1)与δ177.1存在远程相关，1个糖基的端基质子信号δ5.11(Ara-H-1)与δ81.7(C-3)存在远程相关。以上信息表示Glc与Ara分别与C-28、C-3位相连，δ6.54(Rha′-H-1)与δ76.1(Glc-C-2)相关，δ6.27(Rha-H-1)与δ76.4(Ara-C-2)相关，δ4.88(Xyl-H-1)与δ69.8(Glc-C-6)相关，进一步确证了糖的连接顺序和连接位置，连接位置同化合物1(忍冬苦苷B)。相较于忍冬苦苷B，化合物3含有乙酰基，乙酰基与δ5.66相关。TOCSY谱归属糖上的氢信号，显示δ5.66为木糖上的氢信号，即乙酰基连接在木糖上。综合1H-1H-COSY和HSQC谱，δ5.66与Xyl-C-3相连，Xyl-H-3向高场移动，Xyl-C-3发生酰化位移，δ5.66与δ4.02(Xyl-H-2)、δ4.19(Xyl-H-4)耦合，所以推断乙酰基与Xyl的C3位相连。根据以上波谱数据确定化合物3的结构，经过文献和SciFinder查询确定为新化合物，鉴定该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[3-O-Ac-β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为忍冬苦苷L。
化合物5：白色无定形性粉末，易溶于甲醇、水、吡啶，Molish反应阳性。酸水解检出D-葡萄糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-***糖。HR-ESI-MS负离子显示：1217.6084[M-H]-，1263.6143[M+HCOO]-，二级质谱出现1175.5973[M-H-Ac]-，749.4515[M-H-Ac-Xyl-Glc-Xyl]-，603.3918[M-H-Ac-Xyl-Glc-Xyl-Rha]-，471.3462[M-H-Ac-Xyl-Glc-Xyl-Rha-Ara]-，综合质谱数据可推测出化合物5分子量为1218，分子式为C59H94O26。1H NMR(600MHz,C5D5N)中δ5.42(1H,s)为12位烯氢，δ0.88(3H,s,Me-29)，0.93(3H,s,Me-30)，0.98(3H,s,Me-25)，1.03(3H,s,Me-24)，1.08(3H,s,Me-26)，1.19(3H,s,Me-27)为苷元上6个甲基质子信号，δ64.3(C-23)的信号及氢谱中的质子信号δ4.10(H-23a)，3.61(H-23b)表明C-23位有羟基取代，13C NMR中δ123.5，145.0表明该化合物为齐墩果烷型的三萜皂苷。δ5.12(1H,d,J＝6.3Hz)，5.36(1H,d,J＝7.7Hz)，4.87(1H,d,J＝7.7Hz)，6.16(1H,d,J＝8.2Hz)，6.31(1H,s,1H)分别为***糖、两个木糖、葡萄糖和鼠李糖的端基氢信号。δ1.66(3H,d,J＝6.2Hz)为鼠李糖6位的甲基峰。HMBC谱中显示1个糖基的端基质子信号δ6.16(Glc-H-1)与δ177.2存在远程相关，1个糖基的端基质子信号δ5.12(Ara-H-1)与δ81.5(C-3)存在远程相关。以上信息表示有Glc与Ara分别与C-28、C-3位相连。δ6.31(Rha-H-1)与δ76.2(Ara-C-2)相关，δ5.36(Xyl′-H-1)与δ80.3(Glc-C-3)相关，δ4.87(Xyl-H-1)与δ69.6(Glc-C-6)相关，进一步确证了糖的连接顺序和连接位置。化合物5含有乙酰基，乙酰基与δ5.66相关。TOCSY谱归属糖上的氢信号，显示δ5.66为连接葡萄糖C-6位上的木糖上的氢信号，即乙酰基连接在木糖上。综合1H-1H-COSY和HSQC谱，δ5.66与Xyl-C-3相连，Xyl-H-3向高场移动，Xyl-C-3发生酰化位移，δ5.66与δ4.02(Xyl-H-2)、δ4.17(Xyl-H-4)耦合，所以推断乙酰基与Xyl的C-3位相连。根据以上波谱数据确定化合物5的结构，经过文献和SciFinder查询，确定为新化合物，鉴定该化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃木糖基-(1→3)-[3-O-Ac-β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为忍冬苦苷M。
化合物6：白色无定形性粉末，易溶于甲醇、水、吡啶，Molish反应阳性。酸水解检出D-葡萄糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-***糖。HR-ESI-MS负离子显示1231.6340[M-H]-，1227.6296[M+HCOO]-，二级质谱出现1189.6150[M-H-Ac]-，749.4539[M-H-Ac-Xyl-Glc-Rha]-，603.3944[M-H-Ac-Xyl-Glc-Rha-Rha]-，471.3455[M-H-Ac-Xyl-Glc-Rha-Rha-Ara]-，综合质谱数据可推测出化合物6分子量为1232，分子式为C60H96O26。1H NMR(600MHz,C5D5N)中δ5.50(1H,s)为12位烯氢，δ0.95(3H,s,Me-29)，1.02(3H,s,Me-30)，1.10(3H,s,Me-25)，1.13(3H,s,Me-24)，1.20(3H,s,Me-26)，1.27(3H,s,Me-27)为苷元上6个甲基质子信号。13CNMR中δ123.3，144.6表明该化合物为齐墩果烷型的三萜皂苷，δ64.5(C-23)的信号及氢谱中的质子信号δ4.16(H-23a)，3.74(H-23b)表明C-23位有羟基取代。δ5.18(1H,d,J＝6.2Hz)，5.03(1H,d,J＝7.5Hz)，6.20(1H,d,J＝8.1Hz)，6.34(1H,s)，6.62(1H,s)分别为***糖、木糖、葡萄糖和两个鼠李糖的端基氢信号。δ1.72(3H,d,J＝6.1Hz)，1.85(3H,d,J＝6.1Hz)为鼠李糖6位的甲基峰。HMBC谱中显示1个糖基的端基质子信号δ6.20(Glc-H-1)与δ177.1存在远程相关，1个糖基的端基质子信号δ5.18(Ara-H-1)与δ81.7(C-3)存在远程相关。