CN113412271A - 具有半胱氨酸残基的哈米特林衍生物 - Google Patents

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CN113412271A CN202080013398.6A CN202080013398A CN113412271A CN 113412271 A CN113412271 A CN 113412271A CN 202080013398 A CN202080013398 A CN 202080013398A CN 113412271 A CN113412271 A CN 113412271A
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Abstract

式(1)所示的化合物或其盐[式中，b表示1～5的整数，X表示‑NH‑或‑CO‑，Z表示式(Z‑1)等所示的基团，R1表示氢原子或(AB)m，AB表示特定的氨基酸残基，AB有两个以上时，各个AB彼此可以相同也可以不同，并且AB彼此通过酰胺键键合，m表示1～9的整数，R2表示羟基或(AC)g，AC表示特定的氨基酸残基，AC有两个以上时，各个AC彼此可以相同也可以不同，并且AC彼此通过酰胺键键合，g表示1～9的整数]。

Description

具有半胱氨酸残基的哈米特林衍生物
技术领域
本发明涉及具有半胱氨酸残基的哈米特林(hemiasterlin)衍生物。
背景技术
哈米特林是从海绵中单离的、具有三肽结构的天然化合物，参与细胞中的微管解聚和有丝***停止(非专利文献1)。
到目前为止，几个研究小组进行了哈米特林衍生物的结构修饰，为了癌症等疾病的治疗，已发现了显示强力的细胞毒性和抗有丝***作用的哈米特林衍生物(专利文献1～5、非专利文献2～5)。但是据报道，这些哈米特林衍生物不具有靶向性，因此被递送至全身，对正常细胞也显示细胞毒性，从而显示副作用(非专利文献6)。
抗体药物复合物是抗体与药物直接结合、或者借助适当的接头结合而成的复合物。于是，抗体药物复合物具有如下特征：借助与靶细胞中表达的抗原结合的抗体将药物递送至靶细胞，由此抑制药物的全身暴露，提高对靶细胞的药效。
另外，到目前为止，几个研究小组报道了由具有马来酰亚胺基的哈米特林衍生物与抗体等的半胱氨酸残基形成了硫代琥珀酰亚胺的复合物(专利文献4、6～8)。
此外，另几个研究小组报道了：使抗体的半胱氨酸残基与药物直接结合而成的抗体药物复合物通过抗体的代谢而在细胞内释放抗体药物复合物的Cys-药物部分(非专利文献7)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：国际公开第2004/026293号
专利文献2：国际公开第96/33211号
专利文献3：美国专利第7579323号
专利文献4：国际公开第2014/144871号
专利文献5：国际公开第2003/082268号
专利文献6：国际公开第2015/095952号
专利文献7：国际公开第2015/095953号
专利文献8：国际公开第2014/057436号
非专利文献
非专利文献1：Talpir,R.et al.,Tetrahedron Lett.,1994,35,4453-4456.
非专利文献2：Zask,A.et.al.,Bioorg.Med.Chem.Lett.,2004,14,4353-4358.
非专利文献3：Zask,A.et.al.,J.Med.Chem.,2004,47,4774-4786.
非专利文献4：Yamashita,A.et.al.,Bioorg.Med.Chem.Lett.,2004,14,5317-5322.
非专利文献5：Nieman,J.A.et.al.,J,Nat.Prod.,2003,66,183-199.
非专利文献6：Rocha-Lima,C.M.et.al.,Cancer,2012,118,4262-4270.
非专利文献7：Doronina S.O.et.al.,Bioconjugate Chem.2006,17,114-124.
发明内容
发明所要解决的问题
本发明的课题在于提供对靶细胞特异性地赋予细胞杀伤、另一方面抑制了对正常细胞的细胞毒性的哈米特林衍生物。
用于解决问题的方法
本发明人进行了深入研究，结果发现，式(1)所示的具有半胱氨酸残基的哈米特林衍生物显示出强的抗肿瘤活性，另一方面，对正常细胞的细胞毒性低，从而完成了本发明。
即，本发明如下所述。
[项1]
式(1)所示的化合物或其盐。
Figure BDA0003202958710000031
[式中，
b表示1～5的整数；
X表示-NH-或-CO-；
Z表示式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)、式(Z-5)、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)或式(Z-11)所示的基团，
Figure BDA0003202958710000041
Figure BDA0003202958710000051
(式中，
n表示0～2的整数，
p表示1～3的整数，
AA表示谷氨酸残基(Glu)、天冬氨酸残基(Asp)或赖氨酸残基(Lys)，AA有两个以上时，各个AA彼此可以相同也可以不同，并且AA彼此通过酰胺键键合，(AA)n或(AA)p的N末端氮原子与羰基(a)一起形成酰胺键，
G表示-O-或-NH-，
W表示式(W-1)或式(W-2)所示的基团，
Figure BDA0003202958710000061
(式中，
R6a和R6b各自独立地表示氢原子或甲基，
R7表示C1-6烷基，
Q表示式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)或式(Q-7)所示的基团，
Figure BDA0003202958710000062
(式中，
R8a和R8b各自独立地表示氢原子、卤素原子、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
R8c、R8d和R8e各自独立地表示氢原子、卤素原子、羟基、氰基、氨基、羧基、苯基、可以被1～3个氟原子取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基酯基))
R3表示-(CH2)u-COR9，
u表示1或2，
R4和R9各自独立地表示羟基或AD，
AD表示Glu、Asp或Lys，AD的N末端氮原子与相邻的羰基一起形成酰胺键，
其中，R4或R9为AD时，n为0或1，
R5a和R5b各自独立地表示氢原子或甲基)
其中，X为-NH-时，Z为式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)或式(Z-5)，X为-CO-时，Z为式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)或式(Z-11)，
R1表示氢原子或(AB)m，
AB表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AB有两个以上时，各个AB彼此可以相同也可以不同，并且AB彼此通过酰胺键键合，
m表示1～9的整数；
R2表示羟基或(AC)g，
AC表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AC有两个以上时，各个AC彼此可以相同也可以不同，并且AC彼此通过酰胺键键合，
g表示1～9的整数；
其中，R1为(AB)m且R2为(AC)g时，m与g之和为2～10的整数]
[项2]
如项1所述的化合物或其盐，其中，式(1)由式(1-1)表示。
Figure BDA0003202958710000071
[式中，
b表示1～5的整数；
Z表示式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)或式(Z-5)所示的基团，
Figure BDA0003202958710000081
(式中，
n表示0～2的整数，
p表示1～3的整数，
AA表示谷氨酸残基(Glu)、天冬氨酸残基(Asp)或赖氨酸残基(Lys)，AA有两个以上时，各个AA彼此可以相同也可以不同，并且AA彼此通过酰胺键键合，(AA)n或(AA)p的N末端氮原子与羰基(a)一起形成酰胺键，
W表示式(W-1)或式(W-2)所示的基团，
Figure BDA0003202958710000091
(式中，
R6a和R6b各自独立地表示氢原子或甲基，
R7表示C1-6烷基，
Q表示式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)或式(Q-7)所示的基团，
Figure BDA0003202958710000092
(式中，
R8a和R8b各自独立地表示氢原子、卤素原子、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
R8c、R8d和R8e各自独立地表示氢原子、卤素原子、羟基、氰基、氨基、羧基、苯基、可以被1～3个氟原子取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基酯基))
R3表示-(CH2)u-COR9，
u表示1或2，
R4和R9各自独立地表示羟基或AD，
AD表示Glu、Asp或Lys，AD的N末端氮原子与相邻的羰基一起形成酰胺键，
其中，R4或R9为AD时，n为0或1，
R5a和R5b各自独立地表示氢原子或甲基)
R1表示氢原子或(AB)m，
AB表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AB有两个以上时，各个AB彼此可以相同也可以不同，并且AB彼此通过酰胺键键合，
m表示1～9的整数；
R2表示羟基或(AC)g，
AC表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AC有两个以上时，各个AC彼此可以相同也可以不同，并且AC彼此通过酰胺键键合，
g表示1～9的整数；
其中，R1为(AB)m且R2为(AC)g时，m与g之和为2～10的整数]
[项3]
如项2所述的化合物或其盐，其中，
R7为甲基或异丙基，
Q为式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-4)、式(Q-6)或式(Q-7)。
[项4]
如项2或3所述的化合物或其盐，其中，
p为1，
W为式(W-1)，
Q为式(Q-1)或式(Q-2)，
R8a和R8b各自独立地为氢原子、氟原子或甲氧基，
R8c、R8d和R8e各自独立地为氢原子、氟原子、羟基、氰基、氨基、羧基、甲基、三氟甲基或甲氧基，
R4和R9为羟基。
[项5]
如项2～4中任一项所述的化合物或其盐，其中，
Z为式(Z-1)、式(Z-2)或式(Z-3)，
W为式(W-1)，
Q为式(Q-1)或式(Q-2)，
R8a和R8b为氢原子，
R8c、R8d和R8e为氢原子，
R4和R9为羟基。
[项6]
如项2～5中任一项所述的化合物或其盐，其中，b为2。
[项7]
如项1所述的化合物或其盐，其中，式(1)由式(1-2)表示。
Figure BDA0003202958710000111
[式中，
b表示1～5的整数；
Z表示式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)或式(Z-11)所示的基团，
Figure BDA0003202958710000121
(式中，
n表示0～2的整数，
p表示1～3的整数，
AA表示谷氨酸残基(Glu)、天冬氨酸残基(Asp)或赖氨酸残基(Lys)，AA有两个以上时，各个AA彼此可以相同也可以不同，并且AA彼此通过酰胺键键合，
(AA)n或(AA)p的N末端氮原子与羰基(a)一起形成酰胺键，
G表示-O-或-NH-，
W表示式(W-1)或式(W-2)所示的基团，
Figure BDA0003202958710000131
(式中，
R6a和R6b各自独立地表示氢原子或甲基，
R7表示C1-6烷基，
Q表示式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)或式(Q-7)所示的基团，
Figure BDA0003202958710000132
(式中，
R8a和R8b各自独立地表示氢原子、卤素原子、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
R8c、R8d和R8e各自独立地表示氢原子、卤素原子、羟基、氰基、氨基、羧基、苯基、可以被1～3个氟原子取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基酯基))
R5a和R5b各自独立地表示氢原子或甲基)
R1表示氢原子或(AB)m，
AB表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AB有两个以上时，各个AB彼此可以相同也可以不同，并且AB彼此通过酰胺键键合，
m表示1～9的整数；
R2表示羟基或(AC)g，
AC表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AC有两个以上时，各个AC彼此可以相同也可以不同，并且AC彼此通过酰胺键键合，
g表示1～9的整数；
其中，R1为(AB)m且R2为(AC)g时，m与g之和为2～10的整数]
[项8]
如项7所述的化合物或其盐，其中，
Z为式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)或式(Z-9)，
R7为甲基或异丙基，
Q为式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-4)、式(Q-6)或式(Q-7)。
[项9]
如项7或8所述的化合物或其盐，其中，
Z为式(Z-6)或式(Z-7)，
W为式(W-1)，
Q为式(Q-1)或式(Q-2)，
R8a和R8b各自独立地为氢原子、氟原子或甲氧基，
R8c、R8d和R8e各自独立地为氢原子、氟原子、羟基、氰基、氨基、羧基、甲基、三氟甲基或甲氧基。
[项10]
如项7～9中任一项所述的化合物或其盐，其中，
R8a和R8b为氢原子，
R8c、R8d和R8e为氢原子。
[项11]
如项7～10中任一项所述的化合物或其盐，其中，b为3。
[项12]
如项1～11中任一项所述的化合物或其盐，其中，
(AB)m为丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)、缬氨酸残基(Val)、*1-(Glu)-(Gly)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)或*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)-(Val)，
在此，*1末端表示与半胱氨酸残基形成了酰胺键，
(AC)g为甘氨酸残基(Gly)或脯氨酸残基(Pro)。
[项13]
如项1～11中任一项所述的化合物或其盐，其中，
(AB)m为丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，
(AC)g为甘氨酸残基(Gly)。
[项14]
如项1～13中任一项所述的化合物或其盐，其中，R1为氢原子，R2为羟基。
[项15]
如项1～14中任一项所述的化合物或其盐，其中，(AA)n为式(A-1)所示的基团。
Figure BDA0003202958710000161
(式中，AA1和AA2各自独立地表示Glu、Asp或Lys)
[项16]
如项1～14中任一项所述的化合物或其盐，其中，(AA)n为式(A-2)所示的基团。
Figure BDA0003202958710000162
(式中，AA1和AA2各自独立地表示Glu、Asp或Lys)
[项17]
如项1～14中任一项所述的化合物或其盐，其中，n为0或1。
[项18]
如项1所述的化合物或其盐，其中，所述化合物选自以下的化合物。
Figure BDA0003202958710000171
[项19]
如项1所述的化合物或其盐，其中，所述化合物选自以下的化合物。
Figure BDA0003202958710000181
发明效果
本发明的哈米特林衍生物对抗原表达细胞特异性地显示细胞杀伤活性，在抗原表达细胞以外的正常细胞中的细胞毒性低，因此可能成为安全性优良的抗癌剂。
附图说明
图1是示出实施例MM1和MM47的猪微管蛋白的聚合抑制活性的图。
具体实施方式
本说明书中，“C1-6烷基”是指碳原子数为1～6的直链状或支链状的饱和烃基。作为“C1-6烷基”，优选列举“C1-4烷基”，更优选列举“C1-3烷基”，进一步优选列举甲基、乙基、丙基或异丙基，特别优选列举甲基或乙基。
作为“C1-3烷基”的具体例，可以列举例如甲基、乙基、丙基和异丙基。作为“C1-4烷基”的具体例，除了作为“C1-3烷基”的具体例所列举的基团以外，还可以列举例如丁基、1、1-二甲基乙基、1-甲基丙基、2-甲基丙基等。作为“C1-6烷基”的具体例，除了作为“C1-4烷基”的具体例所列举的基团以外，还可以列举例如戊基、3-甲基丁基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、1,1-二甲基丙基、己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基等。
本说明书中，“C1-6烷基酯”是指酯(-COOR’)的R’为上述“C1-6烷基”的酯。作为“C1-6烷基酯”，优选列举“C1-4烷基酯”，更优选列举“C1-3烷基酯”，进一步优选列举甲基酯、乙基酯、异丙基酯或叔丁基酯，特别优选列举甲基酯或乙基酯。
作为“C1-3烷基酯”的具体例，可以列举例如甲基酯、乙基酯、丙基酯或异丙基酯。作为“C1-4烷基酯”的具体例，除了作为“C1-3烷基酯”的具体例所列举的例子以外，还可以列举例如丁基酯、叔丁基酯等。作为“C1-6烷基酯”的具体例，除了作为“C1-4烷基酯”的具体例所列举的例子以外，还可以列举例如戊基酯、3-甲基丁基酯、2-甲基丁基酯、2,2-二甲基丙基酯、1-乙基丙基酯、1,1-二甲基丙基酯、己基酯、4-甲基戊基酯、3-甲基戊基酯、2-甲基戊基酯、1-甲基戊基酯、3,3-二甲基丁基酯、2,2-二甲基丁基酯、1,1-二甲基丁基酯、1,2-二甲基丁基酯等。
本说明书中，“C1-6烷氧基”是指被“C1-6烷基”取代的氧基。作为“C1-6烷氧基”，优选列举“C1-4烷氧基”，更优选列举“C1-3烷氧基”，进一步优选列举甲氧基、乙氧基、丙氧基或1-甲基乙氧基，特别优选列举甲氧基或乙氧基。
作为“C1-3烷氧基”的具体例，可以列举例如甲氧基、乙氧基、丙氧基或1-甲基乙氧基。作为“C1-4烷氧基”的具体例，除了作为“C1-3烷氧基”的具体例所列举的例子以外，还可以列举例如丁氧基、1,1-二甲基乙氧基、1-甲基丙氧基、2-甲基丙氧基等。作为“C1-6烷氧基”的具体例，除了作为“C1-4烷氧基”的具体例所列举的例子以外，还可以列举例如戊氧基、3-甲基丁氧基、2-甲基丁氧基、2,2-二甲基丙氧基、1-乙基丙氧基、1,1-二甲基丙氧基、己氧基、4-甲基戊氧基、3-甲基戊氧基、2-甲基戊氧基、1-甲基戊氧基、3,3-二甲基丁氧基、2,2-二甲基丁氧基、1,1-二甲基丁氧基、1,2-二甲基丁氧基等。
本说明书中，“卤素原子”可以列举氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。优选列举氟原子或氯原子，更优选列举氟原子。
式(1)所示的化合物和其盐(以下有时也称为“本发明的哈米特林衍生物”)如下所述。
Figure BDA0003202958710000201
式中，b表示1～5的整数。即，b为1、2、3、4或5。作为b的一个方式，可以列举1～4的整数，作为另一个方式，可以列举1～3的整数，作为另一个方式，可以列举2或3。
式中，X表示-NH-或-CO-。作为X的一个方式，可以列举-NH-，作为另一个方式，可以列举-CO-。
式中，Z表示式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)、式(Z-5)、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)或式(Z-11)所示的基团。
Figure BDA0003202958710000211
Figure BDA0003202958710000221
这些式中，AA表示谷氨酸残基、天冬氨酸残基或赖氨酸残基，优选列举谷氨酸残基或天冬氨酸残基。
本说明书中，除了需要特意区分的情况以外，在表示α-氨基酸和对应的氨基酸残基这两者时，有时使用下述的三字母缩写表示。另外，在没有特别指定的情况下，α-氨基酸的旋光性可包括DL体、D体或L体中的任意一者。例如，“谷氨酸”或“Glu”表示DL-谷氨酸或其残基、D-谷氨酸或其残基、或者L-谷氨酸或其残基。
Ala…丙氨酸、Arg…精氨酸、Asn…天冬酰胺、Asp…天冬氨酸、Cys…半胱氨酸、Gln…谷氨酰胺、Glu…谷氨酸、Gly…甘氨酸、His…组氨酸、Ile…异亮氨酸、Leu…亮氨酸、Lys…赖氨酸、Met…甲硫氨酸、Phe…苯丙氨酸、Pro…脯氨酸、Ser…丝氨酸、Trp…色氨酸、Thr…苏氨酸、Tyr…酪氨酸、Val…缬氨酸
这些式中，n表示0～2的整数。即，n为0、1或2。作为n的一个方式，可以列举0或1的整数，作为另一个方式，可以列举0，作为另一个方式，可以列举1或2，作为另一个方式，可以列举1，作为另一个方式，可以列举2。
这些式中，p表示1～3的整数。即，p为1、2或3。作为p的一个方式，可以列举1或2，作为另一个方式，可以列举2或3，作为另一个方式，可以列举1，作为另一个方式，可以列举2，作为另一个方式，可以列举3。
AA有两个以上时，各个AA彼此可以相同也可以不同，另外，AA彼此通过酰胺键键合。“AA彼此通过酰胺键键合”是指一个氨基酸的羧基与另一个氨基酸的氨基缩合而形成酰胺键。例如，n为2、2个AA均为Glu的情况下，一个Glu的氮原子(d)与另一个Glu的羰基(c)可以如下式所示地形成酰胺键而连接。
Figure BDA0003202958710000231
(AA)n或(AA)p的N末端氮原子与羰基(a)一起形成酰胺键。“AA的N末端氮原子与羰基(a)一起形成酰胺键”是指：例如，在AA为Asp的情况下，Asp的氮原子(b)和羰基(a)如下式所示地形成酰胺键而连接。
Figure BDA0003202958710000241
作为(AA)n的一个方式，可以列举n为2的式(A-1)或式(A-2)所示的基团。
Figure BDA0003202958710000242
这些式中，AA1和AA2各自独立地表示Glu、Asp或Lys。
作为(AA)p的一个方式，可以列举p为3的式(A-3)或式(A-4)所示的基团。
Figure BDA0003202958710000243
这些式中，AA1、AA2和AA3各自独立地表示Glu、Asp或Lys。
式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-6)和式(Z-7)中，W表示式(W-1)或式(W-2)所示的基团。
Figure BDA0003202958710000251
式(W-1)中，R6a和R6b各自独立地表示氢原子或甲基。式(W-2)中，R7表示C1-6烷基。R7例如可以为甲基、乙基、丙基、异丙基等。
式(Z-10)和式(W-1)中，Q表示式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)或式(Q-7)所示的基团。
Figure BDA0003202958710000252
式(Q-1)中，R8a和R8b各自独立地表示氢原子、卤素原子、C1-6烷基或C1-6烷氧基。式(Q-2)中，R8c、R8d和R8e各自独立地表示氢原子、卤素原子、羟基、氰基、氨基、羧基、苯基、可以被1～3个氟原子取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基酯基。卤素原子例如可以为氟原子、氯原子或溴原子。
Q可以为式(Q-1)或式(Q-2)所示的基团。另外，R8a和R8b可以为氢原子，R8c、R8d和R8e可以为氢原子。
式(Z-4)、式(Z-5)、式(Z-8)、式(Z-9)和式(Z-10)中，R5a和R5b各自独立地表示氢原子或甲基。
本说明书中，氢原子可以为1H，也可以为2H(D)。即，例如将式(1)所示的化合物的1个或2个以上的1H改变为2H(D)的氘改变体也被包括在式(1)所示的化合物中。
式(1)中，R1表示氢原子或(AB)m。在此，m为1～9的整数、即1、2、3、4、5、6、7、8或9。AB表示Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Trp、Thr、Tyr或Val，AB有两个以上时，各个AB彼此可以相同也可以不同，并且AB彼此通过酰胺键键合。作为m的一个方式，可以列举1、2、3、4或5，作为另一个方式，可以列举1，作为另一个方式，可以列举2，作为另一个方式，可以列举1～3的整数，作为另一个方式，可以列举3。
式(1)中，作为(AB)m的一个方式，可以列举*1-(Glu)-(Gly)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)或*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)-(Val)。在此，*1末端表示与半胱氨酸残基形成了酰胺键。
式(1)中，R2表示羟基或(AC)g。在此，g为1～9的整数、即1、2、3、4、5、6、7、8或9。AC表示Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Trp、Thr、Tyr或Val。AC有两个以上时，各个AC彼此可以相同也可以不同，另外，AC彼此通过酰胺键键合。作为g的一个方式，可以列举1、2、3、4或5，作为另一个方式，可以列举1～3的整数，作为另一个方式，可以列举1，作为另一个方式，可以列举2，作为另一个方式，可以列举3。
式(1)中，作为(AC)g的一个方式，可以列举Gly或Pro。
在R1为(AB)m且R2为(AC)g的情况下，m与g之和为2～10的整数、即2、3、4、5、6、7、8、9或10。作为n与p之和的一个方式，可以列举2～5的整数，作为另一个方式，可以列举2或3，作为另一个方式，可以列举2。
