CN113329749A - 用于治疗葡萄膜黑色素瘤的联合疗法 - Google Patents

用于治疗葡萄膜黑色素瘤的联合疗法 Download PDF

Info

Publication number
CN113329749A
CN113329749A CN201980064553.4A CN201980064553A CN113329749A CN 113329749 A CN113329749 A CN 113329749A CN 201980064553 A CN201980064553 A CN 201980064553A CN 113329749 A CN113329749 A CN 113329749A
Authority
CN
China
Prior art keywords
pac
melanoma
active agent
composition
kinase
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201980064553.4A
Other languages
English (en)
Inventor
保罗·J·赫根罗德
马修·韦斯利·布德罗
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of Illinois
Original Assignee
University of Illinois
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of Illinois filed Critical University of Illinois
Publication of CN113329749A publication Critical patent/CN113329749A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2013—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A61K9/2018—Sugars, or sugar alcohols, e.g. lactose, mannitol; Derivatives thereof, e.g. polysorbates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Abstract

用于治疗葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤的具有小分子PAC‑1的协同药物组合。目前没有针对葡萄膜黑色素瘤相关突变的靶向药物治疗。由于目前尚无标准疗法或治疗手段能够改善总体生存率，尽管进行基本放射或外科手术治疗，仍会有多达50％的患者最终发展成转移性疾病。带有PAC 1的药物组合允许使用较低剂量的化合物，从而导致葡萄膜黑色素瘤中的癌细胞死亡。PAC‑1与激酶抑制剂恩曲替尼(entrectinib)的药物组合已显示出对葡萄膜黑色素瘤细胞系的协同作用。具体地说，PAC‑1和恩曲替尼对野生型和突变的葡萄膜黑色素瘤细胞系(例如，GNAQ和GNA11)具有协同作用。

