CN113416629B - 一种肿瘤化疗药物敏感性检测试剂盒和检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种肿瘤化疗药物敏感性检测试剂盒和检测方法，具体涉及肿瘤化疗药物敏感性检测技术领域，包括以下步骤：步骤一、在无菌环境下摘取肿瘤组织和部分肿瘤周围正常的细胞组织，然后处理摘取下来的肿瘤组织和细胞组织，再在无菌环境下用剪刀将其切割成1立方毫米大小的组织块；步骤二、制备培养基：提取肿瘤患者的血清充当培养基，并在使用前对血清进行灭活处理，并在零下20℃的条件下进行保存；步骤三、选取和配制其他常用药剂；步骤四、制备培养液。本发明通过通过利用患者的血清充当培养基，并将肿瘤细胞与其周围完整的细胞组织共同培养，能够最大限度的模拟病患的生理特征，然后再向该培养基中添加化料药物，从而能够提高测定结果的准确性。

Description

一种肿瘤化疗药物敏感性检测试剂盒和检测方法
技术领域
本发明实施例涉及肿瘤化疗药物敏感性检测技术领域，具体涉及一种肿瘤化疗药物敏感性检测试剂盒和检测方法。
背景技术
肿瘤(tumor,neoplam)是一种基因病，但并非是遗传的。它是指细胞在致癌因素作用下，基因发生了改变，失去对其生长的正常调控，导致单克隆性异常增生而形成的新生物。这种新生物常形成局部肿块，因而得名。肿瘤分良性肿瘤和恶性肿瘤两种，良性肿瘤在通过手术治疗后一般能够恢复健康，但是恶性肿瘤因为其顽固性不容易被治愈。恶性肿瘤也就是人们常说的癌症，不少人在患了癌症后认为被判了死刑，心态极为消极。近年来，恶性肿瘤治疗又出现了新方法，这就是空气负离子自然疗法。大量临床实验证实，空气负离子理疗癌症效果显著，是除放疗、化疗、手术治疗外地又一新方法。在肿瘤的常见治疗中，肿瘤化疗耐药是导致化疗失败的主要原因之一，如何制定个体化化疗方案提高化疗疗效是临床亟待解决的难题。肿瘤体外药物敏感性检测技术能在患者化疗之前检测出该患者肿瘤细胞对药物的敏感性，准确预见体内治疗效果，从而为患者筛选出相对有效化疗药物，为临床医师确定化疗方案和开展有的放矢的个体化治疗提供科学依据。其良好的稳定性和重复性、高敏感性、高可评价率、高通量筛选、计算机扫描和软件分析等特点，使该技术体外检测结果与体内治疗反应间具有高度的一致性，其总的预测准确率在85％以上，阳性和阴性预测值、敏感性和特异性均高于其他技术。大量临床研究表明，肿瘤体外药物敏感性检测与临床疗效存在一定的相关性，体外药敏检测能较好的指导临床用药，提高临床疗效。目前肿瘤药物敏感性检测方法有如下几种：软琼脂克隆形成实验(HTCA)、四唑蓝比色法(MTT)、差别染色细胞毒检测方法(DiSC)以及三磷酸腺苷生物发光法。
现有技术在进行肿瘤化疗药物敏感性检测时，会模拟人体制备培养基，使得肿瘤细胞能够顺利培养，但是由于患者的个体差异性较大，每个患者的生理条件都是不一样的，所以每个患者对与该化疗药物的反应也是不一样的，该检测结果在针对不同的患者时存在一定的误差。
发明内容
为此，本发明实施例提供一种肿瘤化疗药物敏感性检测试剂盒和检测方法，通过利用患者的血清充当培养基，并将肿瘤细胞与其周围完整的细胞组织共同培养，能够最大限度的模拟病患的生理特征，然后再向该培养基中添加化料药物，从而能够提高测定结果的准确性，以解决现有技术中由于不同患者存在个体差异性，导致的检测结果存在误差的问题。