式(Z-1)中，R3表示-(CH2)u-COR9。在此，u为1或2。R9表示羟基或AD，更优选为羟基。在此，AD表示Glu、Asp或Lys，AD的N末端氮原子与相邻的羰基一起形成酰胺键。
式(Z-2)或式(Z-3)中，R4表示羟基或AD，更优选为羟基。在此，AD表示Glu、Asp或Lys，AD的N末端氮原子与相邻的羰基一起形成酰胺键。
在R4或R9为AD的情况下，n为0或1。作为n的一个方式，可以列举0，作为另一个方式，可以列举1。
式(1)所示的化合物可能引起下述式所示的异构化而形成式(1’)所示的化合物。因此，本发明的哈米特林衍生物包含式(1’)所示的化合物。
Figure BDA0003202958710000271
关于式(1’)所示的化合物，可能在生物体内抗体药物复合物被代谢而产生式(1)所示的化合物时竞争地产生，另外也可能在式(1)所示的化合物在生物体内产生后通过引起上述异构化反应而产生。在化学上，在酸或碱催化剂下引起上述的异构化。可期待式(1’)所示的化合物与式(1)所示的化合物同样地显示微管聚合抑制活性、细胞杀伤性。
作为本发明的哈米特林衍生物的一个方式，可以列举以下的(1-A)。
(1-A)
一种化合物或其盐，其中，
式(1)中，
b为2、3或4，
X为-NH-，
Z为式(Z-1)、式(Z-2)或式(Z-3)所示的基团，
W为式(W-1)所示的基团，
Q为式(Q-1)或式(Q-2)所示的基团，
R8a和R8b为氢原子，
R8c、R8d和R8e为氢原子，
R6a为甲基，
R6b为氢原子，
n为0，
R3为-(CH2)u-COR9，
u为1或2，
R9为羟基，
R4为羟基，
R1为氢原子或(AB)m，
(AB)m为Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr、Val、*1-(Glu)-(Gly)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)或*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)-(Val)，
R2为羟基、Gly或Pro。
作为本发明的哈米特林衍生物的一个方式，可以列举以下的(1-B)。
(1-B)
一种化合物或其盐，其中，
式(1)中，
b为2、3或4，
X为-NH-，
Z为式(Z-1)、式(Z-2)或式(Z-3)所示的基团，
W为式(W-1)所示的基团，
Q为式(Q-1)或式(Q-2)所示的基团，
R8a和R8b为氢原子，
R8c、R8d和R8e为氢原子，
R6a为甲基，
R6b为氢原子，
n为0或1，
AA为Glu或Asp，
R3为-(CH2)u-COR9，
u为1或2，
R9为羟基，
R4为羟基，
R1为氢原子或(AB)m，
(AB)m为Ala、Arg、Asn、Asp、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr、Val或*1-(Glu)-(Gly)，
R2为羟基。
作为本发明的哈米特林衍生物的一个方式，可以列举以下的(1-C)。
(1-C)
一种化合物或其盐，其中，
式(1)中，
b为2、3、4或5，
X为-CO-，
Z为式(Z-6)或式(Z-7)所示的基团，
W为式(W-1)或式(W-2)所示的基团，
R7为异丙基，
Q为式(Q-1)或式(Q-2)所示的基团，
R8a和R8b为氢原子，
R8c、R8d和R8e为氢原子，
R6a为甲基，
R6b为氢原子，
n为0或1，
AA为Glu或Asp，
R3为-(CH2)u-COR9，
u为1或2，
R9为羟基，
R4为羟基，
R1为氢原子，
R2为羟基。
作为本发明的哈米特林衍生物的一个方式，可以列举以下的(1-D)。
(1-D)
一种化合物或其盐，其中，
式(1)中，
b为2、3、4或5，
X为-NH-，
Z为式(Z-4)或式(Z-5)所示的基团，
p为1，
AA为Glu、Asp或Lys，
R5a为甲基，
R5b为氢原子，
R1为氢原子，
R2为羟基。
作为本发明的哈米特林衍生物的一个方式，可以列举以下的(1-E)。
(1-E)
一种化合物或其盐，其中，
式(1)中，
b为2、3、4或5，
X为-CO-，
Z为式(Z-8)或式(Z-9)所示的基团，
G为-O-或-NH-，
p为1，
AA为Glu、Asp或Lys，
R5a为甲基，
R5b为氢原子，
R1为氢原子，
R2为羟基。
抗体药物复合物是如下所示来自抗体分子的抗体部分与来自药物分子的药物部分直接共价键合的复合物。本说明书中，也有时将“抗体药物复合物”称为“ADC”。
Figure BDA0003202958710000321
q表示抗体药物复合物分子中的药物抗体比(也称为Drug Antibody Ratio或DAR)。药物抗体比q是指：在1分子抗体药物复合物中，相对于1个抗体分子的药物分子数、即相对于1分子抗体药物复合物的药物分子数。需要说明的是，通过化学合成得到的抗体药物复合物大多是可能具有不同的药物抗体比q的多种抗体药物复合物分子的混合物。本说明书中，将这种抗体药物复合物的混合物中的整体的药物抗体比(即，各个抗体药物复合物的药物抗体比q的平均值)称为“平均药物抗体比”或“平均DAR”。
q为1、2、3、4、5、6、7或8。作为q的一个方式，可以列举2～8的整数，作为另一个方式，可以列举2～6的整数，作为另一个方式，可以列举4～8的整数，作为另一个方式，可以列举6～8的整数，作为另一个方式，可以列举2或4，作为另一个方式，可以列举6或8，作为另一个方式，可以列举8。
作为平均DAR的一个方式，可以列举2～8，作为另一个方式，可以列举3.5～4.5，作为另一个方式，可以列举1～2、2～3、3～4、4～5、5～6、6～7或7～8。平均DAR可利用SDS-PAGE、质谱法、ELISA(酶联免疫吸附测定法)、HPLC(高效液相色谱法)等通常用于确定平均DAR的方法来确定。可以利用疏水性相互作用柱色谱(HIC)HPLC、反相HPLC、电泳等方法，从具有不同的DAR的多种抗体药物复合物的混合物进行特定DAR的抗体药物复合物的分离、纯化及特性确定。
mAb表示“抗体”。在此，“抗体”只要是至少包含重链的可变结构域和轻链的可变结构域的抗体即可，可以为完全抗体，也可以为完全抗体的片段、具有抗原识别部位的抗原结合片段。完全抗体具有2条全长的轻链和2条全长的重链，各个轻链和重链通过二硫键而连接。完全抗体包括IgA、IgD、IgE、IgM和IgG，IgG包括IgG1、IgG2、IgG3和IgG4作为亚型。另外，抗体优选为单克隆抗体。抗体部分与药物部分通过使抗体中的二硫键还原而得到的巯基结合。
抗体mAb只要是可识别存在于靶细胞的表面的抗原的抗体就没有特别限制。靶细胞只要是需要利用哈米特林衍生物进行治疗的细胞即可，优选为癌细胞。存在于靶细胞的表面的抗原优选为在正常细胞中不表达或表达量少的、靶细胞特异性的抗原。作为mAb的一个方式，可以列举上述所列举的已知抗体，作为另一个方式，可以列举本妥昔单抗、曲妥珠单抗、伊珠单抗、吉妥珠单抗、格仑妥木单抗、拉贝妥珠单抗、沙西妥珠单抗、利法妥珠单抗、英度妥单抗、珀拉妥珠单抗、匹那妥珠单抗、考妥昔单抗、英达妥昔单抗、米拉妥珠单抗、洛伐妥珠单抗、阿奈妥单抗、替索妥单抗、洛沃妥珠单抗(Lorvotuzumab)、利妥昔单抗、迪妥昔珠单抗、地宁妥珠单抗、恩弗妥单抗、特鲁妥珠单抗、万多妥珠单抗、索非妥珠单抗、沃瑟妥珠单抗、米妥昔单抗(Mirvetuximab)、那妥昔单抗、坎妥珠单抗、拉妥昔单抗、贝伐珠单抗、伐达妥昔单抗、鲁帕妥单抗、阿普卢妥单抗、阿巴伏单抗、阿昔单抗、阿比妥珠单抗、阿布鲁单抗、阿克托克单抗、阿达木单抗、阿德木单抗、阿度努单抗、阿非西维单抗、阿非莫单抗、阿拉赛珠单抗、阿仑妥珠单抗、阿利库单抗、阿妥莫单抗、阿麦妥昔单抗、阿那妥莫单抗、阿尼弗洛姆单抗、安卢吉珠单抗、阿珀利珠单抗、阿西莫单抗、阿斯库昔单抗、阿塞珠单抗、阿特珠单抗、阿替努单抗、阿托木单抗、阿维鲁单抗、阿妥昔珠单抗、巴匹珠单抗、巴利昔单抗、巴维昔单抗、贝妥莫单抗、贝戈罗单抗、贝利木单抗、本雷利珠单抗、柏替木单抗、贝西来索单抗、贝伐珠单抗、贝洛托舒单抗、比赛罗单抗、比玛格鲁单抗、比美吉珠单抗、布来鲁单抗、布利妥莫单抗、布隆妥维单抗、布洛索珠单抗、博库斯珠单抗、布拉库单抗、布瑞吉努单抗、布罗芦单抗、布洛赛珠单抗、布隆妥珠单抗、布洛舒单抗、卡比利珠单抗、卡瑞利珠单抗、卡普赛珠单抗、卡普罗单抗、卡鲁单抗、卡罗妥昔单抗、卡妥索单抗、西利珠单抗、赛妥珠单抗、西妥昔单抗、西他妥珠单抗、西妥木单抗、克立昔单抗、克立瓦妥珠单抗、钴妥珠单抗、考那妥木单抗、康赛珠单抗、考韦昔单抗、西他妥珠单抗、立赞利珠单抗、克洛特单抗、达塞妥珠单抗、达克利珠单抗、达洛妥珠单抗、达匹利珠单抗、达雷妥木单抗、德克特单抗、登西珠单抗、地诺单抗、地莫单抗、Dezamizumab、地努妥昔单抗、地达夫单抗、多古组单抗、阿托度单抗、卓齐妥单抗、度利戈妥单抗、度匹鲁单抗、度伐鲁单抗、度司妥单抗、Duvortuxizumab、依洛美昔单抗、依库利珠单抗、埃巴单抗、依决洛单抗、依法利珠单抗、依芬古单抗、依德鲁单抗、Erezamumab、依洛妥珠单抗、艾西莫单抗、依玛妥珠单抗、依帕伐单抗、依米妥珠单抗、依米赛珠单抗、恩伐珠单抗、恩利莫单抗、恩必利珠单抗、依诺吉珠单抗、依诺替单抗、恩司妥昔单抗、依匹莫单抗、依帕珠单抗、依普奈珠单抗、厄瑞努单抗、厄利珠单抗、厄妥索单抗、依他赛珠单抗、依卓利珠单抗、依维苏单抗、依伏洛单抗、艾韦单抗、法拉莫单抗、法乐妥珠单抗、法司努单抗、泛维珠单抗、菲扎吉努单抗、菲拉妥珠单抗、菲吉妥木单抗、非利伏单抗、夫兰妥单抗、夫来库单抗、芳妥珠单抗、弗雷鲁单抗、弗雷韦卢单抗、夫瑞奈组单抗、夫苏木单抗、夫卢维单抗、富拉单抗、伏妥昔单抗、伽奈珠单抗、加利昔单抗、加尼妥单抗、甘腾纳单抗、Gatipotuzumab、加维莫单抗、格迪伏单抗、格沃吉珠单抗、Gilvetmab、吉仑妥昔单抗、戈利木单抗、谷瑟库单抗、艾巴利珠单抗、替伊莫单抗、伊克芦库单抗、依达赛珠单抗、伊波妥组单抗、伊戈伏单抗、伊玛鲁单抗、英西单抗、英加妥珠单抗、英拉苏单抗、英比利珠单抗、英利昔单抗、艾诺利莫单抗、英妥木单抗、伊匹木单抗、艾雷妥木单抗、艾萨妥昔单抗、艾托利珠单抗、艾塞吉珠单抗、凯利昔单抗、Lacnotuzumab、兰帕利珠单抗、兰纳德单抗、兰德珠单抗、拉韦昔单抗、来瑞吉珠单抗、来马索单抗、仑兹鲁单抗、乐德木单抗、来索伏单抗、来利珠单抗、来沙木单抗、利比韦卢单抗、利法妥珠单抗、利格利珠单抗、利洛托单抗、林妥珠单抗、利瑞鲁单抗、洛德昔单抗、洛克韦单抗、鲁卡妥木单抗、鲁利珠单抗、鲁妥珠单抗、鲁吉珠单抗、玛帕妥木单抗、玛格妥昔单抗、马司莫单抗、马妥珠单抗、玛弗利木单抗、美泊利单抗、美替木单抗、明瑞妥莫单抗、米妥莫单抗、莫多妥昔单抗、莫格利珠单抗、莫纳利珠单抗、莫罗木单抗、莫维珠单抗、莫塞妥莫单抗、莫罗单抗、那考洛单抗、那米鲁单抗、那普妥莫单抗、纳那妥单抗、那他利珠单抗、那赛昔珠单抗、那韦伏单抗、奈巴库单抗、奈西妥木单抗、奈莫利珠单抗、奈瑞利莫单抗、奈弗库单抗、尼莫妥珠单抗、尼沃鲁单抗、奥托昔单抗、奥比妥珠单抗、奥卡妥珠单抗、奥瑞利珠单抗、奥度莫单抗、奥法木单抗、奥拉妥单抗、奥来鲁单抗、奥仑达利珠单抗、奥洛吉珠单抗、奥马珠单抗、奥那妥珠单抗、昂妥昔珠单抗、奥匹努单抗、奥珀妥珠单抗、奥戈伏单抗、奥来苏单抗、奥替苏单抗(Orticumab)、奥昔珠单抗、奥那妥珠单抗、奥塞鲁单抗、奥赞那珠单抗、奥佐利珠单抗、帕昔单抗、帕利韦珠单抗、潘瑞鲁单抗、帕尼单抗、帕诺巴库单抗、帕萨妥珠单抗、帕考利珠单抗、帕妥昔珠单抗、帕特利珠单抗、帕曲妥单抗、喷突莫单抗、珀雷吉珠单抗、珀妥珠单抗、培塞利珠单抗、匹地利珠单抗、普拉鲁单抗、帕洛利珠单抗、珀奈珠单抗、珀韦昔单抗、普瑞鲁单抗、普立昔单抗、瑞托萨昔单抗、普瑞妥木单抗、奎利珠单抗、雷考妥莫单抗、雷曲妥单抗、雷非韦卢单抗、雷泮赛珠单抗、雷莫芦单抗、雷奈维单抗、雷尼比珠单抗、雷昔巴库单抗、瑞凡珠单抗、瑞加韦单抗、Remtolumab、瑞司利珠单抗、瑞洛妥木单抗、利尼库单抗、瑞莎珠单抗、利伐巴珠单抗、洛巴妥木单抗、罗度单抗、洛莫索珠单抗、罗利珠单抗、洛曼妥珠单抗、洛维利珠单抗、洛利昔珠单抗、卢普利珠单抗、萨玛利珠单抗、萨瑞鲁单抗、萨特利珠单抗、萨妥莫单抗、司库奇尤单抗、瑟利瑞鲁单抗、塞里班单抗、瑟托萨昔单抗、司韦单抗、西罗珠单抗、西法木单抗、司妥昔单抗、辛妥珠单抗、西利珠单抗、司卢库单抗、索拉奈珠单抗、索利托单抗、松妥珠单抗、司他芦单抗、苏来索单抗、Sumutavumab、苏韦珠单抗、Suburatokumab、他贝芦单抗、他度珠单抗、他利珠单抗、坦妥维单抗、他尼珠单抗、帕他莫单抗、他瑞妥单抗、Tavolixizumab、法索单抗、巯诺莫单抗、平妥莫单抗、替非珠单抗、阿替莫单抗、Telisozumab、特那妥莫单抗、替奈昔单抗、替利珠单抗、替妥木单抗、特度鲁单抗、特折鲁单抗、替加妥珠单抗、替曲吉珠单抗、替米妥珠单抗、替莫鲁单抗、托珠单抗、托木妥昔单抗、托雷利珠单抗、托萨托舒单抗、托西莫单抗、托维妥单抗、曲洛吉努单抗、曲加利珠单抗、曲美木单抗、曲戈卢单抗、图考珠单抗、妥韦单抗、乌妥昔单抗、乌洛鲁单抗、乌瑞鲁单抗、乌珠单抗、优特吉努单抗、乌托鲁单抗、万替妥单抗、伐努赛珠单抗、伐帕利昔单抗、Varisacumab、伐立鲁单抗、伐特利珠单抗、维多利珠单抗、维妥珠单抗、维帕利莫单抗、维森库单抗、维西珠单抗、沃巴利珠单抗、伏洛昔单抗、珀伽利珠单抗、伏妥木单抗、Vunakizumab、他卡妥珠单抗、扎芦木单抗、扎诺利木单抗、齐拉木单抗、佐利莫单抗或抗Embigin抗体，作为另一个方式，可以列举本妥昔单抗、曲妥珠单抗、伊珠单抗、吉妥珠单抗、拉贝妥珠单抗、珀拉妥珠单抗、考妥昔单抗、英达妥昔单抗、阿奈妥单抗、利妥昔单抗、地宁妥珠单抗、拉妥昔单抗、伐达妥昔单抗、格仑妥木单抗、西妥昔单抗、阿仑妥珠单抗或迪妥昔珠单抗，作为另一个方式，可以列举本妥昔单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗或抗Embigin抗体，作为另一个方式，可以列举本妥昔单抗或曲妥珠单抗，优选列举本妥昔单抗。
作为mAb，可以列举抗19A抗体、抗AXL抗体、抗BCMA抗体、抗C4.4a抗体、抗CA6抗体、抗CA9抗体、抗CA-125抗体、抗钙粘着蛋白-6抗体、抗CD166抗体、抗CD19抗体、抗CD20抗体、抗CD22抗体、抗CD25抗体、抗CD27抗体、抗CD30抗体、抗CD33抗体、抗CD37抗体、抗CD40抗体、抗CD41抗体、抗CD44v6抗体、抗CD51抗体、抗CD52抗体、抗CD56抗体、抗CD70抗体、抗CD74抗体、抗CD79抗体、抗CD79b抗体、抗CEACAM5抗体、抗c-Met抗体、抗DLL3抗体、抗DPEP3抗体、抗EGFR抗体、抗EGFRvIII抗体、抗ENPP3抗体、抗EpCAM抗体、抗EphA4抗体、抗FGFR2抗体、抗FGFR3抗体、抗FTL3抗体、抗叶酸受体α抗体、抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体、抗gpNMB抗体、抗HER2抗体、抗HER3抗体、抗IL-3RA抗体、抗LAMP1抗体、抗LIV-1抗体、抗LRRC15抗体、抗Ly6E抗体、抗间皮素抗体、抗MUC-16抗体、抗NaPi2b抗体、抗连接蛋白-4抗体、抗CD352抗体、抗P-钙粘着蛋白抗体、抗PMSA抗体、抗蛋白酪氨酸激酶7抗体、抗SLITRK抗体、抗STEAP1抗体、抗CD138抗体、抗组织因子抗体、抗CD71抗体、抗TIM-1抗体、抗Trop2抗体、抗5T4抗体、抗B7-H3抗体、抗CD163巨噬细胞受体抗体、抗CD38抗体、抗CD48抗体、抗cKit抗体、抗鸟苷酸环化酶C抗体、抗胃泌素释放肽抗体、抗溶质转运蛋白抗体、抗肿瘤相关MUC-1抗体、抗GD2抗体、抗α4β7整联蛋白抗体或抗Embigin抗体。作为mAb的另一个方式，可以列举抗CD19抗体、抗CD20抗体、抗CD22抗体、抗CD30抗体、抗CD33抗体、抗CD52抗体、抗CD70抗体、抗CD79b抗体、抗CEACAM5抗体、抗EGFR抗体、抗EGFRvIII抗体、抗gpNMB抗体、抗HER2抗体、抗间皮素抗体、抗CD138抗体、抗CD38抗体或抗GD2抗体。作为mAb的另一个方式，可以列举抗CD19抗体、抗CD20抗体、抗CD22抗体、抗CD30抗体、抗CD33抗体、抗CD52抗体、抗CD79b抗体、抗CEACAM5抗体、抗EGFR抗体、抗EGFRvIII抗体、抗gpNMB抗体、抗HER2抗体、抗间皮素抗体或抗CD138抗体。
“AMG595的抗体”是指通过Mol.Cancer Ther.,2015,14,1614-1624中记载的方法得到的抗EGFRvIII抗体。
一般而言，抗体药物复合物的制作和分析可以利用本领域技术人员公知的任意技术来进行。作为这种方法，可以列举例如Antibody-Drug Conjugates(Laurent Ducry编辑、Humana Press出版、2013年)等中记载的方法。
抗体药物复合物例如可以通过将抗体中的二硫键还原为巯基、使该巯基与哈米特林衍生物反应来形成。
关于抗体药物复合物，在靶细胞(抗原表达细胞)内抗体被代谢，包含抗体的一部分(抗体片段)和药物部分的结构可能作为活性代谢物被释放。例如，非专利文献7中记载了：通过抗体的代谢，在细胞内释放抗体药物复合物的Cys-药物部分。
可以推定抗体药物复合物在通过利用抗体-抗原反应的向细胞内的摄入而被特异性地递送至特定的抗原表达细胞内之后，利用上述机制释放活性代谢物，由此仅在特定的细胞内发挥药效。抗体药物复合物可被特异性地摄入到癌细胞中，因此可期待对癌细胞发挥强药效。
另一方面，可以认为抗体药物复合物有时在被递送至靶细胞之前被血液中所含的蛋白酶等分解、从而在血液中释放活性代谢物。此时，在以往的抗体药物复合物的情况下，被释放到血液中的活性代谢物对正常细胞也发挥作用。因此，导致不期望的全身暴露，容易引发副作用，因此是不优选的。
此外，抗体药物复合物被特异性地递送至特定的抗原表达细胞内后，利用上述机制释放出活性代谢物，结果，有时由于细胞死亡等而使活性代谢物从细胞内被释放到细胞外或血液中。此时，在以往的抗体药物复合物的的情况下，被释放到血液中的活性代谢物对正常细胞也发挥作用。因此，导致不期望的全身暴露，容易引发副作用，因此是不优选的。
与此相对，相当于本发明的哈米特林衍生物的活性代谢物即使如非专利文献7中所报道的那样在到达靶细胞之前或到达之后被释放到血液中，也不易对正常细胞发挥作用，迅速地被代谢和***，因此，能够期待全身暴露所引起的副作用少。
即，本发明的哈米特林衍生物通过由抗体药物复合物的代谢生成而对癌细胞特异性地发挥药效，并且对正常细胞的影响小，可期待安全性高。
“盐”是本发明的哈米特林衍生物的适合的盐及作为药品原料可接受的盐，优选为制药学上可接受的盐。作为“盐”，除了例如有机酸盐(例如乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲酸盐或对甲苯磺酸盐等)和无机酸盐(例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐或磷酸盐等)之类的酸加成盐、与氨基酸(例如精氨酸、天冬氨酸或谷氨酸等)的盐、碱金属盐(例如钠盐或钾盐等)及碱土金属盐(例如钙盐或镁盐等)等金属盐、铵盐、或有机碱盐(例如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己胺盐或N,N’-二苄基乙二胺盐等)等以外，本领域技术人员可适宜选择适当的盐。
作为“制药学上可接受的盐”，可以列举酸加成盐和碱加成盐。例如，作为酸加成盐，可以列举：盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、磷酸盐等无机酸盐；或者柠檬酸盐、草酸盐、邻苯二甲酸盐、富马酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、苹果酸盐、乙酸盐、甲酸盐、丙酸盐、苯甲酸盐、三氟乙酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、樟脑磺酸盐等有机酸盐。另外，作为碱加成盐，可以列举：钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、钡盐、铝盐等无机碱盐；或者三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、2,6-二甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇[三(羟甲基)甲胺]、叔丁胺、环己胺、二环己胺、N,N-二苄基乙胺等有机碱盐。此外，作为“制药学上可接受的盐”，还可以列举与精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等碱性氨基酸或酸性氨基酸的盐(氨基酸盐)。
在想要获取本发明的哈米特林衍生物的盐时，在以盐的形态得到目标化合物的情况下直接对其进行纯化即可，另外，在以游离的形态得到的情况下，可以将其溶解或悬浮于适当的有机溶剂中，加入酸或碱，利用通常的方法形成盐。
本发明的哈米特林衍生物也有时以水合物和/或与各种溶剂的溶剂合物(乙醇合物等)的形态存在，这些水合物和/或溶剂合物也包括在本发明的哈米特林衍生物中。进一步地，本发明还包括本发明的哈米特林衍生物的所有形态的晶型。
本发明的哈米特林衍生物中，存在可能存在基于旋光性中心的旋光异构体、基于由于分子内旋转受限而产生的轴手性或面手性的阻转异构体、其他所有的立体异构体、互变异构体和几何异构体等的物质，包括这些在内的所有可能的异构体均包含在本发明的范围内。
特别地，旋光异构体、阻转异构体可以以消旋体形式得到，另外在使用旋光性的起始原料、中间体的情况下，可以分别以旋光性体形式得到。必要时，可以在下述制造方法的适当阶段，利用使用旋光性柱的方法、分步结晶法等公知的分离方法以物理方式或化学方式将对应的原料、中间体或作为最终品的消旋体光学拆分为旋光对映体。具体而言，例如非对映体法中，通过使用旋光性拆分剂的反应由消旋体形成两种非对映体。该不同的非对映体通常物理性质不同，因此，可以通过分步结晶等公知的方法进行光学拆分。
以下对本发明的哈米特林衍生物的制造方法进行说明。式(1)所示的本发明的哈米特林衍生物例如可以通过下述的制造方法A～P或T来制造。
制造方法A
在X为-NH-、Z为式(Z-1)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、Q为式(Q-1)所示的基团、R6a为甲基、R6b为氢原子或甲基、R3为-(CH2)u-COOH的情况下，式(1)所示的化合物例如可以通过下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000411
Figure BDA0003202958710000421
(式中，R1、R2、R8a、R8b、AA、u、b和n如项1中所定义的那样，Ra、Rb、Rx、Ry和RZ各自独立地表示C1-6烷基或苄基，PX是指氨基的保护基。)
作为上述PX所示的氨基的保护基，可以使用Protective Groups in OrganicSynthesis(Theodora W.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的保护基等。
化合物a1可以通过例如J.Med.Chem.,2007,50,4329-4339等记载的方法制造或者可以作为市售品购入。化合物a15可以通过例如Tetrahedron Lett.,1997,38,317-320等中记载的方法制造或者可以作为市售品购入。
[A-1步骤]
化合物a2可以通过在适当的碱存在下、在适当的溶剂中使化合物a1与各种甲基化试剂反应来制造。作为甲基化试剂，可以列举例如卤代甲烷等，优选列举碘甲烷、溴甲烷、氯甲烷等。作为碱，优选列举六甲基二硅氮烷钾盐。作为溶剂，优选列举四氢呋喃。反应时间通常为5分钟～48小时，优选为10分钟～2小时。反应温度通常为-78℃～100℃，优选为-78℃～10℃。本步骤可以基于J.Nat.Prod.2003,66,183-199等中记载的方法来进行。
[A-2步骤]
化合物a3可以由化合物a2基于上述A-1步骤中记载的方法来制造。
[A-3步骤]
化合物a4可以通过使化合物a3在适当的溶剂中与适当的还原剂反应来制造。作为还原剂，从通常用于有机合成反应的还原剂中适宜选择，优选列举二异丁基氢化铝。作为溶剂，优选列举***。反应时间通常为5分钟～48小时，优选为10分钟～24小时。反应温度通常为-78℃～100℃，优选为-78℃～50℃。本步骤可以基于J.Nat.Prod.2003,66,183-199等中记载的方法来进行。
[A-4步骤]
化合物a5可以通过在适当的溶剂中使用适当的氧化剂将化合物a4氧化来制造。作为氧化剂，可以从通常用于有机合成反应的氧化剂中适宜选择，优选列举四丙基高钌酸铵。作为溶剂，优选列举二氯甲烷。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为-78℃～100℃，优选为-78℃～50℃。本步骤可以基于J.Nat.Prod.2003,66,183-199等中记载的方法来进行。
[A-5步骤]
化合物a6可以通过在适当的溶剂中对化合物a5的醛进行α-氨基氰基化来制造。作为溶剂，优选列举甲苯和二氯甲烷。反应时间通常为5分钟～96小时，优选为24小时～72小时。反应温度通常为0℃～200℃，优选为0℃～100℃。本步骤可以基于Org.Lett.2002,4,695-697等中记载的方法来进行。
[A-6步骤]
化合物a7可以通过在适当的碱存在下或不存在下、在适当的溶剂中使用适当的氧化剂作用于化合物a6来制造。作为氧化剂，可以从通常用于有机合成反应的氧化剂中适宜选择，优选列举过氧化氢。作为碱，优选列举碳酸钾。作为溶剂，优选列举甲醇。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为0℃～200℃，优选为0℃～60℃。本步骤可以基于J.Org.Chem.2001,66,7355-7364等中记载的方法来进行。
[A-7步骤]
化合物a8可以通过在适当的溶剂中、在适当的催化剂存在下使用还原剂将化合物a7还原来制造。作为还原剂，可以从通常用于有机合成反应的还原剂中适宜选择，优选列举氢气、甲酸铵等甲酸盐或肼。作为催化剂，可以列举钯、镍、铑、钴、铂等过渡金属、其盐或其络合物、或者使上述过渡金属负载于聚合物等载体而成的物质。作为溶剂，优选列举乙醇或甲醇。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为0℃～200℃，优选为0℃～100℃。本步骤可以基于J.Org.Chem.2001,66,7355-7364等中记载的方法来进行。
