CN113557022A

CN113557022A - 用罗达司他乙酯治疗肺动脉高压的给药方案和方法

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Publication number: CN113557022A
Application number: CN202080016400.5A
Authority: CN
Inventors: M·帕拉西奥斯; E·J·高克尔; S·A·玲; M·阿隆索-加力西亚
Original assignee: Altawante Science
Current assignee: Altawante Science; Altavant Sciences GmbH
Priority date: 2019-01-30
Filing date: 2020-01-30
Publication date: 2021-10-26
Also published as: WO2020157577A8; EP3917531A1; JP2022518944A; MX2021009055A; WO2020157577A1; US11607413B2; US20240041877A1; US20200237759A1; CA3128327A1; AU2020213746A1; KR20210133953A

Abstract

提出了用于治疗肺动脉高压的每日给药方案。所述方案采用两种不同的剂型形式。每个剂型包括约600mg至约800mg量的(S)‑乙基8‑(2‑氨基‑6‑((R)‑1‑(5‑氯‑[1,1'‑联苯]‑2‑基)‑2,2,2‑三氟乙氧基)嘧啶‑4‑基)‑2,8‑二氮杂螺[4.5]癸烷‑3‑羧酸酯。还存在提供每日给药方案的其他方法。还提出了用于治疗肺动脉高压的数种方法。提出了一种将血清素生物合成水平降低至少50％的方法。还提出了实现AUC_0‑tau≥2530ng.hr/mL(S)‑8‑(2‑氨基‑6‑((R)‑1‑(5‑氯‑[1.1'‑联苯]‑2‑基)‑2,2,2‑三氟乙氧基)嘧啶‑4‑基)‑2,8‑二氮杂螺[4.5]癸烷‑3‑羧酸的一种方法。提出了一种将尿5‑HIAA降低>50％的方法。

Description

用罗达司他乙酯治疗肺动脉高压的给药方案和方法

本公开的背景

1.本公开的领域

本公开涉及用于治疗肺动脉高压的每日给药方案。本公开还涉及用于治疗肺动脉高压的方法。本公开进一步涉及在一段时间内降低血清素生物合成水平的方法。本公开还进一步涉及在一段时间内实现AUC_0-tau水平提高的方法。本公开进一步涉及在一段时间内实现尿中5-HIAA降低的方法。

2.现有技术说明

血清素(5-羟色胺、5-HT)是一种神经递质，其通过作用于神经元、平滑肌和其他细胞类型来调节中枢和外周功能。5-HT参与多种生理和心理过程的控制和调节。在中枢神经***(CNS)中，5-HT调节情绪、食欲和其他行为功能。在胃肠(GI)***中，5-HT具有一般的促动力作用，是胃肠道和大脑之间感觉(例如，恶心和饱腹感)的重要介体。根据报告，外周5-HT信号传导***失调与多种病症的病因有关(例如，参见：Mawe,G.M.&Hoffman,J.,Serotonin Signalling in the Gut-functions,Dysfunctions and TherapeuticTargets.Nature Reviews.Gastroenterology&Hepatology 10,473-486(2013)；Gershon,M.D.5-hydroxytryptamine(serotonin)in the Gastrointestinal Tract.CurrentOpinion in Endocrinology,Diabetes,and Obesity 20,14-21(2013)；Lesurtel,M.,Soll,C,Graf,R.&Ciavien,P.-A.Role of Serotonin in the Hepato-gastrointestinalTract:An Old Molecule for New Perspectives.Cellular and Molecular LifeSciences:CMLS 65,940-52(2008)。这些包括骨质疏松症(例如，Kode,A,et al.,FOXO1Orchestrates the Bone-suppressing Function of Gut-derived Serotonin,TheJournal of Clinical Investigation 122,3490-503(2012)；Yadav,V,K.et al.,Pharmacological Inhibition of Gut-derived Serotonin Synthesis is a PotentialBone Anabolic Treatment for Osteoporosis.Nature Medicine 16,308-12(2010)；Yadav,V.K,et al.,Lrp5 Controls Bone Formation by Inhibiting SerotoninSynthesis in the Duodenum,Cell 135,825-37(2008)、癌症(例如，Liang,C,et al.,Serotonin Promotes the Proliferation of Serum-deprived HepatocellularCarcinoma Cells Via Upregulation of FOX03a.Molecular Cancer 12,14(2013)；Soil,C.et al.,Serotonin Promotes Tumor Growth in Human HepatocellularCancer.Hepatology 51,1244-1254(2010)；Pai,V.P et al.,Altered SerotoninPhysiology in Human Breast Cancers Favors Paradoxical Growth and CellSurvival.Breast Cancer Research:BCR 11,R81(2009)；Engelman,K.,Lovenberg,W.&Sjoerdsma,A.Inhibition of Serotonin Synthesis by Para-chlorophenylalanine inPatients with The Carcinoid Syndrome.The New England Journal of Medicine 277,1103-8(1967)、心血管疾病(例如，Robiolio,P.A,et al.,Carcinoid Heart Disease:Correlation of High Serotonin Levels with Valvular Abnormalities Detected byCardiac Catheterization and Echocardiography.Circulation 92,790-795(1995)、糖尿病(例如，Sumara,G.,Sumara,O.,Kim,J.K.&Karsenty,G.Gut-derived Serotonin is aMultifunctional Determinant to Fasting Adaptation.Cell Metabolism 16,588-600(2012)、动脉粥样硬化(例如，Ban,Y.et al.,Impact of Increased Plasma SerotoninLevels and Carotid Atherosclerosis on Vascular Dementia.Atherosclerosis 195,153-9(2007))以及胃肠道疾病(例如，Manocha,M.&Khan,W.I.Serotonin and GIDisorders:An Update on Clinical and Experimental Studies.Clinical andTranslational Gastroenterology 3,el 3(2012)；Ghia,J.-E.et al.,Serotonin has aKey Role in Pathogenesis of Experimental Colitis.Gastroenterology 137,1649-60(2009)；Sikander,A.,Rana,S.V.&Prasad,K.K.,Role of Serotonin inGastrointestinal Motility and Irritable Bowel Syndrome.Clinica Chimica Acta；International Journal of Clinical Chemistry403,47-55(2009)；Spiller,R,RecentAdvances in Understanding the Role of Serotonin in Gastrointestinal Motilityin Functional Bowel Disorders:Alterations In 5-HT Signalling and Metabolismin Human Disease.Neurogastroenterology and Motility:The Official Journal ofThe European Gastrointestinal Motility Society 19Suppl 2,25-31(2007)；Costedio,M.M.,Hyman,N.&Mawe,G,M,Serotonin and its Role in Colonic Functionand In Gastrointestinal Disorders.Diseases of the Colon and Rectum 50,376-88(2007)；Gershon,M.D.&Tack,J.,The Serotonin Signalling System:From BasicUnderstanding to Drug Development for Functional GIDisorders.Gastroenterology 132,397-14(2007)；Mawe,G.M.,Coates,M.D.&Moses,P.L.Review Article:Intestinal Serotonin Signalling In Irritable BowelSyndrome.Alimentary Pharmacology&Therapeutics 23,1067-76(2006)；Crowell,M.D.Role of Serotonin in the Pathophysiology of The Irritable BowelSyndrome.British Journal of Pharmacology 141,1285-93(2004)、肺病(例如，Lau,W.K.W.et al.,The Role of Circulating Serotonin in the Development of ChronicObstructive Pulmonary Disease.PloS One 7,e31617(2012)；Egermayer,P.,Town,G.I.&Peacock,A.J.Role of Serotonin in the Pathogenesis of Acute and ChronicPulmonary Hypertension.Thorax 54,161-168(1999)、炎症性疾病(例如，Margolis,K.G.et al.,Pharmacological Reduction of Mucosal but Not Neuronal SerotoninOpposes Inflammation in Mouse Intestine.Gut doi:10.1 136/gutjnl-2013-304901(2013)；Duerschmied,D.et al.,Platelet Serotonin Promotes the Recruitment ofNeutrophils to Sites of Acute Inflammation in Mice.Blood 121,1008-15(2013)；Li,N.et al.,Serotonin Activates Dendritic Cell Function in the Context of GutInflammation.The American Journal of Pathology 178,662-71(2011)或肝脏疾病或失调(例如，Ebrahimkhani,M.R.et al.,Stimulating Healthy Tissue Regeneration byTargeting The 5-HT2B Receptor in Chronic Liver Disease.Nature Medicine 17,1668-73(2011)。阻断或刺激各种5-HT受体的大量药剂也提示了与5-HT失调有关的广泛医学疾病(例如，参见：Wacker,D.et al.,Structural Features for FunctionalSelectivity at Serotonin Receptors,Science(New York N Y.)340,615-9(2013)。

5-HT生物合成的限速步骤为通过双氧羟基化色氨酸，其在存在辅因子(6R)-L-红-5,6,7,8-四氢生物蝶呤(BH4)下由色氨酸羟化酶(TPH；EC 1.14.16.4)催化。随后将所得的氧化产物5-羟基色氨酸(5-HTT)通过芳族氨基酸脱羧酶(AAAD；EC4.1.1.28)脱羧以产生5-HT。TPH与苯丙氨酸羟化酶(PheOH)和酪氨酸羟化酶(TH)一起，均属于蝶呤依赖性芳香族氨基酸羟化酶家族。

已确定TPH的两种脊椎动物同工型，即TPH1和TPH2。TPH1主要在松果体和非神经元组织中表达，例如位于胃肠(GI)道的肠嗜铬细胞(EC)。TPH2(大脑中的主要形式)仅在神经元细胞中表达，例如缝背或肌间神经丛细胞。分离了参与5-HT生物合成的外周和中枢***，并且5-HT无法穿越血脑屏障。因此，5-HT的外周药理作用可通过影响外周的TPH(主要是肠道中的TPH1)的药物来调节。

已知存在少量苯丙氨酸衍生的TPH1抑制剂。一个实例为，对氯苯丙氨酸(pCPA)是一种非常弱和非选择性的TPH不可逆抑制剂，已被证明可有效治疗类癌患者的化疗引起的呕吐以及腹泻。但是，pCPA集中分布，因此，其给药与患者和动物中抑郁症的发作和中枢神经***功能的其他改变有关。对乙炔基苯丙氨酸是一种比pCPA更具选择性和更有效的TPH抑制剂(Stokes,A,H.,et al.p-Ethynylphenylalanine:A Potent Inhibitor ofTryptophan Hydroxylase.Journal of Neurochemistry 74,2067-73(2000)，但它还会影响中枢5-HT的产生，并且如pCPA一样，被认为不可逆地干扰TPH的合成行为(并可能与其他蛋白质相互作用)。

最近，根据报告，较大的苯丙氨酸衍生的TPH抑制剂可降低肠道5-HT浓度而不会影响脑部5-HT水平(Zhong,H.et al.,Molecular dynamics simulation of tryptophanhydroxylase-1:binding modes and free energy analysis to phenylalaninederivative inhibitors.International Journal of Molecular Sciences 14,9947-62(2013)；Ouyang,L.,et al.,Combined Structure-Based Pharmacophore and 3D-QSAStudies on Phenylalanine Series Compounds as TPH1 Inhibitors.InternationalJournal of Molecular Sciences 13,5348-63(2012)；Camilleri,M.LX-1031,ATryptophan5-hydroxylase Inhibitor,and its Potential in Chronic DiarrheaAssociated with Increased Serotonin.Neurogastroenterology and Motility:TheOfficial Journal of the European Gastrointestinal Motility Society 23,193-200(2011)；Cianchetta,G.,et al.,Mechanism of Inhibition of Novel TryptophanHydroxylase Inhibitors Revealed by Co-crystal Structures and KineticAnalysis.Current Chemical Genomics 4,19-26(2010)；Jin,H.,et al.,Substituted 3-(4-(l,3,5-triazin-2-yl)-phenyl)-2-aminopropanoic Acids as Novel TryptophanHydroxylase Inhibitors.Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters 19,5229-32(2009)；Shi,Z.C.,et al.,Modulation of Peripheral Serotonin Levels by NovelTryptophan Hydroxylase Inhibitors for the Potential Treatment of FunctionalGastrointestinal Disorders.Journal of Medicinal Chemistry 51,3684-7(2008)；Liu,Q.,et al.,Discovery and Characterization of Novel Tryptophan HydroxylaseInhibitors That Selectively Inhibit Serotonin Synthesis in theGastrointestinal Tract.The Journal of Pharmacology and ExperimentalTherapeutics 325,47-55(2008)。

螺环化合物为已知，其充当TPH的抑制剂并且可用于治疗与外周血清素相关的各种疾病和病症，包括肺动脉高压(PAH)和相关性肺动脉高压(APAH)的心血管疾病以及类癌综合征。(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基])-2,2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸盐和(S)-8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸为已知化合物。

作为治疗和预防5-HT相关疾病和调节和/或降低血清素水平(特别是外周血清素水平)以及尿液中5-HIAA水平的手段，需要选择性降低组织5-HT(特别是肠5-HT和肺5-HT)的水平。还需要在血流中达到理想的AUC_0-tau水平。更特别需要治疗或预防肺动脉高压(PAH)和相关性肺动脉高压(APAH)的心血管疾病。