为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：一种肿瘤化疗药物敏感性检测试剂盒和检测方法，包括试剂盒，所述试剂盒内部设有两个试剂杯，两个所述试剂杯底部螺纹连接有第一底座，所述第一底座底部固定设有竖管，所述竖管外端固定设有第一电磁阀和流量计，所述流量计设在第一电磁阀底部，所述竖管外端固定连接有多个第一连接管，所述第一连接管另一端固定设有第二底座，所述第二底座和第一底座顶部均固定设有出水管，所述出水管外端顶部开设有多个通孔，所述第二底座顶部螺纹连接有配料筒，所述出水管顶端插接在配料筒内部，所述配料筒和试剂杯内部底端插接有橡胶塞，所述橡胶塞底端与出水管顶端相接触，所述橡胶塞底部固定设有多个弹簧，所述弹簧底端与配料筒和试剂杯内部底端固定连接，所述配料筒内部设有橡胶活塞，所述橡胶活塞设在橡胶塞顶部，所述配料筒顶部固定设有第二连接管，所述第二连接管外端固定设有第二电磁阀，所述第二连接管一端螺纹连接有管道接头，所述管道接头一端插接在试剂盒内部，所述试剂盒内部设有送风机构，所述试剂盒顶部设有杀菌机构。
进一步地，所述送风机构包括两个风机，两个所述风机分别固定设在试剂盒两侧，所述风机顶部固定设有第三连接管，所述第三连接管一端延伸入试剂盒内部，所述试剂盒侧壁中开设有流道，所述管道接头一端与流道相连通，所述第三连接管一端延伸入流道内部并与流道相连通。
进一步地，所述杀菌机构包括盒盖，所述盒盖设在试剂盒顶部，所述盒盖后端通过阻尼转轴与试剂盒后侧活动连接，所述盒盖内部顶端固定设有多个紫外线杀菌灯，多个所述盒盖顶部中间固定设有控制器，所述控制器顶部设有控制面板，所述控制器与盒盖、第一电磁阀、流量计和第二电磁阀电性连接。
本发明还包括使用包括使用该肿瘤化疗药物敏感性检测用试剂盒的检测方法，具体步骤如下所示：
步骤一、在无菌环境下摘取肿瘤组织和部分肿瘤周围正常的细胞组织，然后处理摘取下来的肿瘤组织和细胞组织，再在无菌环境下用剪刀将其切割成立方毫米大小的组织块；
步骤二、利用试剂盒制备培养基：提取肿瘤患者的血清充当培养基，并在使用前对血清进行灭活处理，并在零下℃的条件下进行保存，将提取的血清加入试剂盒内部左侧试剂杯中，然后再将处理血清所需要使用的试剂分别放置在该试剂杯周围的多个配料筒中，然后关闭控制器，并通过控制器启动紫外线杀菌灯，利用紫外线杀菌灯对试剂盒内部进行杀菌处理，然后再通过控制器启动位于左侧的风机，并且依次打开左侧的多个第二连接管外端的第二电磁阀，使得风机工作过程中产生的气体会通过第三连接管、流道和管道接头进入第二连接管内部，并且会通过第二连接管进入配料筒内部，然后该气体会推动配料筒内部的橡胶活塞沿着配料筒内壁向下移动，从而能够推动配料筒内部的试剂通过出水管上的通孔移动到第二底座内部，并且会通过第二底座、第一连接管、竖管和第一底座移动到试剂杯内部，此时第一电磁阀处于打开的状态，流量计会对流过的试剂的流量进行计算，从而能够定量向试剂杯中添加试剂，从而能够利用该试剂对试剂杯中的血清进行灭活处理，当配料筒中的试剂添加到一定量时，控制器会自动关闭与盛放有该试剂的配料筒连接的第二连接管上的第二电磁阀，以防止加入的试剂过多；
步骤三、利用试剂盒选取和配制其他常用药剂，包括平衡盐溶液、消化液、PH调整液、抗生素溶液和谷氨酰胺补充液，其中选取Hank’s平衡液作为平衡盐溶液、选取EDTA和胰酶混合液作为消化液、选取HEPES溶液作为PH调整液、选取青霉素和链霉素的混合液作为抗生素溶液、配制谷氨酰胺补充液，并将选取的试剂按照顺序依次加入右侧的多个配料筒内部；