[A-8步骤]
化合物a9可以通过将化合物a8的氨基用保护基PX进行保护来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法等来进行。
[A-9步骤]
化合物a11可以通过使化合物a9与各种酰基化试剂(例如化合物a10)在适当的碱存在下或不存在下、在适当的溶剂中反应来制造。作为酰基化试剂，可以列举例如羧酸卤化物、羧酸酐等，优选列举二碳酸二叔丁酯。作为碱，优选列举二异丙基乙胺。作为溶剂，优选列举氯仿。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为0℃～200℃，优选为0℃～50℃。
[A-10步骤]
化合物a12可以通过使化合物a11在适当的溶剂中与适当的碱金属醇盐类反应来制造。作为碱金属醇盐类，可以从通常用于有机合成反应的碱金属醇盐类中适宜选择，优选列举甲醇锂或乙醇锂。作为溶剂，优选列举甲醇或乙醇。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～6小时。反应温度通常为-78℃～200℃，优选为-78℃～50℃。
[A-11步骤]
化合物a13可以通过在适当的碱存在下、在适当的溶剂中使各种甲基化试剂与化合物a12反应来制造。作为甲基化试剂，可以列举例如卤代甲烷等，优选列举碘甲烷、溴甲烷、氯甲烷等。作为碱，优选列举氢化钠。作为溶剂，优选列举四氢呋喃。反应时间通常为5分钟～48小时，优选为10分钟～2小时。反应温度通常为-78℃～100℃，优选为-78℃～10℃。
[A-12步骤]
化合物a14可以通过使化合物a13的酯在适当的碱存在下、在适当的溶剂中水解来制造。作为碱，优选列举氢氧化锂。作为溶剂，优选列举水或甲醇。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为0℃～200℃、优选为0℃～100℃。
[A-13步骤]
化合物a16可以通过在适当的溶剂中、在适当的碱存在下使用各种缩合剂使化合物a14与化合物a15缩合来制造。作为缩合剂，可以使用通常用于有机合成反应的各种缩合剂，优选列举(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺或三吡咯烷基溴化
Figure BDA0003202958710000461
六氟磷酸盐。另外，为了提高缩合反应的效率，可以根据需要一起使用1-羟基苯并***等羰基活化试剂。作为碱，优选列举二异丙基乙胺。作为溶剂，优选列举N,N-二甲基甲酰胺。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为-78℃～200℃，优选为0℃～100℃。本步骤可以基于Tetrahedron Lett.,1997,38,317-320等中记载的方法来进行。
[A-14步骤]
化合物a17可以通过基于上述A-12步骤中记载的方法使化合物a16的酯水解来制造。本步骤可以基于Tetrahedron Lett.,1997,38,317-320等中记载的方法来进行。
[A-15步骤]
化合物a18可以通过在适当的溶剂中、在适当的碱存在下使用各种缩合剂使化合物a17与N-羟基琥珀酰亚胺反应来制造。作为缩合剂，可以使用通常用于有机合成反应的各种缩合剂，优选列举(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺或三吡咯烷基溴化
Figure BDA0003202958710000462
六氟磷酸盐。另外，为了提高反应的效率，可以根据需要一起使用1-羟基苯并***等羰基活化试剂。作为碱，优选列举二异丙基乙胺。作为溶剂，优选列举N,N-二甲基甲酰胺。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为-78℃～200℃，优选为0℃～100℃。
[A-16步骤]
化合物a19可以通过在适当的碱存在下、在适当的溶剂中使化合物a18与氨基酸或肽的酯体反应来制造。作为碱，优选列举二异丙基乙胺。作为溶剂，优选列举N,N-二甲基甲酰胺。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为0℃～200℃，优选为0℃～100℃。
[A-17步骤]
化合物a20可以通过使化合物a19和氨基烷基马来酰亚胺化合物基于上述A-13步骤中记载的方法进行缩合来制造。
[A-18步骤]
化合物a21可以通过化合物a20的氨基的保护基PX的脱保护和酯(-COORb)的水解来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法等来进行。
另外，在(AA)n具有酯或被保护的氨基的情况下，也可以根据需要在本脱保护步骤中进行酯的水解和氨基的保护基的脱保护。
[A-19步骤]
化合物A1可以通过使化合物a21和半胱氨酸衍生物在适当的溶剂中发生反应来制造。作为溶剂，优选列举水、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为0℃～约200℃，优选为0℃～40℃。
[A-20步骤]
化合物a22可以通过使化合物a21和甲醛在适当的溶剂中与适当的还原剂一起反应来制造。作为溶剂，优选列举乙腈。作为还原剂，可以使用通常用于有机合成反应的各种还原剂，优选列举三乙酰氧基硼氢化钠。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为0℃～约200℃，优选为0℃～100℃。
[A-21步骤]
化合物A2可以由化合物a22基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法B
在X为-NH-、Z为式(Z-1)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、Q为式(Q-2)所示的基团、R8c、R8d和R8e为氢原子、R6a为甲基、R6b为氢原子或甲基、R3为-(CH2)u-COOH的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000491
Figure BDA0003202958710000501
(式中，R1、R2、AA、u、b和n如项1中所定义的那样，Ra、Rb和Rx表示C1-6烷基或苄基，PX是指氨基的保护基。)
化合物b1例如可以作为市售品购入。化合物b11例如可以通过TetrahedronLett.,1997,38,317-320等中记载的方法来制造或者可以作为市售品购入。
[B-1步骤]
化合物b2可以在各种路易斯酸存在下使苯与化合物b1反应来制造。作为路易斯酸，可以列举例如卤化硼、卤化铝、卤化镓、卤化铁、卤化钛等，优选列举氯化铝、氯化铁等。反应时间通常为5分钟～48小时，优选为30分钟～4小时。反应温度通常为-78℃～200℃，优选为50℃～150℃。本步骤可以基于J.Nat.Prod.2003,66,183-199等中记载的方法来进行。
[B-2步骤]
化合物b3可以通过在适当的碱存在下、在适当的溶剂中使化合物b2与各种羧酸卤化物反应后，再与碱金属化4-烷基-2-
Figure BDA0003202958710000511
唑烷酮反应来制造。作为碱，优选列举三乙胺或二异丙基乙胺。作为溶剂，优选列举四氢呋喃。作为羧酸卤化物，可以列举例如羧酰氯等，优选列举特戊酰氯等。作为碱金属化4-烷基-2-
Figure BDA0003202958710000512
唑烷酮，可以列举4-烷基-2-
Figure BDA0003202958710000513
唑烷酮锂、4-烷基-2-
Figure BDA0003202958710000514
唑烷酮钠等，优选列举4-异丙基-2-
Figure BDA0003202958710000515
唑烷酮锂。反应时间通常为5分钟～48小时，优选为10分钟～24小时。反应温度通常为-78℃～100℃，优选为-78℃～50℃。本步骤可以基于J.Nat.Prod.2003,66,183-199等中记载的方法来进行。
[B-3步骤]
化合物b4可以通过在适当的碱存在下、在适当的溶剂中使化合物b3与各种叠氮化试剂反应来制造。作为叠氮化试剂，可以列举例如叠氮化钠、叠氮基三甲基硅烷、叠氮磷酸二苯酯等，优选列举叠氮基三甲基硅烷。作为碱，优选列举六甲基二硅氮烷钾盐。作为溶剂，优选列举四氢呋喃。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为-78℃～200℃，优选为-78℃～75℃。本步骤可以基于J.Nat.Prod.2003,66,183-199等中记载的方法来进行。
[B-4步骤]
化合物b5可以由化合物b4基于上述A-7步骤中记载的方法来制造。
[B-5步骤]
化合物b6可以由化合物b5基于上述A-8步骤中记载的方法来制造。
[B-6步骤]
化合物b7可以通过在适当的碱存在下、在适当的溶剂中使用适当的氧化剂作用于化合物b6来制造。作为碱，优选列举氢氧化锂。作为溶剂，优选列举甲醇、四氢呋喃或水。作为氧化剂，可以从通常用于有机合成反应的氧化剂中适宜选择，优选列举过氧化氢。反应时间通常为5分钟～72小时，优选为30分钟～24小时。反应温度通常为0℃～200℃，优选为0℃～60℃。本步骤可以基于J.Nat.Prod.2003,66,183-199等中记载的方法来进行。
[B-7步骤]
化合物b8可以通过在适当的碱存在下、在适当的溶剂中使各种烷基化试剂与化合物b7反应来制造。作为烷基化试剂，可以列举例如卤代烷烃等，优选列举碘代烷烃、溴代烷烃、氯代烷烃等。作为碱，优选列举碳酸钠、碳酸钾。作为溶剂，优选列举N,N-二甲基甲酰胺。反应时间通常为5分钟～48小时，优选为10分钟～2小时。反应温度通常为-78℃～100℃，优选为-10℃～25℃。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法等来进行。
[B-8步骤]
化合物b9可以由化合物b8基于上述A-11步骤中记载的方法来制造。
[B-9步骤]
化合物b10可以由化合物b9基于上述A-12步骤中记载的方法来制造。
[B-10步骤]
化合物b12可以由化合物b10和化合物b11基于上述A-13步骤中记载的方法来制造。
[B-11步骤]
化合物b13可以将化合物b12的酯基于上述A-12步骤中记载的方法进行水解来制造。
[B-12步骤]
化合物b14可以由化合物b13基于上述A-15步骤中记载的方法来制造。
[B-13步骤]
化合物b15可以由化合物b14基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[B-14步骤]
化合物b16可以由化合物b15基于上述A-17步骤中记载的方法来制造。
[B-15步骤]
化合物b17可以由化合物b16基于上述A-18步骤中记载的方法来制造。
[B-16步骤]
化合物B1可以由化合物b17基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[B-17步骤]
化合物b18可以由化合物b17基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[B-18步骤]
化合物B2可以由化合物b18基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法C
在X为-NH-、Z为式(Z-1)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、R6a为甲基、R6b为氢原子或甲基、R3为-(CH2)u-COOH的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000551
(式中，R1、R2、AA、u、b和n如项1中所定义的那样，Rb和PX与上述含义相同。)
化合物c1表示制造方法A的化合物a18或制造方法B的化合物b14。
[C-1步骤]
化合物c2可以由化合物c1基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[C-2步骤]
化合物c3可以由化合物c2基于上述A-15步骤中记载的方法来制造。
[C-3步骤]
化合物c4可以由化合物c3基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[C-4步骤]
化合物c5可以由化合物c4基于上述A-17步骤中记载的方法来制造。
[C-5步骤]
化合物c6可以由化合物c5基于上述A-18步骤中记载的方法来制造。
[C-6步骤]
化合物C1可以由化合物c6基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[C-7步骤]
化合物c7可以由化合物c6基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[C-8步骤]
化合物C2可以由化合物c7基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法D
在X为-NH-、Z为式(Z-1)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、R6a为甲基、R6b为氢原子或甲基、R3为-(CH2)u-COR9、R9为AD、n为1的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000581
(式中，R1、R2、Q、AA、AD、u和b如项1中所定义的那样，PY是指氨基的保护基，Ra、Rb和PX与上述含义相同。)
作为上述PY所示的氨基的保护基，可以使用Protective Groups in OrganicSynthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的保护基等。
化合物d1例如可以作为市售品购入。化合物d6表示制造方法A的化合物a18或制造方法B的化合物b14。
[D-1步骤]
化合物d2可以通过将化合物d1和天冬氨酸二酯或谷氨酸二酯基于上述A-13步骤中记载的方法进行缩合来制造。
[D-2步骤]
化合物d3可以通过将化合物d2的酯基于上述A-12步骤中记载的方法进行水解来制造。
[D-3步骤]
化合物d4可以通过将化合物d3和(AD)基于上述A-13步骤中记载的方法进行缩合来制造。
[D-4步骤]
化合物d5可以通过基于上述A-18步骤中记载的方法进行化合物d4的酯的水解和氨基的保护基的脱保护来制造。另外，在(AD)具有酯或被保护的氨基的情况下，也可以根据需要在本脱保护步骤中进行酯的水解和氨基的保护基的脱保护。
[D-5步骤]
化合物d7可以由化合物d5和化合物d6基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[D-6步骤]
化合物d8可以由化合物d7基于上述A-17步骤中记载的方法来制造。
[D-7步骤]
化合物d9可以由化合物d8基于上述A-18步骤中记载的方法来制造。
[D-8步骤]
化合物D1可以由化合物d9基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[D-9步骤]
化合物d10可以由化合物d9基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[D-10步骤]
化合物D2可以由化合物d10基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法E
在X为-NH-、Z为式(Z-2)或式(Z-3)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、R6a为甲基、R6b为氢原子或甲基、R4为羟基的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000611
(式中，R1、R2、Q、AA、b和n如项1中所定义的那样，s表示1或2，Rb和PX与上述含义相同。)
化合物e1表示制造方法A的化合物a18或制造方法B的化合物b14。
[E-1步骤]
化合物e2可以由化合物e1基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[E-2步骤]
化合物e3可以由化合物e2基于上述A-17步骤中记载的方法来制造。
[E-3步骤]
化合物e4可以由化合物e3基于上述A-18步骤中记载的方法来制造。
[E-4步骤]
化合物E1可以由化合物e4基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[E-5步骤]
化合物e5可以由化合物e4基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[E-6步骤]
化合物E2可以由化合物e5基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法F
在X为-NH-、Z为式(Z-2)或式(Z-3)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、R6a为甲基、R6b为氢原子或甲基、R4为羟基的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000631
(式中，R1、R2、Q、AA、b和n如项1中所定义的那样，s、Rb和PX与上述含义相同。)
化合物f1表示制造方法A的化合物a18或制造方法B的化合物b14。
[F-1步骤]
化合物f2可以由化合物f1基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[F-2步骤]
化合物f3可以由化合物f2基于上述A-15步骤中记载的方法来制造。
[F-3步骤]
化合物f4可以由化合物f3基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[F-4步骤]
化合物f5可以由化合物f4基于上述A-17步骤中记载的方法来制造。
[F-5步骤]
化合物f6可以由化合物f5基于上述A-18步骤中记载的方法来制造。
[F-6步骤]
化合物F1可以由化合物f6基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[F-7步骤]
化合物f7可以由化合物f6基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[F-8步骤]
化合物F2可以由化合物f7基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法G
在X为-NH-、Z为式(Z-2)或式(Z-3)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、R6a为甲基、R6b为氢原子或甲基、R4为AD的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000661
(式中，R1、R2、Q、AA、AD、b和n如项1中所定义的那样，s、Ra、Rb、PX和PY与上述含义相同。)
化合物g1例如可以作为市售品购入。化合物g6表示制造方法A的化合物a18或制造方法B的化合物b14。
[G-1步骤]
化合物g2可以通过将化合物g1和天冬氨酸二酯或谷氨酸二酯基于上述A-13步骤中记载的方法进行缩合来制造。
[G-2步骤]
化合物g3可以通过将化合物g2的酯基于上述A-12步骤中记载的方法进行水解来制造。
[G-3步骤]
化合物g4可以由化合物g3和(AD)基于上述A-13步骤中记载的方法来制造。
[G-4步骤]
化合物g5可以基于上述A-18步骤中记载的方法进行化合物g4的酯的水解和氨基的保护基的脱保护来制造。另外，在(AD)具有酯或被保护的氨基的情况下，也可以根据需要在本脱保护步骤中进行酯的水解和氨基的保护基的脱保护。
[G-5步骤]
化合物g7可以由化合物g5和化合物g6基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[G-6步骤]
化合物g8可以由化合物g7基于上述A-17步骤中记载的方法来制造。
[G-7步骤]
化合物g9可以由化合物g8基于上述A-18步骤中记载的方法来制造。
[G-8步骤]
化合物G1可以由化合物g9基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[G-9步骤]
化合物g10可以由化合物g9基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[G-10步骤]
化合物G2可以由化合物g10基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法H
在X为-C(O)-、Z为式(Z-6)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、R6a为甲基、R6b为氢原子或甲基的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000691
(式中，R1、R2、Q、AA、b和n如项1中所定义的那样，Rx、PX和PY与上述含义相同。)
化合物h1表示制造方法A的化合物a18或制造方法B的化合物b14。化合物h5例如可以作为市售品购入。
[H-1步骤]
化合物h2可以由化合物h1基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[H-2步骤]
化合物h3可以通过将化合物h2和赖氨酸衍生物基于上述A-13步骤中记载的方法进行缩合来制造。
[H-3步骤]
化合物h4可以由化合物h3基于上述A-18步骤中记载的方法来制造。
[H-4步骤]
化合物h6可以由化合物h4和化合物h5基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[H-5步骤]
化合物H1可以由化合物h6基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[H-6步骤]
化合物h7可以由化合物h6基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[H-7步骤]
化合物H2可以由化合物h7基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法I
在X为-C(O)-、Z为式(Z-7)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、R6a为甲基、R6b为氢原子或甲基的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000711
(式中，R1、R2、Q、AA、b和n如项1中所定义的那样，Rx、PX和PY与上述含义相同。)
化合物i1表示制造方法A的化合物a18或制造方法B的化合物b14。化合物i5例如可以作为市售品购入。
[I-1步骤]
化合物i2可以由化合物i1基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[I-2步骤]
化合物i3可以通过将化合物i2和赖氨酸衍生物基于上述A-13步骤中记载的方法进行缩合来制造。
[I-3步骤]
化合物i4可以由化合物i3基于上述A-18步骤中记载的方法来制造。
[I-4步骤]
化合物i6可以由化合物i4和化合物i5基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[I-5步骤]
化合物I1可以由化合物i6基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[I-6步骤]
化合物i7可以由化合物i6基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[I-7步骤]
化合物I2可以由化合物i7基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法J
化合物j6是式(1)中X为-NH-、Z为式(Z-1)、式(Z-2)或式(Z-3)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、Q为式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)或式(Q-6)所示的基团的化合物J1的、制造中间体。化合物j6可以通过例如下述的制法来制造。另外，化合物J1可以由化合物j6基于制造方法A的A-16步骤至A-21步骤中记载的制造方法来制造。
Figure BDA0003202958710000731
(式中，R1、R2、R6a和b如项1中所定义的那样，Ra表示C1-6烷基。)
化合物j1例如可以作为市售品购入。化合物a15可以通过例如制造方法A中记载的方法来制造。
[J-1步骤]
化合物j2例如可以基于Bioorg.Med.Chem.Lett.14(2004)5317-5322等中记载的方法来制造。
[J-2步骤]
化合物j3例如可以基于Bioorg.Med.Chem.Lett.14(2004)5317-5322等中记载的方法来制造。
[J-3步骤]
化合物j4例如可以基于Bioorg.Med.Chem.Lett.14(2004)5317-5322等中记载的方法来制造。
[J-4步骤]
化合物j5可以由化合物j4基于制造方法A的A-14步骤来制造。
[J-5步骤]
化合物j6可以由化合物j5基于制造方法A的A-15步骤来制造。
制造方法K
在X为-C(O)-、Z为式(Z-10)所示的基团的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000741
(式中，R1、R2、AA、b、Q、p和R5a如项1中所定义的那样，Px表示氨基的保护基。)
化合物k1表示制造方法A的化合物a18或制造方法B的化合物b14。
[K-1步骤]
化合物k2可以由化合物k1基于上述A-16中记载的方法来制造。
[K-2步骤]
化合物k3可以由化合物k2基于上述A-18中记载的方法来制造。
[K-3步骤]
化合物k4可以由化合物k3基于上述A-13或A-16中记载的方法来制造。