本公开的简介

根据本公开，提出了用于治疗肺动脉高压的每日给药方案。所述方案采用两种不同的剂型形式。每个剂型包括约600mg至约800mg量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯。

此外，根据本公开，提出了用于治疗肺动脉高压的每日给药方案。所述方案包括约1200mg至约1600mg量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯。

同样，根据本公开，提出了用于治疗肺动脉高压的方法。所述方法包含向有需要的人类患者每日给予约1200mg至约1600mg量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯的步骤。

进一步根据本公开，提出了一种在治疗开始后14天内将有需要的人类患者的血清素生物合成水平降低至少50％的方法。所述方法包含向人类患者每日给予约800mg至约1600mg量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯的步骤。

更进一步根据本公开，提出了在开始给药后14天内AUC_0-tau达到≥2530ng.hr/mL(S)-乙基-8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯的方法。所述方法包含向人类患者每日给予有效量(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯的步骤。

根据本公开，提出了一种在开始给药后14天内在人类患者中实现尿中5-HIAA降低>50％的方法。所述方法包含向人类患者每日给予有效量(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯的步骤。

另外，根据本公开，提出了用于治疗肺动脉高压的方法。所述方法包含向有需要的人类患者每日给予一定量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基])-2,2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸盐的步骤，从而足以在开始给药后14天内达到AUC_0-tau≥2530ng.hr/mL(S)-8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1.1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸。

根据本公开，提出了用于治疗肺动脉高压的方法。所述方法包含向有需要的人类患者每日给予一定量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯的步骤，从而足以在开始给药后14天内达到尿液5-HIAA降低>50％。

附图简要说明

本文参考以下附图描述了本公开的实施方案。

图1为根据本公开所述的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基])-2,2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸盐的结晶化合物(结晶3型)的XRPD图。

图2为与图1不同的多晶型的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基])-2,2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸盐的结晶化合物(结晶1型)的XRPD图。

图3a为空腹条件下给予100-2000mg KAR5585后KAR5585的平均(±SD)血浆浓度-时间曲线图–队列1-6(线性标度)。

图3b为空腹条件下给予100-2000mg KAR5585后KAR5417的平均(±SD)血浆浓度-时间曲线图–KAR5417队列1-6(线性标度)。

图4a为空腹条件下给予100-2000mg KAR5585后KAR5585和KAR5417的平均(±SD)血浆浓度-时间曲线图–KAR5585队列1-6(对数标度)。

图4b为空腹条件下给予100-2000mg KAR5585后KAR5585和KAR5417的平均(±SD)血浆浓度-时间曲线图–KAR5417队列1-6(对数标度)。

图5a为单次口服KAR5585后空腹健康志愿者中KAR5585和KAR5417的剂量对血浆C_max值的图。

图5b为单次口服KAR5417后空腹健康志愿者中KAR5585和KAR5417的剂量对血浆C_max值的图。

图6a为单次口服KAR5585后空腹健康志愿者中KAR5585和KAR5417的剂量对血浆AUC_inf值的图。

图6b为单次口服KAR5585后空腹健康志愿者中KAR5585和KAR5417的剂量对血浆AUC_inf值的图。

图7为单次口服KAR5585后空腹健康志愿者中作为KAR5417从尿液中排出剂量的平均(±SD)总百分比的条形图。

图8为单次口服KAR5585后空腹健康志愿者中KAR5417的累积平均(±SD)尿液回收率与采样时间图。

图9a为KAR5585 BID口服给药14天后空腹和进食健康志愿者中KAR5585的平均浓度与时间曲线图(半对数标度)

图9b为KAR5585 BID口服给药14天后空腹和进食健康志愿者中KAR5417的平均浓度与时间曲线图(半对数标度)

图10为100mg KAR5585 BID口服给药14天后空腹健康志愿者中KAR5585和KAR5417的平均(±SD)浓度与时间曲线图。

图11为100mg KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5585和KAR5417的平均(±SD)浓度与时间曲线图。

图12为200mg KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5585和KAR5417的平均(±SD)浓度与时间曲线图。

图13为400mg KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5585和KAR5417的平均(±SD)浓度与时间曲线图。

图14a为KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5585的剂量与C_max图。

图14b为KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5417的剂量与C_max图。

图15a为KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5585的剂量与C_max图。

图15b为KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5417的剂量与C_max图。

图16a为KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5585的剂量与AUC_0-12图。

图16b为KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5417的剂量与AUC_0-12图。

图17a为KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5585的剂量与AUC_0-12图。

图17b为KAR5585 BID口服给药14天后进食健康志愿者中KAR5417的剂量与AUC_0-12图。

图18a为进食和空腹条件下给予400mg KAR5585后KAR5585的平均(±SD)血浆浓度-时间曲线图–队列3A和3B(线性标度)。

图18b为进食和空腹条件下给予400mg KAR5585后KAR5417的平均(±SD)血浆浓度-时间曲线图–队列3A和3B(线性标度)。

图19a为进食和空腹条件下给予400mg KAR5585后KAR5585的平均(±SD)血浆浓度-时间曲线图–队列3A和3B(对数标度)。

图19b为进食和空腹条件下给予400mg KAR5585后KAR5417的平均(±SD)血浆浓度-时间曲线图–队列3A和3B(对数标度)。

图20为第14天时血浆5-HIAA与AUC_0-24相对于基线的变化百分比图。

公开的详细说明

(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯(“KAR5585”)是一种有用的TPH1抑制剂。美国专利第9,199,994号实施例63i中公开了KAR5585的无定形形式。KAR5585的结构如下：

KAR5585的两种结晶形式(即多晶型)是已知的。一种表示为“结晶形式3”，另一种表示为“结晶形式1”。与形式1相比，形式3表现出明显更高的热力学稳定性，且保质期更长，特别是在低于95℃的温度下，更特别是在低于80℃的温度下。

晶型3表现出下表1中列出的XRPD(X射线粉末衍射)图。

表1

形式3 KAR5585 X射线粉末衍射图的观测峰

另一方面，形式3表现出下表2中列出的突出XRPD图。

表2

形式3 KAR5585的X射线粉末衍射图的明显观测峰

再一方面，形式3在19.05±0.20(°2θ)处显示出特征性XRPD峰。

1型结晶化合物表现出下表3中列出的XRPD(X射线粉末衍射)图。

表3

形式1的X射线粉末衍射图的观测峰

再一方面，形式1表现出下表4中列出的突出XRPD图。

表4

1型化合物1的X射线粉末衍射图的突出观测峰

无定形(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基])-2,2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸盐可通过美国专利号9,199,994实施例63i中所述的方法制备，所述专利通过引用整体并入本文。然后可以通过2019年11月14日提交的美国序列号16/683,509中所述的方法将无定形形式转化为结晶形式，所述专利通过引用整体并入本文。形式1和3可通过美国序列号16/683,509中所述的方法制备。

本文中使用的短语“药用”系指在合理医学判断范围内适用于与人和动物组织和器官接触的那些化合物、材料、组合物和/或剂型，而无过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，且具有合理的获益/风险比。

通过使细胞与抑制量的本发明化合物接触，3型化合物可用于抑制细胞中TPH1酶的活性。所述细胞可以为活生物体组织的一部分，也可以在培养液中或从活生物体中分离的。此外，通过向细胞、动物、个体或人类患者施用抑制量的本公开化合物，3型化合物可用于抑制动物、个体或患者中TPH1酶的活性。

通过向动物、个体或患者施用有效量的本发明化合物，3型化合物还可降低动物、个体或患者的外周血清素水平。在一些实施方案中，3型化合物相对于非外周血清素(例如CNS中的5-HT)可选择性地降低外周血清素(例如，胃肠道或肺组织中的5-HT)水平。在一些实施方案中，选择性可以为2倍或更多、3倍或更多、5倍或更多、10倍或更多、50倍或更多或100倍或更多。

作为可降低外周血清素水平的TPH1抑制剂，3型化合物可用于治疗和预防与TPH1酶异常表达或活性相关的多种疾病，或与外周血清素水平升高或异常相关的疾病。在一些实施方案中，所述治疗或预防包括向有需要的患者施用有效治疗量的3型化合物的TPH1抑制剂。3型化合物也可用于治疗和预防血清素综合征。

实施例63i和表27美国专利号9,199,994的生物学测定中证实无定形(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基])-2,2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸盐对小鼠TPH1的功效。

本文中描述了一些生物测定法，其可以用于确定化合物对TPH(例如TPH1)的体外和/或体内抑制作用。人、小鼠和大鼠TPH1和人TPH2、PheOH和TH的体外生化分析可用于测定酶活性的抑制情况以及在TPH1、TPH2、PheOH和TH之间的选择性。另外，这些化合物的功效可以例如通过在口服后测量对啮齿动物中肠5-HT水平的影响来确定。

KAR5585的代谢物为(S)-8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸，其具有下式

(S)-8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸在本文中称为KAR5417。当KAR5585进入血流时，其基本上转化为KAR5417。KAR5417的无定形形式可通过美国专利号9,199,994的实施例34c中所述的方法制备。

已发现KAR5585特别适用于治疗和预防肺动脉高压(PAH)。先前的研究已表征了大鼠中的PAH治疗，但仍然需要对疗效和剂量进行表征，以便可对成人进行有效治疗。

本公开的一方面为用于治疗成人PAH的每日给药方案。所述方案采用两种不同的剂型形式。每个剂型包括约600mg至约800mg量的3型(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯。优选每日方案采用两种口服剂型，每天服用两次(BID)最多14天。另一个优选方面为含有600mg或800mg KAR5585(3型)的剂型。

用于治疗肺动脉高压的给药方案另一方面为每日给予约1200mg至约1600mg量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯。

本公开的另一方面为一种在治疗开始后14天内将人类患者的血清素(5-HT)生物合成水平降低至少50％的方法。所述方法包含向人类患者每日给予约800mg至约1600mg的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯的步骤。血清素水平通过以下实施例中公开的方法测定。

本公开的另一方面为通过开始向人类患者给予足量药物后14天内AUC_0-tau达到≥2530ng.hr/mL(S)-乙基-8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯来治疗肺动脉高压。AUC_0-tau优选水平≥2530ng.hr/mL。AUC_0-tau通过以下实施例中公开的方法测定。

本公开的另一方面为通过开始向人类患者给予足量药物14天内实现人类患者尿中5-HIAA降低>50％来治疗肺动脉高压。尿5-HIAA通过以下实施例中公开的方法测定。

通过施用本发明TPH1抑制剂可治疗或预防的其他疾病包括骨疾病，例如骨质疏松症、骨质疏松假性神经胶质瘤综合征(OPPG)、骨质减少、骨软化症、肾性骨营养不良、佩吉特氏病、骨折和骨转移。在一些实施方案中，所述疾病为骨质疏松症，例如原发性1型(例如，绝经后骨质疏松症)、原发性2型(例如，老年性骨质疏松症)和继发性(例如，类固醇或糖皮质激素诱导性骨质疏松症)。

通过本公开的方法可治疗或可预防的其他疾病包括心血管疾病，例如动脉粥样硬化和肺动脉高压(PH)，包括特发性或家族性PH，并且包括与其他疾病或病症相关或由其引起的PH。在一些实施方案中，PH疾病为肺动脉高压(PAH)。

根据本公开所述方法可治疗的PAH类型包括(1)特发性(IPAH)、(2)家族性(FPAH)和(3)相关性(APAH)，APAH是最常见的PAH类型。后者为PAH，其与其他医学病症相关，例如包括：(1)胶原血管疾病(或***疾病)，其中包括自身免疫性疾病，例如硬皮病或狼疮；(2)先天性心肺疾病；(3)门静脉高压症(例如，由肝脏疾病引起)；(4)HIV感染；(5)药物(例如，食欲抑制剂、***和***)；和(6)其他病症，包括甲状腺疾病、糖原贮积病、高雪病、遗传性出血性毛细血管扩张、血红蛋白病、骨髓增生性疾病和脾切除术。APAH也可以为与肺静脉和/或毛细血管异常狭窄异常相关的PAH，例如肺静脉闭塞性疾病(PVOD)和肺毛细血管血管瘤病。另一类型的PAH与新生儿持续性肺动脉高压(PPHN)有关。

本公开方法可治疗或可预防的其他疾病包括代谢性疾病，例如糖尿病和高脂血症；肺部疾病，例如慢性阻塞性肺疾病(COPD)和肺栓塞；胃肠疾病，例如IBD、结肠炎、化疗引起的呕吐、腹泻、类癌综合征、乳糜泻、克罗恩病、腹痛、消化不良、便秘、乳糖不耐症、MEN I和II型、Ogilvie综合征、胰性霍乱综合征、胰腺功能不全、嗜铬细胞瘤、硬皮病、躯体化障碍、Zollinger-Ellison综合征或其他胃肠炎症性疾病；肝脏疾病，例如慢性肝病；癌症，例如肝癌、乳腺癌、胆管癌、结肠癌、结直肠癌、神经内分泌肿瘤、胰腺癌、***癌和骨癌(例如，骨肉瘤、软骨肉瘤、尤因氏肉瘤、成骨细胞瘤、类骨质瘤、骨软骨瘤、内生软骨瘤、软骨黏膜纤维瘤、动脉瘤性骨囊肿、单房性骨囊肿、巨细胞瘤和骨肿瘤)；血液疾病(例如骨髓增生综合征、骨髓增生异常综合征、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、骨髓瘤)和贫血，例如再生障碍性贫血和与肾脏疾病相关的贫血；以及血癌(例如白血病，如急性淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、急性髓细胞性白血病(AML)和慢性髓细胞性白血病(CML))。