步骤四、制备培养液：将试剂盒内部左侧处理后的试剂杯内部的血清倒入右侧的试剂杯内部，取出的过程中，只需要转动试剂杯，使得试剂杯与第一底座脱离，然后试剂杯内部底端的橡胶塞会在弹簧的弹力作用下自动将橡胶塞底端插接在试剂杯内部底端以防止漏水，然后再启动位于右侧风机，并且依次打开右侧的多个第二连接管外端的第二电磁阀，使得风机工作过程中产生的气体会通过第三连接管、流道和管道接头进入第二连接管内部，并且会通过第二连接管进入配料筒内部，然后该气体会推动配料筒内部的橡胶活塞沿着配料筒内壁向下移动，从而能够推动配料筒内部的试剂通过出水管上的通孔移动到第二底座内部，并且会通过第二底座、第一连接管、竖管和第一底座移动到试剂杯内部，此时第一电磁阀处于打开的状态，流量计会对流过的试剂的流量进行计算，从而能够定量向试剂杯中添加试剂，当其中一个试剂添加结束后，控制器会自动关闭与盛放有该试剂的配料筒连接的第二连接管上的第二电磁阀，以防止加入的试剂过多，然后再重复上述步骤向试剂杯内部添加其他试剂，直至向血清培养基中添加适量的Hank’s平衡液、适量的HEPES溶液、适量的青霉素和链霉素的混合液和适量的谷氨酰胺补充液，以制得培养液；
步骤五、向Hank’s平衡液中加入适量的抗生素溶液，然后再利用Hank’s平衡液和抗生素溶液的混合液分别漂洗分切后的肿瘤组织块和细胞组织块，并且漂洗多次，以洗去组织表面的血液，然后再将漂洗后的肿瘤组织块和细胞组织块混合物方别移入两组的灭菌的培养瓶中；
步骤六、在培养箱中静置两组培养瓶1-2h，然后向培养瓶中添加培养液，再将培养瓶翻转180°，并且静置翻转后的培养瓶1-2h，然后再将培养瓶翻正，使得原代细胞开始生长并且能够贴壁；
步骤七、采用无标记动态细胞分析技术测定组织块中肿瘤细胞的数量及形状变化，并且将测定结果进行记录，然后向其中一组培养瓶中添加适量化料药物和培养液的混合液，另一组培养瓶中只添加培养液不添加化料药物作为对照组，然后在培养箱中培养36h；
步骤八、取出两组培养瓶，然后再次采用无标记动态细胞分析技术测定组织块中肿瘤细胞的数量及形状变化，并且记录测定结果，并将本次测定结果与上次的测定结果进行对比，分析两次测定之间组织块中肿瘤细胞的数量及形状变化，进而判定化料药物的敏感性。
进一步地，在步骤二中，对血清进行灭活处理需要将血清在无菌、环境温度56℃的条件下静置30分钟。
进一步地，在步骤三中，谷氨酰胺补充液的配制过程中需要加温30℃，谷氨酰胺完全溶解后再过滤除菌、分装至小瓶中，并与4℃的条件下储存，储存时间不能够超过7天。
进一步地，在步骤七和八中的无标记动态细胞分析技术是将微电子细胞传感器芯片整合到表面适于细胞贴附与生长的细胞检测板的底部或细胞浸润迁移板的微孔膜，用以构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化等改变的细胞阻抗检测传感***，当贴壁生长在微电极表面的细胞引起贴壁电极界面阻抗的改变时，这种改变与细胞的实时功能状态改变成相关性，通过实时动态的电极阻抗检测可以获得细胞生理功能相关的生物信息，包括细胞生长、伸展、形态变化、浸润及迁移、死亡和贴壁等，在具体使用的过程中会使用到实时无标记细胞功能分析***，该无标记细胞功能分析***是一种用于生物学、预防医学与公共卫生学领域的分析仪器。
进一步地，在步骤五中，每组培养瓶的数量为3个，并且将多个组织块间隔开，然后向该培养瓶中添加培养液，并使得该培养液基能够浸润组织块。
进一步地，在步骤二中，对血清进行灭活处理时选用的药品是甲醛，而且血清与甲醛的比例为血清与甲醛的比例在1：4000，灭活之后再利用生理盐水冲洗3-5遍。
本发明实施例具有如下优点：
1、本发明通过从患者的体内提取血清作为培养基和制备培养液，并在提取肿瘤组织的同时还提取部分肿瘤周围的正常细胞组织，使得该正常细胞组织能够与肿瘤组织在培养基中同时存在，从而能够最大限度的模拟该患者的生理条件，使得该化疗药物的检测结果具有针对性，以消除患者的个体差异对检测结果的影响，与现有技术相比，能够有效的消除患者的个体差异对检测结果的影响，从而能够得到较为准确的化疗药物敏感性检测结果；