[K-4步骤]
化合物K1可以由化合物k4基于上述A-19中记载的方法来制造。
制造方法L
在X为-C(O)-、Z为式(Z-11)所示的基团的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000761
(式中，R1、R2、AA、b和p如项1中所定义的那样，Px表示氨基的保护基，Ra表示C1-6烷基。)
化合物l1例如可以作为市售品购入。化合物a15可以通过例如制造方法A中记载的方法来制造。
[L-1步骤]
化合物l2可以通过将化合物l1的氨基用保护基Px进行保护来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法等来进行。
[L-2步骤]
化合物l3可以由化合物l2基于上述A-13步骤中记载的方法来制造。
[L-3步骤]
化合物l4可以由化合物l3基于上述A-14步骤中记载的方法来制造。
[L-4步骤]
化合物l5可以由化合物l4基于上述A-13步骤中记载的方法来制造。
[L-5步骤]
化合物l6可以通过将化合物l5的保护基Px进行脱保护来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、JohnWiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法、Tetrahedron Lett.45(2004)495-499等来进行。另外，在(AA)p具有酯或被保护的氨基的情况下，也可以根据需要在本脱保护步骤中进行酯的水解和氨基的保护基的脱保护。
[L-6步骤]
化合物l7可以由化合物l6基于上述A-13或上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[L-7步骤]
化合物L1可以由化合物l7基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法M
化合物m7是式(1)中X为-NH-、Z为式(Z-1)、式(Z-2)或式(Z-3)所示的基团、W为式(W-1)所示的基团、Q为式(Q-7)所示的基团的化合物Ma1的制造中间体。化合物m7可以通过例如下述的制法来制造。另外，化合物Ma1可以由化合物m7基于制造方法A的A-16步骤至A-21步骤中记载的制造方法来制造。
Figure BDA0003202958710000781
(式中，R1、R2、R6a和b如项1中所定义的那样，Ra表示C1-6烷基。)
化合物m1例如可以作为市售品购入。化合物a15可以通过例如制造方法A中记载的方法来制造。
[M-1步骤]
化合物m2例如可以基于Bioorg.Med.Chem.Lett.14(2004)5317-5322等中记载的方法来制造。
[M-2步骤]
化合物m3例如可以基于Bioorg.Med.Chem.Lett.14(2004)5317-5322等中记载的方法来制造。
[M-3步骤]
化合物m4例如可以基于J.Med.Chem.2004,47,4774-4786等中记载的方法来制造。
[M-4步骤]
化合物m5例如可以基于Bioorg.Med.Chem.Lett.14(2004)5317-5322等中记载的方法来制造。
[M-5步骤]
化合物m6可以由化合物m5基于制造方法A的A-14步骤来制造。
[M-6步骤]
化合物m7可以由化合物m6基于制造方法A的A-15步骤来制造。
制造方法N
化合物n5是式(1)中X为-NH-、Z为式(Z-1)、式(Z-2)或式(Z-3)所示的基团、W为式(W-2)所示的基团的化合物N1的制造中间体。化合物n5可以通过例如下述的制法来制造。另外，化合物N1可以由化合物n5基于制造方法A的A-16步骤至A-19步骤中记载的制造方法来制造。
Figure BDA0003202958710000801
(式中，R1、R2、R7和b如项1中所定义的那样，Ra表示C1-6烷基。)
化合物n1例如可以作为市售品购入。化合物a15可以通过例如制造方法A中记载的方法来制造。
[N-1步骤]
化合物n2可以基于例如国际公开第2003/082268号等中记载的方法来制造。
[N-2步骤]
化合物n3可以由化合物n2基于A-13步骤中记载的方法来制造。
[N-3步骤]
化合物n4可以由化合物n3基于A-14步骤中记载的方法来制造。
[N-4步骤]
化合物n5可以由化合物n4基于制造方法A的A-15步骤来制造。
制造方法O
在X为-NH-、Z为式(Z-4)或式(Z-5)所示的基团的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000811
(式中，R1、R2、AA、R5a、b和p如项1中所定义的那样，EL表示氯原子、溴原子、碘原子、三氟甲基磺酰基或甲苯磺酰基，Rzz表示氢原子或-COORa，Px表示氨基的保护基，Pz表示羧基的保护基，Ra表示C1-6烷基。)
化合物o1可以通过例如国际公开第2004/026293号、国际公开第2016/123582号等中记载的方法来制造、或者可以作为市售品购入。化合物a15例如基于制造方法A中记载的方法来制造。
[O-1步骤]
化合物o2可以由化合物o1基于例如国际公开第2004/026293号、Bioorg.Med.Chem.Lett.14(2004)5317-5322等中记载的方法来制造。
[O-2步骤]
化合物o3可以由化合物o2基于上述A-8步骤中记载的方法来制造。
[O-3步骤]
化合物o4可以由化合物o3基于上述A-11步骤中记载的方法来制造。
[O-4步骤]
化合物o5可以由化合物o4基于例如国际公开第2004/026293号中记载的方法等来制造。
[O-5步骤]
化合物o6可以由化合物o5基于例如国际公开第2004/026293号等中记载的方法来制造。
[O-6步骤]
化合物o7可以由化合物o6基于例如国际公开第2004/026293号等中记载的方法来制造。
[O-7步骤]
化合物o8可以通过将化合物o7的羧基用保护基PZ进行保护来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(Theodora W.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法等来进行。
[O-8步骤]
化合物o9可以由化合物o8基于上述A-12步骤中记载的方法来制造。
[O-9步骤]
化合物o10可以由化合物o9基于上述A-13步骤中记载的方法来制造。
[O-10步骤]
化合物o11可以由化合物o10基于上述A-14步骤中记载的方法来制造。
[O-11步骤]
化合物o12可以由化合物o11基于上述A-15步骤中记载的方法来制造。
[O-12步骤]
化合物o13可以由化合物o12基于上述A-16步骤中记载的方法来制造。
[O-13步骤]
化合物o14可以由化合物o13通过将保护基Pz进行脱保护来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(Theodora W.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法等来进行。
[O-14步骤]
化合物o15可以由化合物o14基于上述A-17步骤中记载的方法来制造。
[O-15步骤]
化合物O1可以由化合物o15基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[O-16步骤]
化合物o16可以由化合物o13基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[O-17步骤]
化合物o17可以由化合物o16基于上述O-13步骤中记载的方法来制造。
[O-18步骤]
化合物o18可以由化合物o17基于上述O-14步骤中记载的方法来制造。
[O-19步骤]
化合物O2可以由化合物o18基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法P
在X为-C(O)-、Z为式(Z-8)或式(Z-9)所示的基团、G为-O-的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000851
(式中，R1、R2、AA、p、b和R5如项1中所定义的那样，Px表示氨基的保护基，Pz表示羟基的保护基，Ra表示C1-6烷基。)
化合物p1例如可以作为市售品购入。化合物a15例如可以通过制造方法A中记载的方法来制造。
[P-1步骤]
化合物p2可以由化合物p1基于例如国际公开第2004/026293号等中记载的方法来制造。
[P-2步骤]
化合物p3可以由化合物p2通过将保护基Pz进行脱保护来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、JohnWiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法等来进行。
[P-3步骤]
化合物p4可以由化合物p3基于例如国际公开第2004/026293号等中记载的方法来制造。
[P-4步骤]
化合物p5可以通过将化合物p4的氨基和羟基分别用保护基Px和保护基Pz进行保护来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法等来进行。
[P-5步骤]
化合物p6可以由化合物p5通过将保护基Pz进行脱保护来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、JohnWiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法、Tetrahedron Lett.45(2004)495-499等来进行。
[P-6步骤]
化合物p7可以由化合物p6基于A-13步骤中记载的方法来制造。
[P-7步骤]
化合物p8可以由化合物p7基于上述A-18步骤中记载的方法来制造。
[P-8步骤]
化合物p9可以由化合物p8通过基于上述A-13步骤中记载的方法进行缩合来制造。另外，在(AA)p具有酯或被保护的氨基的情况下，在缩合反应后，还可以根据需要基于Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、JohnWiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法等来进行酯的水解和氨基的保护基的脱保护。
[P-9步骤]
化合物p10可以通过将化合物p9和琥珀酰亚胺衍生物基于上述A-16步骤中记载的方法进行缩合来制造。
[P-10步骤]
化合物P1可以由化合物p10基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[P-11步骤]
化合物p11可以由化合物p10基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[P-12步骤]
化合物P2可以由化合物p11基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
制造方法T
在X为-C(O)-、Z为式(Z-8)或式(Z-9)所示的基团、G为-NH-的情况下，式(1)所示的化合物可以通过例如下述的制法来制造。
Figure BDA0003202958710000881
(式中，R1、R2、AA、p、b和R5a如项1中所定义的那样，EL表示氯原子、溴原子、碘原子、三氟甲基磺酰基或甲苯磺酰基，Px和Py表示氨基的保护基，Ra表示C1-6烷基。)
化合物t1可以通过例如国际公开第2004/026293号、国际公开第2016/123582号等中记载的方法、或者可以作为市售品购入。化合物a15可以通过例如制造方法A中记载的方法来制造。
[T-1步骤]
化合物t2可以由化合物t1基于例如国际公开第2004/026293号、Bioorg.Med.Chem.Lett.14(2004)5317-5322等中记载的方法来制造。
[T-2步骤]
化合物t3可以由化合物t2基于上述A-8步骤中记载的方法来制造。
[T-3步骤]
化合物t4可以由化合物t3通过例如国际公开第2016/123582号等中记载的方法来制造。
[T-4步骤]
化合物t5可以通过将化合物t4的氨基用保护基Py进行保护来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(TheodoraW.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法等来进行。
[T-5步骤]
化合物t6可以由化合物t5基于上述A-13步骤中记载的方法来制造。
[T-6步骤]
化合物t7可以由化合物t6基于上述A-14步骤中记载的方法来制造。
[T-7步骤]
化合物t8可以由化合物t7基于上述A-13步骤中记载的方法来制造。
[T-8步骤]
化合物t9可以通过将化合物t8的保护基Px和Py进行脱保护来制造。本步骤可以基于Protective Groups in Organic Synthesis(Theodora W.Greene,Peter G.M.Wuts著、John Wiley&Sons,Inc.发行、1999年)中记载的方法、Tetrahedron Lett.45(2004)495-499等来进行。另外，在(AA)p具有酯或被保护的氨基的情况下，也可以根据需要在本脱保护步骤中进行酯的水解和氨基的保护基的脱保护。
[T-9步骤]
化合物t10可以由化合物t9基于上述A-13或A-16步骤中记载的方法来制造。
[T-10步骤]
化合物T1可以由化合物t10基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
[T-11步骤]
化合物t11可以由化合物t10基于上述A-20步骤中记载的方法来制造。
[T-12步骤]
化合物T2可以由化合物t11基于上述A-19步骤中记载的方法来制造。
上述示出了本发明的哈米特林衍生物的制造方法。但是，即使是这些以外的方法，例如通过将本领域技术人员公知的方法适当组合，也可以制造本发明的哈米特林衍生物。
上述各制造方法的各步骤中使用的适当的碱应当根据反应、原料化合物的种类等适宜选择，可以列举例如：碳酸氢钠、碳酸氢钾等碱金属碳酸氢盐类；碳酸钠、碳酸钾等碱金属碳酸盐类；氢化钠、氢化钾等金属氢化物；氢氧化钠、氢氧化钾等碱金属氢氧化物；甲醇钠、叔丁醇钠等碱金属醇盐类；丁基锂、二异丙基酰胺锂等有机金属碱类；三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、4-二甲基氨基吡啶(DMAP)、1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯(DBU)等有机碱类等。
上述各制造方法的各步骤中使用的适当的溶剂应当根据反应、原料化合物的种类等适宜选择，可以列举例如：甲醇、乙醇、异丙醇等醇类；丙酮、甲基酮等酮类；二氯甲烷、氯仿等卤代烃类；四氢呋喃(THF)、二氧杂环己烷等醚类；甲苯、苯等芳香族烃类；己烷、庚烷等脂肪族烃类；乙酸乙酯、乙酸丙酯等酯类；N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N-甲基-2-吡咯烷酮等酰胺类；二甲基亚砜(DMSO)等亚砜类；乙腈等腈类；蒸馏水等，这些溶剂可以单独使用或混合使用两种以上。另外，根据反应的种类，也可以使用三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶等有机碱类作为溶剂。
本发明的哈米特林衍生物可以利用本领域技术人员公知的方法来分离、纯化。例如，可以列举萃取、分配、再沉淀、柱色谱法(例如硅胶柱色谱法、离子交换柱色谱法或制备液相色谱法)或重结晶等。
作为重结晶溶剂，可以使用例如：甲醇、乙醇、2-丙醇等醇系溶剂；***等醚系溶剂；乙酸乙酯等酯系溶剂；苯、甲苯等芳香族烃系溶剂；丙酮等酮系溶剂；二氯甲烷、氯仿等卤素系溶剂；己烷等烃系溶剂；二甲基甲酰胺、乙腈等非质子系溶剂；水；或它们的混合溶剂等。
作为其它纯化方法，可以使用实验化学讲座(日本化学会编、丸善)1卷等中记载的方法等。另外，关于本发明的哈米特林衍生物的分子结构的确定，可以参照来自各自的原料化合物的结构并通过核磁共振法、红外吸收法、圆二色性光谱分析法等光谱学方法或质谱法容易地进行。
另外，就上述制造方法中的中间体或最终生成物而言，还可以通过适宜变换其官能团、另外特别是以氨基、羟基、羰基、卤素原子等为起点来延伸各种侧链、以及在此时根据需要进行上述官能团的保护、脱保护而引导为本发明中包含的其它化合物。官能团的变换和侧链的延伸可以通过通常进行的常规方法(例如，参照Comprehensive OrganicTransformations,R.C.Larock,John Wiley&Sons Inc.(1999)等)来进行。
在本发明的哈米特林衍生物中，有时会产生不对称或具有包含不对称碳的取代基，这种化合物则存在旋光异构体。旋光异构体可以按照通常的方法来制造。作为制造方法，可以列举例如：使用具有不对称点的原料的方法；或在中间阶段引入不对称的方法。例如，在旋光异构体的情况下，通过使用旋光性的原料或在制造步骤的适当阶段进行光学拆分等，可以得到旋光异构体。作为光学拆分法，例如在本发明的哈米特林衍生物具有碱性官能团的情况下，可以列举如下非对映体法：在惰性溶剂(例如甲醇、乙醇、2-丙醇等醇系溶剂；***等醚系溶剂；乙酸乙酯等酯系溶剂；甲苯等烃系溶剂；乙腈等非质子系溶剂；或选自上述溶剂中的两种以上的混合溶剂)中，使用旋光性的酸(例如扁桃酸、N-苄氧基丙氨酸、乳酸等单羧酸；酒石酸、邻二亚异丙基酒石酸、苹果酸等二羧酸；樟脑磺酸、溴代樟脑磺酸等磺酸等)形成盐。在本发明的哈米特林衍生物或其合成中间体具有羧基等酸性官能团的情况下，还可以使用旋光性的胺(例如1-苯基乙胺、奎宁、奎尼丁、辛可尼丁、辛可宁、马钱子碱等有机胺)形成盐，由此进行光学拆分。
作为形成盐的温度，可以列举-50℃至溶剂的沸点的范围，优选列举0℃至沸点的范围，更优选列举室温至溶剂的沸点的范围。为了提高光学纯度，期望暂时将温度升高至溶剂的沸点附近。滤取所析出的盐时，可以根据需要进行冷却以提高收率。旋光性的酸或胺的使用量可以列举相对于基质为约0.5当量～约2.0当量的范围，优选列举1当量左右的范围。还可以根据需要使晶体在惰性溶剂(例如甲醇、乙醇、2-丙醇等醇系溶剂；***等醚系溶剂；乙酸乙酯等酯系溶剂；甲苯等烃系溶剂；乙腈等非质子系溶剂；或选自上述溶剂中的两种以上的混合溶剂)中重结晶，得到高纯度的旋光性的盐。另外，还可以根据需要将光学拆分后的盐利用通常的方法用酸或碱进行处理，以游离体的形式得到。
上述各制造方法中的原料或中间体中，关于未特别预先记载其制造方法的物质，可以为市售化合物，或者可以由市售化合物利用本领域技术人员公知的方法或基于此的方法来合成。
实施例
以下通过参考例、实施例和试验例对本发明更具体地进行说明，但本发明当然不受这些例子限定。需要说明的是，以下的参考例和实施例中所示的化合物名未必遵循IUPAC命名法。
根据反应后的处理等方法，参考例和实施例的化合物也有时以TFA盐等酸加成盐的形式得到。
为了简化说明书的记载，也有时在参考例、实施例和实施例的表中使用以下所示的简写符号。就作为取代基使用的简写符号而言，Me表示甲基，Et表示乙基，Boc表示叔丁氧基羰基，Fmoc表示9-芴基甲氧基羰基，trt表示三苯甲基，Ph表示苯基，Bn表示苄基。TFA表示三氟乙酸，THF表示四氢呋喃，TCEP表示三(2-羧基乙基)膦，Tris-HCl表示三羟甲基氨基甲烷盐酸盐，PBS表示磷酸缓冲生理盐水，TBS表示Tris缓冲生理盐水，HEPES表示2-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]乙磺酸，PIPES表示哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸)。作为NMR中使用的符号，s表示单峰，d表示二重峰，dd表示双二重峰，t表示三重峰，q表示四重峰，m表示多重峰，br表示宽峰，brs表示宽单峰，brd表示宽二重峰，brm表示宽多重峰，J表示耦合常数。
高效液相色谱-质谱分析仪；LCMS的测定条件如下所述，用[M+nH]n+/n、[M+Na]+、[M-nH]n-/n表示观察到的质谱分析的值[MS(m/z)]，用Rt(分钟)表示保留时间。需要说明的是，各实测值中，用A～D或F～H来标注测定中使用的测定条件。
测定条件A
检测仪器：岛津LCMS-IT-TOF
柱：Phenomenex Kinetex(1.7μm C18,50mm×2.10mm)
溶剂：A液：0.1％HCOOH/CH3CN、B液：0.1％HCOOH/H2O
梯度条件：
0.0分钟；A/B＝1：99
0.0-1.4分钟从A1％到95％的线性梯度
1.4-1.6分钟；A/B＝95：5
1.6-2.0分钟；A/B＝1：99
流速：1.2mL/分钟
UV：220/254nm
柱温：40℃
测定条件B
检测仪器：岛津LCMS-IT-TOF
柱：Phenomenex Kinetex(1.7μm C18,50mm×2.10mm)
溶剂：A液：0.1％HCOOH/CH3CN、B液：0.1％HCOOH/H2O
梯度条件：
0.0分钟；A/B＝10：90
0.0-1.4分钟从A10％到90％的线性梯度
1.4-1.6分钟；A/B＝90：10
1.6-2.0分钟；A/B＝10：90
流速：1.2mL/分钟
UV：220/254nm
柱温：40℃
测定条件C
检测仪器：岛津LCMS-IT-TOF
柱：Phenomenex Kinetex(1.7μm C8,50mm×2.10mm)
溶剂：A液：0.1％HCOOH/CH3CN、B液：0.1％HCOOH/H2O
梯度条件：
0.0分钟；A/B＝1：99
0.0-1.4分钟从A1％到95％的线性梯度
1.4-1.6分钟；A/B＝95：5
1.6-2.0分钟；A/B＝1：99
流速：1.2mL/分钟
UV：220/254nm
柱温：40℃
测定条件D
检测仪器：岛津LCMS-IT-TOF
柱：Phenomenex Kinetex(1.7μm C8,50mm×2.10mm)
溶剂：A液：0.1％HCOOH/CH3CN、B液：0.1％HCOOH/H2O
梯度条件：
0.0分钟；A/B＝10：90
0.0-1.4分钟从A10％到90％的线性梯度
1.4-1.6分钟；A/B＝90：10
1.6-2.0分钟；A/B＝10：90
流速：1.2mL/分钟
UV：220/254nm
柱温：40℃
测定条件F
检测仪器：ACQUITY(注册商标)SQ检测器(Waters公司)
HPLC：ACQUITY(注册商标)***
柱：Waters ACQUITY UPLC(注册商标)BEH C18(1.7μm,2.1mm×30mm)
溶剂：A液：0.06％甲酸/CH3CN、B液：0.06％甲酸/H2O
梯度条件：0.0-1.3分钟从A 2％到96％的线性梯度
流速：0.8mL/分钟
UV：220/254nm
柱温：25℃
测定条件G
检测仪器：岛津LCMS-IT-TOF
柱：Phenomenex Kinetex(1.7μm C8,50mm×2.10mm)
溶剂：A液：0.1％HCOOH/CH3CN、B液：0.1％HCOOH/H2O
梯度条件：
0.0分钟；A/B＝10：90
0.0-1.4分钟从A10％到95％的线性梯度
1.4-1.6分钟；A/B＝95：5
1.6-2.0分钟；A/B＝10：90
流速：1.2mL/分钟
UV：220/254nm
柱温：40℃
测定条件H
检测仪器：岛津LCMS-IT-TOF
柱：Phenomenex Kinetex(1.7μm C8,50mm×2.10mm)
溶剂：A液：0.1％HCOOH/CH3CN、B液：0.1％HCOOH/H2O
梯度条件：
0.0分钟；A/B＝40：60
0.0-1.4分钟从A 40％到95％的线性梯度
1.4-1.6分钟；A/B＝95：5
1.6-2.0分钟；A/B＝5：95
流速：1.2mL/分钟
UV：220/254nm
柱温：40℃
高效液相色谱仪；求出平均药物抗体比(平均DAR)的测定条件如下所述，用Rt(分钟)表示保留时间。需要说明的是，各实测值中，用E标注测定中使用的测定条件。
测定条件E
HPLC：Shimadzu LC-10A系列
柱：无孔TSKgel Butyl-NPR柱(TosohBioscience,2.5μm,35mm×4.6mm)
溶剂：A液：1.5mol/L硫酸铵,25mmol/L磷酸钠水溶液(pH6.95)、B液：25％异丙醇/25mmol/L磷酸钠水溶液(pH6.95)
梯度条件：
0.0分钟；A/B＝100：0
0.0-12.0分钟从B 0％到100％的线性梯度
12.1-18.0分钟；A/B＝100：0
流速：0.8mL/分钟
UV：230nm
柱温：25℃
参考例1
(6S,9S,12S,13E,17R)-9-叔丁基-17-(3-{[2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基]氨基}-3-氧代丙基)-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧代-5,8,11,16-四氮杂十八碳-13-烯-18-羧酸叔丁酯
Figure BDA0003202958710000981
a)2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯的制造
在氮气气氛下向-78℃的吲哚-3-乙酸甲酯(3.8g)的四氢呋喃(87mL)溶液中滴加六甲基二硅氮烷钾盐(1mol/L四氢呋喃溶液、65.5mL)后，在0℃下搅拌2小时。将反应液冷却至-78℃后，滴加碘甲烷(23g)，然后，在0℃下搅拌3小时。反应结束后，加入水，用***萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸镁干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(3.95g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.60(3H,d,J＝7.1Hz),3.67(3H,s),3.76(3H,s),4.02(1H,q,J＝7.1Hz),7.00(1H,s),7.12(1H,t,J＝7.8Hz),7.23(1H,t,J＝7.8Hz),7.29(1H,d,J＝7.8Hz),7.66(1H,d,J＝7.8Hz).