另一种可治疗的疾病为治疗和预防类癌综合征。类癌综合征是一种副肿瘤综合征，表现为继发于类癌肿瘤的体征和症状。类癌综合征由类癌肿瘤引起，其可将血清素或其他激素分泌入血液。类癌肿瘤通常发生于胃肠道，包括胃、阑尾、小肠、结肠和直肠或肺。常见症状包括皮肤潮红、面部皮肤病变、腹泻、肠易激综合征、痉挛、呼吸困难和心跳加快。

在一些实施方案中，本公开包括通过向所述患者施用治疗有效量的本公开化合物来降低患者的血浆胆固醇、降低血浆甘油三酯、降低血浆甘油、降低血浆游离脂肪酸的方法。

KAR5585也可用于治疗和预防炎性疾病，例如过敏性气道炎症(例如哮喘)。

本文所用的术语“细胞”系指体外、离体或体内的细胞。在一些实施方案中，离体细胞可以是从生物体(例如哺乳动物)中切除的组织样品的一部分。在一些实施方案中，体外细胞可以为细胞培养物中的细胞。在一些实施方案中，体内细胞为存活于生物体(例如哺乳动物)中的细胞。

本文所用的术语“接触”系指在体外***或体内***中将指定部分连接在一起。例如，使酶与本公开的化合物“接触”包括向有TPH1酶的个体或患者(例如人)施用本公开的化合物，以及例如将本公开的化合物引入含有细胞和纯化制剂(含TPH1酶)的样品。

本文所用的术语“个体”或“患者”可互换使用，系指任何动物，包括哺乳动物，优选为小鼠、大鼠、其他啮齿动物、兔、狗、猫、猪、牛、绵羊、马或灵长类动物，最优选为人类。

本文所用的短语“有效治疗量”系指研究人员、兽医、医生或其他临床医生所寻求的在组织、***、动物、个体或人体中引发生物学或医学反应的活性化合物或药剂的量。

本文所用的术语“治疗”或“治疗方法”系指1)抑制疾病；例如，在出现或展现疾病、病症或障碍的病理或症状的个体中抑制疾病、病症或障碍(即，阻止病理和/或症状的进一步发展)，或2)改善疾病；例如，在出现或展现疾病、病症或障碍的病理或症状的个体中改善疾病、病症或障碍(即，逆转病理和/或症状)。

本文所用的术语“预防”系指抑制疾病的发作或恶化；例如，针对可能易患所述疾病、病症或障碍但尚未出现或未展现所述疾病病理或症状的个体。

KAR5585可以以提供预防和/或治疗疗效的适当剂量给予需要此类治疗的人类患者。治疗或预防任何特定疾病或障碍所需的剂量通常会因患者而异，具体取决于，例如，选定的特定化合物或组合物、给药途径、所治疗病症的性质、患者的年龄和病情、患者遵循的合并用药或特殊饮食以及其他因素。合适剂量可由治疗医生确定。

KAR5585可以以含药用载体、佐剂和赋形剂的剂量单位制剂经口、皮下、局部、肠胃外、通过吸入喷雾剂或直肠给药。肠胃外给药可包括皮下注射、静脉内或肌肉内注射或输注技术。治疗持续时间可以为治疗医生认为必要的时间。所述组合物可以每天给药一至四次或更多次。当达到期望的结果，例如特定的治疗效果时，治疗期可终止。或者，治疗期可以无限期延续。

在一些实施方案中，药物组合物可制备成口服固体剂型(例如，胶囊、片剂、丸剂、糖衣丸、粉剂、颗粒等)。片剂可通过压制或模制来制备。压制片剂可包括一种或多种粘合剂、润滑剂、助流剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂或分散剂。片剂和其他固体剂型(例如胶囊、丸剂和颗粒)可以包括包衣(例如肠溶包衣)。

可以将固体和液体剂型配制为使其符合所需的释放曲线，例如快速释放、延迟释放以及延长释放或持续释放。

KAR5585的施用量取决于诸如以下因素而变化：给药方法、释放曲线和组合物制剂。通常情况下，对于用于治疗或预防疾病(特别是PH/PAH/APAH/IPAH/FPAH)的口服剂型KAR5585，根据患者体重，通常剂量为约1mg/kg/天至约50mg/kg/天，更通常为约5mg/kg/天至约30mg/kg/天。最优选的活性剂为形式3。单独口服剂型通常含有约50mg至约3000mg的KAR5585和额外量的一种或多种药用辅料。例如，其他有用的单个口服剂型可以含有100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、or 400mg、450mg、500mg、550mg、575mg、600mg、625mg、650mg、675mg、700mg、725mg、750mg、775mg、800mg、900mg、950mg、1000mg、1050mg、1100mg、1150mg和约1200mg量的KAR5585。其他的量可能为50mg至3000之间，例如，约325mg至约475mg、约350mg至约500mg、约375至约525mg、约400mg至约550mg、约425mg至约575mg、约450mg至约600mg、约475mg至约625mg、约500mg至约650mg、约525mg至约675mg、约550mg至约700mg、约575mg至约725mg、约600mg至约750mg、约625mg至约775mg、约650mg至约800mg、约675mg至约825mg、约700mg至约850mg、约725mg至约875mg、约750mg至约900mg、约775mg至约925mg、约800mg至约950mg、约825至约975、约850mg至约1000mg、约900mg至约1150mg、约1000mg至约1150mg、约1100mg至约1250mg和约1200mg至约1350mg。特别优选的给药方案为600mg至800mg每天两次(BID)。尤其优选方案的实施方案为600mg BID和800mg BID。

“wt％”意指基于组合物或制剂总重量的重量百分比。

优选的剂型具有3型结晶化合物比例，其按重量为任何存在的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基])-2,2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸盐的90wt％或更多，更优选为95wt％或更多。

剂型具有任何量或比例的3型结晶化合物。基于剂型的总重量，通常比例包括约20wt％或更多、约60wt％或更多，以及约90wt％或更多(其余主要为辅料、载体和赋形剂)。特别有用的比例为25wt％和60wt％。

用于吸入或吹入的组合物包括在药用水性或有机溶剂或其混合物中的溶液和悬浮液，以及粉末。口服给药的液体剂型可以包括例如药用乳剂、微乳剂、溶液、混悬液、糖浆和酏剂。悬浮液可以包括一种或多种悬浮剂。

用于受试者组合物的透皮给药剂型包括粉剂、喷雾剂、软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、溶液和贴剂。

3型化合物和含有该化合物的组合物可以以气雾剂形式施用，其可以例如通过超声雾化器给药。

适用于肠胃外给药的药物组合物可以包括3型化合物以及一种或多种药用无菌等渗水性或非水性溶液、分散液、悬浮液或乳剂。

或者，所述组合物可以为无菌粉末形式，其可在使用前配置成无菌可注射溶液或分散液。

本文通过以下非限制性实施例进一步说明本公开。

实施例

表5：

实施例中使用的缩写词包括如下：

表5(续)

表5(续)

方法学：

研究KAR5585-101是一项分两部分进行的首次人体、1期、随机、双盲、安慰剂对照、单中心试验，以评估KAR5585单次递增剂量(SAD，第1部分)和多次递增剂量(MAD，第2部分)在健康成人受试者中的安全性、耐受性、PK、心脏传导和靶点参与作用的生物标志物。食物影响将在第1部分第2阶段评估。第2部分允许在第1部分完成之前开始，在每个部分中，每个剂量组的数据都将在入组下一个剂量组之前进行安全性审查。

给予的KAR5585剂量如下：

·第1部分(SAD)第1阶段(空腹)：第1至第6组分别为100mg、200mg、400mg、700mg、1200mg或2000mg或匹配的安慰剂

·第1部分(SAD)第2阶段(进食，高脂食物的影响)：仅第3组400mg

·第2部分(MAD)：第1至第4组分别为100mg(空腹)、100mg(进食)、200mg(进食)和400mg(进食)或匹配的安慰剂，每日给药两次(BID)，大约每12小时一次，共27次。

·KAR5585和安慰剂的剂量以胶囊剂型口服给药。含有KAR5585的活性药物胶囊以50、200和300mg的剂量规格提供；因此，需要超过1粒胶囊才能达到某些研究剂量。

患者人数(计划和分析人数)：

每个部分最初计划入组60名成人受试者(5个组，每组12名受试者)。此外，如果需要，根据先前组的安全性和PK数据，任一或两个部分可添加最多2个组(每组12名受试者)，总共最多168名受试者参与试验。允许受试者参与第1部分或第2部分，但不能同时参加这两个部分。

第1部分有6个组，每组12名受试者(总共72名受试者)，第2部分有4个组，每组12名受试者(总共48名受试者)。在第1部分，第3组(400mg)12名受试者被研究两次，一次在空腹条件下(第1阶段)和一次在进食条件下(第2阶段)，进行食物影响评估。

受试品、剂量和给药方式、批号：

KAR5585，50、200和300mg口服胶囊，以100mg、200mg、400mg、700mg、1200mg或2000mg的单剂量给药(第1部分)或以100mg、200mg、400mg的多剂量给药，每12小时一次，共14天(27次)(第2部分)。批次为批次PID-19JUL15-111(50mg)、PID-19JUL15-110(200mg)、PID-19JUL15-109(300mg)

治疗持续时间：

第1部分(SAD)：空腹条件下单剂量；入选进食组的受试者将接受第2剂KAR5585(相同剂量水平)或安慰剂。

第2部分(MAD)：BID剂量(间隔约12小时，第1天至第13天)以及第14天上午单次剂量。一个或多个MAD组可能接受每天一次(QD)给药。

参考疗法、剂量和给药方式、批号：

安慰剂，口服胶囊。批次PID-19JUL15-108(匹配的50mg)；PID-19JUL15-107(匹配的200mg和300mg)

药代动力学：

KAR5585和KAR5417的药代动力学特征将在第1部分和第2部分通过测量血浆和尿液中药物浓度和计算PK参数来评估。

生物标志物：

第2部分将通过测量血清中血清素(5-羟色胺[5-HT])浓度以及血浆和尿液中5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)浓度来评估生物标志物。同样，将评估生物标志物与PK参数的关系。

生物标志物分析：

生物标志物分析将基于生物标志物人群(基线时[给药前第1天]和给药后至少一天[第7天或第14天]有可评估生物标志物测量值的所有受试者)。对于重点为使用梯形规则计算给药后0至24小时浓度-时间曲线下面积(AUC)(AUC_0-24)、最小观测浓度(C_min)和最大观测浓度(C_max)等PK参数与生物标志物之间关系的分析，仅入选评估了所有生物标志物和这些PK参数的受试者。

仅在第2部分收集生物标志物数据。将分析以下生物标志物：

·血清5-HT

·血浆5-HIAA

·尿5-HIAA/24小时(根据测量、调整、估算结果，每克肌酐)

先验的主要生物标志物终点为第14天血浆5-HIAA浓度相对于第1天的变化。要检验的无效假设为安慰剂和KAR5585自第1天给药前至第14天的变化无差异。

使用相对于第1天开始、第7天或第14天给药前绝对和相对生物标志物变化(％)对于相应研究日的AUC_0-24、C_max和C_min进行线性回归。斜率和相应的95％置信区间(CI)制成表格。

使用相对于第1天给药前的绝对和相对(％)变化将汇总统计数据(平均值、标准差[SD]、中值、最小值[Min]和最大值[Max])按组制成每种生物标志物的表格。每种生物标志物的平均测量值相应时间进程图将以图形方式显示。每个个体受试者的时间进程也将按组以图形方式显示。

对于每种生物标志物，要估计KAR5585治疗组和安慰剂第7天或第14天相对于基线变化的最小均方差和相应的95％CI。这些值将与P值一起制成表格，以检验变化差异等于0。

每种生物标志物第7天和第14天相对于给药前第1天的绝对和相对变化与AUC_0-24、C_max和C_min以图形方式显示。

将列出用于生物标志物分析的血液和尿液样本收集细节以及生物标志物浓度。

药代动力学分析：

PK分析将基于PK浓度人群(接受活性研究药物并在任何时间点具有任何可测量研究药物血浆浓度的所有受试者)和PK可评估人群(具有足够KAR5585和KAR5417浓度-时间数据以支持PK分析的所有受试者)。药代动力学数据将进行描述性总结。