2、本发明通过对肿瘤细胞以组织块的形式进行培养，以减小细胞分散过程中对细胞的损坏，从而能够保存较多具有活性的肿瘤细胞，而且该细胞活性较大，从而能够避免造成大量检测样本的浪费，也能够有效的减小样本的提取次数。
附图说明
为了更清楚地说明本发明的实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是示例性的，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图引伸获得其它的实施附图。
本说明书所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本发明可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本发明所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本发明所揭示的技术内容得能涵盖的范围内。
图1为本发明提供的整体结构示意图；
图2为本发明提供的紫外线杀菌灯与盒盖的结构示意图；
图3为本发明提供的俯视图；
图4为本发明提供的两个试剂杯与试剂盒的结构示意图；
图5为本发明提供的流道与试剂盒的结构示意图；
图6为本发明提供的竖管与第一电磁阀、流量计的结构示意图；
图7为本发明提供的试剂杯与多个配料筒的结构示意图；
图8为本发明提供的图7中A的放大图。
图中：1试剂盒、2试剂杯、3第一底座、4竖管、5第一连接管、6第二底座、7出水管、8橡胶塞、9弹簧、10配料筒、11第二连接管、12管道接头、13流道、14风机、15第三连接管、16第一电磁阀、17流量计、18第二电磁阀、19盒盖、20紫外线杀菌灯、21控制器。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明实施例提供如下技术方案：一种肿瘤化疗药物敏感性检测试剂盒和检测方法，包括试剂盒1，所述试剂盒1内部设有两个试剂杯2，两个所述试剂杯2底部螺纹连接有第一底座3，所述第一底座3底部固定设有竖管4，所述竖管4外端固定设有第一电磁阀16和流量计17，所述流量计17设在第一电磁阀16底部，所述竖管4外端固定连接有多个第一连接管5，所述第一连接管5另一端固定设有第二底座6，所述第二底座6和第一底座3顶部均固定设有出水管7，所述出水管7外端顶部开设有多个通孔，所述第二底座6顶部螺纹连接有配料筒10，所述出水管7顶端插接在配料筒10内部，所述配料筒10和试剂杯2内部底端插接有橡胶塞8，所述橡胶塞8底端与出水管7顶端相接触，所述橡胶塞8底部固定设有多个弹簧9，所述弹簧9底端与配料筒10和试剂杯2内部底端固定连接，所述配料筒10内部设有橡胶活塞，所述橡胶活塞设在橡胶塞8顶部，所述配料筒10顶部固定设有第二连接管11，所述第二连接管11外端固定设有第二电磁阀18，所述第二连接管11一端螺纹连接有管道接头12，所述管道接头12一端插接在试剂盒1内部，所述试剂盒1内部设有送风机构，所述试剂盒1顶部设有杀菌机构。
进一步地，所述送风机构包括两个风机14，两个所述风机14分别固定设在试剂盒1两侧，所述风机14顶部固定设有第三连接管15，所述第三连接管15一端延伸入试剂盒1内部，所述试剂盒1侧壁中开设有流道13，所述管道接头12一端与流道13相连通，所述第三连接管15一端延伸入流道13内部并与流道13相连通。
进一步地，所述杀菌机构包括盒盖19，所述盒盖19设在试剂盒1顶部，所述盒盖19后端通过阻尼转轴与试剂盒1后侧活动连接，所述盒盖19内部顶端固定设有多个紫外线杀菌灯20，多个所述盒盖19顶部中间固定设有控制器21，所述控制器21顶部设有控制面板，所述控制器21与盒盖19、第一电磁阀16、流量计17和第二电磁阀18电性连接。