Description

用于治疗葡萄膜黑色素瘤的联合疗法
相关申请
本申请根据U.S.C.§119(e)的规定要求下述在先申请的优先权：2018年10月5日提交的美国临时专利申请62/742,063，其在此通过引用纳入本文。
政府支助
本发明是在美国政府支助下，通过National Institutes of Health提供的拨款项目R01-CA120439的资助进行的。美国政府对本发明享有某些权利。
背景技术
葡萄膜黑色素瘤(Uveal melanoma，UM)是眼部黑色素瘤的最常见形式。大约97％的UM患者有在GNAQ/11中的激活突变，从而触发GNAQ/11信号的组成性激活并驱动UM表型。尽管文献记载了对UM的细胞生物学所进行的广泛研究，但这种知识的广度还没有直接转化为对于UM患者的更好的疗法和效果。虽然原发性UM肿瘤通常可以通过放疗和手术治疗，但是51％的UM患者会在1-5年内出现转移性病变。转移性葡萄膜黑色素瘤(Metastatic uvealmelanoma，MUM)是一种高度侵袭性癌症，通常存在于肝脏中，并且其1年总生存率低于15％。
该领域当前的工作集中于利用针对GNAQ/11下游的单一药剂或激酶抑制剂的组合。其中最引人注目的是，在第二阶段的临床试验中，司美替尼(selumetinib)对MEK的抑制作用显示出令人鼓舞的反应率，但在第三阶段的试验中未达到其临床终点。有趣的是，有证据表明，UM通过自噬保护避免了对激酶抑制剂的强烈凋亡细胞死亡。这种防止细胞大量死亡可能会导致较差的临床疗效。
目前尚无针对葡萄膜黑色素瘤和与其相关的突变的靶向药物治疗。因此，需要一种有效的标准疗法或处理，得以改善UM患者的总存活率。
发明内容
考虑到有证据表明葡萄膜黑色素瘤通过自噬保护而避免了对激酶抑制剂的强烈凋亡细胞死亡，因此研究了前体半胱天冬酶-3(procaspase-3)的直接激活与激酶抑制作用相结合，以诱导葡萄膜黑色素瘤中凋亡细胞的较大程度死亡。发现PAC-1和某些激酶抑制剂的组合可有效杀死黑色素瘤细胞，而对正常(非癌性)细胞几乎没有影响。因此，本发明提供了一种组合物，其包含：
(a)化合物PAC-1：
Figure GDA0003146677210000011
(b)至少一种第二活性剂，其中所述第二活性剂是酪氨酸激酶的抑制剂，单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)的抑制剂或其组合；以及
(c)任选的药学上可接受的稀释剂，赋形剂，载体，或其组合。
在一些实施方式中，所述第二活性剂是恩曲替尼(entrectinib)，多西***(dorsomorphin)，或其组合。
本发明还提供了抑制(黑色素瘤)癌细胞的生长或增殖的方法，包括使癌细胞与有效量的本文所述的组合物接触，从而抑制癌细胞的生长或增殖。另外，本发明提供了一种在黑色素瘤细胞中诱导凋亡的方法，该方法包括使细胞与有效量的所述的组合物接触，其中由此在黑色素瘤细胞中诱导了凋亡。
本发明还提供了一种治疗癌症，例如黑色素瘤，的方法，包括向有需要的患者同时或依次施用治疗有效量的化合物PAC-1和有效量的第二活性剂，从而可选择***地形成上述组合物，从而治疗癌症。在各种实施方式中，所述癌症是葡萄膜黑色素瘤(uvealmelanoma)或皮肤黑色素瘤(cutaneous melanoma)。
因此，本发明提供了新颖的组合物，以及用于制备可用于治疗哺乳动物(例如成年人或非成年人)的癌症的药物的组合物。
本发明提供了本文所述的组合物用于药物疗法的用途。所述药物疗法可以用于治疗癌症，例如皮肤癌(黑色素瘤)或眼癌(葡萄膜黑色素瘤)。本发明还提供了所述组合物在制备用于治疗哺乳动物疾病例如人类黑色素瘤的药物中的用途。所述药物可以包括药学上可接受的稀释剂，赋形剂或载体。
附图说明
下述附图属于说明书的一部分并且是用来对本发明的一些实施方式或不同方面作进一步的描述。在一些实例中，本发明的实施方式可以通过参照附图并结合本文提供的详细描述得到更好地理解。这些描述和附图可以突出某些具体的实施例或者本发明的某些方面。然而，本领域技术人员应当理解这些部分的实施例或方面也可用于结合本发明的其他实施例或方面。
图1：整个葡萄膜黑色素瘤细胞系中前体半胱天冬酶-3(PC-3)的相对表达。
图2：用PAC-1和小分子抑制剂组合对UM细胞系(cell line)MEL270处理72小时后观察到的细胞死亡(cell death)百分比。MEL270是GNAQ突变细胞系。方框中显示了PAC-1+恩曲替尼(PAC-1+
entrectinib)组合的数据。显示的数据是两个独立实验的平均值。
图3：PAC-1与恩曲替尼(entrectinib)组合(combination)显示整个UM细胞系的协同作用。温育72小时后，计算细胞死亡(cell death)和相应的CI值(CI values)。细胞系由其驱动程序突变表示。CI值<1具有协同作用，较低的值表示较高的协同作用。CI值＝1表示加和(additive)效果。CI值>1表示两种药剂之间的拮抗作用。显示的数据是至少三个独立实验的平均值(Average)，但H460KRAS细胞系除外；误差表示为s.e.m.；4,000个细胞/孔，Alamar蓝荧光；死亡对照：Raptinal。
图4：PAC-1+恩曲替尼(entrectinib)在很宽的浓度范围内显示出广泛的协同作用。显示的数据是至少三个独立重复实验的平均值，误差用s.e.m.表示。
图5：PAC-1+恩曲替尼(entrectinib)对UM细胞系具有显著活性。平均CI是通过对2μM PAC-1+0.5μM恩曲替尼，2μM PAC-1+1μM恩曲替尼，4μM PAC-1+0.5μM恩曲替尼和4μMPAC-1+1μM恩曲替尼观察到的细胞死亡(cell death)进行平均计算得出的。显示的值是至少两次独立实验的平均值，误差为平均值的s.e.m.，除非另有说明。
Figure GDA0003146677210000032
＝表示N＝1个结果。
图6：显示的数据是至少三个独立实验的平均值；误差表示为s.e.m.；4,000个细胞/孔，孵育72小时，Alamar蓝色荧光；死亡对照：Raptinal。(A)PAC-1和恩曲替尼在UMGq中具有协同作用。(B)PAC-1和恩曲替尼在UMG11/WT中具有协同作用。(C)组合指数(CI)的解释：
Figure GDA0003146677210000031
其中，Dn≡药物n的联合剂量产生50％的生长抑制作用；Dxn≡药物n的单剂量产生50％的生长抑制作用。
具体实施方式
半胱氨酸蛋白酶的半胱天冬酶家族的成员为凋亡的启动和完成的关键参与者。对凋亡最关键的是前体半胱天冬酶-3(procaspase-3)蛋白水解为半胱天冬酶-3(caspase-3)。由于内在和外在的凋亡途径都收敛以激活前体半胱天冬酶-3，并且半胱天冬酶-3具有100多种细胞底物，因此前体半胱天冬酶-3激活为半胱天冬酶-3是凋亡级联反应中的关键事件。在包括胶质母细胞瘤，乳腺癌，结肠癌，肺癌，淋巴瘤，神经母细胞瘤，黑色素瘤和肝癌在内的多种肿瘤中，前体半胱天冬酶-3水平升高。前体半胱天冬酶激活化合物1(PAC-1)是一个小分子，可在体外增强前体半胱天冬酶-3的活性，诱导培养中癌细胞的凋亡死亡，并在多种小鼠异种移植模型中具有功效。细胞前体半胱天冬酶-3水平与PAC-1的凋亡诱导特性之间存在很强的相关性。如本文所述，已经发现PAC-1和某些激酶抑制剂的组合有效杀死黑色素瘤细胞，而对正常(非癌)细胞几乎没有影响。
定义
下面的定义是用来对说明书和权利要求书提供清晰和一致的理解。本文所采用的术语具有下述的含义。本说明书中所采用的其他术语和短语具有本领域技术人员所能理解的普通含义。这种普通含义可通过参考技术辞典获得，例如Hawley’s Condensed ChemicalDictionary 14th Edition,by R.J.Lewis,JohnWiley&Sons,New York,N.Y.,2001。
本说明书中提及的“一种实施方式(one embodiment)"、“实施方式(anembodiment)”等表明所描述的实施方式可包含特定的方面、特征、结构、部分或特性，但并不是每个实施方式都必须包含这些特定的方面、特征、结构、部分或特点。此外，这些短语可能，但并不一定，适用于在本说明书其它部分提及的相同的实施方式。此外，当特定的方面、特征、结构、部分或特点是结合某种实施方式进行描述的，本领域技术人员应当能够知道将这些特定的方面、特征、结构、部分或特点应用到或关联到其它的实施方式，无论是否明确地表述出来。
单数形式的冠词"a,""an"和"the"包括复数含义，除非上下文存在明确的不同阐述。因此，例如，“化合物”可以是指包括多个这样的化合物，从而化合物X包括多个的化合物X。进一步值得注意的是，权利要求书可能被撰写为排除任何可选元素。因此，本声明旨在作为排除性术语使用的前置基础，例如"单独(solely)"、"仅仅(only)"等术语，与本文所描述的任何元素相关联和/或作为对权利要求所述要素的限定或者用作“负面”限制。