总结–结论

药代动力学结果：

第1部分SAD PK：

KAR5585是活性色氨酸羟基化物1(TPH1)抑制剂KAR5417的前药。KAR5585给药后，KAR5585被迅速吸收。最大观测浓度(t_max)的中位时间介于给药后1.5和3小时之间。KAR5585给药后，KAR5417迅速出现在血浆中，这一观察结果与KAR5585快速吸收和有效转化为KAR5417一致。

全身暴露于活性TPH1抑制剂KAR5417的平均程度(通过平均AUC_0-24和从时间0外推至无穷大时间的AUC(AUC0-inf)测得)似乎在100和700mg之间剂量水平下以剂量成比例方式增加，对于100mg至700mg剂量下增加7倍时平均AUC_0-24和平均AUC_0-inf估计值分别增加6.3倍和6.8倍。剂量大于700mg时，AUC_0-24和AUC_0-inf值以剂量成比例增加幅度较小，在700mg和2000mg之间剂量增加2.86倍时，其增加了1.7倍和1.81倍。口服KAR5417后的平均表观终末半衰期(t_1/2)随研究剂量水平的增加而增加，范围为口服KAR5585后4.7小时(100mg剂量)至22.6小时(2000mg剂量)之间。

进食条件下给予KAR5585增加了KAR5585和KAR5417的暴露程度和峰值，空腹和进食条件下，KAR5417从时间0外推至无穷大时间的平均AUC(AUC_0-inf)增加1.8倍，从3650ng·hr/mL增加至6710ng·hr/mL，C_max增加1.8倍，从485ng/mL增加至860ng/mL。这视为暴露量的临床相关变化。

第2部分MAD PK：

KAR5585给药后被迅速吸收。

总体而言，全身暴露于KAR5417的平均程度(通过给药后0至12小时的平均AUC(AUC_0-12)和平均AUC0_0-24测得)在空腹条件下(第2部分第1组；第1天AUC_0-12＝741hr*ng/mL；第14天AUC_0-24＝1650hr*ng/mL)相对于进食条件下(第2部分第2组；第1天AUC_0-12＝470hr*ng/mL；第14天AUC_0-24＝1220hr*ng/mL)似乎相当。这一观察结果与第1部分第3A和3B组(KAR5585400mg)中的食物影响比较相反。

在第1部分，高脂肪、高热量膳食导致进食条件下给予KAR5585 400mg后KAR5417的AUC_0-inf(AUC_0-inf＝6710ng·hr/mL)比空腹条件下(AUC_0-inf＝3650ng·hr/mL)高约1.8倍。

通过比较第7天和第14天的AUC_0-12和BID口服给予KAR5585共14天后给药后12小时获得的浓度(C_12hr)值进行评估，KAR5417截至第7天达到稳态血浆水平。KAR5417的蓄积率与第7天/第1天和第14天/第1天的C_max(R_Cmax)蓄积率和AUC_0-12(R_AUC0-12)蓄积率进行了比较，并验证第7天达到稳态。KAR5585 100mg、200mg和400mg剂量下KAR5417的R_AUC0-12值范围分别为2.19-2.57、1.09-1.34和1.65-2.38，表明KAR5417的PK与时间无关，且在重复BID给药14天后第7天达到稳定状态。

生物标志物结果：

血浆和尿液的5-HIAA(5-HT合成的PD标志物)均观察到剂量和时间依赖性降低。在最高KAR5585剂量(400mg)下，第1天至第14天的血浆5-HIAA浓度平均变化百分比为53.33，而在被随机分配接受安慰剂的受试者中平均变化百分比为+20.12。对于每个剂量组和第14天所有剂量组合，与安慰剂相比，第1天至第14天血浆5-HIAA浓度的绝对变化和百分比变化的平均差异具有有利于KAR5585的统计学意义。

尿液5-HIAA/24小时与KAR5585剂量之间存在很强关联性。在最高KAR5585剂量(400mg)下，第1天至第14天测得的尿液5-HIAA平均变化百分比为？50.85，而在被随机分配接受安慰剂的受试者中平均变化百分比为+3.97。除一个剂量组(KAR5585 100mg空腹剂量组第14天的相对变化)外，第1天至第14天绝对和相对变化的平均差异在所有剂量组中均具有有利于KAR5585的统计学意义。尿液5-HIAA/24小时的结果与调整后、估算和每克肌酐的结果相当。

KAR5417暴露量和5-HIAA降低之间存在很强的关系。血浆和尿液5-HIAA之间密切关系得到以下观察结果的支持，即通过PK参数AUC_0-24、C_max、C₁₂和AUC_0-12测得更高KAR5417暴露量与5-HIAA降低更多相关。

安全性结果：

第1部分，SAD，第1阶段-空腹给药

KAR5585以单次递增口服剂量(100mg、200mg、400mg、700mg、1200mg或2000mg)给药，在54名健康成人受试者中安全且耐受性良好。

第1部分，SAD，第2阶段–进食给药(食物影响)：

KAR5585 400mg在进食条件下单次口服剂量给药，在9名健康成人受试者中耐受性良好。

第2部分，MAD–空腹和进食给药：

KAR5585以100mg(空腹)、100mg(进食)、200mg(进食)和400mg(进食)多次递增口服剂量BID最多14天(27剂)给药，在36名健康成人受试者中安全且耐受性良好。一个或多个MAD组可接受QD给药，但任何一组均没有给药。

结论：

研究过程中未发现安全性、耐受性、PK或心脏传导问题。在整个试验过程中，KAR5585给药耐受性良好：第1部分(SAD)第1阶段，空腹条件下以100mg、200mg、400mg、700mg、1200mg或2000mg剂量给药；第1部分(SAD)第2阶段，进食条件下以400mg剂量给药；第2部分(MAD)，以100mg(空腹)、100mg(进食)、200mg(进食)和400mg(进食)给药。

KAR5585(前药)给药后，KAR5417(活性TPH1抑制剂)迅速出现在血浆中，这一观察结果与KAR5585快速吸收和有效转化为KAR5417一致。KAR5417暴露量和5-HIAA降低之间存在很强的关系。

前药(KAR5585)和活性药物(KAR5417)均未显示任何以剂量依赖性方式增加QTcF的趋势。

如PK SAP中所述，以下PK参数(视情况而定)根据PK可评估人群中第1部分第1天开始以及第2部分第1、7和14天KAR5585和KAR5417个体血浆浓度生成：

C_max1 第一次每日给药后获得的最大浓度

C_max2 第二次每日给药后获得的最大浓度

C_12hr 给药后12小时获得的浓度

C_max1/C_12hr 第一次每日给药后获得的最大浓度与首次每日给药后12小时获得的浓度比

C_max1/D 第一次每日给药后获得的剂量标准化C_max

t_max1 第一次每日给药后获得的至最大浓度的时间

t_max2 第二次每日给药后获得的至最大浓度的时间

AUC_0-tau 药间隔内从时间0至最后可量化点的浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)

AUC_0-12 给药后0至12小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)

AUC_0-24 给药后0至24小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)

AUC_0-24/D 剂量标准化AUC_0-24(SAD第1天，MAD第1天和第7天)

λ_z 口服给药后的表观终末速率常数

t_1/2 口服给药后的表观终末半衰期

AUC_0-inf 从时间0至无穷大时间的浓度与时间曲线下面积(仅SAD)

AUC Extrap 最后可量化浓度后外推的AUC_0-∞百分比

CL/F 表观口服清除率

CL_ss/F 稳定状态下表观口服清除率

V_z/F 依赖于终末期的表观口服分布容积

给予的剂量如下：

·第1部分(SAD)第1阶段：第1至第6组分别给予100mg、200mg、400mg、700mg、1200mg或2000mg单次KAR5585剂量或匹配的安慰剂。

·第1部分(SAD)第2阶段：仅第3组400mg。

·第2部分(MAD)：第1至第4组分别给予KAR5585 100mg(空腹)、100mg(进食)、200mg(进食)和400mg(进食)或匹配的安慰剂BID(大约每12小时一次)，共27次。

使用表9中所示的胶囊规格或大小给药。

表6

给予的剂量和胶囊规格

缩写词：MAD，多次递增剂量；SAD，单次递增剂量

药代动力学结果和个体受试者数据列表：

血浆浓度：

下表列出了血浆KAR5585和KAR5417浓度的个体和平均估计值的位置：

第1-6组健康成人受试者空腹条件下给予100-2000mg KAR5585后KAR5585和KAR5417的平均血浆浓度-时间曲线(线性和半对数标度)分别列于图3a和3b以及图4a和4b。第3A和3B组空腹和进食条件下给予400mg KAR5417后KAR5585和KAR5417的平均血浆浓度-时间曲线(线性和半对数标度)分别列于18a和18b以及图19a和19b。

KAR5585平均峰值血浆浓度在单剂量空腹口服100、200、400、700、1200和2000mgKAR5585后1.5和3小时之间达到。对于100至1200mg KAR5585剂量，KAR5585达到血浆浓度峰值的时间为0.75至6小时之间。对于2000mg剂量，KAR5585达到血浆浓度峰值的时间为0.75至12小时之间。平均KAR5585浓度随剂量增加而增加。在大多数受试者中，服用100mg剂量后，KAR5585浓度保持高于LLOQ(4.94ng/mL)长达4小时，一名受试者KAR5585在所有时间点均为BLQ，而另一名受试者KAR5585在长达8小时内可测量。在给予400、700、1200和200mg剂量KAR5585给药后长达12小时内，KAR5585浓度仍保持在LLOQ(4.94ng/mL)以上。

KAR5417平均峰值血浆浓度在单剂量空腹口服100、200、400、700、1200和2000mgKAR5585后1.5和3小时之间达到。对于100至1200mg KAR5585剂量，KAR5417达到血浆浓度峰值的时间为2至6小时之间。对于2000mg剂量KAR5585，KAR5417达到血浆浓度峰值的时间为3至12小时之间。平均KAR5417浓度随剂量增加而增加。在给予100、200、400、700、1200和2000mg剂量KAR5417后分别在长达12、24、36、48、48和72小时内仍保持在LLOQ(7.65ng/mL)以上。KAR5417的血浆浓度比KAR5585的血浆浓度高约10倍。

给予400mg KAR5585后，峰值平均血浆KAR5585浓度在较晚时间观察到，且与空腹条件相比，进食后持续更长时间(进食和空腹状态下t_max分别为给药后3.0和2.07小时)。相对于空腹条件(C_max＝52.8ng/mL)，进食条件下给药后峰值平均浓度高约320％(C_max＝169ng/mL)。进食条件下给药后KAR5585平均浓度相对于空腹条件下更高，进食状态下KAR5585水平可测量至24小时，而空腹状态下可测量至12小时。

给予400mg KAR5585后，空腹和进食条件下在相似时间(给药后4小时)观察到峰值平均血浆KAR5417浓度。相对于空腹条件(C_max＝485ng/mL)，进食条件下给药后峰值平均浓度高约177％(C_max＝860ng/mL)。进食条件下给药后KAR5417平均浓度相对于空腹条件下更高，进食状态下KAR5585水平可测量至72小时，而空腹状态下可测量至36小时。

表7

(单次口服KAR5585剂量后KAR5585的平均药代动力学参数总结(第1–6组)(药代动力学可评估人群))

表7(续)

^a显示中值和范围(最小值，最大值)；

缩写词：AUC_0-12，给药后0至12小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-24，给药后0至24小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-tau，从时间0至最后可量化浓度时间的浓度时间曲线下面积；BLQ，低于定量限；CL/F，表观口服清除率；CV，变异系数；Geo.，几何；hr，小时；N，数量；NA，不适用；NR，未报告；ND，未确定；P_aram.，参数；SD，标准差；Stat.，统计；t1/2，口服给药后的表观终末半衰期；t_max，最大观测浓度的时间；V_z/F，终末期分布容积

表8

(单次口服KAR5585剂量后KAR5417的平均药代动力学参数总结(第1–6组)(药代动力学可评估人群))

表8(续)

表8(续)

^a显示中值和范围(最小值，最大值)；因为KAR5417是KAR5585的代谢物，因此未计算KAR5417的Vz/F和CL/F

写词：AUC_0-12，给药后0至12小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-24，给药后0至24小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-tau，从时间0至最后可量化浓度时间的浓度时间曲线下面积；BLQ，低于定量限；CL/F，表观口服清除率；CV，变异系数；Geo.，几何；hr，小时；Max，最大值；Min，最小值；N，数量；NA，不适用；NR，未报告；ND，未确定；Param.，参数；SD，标准差；Stat.，统计；t1/2，口服给药后的表观终末半衰期；tmax，最大观测浓度的时间；V_z/F，终末期分布容积

KAR5417的药代动力学：

KAR5417是前药KAR5585的活性代谢物。KAR5585给药后，KAR5417迅速出现在血浆中，这一观察结果与KAR5585快速吸收和有效转化为KAR5417一致；截至给药后0.25小时，所有受试者都具有可测得的KAR5417浓度，并且所有空腹组的中位t_max具有可比性，范围为给药后3至6小时之间。