本发明还包括使用包括使用该肿瘤化疗药物敏感性检测用试剂盒的检测方法，具体步骤如下所示：
步骤一、在无菌环境下摘取肿瘤组织和部分肿瘤周围正常的细胞组织，然后处理摘取下来的肿瘤组织和细胞组织，再在无菌环境下用剪刀将其切割成1立方毫米大小的组织块；
步骤二、利用试剂盒1制备培养基：提取肿瘤患者的血清充当培养基，并在使用前对血清进行灭活处理，并在零下20℃的条件下进行保存，将提取的血清加入试剂盒1内部左侧试剂杯2中，然后再将处理血清所需要使用的试剂分别放置在该试剂杯2周围的多个配料筒10中，然后关闭控制器21，并通过控制器21启动紫外线杀菌灯20，利用紫外线杀菌灯20对试剂盒1内部进行杀菌处理，然后再通过控制器21启动位于左侧的风机14，并且依次打开左侧的多个第二连接管11外端的第二电磁阀18，使得风机14工作过程中产生的气体会通过第三连接管15、流道13和管道接头12进入第二连接管11内部，并且会通过第二连接管11进入配料筒10内部，然后该气体会推动配料筒10内部的橡胶活塞沿着配料筒10内壁向下移动，从而能够推动配料筒10内部的试剂通过出水管7上的通孔移动到第二底座6内部，并且会通过第二底座6、第一连接管5、竖管4和第一底座3移动到试剂杯2内部，此时第一电磁阀16处于打开的状态，流量计17会对流过的试剂的流量进行计算，从而能够定量向试剂杯2中添加试剂，从而能够利用该试剂对试剂杯2中的血清进行灭活处理，当配料筒10中的试剂添加到一定量时，控制器21会自动关闭与盛放有该试剂的配料筒10连接的第二连接管11上的第二电磁阀18，以防止加入的试剂过多；对血清进行灭活处理需要将血清在无菌、环境温度56℃的条件下静置30分钟；对血清进行灭活处理时选用的药品是甲醛，而且血清与甲醛的比例为血清与甲醛的比例在1：4000，灭活之后再利用生理盐水冲洗3-5遍；
步骤三、利用试剂盒1选取和配制其他常用药剂，包括平衡盐溶液、消化液、PH调整液、抗生素溶液和谷氨酰胺补充液，其中选取Hank’s平衡液作为平衡盐溶液、选取EDTA和胰酶混合液作为消化液、选取HEPES溶液作为PH调整液、选取青霉素和链霉素的混合液作为抗生素溶液、配制谷氨酰胺补充液，并将选取的试剂按照顺序依次加入右侧的多个配料筒10内部；
谷氨酰胺补充液的配制过程中需要加温30℃，谷氨酰胺完全溶解后再过滤除菌、分装至小瓶中，并与4℃的条件下储存，储存时间不能够超过7天；
步骤四、制备培养液：将试剂盒1内部左侧处理后的试剂杯2内部的血清倒入右侧的试剂杯2内部，取出的过程中，只需要转动试剂杯2，使得试剂杯2与第一底座3脱离，然后试剂杯2内部底端的橡胶塞8会在弹簧9的弹力作用下自动将橡胶塞8底端插接在试剂杯2内部底端以防止漏水，然后再启动位于右侧风机14，并且依次打开右侧的多个第二连接管11外端的第二电磁阀18，使得风机14工作过程中产生的气体会通过第三连接管15、流道13和管道接头12进入第二连接管11内部，并且会通过第二连接管11进入配料筒10内部，然后该气体会推动配料筒10内部的橡胶活塞沿着配料筒10内壁向下移动，从而能够推动配料筒10内部的试剂通过出水管7上的通孔移动到第二底座6内部，并且会通过第二底座6、第一连接管5、竖管4和第一底座3移动到试剂杯2内部，此时第一电磁阀16处于打开的状态，流量计17会对流过的试剂的流量进行计算，从而能够定量向试剂杯2中添加试剂，当其中一个试剂添加结束后，控制器21会自动关闭与盛放有该试剂的配料筒10连接的第二连接管11上的第二电磁阀18，以防止加入的试剂过多，然后再重复上述步骤向试剂杯2内部添加其他试剂，直至向血清培养基中添加适量的Hank’s平衡液、适量的HEPES溶液、适量的青霉素和链霉素的混合液和适量的谷氨酰胺补充液，以制得培养液；