术语“和/或(and/or)”是指相关项目的任何一项、任何组合，或它们的全部。短语“一个或多个(one ormore)"和“至少一个(at least one)"是本领域技术人员都能容易理解的，尤其是根据上下文理解。例如，这些短语可以是指一、二、三、四、五、六、十、一百，或大约比已经列举的下限高出10、100或1000倍的任何上限值。
本领域技术人员应当能够理解，包括表示成分含量、诸如分子量的性质、反应条件等等的任何数目都可以是近似的，并且在各种情下都能够采用术语“大约”进行修饰。取决与本领据技术人员通过本文所述方法所期望获得的性质，这些值是可以有变化的。还应当理解，这些值，由于测试中出现的标准偏差必然会导致其内在的可变化性。当使用先行词“约”表示近似值时，应当理解的是，不被“约”修饰的特定值在另一方面也被表达。
术语“大约(about)”表示特定值可以具有±5％、±10％、±20％或±25％的变化。例如，“大约50”百分比在一些实施方式中可变化为45到55百分比。对于整数范围，术语“大约”可包含在所指范围各端相较于所列举的整数小或大一个或两个整数。除非文中另有说明，术语“大约”是用来包括对于成分、组合或实施例的功能来说等同的接近所列范围的数值。术语“大约”也能用来对本段前述范围的端点进行调整。
本领域技术人员应当能够理解，出于任何各种目的，尤其是就提供文字描述来说，本文提供的任何范围还包括所有可能的子范围和这些子范围的组合，以及构成所述范围的单独值，尤其是整数值。因此，应当理解，两个特定单元之间的每个单元也被公开。例如，如果公开了10到15，则分别单独地公开了11、12、13和14，及其作为范围的一部分。所引述范围(例如重量百分比或碳基团)包括各个特定的数值、整数、小数或所述范围内的特性。应当易于理解，所列举的任何范围能够充分描述并能够使的相同的范围被分解为相等的二等份、三等分、四等分、五等分或十等分。作为非限制性例子，本文所述的每个范围都可容易地分解为下三分之一，中三分之一和上三分之一等等。本领域技术人员也应当能够理解，诸于“高至”、“至少”、“高于”、“低于”、“多于”、“或以上”或类似的术语包含所列举的数字，并且这种术语还指所述范围可随后分成上文述及的子范围。同样地，本文所列的任何比率也包含落在较宽比率之内的子比率。因此，自由基、取代基和范围的具体数值只是用来进行说明；其不排除自由基和取代基的其它指定数值或其它指定范围的数值。还应理解的是，每个范围的端点相对于另一个端点以及独立于另一个端点都是有意义的。
本领域技术人员还应当能够容易理解，当单元被按照通常的方式例如在马库什群组中被组合起来时，本发明不仅包括所列单元组合构成的整体，还包括所述群组单独的每个单元以及所述基本群组的任何可能的亚群组。另外，对于所有的目的，本发明不仅包括基本群组，还包括基本群组去掉一个或多个单元的群组。可见，本发明可以包括明确排除所引述群组的任何一个或多个单元。因此，有关约束条件可以附加于任何公开的范畴或实施方式，其中任何一个或多个单元、种类或实施方式，可从所述范畴或实施方式中排除出来，例如，用于明示负面限定的场合。
术语“接触(contacting)”是指触及、接触，或者邻接或紧密地靠近，例如，包括在细胞或分子水平，比如在溶液或反应混合物中，在体外或体内，发生生理反应、化学反应或物理变化。
术语“有效量(effective amount)"是指有效地治疗疾病、失调和/或病症，或者产生所描述效果的量。例如，有效量可以是有效地减缓所治疗的病症或症状的进展或程度的剂量。对治疗上有效量是在本领域技术人员能力范围内能够确定的。术语“有效量”是指包括本文所描述的化合物的量，或本文所描述的肽类的组合的量，比如，是用于针对受试者有效地治疗或预防疾病或失调，或者治疗疾病或失调的症状。因此，“有效量”通常是指能提供预期效果的量。
或者，本文中术语“有效量(effective amount)”或“治疗有效量(therapeutically effective amount)”是指足以在一定程度上缓解被治疗的疾病或病症的一种或多种症状的药剂或成分或成分的组合。结果可以是对疾病的体征、症状或根源的减轻和/或缓解，或生物***的任何其他期望的改变。例如，用于治疗用途的“有效量”是包含本文所述化合物以提供临床上显著减轻疾病症状所需的量。在任何情况下，都可以使用诸如剂量递增研究之类的技术来确定适当的“有效”量。所述剂量可以通过一次或多次施用。然而，可以根据每个患者的个体因素来精确确定有效剂量，包括但不限于患者的年龄，个头，疾病类型或程度，疾病阶段，组合物的给药途径，所用补充疗法的类型或程度，当前疾病过程以及所需的治疗类型(例如，积极治疗与常规治疗)。
术语“治疗(treating,treat和treatment)”包括(i)防止疾病，病理或医学状况的发生(例如，预防)；(ii)阻止疾病、病理或医学病症的发生或者控制其发展；(iii)缓解疾病、病理或医学病症；和/或(iv)减轻疾病、病理或医学病症。因此，术语“治疗”可以包括降低、阻止或逆转所治疗病症或症状的进展或程度。因此，术语“治疗”可以酌情包括医治、疗养和/或预防性用药。
如本文所用，“受试者(subject)”或“患者(patient)”是指具有疾病或其他恶性肿瘤的症状或处于危险中的个体。患者可以是人类或非人类，并且可以包括例如出于研究目的用作“模型***”的动物品系或物种，例如本文所述的小鼠模型。同样，患者可以包括成人或青少年(例如，儿童)。此外，患者可以指可以从本文所述组合物的施用中受益的任何活生物体，优选哺乳类(例如人或非人)。哺乳类的例子包括但不限于哺乳动物类别的任何成员：人类，非人类灵长类动物(例如黑猩猩)以及其他猿类和猴类；牲畜，例如牛，马，绵羊，山羊，猪；家畜，例如兔子，狗和猫；实验动物包括啮齿动物，例如大鼠，小鼠和豚鼠等。非哺乳动物的例子包括但不限于鸟类，鱼类等。在本文提供的一种实施方式中，哺乳类是人。
如本文所用，术语“提供”，“施用”，“引入”在本文可交互使用，并且是指通过一定的方式或途径将本文所述的组合物置于受试者体内从而使得所述组合物至少部分地置于所需的部位。所述组合物可以通过递送到受试者中所需位置的任何合适的途径来施用。
本文所述的组合物可以与其它的组合物一起施用以延长组合物的稳定性和活性或者与其他治疗药物组合。
术语“抑制(inhibit,inhibiting和inhibition)”是指减缓、阻止或逆转疾病、感染、病况或细胞群的生长或进展。抑制作用可以大于约20％,40％,60％,80％,90％,95％或99％，例如，相比于发生在没有治疗或处理的情况下的生长或进展程度。
本文使用的术语“基本上(substantially)”是广义的，并且以其通常意义使用，包括但不限于很大程度上但不一定是所指定的全部。例如，该术语可以指不是整体数值的100％的数值。所述整体数值可以少约1％，约2％，约3％，约4％，约5％，约6％，约7％，约8％，约9％，约10％，约15％，约20％。
葡萄膜黑色素瘤：术语“葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma)”是指一种眼睛的癌症(黑色素瘤)，涉及统称为葡萄膜的眼睛的部分。葡萄膜黑色素瘤起源于眼睛的葡萄膜，包括脉络膜、睫状体和虹膜。肿瘤通常是由位于葡萄膜内的色素细胞(黑素细胞)引起的。葡萄膜黑色素瘤是成人中最常见的原发性眼内恶性肿瘤。它在生物学上与皮肤黑色素瘤不同，约占所有黑色素瘤的3％至5％。目前尚无针对转移性葡萄膜黑色素瘤患者的经批准或有效的***治疗方案。在80％的葡萄膜黑色素瘤中，发现了GNAQ或GNA11中的突变，导致RAS/RAF/MEK/ERK途径的组成性激活。
真正的虹膜黑色素瘤(iris melanomas)起源于虹膜内部，与起源于其它地方而侵入虹膜相比，在病因和预后方面截然不同，因此其他肿瘤通常统称为后部葡萄膜黑色素瘤(posterior uveal melanomas)。虹膜黑色素瘤与皮肤黑色素瘤(cutaneous melanoma)有更多共同点，因为它们经常带有与紫外线损伤相关的BRAF突变。
皮肤黑色素瘤是一种始于皮肤色素生成细胞(称为黑素细胞)的癌症。然而，非皮肤黑色素瘤出现在通常不被认为是皮肤的地方，例如眼睛，鼻子内部，粘膜(例如嘴内，肠，***，***或直肠内)。
发明实施例
本发明提供了组合物的不同实施方式：
(a)化合物PAC-1：
Figure GDA0003146677210000061
(b)至少一种第二活性剂，其中所述第二活性剂是酪氨酸激酶的抑制剂，单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)的抑制剂,或其组合；以及
(c)任选的药学上可接受的稀释剂，赋形剂，载体，或其组合。
在一些实施方式中，所述第二活性剂是神经营养受体酪氨酸激酶(NTRK)，C-ros癌基因1(ROS1)，间变性淋巴瘤激酶(ALK)，或其组合的抑制剂。在其他实施方式中，所述第二活性剂是原肌球蛋白受体激酶A(TrkA)，原肌球蛋白受体激酶B(TrkB)，原肌球蛋白受体激酶C(TrkC)，或其组合的抑制剂。在进一步的实施方式中，所述第二活性剂是Janus激酶1(JAK1)，Janus激酶2(JAK2)，Janus激酶3(JAK3)，活化的CDC42激酶1(ACK1)，***1受体(IGF1R)，黏着斑激酶(FAK)，Fms样酪氨酸激酶3(FLT3)，乳腺肿瘤激酶(BRK)，胰岛素受体(IR)，Aurora-2激酶(AUR2)，RET受体酪氨酸激酶(RET)，非受体酪氨酸蛋白激酶1(TNK1)，或其组合的抑制剂。