一般而言，通过平均C_max测得的平均峰值血浆KAR5417浓度似乎在100-700mg剂量下以剂量成比例方式增加，在100mg剂量(第1组)和700mg剂量(第4组)之间增加7倍的情况下平均C_max值增加了7.27倍。剂量大于700mg时，C_max值中度增加，在700mg(第4组)和2000mg(第6组)之间剂量增加2.86倍的情况下C_max值增加1.38倍。

总体而言，全身暴露于KAR5417的平均程度(通过平均AUC_0-24和AUC_0-inf测得)似乎在100和700mg之间剂量水平下以剂量成比例方式增加，对于100mg剂量(第1组)至700mg剂量(第4组)下增加7倍时平均AUC_0-24和平均AUC_0-inf估计值分别增加6.3倍和6.8倍。剂量水平大于700mg时，AUC_0-24和AUC_0-inf值以剂量成比例增加幅度较小，在700mg(第4组)和2000mg(第6组)之间剂量增加2.86倍时，其增加了1.7倍和1.81倍。

700mg(第4组)和2000mg(第6组)之间剂量增加2.86倍。

进食条件下给予KAR5585增加了KAR5417的暴露程度和峰值，空腹和进食条件下，平均AUC(AUC_0-inf)增加1.8倍，从3650ng·hr/mL增加至6710ng·hr/mL，C_max增加1.8倍，从485ng/mL增加至860ng/mL。这视为暴露量的临床相关变化。

KAR5417的平均表观消除半衰期随研究剂量水平增加而增加，口服KAR5585后为4.67(100mg剂量)和22.6小时(2000mg剂量)之间。KAR5417消除期基于最后3至6个可测量时间点进行表征。

KAR5585和KAR5417的剂量比例评估

个体血浆KAR5585和KAR5417 C_max和AUC_0-inf相对于KAR5585剂量的散点图分别列于图5a和5b以及图6a和6b。

血浆KAR5585和KAR5417 PK参数的剂量比例评估总结于表18中。使用幂模型对单剂量给药后KAR5585和KAR5417的剂量比例进行了评估。根据暴露量(例如，C_max、AUC_0-12、AUC_0-tau和/或AUC_0-inf)对比剂量的图，如果斜率(以下等式中的β)的90％置信区间(CI)包括统一性(例如，1.0)，则暴露量增加视为与剂量成比例。

表9

(空腹条件下100至2000mg KAR5585作为单次口服剂量给药后血浆KAR5417和KAR5585药代动力学参数AUC_0-12、AUC_0-inf、AUC_0-tau和C_max的剂量比例分析总结(药代动力学可评估人群))

如果斜率95％CI的值包括1，则不会拒绝剂量成比例。

缩写词：AUC_0-12，给药后0至12小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-inf，从时间0外推至无穷大时间的浓度与时间曲线下面积；AUC_0-tau，从时间0至最后可量化浓度时间的浓度时间曲线下面积；C_max，最大观测浓度；CI，置信区间；NC，未计算。

KAR5417 AUC_0-inf和C_max幂模型斜率的95％CI的值包括1。因此，得出的结论是，100至2000mg KAR5585研究剂量范围下KAR5417的AUC_0-inf和C_max成剂量比例。因此，对于KAR5417AUC_0-inf和C_max PK参数，满足统计线性条件。

KAR5585 AUC_0-inf和C_max幂模型斜率的95％CI的值不包括1。因此，得出的结论是，100至2000mg KAR5585研究剂量范围下KAR5585的AUC_0-inf和C_max不成剂量比例。因此，对于KAR5585 AUC_0-inf和C_max PK参数，不满足统计线性条件，并且通过AUC_0-inf和C_max评估的暴露量似乎以小于剂量成比例的方式增加。

KAR5585和KAR5417的食物影响评估：

空腹和进食条件下给予400mg KAR5585后食物影响评估的统计结果(第3A和3B组)列于表10中。

表10

(血浆KAR5585和KAR5417药代动力学参数AUC0-tau、AUC0-inf、Cmax：食物影响评估统计比较总结[组3B(进食)对比组3A(空腹)](药代动力学可评估人群))

分析之前对参数进行ln转换。

几何LS平均值通过从ANOVA中对LS平均值求幂来计算。几何平均比＝(测试/参考)

组3A(空腹)：空腹条件下作为单次口服给药的400mg KAR5585(参考)，组4B(进食)：进食条件下作为单次口服给药的400mg KAR5585(测试)

缩写词：ANOVA，方差分析；AUC_0-inf，从时间0外推至无穷大时间的浓度与时间曲线下面积；

AUC_0-tau，从时间0至最后可量化浓度时间的浓度-时间曲线下面积；CI，置信区间；C_max，最大观测浓度；LS法，最小二乘法。

进食条件下400mg KAR5585给药后通过AUC_0-tau和AUC_0-inf评估的对KAR5585的暴露量是相对于空腹条件下KAR5585给药时的约3.1-4.8倍。峰值暴露量(C_max)大约高出3.9倍。进食条件下400mg KAR5585给药后通过AUC_0-tau和AUC_0-inf评估的对KAR5417的暴露量是相对于空腹条件下KAR5585给药时的高约2倍。峰值暴露量大约高出1.87倍。C_max、AUC_0-tau和AUC_0-inf的90％CI超出了普遍接受的范围80-125％，表明存在针对AUC_0-tau和AUC_0-inf的食物影响以及针对KAR585和KAR5417的C_max。全身暴露量的增加视为对KAR5585和KAR5417口服吸收药代动力学有临床相关影响。

尿液浓度：

下表列出了尿KAR5585和KAR5417浓度和累积***的个体和平均估计值的位置：

健康成人受试者空腹条件下给予100-2000mg KAR5585后空腹健康志愿者中作为KAR5417***到尿液中的平均总剂量百分比和平均累积尿液回收率-(第1-6组)列于图7和8。

单次口服给药KAR5585后健康志愿者中KAR5585和KAR5417的平均尿PK参数(第1-6组)分别列于表12和表13中。

在几乎所有受试者中，KAR5585无法在尿样中定量，并且在所有剂量水平下，尿中***量(Ae)均小于给药剂量的0.004％(表20)。

假设KAR5585完全转化为KAR5417，则KAR5417可在尿样中定量，且尿中***量(Ae)为给药剂量的0.102％至0.331％(表13)。KAR5417***量最高，为剂量的0.331％。

图7为400mg进食组(组3B)，并且食物增加KAR5585口服吸收的影响一致。一般而言，空腹受试者中尿液中KAR5417***量与剂量无关。KAR5417的大部分尿液***发生在口服KAR5585后的前24小时。

KAR5417的肾脏清除率根据KAR5417的血浆时间浓度曲线下面积(AUC_0-96)和尿液中KAR5417回收量计算(表21)。KAR5417的肾脏清除率范围为157至296mL/hr，并且很大程度上与KAR5585给药剂量无关(表21)。

人尿中KAR5585和KAR5417的测量值表明，KAR5585和KAR5417的肾脏清除和消除是人单剂量给药后KAR5585消除的非常小的途径。

表11

(单次口服KAR5585剂量后健康志愿者中KAR5585的平均(±SD)尿PK参数(药代动力学可评估人群))

缩写词：CV，变异系数；N，数量；Param.，参数；SD，标准差；Stat.，统计；D，标准偏差。

表12

单次口服KAR5585剂量后健康志愿者中KAR5417的平均(±SD)尿PK参数(药代动力学可评估人群)

缩写词：CV，变异系数；N，数量；PK，药代动力学；Param.，参数；SD，标准差；Stat.，统计。

药代动力学结果讨论

KAR5585是活性TPH1抑制剂KAR5417的前药。KAR5585给药后，KAR5585被迅速吸收，中位t_max范围为给药后1.5至3小时。KAR5585给药后，KAR5417迅速出现在血浆中，这一观察结果与KAR5585快速吸收和有效转化为KAR5417一致；所有空腹组的中位t_max具有可比性，范围为给药后3至6小时之间。健康受试者中单次口服100mg至2000mg KAR5588后，暴露的总程度(AUC_0-tau和AUC_0-inf)和暴露于KAR5855和KAR5417的峰值在100-700mg剂量下似乎以成比例方式增加，在700mg至2000mg下以小于剂量比例的方式增加。

总体而言，全身暴露于前药KAR5585的平均程度(通过平均AUC_0-tau和AUC_0-inf测得)似乎在100和700mg之间剂量水平下以剂量成比例方式增加，对于100mg剂量(第1组)至700mg剂量(第4组)下增加7倍时平均AUC_0-24和平均AUC_0-inf估计值分别增加8.7倍和8.8倍。剂量大于700mg时，AUC_0-24和AUC_0-inf值以剂量成比例增加幅度较小，在700mg(第4组)和2000mg(第6组)之间剂量增加2.86倍时，其增加了1.86倍和1.78倍。

全身暴露于活性TPH1抑制剂KAR5417的平均程度(通过平均AUC_0-24和AUC_0-inf测得)似乎在100和700mg之间剂量水平下以剂量成比例方式增加，对于100mg剂量(第1组)至700mg剂量(第4组)下增加7倍时平均AUC_0-24和平均AUC_0-inf估计值分别增加6.3倍和6.8倍。剂量大于700mg时，AUC_0-24和AUC_0-inf值以剂量成比例增加幅度较小，在700mg(第4组)和2000mg(第6组)之间剂量增加2.86倍时，其增加了1.7倍和1.81倍。

KAR5585的平均表观消除半衰期随研究剂量水平增加而增加，口服KAR5585后为1.89和4.84小时之间。KAR5417的平均表观消除半衰期随研究剂量水平增加而增加，口服KAR5585后为4.67(100mg剂量)和22.6小时(2000mg剂量)之间。

KAR5585的平均CL/F估计值范围为1480至3850L/h，1200mg(第5组)和2000mg(第6组)剂量水平时发现CL/F值较高，并与较高剂量水平下KAR5585吸收减少相关的非线性PK关联。Vz/F随剂量水平增加而增加，范围为5680到25100L之间，1200mg(第5组)和2000mg(第6组)剂量水平下发现的较高Vz/F值归因于较高剂量水平下KAR5585吸收减少。

进食条件下给予KAR5585增加了KAR5585的暴露程度和峰值，空腹和进食条件下，平均AUC(AUC_0-inf)增加3倍，从302ng·hr/mL增加至915ng·hr/mL，C_max增加3.2倍，从52.8ng/mL增加至169ng/mL。在类似方式下，进食条件增加了KAR5417的暴露程度和峰值，空腹和进食条件下，平均AUC(AUC_0-inf)增加1.8倍，从3650ng·hr/mL增加至6710ng·hr/mL，C_max增加1.8倍，从485ng/mL增加至860ng/mL。这视为暴露量的临床相关变化。

KAR5585和KAR5417的尿液***是一种次要的消除机制。KAR5585几乎在所有受试者的尿液中都无法定量。KAR5417可在尿样中定量，且尿中***量(Ae)为KAR5585给药剂量的0.102％至0.331％。

药代动力学结论：

KAR5585是活性TPH1抑制剂KAR5417的前药。KAR5585给药后，KAR5585被迅速吸收，中位t_max范围为给药后1.5至3小时。KAR5585给药后，KAR5417迅速出现在血浆中，这一观察结果与KAR5585快速吸收和有效转化为KAR5417一致。

全身暴露于活性TPH1抑制剂KAR5417的平均程度(通过平均AUC_0-24和AUC0-inf测得)似乎在100和700mg之间剂量水平下以剂量成比例方式增加，对于100mg剂量至700mg剂量下增加7倍时平均AUC_0-24和平均AUC_0-inf估计值分别增加6.3倍和6.8倍。剂量大于700mg时，AUC_0-24和AUC_0-inf值剂量成比例增加幅度略低，在700mg和2000mg之间剂量增加2.86倍时，其增加了1.7倍和1.81倍。KAR5417的平均表观清除半衰期随研究剂量水平增加而增加，范围为口服KAR5585后4.7小时(100mg剂量)至22.6小时(2000mg剂量)之间。

进食条件下给予KAR5585增加了KAR5585和KAR5417的暴露程度和峰值，空腹和进食条件下，KAR5417平均AUC(AUC_0-inf)增加1.8倍，从3650ng·hr/mL增加至6710ng·hr/mL，C_max增加1.8倍，从485ng/mL增加至860ng/mL。这视为暴露量的临床相关变化。

第2部分：多次递增剂量

血浆浓度：

健康成人受试者中空腹条件下给予100mg KAR5585(第2部分，第1组)和进食条件下给予100、200和400mg KAR5585(第2部分，第2-4组)每天两次持续14天后KAR5585和KAR5417的平均血浆浓度-时间曲线(半对数标度)如图9a和9b所示。

健康成人受试者中空腹条件下给予100mg KAR5585(第2部分，第1组)和进食条件下给予100、200和400mg KAR5585(第2部分，第2-4组)每天两次持续14天后KAR5585和KAR5417的平均(±SD)血浆浓度-时间曲线(半对数标度)如图10至13所示。