以上信息表示有Glc与Ara分别与C-28、C-3位相连。δ6.34(Rha-H-1)与δ76.4(Ara-C-2)相关，δ6.62(Rha′-H-1)与δ76.1(Glc-C-2)相关，δ5.03(Xyl-H-1)与δ69.3(Glc-C-6)相关，进一步确证了糖的连接顺序和连接位置，连接位置同化合物1(忍冬苦苷B)。相较于忍冬苦苷B，化合物6含有乙酰基，乙酰基与δ5.44相关。TOCSY谱归属糖上的氢信号，显示δ5.44为木糖上的氢信号，即乙酰基连接在木糖上。综合1H-1H-COSY和HSQC谱，HSQC谱显示δ5.44与Xyl-C-4相连，Xyl-C-4发生酰化位移，δ5.44与δ4.33(Xyl-H-3)、δ3.60(Xyl-H-5b)耦合，所以推断乙酰基与Xyl的C-4位相连。根据波谱数据确定化合物6的结构，经过文献和SciFinder查询确定为新化合物，鉴定化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[4-O-Ac-β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为忍冬苦苷N。
化合物7：白色无定形性粉末，易溶于甲醇、水、吡啶，Molish反应阳性。酸水解检出D-葡萄糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-***糖。HR-ESI-MS负离子显示：1217.5961[M-H]-，1263.6021[M+HCOO]-，二级质谱出现1175.5862[M-H-Ac]-，1043.5433[M-H-Xyl]-，923.5018[M-H-Ac-Xyl-C4H8O4]-，791.4598[M-H-Ac-Xyl-C4H8O4-Xyl]-，749.4492[M-H-Ac-Xyl-C4H8O4-Xyl-C2H2O]-，603.3896[M-H-Ac-Xyl-C4H8O4-Xyl-C2H2O-Rha]-，471.3484[M-H-Ac-Xyl-C4H8O4-Xyl-C2H2O-Rha-Ara]-，综合质谱数据可推测出化合物7分子量为1218，分子式为C59H94O26。1H NMR(600MHz,C5D5N)中δ5.46(1H,s)为12位烯氢，δ0.89(3H,s,Me-29)，0.94(3H,s,Me-30)，0.99(3H,s,Me-25)，1.05(3H,s,Me-24)，1.08(3H,s,Me-26)，1.19(3H,s,Me-27)为苷元上6个甲基质子信号。13C NMR中δ123.4，144.8表明该化合物为齐墩果烷型的三萜皂苷，δ64.3(C-23)的信号及氢谱中的质子信号δ4.31(H-23a)，3.63(H-23b)表明C-23位有羟基取代。δ5.12(1H,d,J＝6.2Hz)，5.38(1H,d,J＝5.5Hz)，4.94(1H,d,J＝7.8Hz)，6.15(1H,d,J＝7.6Hz)，6.31(1H,s)分别为***糖、两个木糖、葡萄糖和鼠李糖的端基氢信号。δ1.66(3H,d,J＝6.1Hz)为鼠李糖6位的甲基峰。HMBC谱中显示1个糖基的端基质子信号δ6.15(Glc-H-1)与δ177.1存在远程相关，1个糖基的端基质子信号δ5.12(Ara-H-1)与δ81.5(C-3)存在远程相关。以上信息表示有Glc与Ara分别与C-28、C-3位相连。δ6.31(Rha-H-1)与δ76.2(Ara-C-2)相关，δ5.38(Xyl-H-1)与δ80.3(Glc-C-3)相关，δ4.94(Xyl′-H-1)与δ69.1(Glc-C-6)相关，进一步确证了糖的连接顺序和连接位置。化合物7含有乙酰基，乙酰基与δ5.41相关。TOCSY谱归属糖上的氢信号，显示δ5.41为连接葡萄糖C-6位上的木糖上的氢信号，即乙酰基连接在木糖上。综合1H-1H-COSY和HSQC谱，δ5.41与Xyl-C-4相连，Xyl-H-4向高场移动，Xyl-C-4发生酰化位移，δ5.38与δ4.22(Xyl-H-3)、δ4.32a、3.51b(Xyl-H-5)耦合，所以推断乙酰基与Xyl的C-4位相连。根据波谱数据确定化合物7的结构，经过文献和SciFinder查询确定该化合物为新化合物，鉴定化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃木糖基-(1→3)-[4-O-Ac-β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为忍冬苦苷O。
化合物9：白色无定形性粉末，易溶于甲醇、水、吡啶，Molish反应阳性。酸水解检出D-葡萄糖、L-鼠李糖、L-***糖。HR-ESI-MS负离子显示：1261.6222[M-H]-，1307.6283[M+HCOO]-，二级质谱出现，1219.6123[M-H-Ac]-，937.5173[M-H-Ac-Glc-C4H8O4]-，791.4594[M-H-Ac-Glc-C4H8O4-Rha]-，749.4450[M-H-Ac-Glc-C4H8O4-Rha-C2H2O]-，603.3919[M-H-Ac-Glc-C4H8O4-Rha-C2H2O-Rha]-，471.3484[M-H-Ac-Glc-C4H8O4-Rha-C2H2O-Rha-Ara]-，综合质谱数据可推测出化合物9分子量为1262，分子式为C61H98O27。1H NMR(600MHz,C5D5N)中δ5.47(1H,s)为12位烯氢，δ0.86(3H,s,Me-29)，0.87(3H,s,Me-30)，1.01(3H,s,Me-25)，1.06(3H,s,Me-24)，1.13(3H,s,Me-26)，1.20(3H,s,Me-27)为苷元上6个甲基质子信号。13C NMR中δ123.0，144.6表明该化合物为齐墩果烷型的三萜皂苷，δ64.3(C-23)的信号及氢谱中的质子信号δ4.15(H-23a)，3.67(H-23b)表明C-23位有羟基取代。δ5.11(1H,d,J＝6.2Hz)，6.28(1H,s)，6.57(1H,s)，6.12(1H,d,J＝8.1Hz)，4.98(1H,d,J＝7.8Hz)分别为***糖、两个鼠李糖和两个葡萄糖的端基氢信号。