在另外的实施方式中，所述第二活性剂是恩曲替尼(entrectinib)。在其他实施方式中，第二活性剂是多西***(dorsomorphin)。在进一步的实施方式中，所述第二活性剂是林西替尼(linsitinib)或VS-4718(PND-1186)。在其他另外的实施方式中，所述第二活性剂是R1507，MK0646，OSI-906，BIIB022，芬妥木单抗(figitumumab)(CP-751,871)，AXL1717，AMG479，阿来替尼(alectinib)，舒尼替尼(sunitinib)，伊马替尼(imatinib)，索拉非尼(sorafenib)，尼洛替尼(nilotinib)，贝伐单抗(bevacizumab)，伊立木单抗(ipilimumab)，西克斯妥单抗(cixutumumab)，或其组合。
在各种实施方式中，所述第二活性剂是对于表A(如下)所列靶标的抑制剂：
表A
靶标 抑制剂 靶标 抑制剂
NTRK larotrectinib(拉罗替尼) JAK2 GW441756
ROS1 crizotinib(克唑替尼) JAK3 tofacitinib(托法替尼)
ALK lorlatinib(氯雷替尼) ACK1 ceritinib(色瑞替尼)
TrkA entrectinib(恩曲替尼) 1GF1R linsitinib(林西替尼)
TrkB GNF5837 FAK defactinib(德法替尼)
TrkC CH7057288 FLT3 midostaurin(米哚妥林)
JAK1 filgotinib(非洛替尼) BRK tilfrinib(替氟利尼)
IR tyrphostin(酪氨酸磷酸化抑制剂) AUR2 PHA-680632
RET pralsetinib(普拉替尼) TNK1 lestaurtinib(来他替尼)
在不同实施方式中，所述第二活性剂可以是美国专利8,299,057中公开的一种或多种化合物，所述化合物及其描述式通过引用并入本文。在另外的不同实施方式中，所述第二活性剂是IGF1R抑制剂，其中所述IGF1R抑制剂是AG538，AG1024，NVP-AEW541或芬妥木单抗(figitumumab)。在其他的不同实施方式中，所述第二活性剂是FAK(或蛋白酪氨酸激酶2(PTK2))的抑制剂，其中FAK抑制剂是PF-573,228，PF-562,271，NVP-226，Y15，德法替尼(defactinib)或VS-6063。在不同的实施方式中，所述第二活性剂是以能够与PAC-1协同作用的量施用，以治疗葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤。
在不同的实施方式中，PAC-1和/或所述第二活性剂是通过经口、静脉内、皮下、吸入、肌内、玻璃体腔内或本领域技术人员已知的任何途径施用。
在上述组合物的各种其他实施方式中，所述第二活性剂的浓度为约1nM至约100M。在另外的实施方式中，所述第二活性剂的浓度为约1纳摩尔至约10,000纳摩尔。在其他实施方式中，PAC-1的浓度为约0.1μM至约50μM。在其他的实施方式中，PAC-1的浓度为约1μM至约15μM。在进一步其他一些实施方式中，PAC-1的浓度为约1μM至约5μM。
在其他的不同实施方式中，PAC-1和所述第二活性剂(SAA)的***性浓度示列于表B如下：
表B*
Figure GDA0003146677210000071
*所列浓度(A)-(I)和(1)-(9)的单位为微摩尔(μM)。PAC-1浓度范围沿列读取。SAA浓度范围顺行读取。实施方式被标注为字母和数字。例如，实施方式D2表明PAC-1浓度为约5至约10微摩尔，而SAA浓度为约1至约2微摩尔。
本文还提供了上述组合物，其中a)载体包含水，缓冲液，糖，纤维素，环糊精，二甲亚砜，聚乙二醇，生育酚，脂质体，胶束或其组合，和/或b)赋形剂包括粘合剂，润滑剂，吸附剂，媒介物，崩解剂，防腐剂或其组合。
本文提供了抑制(黑色素瘤)癌细胞的生长或增殖的方法，其包括使癌细胞与有效量的本文所述的组合物接触，从而抑制癌细胞的生长或增殖。此外，本文提供了在(黑色素瘤)癌细胞中诱导凋亡的方法，其包括使癌细胞与有效量的本文所述的组合物接触，由此在癌细胞中诱导凋亡。
另外，本文还提供了一种治疗癌症(黑色素瘤)的方法，其包括向有需要的患者同时或依次施用治疗有效量的化合物PAC-1和有效量的第二活性剂，以任选地***形成本文所述的组合物，从而治疗癌症。在各种实施方式中，PAC-1与所述第二活性剂协同作用，其中所述第二活性剂是恩曲替尼(entrectinib)，多西***(dorsomorphin)，或表A所列的化合物，其中所述药剂的浓度可以是表B中所述的浓度。
在本文的各种实施方式中，所述癌症是葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤。在其他实施方式中，所述葡萄膜黑色素瘤是GNAQ突变，GNA11突变，GNAQ野生型，或GNA11野生型葡萄膜黑色素瘤。在另外的实施方式中，有需要的患者中对癌症治疗的抗性被减轻、延缓或消除。在其他实施方式中，有需要的患者中癌症的转移被减轻、延缓或消除。被减轻、延缓或消除的癌症的转移可以通过本领域普通技术人员已知的方法来确定。
本文还提供了一种方法，其中PAC-1在体内与所述第二活性剂协同作用，其中：
a)PAC-1的浓度为约0.1μM至约50μM，所述第二活性剂的浓度为约1nM至约100μM；
b)PAC-1的浓度为约1μM至约15μM，所述第二活性剂的浓度为约1nM至约10,000nM；或者
c)PAC-1的浓度为约1μM至约5μM，所述第二活性剂的浓度为约1nM至约1000nM。
在本文公开的其他实施方式中，PAC-1的浓度为约0.5μM，约1.5μM，约2μM，约2.5μM，约3μM，约3.5μM，约4μM，约4.5μM，约5μM，约6μM，约7μM，约8μM，约9μM或约10μM。
在一些实施方式中，PAC-1和所述第二活性剂被同时施用于癌症患者。在其他实施方式中，PAC-1和所述第二活性剂被依次施用于癌症患者。在其他实施方式中，PAC-1在所述第二活性剂之前被施用于癌症患者。在另一些实施方式中，PAC-1在所述第二活性剂之后施用于癌症患者。在某些实施方式中，所述第二活性剂是恩曲替尼，多尔***，林西替尼，VS-4718，或其组合。
本发明进一步提供了本文所述的组合物或组合物的联合在制备用于治疗黑色素瘤的药物中的用途。所述组合物可以是包含PAC-1的组合物，包含诸如恩曲替尼的所述第二活性剂的组合物，或其组合，或包含PAC-1和所述第二活性剂的组合物。
在各种实施方式中，黑色素瘤是葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤。在其他各种实施方式中，葡萄膜黑色素瘤具有GNAQ突变或GNA11突变，或者是GNAQ野生型或GNA11野生型。
在各种实施方式中，PAC-1和所述第二活性剂(SAA)的剂量，例如日剂量，列于表C如下：
表C*
Figure GDA0003146677210000081
*所述浓度(A)-(I)和(1)-(9)的剂量单位为毫克(mg)。PAC-1剂量范围沿列读取。SAA剂量范围顺行读取。实施方式被标注为字母和数字。例如，实施方式D2表明PAC-1剂量为约200至约300毫克，而SAA剂量为约50至约100毫克。
本领域技术人员应当会认识到，本文描述的有关特定浓度或浓度范围可以交换为合适的剂量或剂量范围，例如，上述表C中列举的或如下所述的范围或范围的端点。在各种实施方式中，PAC-1和第二活性剂被施用的量是对于葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤的治疗具有协同作用的量。
在其他实施方式中，PAC-1的总剂量为约75mg，约150mg，约250mg，约375mg，约450mg，约625mg，约750mg或约825mg，其中所述总剂量的施用是一天一次，一天两次，或一天三次。
本文提供了第二活性剂(SAA)和化合物PAC-1联合，施用于有需要的患者以治疗癌症(例如黑色素瘤)的各种实施方式，所述用途包括向患者同时或依次施用治疗有效量的SAA和有效量的化合物PAC-1，从而治疗癌症。另外的实施方式提供了PAC-1组合物和恩曲替尼组合物，在对有需要的患者治疗葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤的方法中使用，所述使用包括向患者同时或依次施用治疗有效量的所述PAC-1组合物和治疗有效量的所述恩曲替尼组合物，从而治疗葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤。所述治疗有效量可以是当用于治疗葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤时具有协同作用的量。