对于第2部分第1组(空腹状态)，第1天和第14天早上服用KAR5585后采集用于KAR5585和KAR5417 PK分析的样本。对于第2部分第2-4组(进食状态)，第1天和第7天服用早上和晚上后以及第14天给予单次早晨KAR5585后采集用于PK分析的样本。

KAR5585血浆浓度：

一般而言，KAR5585在每个剂量水平下均可在循环中检测到，并且浓度通常随剂量增加而增加。此外，较高剂量水平下，具有可测量KAR5585浓度的时间长度增加。

第2部分第1组血浆KAR5585峰值浓度在第1天和第14天每日两次口服100mgKAR5585(空腹状态)后0.75-2.0和0.75-3.0小时之间达到。KAR5585的峰值平均浓度在第1天和第14天分别为16.7和21.3ng/mL。

对于第2部分第2-4组的100、200和400mg KAR5585剂量(进食状态)，所有给药日和时间的至KAR5585血浆峰浓度中位值的时间范围分别为0.75-4小时、1.5至6小时和1.5至6小时。一些证据表明，晚间KAR5585给药于第7天吸收延迟，其中KAR5585 100、200和400mg剂量下t_max分别为4小时、6小时和6小时。第7天下午t_max值位于第1天、第7天和第14天测定的t_max值上限。

对于第2部分第2-4组100、200和400mg KAR5585剂量(进食状态)，KAR5585的峰值平均浓度随剂量增加。对于第2部分第2-4组的100、200和400mg KAR5585剂量(进食状态)，所有给药日KAR5585的平均C_max血浆浓度范围分别为18.4-44.1ng/mL、42.6-90.9ng/mL和69.0-124ng/mL。

一些证据表明，晚间KAR5585给药于第7天吸收延迟，其中100、200和400mg剂量KAR5585的平均C_max浓度分别为28.4ng/mL、42.6ng/mL和69ng/mL。第7天下午C_max值低于第7天上午C_max，并位于第1、第7天和第14天对所有剂量测定的C_max值下限。

给予100mg KAR5585后，进食条件相对于空腹条件下在相似时间观察到峰值平均血浆KAR5417浓度。第1天进食和空腹状态下中位t_max值为给药后0.75和1.5小时，第14天进食和空腹状态下分别为给药后1.8和1.0小时。

KAR5585的峰值平均浓度进食条件下(第1天C_max＝18.4ng/mL；第14天C_max＝30ng/mL)与空腹条件下(第1天C_max＝16.7ng/mL；第14天C_max＝21.3ng/mL)相当。这一观察结果与第1部分第3A和3B组(400mg KAR5585)中的食物影响比较相反。在第1部分，高脂肪、高热量膳食导致KAR5585的峰值平均峰值浓度在进食条件下给药后(C_max＝169ng/mL)相对于空腹条件(C_max＝52.8ng/mL)高约320％。应该注意的是，第1部分中，在相同受试者中以交叉方式评估食物影响，而第2部分中则平行评估食物影响(不同受试者中进食对比空腹)。

KAR5417血浆浓度：

一般而言，在所有天中和所有剂量水平下，KAR5417的循环浓度均明显高于KAR5585的循环浓度。此外，KAR5417的浓度通常随KAR5585剂量增加而增加。

第2部分第1组血浆KAR5417峰值浓度在第1天和第14天每日两次口服100mgKAR5585(空腹状态)后2.0-6.0和2.0-4.0小时之间达到。KAR5417的平均峰值浓度在第1天和第14天分别为121和194ng/mL。这些值比相应的KAR5585峰值平均浓度高约7.25倍和9.1倍。

对于第2部分第2-4组的100、200和400mg KAR5585剂量(进食状态)，所有给药日和时间的至KAR5417血浆峰浓度中位值的时间范围分别为2至6小时、3至8小时和3至6小时。一些证据表明，第7天晚间给药KAR5417的t_max延迟，其中100、200和400mg剂量下至KAR5417血浆峰浓度中位值的时间分别为6小时、8小时和6小时。KAR5417第7天下午t_max中位值位于第1天、第7天和第14天测定的t_max中位值上限。

对于第2部分第2-4组100、200和400mg KAR5585剂量(进食状态)，KAR5417的峰值平均浓度随剂量增加。对于第2部分第2-4组的100、200和400mg KAR5585剂量(进食状态)，所有给药日KAR5417的平均C_max血浆浓度范围分别为85.9-168ng/mL、222-359ng/mL和595-1000ng/mL。一些证据表明，第7天晚间给药KAR5585吸收延迟，KAR5417 C_max相应降低，其中100、200和400mg剂量KAR5417的平均C_max浓度分别为112ng/mL、222ng/mL和608ng/mL。第7天下午C_max值低于第7天上午C_max，并位于第1、第7天和第14天对所有剂量测定的平均C_max值下限。

给予100mg KAR5585后，进食条件相对于空腹条件下在相似时间观察到峰值平均血浆KAR5417浓度。第1天进食和空腹状态下中位t_max值为给药后2.0和3.0小时，第14天进食和空腹状态下分别为给药后3.0和3.0小时。KAR5417的峰值平均浓度进食条件下(第1天C_max＝85.9ng/mL；第14天C_max＝168ng/mL)与空腹条件下(第1天C_max＝121ng/mL；第14天C_max＝194ng/mL)相当。这一观察结果与第1部分第3A和3B组(400mg KAR5585)中的食物影响比较相反。在第1部分，高脂肪、高热量膳食导致KAR5417的峰值平均峰值浓度在进食条件下KAR5585给药后(C_max＝860ng/mL)相对于空腹条件(C_max＝485ng/mL)高约177％。同样，应该注意的是，第1部分中，以交叉方式评估食物影响，而第2部分中则平行评估食物影响(不同受试者中进食对比空腹)。

药代动力学参数：

健康成人受试者中重复剂量口服给予100、200和400mg KAR5585后，血浆KAR5585和KAR5417 PK参数的总结分别列于表15和表16中。BID口服给予KAR5585 14天后，健康志愿者中KAR5417和KAR5585的蓄积率列于表17中。

KAR5585的药代动力学：

一般而言，通过平均C_max测得的平均峰值血浆KAR5585浓度似乎在100-400mg剂量下以剂量成比例方式增加(第2部分，第2-4组，进食状态)。第1天，100mg剂量(第2组)和400mg剂量(第4组)之间剂量增加4倍时平均C_max值增加4.4倍。第14天，100mg剂量(第2部分第2组)和400mg剂量(第2部分第4组)之间剂量增加4倍时平均C_max值增加约3.0倍至4倍。

总体而言，全身暴露于KAR5585的平均程度(通过平均AUC_0-12和AUC_0-24测得)似乎在100和400mg之间剂量水平下以剂量成比例方式增加，第1天，100mg剂量(第2部分第2组)至400mg剂量(第2部分第4组)下剂量增加4倍时平均AUC_0-12和AUC_0-24估计值分别增加5.1倍和3.6倍。第14天，100mg剂量(第2部分第2组)至400mg剂量(第2部分第4组)剂量下剂量增加4倍时平均AUC_0-12和AUC_0-24估计值分别增加3.1倍和3.6倍。

总体而言，全身暴露于KAR5585的平均程度(通过平均AUC_0-12和平均AUC0_0-24测得)在空腹条件下(第2部分第1组；第1天AUC_0-12＝62.8hr*ng/mL；第14天AUC_0-24＝99.8hr*ng/mL)相对于进食条件下(第2部分第2组；第1天上午AUC_0-12＝55.5hr*ng/mL；第14天AUC_0-24＝122hr*ng/mL)似乎相当。这一观察结果与第1部分第3A和3B组(400mg KAR5585)中的食物影响比较相反。在第1部分，高脂肪、高热量膳食导致进食条件下给予KAR5585 400mg后KAR5585的AUC_0-inf(AUC_0-inf＝915ng·hr/mL)比空腹条件下(AUC_0-inf＝302ng·hr/mL)高约3.0倍。同样，第1部分中，以交叉方式评估食物影响，而第2部分中则平行评估食物影响(不同受试者中进食对比空腹)。

KAR5585的平均表观消除半衰期随剂量水平增加而增加，重复剂量每天两次100、200和400mg口服给予KAR5585后第14天的平均值分别为2.73、4.08和6.45小时(第2部分，第2-4组，进食状态)。KAR5585半衰期在空腹状态下口服100mg重复给药后第14天为2.49小时，与进食状态下100mg剂量的半衰期(2.73小时)相当。

第1天，100、200和400mg(第2部分，第2-4组，进食状态)剂量KAR5585的平均CL/F估计值分别为2100、830和1730L/h。第14天，100、200和400mg(第2部分，第2-4组，进食状态)剂量KAR5585进食状态下的平均稳态CL/F估计值分别为880、1200和1140L/h。范围(平均值±SD)在这两天和本文研究的剂量范围内通常重叠。

第1天，随着剂量水平增加，Vz/F有略增加的趋势，发现范围(平均值±SD)通常重叠。100、200和400mg(第2部分，第2-4组，进食状态)剂量KAR5585的平均Vz/F分别为4100、3220和6800L。第14天，Vz/F随着第14天剂量水平增加而增加，在100、200和400mg剂量下分别为3520、7010和10300L。400mg剂量时(第4组)发现平均Vz/F值最高，并归因于KAR5585在较高剂量下消除半衰期的更好表征。

通过评估第7天和第14天AUC_0-12和浓度的比较，每天两次给予KAR558514天后获得给药后12小时浓度(C_12hr)值进行评估，KAR5585血浆水平截至第7天达到稳态暴露量。与第7/1天和第14天/第1天的C_max(R_Cmax)蓄积率和AUC_0-12(R_AUC0-12)蓄积率相比较的KAR5585蓄积率列于表17中。KAR5585100、200和400mg剂量下KAR5585的R_AUC0-12值范围为2.75-3.32、0.76-0.93和1.6-2.01，这表明KAR5417的PK与时间无关，并且在每天两次重复给药14天后第7天达到稳态。

KAR5417的药代动力学

KAR5417是前药KAR5585的活性代谢物。KAR5585给药后，KAR5417出现在血浆中，这一观察结果与KAR5585快速吸收和有效转化为KAR5417一致。一般而言，通过平均C_max测得的平均峰值血浆KAR5417浓度似乎在100-400mg剂量下以高于剂量成比例方式增加(第2部分，第2-4组，进食状态)。第1天，100mg剂量(第2组)和400mg剂量(第4组)之间剂量增加4倍时平均C_max值增加6.9倍。第14天平均C_max值以近似剂量成比例方式增加，100mg剂量(第2部分第2组)和400mg剂量(第2部分第4组)之间剂量增加4倍时平均C_max值增加约4.5倍。

总体而言，全身暴露于KAR5417的平均程度(通过平均AUC_0-12和AUC_0-24测得)似乎在100和400mg之间剂量水平下以大于剂量成比例方式增加，第1天，100mg剂量(第2部分第2组)至400mg剂量(第2部分第4组)下剂量增加4倍时平均AUC_0-12和AUC_0-24估计值分别增加7.0倍和6.45倍。第14天，100mg剂量(第1部分第2组)至400mg剂量(第2部分第4组)剂量下剂量增加4倍时平均AUC_0-12和AUC_0-24估计值分别增加4.6倍和4.45倍。

总体而言，全身暴露于KAR5417的平均程度(通过平均AUC_0-12和平均AUC0_0-24测得)在空腹条件下(第2部分第1组；第1天AUC_0-12＝741hr*ng/mL；第14天AUC_0-24＝1650hr*ng/mL)相对于进食条件下(第2部分第2组；第1天AUC_0-12＝470hr*ng/mL；第14天AUC_0-24＝1220hr*ng/mL)似乎相当。这一观察结果与第1部分第3A和3B组(400mg KAR5585)中的食物影响比较相反。在第1部分，高脂肪、高热量膳食导致进食条件下给予KAR5585 400mg后KAR5417的AUC_0-inf(AUC_0-inf＝6710ng·hr/mL)比空腹条件下(AUC_0-inf＝3650ng·hr/mL)高约1.8倍。如上所述，第1部分中，以交叉方式评估食物影响，而第2部分中则平行评估食物影响(不同受试者中进食对比空腹)。

KAR5417的平均表观消除半衰期随研究剂量水平增加而增加，根据第14天上午单剂量测定，重复剂量每天两次100、200和400mg口服给予KAR5585后第14天的平均值分别为19.6、25.0和30.6小时(第2部分，第2-4组，进食状态)。KAR5417半衰期在空腹状态下口服100mg重复给药后第14天为18.8小时，与进食状态下100mg剂量的半衰期(19.6小时)相当。400mg KAR5585重复给药时KAR5417的消除半衰期(30.6小时)与400mg KAR5585单次给药(第1部分第3B组)后KAR5417的消除半衰期(20.5小时)相似。

通过评估第7天和第14天AUC_0-12和C_12hr值比较，每天两次给予KAR558514天后进行评估，KAR5417血浆水平截至第7天达到稳态暴露量。与第7天/第1天和第14天/第1天R_Cmax和R_AUC0-12相比较的KAR5417蓄积率列于表17。KAR5585 100mg、200mg和400mg剂量下KAR5417的R_AUC0-12值范围分别为2.19-2.57、1.09-1.34和1.65-2.38，表明KAR5417的PK与时间无关，且在每天两次重复给药14天后第7天达到稳定状态。