b)2-甲基-2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯的制造
在氮气气氛下向-78℃的2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(3.94g)的四氢呋喃(200mL)溶液中滴加六甲基二硅氮烷钾盐(1mol/L四氢呋喃溶液、27.7mL)后，在0℃下搅拌2小时。将反应液冷却至-78℃后，滴加碘甲烷(15.4g)，然后，在0℃下搅拌3小时。反应结束后，加入水，用***萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸镁干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到2-甲基-2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(3.59g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.66(6H,s),3.61(3H,s),3.73(3H,s),6.91(1H,s),7.06(1H,t,J＝8.0Hz),7.19(1H,t,J＝8.0Hz),7.27(1H,d,J＝8.0Hz),7.61(1H,d,J＝7.9Hz).
c)2-甲基-2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-1-醇的制造
在氮气气氛下向-78℃的2-甲基-2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯(3.59g)的***(169mL)和二氯甲烷(47mL)溶液中滴加二异丁基氢化铝(1mol/L正己烷溶液、38.8mL)后，在0℃下搅拌1小时。反应结束后，加入水后，将25℃的反应混合物加入饱和酒石酸钾钠水溶液，然后，用***萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸镁干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到2-甲基-2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-1-醇(3.14g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.42(6H,s),3.74(3H,s),3.77(2H,s),6.87(1H,s),7.07(1H,t,J＝7.9Hz),7.20(1H,t,J＝7.9Hz),7.29(1H,d,J＝8.0Hz),7.75(1H,d,J＝8.0Hz).
d)2-甲基-2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙醛的制造
在氮气气氛下将2-甲基-2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-1-醇(3.14g)、四丙基高钌酸铵(271mg)、N-甲基吗啉-N-氧化物(3.26g)和分子筛4A(7.7g)的二氯甲烷(110mL)混合溶液在25℃下搅拌1小时。反应结束后，用硅藻土过滤后，蒸馏除去溶剂，将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到2-甲基-2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙醛(2.4g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.53(6H,s),3.77(3H,s),6.94(1H,s),7.07(1H,t,J＝8.0Hz),7.22(1H,t,J＝8.0Hz),7.30(1H,d,J＝8.0Hz),7.53(1H,d,J＝8.0Hz),9.47(1H,s).
e)(2S)-2-{[(1R)-2-羟基-1-苯基乙基]氨基}-3-甲基-3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丁腈的制造
在氮气气氛下将2-甲基-2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙醛(2.4g)和(R)-(-)-2-苯甘氨醇(1.63g)的甲苯(47mL)溶液进行1.5小时加热回流，利用迪安-斯托克装置将水蒸馏除去后，蒸馏除去溶剂。在氮气气氛下向残渣中加入0℃的二氯甲烷(69mL)后，加入三甲基氰硅烷(2.36g)，在25℃下搅拌96小时。向反应溶液中加入四正丁基氟化铵(1mol/L四氢呋喃溶液、1mL)，进一步搅拌30分钟后，加入水，用氯仿萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到(2S)-2-{[(1R)-2-羟基-1-苯基乙基]氨基}-3-甲基-3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丁腈(2.74g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.64(3H,s),1.65(3H,s),3.49-3.55(1H,m),3.73(1H,dd,J＝10.9,4.2Hz),3.79(1H,s),3.80(3H,s),4.05(1H,dd,J＝7.9,3.6Hz),6.96-7.00(2H,m),7.11(2H,d,J＝8.0Hz),7.21-7.40(6H,m).
f)Nα-[(1R)-2-羟基-1-苯基乙基]-β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺的制造
在0℃下向(2S)-2-{[(1R)-2-羟基-1-苯基乙基]氨基}-3-甲基-3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丁腈(2.74g)、二甲基亚砜(6.16g)和碳酸钾(10.9g)的甲醇(50mL)和水(2.1mL)悬浮液中加入30％过氧化氢水溶液(8.94mL)后，在45℃下搅拌1.5小时。反应结束后，加入饱和硫代硫酸钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。将有机层用水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到Nα-[(1R)-2-羟基-1-苯基乙基]-β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺(2.32g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.49(3H,s),1.51(3H,s),2.06-2.14(1H,br),2.37(1H,dd,J＝6.0,6.0Hz),3.44-3.50(1H,m),3.50-3.54(1H,m),3.56-3.63(m,2H),3.75(3H,s),5.52(1H,brs),6.14(1H,brs),6.71-6.73(2H,m),6.81-6.85(2H,m),6.97-7.00(2H,m),7.10-7.18(2H,m),7.24-7.28(2H,m).
g)β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺的制造
向Nα-[(1R)-2-羟基-1-苯基乙基]-β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺(2.32g)的甲醇(65mL)溶液中加入氢氧化钯/碳(2.8g)，在氢气气氛下在室温下搅拌3小时。用硅藻土过滤后，蒸馏除去溶剂，将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺(1.27g)。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：1.24(2H,brs),1.28(3H,s),1.42(3H,s),3.68(1H,s),3.71(3H,s),6.93-7.00(2H,m),7.06(1H,s),7.11(1H,t,J＝7.7Hz),7.29(1H,brs),7.36(1H,d,J＝8.3Hz),7.88(1H,d,J＝8.2Hz).
h)Nα-(叔丁氧基羰基)-β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺的制造
将β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺(1.27g)、碳酸氢钠(522mg)、二碳酸二叔丁酯(1.35g)、四氢呋喃(13mL)、氯仿(13mL)和水(6.5mL)的混合液在25℃下搅拌16小时。反应结束后，加入水，用氯仿萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到Nα-(叔丁氧基羰基)-β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺(1.80g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.33(3H,s),1.47(9H,s),1.50(3H,s),3.73(3H,d,J＝1.3Hz),4.51(1H,brs),4.86(1H,brs),5.02(1H,brd,J＝8.2Hz),5.59(1H,brd,J＝6.4Hz),6.83(1H,d,J＝1.8Hz),7.15(1H,t,J＝7.3Hz),7.21-7.25(1H,m),7.30(1H,d,J＝8.2Hz),8.05(1H,brd,J＝7.3Hz).
LC-MS：346(M+H)+(1.211分钟，测定条件A).
i)N,N,Nα-三(叔丁氧基羰基)-β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺的制造
将Nα-(叔丁氧基羰基)-β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺(1.79g)、二碳酸二叔丁酯(2.8g)、N,N-二异丙基乙胺(2.68g)、4-二甲基氨基吡啶(0.19g)和氯仿(20mL)的混合液在25℃下搅拌2.5小时。反应结束后，加入水，用氯仿萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到N,N,Nα-三(叔丁氧基羰基)-β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺(1.99g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.08-1.58(33H,m),3.70(3H,s),4.67-4.90(0.2H,m),5.25-5.45(0.8H,m),6.00-6.03(1H,m),6.81-6.87(1H,m),7.04-7.09(1H,m),7.13-7.18(1H.m),7,21-7,27(1H,m),7.91-7.94(1H,m).
LC-MS：546(M+H)+(1.630分钟，测定条件A)
j)N-(叔丁氧基羰基)-β,β,1-三甲基-L-色氨酸甲酯的制造
在氮气气氛下在0℃下向N,N,Nα-三(叔丁氧基羰基)-β,β,1-三甲基-L-色氨酰胺(2.29g)的甲醇溶液(21mL)中加入甲醇锂(176mg)后，在25℃下搅拌2小时。反应结束后，加入饱和氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到N-(叔丁氧基羰基)-β,β,1-三甲基-L-色氨酸甲酯(927mg)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.17-1.59(15H,m),3.45和3.58(3H,2brs),3.71(3H,s),4.56-4.73(1.2H,m),5.06(0.8H,brd,J＝7.3Hz),6.81-6.82(1H,m),7.05-7.10(1H,m),7.16-7.21(1H,m),7.24-7.29(1H,m),7.73-7.80(1H,m).
LC-MS：361(M+H)+(1.379分钟，测定条件A).
k)N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酸甲酯的制造
在氮气气氛下在0℃下向N-(叔丁氧基羰基)-β,β,1-三甲基-L-色氨酸甲酯(927mg)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(13mL)中加入60％含有氢化钠(168mg)后，在25℃下搅拌15分钟。使反应悬浮液达到0℃后，加入碘甲烷(1.1g)，然后，在25℃下搅拌1小时。反应结束后，加入水，用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酸甲酯(915mg)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.42(9H,s),1.52和1.64(6H,2s),2.80和2.86(3H,2s),3.46(3H,s),3.71(3H,s),5.27和5.52(1H,2s),6.85(1H,s),7.07-7.27(3H,m),7.78和7.92(1H,2d,J＝7.88Hz).
LC-MS：397(M+Na)+(1.406分钟，测定条件B)
l)N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酸的制造
向N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酸甲酯(639mg)的水(11mL)-甲醇(44mL)溶液中加入1mol/L氢氧化锂(13.5mL)，在60℃下搅拌24小时。反应结束后，加入1mol/L草酸水溶液，使反应溶液为pH4后，加入水，用氯仿萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酸(610mg)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.43(9H,s),1.53(3H,s),1.63(3H,s),2.76和2.89(3H,2s),3.71(3H,s),5.36和5.44(1H,2s),6.85和6.87(1H,2s),7.02-7.11(1H,m),7.18(1H,t,J＝7.3Hz),7.24-7.27(1H,m),7.81和7.96(1H,2d,J＝7.9Hz).
LC-MS：361(M+H)+,359(M-H)-(1.300分钟，测定条件A).
m)N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-N-[(3S,4E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺的制造
将N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酸(500mg)、(2E,4S)-2,5-二甲基-4-[甲基(3-甲基-L-缬氨酰基)氨基]己-2-烯酸乙酯(520mg)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(399mg)、1-羟基-1H-苯并***·一水合物(425mg)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)的混合液在25℃下搅拌16小时。反应结束后，加入水，用氯仿萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-N-[(3S,4E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(759mg)。
LC-MS：655(M+H)+(1.714分钟，测定条件A)
n)N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-N-[(3S,4E)-5-羧基-2-甲基己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺的制造
向N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-N-[(3S,4E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(127mg)的水(1.55mL)-甲醇(4.65mL)溶液中加入1mol/L氢氧化锂(1.65mL)，在25℃下搅拌24小时。反应结束后，加入1mol/L草酸水溶液，使反应溶液为pH4后，加入水，用氯仿萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-N-[(3S,4E)-5-羧基-2-甲基己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(93mg)。
LC-MS：627(M+H)+(1.508分钟，测定条件A)
o)N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-N-{(3S,4E)-6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基}-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺的制造
将N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-N-[(3S,4E)-5-羧基-2-甲基己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(185mg)、N-羟基琥珀酰亚胺(97mg)、三吡咯烷基溴化
Figure BDA0003202958710001051
六氟磷酸盐(391mg)、4-二甲基氨基吡啶(102mg)、N,N-二异丙基乙胺(108mg)和N,N-二甲基甲酰胺(2.8mL)的混合液在25℃下搅拌4小时。反应结束后，加入水，用乙酸乙酯萃取。将有机层用水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-N-{(3S,4E)-6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基}-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(166mg)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：8.27和7.96(1H,2d,J＝7.9Hz),7.16-7.04(4H,m),6.88(1H,d,J＝9.1Hz),6.17和6.09(1H,2d,J＝8.5Hz),5.96和5.66(1H,2s),5.07(1H,t,J＝9.3Hz),4.45和3.87(1H,2d,J＝8.6Hz),3.74和3.73(3H,2s),2.99(3H,s),2.95(3H,s),2.83(4H,brs),1.97(3H,s),1.92-1.86(1H,m),1.57-1.42(14H,m),0.89(3H,d,J＝6.1Hz),0.83-0.80(3H,m),0.48和0.41(9H,2s).
LC-MS：724(M+H)+(1.573分钟，测定条件A)
p)(6S,9S,12S,13E,17R)-17-(叔丁氧基羰基)-9-叔丁基-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂二十碳-13-烯-20-羧酸的制造
将N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-N-{(3S,4E)-6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基}-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(30mg)、D-谷氨酸α-叔丁基酯盐酸盐(10.7mg)、N,N-二异丙基乙胺(49.7mg)和N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)的混合液在25℃下搅拌3小时。反应结束后，加入水，用氯仿萃取。将有机层用水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到(6S,9S,12S,13E,17R)-17-(叔丁氧基羰基)-9-叔丁基-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂二十碳-13-烯-20-羧酸(14.2mg)。
LC-MS 834(M+Na)+(1.574分钟，测定条件D)
q)(6S,9S,12S,13E,17R)-9-叔丁基-17-(3-{[2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基]氨基}-3-氧代丙基)-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂十八碳-13-烯-18-羧酸叔丁酯(参考例1)的制造
将(6S,9S,12S,13E,17R)-17-(叔丁氧基羰基)-9-叔丁基-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂二十碳-13-烯-20-羧酸(14mg)、N-(2-氨基乙基)马来酰亚胺盐酸盐(3.0mg)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(6.6mg)、1-羟基-1H-苯并***·一水合物(5.2mg)、N,N-二异丙基乙胺(4.4mg)和N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)的混合液在25℃下搅拌2小时。反应结束后，加入水，用乙酸乙酯萃取。将有机层用水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到参考例1(11.6mg)。
LC-MS：934(M+H)+(1.597分钟，测定条件D)
参考例2
N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酰基-N-{(3S,4E)-6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基}-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺
Figure BDA0003202958710001071
a)3-甲基-3-苯基丁酸的制造
在10℃下向3-甲基-2-丁烯酸(15g)的苯(100mL)溶液中加入氯化铝(24.1g)，搅拌30分钟后，在40℃下搅拌1小时。冷却到0℃后加入冰水，用叔丁基甲基醚萃取，进行一定程度浓缩，将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液萃取。将水层用浓盐酸调节为pH2，用叔丁基甲基醚萃取。将有机层用无水硫酸镁干燥，减压蒸馏除去溶剂，得到3-甲基-3-苯基丁酸(26.3g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.46(6H,s),2.65(2H,s),7.20(1H,t,J＝7.2Hz),7.31(1H,t,J＝7.2Hz),7.37(2H,d,J＝7.2Hz).
b)(4S)-3-(3-甲基-3-苯基丁酰基)-4-(丙烷-2-基)-1,3-
Figure BDA0003202958710001072
唑烷-2-酮的制造
在-78℃下向3-甲基-3-苯基丁酸(17.2g)的THF溶液(900mL)中加入三乙胺(23.7mL)和特戊酰氯(15.3mL)。升温至0℃，搅拌1小时。另行在-78℃下向(S)-异丙基
Figure BDA0003202958710001081
唑烷酮(19.5g)的THF溶液(760mL)中加入正丁基锂(1.64mol/L己烷溶液89.8mL)，搅拌30分钟，从而制备锂盐。使先前的反应液达到-78℃，滴加锂盐，搅拌1小时后，升温至0℃，进一步搅拌30分钟后，加入水，用叔丁基甲基醚萃取。将有机层用饱和盐水清洗，用无水硫酸镁干燥。将溶剂减压蒸馏除去，将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：叔丁基甲基醚)进行纯化，得到(4S)-3-(3-甲基-3-苯基丁酰基)-4-(丙烷-2-基)-1,3-
Figure BDA0003202958710001082
唑烷-2-酮(27.0g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：0.723(3H,d,J＝6.8Hz),0.80(3H,d,J＝6.8Hz),1.49(s,6H),2.13-2.18(m,1H),3.36(s,3H),3.99-4.09(m,2H),4.20-4.23(m,1H),7.16-7.20(m,1H),7.28-7.32(m,2H),7.38-7.40(m,2H).
c)(4S)-3-[(2S)-2-叠氮-3-甲基-3-苯基丁酰基]-4-(丙烷-2-基)-1,3-
Figure BDA0003202958710001083
唑烷-2-酮的制造
将(4S)-3-(3-甲基-3-苯基丁酰基)-4-(丙烷-2-基)-1,3-
Figure BDA0003202958710001084
唑烷-2-酮(27.0g)的THF悬浮液(560mL)冷却至-78℃，加入六甲基二硅氮烷钾盐(1.06mol/L四氢呋喃溶液、99.5mL)，搅拌1.5小时。加入-78℃的2,4,6-三异丙基苯磺酰基叠氮化物(40g)的THF溶液(330mL)，10分钟后，加入乙酸(24.5mL)，升温至40℃，搅拌1小时。加入饱和盐水，用叔丁基甲基醚萃取。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和盐水清洗后，将有机层用无水硫酸镁干燥。将溶剂减压蒸馏除去，将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：氯仿)进行纯化，得到(4S)-3-[(2S)-2-叠氮-3-甲基-3-苯基丁酰基]-4-(丙烷-2-基)-1,3-
Figure BDA0003202958710001085
唑烷-2-酮(16.4g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：0.80(3H,d,J＝6.8Hz),0.84(3H,d,J＝7.2Hz),1.54(3H,s),1.56(3H,s),2.28-2.33(1H,m),3.54-3.59(1H,m),3.87-3.90(1H,m),3.95-3.98(1H,m),5.66(1H,s),7.23-7.420(5H,m).
d){(2S)-3-甲基-1-氧代-1-[(4S)-2-氧代-4-(丙烷-2-基)-1,3-
Figure BDA0003202958710001091
唑烷-3-基]-3-苯基丁烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯的制造
向(4S)-3-[(2S)-2-叠氮-3-甲基-3-苯基丁酰基]-4-(丙烷-2-基)-1,3-
Figure BDA0003202958710001092
唑烷-2-酮(16.4g)的乙酸乙酯溶液(1200mL)中加入二碳酸二叔丁酯(24.0g)和10％Pd-C(11.6g、含水率50％)，在氢气气氛下搅拌2小时。进行硅藻土过滤，用乙酸乙酯清洗。将溶剂减压蒸馏除去，将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：叔丁基甲基醚)进行纯化，得到{(2S)-3-甲基-1-氧代-1-[(4S)-2-氧代-4-(丙烷-2-基)-1,3-
Figure BDA0003202958710001093
唑烷-3-基]-3-苯基丁烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(16.1g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：0.77(3H,d,J＝6.8Hz),0.82(3H,d,J＝6.8Hz),1.42(3H,s),1.43(9H,s),1.48(3H,s),2.20-2.29(1H,m),3.45(1H,t,J＝8.8Hz),3.80-3.83(1H,m),3.89-3.92(1H,dd,J＝2.0Hz,J＝8.4Hz),5.16(1H,brs),6.13(1H,d,J＝9.6Hz),7.21-7.26(1H,m),7.29-7.33(2H,m).7.42(2H,d,J＝7.2Hz).
e)N-(叔丁氧基羰基)-β,β-二甲基-L-苯丙氨酸的制造
在0℃下向{(2S)-3-甲基-1-氧代-1-[(4S)-2-氧代-4-(丙烷-2-基)-1,3-
Figure BDA0003202958710001094
唑烷-3-基]-3-苯基丁烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(16.1g)的THF(468mL)和水(117mL)溶液中加入30％过氧化氢水溶液(32.5mL)和氢氧化锂水溶液(1mol/L,119mL)，升温至25℃，搅拌3小时。在0℃下加入硫酸氢钠水溶液(1.5mol/L,470mL)，升温至25℃，搅拌1小时。用柠檬酸水溶液(1mol/L)使pH为3，用叔丁基甲基醚萃取。将有机层用饱和盐水清洗，将有机层用无水硫酸镁干燥。将溶剂减压蒸馏除去，得到N-(叔丁氧基羰基)-β,β-二甲基-L-苯丙氨酸(14.2g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.38(9H,s),1.44(3H,s),1.46(3H,s),4.56(1H,brd,J＝11.6Hz),4.94(1H,brd,J＝14.4Hz),7.21-7.38(5H,m).
f)N-(叔丁氧基羰基)-β,β-二甲基-L-苯丙氨酸甲酯的制造
向N-(叔丁氧基羰基)-β,β-二甲基-L-苯丙氨酸(14.2g)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(84mL)中加入碳酸钠(8.44g)和碘甲烷(9.91mL)，在25℃下搅拌15小时。冷却至0℃后，加入冷水，用叔丁基甲基醚萃取，将得到的有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸镁干燥。将溶剂减压蒸馏除去，将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；己烷：叔丁基甲基醚)进行纯化，得到N-(叔丁氧基羰基)-β,β-二甲基-L-苯丙氨酸甲酯(11.1g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.36(9H,s),1.37(3H,s),1.41(3H,s),3.48(3H,brs),4.49(1H,brd,J＝9.8Hz),4.98(1H,brd,J＝9.1Hz),7.18-7.22(1H,m),7.27-7.33(4H,m).