δ1.78(3H,d,J＝6.1Hz)，δ1.66(3H,d,J＝6.2Hz)为两个鼠李糖6位的甲基峰。HMBC谱中显示1个糖基的端基质子信号δ6.12(Glc-H-1)与δ177.0存在远程相关，1个糖基的端基质子信号δ5.11(Ara-H-1)与δ81.5(C-3)存在远程相关。以上信息表示有Glc与Ara分别与C-28、C-3位相连。δ6.57(Rha′-H-1)与δ75.8(Glc-C-2)相关，δ6.28(Rha-H-1)与δ76.2(Ara-C-2)相关，δ4.98(Glc′-H-1)与δ70.1(Glc-C-6)相关进一步确证了糖的连接顺序和连接位置，糖的连接位置同化合物8。化合物9含有乙酰基，乙酰基与δ5.78相关。TOCSY谱归属糖上的氢信号，显示δ5.78为连接葡萄糖C-6位上的葡萄糖上的氢信号，即乙酰基连接在葡萄糖上。综合1H-1H-COSY和HSQC谱，δ5.78与Glc′-C-3相连，Glc′-H-3向高场移动，Glc′-C-3发生酰化位移，δ5.78与δ4.01(Glc-H-2)、δ4.31(Glc-H-4)耦合，所以推断乙酰基与Glc′的C3位相连。根据以上波谱数据确定化合物9的结构，经过文献和SciFinder查询确定为新化合物，鉴定化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[3-O-Ac-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为忍冬苦苷P。
化合物11：白色无定形性粉末，易溶于甲醇、水、吡啶，Molish反应阳性。酸水解检出D-葡萄糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-***糖。HR-ESI-MS负离子显示：1173.6069[M-H]-，1219.6123[M+HCOO]-，二级质谱出现1041.5623[M-H-Xyl]-，733.4537[M-H-Xyl-Glc-Rha]-，587.3972[M-H-Xyl-Glc-Rha-Rha]-，455.3521[M-H-Xyl-Glc-Rha-Rha-Ara]-，综合质谱数据可推测出化合物11分子量为1174，分子式为C58H94O24。1H NMR(600MHz,C5D5N)中δ5.44(1H,s)为12位烯氢，δ0.90(3H,s,Me-30)，0.92(3H,s,Me-25)，0.95(3H,s,Me-25)，1.04(3H,s,Me-24)，1.11(3H,s,Me-26)，1.13(3H,s,Me-27)，1.28(3H,s,Me-23)为苷元上7个甲基质子信号，13C NMR中δ123.2，144.6表明该化合物为齐墩果烷型的三萜皂苷。δ4.91(2H,d,J＝6.8Hz)，4.91(2H,d,J＝6.8Hz)，6.17(2H,d,J＝8.5Hz)，6.17(2H,s)，6.60(1H,s)分别为***糖、木糖、葡萄糖和两个鼠李糖的端基氢信号。δ1.65(3H,d,J＝6.1Hz)，1.80(3H,d,J＝6.1Hz)为鼠李糖6位的甲基峰。HMBC谱中显示1个糖基的端基质子信号δ6.17(Glc-H-1)与δ177.1存在远程相关，1个糖基的端基质子信号δ4.91(Ara-H-1)与δ89.4(C-3)存在远程相关，以上信息表示有Glc与Ara分别与C-28、C-3位相连。δ6.60(Rha′-H-1)与δ75.9(Glc-C-2)相关，δ6.17(Rha-H-1)与δ76.5(Ara-C-2)相关，δ4.91(Xyl-H-1)与δ69.6(Glc-C-6)相关，进一步确证了糖的连接顺序和连接位置，连接位置同化合物1，相较于化合物1，C-23位无羟基取代。根据以上波谱数据确定化合物11的结构，经过文献和SciFinder查询确定为新化合物，鉴定化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为忍冬苦苷Q。
化合物14：白色无定形性粉末，易溶于甲醇、水、吡啶，Molish反应阳性。酸水解检出D-葡萄糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-***糖。HR-ESI-MS负离子显示：1085.5529[M-H]-，1131.5569[M+HCOO]-，二级质谱出现1043.5431[M-H-Ac]-，897.4872[M-H-Ac-Rha]-，603.3901[M-H-Ac-Rha-Xyl-Glc-]-，471.3499[M-H-Ac-Xyl-Glc-Rha-Ara]-，综合质谱数据可推测出化合物14分子量为1086，分子式为C58H86O22。1H NMR(600MHz,C5D5N)中δ5.46(1H,s)为12位烯氢，δ0.88(3H,s,Me-29)，0.91(3H,s,Me-30)，1.00(3H,s,Me-25)，1.02(3H,s,Me-24)，1.13(3H,s,Me-26)，1.22(3H,s,Me-27)为苷元上6个甲基质子信号δ65.3(C-23)的信号及氢谱中的质子信号δ4.25(H-23a)，3.63(H-23b)表明C-23位有羟基取代，13C NMR中δ123.4，144.9表明该化合物为齐墩果烷型的三萜皂苷。δ4.98(1H,d,J＝7.2Hz)，5.06(1H,d,J＝7.9Hz)，6.13(1H,d,J＝8.1Hz)，6.59(1H,s)分别为***糖、木糖、葡萄糖和鼠李糖的端基氢信号。δ1.78(3H,d,J＝6.1Hz)为鼠李糖6位的甲基峰。HMBC谱中显示1个糖基的端基质子信号δ6.13(Glc-H-1)与δ177.0存在远程相关，1个糖基的端基质子信号δ4.98(Ara-H-1)与δ82.8(C-3)存在远程相关。以上信息表示有Glc与Ara分别与C-28、C-3位相连。δ6.59(Rha-H-1)与δ76.2(Glc-C-2)相关，δ5.06(Xyl-H-1)与δ69.5(Glc-C-6)相关，进一步确证了糖的连接顺序和连接位置，连接位置同化合物10(忍冬苦苷A)。相较于忍冬苦苷A，化合物14含有乙酰基，乙酰基与δ5.53相关。TOCSY谱归属糖上的氢信号，显示δ5.53为木糖上的氢信号，即乙酰基连接在木糖上。综合1H-1H-COSY和HSQC谱，δ5.53与Xyl-C-2相连，Xyl-C-2发生酰化位移，δ5.53与δ5.06(Xyl-H-1)、δ4.17(Xyl-H-3)耦合，所以推断乙酰基与Xyl的C-2位相连。根据以上波谱数据确定化合物14的结构，经过文献和SciFinder查询确定化合物14为新化合物，鉴定该化合物为3-O-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[2-O-Ac-β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为忍冬苦苷R。