步骤五、向Hank’s平衡液中加入适量的抗生素溶液，然后再利用Hank’s平衡液和抗生素溶液的混合液分别漂洗分切后的肿瘤组织块和细胞组织块，并且漂洗多次，以洗去组织表面的血液，然后再将漂洗后的肿瘤组织块和细胞组织块混合物方别移入两组的灭菌的培养瓶中；每组培养瓶的数量为3个，并且将多个组织块间隔开，然后向该培养瓶中添加培养液，并使得该培养液基能够浸润组织块；
步骤六、在培养箱中静置两组培养瓶1-2h，然后向培养瓶中添加培养液，再将培养瓶翻转180°，并且静置翻转后的培养瓶1-2h，然后再将培养瓶翻正，使得原代细胞开始生长并且能够贴壁；
步骤七、采用无标记动态细胞分析技术测定组织块中肿瘤细胞的数量及形状变化，并且将测定结果进行记录，然后向其中一组培养瓶中添加适量化料药物和培养液的混合液，另一组培养瓶中只添加培养液不添加化料药物作为对照组，然后在培养箱中培养36h；
步骤八、取出两组培养瓶，然后再次采用无标记动态细胞分析技术测定组织块中肿瘤细胞的数量及形状变化，并且记录测定结果，并将本次测定结果与上次的测定结果进行对比，分析两次测定之间组织块中肿瘤细胞的数量及形状变化，进而判定化料药物的敏感性。
在步骤七和八中的无标记动态细胞分析技术是将微电子细胞传感器芯片整合到表面适于细胞贴附与生长的细胞检测板的底部或细胞浸润迁移板的微孔膜，用以构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化等改变的细胞阻抗检测传感***，当贴壁生长在微电极表面的细胞引起贴壁电极界面阻抗的改变时，这种改变与细胞的实时功能状态改变成相关性，通过实时动态的电极阻抗检测可以获得细胞生理功能相关的生物信息，包括细胞生长、伸展、形态变化、浸润及迁移、死亡和贴壁等，在具体使用的过程中会使用到实时无标记细胞功能分析***，该无标记细胞功能分析***是一种用于生物学、预防医学与公共卫生学领域的分析仪器。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种肿瘤化疗药物敏感性检测用试剂盒，包括试剂盒(1)，其特征在于：所述试剂盒(1)内部设有两个试剂杯(2)，两个所述试剂杯(2)底部螺纹连接有第一底座(3)，所述第一底座(3)底部固定设有竖管(4)，所述竖管(4)外端固定设有第一电磁阀(16)和流量计(17)，所述流量计(17)设在第一电磁阀(16)底部，所述竖管(4)外端固定连接有多个第一连接管(5)，所述第一连接管(5)另一端固定设有第二底座(6)，所述第二底座(6)和第一底座(3)顶部均固定设有出水管(7)，所述出水管(7)外端顶部开设有多个通孔，所述第二底座(6)顶部螺纹连接有配料筒(10)，所述出水管(7)顶端插接在配料筒(10)内部，所述配料筒(10)和试剂杯(2)内部底端插接有橡胶塞(8)，所述橡胶塞(8)底端与出水管(7)顶端相接触，所述橡胶塞(8)底部固定设有多个弹簧(9)，所述弹簧(9)底端与配料筒(10)和试剂杯(2)内部底端固定连接，所述配料筒(10)内部设有橡胶活塞，所述橡胶活塞设在橡胶塞(8)顶部，所述配料筒(10)顶部固定设有第二连接管(11)，所述第二连接管(11)外端固定设有第二电磁阀(18)，所述第二连接管(11)一端螺纹连接有管道接头(12)，所述管道接头(12)一端插接在试剂盒(1)内部，所述试剂盒(1)内部设有送风机构，所述试剂盒(1)顶部设有杀菌机构。