表13：BID口服KAR5585 14天后健康志愿者中KAR5585的平均PK参数(药代动力学可评估人群)

表13：BID口服KAR5585 14天后健康志愿者中KAR5585的平均PK参数(药代动力学可评估人群)(续)

^a显示中值和范围(最小值，最大值)；

^b当WinNonlin未计算AUC0-12且t_last>11.90hr时，AUC_0-t替代AUC_0-12；

^c AM是指早上剂量(上午8点)，PM是指晚上剂量(晚上8点)

没有数据的阴影单元格为相对于给药时间的PK采样方案不支持计算PK参数者(例如，第1天和第7天BID给药无C_24hr值)

缩写词：AM，中午之前(ante meridiem)；AUC_0-12，给药后0至12小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-24，给药后0至24小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-t，从时间0至最后可量化浓度时间的浓度时间曲线下面积；BLQ，低于定量限；CL/F，表观口服清除率；NA，不适用；ND，未确定；NR，未报告；Param.，参数；PK，药代动力学；PM，中午之后(post meridiem)；SD，标准差；Stat.，统计；t1/2，口服给药后的表观终末半衰期；t_max，最大观测浓度的时间；V_z/F，终末期分布容积

表14

(BID口服KAR5585 14天后健康志愿者中KAR5417的平均PK参数(药代动力学可评估人群))

表14(续)

表14(续)

表14(续)

^a显示中值和范围(最小值，最大值)；

^b当WinNonlin未计算AUC0-12且t_last>11.90hr时，AUC0-tau替代AUC0-12；

^c AM是指早上剂量(上午8点)，PM是指晚上剂量(晚上8点)

^d RCmax和RAUC0-12是指第7天/第1天或第14天/第1天PK参数的蓄积率缩写词：AM，中午之前(ante meridiem)；AUC_0-12，给药后0至12小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-24，给药后0至24小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-tau，从时间0至最后可量化浓度时间的浓度-时间曲线下面积；BID，每天两次；BLQ，低于定量限；hr，小时；Max，最大值；Min，最小值；NA，不适用；ND，未测定；NR，未报告。PK，药代动力学；PM，中午之后(post meridiem)；Param.，参数；RAUC0-12，AUC0-12的蓄积率；RCmax，Cmax的蓄积率；SD，标准差；Stat.，统计；t1/2，口服给药后表观终末半衰期；tmax，最大观测浓度时间。

表15

(BID口服KAR5585 14天后健康志愿者中KAR5417和KAR5585的蓄积率(药代动力学可评估人群))

缩写词：AM，中午之前(ante meridiem)；BID，每天两次；Geo.，几何；hr，小时；N，数量；PM，中午之后(post meridiem)；R_AUC0-12，AUC_0-12的蓄积率；R_Cmax，C_max的蓄积率；SD，标准差；t_1/2，口服给药后表观终末半衰期。

KAR5585和KAR5417的剂量比例评估：

个体血浆KAR5585和KAR5417第1天和第14天Cmax KAR5585剂量的散点图分别列于图14a和14b以及图15a和15b。个体血浆KAR5585和KAR5417第1天和第14天AUC0-12 KAR5585剂量的散点图列于图16a和16b以及图17a和17b。血浆KAR5585和KAR5417 PK参数的剂量比例评估总结见表16。使用幂模型在重复剂量、每天两次给予KAR5585之后评估KAR5585和KAR5417的剂量比例。根据暴露量(例如，C_max、AUC_0-12、AUC_0-tau和/或AUC_0-inf)对比剂量的图，如果斜率(β)的95％置信区间(CI)包括统一性(例如，1.0)，则暴露量增加视为与剂量成比例。表16中列出的CI表明，KAR5585和KAR5417的Cmax、AUC0-12和/或AUC0-inf在进食状态下给予100-400mg KAR5585(第2部分，第2-4组)后以剂量成比例方式增加。

表16

(进食条件下100至400mg KAR5585作为重复口服剂量给药后血浆KAR5417和KAR5585药代动力学参数AUC_0-12、AUC_0-inf和C_max的剂量比例分析总结(药代动力学可评估人群))

缩写词：AM，中午之前(ante meridiem)；AUC_0-12，给药后0至12小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-24，给药后0至24小时浓度与时间曲线下面积(使用梯形规则计算)；AUC_0-inf，从时间0外推至无穷大时间的浓度与时间曲线下面积；NC，未计算；PK，药代动力学。

药代动力学结果讨论：

KAR5585给药后，KAR5585被迅速吸收。对于第2部分第2-4组的100、200和400mgKAR5585剂量(进食状态)，所有给药日和时间的至KAR5585血浆峰浓度中位时间范围分别为0.75-4小时、1.5至6小时和1.5至6小时。一些证据表明，晚间KAR5585给药于第7天吸收延迟，其中100、200和400mg剂量下至KAR5585峰值血浆浓度中位时间分别为4小时、6小时和6小时。第7天下午t_max值位于第1天、第7天和第14天确定的tmax值上限。这在第1天未观察到。

通过平均C_max测得的峰值血浆KAR5585浓度在100-400mg剂量下以剂量成比例方式增加(第2部分，第2-4组，进食状态)。第1天，100mg剂量(第2组)和400mg剂量(第4组)之间剂量增加4倍时平均C_max值增加4.4倍。第14天，100mg剂量(第2部分第2组)和400mg剂量(第2部分第4组)之间剂量增加4倍时平均C_max值增加约3.0倍至4倍。

KAR5585全身暴露量(通过平均AUC_0-12和AUC_0-24测得)似乎在100和400mg之间剂量水平下以剂量成比例方式增加，第1天，100mg剂量(第2部分第2组)至400mg剂量(第2部分第4组)下剂量增加4倍时平均AUC_0-12和AUC_0-24估计值分别增加5.1倍和3.6倍。第14天，100mg剂量(第2部分第2组)至400mg剂量(第2部分第4组)剂量下剂量增加4倍时平均AUC_0-12和AUC_0-24估计值分别增加3.1倍和3.63倍。

KAR5585的平均表观消除半衰期随研究剂量水平增加而增加，重复剂量每天两次100、200和400mg口服给予KAR5585后第14天的平均值分别为2.73、4.08和6.45小时(第2部分，第2-4组，进食状态)。KAR5585半衰期在空腹状态下口服100mg重复每天两次给药后第14天为2.49小时，与进食状态下100mg剂量的半衰期(2.73小时)相当。

通过平均C_max测得的峰值血浆KAR5417浓度在100-400mg剂量下以高于剂量成比例方式增加(第2部分，第2-4组，进食状态)。第1天，100mg剂量(第2组)和400mg剂量(第4组)之间剂量增加4倍时平均C_max值增加6.9倍。第14天平均C_max值以近似剂量成比例方式增加，100mg剂量(第2部分第2组)和400mg剂量(第2部分第4组)之间剂量增加4倍时平均C_max值增加约4.5倍。

全身暴露于KAR5417的平均程度(通过平均AUC_0-12和AUC_0-24测得)似乎在100和400mg之间剂量水平下以高于剂量成比例方式增加，第1天，100mg剂量(第2部分第2组)至400mg剂量(第2部分第4组)下剂量增加4倍时平均AUC_0-12和AUC_0-24估计值分别增加7.0倍和6.45倍。第14天，100mg剂量(第1部分第2组)至400mg剂量(第2部分第4组)剂量下剂量增加4倍时平均AUC_0-12和AUC_0-24估计值分别增加4.6倍和4.45倍。

总体而言，全身暴露于KAR5417的平均程度(通过平均AUC_0-12和平均AUC0_0-24测得)在空腹条件下(第2部分第1组；第1天AUC_0-12＝741hr*ng/mL；第14天AUC_0-24＝1650hr*ng/mL)相对于进食条件下(第2部分第2组；第1天AUC_0-12＝470hr*ng/mL；第14天AUC_0-24＝1220hr*ng/mL)似乎相当。这一观察结果与第1部分第3A和3B组(400mg KAR5585)中的食物影响比较相反。在第1部分，高脂肪、高热量膳食导致进食条件下给予KAR5585 400mg后KAR5417的AUC_0-inf(AUC_0-inf＝6710ng·hr/mL)比空腹条件下(AUC_0-inf＝3650ng·hr/mL)高约1.8倍。

通过比较第7天和第14天AUC_0-12和C_12hr值，在每天两次口服给药KAR5585共14天后进行评估，KAR5417的稳态血浆水平截至第7天达到。KAR5417蓄积率与第7天/第1天和第14天/第1天R_Cmax和R_AUC0-12进行了比较，并证实截至第7天达到稳态。KAR5585 100mg、200mg和400mg剂量下KAR5417的R_AUC0-12值范围分别为2.19-2.57、1.09-1.34和1.65-2.38，表明KAR5417的PK与时间无关，且在每天两次重复给药14天后第7天达到稳定状态。

药代动力学结论：

KAR5585是活性TPH1抑制剂KAR5417的前药。KAR5585给药后，KAR5585被迅速吸收并转化为KAR5417。

通过平均C_max测得的峰值血浆KAR5417浓度在100-400mg剂量下以高于剂量成比例方式增加(第2部分，第2-4组，进食状态)。第1天，100mg剂量(第2组)和400mg剂量(第4组)之间剂量增加4倍时平均C_max值增加6.9倍。第14天，平均C_max值以近似剂量成比例方式增加，100mg剂量(第2部分第2组)和400mg剂量(第2部分第4组)之间剂量增加4倍时平均C_max值增加约4.5倍。对于第2部分第2-4组的100、200和400mg KAR5585剂量(进食状态)，至KAR5417峰值血浆浓度中位时间范围分别为2至6小时、3至8小时和3至6小时。

总体而言，全身暴露于KAR5417的平均程度(通过平均AUC_0-12和平均AUC0_0-24测得)在空腹条件下(第2部分第1组；第1天AUC_0-12＝741hr*ng/mL；第14天AUC_0-24＝1650hr*ng/mL)相对于进食条件下(第2部分第2组；第1天AUC_0-12＝470hr*ng/mL；第14天AUC_0-24＝1220hr*ng/mL)似乎相当。这一观察结果与第1部分第3A和3B组(400mg KAR5585)中的食物影响比较相反。在第1部分，高脂肪、高热量膳食导致进食条件下给予KAR5585 400mg后KAR5417的AUC_0-inf(AUC_0-inf＝6710ng·hr/mL)比空腹条件下(AUC_0-inf＝3650ng·hr/mL)高约2倍。

KAR5417的平均表观消除半衰期在重复剂量每天两次100、200和400mg口服给予KAR5585后第14天分别为19.6、25.0和30.6小时(第2部分，第2-4组，进食状态)。400mg剂量KAR5585重复给药时KAR5417的消除半衰期(30.6小时)与400mg KAR5585单次给药(第1部分第3B组)后KAR5417的消除半衰期(20.5小时)相似。

通过评估第7天和第14天AUC_0-12和C_12hr值比较，每天两次给予KAR558514天后进行评估，KAR5417血浆水平截至第7天达到稳态暴露量。KAR5417蓄积率与第7天/第1天和第14天/第1天R_Cmax和R_AUC0-12进行了比较。KAR5585 100mg、200mg和400mg剂量下KAR5417的R_AUC0-12值范围分别为2.19-2.57、1.09-1.34和1.65-2.38，表明KAR5417的PK与时间无关，且在每天两次重复给药14天后第7天达到稳定状态。

生物标志物评估：

在给予KAR5585或安慰剂的受试者中进行了生物标志物评估。

该研究的生物标志物部分在第2部分MAD中使用生物标志物人群进行。评估的生物标志物有血清5-HT和血浆5-HIAA以及尿液5-HIAA/24小时(根据测量、调整、估算结果，每克肌酐)。尿液5-HIAA通过经验证(21C.F.R.58，符合GLP)的方法使用液相色谱分离和串联质谱检测法进行测定。

生物标志物人群由具有可评估基线(给药前第1天)和至少一个给药后(第7天或第14天)生物标志物测量值的所有受试者组成。

总共48名受试者根据方案接受研究药物(表22)。两个血浆5HIAA值排除在分析之外，因为缺少第7天评估。这些是KAR5585 200mg进食组中受试者001-M036和KAR5585 100mg空腹组中受试者001-M001的数值。缺少其中一名或两名受试者的第7天值的表格和图都标有“s”。排除值根据统计标准和临床敏感性确定。

基线特征：

基线特征列于表23中。生物标志物血清5-HT、血浆-5HIAA、24小时尿液中测得的5-HIAA基线水平(未针对肌酐***的每日变化进行调整(测量的尿液5-HIAA))、24小时尿液中测得的5-HIAA(对第1、7和14天的平均24小时肌酐***量进行调整(调整后尿5-HIAA))、估计的尿5-HIAA和尿5-HIAA在5个治疗组(安慰剂、KAR5585 100mg空腹、KAR5585 100mg进食、KAR5585 200mg进食和KAR5585 400mg进食)中相似。