g)N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酸甲酯的制造
通过与参考例1-k)同样的方法，由N-(叔丁氧基羰基)-β,β-二甲基-L-苯丙氨酸甲酯(307mg)得到N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酸甲酯(245mg)。
LC-MS：344(M+Na)+(1.589分钟，测定条件C)
h)N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酸的制造
通过与参考例1-l)同样的方法，由N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酸甲酯(235mg)得到N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酸(195mg)。
LC-MS：330(M+Na)+(1.420分钟，测定条件C)
i)N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酰基-N-[(3S,4E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺)的制造
通过与参考例1-m)同样的方法，由N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酸(195mg)得到N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酰基-N-[(3S,4E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(307mg)。
LC-MS：624(M+Na)+(1.797分钟，测定条件C)
j)N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酰基-N-[(3S,4E)-5-羧基-2-甲基己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺的制造
通过与参考例1-n)同样的方法，由N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酰基-N-[(3S,4E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(307mg)得到N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酰基-N-[(3S,4E)-5-羧基-2-甲基己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(286mg)。
LC-MS：596(M+Na)+,572(M-H)-(1.596分钟，测定条件C)
k)N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酰基-N-{(3S,4E)-6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基}-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(参考例2)的制造
通过与参考例1-o)同样的方法，由N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β-三甲基-L-苯丙氨酰基-N-[(3S,4E)-5-羧基-2-甲基己-4-烯-3-基]-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(286mg)得到参考例2(227mg)。
LC-MS：693(M+Na)+(1.658分钟，测定条件C)
参考例3
(6S,9S,12S,13E,17R,22R)-9-叔丁基-28-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15,20,25-六氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16,21,26-六氮杂二十八碳-13-烯-17,22-羧酸二叔丁酯
Figure BDA0003202958710001121
a)(6S,9S,12S,13E,17R)-9-叔丁基-17-{3-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-3-氧代丙基}-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂十八碳-13-烯-18-羧酸叔丁酯的制造
通过与参考例1-o)同样的方法，由(6S,9S,12S,13E,17R)-17-(叔丁氧基羰基)-9-叔丁基-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂二十碳-13-烯-20-羧酸(90.2mg)得到(6S,9S,12S,13E,17R)-9-叔丁基-17-{3-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-3-氧代丙基}-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂十八碳-13-烯-18-羧酸叔丁酯(51.8mg)。
LC-MS：931(M+Na)+(1.662分钟，测定条件D)
b)(6S,9S,12S,13E,17R,22R)-17,22-双(叔丁氧基羰基)-9-叔丁基-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15,20-五氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16,21-五氮杂二十五碳-13-烯-25-羧酸的制造
通过与参考例1-p)同样的方法，由(6S,9S,12S,13E,17R)-9-叔丁基-17-{3-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-3-氧代丙基}-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂十八碳-13-烯-18-羧酸叔丁酯(51.8mg)得到(6S,9S,12S,13E,17R,22R)-17,22-双(叔丁氧基羰基)-9-叔丁基-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15,20-五氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16,21-五氮杂二十五碳-13-烯-25-羧酸(40mg)。
LC-MS：1019(M+Na)+(1.422分钟，测定条件D)
c)(6S,9S,12S,13E,17R,22R)-9-叔丁基-28-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15,20,25-六氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16,21,26-六氮杂二十八碳-13-烯-17,22-羧酸二叔丁酯(参考例3)的制造
通过与参考例1-q)同样的方法，由(6S,9S,12S,13E,17R,22R)-17,22-双(叔丁氧基羰基)-9-叔丁基-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15,20-五氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16,21-五氮杂二十五碳-13-烯-25-羧酸(40mg)得到参考例3(14mg)。
LC-MS：1141(M+Na)+(1.618分钟，测定条件D)
参考例4
N-{(2E,4S)-2,5-二甲基-4-[甲基(N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-3-甲基-L-缬氨酰基)氨基]己-2-烯酰基}-D-γ-谷氨酰基-L-赖氨酸
Figure BDA0003202958710001141
a)(6S,9S,12S,13E,17R)-9-叔丁基-17-(乙氧基羰基)-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂二十碳-13-烯-20-羧酸的制造
将N-(叔丁氧基羰基)-N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-N-{(3S,4E)-6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基}-N,3-二甲基-L-缬氨酰胺(160mg)、D-谷氨酸α-乙酯·三氟乙酸盐(122mg)、N,N-二异丙基乙胺(100mg)和N,N-二甲基甲酰胺(2.2mL)的混合液在25℃下搅拌6小时。反应结束后，用1mol/L草酸水溶液使pH为4，用氯仿萃取。将有机层用水和饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到(6S,9S,12S,13E,17R)-9-叔丁基-17-(乙氧基羰基)-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂二十碳-13-烯-20-羧酸(155mg)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：8.26和7.97(1H,2d,J＝7.9Hz),7.32-7.05(4H,m),6.71(1H,t,J＝6.7Hz),6.45(1H,d,J＝8.6Hz),6.31-6.26(1H,m),5.95和5.63(1H,2s),4.94-4.82(1H,m),4.64-4.59(1H,m),4.51和4.41(1H,2d,J＝9.1Hz),4.21(2H,q,J＝7.3Hz),3.75和3.74(3H,2s),3.00(3H,s),2.97和2.95(3H,2s),2.52-2.38(2H,m),2.29-2.20(1H,m),2.10-2.00(1H,m),1.98-1.90(1H,m),1.90(3H,s),1.57-1.45(14H,m),1.28(3H,t,J＝7.3Hz),0.88(3H,d,J＝6.1Hz),0.82(3H,d,J＝6.7Hz),0.53和0.46(9H,2s).
LC-MS 784(M+H)+,782(M-H)-(1.472分钟，测定条件A)
b)(6S,9S,12S,13E,17R,22S)-9-叔丁基-2,2,5,11,14,30,30-七甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15,20,28-六氧代-12-(丙烷-2-基)-3,29-二氧杂-5,8,11,16,21,27-六氮杂三十一碳-13-烯-17,22-二羧酸17-乙酯22-甲酯的制造
通过与参考例1-m)同样的方法，由(6S,9S,12S,13E,17R)-9-叔丁基-17-(乙氧基羰基)-2,2,5,11,14-五甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15-四氧代-12-(丙烷-2-基)-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂二十碳-13-烯-20-羧酸(20mg)得到(6S,9S,12S,13E,17R,22S)-9-叔丁基-2,2,5,11,14,30,30-七甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15,20,28-六氧代-12-(丙烷-2-基)-3,29-二氧杂-5,8,11,16,21,27-六氮杂三十一碳-13-烯-17,22-二羧酸17-乙酯22-甲酯(13mg)。
LC-MS：1026(M+H)+(1.597分钟，测定条件D)
c)(3S,6S,9S,10E,14R,19S)-23-氨基-6-叔丁基-8,11-二甲基-3-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,12,17-四氧代-9-(丙烷-2-基)-2,5,8,13,18-五氮杂二十三碳-10-烯-14,19-二羧酸14-乙酯19-甲酯的制造
向(6S,9S,12S,13E,17R,22S)-9-叔丁基-2,2,5,11,14,30,30-七甲基-6-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,10,15,20,28-六氧代-12-(丙烷-2-基)-3,29-二氧杂-5,8,11,16,21,27-六氮杂三十一碳-13-烯-17,22-二羧酸17-乙酯22-甲酯(13mg)的氯仿溶液(1.0mL)中加入三氟乙酸(0.2mL)，在25℃下搅拌1小时。反应结束后，将反应液利用硅胶柱色谱(洗脱溶剂；甲醇：氯仿)进行纯化，由此得到(3S,6S,9S,10E,14R,19S)-23-氨基-6-叔丁基-8,11-二甲基-3-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,12,17-四氧代-9-(丙烷-2-基)-2,5,8,13,18-五氮杂二十三碳-10-烯-14,19-二羧酸14-乙酯19-甲酯(10mg)。
LC-MS：826(M+H)+,824(M-H)-(0.978分钟，测定条件D)
d)N-{(2E,4S)-2,5-二甲基-4-[甲基(N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-3-甲基-L-缬氨酰基)氨基]己-2-烯酰基}-D-γ-谷氨酰基-L-赖氨酸(参考例4)的制造
通过与参考例1-n)同样的方法进行制造，利用反相柱色谱(洗脱溶剂；0.1％TFA乙腈：水)进行纯化，由此，由(3S,6S,9S,10E,14R,19S)-23-氨基-6-叔丁基-8,11-二甲基-3-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,12,17-四氧代-9-(丙烷-2-基)-2,5,8,13,18-五氮杂二十三碳-10-烯-14,19-二羧酸14-乙酯19-甲酯(10mg)得到参考例4(7.2mg)。
LC-MS：784(M+H)+,782(M-H)-(0.889分钟，测定条件D)
参考例5
N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酸叔丁酯
Figure BDA0003202958710001171
a)N2-(叔丁氧基羰基)-N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酸叔丁酯的制造
将BOC-D-谷氨酸α-叔丁酯(2.061g)、1-(2-氨基-乙基)-吡咯-2,5-二酮盐酸盐(1.20g)、2-(1H-苯并[d][1,2,3]***-1-基)-1,1,3,3-四甲基异脲
Figure BDA0003202958710001172
六氟磷酸盐(V)(3.87g)、N,N-二异丙基乙胺(3.47mL)和N,N-二甲基甲酰胺(10mL)的混合液在室温下搅拌1小时。反应结束后，加入乙酸乙酯，将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到N2-(叔丁氧基羰基)-N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酸叔丁酯(2.8g)。
LC-MS：426(M+H)+(1.030分钟，测定条件F)
b)N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酸叔丁酯(参考例5)的制造
将N2-(叔丁氧基羰基)-N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酸叔丁酯(51.8mg)、TFA(1mL)的混合液在室温下搅拌1小时20分钟。将反应液冰冷后，减压浓缩，得到参考例5(56.3mg)。将得到的化合物不进行纯化而用于下一反应。
LC-MS：326(M+H)+(0.496分钟，测定条件F)
参考例6
N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酰胺
Figure BDA0003202958710001181
将N2-(叔丁氧基羰基)-N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酸叔丁酯(64.8mg)、TFA(1mL)的混合液在室温下搅拌17小时。反应结束后，减压浓缩，得到参考例6。将得到的化合物不进行纯化而用于下一反应。
LC-MS：270(M+H)+(0.254分钟，测定条件F)
参考例7
N5-[2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基]-D-谷氨酰基-D-谷氨酸
Figure BDA0003202958710001191
a)((R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯的制造
将N-α-(叔丁氧基羰基)-D-谷氨酸γ-甲酯(261mg)、D-谷氨酸二叔丁酯盐酸盐(295mg)、O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲
Figure BDA0003202958710001192
六氟磷酸盐(456mg)、N,N-二异丙基乙胺(0.446mL)和N,N-二甲基甲酰胺(4mL)的混合物在室温下搅拌2小时。反应结束后，加入水，用乙酸乙酯萃取。将有机层用水和饱和碳酸氢钠水溶液清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到(二叔丁基((R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酰基)-D-谷氨酸酯(502mg)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)：1.42(18H,s),1.44(9H,s),1.84-1.94(2H,m),2.12(2H,dtt,J＝22.5,8.4,3.0Hz),2.26(2H,dtd,J＝25.2,10.0,4.5Hz),2.43(2H,tdd,J＝24.8,14.2,7.5Hz),3.67(3H,s),4.14(1H,t,J＝6.1Hz),4.43(1H,td,J＝7.9,4.9Hz),5.23(1H,d,J＝7.3Hz),6.81(1H,d,J＝7.3Hz).
b)(R)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-(((R)-1,5-二叔丁氧基-1,5-二氧代戊烷-2-基)氨基)-5-氧代戊酸的制造
将((R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯(502mg)、1mol/L氢氧化锂水溶液(0.999mL)和甲醇(5mL)混合物在室温下搅拌16小时。反应结束后，加入1mol/L柠檬酸水溶液，使其为酸性(pH4)，将甲醇减压蒸馏除去，然后用氯仿萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到(R)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-(((R)-1,5-二叔丁氧基-1,5-二氧代戊烷-2-基)氨基)-5-氧代戊酸(393mg)。
LC-MS：489(M+H)+(1.417分钟，测定条件G)
c)N2-(叔丁氧基羰基)-N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酰基-D-谷氨酸二叔丁酯的制造
将(R)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-(((R)-1,5-二叔丁氧基-1,5-二氧代戊烷-2-基)氨基)-5-氧代戊酸(205mg)、1-(2-氨基-乙基)-吡咯-2,5-二酮盐酸盐(89mg)、2-(1H-苯并[d][1,2,3]***-1-基)-1,1,3,3-四甲基异脲
Figure BDA0003202958710001201
六氟磷酸盐(V)(191mg)、N,N-二异丙基乙胺(0.187mL)和N,N-二甲基甲酰胺(3mL)的混合液在室温下搅拌16小时。反应结束后，加入水，用氯仿萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到N2-(叔丁氧基羰基)-N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酰基-D-谷氨酸二叔丁酯(13mg)。
LC-MS：611(M+H)+(1.638分钟，测定条件G)
d)N5-[2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基]-D-谷氨酰基-D-谷氨酸(参考例7)的制造
使N2-(叔丁氧基羰基)-N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酰基-D-谷氨酸二叔丁酯(13mg)与实施例M1同样地进行反应和处理，由此合成参考例7。合成的参考例7不进行纯化，而直接用于下一反应。
参考例8～18
依据文献(Bioorg Med Chem Lett.2004 Nov 1；14(21):5317-22.、J MedChem.2004 Sep 9；47(19):4774-86.、国际公开第2003/082268号和国际公开第2016/123582号)中记载的方法，得到下表1所示的化合物。
[表1]
Figure BDA0003202958710001221
Figure BDA0003202958710001231
参考例19
N,β,β,3-四甲基-L-苯丙氨酰基-N-[(3S,4E)-5-羧基-2-甲基己-4-烯-3-基]-N, 3-二甲基-L-缬氨酰胺
Figure BDA0003202958710001232
将(S,E)-4-((S)-2-((S)-3-(3-溴苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸(62.5mg)、四(三苯基膦)钯(0)(13.07mg)、二甲基锌(0.113mL)和四氢呋喃(5mL)的混合液在60℃下搅拌2.5小时。反应结束后，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到参考例19(29.7mg)。
LC-MS：488(M+H)+(0.68分钟，测定条件F)
参考例20
(S,E)-4-((S)-2-((S)-3-(3-氰基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸
Figure BDA0003202958710001241
将(S,E)-4-((S)-2-((S)-3-(3-溴苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸(76.1mg)、四(三苯基膦)钯(0)(15.92mg)、锌(18.01mg)、氰化锌(32.3mg)和N,N-二甲基甲酰胺(1mL)的混合液在120℃下在微波照射下搅拌1小时。反应结束后，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行粗纯化后，利用反相HPLC(流动相为0.1％TFA水/0.035％TFA乙腈溶剂)得到参考例20(53.5mg)。
LC-MS：499(M+H)+(0.99分钟，测定条件F)
参考例21
(S,E)-4-((S)-2-((S)-3-([1,1’-联苯]-3-基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸
Figure BDA0003202958710001242
将(S,E)-4-((S)-2-((S)-3-(3-溴苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸(64.3mg)、四(三苯基膦)钯(0)(13.45mg)、苯基硼酸(28.4mg)、碳酸钠(24.67mg)和四氢呋喃(5mL)的混合液在80℃下搅拌3.5小时。将溶剂减压蒸馏除去。利用反相HPLC(流动相为0.1％TFA水/0.035％TFA乙腈溶剂)得到参考例21(10.7mg)。
LC-MS：550(M+H)+(0.88分钟，测定条件F)
参考例22
4-(4-(((S)-1-(((S,E)-5-羧基-2-甲基己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧杂丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸
Figure BDA0003202958710001251
a)4-(4-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧杂丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧杂丁烷-2-基)苯甲酸的制造
将(9S,12S,E)-6-(2-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)丙烷-2-基)-9-(叔丁基)-12-异丙基-2,2,5,11,14-五甲基-4,7,10-三氧代-3-氧杂-5,8,11-三氮杂十五碳-13-烯-15-酸乙酯(400mg)、TFA(2mL)和氯仿(8mL)的混合液在室温下搅拌4小时。将溶剂减压蒸馏除去，得到4-(4-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧杂丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧杂丁烷-2-基)苯甲酸(376mg)。将得到的化合物不进行纯化而用于下一反应。
LC-MS：546(M+H)+(1.15分钟，测定条件F)
b)4-(4-(((S)-1-(((S,E)-5-羧基-2-甲基己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧杂丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸(参考例22)的制造
将4-(4-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧杂丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧杂丁烷-2-基)苯甲酸(55.2mg)、甲醇(3mL)和水(1mL)的混合液在冰冷下搅拌，同时加入氢氧化锂(16.98mg)。在室温下搅拌2天。将溶剂减压蒸馏除去。将残渣进行反相HPLC(流动相为0.1％TFA水/0.035％TFA乙腈溶剂)，由此得到参考例22(21.1mg)。
LC-MS：518(M+H)+(1.18分钟，测定条件F)
参考例23
(4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸
Figure BDA0003202958710001261
与参考例1的步骤n)同样地操作，由4-(4-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸叔丁酯得到参考例23。
LC-MS：574(M+H)+(1.29分钟，测定条件G)
参考例24
(S,E)-4-((S)-2-((S)-3-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-3-甲基-2-(甲氧基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸
Figure BDA0003202958710001271
a)4-((S)-4-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸叔丁酯的制造
向4-(4-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸(104.0mg)和甲苯(1mL)的混合液中加入N,N-二甲基氟酰胺二叔丁基乙酸酯(0.456mL)，加热回流14小时后，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱进行纯化，由此得到4-((S)-4-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸叔丁酯(21.0mg)。
LC-MS：602(M+H)+(1.47分钟，测定条件F)
b)(S,E)-4-((S)-2-((S)-3-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-3-甲基-2-(甲氧基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸(参考例24)的制造
向4-((S)-4-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸叔丁酯(10.5mg)、甲醇(3mL)和水(1.000mL)的混合液中加入氢氧化锂(4.39mg)，在室温下搅拌2天。将溶剂减压蒸馏除去，将残渣利用反相HPLC(流动相为0.1％TFA水/0.035％TFA乙腈溶剂)进行纯化，得到参考例24(7.0mg)。
LC-MS：574(M+H)+(1.49分钟，测定条件F)
参考例25
4-((S)-4-(((S)-1-(((S,E)-5-羧基-2-甲基己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸
Figure BDA0003202958710001281
向4-((S)-4-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸叔丁酯(10.5mg)、甲醇(3mL)和水(1mL)的混合液中加入氢氧化锂(4.39mg)，在室温下搅拌5天后，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣溶解于氯仿(4mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，在室温下搅拌17小时后，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用反相HPLC(流动相为0.1％TFA水/0.035％TFA乙腈溶剂)进行纯化，得到参考例25(7.40mg)。
LC-MS：518(M+H)+(1.08分钟，测定条件F)
参考例26
(4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁基)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸
Figure BDA0003202958710001291
a)3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酸的制造
在氮气气氛下将3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-氧代丁酸(54.9g)的无水四氢呋喃(480mL)溶液冰冷，滴加甲胺(280mL)(2mol/L四氢呋喃溶液)。在室温下搅拌1小时后，滴加硼烷-吡啶络合物(27.5mL)，在55℃下搅拌2.5小时。在冰冷下滴加甲醇(240mL)后，在室温下搅拌2小时。将溶剂减压蒸馏除去后，加入四氢呋喃，对悬浮液进行抽滤。将粉末用四氢呋喃清洗，得到3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酸(40.7g)。
1H-NMR(400MHz,D2O)：1.21(3H,s),1.24(3H,s),2.04(3H,s),3.06(1H,s),6.52(2H,d,J＝8.8Hz),7.11(2H,d,J＝8.8).
b)2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(4-((叔丁氧基羰基)氧基)苯基)-3-甲基丁酸的制造
在氮气气氛下向3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酸(10.2g)的1,4-二氧杂环己烷/水(1：1)(160mL)的悬浮液中加入碳酸二叔丁酯(39.9g)和碳酸钾(25.4g)，在40℃下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯和水，用1mol/L硫酸氢钾水溶液使pH为2～3后，用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸镁干燥后，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(4-((叔丁氧基羰基)氧基)苯基)-3-甲基丁酸(15.7g)。
1H-NMR(400MHz,DMSO-D6)：1.38(12H,s),1.48(12H,s),2.64(3H,s),7.09(2H,d,J＝8.4Hz),7.40(2H,d,J＝8.8).
c)(S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(4-羟基苯基)-3-甲基丁酸的制造
在氮气气氛下将2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(4-((叔丁氧基羰基)氧基)苯基)-3-甲基丁酸(15.7g)溶解于二氯甲烷(370mL)中，28％甲醇钠甲醇溶液(15.8g)和甲醇(14mL)，在室温下搅拌1.5小时。向反应液中加入乙酸乙酯和4％硫酸氢钾水溶液，萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸镁干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到(S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(4-羟基苯基)-3-甲基丁酸(153.7mg)。
1H-NMR(400MHz,DMSO-D6)：1.36(12H,s),1.42(3H,s),2.60(3H,s),6.66(2H,d,J＝8.0Hz),7.15(2H,d,J＝8.4).