2.根据权利要求1述的一种肿瘤化疗药物敏感性检测用试剂盒，其特征在于：所述送风机构包括两个风机(14)，两个所述风机(14)分别固定设在试剂盒(1)两侧，所述风机(14)顶部固定设有第三连接管(15)，所述第三连接管(15)一端延伸入试剂盒(1)内部，所述试剂盒(1)侧壁中开设有流道(13)，所述管道接头(12)一端与流道(13)相连通，所述第三连接管(15)一端延伸入流道(13)内部并与流道(13)相连通。
3.根据权利要求1述的一种肿瘤化疗药物敏感性检测用试剂盒，其特征在于：所述杀菌机构包括盒盖(19)，所述盒盖(19)设在试剂盒(1)顶部，所述盒盖(19)后端通过阻尼转轴与试剂盒(1)后侧活动连接，所述盒盖(19)内部顶端固定设有多个紫外线杀菌灯(20)，多个所述盒盖(19)顶部中间固定设有控制器(21)，所述控制器(21)顶部设有控制面板，所述控制器(21)与盒盖(19)、第一电磁阀(16)、流量计(17)和第二电磁阀(18)电性连接。
4.使用权利要求1-3任一项所述的肿瘤化疗药物敏感性检测用试剂盒的检测方法，具体步骤如下所示：
步骤一、在无菌环境下摘取肿瘤组织和部分肿瘤周围正常的细胞组织，然后处理摘取下来的肿瘤组织和细胞组织，再在无菌环境下用剪刀将其切割成1立方毫米大小的组织块；
步骤二、利用试剂盒(1)制备培养基：提取肿瘤患者的血清充当培养基，并在使用前对血清进行灭活处理，并在零下20℃的条件下进行保存，将提取的血清加入试剂盒(1)内部左侧试剂杯(2)中，然后再将处理血清所需要使用的试剂分别放置在该试剂杯(2)周围的多个配料筒(10)中，然后关闭控制器(21)，并通过控制器(21)启动紫外线杀菌灯(20)，利用紫外线杀菌灯(20)对试剂盒(1)内部进行杀菌处理，然后再通过控制器(21)启动位于左侧的风机(14)，并且依次打开左侧的多个第二连接管(11)外端的第二电磁阀(18)，使得风机(14)工作过程中产生的气体会通过第三连接管(15)、流道(13)和管道接头(12)进入第二连接管(11)内部，并且会通过第二连接管(11)进入配料筒(10)内部，然后该气体会推动配料筒(10)内部的橡胶活塞沿着配料筒(10)内壁向下移动，从而能够推动配料筒(10)内部的试剂通过出水管(7)上的通孔移动到第二底座(6)内部，并且会通过第二底座(6)、第一连接管(5)、竖管(4)和第一底座(3)移动到试剂杯(2)内部，此时第一电磁阀(16)处于打开的状态，流量计(17)会对流过的试剂的流量进行计算，从而能够定量向试剂杯(2)中添加试剂，从而能够利用该试剂对试剂杯(2)中的血清进行灭活处理，当配料筒(10)中的试剂添加到一定量时，控制器(21)会自动关闭与盛放有该试剂的配料筒(10)连接的第二连接管(11)上的第二电磁阀(18)，以防止加入的试剂过多；
步骤三、利用试剂盒(1)选取和配制其他常用药剂，包括平衡盐溶液、消化液、PH调整液、抗生素溶液和谷氨酰胺补充液，其中选取Hank’s平衡液作为平衡盐溶液、选取EDTA和胰酶混合液作为消化液、选取HEPES溶液作为PH调整液、选取青霉素和链霉素的混合液作为抗生素溶液、配制谷氨酰胺补充液，并将选取的试剂按照顺序依次加入右侧的多个配料筒(10)内部；
步骤四、制备培养液：将试剂盒(1)内部左侧处理后的试剂杯(2)内部的血清倒入右侧的试剂杯(2)内部，取出的过程中，只需要转动试剂杯(2)，使得试剂杯(2)与第一底座(3)脱离，然后试剂杯(2)内部底端的橡胶塞(8)会在弹簧(9)的弹力作用下自动将橡胶塞(8)底端插接在试剂杯(2)内部底端以防止漏水，然后再启动位于右侧风机(14)，并且依次打开右侧的多个第二连接管(11)外端的第二电磁阀(18)，使得风机(14)工作过程中产生的气体会通过第三连接管(15)、流道(13)和管道接头(12)进入第二连接管(11)内部，并且会通过第二连