生物标志物分析：生物标志物结果和个体受试者数据列表：

分别对每个KAR5585剂量、合并的所有KAR5585剂量和合并的所有安慰剂受试者的生物标志物数据进行分析。

对以下项目进行了生物标志物分析：

·血清5-HT

·血浆5-HIAA

·尿5-HIAA/24小时(根据测量、调整、估算结果，每克肌酐)

对生物标志物变化以及相对于PK参数的生物标志物变化进行了分析。计划对第7天和第14天生物标志物测量合并值与相应PK参数进行线性混合效应建模，以解释同一受试者的重复测量，但并未进行，因为第7天和第14天与PK参数之间的关系彼此不一致。

主要生物标志物终点：血浆5羟基吲哚乙酸从第1天至第14天的变化：

KAR5585给药可降低血浆5-HIAA浓度。进食条件下随机分配至KAR5575400mg的受试者中，血浆5-HIAA的平均百分比变化从第1天至第7天为-56.67，从第1天至第14天为-53.33。随机分配接受安慰剂的受试者中，第7天的平均百分比变化为+19.79，第14天为+20.12。对于每个剂量组和第14天所有剂量组合，与安慰剂相比，第1天至第14天血浆5-HIAA浓度的绝对变化和百分比变化的平均差异具有有利于KAR5585的统计学意义(表17)。

表17

(按组列出的KAR5585和安慰剂之间相对于第1天给药前的血浆5-HIAA(ng/mL)变化差异–第2部分MAD生物标志物人群)

缩写词：5-HIAA，5-羟基吲哚乙酸；CI，置信区间；MAD，多次递增剂量。

生物标志物：测得的尿液5-羟基吲哚乙酸：

尿液5-HIAA/24小时以4种不同方式进行分析：根据24小时采集样本测量和(为了纠正任何采集错误)并且针对肌酐***量进行调整，通过受试者的预期肌酐***量(如定义在并表示为每克肌酐)估计。4种方式中每一种的结果都相似，并在本报告中列出了测量的尿液。调整、估计和每克肌酐结果的表格和图列于第14节中。

KAR5585给药可降低测量的尿液5-HIAA浓度。进食条件下随机分配至KAR5575400mg的受试者中，测得尿液5-HIAA的平均百分比变化从第1天至第7天为-39.97，从第1天至第14天为-50.85。随机分配接受安慰剂的受试者中，第7天的平均百分比变化为+9.44，第14天为+3.97。

第7天和第14天测得的尿液5-HIAA相对于第1天的绝对和相对变化差异在所有剂量组中均具有有利于KAR5585的统计学意义，除了：KAR5585 100mg空腹剂量组第14天的相对变化(表18)。

表18

(按组列出的KAR5585和安慰剂之间相对于第1天给药前的测得a尿液5-羟基吲哚乙酸(mg/24小时)变化差异(生物标志物人群))

表18(续)

^a测得值按24小时5-HIAA***量测量值，未针对每日肌酐***变化进行调整。

缩写词：5-HIAA，5-羟基吲哚乙酸；CI，置信区间。

第7天和第14天肌酐标准化尿液5-HIAA相对于第1天的绝对变化和百分比变化在所有剂量组中均具有有利于KAR5585(对比安慰剂)的统计学意义。

血清5-羟色胺：

400mg进食和所有KAR5585合并剂量下，第1天至第14天血清5-HT浓度绝对和相对变化的平均差异与安慰剂相比具有有利于KAR5585的统计学意义(表19)。

与安慰剂相比，第7天血清5-HT浓度相对于第1天的变化百分比平均差异具有有利于200mg进食剂量组的统计学意义。

表19

(按组列出的KAR5585和安慰剂之间相对于第1天给药前的血清5-HT(ng/mL)变化差异–第2部分MAD生物标志物人群)

表19(续)

与药代动力学参数相关的生物标志物分析：

所有受试者均接受KAR5585或安慰剂给药。给药后，KAR5585被迅速吸收，活性部分KAR5417迅速出现在血浆中。

PK-生物标志物分析中只纳入具有所有生物标志物结果和PK参数AUC_0-24、C_min、给药后12小时获得的浓度(C₁₂hr)和AUC_0-12结果的受试者。PK参数AUC_0-24、Cmin、C12_hr和AUC_0-12根据方案中所述的参数(AUC_0-24、C_min和C_max)进行调整，以解释每天两次给药。

第2部分(MAD)中的所有受试者都有资格接受生物标志物分析。只有被随机分配接受活性药物的生物标志物人群子集被纳入PK-生物标志物分析。

药代动力学参数和血浆5-羟基吲哚乙酸，主要生物标志物终点：

第14天，血浆5-HIAA相对于基线的绝对和相对变化与AUC_0-24、C_max、C₁₂和AUC_0-12显著相关(P≤.0010)。

PK参数的较大值与血浆5-HIAA浓度的较大降低相关，如图23所示，其显示了血浆5-HIAA相对于基线的相对变化与KAR5417 AUC_0-24之间的关系。

图23公开了接受KAR5585的受试者(第2部分MAD生物标志物人群)中第14天血浆5-HIAA相对于第1天给药前对比AUC_[0-24]的绝对和相对变化。

虽然第7天血清5-HT浓度相对于基线的绝对或相对变化与KAR5417的AUC0-24、Cmax、C12或AUC0-12之间无显著相关性，但第14天的绝对和相对变化均相关(P<.0010)。

虽然第7天测得的尿液5-HIAA相对于基线的绝对或相对变化与KAR5417的AUC0-24、Cmax、C12或AUC0-12之间无显著相关性，但第14天的绝对和相对变化均显著相关(P≤.0067)。PK参数的较大值与测得的尿液5-HIAA浓度的较大降低相关，其显示了第1天至第14天测得的尿液5-HIAA(mg/24小时)相对变化与KAR5417 AUC_0-24之间具有关系。

调整和估计的尿液5-HIAA和KAR5417 PK参数之间的关系与测得的尿液5-HIAA之间的关系相似：虽然第7天尿液5-HIAA相对于基线的绝对或相对变化与KAR5417 PK参数之间无显著相关性，但第14天尿液5-HIAA和KAR5417PK参数的绝对和相对变化均具有显著相关性(调整后尿液5-HIAA，P≤.0007；估计尿液5-HIAA，P≤.0110)。

生物标志物结果讨论：

血浆5-HIAA(预先确定为主要生物标志物终点)与KAR5585剂量和给药持续时间之间存在很强关联性。血浆5-HIAA从第1天至第14天的平均减少量，最高剂量时(–53.33％，400mg进食)大于最低剂量时(-28.71％，100mg空腹；-32.58％，100mg进食)。KAR5585和安慰剂之间相对于第1天变化的平均百分比对于每个剂量组和第14天汇总的所有剂量均具有显著差异(P<.0001)，但在第7天对于任何剂量组均不显著。

尿液5-HIAA/24小时与KAR5585剂量之间也存在很强关联性。在最高KAR5585剂量(400mg)下，第1天至第14天测得的尿液5-HIAA平均变化百分比为50.85，而在被随机分配接受安慰剂的受试者中平均变化百分比为+3.97。除一个剂量组(KAR5585 100mg空腹剂量组第14天的相对变化)外，第1天至第14天绝对和相对变化的平均差异在所有剂量组中均具有有利于KAR5585的统计学意义。尿液5-HIAA/24小时的结果与调整后、估算和每克肌酐的结果相当。

血清5-HT未显示血清素生物标志物与KAR5585剂量或给药持续时间之间存在强关联性。对于最高剂量组(400mg进食)和所有汇总的KAR5585剂量，KAR5585和安慰剂之间相对于第1天的变化差异具有统计学意义。

生物标志物结论：

血浆和尿液的5-HIAA(5-HT合成的PD标志物)均观察到剂量和时间依赖性降低。

在最高KAR5585剂量(400mg)下，第1天至第14天的血浆5-HIAA浓度平均变化百分比为-53.33，而在被随机分配接受安慰剂的受试者中平均变化百分比为+20.12。

在最高KAR5585剂量(400mg)下，第1天至第14天测得的尿液5-HIAA平均变化百分比为-50.85，而在被随机分配接受安慰剂的受试者中平均变化百分比为+3.97。尿液5-HIAA/24小时的结果与调整后、估算和每克肌酐的结果相当。

KAR5417暴露量和5-HIAA降低之间存在很强的关系。

总体结论：

研究分为2个部分：SAD(第1部分)和MAD(第2部分)。第1部分(SAD)进一步分为第1阶段(空腹给药)和第2阶段(进食给药，食物影响)。给予的KAR5585剂量如下：

·第1部分(SAD)第1阶段(空腹)：第1至第6组分别为100mg、200mg、400mg、700mg、1200mg或2000mg

·第1部分(SAD)第2阶段(进食，高脂食物的影响)：仅第3组400mg

·第2部分(MAD)：第1至第4组分别给予100mg(空腹)、100mg(进食)、200mg(进食)和400mg(进食)或匹配的安慰剂BID(大约每12小时一次)，共27次。

药代动力学：KAR5585(前药)给药后，KAR5417(活性TPH1抑制剂)迅速出现在血浆中，这一观察结果与KAR5585快速吸收和有效转化为KAR5417一致。

在第1部分第2阶段进食条件下给予KAR5585增加了KAR5585和KAR5417的暴露程度和峰值。这视为暴露量的临床相关变化。在第2部分，KAR5417全身暴露的平均程度(通过平均AUC_0-12和AUC_0-24测得)似乎与空腹条件下相当。这一观察结果与第1部分中的食物影响比较相反。

生物标志物：血浆和尿液的5-HIAA(5-HT合成的PD标志物)均观察到剂量和时间依赖性降低。

KAR5417暴露量和5-HIAA降低之间存在很强的关系。

KAR5585(前药)给药后，KAR5417(活性TPH1抑制剂)迅速出现在血浆中，这一观察结果与KAR5585快速吸收和有效转化为KAR5417一致。KAR5417暴露量和5-HIAA降低之间存在很强的关系。前药(KAR5585)和活性药物(KAR5417)均未显示任何以剂量依赖性方式增加QTcF的趋势。

应当理解的是，前面的描述仅是本公开的说明。在不脱离本公开的情况下，本领域技术人员可以作出各种替代和修改。因此，本公开旨在涵盖所附权利要求围内的所有此类替代、修改和变化。

Claims

1.一种治疗肺动脉高压的每日给药方案，包括两个不同剂型，其中每个剂型包括约600mg至约800mg量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯。

2.权利要求1中所述的每日给药方案，其中各剂型包括RVT-1201，其中(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯基本如图1所示。

3.权利要求1或2中所述的每日给药方案，其中所述剂型为口服剂型。

4.权利要求1至3中任一项所述的每日给药方案，其中每个剂型还包括一定量的药用赋形剂。

5.一种治疗肺动脉高压的每日给药方案，其包括1200mg至1600mg量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯。

6.权利要求5中所述的每日给药方案，其中(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯基本上如权利要求1中所述。

7.权利要求5或6的每日给药方案，其中所述量还包括药用赋形剂。

8.一种治疗肺动脉高压的方法，其包含向有需要的人类患者每日给予1200mg至1600mg量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯。

9.权利要求8中的方法，其中(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯基本上如图1中所示。

10.权利要求8或9的方法，其中所述量为口服给药。

11.权利要求8至11任一项中所述的方法，其中所述量以600mg至800mg BID给药。

12.一种在开始治疗后14天内将血清素生物合成水平降低至少50％的方法，其包含向有需要的人类患者每日给予约800mg至约1600mg量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯。

13.权利要求12中的方法，其中(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯基本上如图1中所示。

14.权利要求12或13的方法，其中所述量为口服给药。

15.权利要求12至14任一项中所述的方法，其中给予的量为约400mg至约800mg BID。

16.权利要求12中的方法，其中所述量以选自由约400mg BID、600mg BID和800mg BID组成组的剂量给予。

17.一种在开始给药后14天内AUC_0-tau达到≥2530ng.hr/mL(S)-乙基-8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯的方法，其包含向人类患者每日给予有效量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯。

18.权利要求17的方法，其中给药量为每天约800mg至约1600mg。

19.权利要求18的方法，其中给予的量为约400mg至约800mg BID。

20.一种在给药后14天内实现尿5-HIAA降低>50％的方法，其包含向人类患者每日给予有效量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯。

21.权利要求19的方法，其中给药量为每天约800mg至约1600mg。

22.权利要求20的方法，其中给予的量为约400mg至约800mg BID。

23.一种治疗肺动脉高压的方法，其包含向有需要的人类患者每日给予一定量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基])-2,2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸盐，从而足以在开始给药后14天内达到AUC_0-tau≥2530ng.hr/mL(S)-8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1.1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸。

24.一种治疗肺动脉高压的方法，其包含向有需要的人类患者每日给予一定量的(S)-乙基8-(2-氨基-6-((R)-1-(5-氯-[1,1'-联苯]-2-基)-2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-羧酸酯，从而在开始给药后14天内有效达到尿液5-HIAA降低>50％。