化合物16：白色无定形性粉末，易溶于甲醇、水、吡啶，Molish反应阳性。HR-ESI-MS负离子显示：1085.5611[M-H]-，1131.5592[M+HCOO]-，二级质谱出现1043.53837[M-H-Ac]-，911.5076[M-H-Ac-Xyl]-，791.4565[M-H-Ac-Xyl-C4H8O4]-，645.3994[M-H-Ac-Xyl-C4H8O4-Rha]-，603.3890[M-H-Ac-Xyl-C4H8O4-Rha-C2H2O]-，471.3392[M-H-Ac-Xyl-C4H8O4-Rha-C2H2O-Ara]-，综合质谱数据可推测出化合物16分子量为1086，分子式为C58H86O22。1H NMR(600MHz,C5D5N)中δ5.46(1H,s)为12位烯氢，δ0.90(3H,s,Me-29)，0.94(3H,s,Me-30)，0.97(3H,s,Me-25)，1.05(3H,s,Me-24)，1.15(3H,s,Me-26)，1.23(3H,s,Me-27)为苷元上6个甲基质子信号。δ65.1(C-23)的信号及氢谱中的质子信号δ4.29(H-23a)，3.65(H-23b)表明C-23位有羟基取代，13C NMR中δ123.3，144.6表明该化合物为齐墩果烷型的三萜皂苷。δ5.00(1H,d,J＝7.2Hz)，4.97(1H,d,J＝7.5Hz)，6.15(1H,d,J＝8.1Hz)，6.56(1H,s)分别为***糖、木糖、葡萄糖和鼠李糖的端基氢信号，δ1.78(3H,d,J＝6.0Hz)为鼠李糖6位的甲基峰。HMBC谱中显示1个糖基的端基质子信号δ6.15(Glc-H-1)与δ177.1存在远程相关，1个糖基的端基质子信号δ5.00(Ara-H-1)与δ82.6(C-3)存在远程相关。以上信息表示有Glc与Ara分别与C-28、C-3位相连。δ6.56(Rha-H-1)与δ76.0(Glc-C-2)相关，δ4.97(Xyl-H-1)与δ69.3(Glc-C-6)相关，进一步确证了糖的连接顺序和连接位置。连接位置同化合物10(忍冬苦苷A)。相较于忍冬苦苷A，化合物16含有乙酰基，乙酰基与δ5.38相关。HSQC谱显示δ5.38与Xyl-C-4相连，Xyl-C-4发生酰化位移，所以乙酰基与Xyl的C-4位相连。根据以上波谱数据确定化合物16的结构，经过文献和SciFinder查询确定化合物16为新化合物，鉴定该化合物为3-O-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[4-O-Ac-β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为忍冬苦苷S。
化合物19：白色无定形性粉末，易溶于甲醇、水、吡啶，Molish反应阳性。HR-ESI-MS负离子显示：911.5026[M-H]-，957.5098[M+HCOO]-，二级质谱出现791.4598[M-H-C4H8O4]-，645.4018[M-H-C4H8O4-Rha]-，603.3911[M-H-C4H8O4-Rha-C2H2O]-，471.3478[M-H-C4H8O4-Rha-C2H2O-Ara]-，综合质谱数据可推测出化合物19分子量为912，分子式为C47H76O17。1H NMR(600MHz,C5D5N)中δ5.48(1H,s)为12位烯氢，δ0.82(3H,s,Me-29)，0.88(3H,s,Me-30)，0.92(3H,s,Me-25)，0.99(3H,s,Me-24)，1.14(3H,s,Me-26)，1.21(3H,s,Me-27)为苷元上6个甲基质子信号。13C NMR中δ123.4，145.0表明该化合物为齐墩果烷型的三萜皂苷，δ65.3(C-23)的信号及氢谱中的质子信号δ4.29(H-23a)，3.64(H-23b)表明C-23位有羟基取代。δ4.99(1H,d,J＝7.2Hz)，6.23(1H,d,J＝8.1Hz)，6.64(1H,s)分别为***糖/木糖、葡萄糖和鼠李糖的端基氢信号。HMBC谱中显示1个糖基的端基质子信号δ6.23(Glc-H-1)与δ177.1存在远程相关，1个糖基的端基质子信号δ4.99(Ara/Xyl-H-1)与δ82.7存在远程相关，HSQC谱中δ4.99(d,J＝7.2Hz,1H)与δ107.4相连，通过文献(Zhong,J.,Zhao,X.,Li,H.,et al.,Helvetica Chimica Acta,2016,99(3).)及化合物13、15、16数据对比δ4.99(d,J＝7.2Hz,1H)为Ara的端基氢信号，以上信息表示有Glc与C-28相连，Ara与C-3位相连。根据Rha-C1、C-6化学位移与Glc的C-2为相连。进一步确证了糖的连接顺序和连接位置。根据以上波谱数据确定化合物19的结构，经过***的文献和SciFinder查询，确定化合物19为新化合物，鉴定该化合物为3-O-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名为忍冬苦苷T。
3.3其它已知化合物
化合物1的性状和波谱数据与文献(SonK H,Jung KY,Chang H W,etal.Phytochemistry,1994,35(4):1005-8.)化合物Loniceroside B基本一致，鉴定化合物1为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷。