接管(11)进入配料筒(10)内部，然后该气体会推动配料筒(10)内部的橡胶活塞沿着配料筒(10)内壁向下移动，从而能够推动配料筒(10)内部的试剂通过出水管(7)上的通孔移动到第二底座(6)内部，并且会通过第二底座(6)、第一连接管(5)、竖管(4)和第一底座(3)移动到试剂杯(2)内部，此时第一电磁阀(16)处于打开的状态，流量计(17)会对流过的试剂的流量进行计算，从而能够定量向试剂杯(2)中添加试剂，当其中一个试剂添加结束后，控制器(21)会自动关闭与盛放有该试剂的配料筒(10)连接的第二连接管(11)上的第二电磁阀(18)，以防止加入的试剂过多，然后再重复上述步骤向试剂杯(2)内部添加其他试剂，直至向血清培养基中添加适量的Hank’s平衡液、适量的HEPES溶液、适量的青霉素和链霉素的混合液和适量的谷氨酰胺补充液，以制得培养液；
步骤五、向Hank’s平衡液中加入适量的抗生素溶液，然后再利用Hank’s平衡液和抗生素溶液的混合液分别漂洗分切后的肿瘤组织块和细胞组织块，并且漂洗多次，以洗去组织表面的血液，然后再将漂洗后的肿瘤组织块和细胞组织块混合物方别移入两组的灭菌的培养瓶中；
步骤六、在培养箱中静置两组培养瓶1-2h，然后向培养瓶中添加培养液，再将培养瓶翻转180°，并且静置翻转后的培养瓶1-2h，然后再将培养瓶翻正，使得原代细胞开始生长并且能够贴壁；
步骤七、采用无标记动态细胞分析技术测定组织块中肿瘤细胞的数量及形状变化，并且将测定结果进行记录，然后向其中一组培养瓶中添加适量化料药物和培养液的混合液，另一组培养瓶中只添加培养液不添加化料药物作为对照组，然后在培养箱中培养36h；
步骤八、取出两组培养瓶，然后再次采用无标记动态细胞分析技术测定组织块中肿瘤细胞的数量及形状变化，并且记录测定结果，并将本次测定结果与上次的测定结果进行对比，分析两次测定之间组织块中肿瘤细胞的数量及形状变化，进而判定化料药物的敏感性。
5.根据权利要求4所述的一种肿瘤化疗药物敏感性检测方法，其特征在于：在步骤二中，对血清进行灭活处理需要将血清在无菌、环境温度56℃的条件下静置30分钟。
6.根据权利要求4所述的一种肿瘤化疗药物敏感性检测方法，其特征在于：在步骤三中，谷氨酰胺补充液的配制过程中需要加温30℃，谷氨酰胺完全溶解后再过滤除菌、分装至小瓶中，并与4℃的条件下储存，储存时间不能够超过7天。
7.根据权利要求4所述的一种肿瘤化疗药物敏感性检测方法，其特征在于：在步骤七和八中的无标记动态细胞分析技术是将微电子细胞传感器芯片整合到表面适于细胞贴附与生长的细胞检测板的底部或细胞浸润迁移板的微孔膜，用以构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化改变的细胞阻抗检测传感***，当贴壁生长在微电极表面的细胞引起贴壁电极界面阻抗的改变时，这种改变与细胞的实时功能状态改变成相关性，通过实时动态的电极阻抗检测可以获得细胞生理功能相关的生物信息，包括细胞生长、伸展、形态变化、浸润及迁移、死亡和贴壁，在具体使用的过程中会使用到实时无标记细胞功能分析***。
8.根据权利要求4所述的一种肿瘤化疗药物敏感性检测方法，其特征在于：在步骤五中，每组培养瓶的数量为3个，并且将多个组织块间隔开，然后向该培养瓶中添加培养液，并使得该培养液基能够浸润组织块。
9.根据权利要求4所述的一种肿瘤化疗药物敏感性检测方法，其特征在于：在步骤二中，对血清进行灭活处理时选用的药品是甲醛，而且血清与甲醛的比例为血清与甲醛的比例在1：4000，灭活之后再利用生理盐水冲洗3-5遍。
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