d)(9S,12S,E)-9-(叔丁基)-6-(2-(4-羟基苯基)丙烷-2-基)-12-异丙基-2,2,5,11,14-五甲基-4,7,10-三氧代-3-氧杂-5,8,11-三氮杂十五碳-13-烯-15-酸乙酯的制造
将(S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(4-羟基苯基)-3-甲基丁酸(153.7mg)、(S,E)-4-((S)-2-氨基-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸乙酯盐酸盐(117.6mg)、N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0.172mL)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(129mg)、1-羟基苯并***(103mg)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)的悬浮液在室温下搅拌17小时。将溶剂减压蒸馏除去后，加入氯仿，将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到(9S,12S,E)-9-(叔丁基)-6-(2-(4-羟基苯基)丙烷-2-基)-12-异丙基-2,2,5,11,14-五甲基-4,7,10-三氧代-3-氧杂-5,8,11-三氮杂十五碳-13-烯-15-酸乙酯(206.3mg)。
LC-MS：618(M+H)+(1.69分钟，测定条件F)
e)(4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸乙酯的制造
向(9S,12S,E)-9-(叔丁基)-6-(2-(4-羟基苯基)丙烷-2-基)-12-异丙基-2,2,5,11,14-五甲基-4,7,10-三氧代-3-氧杂-5,8,11-三氮杂十五碳-13-烯-15-酸乙酯(189.2mg)和氯仿(4mL)混合液加入TFA(1mL)，在室温下搅拌1小时后，将溶剂减压蒸馏除去。向残渣中加入氯仿，将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到(4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸乙酯(110.1mg)。
LC-MS：518(M+H)+(1.09分钟，测定条件F)
f)(4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁基)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸(参考例26)的制造
在冰冷下向(4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸乙酯(110.1mg)、甲醇(3mL)和水(1mL)的混合液中加入氢氧化锂(35.7mg)，在室温下搅拌2天。将溶剂减压蒸馏除去，将残渣利用反相HPLC(流动相为0.1％TFA水/0.035％TFA乙腈溶剂)进行纯化，由此得到参考例26(113.2mg)。
LC-MS：490(M+H)+(1.03分钟，测定条件F)
参考例27
((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸
Figure BDA0003202958710001321
a)((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二甲酯的制造
将(4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸三氟乙酸盐(21.4mg)、N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(22.91mg)、D-谷氨酸二甲酯盐酸盐(15.01mg)、3-(((乙基亚氨基)亚甲基)氨基)-N,N-二甲基丙烷-1-胺盐酸盐(13.59mg)、1-羟基苯并***(9.58mgl)和N,N-二甲基甲酰胺(1mL)的混合物在室温下搅拌15小时。向反应液中加入乙酸乙酯，用饱和盐水清洗后，将有机层用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；氯仿/甲醇)进行纯化，由此得到((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二甲酯(21.6mg)。
LC-MS：647(M+H)+(1.21分钟，测定条件F)
b)((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸(参考例27)的制造
在室温下向((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-羟基苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二甲酯(21.6mg)、甲醇(3mL)和水(1mL)的混合液中加入氢氧化锂(5.61mg)，搅拌。将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用高效液相色谱进行纯化，得到参考例27(15.8mg)。
LC-MS：619(M+H)+(1.04分钟，测定条件F)
参考例28
N6-(叔丁氧基羰基)-N2-((R)-4-((S,E)-4-((S)-2-((S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(5-氟-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-3-甲基丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰胺)-4-羧基丁酰基)赖氨酸
Figure BDA0003202958710001331
a)N6-(叔丁氧基羰基)-N2-((R)-4-((S,E)-4-((S)-2-((S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(5-氟-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-3-甲基丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰胺)-5-乙氧基-5-氧代戊酰基)赖氨酸甲酯的制造
在冰冷下向(6S,9S,12S,17R,E)-9-(叔丁基)-17-(乙氧基羰基)-6-(2-(5-氟-1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)-12-异丙基-2,2,5,11,14-五甲基-4,7,10,15-四氧代-3-氧杂-5,8,11,16-四氮杂二十碳-13-烯-20-酸(54.5mg)和N,N-二甲基甲酰胺(2mL)的混合液中加入1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-***[4,5-b]吡啶
Figure BDA0003202958710001332
3-氧化物六氟磷酸盐(31.0mg)，搅拌30分钟。加入N-(叔丁氧基羰基)-L-赖氨酸甲酯盐酸盐(24.20mg)和N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0.028mL)，在室温下搅拌17小时后，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到N6-(叔丁氧基羰基)-N2-((R)-4-((S,E)-4-((S)-2-((S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(5-氟-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-3-甲基丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰胺)-5-乙氧基-5-氧代戊酰基)赖氨酸甲酯(71mg)。
LC-MS：1067(M+Na)+(1.557分钟，测定条件G)
b)N6-(叔丁氧基羰基)-N2-((R)-4-((S,E)-4-((S)-2-((S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(5-氟-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-3-甲基丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰胺)-4-羧基丁酰基)赖氨酸(参考例28)的制造
将N6-(叔丁氧基羰基)-N2-((R)-4-((S,E)-4-((S)-2-((S)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(5-氟-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-3-甲基丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰胺)-5-乙氧基-5-氧代戊酰基)赖氨酸甲酯(71mg)、甲醇(4mL)和1mol/L氢氧化锂水溶液(4mL)的混合液在60℃下搅拌17小时。向反应液中加入饱和柠檬酸水溶液，使其为酸性后，用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水硫酸镁干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用ODS柱色谱(洗脱溶剂；水：乙腈)进行纯化，由此得到参考例28(49.0mg)。
LC-MS：1024(M+Na)+(1.416分钟，测定条件G)
参考例29
((S,E)-4-((S)-2-((R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧基酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯
Figure BDA0003202958710001351
a)(R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸的制造
将D-哌可酸(3.10g)、二碳酸二叔丁酯(7.86g)、5mol/L氢氧化钠水溶液(19.20mL)、四氢呋喃(10mL)和水(10mL)的混合液在室温下搅拌8小时后，将溶剂减压蒸馏除去。用***对水相进行清洗后，用0.1mol/L盐酸水使水相为中性(pH7)，用***萃取。用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去，得到(R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸(4.16g)。
LC-MS：228(M-H)-(1.51分钟，测定条件F)
b)(R)-2-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制造
将(R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸(432.3mg)、(S,E)-4-((S)-2-氨基-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸乙酯(393mg)、o-(苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲
Figure BDA0003202958710001352
六氟磷酸盐(953mg)、N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0.659mL)和N,N-二甲基甲酰胺(3mL)的悬浮液在室温下搅拌15小时后，用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥。将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到(R)-2-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(658mg)。
LC-MS：546(M+Na)+(1.51分钟，测定条件F)
c)(((S,E)-4-((S)-2-((R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧基酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸的制造
将(R)-2-(((S)-1-(((S,E)-6-乙氧基-2,5-二甲基-6-氧代己-4-烯-3-基)(甲基)氨基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(508.1mg)、甲醇(8mL)、水(2mL)和氢氧化锂(204mg)的混合液在室温下搅拌4天后，用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去，得到(((S,E)-4-((S)-2-((R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧基酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸。所得到的化合物不进行纯化而直接用于下一反应。
LC-MS：518(M+Na)+(1.19分钟，测定条件F)
d)((S,E)-4-((S)-2-((R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧基酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯(参考例29)的制造
将(S,E)-4-((S)-2-((R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧基酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸(481mg)、N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0.501mL)、3-(((乙基氨基)亚甲基)氨基)-N,N-二甲基丙烷-1-胺盐酸盐(372mg)、1H-苯并[d][1,2,3]***-1-醇(262mg)、D-谷氨酸二叔丁酯盐酸盐(287mg)和N,N-二甲基甲酰胺(10mL)的混合液在室温下搅拌20小时后，用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到参考例29(673.0mg)。
LC-MS：759(M+Na)+(1.35分钟，测定条件H)
参考例30～52
使用参考例1的A15中间体、参考例2和参考例53作为原料化合物，与参考例1的步骤p)同样地进行反应和处理，得到下表2所示的化合物。
[表2]
Figure BDA0003202958710001371
Figure BDA0003202958710001381
Figure BDA0003202958710001391
Figure BDA0003202958710001401
Figure BDA0003202958710001411
参考例53
使用对应的原料化合物，与参考例1同样地进行反应和处理，得到下表3所示的化合物。
[表3]
Figure BDA0003202958710001412
参考例54～73
使用对应的原料化合物，与参考例3的步骤c)同样地进行反应和处理，得到下表4所示的化合物。
[表4]
Figure BDA0003202958710001421
Figure BDA0003202958710001431
Figure BDA0003202958710001441
Figure BDA0003202958710001451
参考例74～78
使用对应的原料化合物，与参考例M1同样地进行反应和处理，得到下表5所示的化合物。
[表5]
Figure BDA0003202958710001452
参考例79～88
使用对应的原料化合物和参考例5，与参考例1的步骤m)同样地进行反应和处理，得到下表6所示的化合物。
[表6]
Figure BDA0003202958710001461
Figure BDA0003202958710001471
参考例89～95
使用对应的原料化合物，与参考例1的步骤o)同样地进行反应和处理，得到下表7所示的化合物。
[表7]
Figure BDA0003202958710001481
参考例96
使用对应的原料化合物，与实施例M1同样地进行反应和处理，得到下述表8所示的化合物。
[表8]
Figure BDA0003202958710001491
参考例97
(R)-4-((R)-4-((R)-4-氨基-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰胺)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰胺)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酸
Figure BDA0003202958710001492
a)(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-D-谷氨酸1-(叔丁基)酯5-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)酯的制造
通过与参考例3-a)同样的方法，由(R)-4-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酸(500mg)得到(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-D-谷氨酸1-(叔丁基)酯5-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)酯(520mg)。
LC-MS：523(M+H)+(1.324分钟，测定条件G)
b)(R)-4-((R)-4-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰胺)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酸的制造
通过与参考例3-b)同样的方法，由(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-D-谷氨酸1-(叔丁基)酯5-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)酯(520mg)得到(R)-4-((R)-4-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰胺)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酸(428.7mg)。
LC-MS：611(M+H)+(1.551分钟，测定条件G)
c)((R)-4-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰基)-D-谷氨酸1-(叔丁基)酯5-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)酯的制造
通过与参考例3-a)同样的方法，由(R)-4-((R)-4-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰胺)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酸(100mg)得到((R)-4-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰基)-D-谷氨酸1-(叔丁基)酯5-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)酯(33mg)。
LC-MS：708(M+H)+(1.598分钟，测定条件G)
d)(5R,10R,15R)-5,10,15-三(叔丁氧基羰基)-1-(9H-芴-9-基)-3,8,13-三氧代-2-氧杂-4,9,14-三氮杂十八烷-18-酸的制造
通过与参考例3-b)同样的方法，由((R)-4-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰基)-D-谷氨酸1-(叔丁基)酯5-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)酯(33mg)得到(5R,10R,15R)-5,10,15-三(叔丁氧基羰基)-1-(9H-芴-9-基)-3,8,13-三氧代-2-氧杂-4,9,14-三氮杂十八烷-18-酸(16.6mg)。
LC-MS：796(M+H)+(1.119分钟，测定条件F)
e)(R)-4-((R)-4-((R)-4-氨基-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰胺)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰胺)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酸(参考例97)的制造
将(5R,10R,15R)-5,10,15-三(叔丁氧基羰基)-1-(9H-芴-9-基)-3,8,13-三氧代-2-氧杂-4,9,14-三氮杂十八烷-18-酸(16.6mg)的哌啶(0.3mL)和N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)的混合液在25℃下搅拌7小时后，将反应溶液利用反相柱色谱(洗脱溶剂；0.1％TFA乙腈：水)进行纯化，由此得到参考例97(7.5mg)。
LC-MS：574(M+H)+(0.698分钟，测定条件F)
参考例98
使用对应的原料化合物，与参考例2同样地进行反应和处理，得到下述表9所示的化合物。
[表9]
Figure BDA0003202958710001511
参考例99
使用参考例98和参考例5，与参考例1的步骤m)同样地进行反应和处理，得到下表10所示的化合物。
[表10]
Figure BDA0003202958710001512
参考例100
((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-((2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)氨基甲酰基)苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯
Figure BDA0003202958710001521
a)4-(4-(苄基氧基)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-甲基-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸叔丁酯的制造
向2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-3-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-3-甲基丁酸(1.48g)、碳酸钠(0.77g)和N,N-二甲基甲酰胺(7mL)的悬浮液中加入溴化苄(0.647mL)，在室温下搅拌17小时。向反应液中加入乙酸乙酯。将有机层用水和饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到4-(4-(苄基氧基)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-甲基-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸叔丁酯(1.78g)。
LC-MS：520(M+Na)+(1.778分钟，测定条件G)
b)4-(4-(苄基氧基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸三氟乙酸盐的制造
向4-(4-(苄基氧基)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-甲基-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸叔丁酯(1.78g)和氯仿(40mL)的混合液中加入三氟乙酸(10mL)，在室温下搅拌5小时。将溶剂减压蒸馏除去，得到4-(4-(苄基氧基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸三氟乙酸盐。所得到的化合物不进行纯化而用于下一反应。
LC-MS：342(M+H)+(1.05分钟，测定条件F)
c)4-(4-(苄基氧基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸甲酯的制造
向4-(4-(苄基氧基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸三氟乙酸盐、碳酸钠(379mg)和N,N-二甲基甲酰胺(9mL)的悬浮液中加入碘甲烷(0.169mL)，在室温下搅拌。向反应液中加入乙酸乙酯。将有机层用水和饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到4-(4-(苄基氧基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸甲酯(362.3mg)。
LC-MS：356(M+H)+(1.08分钟，测定条件F)
d)3-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酸的制造
将4-(4-(苄基氧基)-2-甲基-3-(甲基氨基)-4-氧代丁烷-2-基)苯甲酸甲酯(362.3mg)、钯-碳(85.5mg)和乙酸乙酯(10mL)的悬浮液在氢气气氛下在室温下搅拌10小时。将反应液利用滤纸进行过滤后，将溶剂减压蒸馏除去，得到3-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酸。所得到的化合物不进行纯化而用于参考例100-g)的反应。
LC-MS：266(M+H)+(0.82分钟，测定条件F)
e)((S,E)-4-((S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯的制造
将(S,E)-4-((S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酸(220.2mg)、D-谷氨酸二叔丁酯盐酸盐(254mg)、N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0.300mL)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(220mg)、1-羟基苯并***(175mg)和N,N-二甲基甲酰胺的混合液在室温下搅拌17小时。向反应液中加入乙酸乙酯。将有机层用水和饱和盐水清洗后，用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。((S,E)-4-((S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯(232.4mg)。
LC-MS：626(M+H)+(1.76分钟，测定条件F)
f)((S,E)-4-((S)-2-氨基-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯的制造
在冰冷下向((S,E)-4-((S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯(232.4mg)和乙酸乙酯(3.7mL)的混合液中加入盐酸(13.54mg)乙酸乙酯溶液，在室温下搅拌1时间20分钟。将反应液冰冷，加入28％氨水，用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去，得到((S,E)-4-((S)-2-氨基-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯(62.2mg)。所得到的化合物不进行纯化而用于下一反应。
LC-MS：526(M+H)+(1.14分钟，测定条件F)
g)((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯的制造
将3-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酸(31.4mg)、((S,E)-4-((S)-2-氨基-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯(62.2mg)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(45.4mg)、1-羟基苯并***(32.0mg)、N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0.062mL)和N,N-二甲基甲酰胺(2mL)的悬浮液在室温下搅拌17小时。将溶剂减压蒸馏除去。向残渣中加入乙酸乙酯，用水、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和盐水清洗后，将有机层用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；己烷：乙酸乙酯)进行纯化，由此得到((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯(60.1mg)。
LC-MS：774(M+H)+(1.341分钟，测定条件G)
h)4-((7R,12S,15S,E)-7-(叔丁氧基羰基)-15-(叔丁基)-12-异丙基-2,2,10,13,19-五甲基-18-(甲基氨基)-4,9,14,17-四氧代-3-氧杂-8,13,16-三氮杂二十碳-10-烯-19-基)苯甲酸的制造
在冰冷下向((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸叔丁酯(56.3mg)、甲醇(4mL)和水(1mL)的混合液中加入氢氧化锂(9.17mg)，在室温下搅拌17小时。将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用反相HPLC(流动相为0.1％TFA水/0.035％TFA乙腈溶剂)进行纯化，由此得到4-((7R,12S,15S,E)-7-(叔丁氧基羰基)-15-(叔丁基)-12-异丙基-2,2,10,13,19-五甲基-18-(甲基氨基)-4,9,14,17-四氧代-3-氧杂-8,13,16-三氮杂二十碳-10-烯-19-基)苯甲酸(14.8mg)。
LC-MS：759(M+H)+(1.334分钟，测定条件G)
i)((4S,E)-4-((2S)-2-(3-(4-((2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)氨基甲酰基)苯基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-D-谷氨酸二叔丁酯(参考例100)的制造
将4-((7R,12S,15S,E)-7-(叔丁氧基羰基)-15-(叔丁基)-12-异丙基-2,2,10,13,19-五甲基-18-(甲基氨基)-4,9,14,17-四氧代-3-氧杂-8,13,16-三氮杂二十碳-10-烯-19-基)苯甲酸(14.8mg)、3-(((乙基亚氨基)亚甲基)氨基)-N,N-二甲基丙烷-1-胺盐酸盐(7.48mg)、1-羟基苯并***(5.97mg)、N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0.014mL)、1-(2-氨基乙基)-吡咯-2,5-二酮盐酸盐(6.86mg)和N,N-二甲基甲酰胺(2mL)的混合液在室温下搅拌3小时。加入乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和盐水清洗后，将有机层用无水硫酸钠干燥，将溶剂减压蒸馏除去。将残渣利用硅胶色谱(洗脱溶剂；氯仿：甲醇)进行纯化，由此得到参考例100(9.00mg)。
LC-MS：881(M+H)+(1.287分钟，测定条件G)
参考例M1
(3S,6S,9S,10E,14R)-6-叔丁基-14-(3-{[2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基]氨基}-3-氧代丙基)-8,11-二甲基-3-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-4,7,12-三氧代-9-(丙烷-2-基)-2,5,8,13-四氮杂十五碳-10-烯-15-羧酸
Figure BDA0003202958710001561
向参考例1(14mg)的氯仿溶液(1.0mL)中加入三氟乙酸(0.2mL)，在25℃下搅拌4小时。然后，追加三氟乙酸(0.2mL)，进一步在25℃下搅拌2小时。反应结束后，将溶剂减压蒸馏除去，将残渣利用反相柱色谱(洗脱溶剂；0.1％TFA乙腈：水)进行纯化，由此得到参考例M1(2.8mg)。
LC-MS：778(M+H)+,776(M-H)-(1.081分钟，测定条件D)
参考例M2
N-{(2E,4S)-2,5-二甲基-4-[甲基(N,β,β,1-四甲基-L-色氨酰基-3-甲基-L-缬氨酰基)氨基]己-2-烯酰基}-D-γ-谷氨酰基-N6-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己酰基]-L-赖氨酸