化合物4的性状和波谱数据与文献(Yoshikawa M,Murakami T,Oomiinami H,etal.Phytochemistry,2001,57(3):469-478.)中化合物基本一致，鉴定化合物4为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷，为忍冬属首次分离得到的化合物。
化合物8的性状和波谱数据与文献(Yoshikawa M,Murakami T,Oomiinami H,etal.Phytochemistry,2001,57(3):469-478.)化合物Astrantiasponin Ⅶ基本一致，鉴定化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，为忍冬属首次分离得到的化合物。
化合物10的性状和波谱数据与文献(SonK H,Jung K Y,Chang H W,etal.Phytochemistry,1994,35(4):1005-8.)化合物Loniceroside A对照基本一致，鉴定该化合物为3-O-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷。
化合物12的性状和波谱数据与文献(Abdelmalek,Rezgui,Anne-Claire,etal.Phytochemistry,2016,123(3):40-47.)中化合物基本一致，鉴定化合物为3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，为金银花首次分离获得。
化合物13的性状和波谱数据与文献(Kuroda M,Shizume T,Mimaki Y.Chemical&Pharmaceutical Bulletin,2014,62(1):92-96.)化合物忍冬苦苷I基本一致，鉴定化合物为3-O-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[3-O-Ac-β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷。
化合物15的性状和波谱数据与文献(Yahara S,Kobayashi N,Nohara T.JapaneseJournal of Pharmacognosy,1990,44(4):339-342.)中化合物基本一致，鉴定化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-[3-O-Ac-β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷。
化合物17的性状和波谱数据与文献(Son K H,Jung K Y,Chang H W,etal.Phytochemistry,1994,35(4):1005-8.)中化合物基本一致，鉴定化合物为常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷基本一致。
化合物18的性状和波谱数据与文献(陈昌祥,王薇薇,倪伟,等.云南植物研究,2000,22(2):202-208.)中化合物基本一致，鉴定化合物为3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃***糖基-常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃木糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷。
4单体化合物的体外抗炎活性研究
4.1实验材料
SZX16型显微镜及DP2-BSW图像采集***(日本Olympus公司)，Thermal CO2培养箱(美国Thermal公司)，酶标仪(美国Molecular Devices公司)，二氧化碳细胞培养箱、生物安全柜(美国Thermo Fisher公司)，BSA2245-CW分析天平(赛多利斯科学仪器有限公司)。CCK8、NO检测试剂盒(Griess试剂)(上海碧云天生物技术有限公司)，1％青霉素/链霉素、DMEM高糖培养基(美国Hyclone公司)，FBS胎牛血清(美国Gibco公司)，细菌脂多糖(LPS，Escherichia coli 055:B5)、吲哚美辛、二甲基亚枫(DMSO)(美国Sigma-Aldrich公司)，数据采用GraphPad Prism 6.0软件进行统计学分析。小鼠单核巨噬细胞RAW264.7购自中国科学院细胞库。
实验用8种皂苷单体化合物(化合物1-4、6、10、13和14)为如2.1“提取与分离”所述从金银花栽培品九丰一号药材中提取分离获得，其结构式可见表1。
4.2实验方法
4.2.1化合物对Raw 264.7细胞的毒性作用
取8种皂苷单体化合物适量，加入DMSO配制成浓度为100μM的溶液依次稀释，得到化合物浓度分别为50、25、12.5、6.25μM。
RAW 264.7细胞培养于含10％FBS和双抗的DMEM培养基中，于37℃5％CO2培养箱中培养，每2-3天传代一次。传代时，无菌条件下在操作台上将培养瓶中RAW 264.7细胞除去细胞培养基，加入新鲜的3mL DMEM后，吹打混匀，取100μL的RAW 264.7细胞以1×104细胞·mL-1浓度接种于96孔板，细胞培养箱中培养24h。24h后加入不同浓度的100μL的化合物溶液处理细胞(5组)，每组6个复孔，继续培养24h，然后每孔加入10μL CCK8试剂，培养4h后，酶标仪检测450nm波长下各孔的OD值，计算细胞存活率。计算公式＝实验组OD均值/对照组OD均值×100％。
4.2.2化合物对LPS诱导的RAW 264.7细胞释放NO的影响
将RAW 264.7细胞以每孔1×104细胞的密度接种于96孔板中，分别加入不同组别药物，预孵育1h后，加入300ng·ml-1LPS，置于5％CO2空气培养箱中培养24h。其中，不同组别设置为：以培养基作为对照组，300ng·ml-1LPS为模型组，50μM化合物为药物组，50μM吲哚美辛为阳性药物组，每组5个复孔。在37℃细胞培养箱中处理24小时后，取50μL细胞上清液于96孔细胞培养板中，先后加入50μL Griess Reagent I和50μL Griess Reagent II试剂，混匀，用酶标仪在540nm处检测其吸光度。通过Griess反应测定NO的含量来测定培养基中NO的浓度，并计算NO抑制率。