其他实施方式提供了所述用途的SAA和化合物PAC-1的组合，其中SAA和化合物PAC-1是同时施用的。其他实施方式提供了所述用途的SAA和化合物PAC-1的组合，其中SAA和化合物PAC-1是依次施用的。其他实施方式提供了所述用途的SAA和化合物PAC-1的组合，其中SAA是在化合物PAC-1之前施用。其他实施方式提供了所述用途的SAA和化合物PAC-1的组合，其中SAA在化合物PAC-1之后施用。
本文描述了诸如体积、质量、百分比、比率等的变量的范围、极限和偏差。本领域普通技术人员应理解，诸如“数目1”至“数目2”的范围表示连续的数字范围，其包括整数和小数。例如，1到10表示1,2,3,4,5,……,9,10，它也表示1.0,1.1,1.2.1.3,……,9.8,9.9,10.0，还表示1.01,1.02,1.03，依此类推。如果所公开的变量是小于“数目10”的数字，则这意味着包括小于数目10的整数和分数的连续范围，如上所述。类似地，如果公开的变量是大于“数目10”的数字，则表示包含大于数目10的整数和分数的连续范围。这些范围可以由术语“约”修饰，其含义前面已有描述。
结果与讨论
UM细胞系中的前体半胱天冬酶-3(Procaspase-3)激活对策：激活前体半胱天冬酶-3的化合物PAC-1已显示为前体半胱天冬酶-3向活性半胱天冬酶-3的有效激活剂，可诱导细胞凋亡。UM细胞系表达前体半胱天冬酶-3(图1)，而PAC-1在一组UM细胞系中具有作为单一药剂的活性(表D)。
表D：在72小时孵育之后的一组葡萄膜黑色素瘤细胞系中PAC-1的IC50值。显示的值是三个独立实验的平均值，而误差为报告为s.e.m。
Figure GDA0003146677210000091
当前葡萄膜黑色素瘤的治疗：对于葡萄膜黑色素瘤的报告有40多项临床试验，平均反应率为4％。当前的护理标准是达卡巴嗪(dacarbazine)。在最近一项随机的临床SUMMIT试验中，司美替尼(selumetinib)联合达卡巴嗪(dacarbazine)治疗转移性葡萄膜黑色素瘤患者的客观缓解率为3％，司美替尼(selumetinib)加达卡巴嗪(dacarbazine)治疗组的无进展生存期(PFS)为2.8个月。3个月和6个月的PFS率分别为38％和10％。总体生存期仅为10个月。
恩曲替尼(Entrectenib)：恩曲替尼是一种有效的酪氨酸激酶抑制剂，可靶向NTRK，ROS1和ALK中的致癌性重排。两项I期试验显示，未使用酪氨酸激酶抑制剂的患者具有一定的颅内活性。在ROS1重排的肺癌中，恩曲替尼导致持久的疾病控制和延长的无进展生存期。该药物具有良好的耐受性，其安全性特征包括靶标原肌球蛋白相关激酶A/B/C抑制介导的不良事件。任何级别最常见的与治疗相关的不良事件是疲劳/乏力(46％,n＝55/119)，消化不良(42％,n＝50/119)，感觉异常(29％,n＝34/119)，恶心(28％,n＝33/119)，以及肌痛(23％,n＝27/119)。
PAC-1和治疗相关抑制剂的联合作用：PAC-1已显示出与多种临床相关药物的协同作用，包括激酶抑制剂(Mol.Cancer Ther.2016,15,1859；Cell Chem.Biol.2018,25,996)。通过与多种临床相关激酶抑制剂联合筛选PAC-1，可以利用这种协同作用。这个有偏差的筛选结果如图2所示。
PAC-1和恩曲替尼的组合从这种筛选看出是很明显的。例如，PAC-1和恩曲替尼的浓度，作为单一药物时，各自导致～16％的死亡，而组合导致75％的死亡(图2)。恩曲替尼是pan-TRK融合，ALK融合和ROS1融合激酶抑制剂。这三种融合蛋白是多种癌症类型中改变的关键驱动因素。有趣的是，这些融合蛋白，其亲本激酶和/或脱靶激酶没有被报道为UM中的主要致癌驱动因素，并且可能指向UM中尚未探索的治疗途径。为了进一步探索这种组合，在一组UM细胞系中对观察到的协同作用进行了量化(图3)。
有趣的是，在GNAQ/11细胞系中观察到了最大的反应(通过细胞死亡和CI值来衡量)。虽然GNAQ/11WT细胞(MEL285和MEL290)的细胞死亡较低，但CI值低于1，表明在这些细胞系中具有协同作用。在广泛的PAC-1和恩曲替尼浓度范围内，在突变GNAQ UM细胞系中观察到的这种效应是一致的(图4)。
由于尚未阐明恩曲替尼在UM细胞中的靶标，因此在一组癌细胞系中寻求确定这种组合是否具有协同作用(图5)。PAC-1和恩曲替尼的组合在UM GNAQ/11突变细胞系中似乎是最有效和协同的。其他黑色素瘤细胞系的平均CI值也低于1，表明具有协同作用，而其他评估的癌细胞系则没有协同作用(图5)。重要的是，这种组合在非癌性正常细胞系HFF-1中不会导致明显的细胞死亡并且也不具有协同作用。
本文所述结果提供了治疗葡萄膜黑色素瘤的新对策。PAC-1和恩曲替尼的组合已被证明对于葡萄膜和皮肤黑色素瘤的临床治疗具有令人兴奋的前景。恩曲替尼完成了两项对患者有希望的活性和有限毒性的I期临床试验，而PAC-1目前正在人类中进行I期临床试验。因此，恩曲替尼加PAC-1的联合治疗有望针对葡萄膜黑色素瘤和密切相关的癌症提供有效的临床治疗。
药物制剂
本文所述的化合物可用于制备治疗性药物组合，例如，通过将所述化合物与药学上可接受的稀释剂、赋形剂或载体组合。所述化合物可以以盐或溶剂合物的形式加入到载体中。例如，在化合物具有足够碱性或酸性以形成稳定的无毒酸或碱盐的情况下，以盐形式施用所述化合物可能是合适的。药学上可接受的盐的实例为与形成生理学上可接受的阴离子的酸形成的有机酸加成盐，例如甲苯磺酸盐，甲磺酸盐，乙酸盐，柠檬酸盐，丙二酸盐，酒石酸盐，琥珀酸盐，苯甲酸盐，抗坏血酸盐，α-酮戊二酸盐和-甘油磷酸盐。也可以形成合适的无机盐，包括盐酸盐，卤化物，硫酸盐，硝酸盐，碳酸氢盐和碳酸盐。
药学上可接受的盐可以使用本领域公知的标准方法获得，例如通过使足够碱性的化合物例如胺与合适的酸反应以提供生理上可接受的离子化合物。羧酸的碱金属(例如钠，钾或锂)或碱土金属(例如钙)的盐也可以用类似的方法制备。
本文所述式的化合物可以配制成药物组合并以多种形式施用于哺乳动物宿主，例如人类患者。所述形式可以特别适合于选择的给药途径，例如口服或者通过静脉内、肌肉内、局部或皮下途径的肠胃外给药。
本文所述的化合物可以与药学上可接受的载体(例如惰性稀释剂或可吸收的可食用载体)一起全身给药。对于口服给药，可将化合物封装在硬的或软壳胶囊中，压成片剂，或直接掺入患者饮食的食物中。所述化合物还可以与一种或多种赋形剂组合，并以可消化片剂，口腔片剂，锭剂，胶囊剂，酏剂，混悬剂，糖浆剂，糯米纸囊剂等的形式使用。这样的组合物和制剂通常含有至少0.1％的活性化合物。组合物和制剂的百分比可以变化，并且可以方便地为设定单位剂型重量的约0.5％至约60％，约1％至约25％或约2％至约10％。这种治疗上有用的组合物中的活性化合物的量可以是使得达到有效剂量水平。
片剂，锭剂，丸剂，胶囊剂等也可以含有一种或多种以下物质：粘合剂，如黄蓍胶、***胶、玉米淀粉或明胶；赋形剂，如磷酸二钙；崩解剂，如玉米淀粉、马铃薯淀粉、海藻酸等；；以及润滑剂，如硬脂酸镁。可以添加甜味剂，如蔗糖、果糖、乳糖或阿斯巴甜；或调味剂，如薄荷、冬青油或樱桃调味料。当单位剂型是胶囊时，除了上述类型的材料之外，它还可以含有液体载体，例如植物油或聚乙二醇。各种其他材料可作为包衣或以其他方式改变固态单位剂型的物理形式。例如，片剂、丸剂或胶囊剂可以包覆有明胶、蜡、虫胶或糖等。糖浆或酏剂可含有活性化合物，作为甜味剂的蔗糖或果糖，作为防腐剂的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯，染料和诸如樱桃或橙调味料的调味剂。用于制备任何单位剂型的任何材料应该是药学上可接受的，并且在所述用量上基本上无毒。另外，可将活性化合物掺入缓释制剂和装置中。
所述活性化合物可通过输液或注射经静脉内或腹膜内给药。所述活性化合物或其盐的溶液可以在水中制备，可选择地与无毒表面活性剂混合。分散体可以在甘油、液体聚乙二醇、甘油三乙酸酯或其混合物中或在药学上可接受的油中制备。在普通的储存和使用条件下，制剂可含有防腐剂以防止微生物的生长。
适用于注射或输注的药物剂型可以包括无菌水溶液、分散体或无菌粉末，其包含适合即时制备无菌可注射或输注溶液或分散体的活性成分，可选择地包封在脂质体中。最终的剂型应该是无菌的、流体的以及在制造和储存的条件下稳定的。液体载体或赋形剂可以是溶剂或液态分散介质，包含例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液体聚乙二醇等)、植物油、无毒甘油酯和其合适的混合物。例如，适合的流动性能可以通过形成脂质体，通过在分散体的情况下维持所需的粒度，或通过使用表面活性剂来维持。对微生物作用的防止可以通过各种抗菌剂和/或抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等来实现。在许多情况下，优选地可以包括等渗剂，例如糖、缓冲剂或氯化钠。可注射组合物的延长吸收可通过使用延缓吸收的试剂，例如单硬脂酸铝和/或明胶。