Figure BDA0003202958710001571
将参考例4(7.2mg)、6-马来酰亚胺己酸N-琥珀酰亚胺酯(2.8mg)、N,N-二异丙基乙胺(2.3mg)和N,N-二甲基甲酰胺(1mL)的混合液在25℃下搅拌18小时。反应结束后，将反应溶液利用反相柱色谱(洗脱溶剂；0.1％TFA乙腈：水)进行纯化，由此得到参考例M2(2.8mg)。
LC-MS：977(M+H)+,975(M-H)-(1.061分钟，测定条件D)
参考例M3～M51
使用对应的原料化合物，与参考例M1、参考例M2或参考例1的步骤p)同样地进行反应和处理，得到下表11所示的化合物。
[表11]
Figure BDA0003202958710001581
Figure BDA0003202958710001591
Figure BDA0003202958710001601
Figure BDA0003202958710001611
Figure BDA0003202958710001621
Figure BDA0003202958710001631
Figure BDA0003202958710001641
参考例M52
N2-((S,E)-4-((S)-2-((S)-2-(二甲基氨基)-3-甲基-3-苯基丁酰胺)-N,3,3-三甲基丁酰胺)-2,5-二甲基己-2-烯酰基)-N5-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙基)-D-谷氨酰胺
Figure BDA0003202958710001642
向参考例M4的单三氟乙酸盐(10mg)的乙腈(1mL)溶液中加入甲醛水溶液(1mL)，加入三乙酰氧基硼酸钠(15mg)，在室温下搅拌3小时。将反应液浓缩后，利用反相HPLC(流动相为0.1％TFA水/0.035％TFA乙腈溶剂)进行纯化，由此得到参考例M52(5.4mg)。
LC-MS：739(M+H)+(1.007分钟，测定条件G)
参考例ADC1
本妥昔单抗-参考例M4复合物(平均药物抗体比：8.00)
Figure BDA0003202958710001651
向本妥昔单抗(100mg)的磷酸缓冲生理水溶液(1.4mL)中加入1mmol/L的三(2-羧基乙基)膦(TCEP)的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(13.3mL)，在37℃下孵育45分钟。将抗体溶液冷却至0℃后，利用用磷酸缓冲生理水溶液进行了预平衡的PD-10脱盐柱进行处理，由此得到被还原的本妥昔单抗的磷酸缓冲生理水溶液。将其冷却至0℃后，加入用磷酸缓冲生理水溶液进行了10倍稀释的参考例M4的1mmol/L DMSO溶液(6.6mL)，完全混合，在4℃下孵育17小时。然后，利用用磷酸缓冲生理水溶液进行了预平衡的PD-10脱盐柱进行纯化后，离心浓缩，由此得到参考例ADC1(68.7mg)。
所得到的ADC的平均DAR利用还原性或非还原性SDS-PAGE、或HPLC-HIC来测定。另外，平均DAR可以利用紫外可见吸收光谱法(UV-Vis)、还原性或非还原性SDS-PAGE、HPLC-HIC、SEC、RP-HPLC、LC-MS等定性或定量地测定。这些技术记载在Antibody DrugConjugates,Methods in Molecular Biology vol.1045,2013.pp267-284.L.Ducry,Ed.中。
在对通过上述的规程得到的参考例ADC1进行HPLC-HIC分析(测定条件E)的结果是，DAR为8的参考例ADC1的峰的Rt为4.89分钟。
参考例ADC2～ADC46
使用对应的抗体和修饰剂(参考例的化合物)，与参考例ADC1同样地进行反应和处理，得到下表12所示的ADC。
Figure BDA0003202958710001661
[表12]
Figure BDA0003202958710001671
Figure BDA0003202958710001681
上表12中的实施例的ADC的Rt(分钟)是利用HPLC-HIC分析(测定条件E)观测到的、DAR为8的ADC的峰的值。另外，比较例3的ADC的Rt(分钟)是DAR为8的ADC的峰的值。
上表12的比较例化合物1表示国际公开第2014/057436号(专利文献8)中公开的下述化合物。
Figure BDA0003202958710001682
“利用SDS-PAGE确认到ADC生成”是指：将SeeBlue(注册商标)Plus2(赛默飞世尔科技公司)作为标志物，在二硫化物非还原条件下对参考例ADC进行SDS-PAGE分析，结果，强烈地检测到分子量50kDa和分子量25kDa附近的条带。这表明，修饰剂与抗体的轻链-重链间和铰链的二硫键相关的半胱氨酸残基进行了结合，意味着得到了ADC。
实施例MM1
(3S,6S,9S,10E,14R)-14-(3-{[2-(3-{[(2R)-2-氨基-2-羧基乙基]硫基}-2,5-二氧代吡咯烷-1-基)乙基]氨基}-3-氧代丙基)-6-叔丁基-8,11-二甲基-4,7,12-三氧代-3-(2-苯基丙烷-2-基)-9-(丙烷-2-基)-2,5,8,13-四氮杂十五碳-10-烯-15-酸
Figure BDA0003202958710001691
向参考例M4(10mg)的水溶液(1.0mL)中加入半胱氨酸(1.73mg)，在4℃下搅拌1小时。然后，将反应溶液利用反相柱色谱(洗脱溶剂；0.1％TFA乙腈：水)进行纯化，由此得到实施例MM1(10mg)。
LC-MS：846(M+H)+,844(M-H)-(0.855分钟，测定条件B)
实施例MM2～MM47
使用对应的原料化合物，与实施例MM1同样地进行反应和处理，得到下表13所示的化合物。
[表13]
Figure BDA0003202958710001701
Figure BDA0003202958710001711
Figure BDA0003202958710001721
Figure BDA0003202958710001731
Figure BDA0003202958710001741
Figure BDA0003202958710001751
实施例MM48～MM67
使用对应的原料化合物，与实施例MM1同样地进行反应和处理，得到下表14所示的化合物。
Figure BDA0003202958710001752
[表14]
Figure BDA0003202958710001761
Figure BDA0003202958710001771
实施例MM68～MM70
使用对应的原料化合物，与实施例MM1同样地进行反应和处理，得到下表15所示的化合物。
Figure BDA0003202958710001772
[表15]
Figure BDA0003202958710001781
比较例化合物2表示通过使用国际公开第2014/057436号(专利文献8)中公开的化合物与实施例MM1同样地进行反应和处理而得到的下述化合物。
Figure BDA0003202958710001782
试验例
以下示出本发明的哈米特林衍生物的特定的实施例的药理试验结果，对它们的药理作用进行说明，但本发明不限于这些试验例所示的化合物。
试验例1：使用猪微管蛋白的微管聚合抑制活性评价(1)
使用由Cytoskeleton公司购入的微管蛋白聚合抑制分析试剂盒(产品目录编号：BK006P)，按照试剂盒所附带的规程对浓度9.1μM的实施例的化合物的聚合抑制活性进行评价。若对规程进行概括，在96孔微孔板中添加各为10μL的评价对象化合物的80mM PIPESpH6.9、2mM MgCl、0.5mM EGTA和5％DMSO缓冲液，向这些中添加各为100μL的3mg/mL的猪微管蛋白80mM PIPES pH6.9、2mM MgCl、0.5mM EGTA、1mM GTP和10.2％甘油溶液。为了经时地调查微管蛋白的聚合情况，使用酶标仪在37℃下测定340nm的吸光度。随着微管蛋白的聚合进行，340nm的吸光度会上升。将结果示于图1中。
如图1所示，实施例MM1和MM47在微管聚合抑制评价试验中显示出微管聚合抑制活性。
试验例2：使用猪微管蛋白的微管聚合抑制活性评价(2)
使用由Cytoskeleton公司购入的微管蛋白聚合抑制分析试剂盒(产品目录编号：BK006P)，按照试剂盒所附带的规程对浓度9.1μM的实施例的化合物的聚合抑制活性进行评价。向96孔微孔板中添加各为10μL的评价对象化合物的80mM PIPES pH6.9、2mM MgCl、0.5mM EGTA和5％DMSO缓冲液，向这些中添加各为100μL的3mg/mL的猪微管蛋白80mM PIPESpH6.9、2mM MgCl、0.5mM EGTA、1mM GTP和10.2％甘油溶液。为了经时地调查微管蛋白聚合的情况，使用酶标仪在37℃下测定340nm的吸光度。随着微管蛋白的聚合进行，340nm的吸光度会上升。
微管蛋白聚合抑制活性通过分析开始60分钟后的发生了聚合的微管蛋白的比例来评价。具体而言，将添加了化合物的孔中的发生了聚合的微管蛋白的吸光度除以未添加化合物的孔中的发生了聚合的微管蛋白的吸光度，将其值乘以100倍，由此计算出微管聚合率(％)。将结果示于表16中。
[表16]
Figure BDA0003202958710001801
微管聚合率的值越低，表示化合物越强烈地抑制微管的聚合。
试验例3：细胞杀伤性试验(1)
将作为人淋巴瘤细胞株的Karpas-299细胞(European Collection ofAuthenticated Cell Cultures(欧洲认证细胞培养物保藏中心)，以下记作ECACC)在包含10％的胎牛血清(MP Biomedicals)的RPMI1640(GIBCO)(以下称为“培养基”)中培养。将细胞用培养基以达到2×105个细胞/mL的方式进行制备，向96孔细胞培养用微孔板中各添加50μL。向微孔板中添加各50μL的用培养基以8阶段进行4倍稀释的实施例的化合物或比较例化合物。将它们在37℃、5％CO2下培养4天。培养后，将微孔板从培养箱中取出，在室温下静置10分钟。向各孔中添加50μL的CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay(CellTiter-Glo发光法细胞活力检测)(Promega)，搅拌。将该混合物在暗处孵育20分钟。使用微孔板光度计来测量各孔的发光，由此，计算出细胞存活率。另外，由细胞存活率的值计算出IC50值。将结果示于表17中。
IC50值利用下式来计算。
IC50(nM)＝antilog(LOG10(a÷b)×(e-d)÷(c-d)+LOG10b)
a：被测物质的浓度a
b：被测物质的浓度b
c：添加浓度a的被测物质时的细胞存活率
d：添加浓度b的被测物质时的细胞存活率
e：添加各浓度的被测物质时的细胞存活率中的、最大与最小的中间值
(a、b是跨越细胞存活率e的浓度，表示a＞b。)
各浓度下的细胞存活率利用下式来计算。
细胞存活率(％)＝a’÷b’×100
a’：添加有被测物质的孔的发光量的平均值(n＝6)
b’：未添加被测物质的孔的发光量的平均值(n＝6)
(n表示在被测物质每一浓度下所实施的评价的数量)
[表17]
Figure BDA0003202958710001821
Figure BDA0003202958710001831
如上表17所示，比较例化合物对Karpas-299细胞显示出强的细胞杀伤性。另一方面，实施例的化合物对Karpas-299细胞显示出弱的细胞杀伤性。
试验例4：ADC的溶酶体代谢试验
使用由SEKISUI XenoTech公司购入的人肝溶酶体(human liver lysosomes)(产品目录编号：H0610.L)和10x分解代谢缓冲液(catabolic buffer)(产品目录编号：K5200)，依据SEKISUI XenoTech公司推荐的规程，对参考例ADC的代谢试验进行评价。向1.5mL艾本德管中添加超纯水70μL、10x分解代谢缓冲液20μL、用超纯水进行了10倍稀释的人肝溶酶体100μL，向其中添加评价对象化合物的磷酸缓冲生理盐水10μL。将反应溶液在37℃下孵育16小时后，添加乙腈200μL，在25℃下进一步孵育16小时，然后通过LC-MS对其进行分析。分析条件如下所述。将检测到的化合物的结果示于表18中。
(分析条件)
质谱装置：6500Qtrap(AB Sciex公司)或Orbitrap Elite(赛默飞世尔科技公司)
喷雾电压：3500V
毛细管温度：400℃
HPLC：Ultimate3000 UPLC(赛默飞世尔科技公司)
柱：InertSustain C18(GL科技公司，3μm,2.1mm×100mm)
溶剂：A液：0.1％HCOOH/CH3CN、B液：0.1％HCOOH/H2O
梯度条件：
0.0分-1.5分钟；A/B＝5：95
1.5-11.0分钟从A 5％到95％的线性梯度
11.0-12.0分钟；A/B＝95：5
12.0-15.0分钟；A/B＝5：95
流速：0.2mL/分钟
柱温：40℃
[表18]
Figure BDA0003202958710001851
如上表18所示，表明本发明的哈米特林衍生物通过受到由溶酶体引起的ADC的抗体部分的代谢而生成。
试验例5：使用细胞的抗CD30ADC的代谢试验
将作为人淋巴瘤细胞株的Karpas-299细胞(European Collection ofAuthenticated Cell Cultures(欧洲认证细胞培养物保藏中心)，以下记作ECACC)在包含10％的胎牛血清(MP Biomedicals)的RPMI1640(GIBCO)(以下称为“培养基”)中培养。将细胞用培养基以达到2×106个细胞/mL的方式进行制备，向细胞培养用板中添加3mL后，添加1.5μL浓度为30mg/mL的参考例ADC1。将其在37℃、5％CO2下培养1天。培养后，将细胞悬浮液利用离心分离(2000g下5分钟)分离成细胞团块和培养液。向回收的培养液中添加乙腈4mL后，在25℃下孵育18小时。孵育后，对于乙腈悬浮液利用离心分离(2500g下5分钟)回收上清，用乙酸使其为约pH4后，冷冻干燥，得到白色的固体。另一方面，对于细胞团块，用磷酸缓冲生理盐水3mL清洗2次后，添加Tris缓冲生理盐水0.3mL和乙腈0.6mL，将其在25℃下孵育18小时。孵育后，对于乙腈悬浮液利用离心分离(2500g下5分钟)回收上清，用乙酸使其为约pH4后，冷冻干燥，得到固体。将得到的样品溶于0.1％甲酸/10％乙腈水溶液(3mL)中，将其中的5μL通过LC-MS进行分析。分析条件如下所述。将检测到的化合物的结果示于表19中。
(分析条件)
质谱装置：Q-Exactive(赛默飞世尔科技公司)
喷雾电压：3500V
毛细管温度：400℃
HPLC：Ultimate3000 UPLC(赛默飞世尔科技公司)
柱：AcquityUPLC HSS T3柱(Waters公司，1.8μm,2.1mm×50mm)
溶剂：A液：0.1％HCOOH/CH3CN、B液：0.1％HCOOH/H2O
梯度条件：
0.0分钟；A/B＝10：90
0.0-2.0分钟从A10％到90％的线性梯度
2.0-6.0分钟；A/B＝90：10
6.0-8.0分钟；A/B＝10：90
流速：0.2mL/分钟
柱温：40℃
[表19]
Figure BDA0003202958710001861
另行在与试验例5相同的条件下使用本妥昔单抗来进行，结果，本发明的哈米特林衍生物作为代谢物被检测到。
如上表19所示，确认到本发明的哈米特林衍生物通过使ADC作用于表达抗原的细胞而生成。
试验例6：ADC的细胞杀伤性试验
将CD30抗原阳性且HER2抗原阴性的Karpas-299细胞(ECACC)在包含10％的胎牛血清(MP Biomedicals)的RPMI1640(GIBCO)(以下在该试验中称为“培养基A”)中培养。另外，将CD30抗原阴性且HER2抗原阳性的SK-BR-3细胞(ATCC)在包含10％的胎牛血清(MPBiomedicals)的McCoy’s5A(GIBCO)(以下在该试验中称为“培养基B”)中培养。将Karpas-299细胞和SK-BR-3细胞用培养基A或培养基B以达到2×106个细胞/mL的方式进行制备，向96孔细胞培养用微孔板中各添加50μL。关于SK-BR-3细胞，添加后在37℃、5％CO2下培养过夜。向微孔板中添加各50μL的用培养基A或培养基B以8阶段进行了4倍稀释的ADC，在37℃、5％CO2下将Karpas-299细胞培养4天，将SK-BR-3细胞培养3天。培养后，将微孔板从培养箱中取出，在室温下静置10分钟。向各孔中添加50μL的CellTiter-Glo Luminescent CellViability Assay(Promega)，搅拌。将该混合物在暗处孵育20分钟。使用微孔板光度计来测量发光，由此，在ADC的各浓度下计算出细胞存活率。IC50值按照试验例3中记载的方法来计算。将结果示于表20中。
[表20]
Figure BDA0003202958710001881
Figure BDA0003202958710001891
如上表20所示，作为CD30抗原特异性抗体的本妥昔单抗的抗体药物复合物对作为CD30抗原阳性细胞的Karpas-299细胞显示出强的细胞杀伤活性，但对作为CD30抗原阴性细胞的SK-BR-3细胞显示出弱的细胞杀伤活性。另外，作为HER2抗原特异性抗体的曲妥珠单抗的抗体药物复合物对作为HER2抗原阳性细胞的SK-BR-3细胞显示出强的细胞杀伤活性，对作为HER2抗原阴性细胞的Karpas-299细胞显示出弱的细胞杀伤活性。
即使是细胞杀伤性弱的化合物，通过在与抗体特异性结合的抗原阳性细胞内通过抗体药物复合物的代谢而生成，也选择性地显示出了强的细胞杀伤活性。即表明，如果实施例化合物通过抗体药物复合物的代谢而存在于细胞内，则会对与抗体特异性结合的阳性细胞选择性地显示强的细胞抑制活性。
试验例7：使用CB-17SCID小鼠的、抗体药物复合物对于Karpas-299肿瘤型的有效 性试验
本试验是评价药物的抗肿瘤作用的代表性试验。Karpas人未分化巨细胞的淋巴瘤模型通过向CB-17SCID小鼠皮下移植5×106个细胞来制作。在该肿瘤模型中，在肿瘤达到90～110mm3的平均体积后开始治疗。对小鼠静脉内注射1次将参考例ADC溶解于磷酸缓冲生理盐水而成的溶液。肿瘤体积使用式：0.5(最长尺寸×垂直尺寸2)来计算。在该肿瘤达到约2000mm3时，将小鼠从试验中排除，平均肿瘤尺寸在此之后不作图。需要说明的是，本试验的方法记载于Hamblett K.J.et.al.Clin.Cancer Res.,2004,10,7063-7070等中。
试验例8：使用小鼠或大鼠的、药物或抗体药物复合物的毒性(安全性)试验
本试验是用于评价药物或抗体药物复合物的毒性(安全性)的代表性试验。毒性可以通过如下方法确认：对小鼠或Sprague-Dawley大鼠单次或反复尾静脉内给药药物或抗体药物复合物，实施一般症状观察、血液学检查、血液生化检查、骨髓检查、剖检、脏器重量、病理组织学检查等。需要说明的是，本试验记载于新版毒理学、日本毒理学学会教育委员会编、朝仓书店(2009)中。
由以上结果可知，实施例化合物在细胞杀伤性试验中显示比比较例化合物低的活性。另一方面，实施例化合物并没有丧失来源于哈米特林结构的微管蛋白聚合抑制活性。另外，利用在靶细胞内表达的蛋白酶提供实施例化合物的抗体药物复合物在细胞杀伤性试验中显示出高活性。因此启示了，根据包含实施例化合物作为结构的一部分的抗体药物复合物，即使由抗体药物复合物的代谢在全身血液中产生含有抗体部分的药物部分，被释放到细胞外，实施例化合物对正常细胞引起细胞杀伤性的情况也得到抑制，能够减少副作用。
产业上的可利用性
如以上所说明的那样，本发明的哈米特林衍生物在抗原表达细胞中选择性地显示细胞杀伤活性，在正常细胞中的细胞毒性低，因此可期待成为安全性优良的抗癌剂。
序列表
<110> 大日本住友制药株式会社（Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd.）
<120> 具有半胱氨酸残基的哈米特林衍生物（Hemiasterlin derivatives having acysteine residue）
<130> FP19-1346-00
<150> JP2019-023960
<151> 2019-02-13
<160> 6
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列（Artificial Sequence）
<220>
<223> (AB)m的示例
<400> 1
Asn Arg Gly Glu
1
<210> 2
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> (AB)m的示例
<400> 2
Phe Asn Arg Gly Glu
1 5
<210> 3
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> (AB)m的示例
<400> 3
Ser Phe Asn Arg Gly Glu
1 5
<210> 4
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> (AB)m的示例
<400> 4
Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu
1 5
<210> 5
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> (AB)m的示例
<400> 5
Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu
1 5
<210> 6
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> (AB)m的示例
<400> 6
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu
1 5

Claims (19)

1.式(1)所示的化合物或其盐，
Figure FDA0003202958700000011
式中，
b表示1～5的整数；
X表示-NH-或-CO-；
Z表示式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)、式(Z-5)、式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)或式(Z-11)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000012
Figure FDA0003202958700000021
式中，
n表示0～2的整数，
p表示1～3的整数，
AA表示谷氨酸残基(Glu)、天冬氨酸残基(Asp)或赖氨酸残基(Lys)，AA有两个以上时，各个AA彼此相同或不同，并且AA彼此通过酰胺键键合，(AA)n或(AA)p的N末端氮原子与羰基(a)一起形成酰胺键，
G表示-O-或-NH-，
W表示式(W-1)或式(W-2)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000031
式中，
R6a和R6b各自独立地表示氢原子或甲基，
R7表示C1-6烷基，
Q表示式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)或式(Q-7)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000032
式中，
R8a和R8b各自独立地表示氢原子、卤素原子、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
R8c、R8d和R8e各自独立地表示氢原子、卤素原子、羟基、氰基、氨基、羧基、苯基、可以被1～3个氟原子取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基酯基，
R3表示-(CH2)u-COR9，
u表示1或2，
R4和R9各自独立地表示羟基或AD，
AD表示Glu、Asp或Lys，AD的N末端氮原子与相邻的羰基一起形成酰胺键，
其中，R4或R9为AD时，n为0或1，
R5a和R5b各自独立地表示氢原子或甲基，
其中，X为-NH-时，Z为式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)或式(Z-5)，X为-CO-时，Z为式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)或式(Z-11)；
R1表示氢原子或(AB)m，
AB表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AB有两个以上时，各个AB彼此相同或不同，并且AB彼此通过酰胺键键合，
m表示1～9的整数；
R2表示羟基或(AC)g，
AC表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AC有两个以上时，各个AC彼此相同或不同，并且AC彼此通过酰胺键键合，
g表示1～9的整数；
其中，R1为(AB)m且R2为(AC)g时，m与g之和为2～10的整数。
2.如权利要求1所述的化合物或其盐，其中，式(1)由式(1-1)表示，
Figure FDA0003202958700000041
式中，
b表示1～5的整数；
Z表示式(Z-1)、式(Z-2)、式(Z-3)、式(Z-4)或式(Z-5)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000051
式中，
n表示0～2的整数，
p表示1～3的整数，
AA表示谷氨酸残基(Glu)、天冬氨酸残基(Asp)或赖氨酸残基(Lys)，AA有两个以上时，各个AA彼此相同或不同，并且AA彼此通过酰胺键键合，(AA)n或(AA)p的N末端氮原子与羰基(a)一起形成酰胺键，
W表示式(W-1)或式(W-2)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000061
式中，
R6a和R6b各自独立地表示氢原子或甲基，
R7表示C1-6烷基，
Q表示式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)或式(Q-7)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000062
式中，
R8a和R8b各自独立地表示氢原子、卤素原子、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
R8c、R8d和R8e各自独立地表示氢原子、卤素原子、羟基、氰基、氨基、羧基、苯基、可以被1～3个氟原子取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基酯基，
R3表示-(CH2)u-COR9，
u表示1或2，
R4和R9各自独立地表示羟基或AD，
AD表示Glu、Asp或Lys，AD的N末端氮原子与相邻的羰基一起形成酰胺键，
其中，R4或R9为AD时，n为0或1，
R5a和R5b各自独立地表示氢原子或甲基；
R1表示氢原子或(AB)m，
AB表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AB有两个以上时，各个AB彼此相同或不同，并且AB彼此通过酰胺键键合，
m表示1～9的整数；
R2表示羟基或(AC)g，
AC表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AC有两个以上时，各个AC彼此相同或不同，并且AC彼此通过酰胺键键合，
g表示1～9的整数；
其中，R1为(AB)m且R2为(AC)g时，m与g之和为2～10的整数。
3.如权利要求2所述的化合物或其盐，其中，
R7为甲基或异丙基，
Q为式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-4)、式(Q-6)或式(Q-7)。
4.如权利要求2或3所述的化合物或其盐，其中，
p为1，
W为式(W-1)，
Q为式(Q-1)或式(Q-2)，
R8a和R8b各自独立地为氢原子、氟原子或甲氧基，
R8c、R8d和R8e各自独立地为氢原子、氟原子、羟基、氰基、氨基、羧基、甲基、三氟甲基或甲氧基，
R4和R9为羟基。
5.如权利要求2～4中任一项所述的化合物或其盐，其中，
Z为式(Z-1)、式(Z-2)或式(Z-3)，
W为式(W-1)，
Q为式(Q-1)或式(Q-2)，
R8a和R8b为氢原子，
R8c、R8d和R8e为氢原子，
R4和R9为羟基。
6.如权利要求2～5中任一项所述的化合物或其盐，其中，b为2。
7.如权利要求1所述的化合物或其盐，其中，式(1)由式(1-2)表示，
Figure FDA0003202958700000081
式中，
b表示1～5的整数；
Z表示式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)、式(Z-9)、式(Z-10)或式(Z-11)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000091
式中，
n表示0～2的整数，
p表示1～3的整数，
AA表示谷氨酸残基(Glu)、天冬氨酸残基(Asp)或赖氨酸残基(Lys)，AA有两个以上时，各个AA彼此相同或不同，并且AA彼此通过酰胺键键合，
(AA)n或(AA)p的N末端氮原子与羰基(a)一起形成酰胺键，
G表示-O-或-NH-，
W表示式(W-1)或式(W-2)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000101
式中，
R6a和R6b各自独立地表示氢原子或甲基，
R7表示C1-6烷基，
Q表示式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-3)、式(Q-4)、式(Q-5)、式(Q-6)或式(Q-7)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000102
式中，
R8a和R8b各自独立地表示氢原子、卤素原子、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
R8c、R8d和R8e各自独立地表示氢原子、卤素原子、羟基、氰基、氨基、羧基、苯基、可以被1～3个氟原子取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基酯基，
R5a和R5b各自独立地表示氢原子或甲基；
R1表示氢原子或(AB)m，
AB表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AB有两个以上时，各个AB彼此相同或不同，并且AB彼此通过酰胺键键合，
m表示1～9的整数；
R2表示羟基或(AC)g，
AC表示丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，AC有两个以上时，各个AC彼此相同或不同，并且AC彼此通过酰胺键键合，
g表示1～9的整数；
其中，R1为(AB)m且R2为(AC)g时，m与g之和为2～10的整数。
8.如权利要求7所述的化合物或其盐，其中，
Z为式(Z-6)、式(Z-7)、式(Z-8)或式(Z-9)，
R7为甲基或异丙基，
Q为式(Q-1)、式(Q-2)、式(Q-4)、式(Q-6)或式(Q-7)。
9.如权利要求7或8所述的化合物或其盐，其中，
Z为式(Z-6)或式(Z-7)，
W为式(W-1)，
Q为式(Q-1)或式(Q-2)，
R8a和R8b各自独立地为氢原子、氟原子或甲氧基，
R8c、R8d和R8e各自独立地为氢原子、氟原子、羟基、氰基、氨基、羧基、甲基、三氟甲基或甲氧基。
10.如权利要求7～9中任一项所述的化合物或其盐，其中，
R8a和R8b为氢原子，
R8c、R8d和R8e为氢原子。
11.如权利要求7～10中任一项所述的化合物或其盐，其中，b为3。
12.如权利要求1～11中任一项所述的化合物或其盐，其中，
(AB)m为丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)、缬氨酸残基(Val)、*1-(Glu)-(Gly)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)、*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)或*1-(Glu)-(Gly)-(Arg)-(Asn)-(Phe)-(Ser)-(Lys)-(Thr)-(Val)，
在此，*1末端表示与半胱氨酸残基形成了酰胺键，
(AC)g为甘氨酸残基(Gly)或脯氨酸残基(Pro)。
13.如权利要求1～11中任一项所述的化合物或其盐，其中，
(AB)m为丙氨酸残基(Ala)、精氨酸残基(Arg)、天冬酰胺残基(Asn)、天冬氨酸残基(Asp)、半胱氨酸残基(Cys)、谷氨酰胺残基(Gln)、谷氨酸残基(Glu)、甘氨酸残基(Gly)、组氨酸残基(His)、异亮氨酸残基(Ile)、亮氨酸残基(Leu)、赖氨酸残基(Lys)、甲硫氨酸残基(Met)、苯丙氨酸残基(Phe)、脯氨酸残基(Pro)、丝氨酸残基(Ser)、苏氨酸残基(Thr)、色氨酸残基(Trp)、酪氨酸残基(Tyr)或缬氨酸残基(Val)，
(AC)g为甘氨酸残基(Gly)。
14.如权利要求1～13中任一项所述的化合物或其盐，其中，R1为氢原子，R2为羟基。
15.如权利要求1～14中任一项所述的化合物或其盐，其中，(AA)n为式(A-1)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000131
式中，AA1和AA2各自独立地表示Glu、Asp或Lys。
16.如权利要求1～14中任一项所述的化合物或其盐，其中，(AA)n为式(A-2)所示的基团，
Figure FDA0003202958700000132
式中，AA1和AA2各自独立地表示Glu、Asp或Lys。
17.如权利要求1～14中任一项所述的化合物或其盐，其中，n为0或1。
18.如权利要求1所述的化合物或其盐，其中，所述化合物选自以下的化合物，
Figure FDA0003202958700000141
19.如权利要求1所述的化合物或其盐，其中，所述化合物选自以下的化合物，
Figure FDA0003202958700000151
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