4.3实验结果
4.3.1细胞毒实验结果
不同剂量的化合物(6.25、12.5、25、50和100μM)处理RAW 264.7 24h后，通过CCK8实验检测细胞的增殖。实验结果表明：与对照组相比，≤100μM的化合物浓度下，化合物对细胞的活性没有影响，不具有统计学差异(P>0.05)，说明化合物≤100μM下不具有细胞毒性。
4.3.2抗炎实验结果
不同化合物(50μM)对LPS诱导的RAW 264.7细胞NO抑制率见表2。并且，采用单因素方差分析法(SPSS 19.0统计学软件)对不同组别化合物的NO抑制率进行多重比较，结果显示，与模型组比较，化合物1、2、3、4、6、10、13、14以及吲哚美辛的NO抑制率均具有显著性差异(P＜0.01)，说明各化合物均具有良好的抗炎活性。此外，新化合物6与已知化合物1、4、10、13具有显著性差异(P＜0.01)，说明其抗炎活性显著优于上述已知化合物；新化合物3与已知化合物1、10具有显著性差异(P＜0.05)，与已知化合物4、13无显著性差异(P＞0.05)，说明其抗炎活性优于化合物1、10，与化合物4、13相当；新化合物2、14与已知化合物1、4、10、13无显著性差异(P＞0.05)，说明其抗炎活性与已知化合物相当。
上述结果表明，8种皂苷单体化合物均具有良好的抗炎活性，尤其新化合6的抗炎活性更为突出。
表2化合物(50μM)对LPS诱导的RAW 264.7细胞NO抑制率(n＝5)
Figure BDA0003279545450000271
备注：*表示新化合物。
以上对本申请实施例进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本申请的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明仅用于帮助理解本申请的方法及其核心思想。同时，本领域技术人员依据本申请的思想，基于本申请的具体实施方式及应用范围上做出的改变或变形之处，都属于本申请保护的范围。综上所述，本说明书内容不应理解为对本申请的限制。

Claims (10)

1.一种下式I的齐墩果烷型三萜皂苷类化合物或其药学上可接受的盐、酯、外消旋体、R-异构体、S-异构体、同位素标记物、溶剂化物、代谢产物或前药，
Figure FDA0003279545440000011
其中R1是氢、羟基、卤素、C1-12烷基、C1-12卤代烷基或羟甲基，R2是氢、C1-12烷基、C1-12卤代烷基或含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha的糖或其酰化衍生物的碳水化合物，R3是含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha、Xyl的糖或其酰化衍生物的碳水化合物。
2.根据权利要求1所述的三萜皂苷类化合物，其中R1是C1-12烷基或羟甲基，R2是氢或含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha的糖或其酰化衍生物的碳水化合物，R3是含有一个或多个选自Glc、Ara、Rha、Xyl的糖或其酰化衍生物的碳水化合物。
3.根据权利要求2所述的三萜皂苷类化合物，其中R1是甲基或羟甲基，R2是氢、Ara、Rha(1→2)Ara或Glc(1→2)Ara，R3是Rha(1→2)[Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)Glc、Xyl(1→3)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Xyl(1→3)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[Glc(1→6)]Glc、Rha(1→2)[3-O-Ac-Glc(1→6)]Glc、3-O-Ac-Xyl(1→6)Glc或Xyl(1→6)Glc。
4.根据权利要求3所述的三萜皂苷类化合物，其中R1是甲基或羟甲基，R2是Ara或Rha(1→2)Ara，R3是Rha(1→2)[Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)Glc、Xyl(1→3)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc、Xyl(1→3)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc或Rha(1→2)[3-O-Ac-Glc(1→6)]Glc。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的三萜皂苷类化合物，其中R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Xyl(1→3)[3-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Xyl(1→3)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[3-O-Ac-Glc(1→6)]Glc；或者R1＝甲基，R2＝Rha(1→2)Ara，R3＝Rha(1→2)[Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Ara，R3＝Rha(1→2)[2-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Ara，R3＝Rha(1→2)[4-O-Ac-Xyl(1→6)]Glc；或者R1＝羟甲基，R2＝Ara，R3＝Rha(1→2)Glc。
6.一种药物制剂，包含权利要求1至5中任一项所述的三萜皂苷类化合物和药学上可接受的辅料；
优选地，所述药物制剂的剂型是液体剂型或固体剂型；
更优选地，所述液体剂型是糖浆剂、注射溶液、悬浮液或乳剂；
特别优选地，所述固体剂型是片剂、锭剂、胶囊、滴丸、丸剂、颗粒剂、粉剂、霜剂或栓剂；
尤其优选地，所述辅料选自以下中的一种或多种：调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、粘合剂、增稠剂和增溶剂。