无菌可注射溶液的制备可以是通过将所需量的活性化合物与上文列举的各种其它成分(如果需要)合并在适当的溶剂中，并且根据需要可选择地随后过滤除菌来进行。在采用制备无菌注射溶液的无菌粉末的情况下，制备方法可以包括真空干燥和冷冻干燥技术，其形成活性成分加上在溶液中需要的任何额外成分的粉末。
对于局部给药，所述化合物可以以纯净形式使用，例如当它们是液体时。然而，通常期望以例如与皮肤学上可接受的载体组合的组合物或制剂的形式将活性剂施用到皮肤，而所述载体可以是固体、液体、凝胶等。
可用的固体载体包括细碎的固体，如滑石、粘土、微晶纤维素、二氧化硅、氧化铝等。可用的液体载体包括水、二甲基亚砜(DMSO)、醇、二醇或水-醇/二醇混合物，其中化合物能够以有效的浓度溶解或分散，可选择地借助于无毒的表面活性剂。辅助剂如香料和其他抗微生物剂也可添加用以针对给定用途进行性能优化。所得的液体组合物可以从吸收垫施用，用于浸渍绷带和其它敷料，或者使用泵式或气溶胶喷雾器喷射到患处。
增稠剂，例如合成聚合物、脂肪酸、脂肪酸盐和酯、脂肪醇、改性纤维素或改性矿物材料，也可以与液体载体一起使用，形成可涂抹的糊剂，凝胶剂，软膏剂，皂剂等，以直接施用到使用者的皮肤。
用于将活性剂递送至皮肤的皮肤病学组合物的实例是本领域已知的；例如，参见美国专利号4,992,478(Geria),4,820,508(Wortzman),4,608,392(Jacquet et al.),和4,559,157(Smith et al.)。此类皮肤病学组合物可以与本文所述的化合物组合使用，其中此类组合物的成分可以任选地被本文所述的化合物替代，或者可以将本文所述的化合物添加至所述组合物中。
本文所述化合物或组合物的有用剂量可通过比较其体外活性和动物模型中的体内活性来确定。用于将小鼠和其它动物中的有效剂量外推至人的方法是本领域已知的；例如参见美国专利4,938,949(Borch et al.)。用于治疗所需的化合物或其活性盐或衍生物的量将不仅随着所选择的具体化合物或盐而变化，而且随着给药途径，被治疗病症的性质以及患者的年龄和状况，最终由门诊或临床医师决定。
然而，通常活性剂的合适剂量可以是约0.5至约100mg/kg，例如约10至约75mg/kg体重每天，例如约3至约50mg每天每公斤接受者体重，优选6至90mg/kg/天，最优选15至60mg/kg/天。
所述化合物可以方便地施用为单位剂量形式，例如，每单位剂型含有活性成分5至1000mg，方便地10至750mg，最方便地50至500mg。在一种实施方式中，本发明提供了包含以这种单位剂型配制的本发明化合物的组合物。
所述化合物可以方便地施用为单位剂量形式，例如，每单位剂型含有活性成分5至1000mg/m2，方便地10至750mg/m2，最方便地50至500mg/m2。所需剂量可以方便地以单剂量或以适当间隔例如每天二、三、四或更多个亚剂量施用的分剂量存在。所述亚剂量本身可以进一步分为例如多个离散的松散间隔的给药。
期望的剂量可以方便地配制为单剂量，或者以分开剂量用于合适的时间间隔，例如每天二、三、四或更多个亚剂量。所述亚剂量本身还可以进一步分开，例如分成多个各自大致分隔的给药；例如从吹药器多次吸入或通过将多滴药液滴入眼中。
本文所述的化合物和组合物可以有效地用作抗癌药，并且当单独使用以标准的单药有效剂量治疗癌症时，与例如恩曲替尼相比，具有更高的功效和/或降低的毒性。
本发明提供了在哺乳动物(或脊椎动物)中的癌症治疗方法，其包括对患有癌症的哺乳动物施用有效量的本文所述的化合物或组合物。所述哺乳动物包括灵长类动物，人类，啮齿动物，犬，猫，牛，绵羊，马，猪，山羊，牛等。所述癌症是指任何各种类型的恶性肿瘤，例如结肠癌，乳腺癌，(葡萄膜)黑色素瘤和白血病，并且通常以不良细胞增殖为特征，例如细胞生长不受控制，分化不足，局部组织浸润和转移。癌症是指任何类型的恶性肿瘤，例如结肠癌，乳腺癌，(葡萄膜)黑色素瘤和白血病，并且通常特征为不良细胞增殖，例如细胞生长不受控制，分化不足，局部组织浸润和转移。
本发明化合物治疗癌症的能力可以通过使用本领域周知的测定法来确定。例如，治疗方案的设计，毒性评估，数据分析，肿瘤细胞杀伤的定量以及使用可移植肿瘤筛查的生物学意义是已知的。
以下实施例是用来对上述发明内容进行说明，而不应被解释为缩小发明的范围。本领域技术人员应很容易的认识到所述实施例能够提示本发明可以通过很多其他方法来实施。应当理解，在本发明的范围内可以进行很多的变化和修改。
实施例
实施例1：临床研究
PAC-1已通过7种PAC-1剂量水平(范围：75-750mg)在34位人类患者中使用。两位患者在PAC-1治疗的第一个周期中有进展。有32位患者接受了PAC-1至少2个配药周期(一个周期是21天每日给药，接着是7天无药物)。由于疾病反应稳定，六位患者接受了PAC-1的4个周期，三位患者接受了PAC-1的6个周期，而两位患者接受了PAC-1的10个周期。没有观察到与PAC-1给药相关的严重不良事件(SAE)。此外，在仔细审查所有神经和神经认知评估以及通过剂量水平7(750毫克)收集的数据后，没有发现与PAC-1剂量相关的神经毒性的确切迹象。尽管如此，在GLP狗PK/临床前PAC-1毒性研究中观察到的脑组织变化都强调了在检测与PAC-1暴露相关的任何可能的神经学变化方面需要持续的神经学和神经认知测试以及观察努力。
葡萄膜黑色素瘤中恩曲替尼和PAC-1活性的临床前数据
在七种葡萄膜黑色素瘤细胞系(GNAQ突变:MEL270,92.1,MEL202,OMM2.5,GNA11突变:OMM1,以及GNAQ和GNA11野生型:MEL285，和MEL290)中进行了PAC-1和恩曲替尼的组合的体外研究。在所有七个细胞系中均观察到了PAC-1和恩曲替尼的协同杀伤作用。相信恩曲替尼在患有转移性黑色素瘤的人类患者中与PAC-1协同作用，并产生无进展生存期的显著延长。
目标和端点
正在进行对于使用了恩曲替尼和PAC-1治疗的患有转移性葡萄膜黑色素瘤的受试者采用RECIST v1.1正在进行无进展生存(PFS)率的测量(表1)。恩曲替尼和PAC-1组合的安全性正在通过转移性葡萄膜黑色素瘤受试者的药物相关不良事件(AE)的发生率和严重性进行评估。使用RECIST v.1.1和影像学，确定了接受恩曲替尼和PAC-1治疗的转移性葡萄膜黑色素瘤受试者的客观缓解率[完全缓解(CR)+部分缓解(PR)]。使用RECIST v1.1确定了转移性葡萄膜黑色素瘤受试者的反应持续时间。正在测量接受恩曲替尼和PAC-1治疗的转移性葡萄膜黑色素瘤受试者的总生存(OS)率。正在确定葡萄膜黑色素瘤组织中前体半胱天冬酶3的表达，以及DNAQ和DNA11突变与前体半胱天冬酶3表达存在之间的相关性。
表1：有关治疗研究。任一种活性剂的剂量水平可在40mg至750mg之间变化。
Figure GDA0003146677210000131
剂量水平 PAC-1剂量(mg,口服) 恩曲替尼(mg,口服) 患者数量*
1 500每天 400每天 3-6
2 500每天 600每天 3-6
3 625每天 600每天 3-6
实施例2：药物剂型
下述制剂描述了能够用于治疗性施用本文所述化合物或本文所述结构式的化合物的代表性药物剂型，每种可选择地以药学上可接受的盐或溶剂化物的形式，并且每种可选择地与一种或多种可药用稀释剂、赋形剂或载体组合；在下文中称为“组合物X”。所述组合物X可以包括单一药剂(例如，PAC-1或恩曲替尼)，或者所述组合物X可以包括两种或更多种活性剂(例如，PAC-1和恩曲替尼)的组合。以下剂量仅是代表性的。可以针对较大或较小的剂量单位调整(例如，基本上成比例地)每种制剂中的活性剂和其他组分的量，或者对于较大或较小的剂量单位，可以将每种制剂中的活性剂的量调整为更高或更低，而保持其他组分的相对比例在所述水平。
Figure GDA0003146677210000141
Figure GDA0003146677210000151
Figure GDA0003146677210000161
这些制剂可以通过制药领域公知的常规方法制备。应当理解，上述药物组合可根据公知的制药技术进行改变，以适应不同量和不同类型的活性成分“化合物X”。气雾剂(vi)可以与标准计量喷雾器结合使用。另外，具体的成分和比例只是用来进行说明。根据需要的剂型的期望的性质，具体成分可以用合适的等价物(例如上述成分)替代，并且比例也可以改变。
文中描述了上述的一些实施方式和实施例，但这些描述都只是示意和说明性的，对本发明的范围不产生限制作用。根据本领域的普通技术可能进行一些改变和修饰，然而并不脱离本发明由下列权利要求所定义的较为宽泛的范围。
所有的出版物、授权专利和专利申请文献均通过参考纳入文本，就如各自单独通过参考纳入本文那样。由这些公开物，应当不会引入与本文公开内容不一致的限制。本发明的描述引述了各种特定和优选的实施方式和技术方案。应当理解，还有许多变化和修饰可被采纳，仍然都应属于本发明的精神和范围。

Claims (21)

1.一种组合物，其包含：
(a)化合物PAC-1：
Figure FDA0002999663890000011
(b)至少一种第二活性剂，其中所述第二活性剂是酪氨酸激酶的抑制剂，单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)的抑制剂,或其组合；以及
(c)任选的药学上可接受的稀释剂，赋形剂，载体，或其组合。
2.权利要求1所述的组合物，其中所述第二活性剂是神经营养受体酪氨酸激酶(NTRK)，C-ros癌基因1(ROS1)，间变性淋巴瘤激酶(ALK)，或其组合的抑制剂；或者
其中所述第二活性剂是原肌球蛋白受体激酶A(TrkA)，原肌球蛋白受体激酶B(TrkB)，原肌球蛋白受体激酶C(TrkC)，或其组合的抑制剂；或者
其中所述第二活性剂是Janus激酶1(JAK1)，Janus激酶2(JAK2)，Janus激酶3(JAK3)，活化的CDC42激酶1(ACK1)，***1受体(IGF1R)，黏着斑激酶(FAK)，Fms样酪氨酸激酶3(FLT3)，乳腺肿瘤激酶(BRK)，胰岛素受体(IR)，Aurora-2激酶(AUR2)，RET受体酪氨酸激酶(RET)，非受体酪氨酸蛋白激酶1(TNK1)，或其组合的抑制剂。
3.权利要求1所述的组合物，其中所述第二活性剂是恩曲替尼。
4.权利要求1所述的组合物，其中所述第二活性剂是多西***。
5.权利要求1-4任一项所述的组合物，其中所述第二活性剂的浓度为约1nM至约100μM。
6.权利要求5所述的组合物，其中所述第二活性剂的浓度为约1纳摩尔至约10,000纳摩尔。
7.权利要求1-4任一项所述的组合物，其中PAC-1的浓度为约0.1μM至约50μM。
8.权利要求7所述的组合物，其中PAC-1的浓度为约1μM至约15μM。
9.权利要求7所述的组合物，其中PAC-1的浓度为约1μM至约5μM。
10.权利要求1所述的组合物，其中所述组合物包含水，缓冲剂，糖，纤维素，环糊精，二甲亚砜，聚乙二醇，生育酚，脂质体，胶束，粘合剂，润滑剂，吸附剂，媒介物，崩解剂，防腐剂，或其组合。
11.一种抑制黑色素瘤癌细胞生长或增殖的方法，其包括使癌细胞与有效量的权利要求1-4任一项所述的组合物接触，从而抑制癌细胞的生长或增殖；或者
一种在黑色素瘤癌细胞中诱导凋亡的方法，其包括使癌细胞与有效量的权利要求1-4任一项所述的组合物接触，其中由此在癌细胞中诱导凋亡。
12.一种治疗黑色素瘤的方法，其包括向有需要的患者同时或依次施用治疗有效量的化合物PAC-1和有效量的第二活性剂，其中PAC-1和所述第二活性剂以所施用的剂量水平对黑色素瘤协同作用，从而治疗黑色素瘤。
13.权利要求12所述的方法，其中所述黑色素瘤是葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤。
14.权利要求13所述的方法，其中葡萄膜黑色素瘤是GNAQ突变，GNA11突变，GNAQ野生型，或GNA11野生型葡萄膜黑色素瘤。
15.权利要求12所述的方法，其中有需要的患者中对黑色素瘤治疗的抗性被减轻、延缓或消除，或者，有需要的患者中黑色素瘤的转移被减轻、延缓或消除。
16.权利要求12所述的方法，其中PAC-1在体内与所述第二活性剂协同作用，其中：
a)PAC-1的浓度为约0.1μM至约50μM，所述第二活性剂的浓度为约1nM至约100μM；
b)PAC-1的浓度为约1μM至约15μM，所述第二活性剂的浓度为约1nM至约10,000nM；或者
c)PAC-1的浓度为约1μM至约5μM，所述第二活性剂的浓度为约1nM至约1000nM。
17.权利要求12所述的方法，其中PAC-1和所述第二活性剂被同时施用于患者。
18.权利要求12所述的方法，其中PAC-1和所述第二活性剂被依次施用于患者。
19.权利要求12所述的方法，其中所述第二活性剂是恩曲替尼。
20.一种治疗葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤的方法，其包括向有需要的患者同时或依次施用治疗有效量的PAC-1和治疗有效量的恩曲替尼，其中PAC-1和恩曲替尼以所施用的剂量水平对黑色素瘤协同作用，从而治疗黑色素瘤。
21.PAC-1组合物和恩曲替尼组合物，在对有需要的患者治疗葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤的方法中使用，所述使用包括向患者同时或依次施用治疗有效量的所述PAC-1组合物和治疗有效量的所述恩曲替尼组合物，从而由此治疗葡萄膜黑色素瘤或皮肤黑色素瘤。
CN201980064553.4A 2018-10-05 2019-10-03 用于治疗葡萄膜黑色素瘤的联合疗法 Pending CN113329749A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862742063P 2018-10-05 2018-10-05
US62/742,063 2018-10-05
PCT/US2019/054500 WO2020072774A1 (en) 2018-10-05 2019-10-03 Combination therapy for the treatment of uveal melanoma