7.根据权利要求6所述的药物制剂，其中所述药物制剂进一步包括一种或多种抗炎药；
优选地，所述抗炎药为非甾体类抗炎药；
优选地，所述非甾体类抗炎药选自以下中的一种或多种：阿司匹林、对乙酰氨基酚、吲哚美辛、萘普生、萘普酮、双氯芬酸、布洛芬、尼美舒利、罗非昔布和塞来昔布。
8.一种制备权利要求1至5中任一项所述的三萜皂苷类化合物的方法，其中所述方法包括如下步骤：
(1)取适量的金银花药材作为原料，使用40％～95％的乙醇水溶液进行冷浸、渗漉、回流或超声提取，得到提取液；
(2)对所述提取液进行浓缩，得到浓缩液；
(3)利用大孔吸附树脂分离所述浓缩液，洗脱剂依次为水、35％至45％乙醇水溶液，65％至75％乙醇水溶液和约95％乙醇水溶液，收集65％至75％乙醇水溶液的洗脱液经浓缩干燥后得到总皂苷提取物；以及
(4)所述总皂苷提取物经过硅胶柱层析，得到式I的三萜皂苷类化合物。
9.根据权利要求8所述的方法，所述步骤(1)中的所述金银花药材为金银花栽培品九丰一号；
优选地，所述步骤(1)中的所述提取的方法为渗漉法；
优选地，所述步骤(1)中的所述乙醇水溶液的浓度为约50％；
优选地，所述步骤(2)中的所述浓缩的方法为减压旋蒸法；
优选地，所述步骤(3)中的所述洗脱剂依次为水、约40％乙醇水溶液，约70％乙醇水溶液和约95％乙醇水溶液；
优选地，所述步骤(3)中的所述大孔吸附树脂为HPD100大孔吸附树脂；
优选地，所述步骤(4)中的所述硅胶为粒度100至400目的正向硅胶；
特别优选地，所述正向硅胶柱层析的洗脱流动相为二氯甲烷-甲醇-水体积比为3.6:(1.1～1.4):0.1的混合溶剂；
尤其优选地，所述步骤(4)进一步包括重结晶步骤、反向硅胶柱层析步骤和/或半制备HPLC分离步骤；
又优选地，所述反向硅胶柱层析步骤是ODS柱层析步骤；
又优选地，所述反向硅胶柱层析步骤的洗脱剂是40％至70％甲醇，优选地40％至60％甲醇；
又优选地，所述半制备HPLC分离步骤的流动相为乙腈-0.1％甲酸水(30∶70)、乙腈-0.1％甲酸水(31∶69)、乙腈-0.1％甲酸水(32∶68)、乙腈-0.1％甲酸水(35∶65)和/或甲醇-0.1％甲酸水(65∶35)；
又优选地，所述半制备HPLC分离步骤的检测波长为203nm；
又优选地，所述半制备HPLC分离步骤的流速为3mL·min-1。
10.权利要求1至5中任一项所述的三萜皂苷类化合物或权利要求6或7所述的药物制剂在制备用于治疗和/或预防炎症的药物中的用途；
优选地，所述炎症为一氧化氮介入的炎症反应；
更优选地，所述一氧化氮是由巨噬细胞释放的；
特别优选地，所述一氧化氮是由细菌脂多糖诱导的巨噬细胞释放的。
CN202111139210.5A 2021-09-26 2021-09-26 齐墩果烷型三萜皂苷及其制备方法与用途 Active CN113683657B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111139210.5A CN113683657B (zh) 2021-09-26 2021-09-26 齐墩果烷型三萜皂苷及其制备方法与用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111139210.5A CN113683657B (zh) 2021-09-26 2021-09-26 齐墩果烷型三萜皂苷及其制备方法与用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113683657A true CN113683657A (zh) 2021-11-23
CN113683657B CN113683657B (zh) 2022-09-23

Family

ID=78587389

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111139210.5A Active CN113683657B (zh) 2021-09-26 2021-09-26 齐墩果烷型三萜皂苷及其制备方法与用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113683657B (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102485741A (zh) * 2010-12-03 2012-06-06 沈阳药科大学 降甲基齐墩果烷型三萜类化合物及其制备方法和应用
CN106892957A (zh) * 2015-12-17 2017-06-27 广州中医药大学 一种齐墩果烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法和应用
CN109912680A (zh) * 2019-04-24 2019-06-21 中国人民解放军第四军医大学 一种齐墩果烷型三萜皂苷及其提取分离方法和应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102485741A (zh) * 2010-12-03 2012-06-06 沈阳药科大学 降甲基齐墩果烷型三萜类化合物及其制备方法和应用
CN106892957A (zh) * 2015-12-17 2017-06-27 广州中医药大学 一种齐墩果烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法和应用
CN109912680A (zh) * 2019-04-24 2019-06-21 中国人民解放军第四军医大学 一种齐墩果烷型三萜皂苷及其提取分离方法和应用

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ABDELMALEK REZGUI 等: "Oleanolic acid and hederagenin glycosides from Weigela stelzneri", 《PHYTOCHEMISTRY》 *
CATHERINE LAVAUD等: "Triterpenoid saponins from the stem bark of Elattostachys apetala", 《PHYTOCHEMISTRY》 *