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN113329749A true CN113329749A (zh) 2021-08-31

Family

ID=70055373

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201980064553.4A Pending CN113329749A (zh) 2018-10-05 2019-10-03 用于治疗葡萄膜黑色素瘤的联合疗法

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20220000862A1 (zh)
EP (1) EP3852744A4 (zh)
JP (1) JP2022504184A (zh)
KR (1) KR20210084442A (zh)
CN (1) CN113329749A (zh)
AU (1) AU2019354771A1 (zh)
CA (1) CA3114385A1 (zh)
IL (1) IL281997A (zh)
MX (1) MX2021003490A (zh)
SG (1) SG11202102485TA (zh)
WO (1) WO2020072774A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022101484A1 (en) * 2020-11-16 2022-05-19 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for predicting and treating uveal melanoma
CN113318230B (zh) * 2021-06-11 2022-08-26 上海交通大学医学院附属第九人民医院 Optineurin在眼部黑色素瘤诊治中的应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104507479A (zh) * 2012-03-06 2015-04-08 伊利诺伊大学评议会 通过联合治疗的半胱天冬酶-3酶原激活
CN108135896A (zh) * 2015-06-05 2018-06-08 伊利诺伊大学董事会 Pac-1联合疗法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2018007266A (es) * 2015-12-18 2018-11-09 Ignyta Inc Combinaciones para el tratamiento del cancer.
JP7098615B2 (ja) * 2016-12-05 2022-07-11 フェイト セラピューティクス，インコーポレイテッド 養子免疫療法における免疫細胞調節のための組成物および方法
JOP20190213A1 (ar) * 2017-03-16 2019-09-16 Array Biopharma Inc مركبات حلقية ضخمة كمثبطات لكيناز ros1
MX2020004991A (es) * 2017-11-17 2022-02-10 Univ Illinois Terapia oncológica mediante la degradación de la señalización dual de mek.

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104507479A (zh) * 2012-03-06 2015-04-08 伊利诺伊大学评议会 通过联合治疗的半胱天冬酶-3酶原激活
CN108135896A (zh) * 2015-06-05 2018-06-08 伊利诺伊大学董事会 Pac-1联合疗法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王永生;周彩存;: "ALK抑制剂研究进展", 中国医学前沿杂志(电子版), no. 07, pages 47 *

Also Published As

Publication number Publication date
SG11202102485TA (en) 2021-04-29
MX2021003490A (es) 2021-06-18
IL281997A (en) 2021-05-31
EP3852744A1 (en) 2021-07-28
JP2022504184A (ja) 2022-01-13
KR20210084442A (ko) 2021-07-07
EP3852744A4 (en) 2022-06-08
WO2020072774A1 (en) 2020-04-09
CA3114385A1 (en) 2020-04-09
US20220000862A1 (en) 2022-01-06
AU2019354771A1 (en) 2021-04-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3618875B1 (en) Combination therapy comprising a raf inhibitor and trametinib
TWI746449B (zh) 使用阿吡莫德治療癌症之方法
AU2019394218B2 (en) Methods for cancer therapy
CN113329749A (zh) 用于治疗葡萄膜黑色素瘤的联合疗法
EP4197539A1 (en) Use of pyrido[1,2-a]pyrimidinone compound in treating peripheral t cell lymphoma
WO2023168036A1 (en) Method of treatment including kras g12c inhibitors and shp2 inhibitors
TW202333729A (zh) 組合
US20230355618A1 (en) Raf inhibitor for treating low grade glioma
JP7357386B2 (ja) 化合物又はその薬学的に許容される塩、二量体又は三量体のがん治療用医薬品の調製における応用
JP7381115B2 (ja) 組成物及びがん治療用医薬品の調製におけるその応用
KR102486126B1 (ko) 알펠리십을 포함하는 제약 조성물
KR102363043B1 (ko) Pi3 키나아제 억제제 및 세포독성 항암제를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
EP3782620B1 (en) Pharmaceutical composition comprising 1,2-naphthoquinone derivative for use in preventing or treating acute myeloid or lymphoblastic leukemia
EP4110326B1 (en) Combination comprising alpelisib and 6-(2,4-dichlorophenyl)-5-[4-[(3s)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl]oxyphenyl]-8,9-dihydro-7h-benzo[7]annulene-2-carboxylic acid
US20230321110A1 (en) Combination therapy of a raf inhibitor and a mek inhibitor for the treatment of sarcoma
MXPA06003056A (es) Tratamiento de tumores estromales gastrointestinales con imatinib y midostaurin.
US20240115582A1 (en) Use of sodium trans-[tetrachloridobis(1h-indazole)ruthenate(iii)] for treating cancers
WO2014081029A1 (ja) 抗がん剤による末梢神経障害の予防、治療、または軽減剤
WO2023159184A1 (en) Drug combinations and methods of treating ovarian cancer
CN117460509A (zh) 作为c-Met激酶抑制剂的化合物治疗I型神经纤维瘤病的用途
CN117729922A (zh) Egfr抑制剂的药物组合及其应用
CN114787151A (zh) 喹唑啉衍生物或其盐、或其药物组合物的用途
KR20240040407A (ko) 사쿠비트릴ㆍ발사르탄 칼슘염을 포함하는 약제학적 조성물
US20060009475A1 (en) Quinazolinone compounds in combined modalities for improved cancer treatment
CN117042772A (zh) 用于治疗低级别胶质瘤的raf抑制剂

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40061016

Country of ref document: HK