KUN HO SON 等: "TRITERPENOID SAPONINS FROM THE AERIAL PARTS OF LONICERA JAPONZCA", 《PHYTOCHEMISTRY》 *
MINPEI KURODA 等: "Triterpene Glycosides from the Stems and Leaves of Lonicera japonica", 《CHEMICAL&PHARMACEUTICAL BULLETIN》 *
王燕 等: "金银花及其同属植物化学成分研究进展", 《中国中药杂志》 *
矢原正治 等: "忍冬のトリテルペノイド配糖体について", 《THE JAPANESE SOCIETY OF PHARMACOGONSY》 *
陈昌祥 等: "金银花花蕾中的新三萜皂甙", 《云南植物研究》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113683657B (zh) 2022-09-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8829167B2 (en) Foliamangiferosides, preparation method and use thereof
AU2008323968B2 (en) Extract of fraxinus excelsior seeds and therapeutic applications therefor
Cai et al. Iridoids with anti-inflammatory effect from the aerial parts of Morinda officinalis How
Qin et al. Anti-inflammatory activity of isobutylamides from Zanthoxylum nitidum var. tomentosum
Xiong et al. Triterpene saponins with anti-inflammatory activity from the stems of Entada phaseoloides
Song et al. Three novel alkaloids from Portulaca oleracea L. and their anti-inflammatory bioactivities
Tang et al. Study on anti-inflammatory efficacy and correlative ingredients with pharmacodynamics detected in acute inflammation rat model serum from Caulis Lonicerae japonicae
Hou et al. Octyl ester of ginsenoside compound K as novel anti‐hepatoma compound: Synthesis and evaluation on murine H22 cells in vitro and in vivo
WO2017219510A1 (zh) 一种具有抗肿瘤活性和抗炎活性的醌式查尔酮碳苷二聚体化合物及其制备方法
CN113683657B (zh) 齐墩果烷型三萜皂苷及其制备方法与用途
León-Rivera et al. Resin glycosides from Ipomoea tyrianthina and their sedative and vasorelaxant effects
WO2013097665A1 (zh) 皂苷衍生物及其用途
WO2013097661A1 (zh) 呋甾烷型皂苷衍生物及其用途
Lu et al. Diversified cassane family diterpenoids from the leaves of Caesalpinia minax exerting anti-neuroinflammatory activity through suppressing MAPK and NF-κB pathways in BV-2 microglia
CN105796560A (zh) 环丙沙星的药物组合物及其在生物医药中的应用
CN113735923B (zh) 二聚体环烯醚萜苷及其制备方法与用途
CN115368425B (zh) 三萜类化合物及其制备方法与抗炎用途
Li et al. Effects and mechanism of action of Chrysanthemum morifolium (Jinsi Huangju) on hyperlipidemia and non-alcoholic fatty liver disease
CN107243003A (zh) 厥素类化合物在制备抗炎药物中的应用
Li et al. Five new cucurbitane triterpenoids with cytotoxic activity from Hemsleya jinfushanensis
Sun et al. Puerol and pueroside derivatives from Pueraria lobata and their anti-inflammatory activity
CN114057764A (zh) 具有抗炎活性的乌药烷型二聚倍半萜及其制备方法和用途
Li et al. Saponins from Aesculus wilsonii seeds exert anti-inflammatory activity through the suppression of NF-κB and NLRP3 pathway
KR100547253B1 (ko) 암 예방 및 치료에 유효한 진세노사이드 유도체
US20040247698A1 (en) Erectile Dysfunction Treatment

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant