CN113304218B - 治疗猫杯状病毒感染的中药 - Google Patents
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Abstract
一种治疗猫杯状病毒感染的中药,属于动物药技术领域。本发明目的是针对猫杯状病毒的症状,结合中医理论,能对患病动物的机体起到整体调节作用的治疗猫杯状病毒感染的中药。本发明制成有效成分组成为:青黛、儿茶、生石膏、黄芪、白芍、麦冬、炒白术、桔梗、辛夷、甘草、化橘红、陈皮、法半夏、杏仁。本发明对患病动物的机体起到整体调节的作用,具有毒副作用小,不易产生耐药性,低致敏性等多种特点。因此,探究青黛散加减对猫杯状病毒感染的治疗效果对攻克猫杯状病毒治疗难题具有重要意义。
Description
技术领域
本发明属于动物药技术领域。
背景技术
猫杯状病毒感染是一种由猫杯状病毒(FCV)感染而引起猫的一种全身性或呼吸道症状疾病。近年来,由FCV感染引起的致命性全身性疾病的死亡率已高达50%。FCV感染的主要临床症状是上呼吸道症状、口腔溃疡和发热。在少数情况下,FCV 感染还与急性跛行综合征、流产、肠炎和严重肺炎有关。
猫杯状病毒(FCV)是一种直径约30-35nm的小型无包膜RNA病毒,属于杯状病毒科的杯状病毒属。与其他RNA病毒一样,FCV的基因组不断发生快速突变,随着时间的推移,这增加了毒株的多样性。但尽管FCV分离株之间存在广泛的抗原多样性,但它们之间的抗原交叉反应程度足以将它们归类为单一血清型。目前,猫杯状病毒(FCV)在世界范围内流行,据欧洲猫病咨询委员会统计,FCV在家养宠物猫中的流行率为10%,但在多猫环境中,如***、猫群集聚地和猫舍,高达40%的猫检测到FCV。猫科动物是主要易感动物,FCV不仅能在猫中传播,也能在狮子、虎和猎豹中传播。
猫杯状病毒感染有三种感染形式:急性猫杯状病毒感染、慢性猫杯状病毒感染和强毒性全身性猫杯状病毒感染。急性或慢性的FCV感染通常是由对疫苗敏感的FCV毒株引起的,其并不致命。但是强毒性全身性FCV感染,至少是由两种不同的、高毒力的、对疫苗具有抗性的FCV毒株引起。急性FCV感染在临床上很普遍,而慢性FCV感染是猫急性感染后的不常见的后遗症。强毒性全身性FCV感染很罕见,其特征是在***、宠物医院、多猫家庭等猫聚集的环境中迅速蔓延的急性暴发。
猫杯状病毒的预防主要通过接种疫苗来实现,但是接种疫苗并不能产生消灭病毒的免疫力,由于FCV的广泛抗原性差异,接种疫苗只能减轻FCV感染的临床症状而不能防止动物感染、发病和排毒。因此,加强饲养管理,切断其传播途径是预防FCV感染的重要手段。保持环境整洁干燥,通风良好,定期全面消毒,隔离带病猫。同时应加强猫的自身抵抗力,保证其营养需求。
目前还没有针对FCV感染的特异性药物,FCV感染的治疗手段主要是对症治疗和支持治疗相结合。对症治疗即根据病猫相应的临床症状给予药物,而支持治疗应用于猫杯状病毒感染的危重病例尤其是患有口炎的猫。当猫患有口炎时易出现食欲废绝的情况,这时要通过口/鼻胃管或静脉输液进行营养支持疗法。临床上用于治疗猫杯状病毒感染的常见药物有干扰素、多西环素,口炎病例中用碘甘油涂抹患处。广谱抗生素也被广泛应用于猫感染杯状病毒后防止继发细菌感染。速诺注射液是临床上广泛应用于上呼吸道感染病例中的抗生素,有效成分是阿莫西林克拉维酸钾,用于家畜及小动物青霉素敏感菌引起的感染。
前人研究证明,中药提取物对猫杯状病毒感染具有很好的防治效果,中药富含多种天然的活性物质成分,包括萜烯、类固醇、生物碱和类黄酮等,其中一些成分被发现在体外实验中能抑制猫杯状病毒的复制。猫杯状病毒感染没有良好的临床治疗药物,常用的猫用干扰素和抗生素长期使用都有一定的副作用。干扰素能发挥广谱抗病毒作用,但是长期使用会有抑郁、易疲劳的不良反应。而长期使用抗生素易引发各种毒性反应,增加细菌耐药性,导致菌群失调,且有些动物个体对抗生素有过敏反应。
发明内容
本发明目的是针对猫杯状病毒的症状,结合中医理论,能对患病动物的机体起到整体调节作用的治疗猫杯状病毒感染的中药。
本发明制成有效成分的原料重量份组成为:
青黛20-40、儿茶20-40、生石膏20-40、黄芪10-30、白芍10-30、麦冬10-30、炒白术10-30、桔梗5-15、辛夷5-15、甘草5-15、化橘红5-15、陈皮5-15、法半夏5-15、杏仁5-15。
本发明对患病动物的机体起到整体调节的作用,具有毒副作用小,不易产生耐药性,低致敏性等多种特点。因此,探究青黛散加减对猫杯状病毒感染的治疗效果对攻克猫杯状病毒治疗难题具有重要意义。
具体实施方式
本发明制成有效成分的原料重量份组成为:
青黛20-40、儿茶20-40、生石膏20-40、黄芪10-30、白芍10-30、麦冬10-30、炒白术10-30、桔梗5-15、辛夷5-15、甘草5-15、化橘红5-15、陈皮5-15、法半夏5-15、杏仁5-15。
称取上述组分中药,加蒸馏水完全没过中药,浸泡30min,然后大火煎开,待水沸腾后,改为文火,煎煮15min。煎煮完后用3层纱布过滤,滤液转入圆底烧瓶,用旋转蒸发仪浓缩至1g/mL-3g/mL的浓度。
实施例1:
本发明制成有效成分的原料重量份组成为:
青黛20、儿茶20、生石膏20、黄芪10、白芍10、麦冬10、炒白术10、桔梗5、辛夷5、甘草5、化橘红5、陈皮5、法半夏5、杏仁5。
称取上述组分中药,加蒸馏水完全没过中药,浸泡30min,然后大火煎开,待水沸腾后,改为文火,煎煮15min。煎煮完后用3层纱布过滤,滤液转入圆底烧瓶,用旋转蒸发仪浓缩至1g/mL-3g/mL的浓度。
实施例2
本发明制成有效成分的原料重量份组成为:
青黛30、儿茶30、生石膏30、黄芪20、白芍20、麦冬20、炒白术20、桔梗10、辛夷10、甘草10、化橘红10、陈皮10、法半夏10、杏仁10。
称取上述组分中药,加蒸馏水完全没过中药,浸泡30min,然后大火煎开,待水沸腾后,改为文火,煎煮15min。煎煮完后用3层纱布过滤,滤液转入圆底烧瓶,用旋转蒸发仪浓缩至1g/mL-3g/mL的浓度。
实施例3
本发明制成有效成分的原料重量份组成为:
青黛40、儿茶40、生石膏40、黄芪30、白芍30、麦冬30、炒白术30、桔梗15、辛夷15、甘草15、化橘红15、陈皮15、法半夏15、杏仁15。
称取上述组分中药,加蒸馏水完全没过中药,浸泡30min,然后大火煎开,待水沸腾后,改为文火,煎煮15min。煎煮完后用3层纱布过滤,滤液转入圆底烧瓶,用旋转蒸发仪浓缩至1g/mL-3g/mL的浓度。
以下对本发明做详细的说明:
本发明中药复方组合物,组成原料为:青黛20-40份、儿茶20-40份、生石膏20-40份、黄芪10-30份、白芍10-30份、麦冬10-30份、炒白术10-30份、桔梗5-15份、辛夷5-15份、甘草5-15份、化橘红5-15份、陈皮5-15份、法半夏5-15份、杏仁5-15份。
本发明中兽药制剂包括如下重量份数配比的中药材:青黛20-30份,儿茶20-30份,生石膏20-30份,黄芪15-25份,白芍15-25份,麦冬15-25份,炒白术15-25份,桔梗5-10份,辛夷5-10份,甘草5-10份,化橘红5-10份,陈皮5-10份,法半夏5-10份,杏仁5-10份。
本发明中兽药制剂包括如下重量份数配比的中药材:青黛20份、儿茶30份、生石膏30份、黄芪20份、白芍20份、麦冬20份、炒白术20份、桔梗10份、辛夷10份、甘草10份、化橘红10份、陈皮10份、法半夏10份、杏仁10份。
本发明的用法用量为:
0.5-2g药物/kg猫,一天2次,连用7天。
本发明的另一个目的是本发明的中药复方制剂在治疗猫杯状病毒感染中的应用。
中药富含多种天然的活性物质成分,包括萜烯、类固醇、生物碱和类黄酮等,其中一些成分被发现在体外实验中能抑制猫杯状病毒的复制。猫杯状病毒感染没有良好的临床治疗药物,常用的猫用干扰素和抗生素长期使用都有一定的副作用。干扰素能发挥广谱抗病毒作用,但是长期使用会有抑郁、易疲劳的不良反应。而长期使用抗生素易引发各种毒性反应,增加细菌耐药性,导致菌群失调,且有些动物个体对抗生素有过敏反应。中药治疗能对患病动物的机体起到整体调节的作用,具有毒副作用小,不易产生耐药性,低致敏性等多种特点。
本发明复方制剂,由青黛散加减而成。青黛散,方中青黛性味咸、寒,具有清热解毒、凉血之效,主治口舌生疮,为方中君药。黄连、黄柏清热燥湿、清热解毒,分别入心经和肾经清泻心火、肾火,助青黛发挥清热解毒燥湿之效,为臣药。青黛配黄连、黄柏,可退湿热,以除寒热往来。薄荷性味辛凉,有疏散风热、理气消食之效,能发汗,与青黛连用,用于治疗风热感冒,目赤肿痛,咽喉肿痛。桔梗性味苦平,入肺经,有宣肺气、镇咳作用,常与薄荷连用治疗咽喉肿痛。儿茶收湿敛疮,清肺化痰。全方攻补兼施、刚柔相兼,共奏清热解毒、宣肺止咳、祛痰排脓、愈疡化腐、生肌敛疡之功。
本发明的各中药组份药性、药理如下:
青黛,药性寒,味苦,归肝经,具有清热解毒、凉血止血、清肺止咳、平肝定惊等功效,治温病热盛,血热吐血、衄血;疮肿;蛇虫咬伤。现代药理学研究证明,青黛具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、调节免疫和镇痛等功效。
儿茶,性微寒,味苦、涩,归肺,心经。具有活血止痛,清肺化痰的功效。既可以应用于治疗外科的跌扑伤痛,外伤出血,也可用于治疗吐血衄血,肺热咳嗽。现代药理学研究表明儿茶可用于抗肿瘤、抗病毒、降血脂等疾病的治疗。
石膏,性大寒,味辛、甘,入肺、胃经。石膏具有清热泻火、收敛生肌的功效,用于外感热病,高热烦渴,肺热喘咳等。现代药理研究表明,石膏具有清热、镇痛、抗炎作用,在临床上石膏及其复方制剂可用于退热、治疗流行性感冒等。
黄芪,性微温,味甘,入脾、肺经。具有补中益气,固表止汗,利水消肿,托疮排脓的功效。药理学研究证明,黄芪不仅有增强免疫功能、抗衰老、抗菌、抗病毒、抗肿瘤的作用,还有对心脑血管、肝脏和泌尿***的保护作用。
白芍,性微寒,味苦、酸,入肝、脾经。具有养血敛阴,柔肝止痛的功效。常用于治疗胎产血虚,自汗、盗汗,腹部痉挛疼痛。研究表明白芍具有抗炎、免疫调节、抗类风湿性关节炎和保护内皮细胞的作用。其主要成分有单萜类、苷类、黄酮类、多糖等化合物,其中主要有效成分是芍药苷。
麦冬,性微寒,味甘、微苦,具有润肺止咳,养胃生津的功效。肺热燥咳,口干舌燥或者热病伤津,口渴贪饮皆可用麦冬,麦冬还有清心养心之功效。
白术,性温,味甘、苦,入脾、胃经。具有补脾益气,燥湿利水,固表止汗的功效。《医学启源》记载:“除湿益燥,和中益气,温中,去脾胃中湿,除胃热,强脾胃,进饮食,止渴,安胎。”现代药理学研究证明,白术具有保肝、调节胃肠运动、抗炎症、抗肿瘤、调节免疫***、降血糖、调节免疫代谢等作用。
桔梗,性平,味苦、辛,入肺经。具有宣肺止咳,清咽利喉,祛痰排脓的功效。可用于治疗咳嗽痰多,咽喉肿痛,肺痈吐脓,胸满胁痛,痢疾腹痛,小便癃闭。现代研究表明,桔梗具有祛痰、镇咳、抗炎、抗肿瘤、提高人体免疫力等广泛的药理活性。
辛夷,性温,味辛,入肺、胃经。具有通鼻窍、散风寒的功效。辛夷能散肺部风邪而通鼻窍,为治鼻病的要药,也可用于风寒感冒而多鼻漏者。现代药理学研究证明辛夷不仅有抗炎、抗菌、抗过敏、抗氧化和镇痛作用,能收缩鼻粘膜血管,其对酒精性肝损伤也有保护作用。
甘草,性平,味甘,入心、肺、脾、胃经。具有补脾益气,润肺止咳,清热解毒,调和药性的功效。常用于脾胃虚弱,倦怠乏力,心悸气短,咳嗽痰多,脘腹、四肢挛急疼痛,痈肿疮毒,缓解药物毒性、烈性。中药甘草具有广泛的药理作用,如抗肿瘤、抗炎杀菌、抗病毒、保肝、抗心肌缺血以及抗纤维化等作用。
化橘红,性温,味辛、苦,入肺、脾经。具有理气宽中,燥湿化痰的功效。主要用于咳嗽痰多,食积伤酒,呕恶痞闷。药理实验证明其具有显著的化痰止咳, 抗炎、抗氧化、免疫调节、防治糖尿病心肌功能损伤等作用。
陈皮,性温,味苦、辛,入脾、肺经。具有理气健脾,燥湿化痰的功效。适用于肚腹涨满疼痛,食欲不振,呕吐,咳嗽痰多等证。现代药理学研究证明,陈皮具有抑制胃肠平滑肌、促进消化液分泌、松弛支气管平滑肌、利胆、抗休克的作用。
法半夏,性温,味辛,入脾、胃、肺经。具有燥湿化痰的功效,用于痰多咳喘,痰饮眩悸,风痰眩晕,痰厥头痛。现代药理学研究表明半夏具有多种药理活性,主要包括止呕、抗消化性溃疡、镇咳平喘、抗动脉粥样硬化与降压、抗癫痫、抗衰老、抗肿瘤和抗新型冠状病毒肺炎等。
杏仁,性微温,味苦、辛、咸,入肺、脾、胃、大肠经。具有消痰平喘,降逆止呕的功效。药理学实验结果表明苦杏仁苷和其降解物有抗动脉粥样硬化、抗肾间质纤维化、抗肺纤维化、抗高氧诱导肺损伤、免疫抑制、免疫调节、抗肿瘤、抗炎等作用。
本发明各药材的取量考究,用量恰到好处,充分发挥各组份的作用,使个药材之间的配伍能够最大程度的发挥药效。
本发明实验临床试验。具体方法如下:
实例一:
(1)药液制备
称取青黛20g、儿茶30g、生石膏30g、黄芪20g、白芍20g、麦冬20g、炒白术20g、桔梗10g、辛夷10g、甘草10g、化橘红10g、陈皮10g、法半夏10g、杏仁10g。加蒸馏水完全没过中药,浸泡30min,然后大火煎开,待水沸腾后,改为文火,煎煮15min。煎煮完后用3层纱布过滤,滤液转入圆底烧瓶,用旋转蒸发仪浓缩至1g/mL-3g/mL的浓度。
(2)病毒液的制备
将冻存的F81细胞复苏至T25细胞瓶,待细胞生长到单层铺满,接种FCV CH-JL2毒株培养20 h。取出细胞培养瓶,用封口膜密封,放入-80℃冰箱中,冻融一次。收集细胞瓶内液体,3000 rpm 4℃离心30 min,取上清液保存。将病毒液按梯度稀释接种于96孔板培养的F81细胞,培养20 h,采用Reed-Muench公式计算TCID50,测得病毒液的病毒滴度为109.67TCID50/mL。
(3)猫杯状病毒感染模型的建立及药效试验
将23只6~12月龄成年猫隔离饲养7天后,随机分为6组,分别为空白组、模型组、2g/kg高剂量治疗组、1 g/kg中剂量治疗组、0.5 g/kg低剂量治疗组。所有青黛散治疗组均联合抗生素速诺注射液进行治疗,各试验组猫药物处理方法见表1.1
记录实验猫从接种FCV到治疗结束每天的临床症状变化,并根据表1.2进行评分
试验指标
治愈:治疗结束后,临床症状评分降低为治疗前和治疗期间临床症状评分最高值的5%以下或者无任何临床症状,即为治愈。
显效:治疗结束后,临床症状评分降低为治疗前和治疗期间临床症状评分最高值的30%以下,即为有显著效果。
有效:治疗结束后,临床症状评分降低为治疗前和治疗期间临床症状评分最高值的70%以下,即为有效。
无效:治疗结束后,达不到以上三个标准,或者临床症状无改善,乃至病情加重,即为无效。
其中治愈、显效和有效比率相加为总有效率。
将实验猫扁桃体病理切片变化按照四个等级进行评分,如表1.3所示
(4)中药复方对猫杯状病毒感染各组猫的临床药效
对人工感染猫杯状病毒的各组临床药效疗效具体结果见表1.4。本发明研制的中药复方联合抗生素能够显著降低患病猫的临床症状评分,并且所有治疗组的扁桃体病理评分均小于模型组(表1.5)。1 g/kg中药复方组能显著升高患病猫的扁桃体IFN-γ表达水平(图1)
实施例二:
(1)药液制备
称取青黛20g、儿茶30g、生石膏30g、黄芪20g、白芍20g、麦冬20g、炒白术20g、桔梗10g、辛夷10g、甘草10g、化橘红10g、陈皮10g、法半夏10g、杏仁10g。加蒸馏水完全没过中药,浸泡30min,然后大火煎开,待水沸腾后,改为文火,煎煮15 min。煎煮完后用3层纱布过滤,滤液转入圆底烧瓶,用旋转蒸发仪浓缩至1 g/mL-3 g/mL的浓度。
(2)临床病例
收集宠物医院、猫舍已检测出猫杯状病毒感染的患病猫8只,将8只猫编序。
1号猫:白虎,猫杯状病毒和猫疱疹病毒混合感染,美国短毛猫,年龄12个月左右。症状表现为眼脓性分泌物、鼻脓性分泌物、鼻中隔溃烂出血、打喷嚏、咳嗽。
2号猫:丢丢,猫杯状病毒感染,加菲猫,年龄3个月。症状表现为舌大面积溃疡,眼脓性分泌物、鼻脓性分泌物、打喷嚏、咳嗽。
3号猫:尖尖,猫杯状病毒感染,中华田园猫,年龄1岁左右,舌有两个溃疡灶,鼻脓性分泌物,打喷嚏。
4号猫:零食,猫杯状病毒和猫疱疹病毒混合感染,中华田园猫,年龄1岁左右,眼脓性分泌物,鼻脓性分泌物,眼睑粘连,打喷嚏,咳嗽,食欲不振,精神不振。
5号猫:蓝灰,猫杯状病毒和猫疱疹病毒混合感染,英国短毛猫,年龄2岁,症状表现为打喷嚏、咳嗽。
6号猫:加菲,猫杯状病毒和猫疱疹病毒混合感染,加菲猫,年龄6个月左右,症状表现为眼脓性分泌物、鼻脓性分泌物、眼睑粘连、鼻中隔溃烂。
7号猫:七七,猫杯状病毒和猫疱疹病毒混合感染,英国短毛猫,年龄5个月,症状表现为,眼脓性分泌物、鼻脓性分泌物,打喷嚏,咳嗽。
8号猫:小二,猫杯状病毒和猫疱疹病毒混合感染,中华田园猫,年龄一岁半,症状表现为打喷嚏、咳嗽。
(3)药效试验
8只猫分别给药1 g/kg青黛散和抗生素进行治疗,连续给药7天。记录实验猫从接种FCV到治疗结束每天的临床症状变化,并根据表1.2进行评分。
试验指标
治愈:治疗结束后,临床症状评分降低为治疗前和治疗期间临床症状评分最高值的5%以下或者无任何临床症状,即为治愈。
显效:治疗结束后,临床症状评分降低为治疗前和治疗期间临床症状评分最高值的30%以下,即为有显著效果。
有效:治疗结束后,临床症状评分降低为治疗前和治疗期间临床症状评分最高值的70%以下,即为有效。
无效:治疗结束后,达不到以上三个标准,或者临床症状无改善,乃至病情加重,即为无效。
其中治愈、显效和有效比率相加为总有效率。
(4)中药复方对猫杯状病毒感染临床病例的治疗效果
经治疗,大部分猫的临床症状评分都有下降,4号猫的症状未改善(表2.1),计算得出有效率为87.5%(表2.2)。白细胞数值的正常范围为5.5-19.5(109/l)。如表2.3所示,2、4、5、8的WBC高于正常水平,1、2、5、6、8在治疗过程中随着临床症状的减轻,其白细胞数值明显下降。其余3只猫(4号无效),白细胞数值没有明显变化。
表2.1 临床病例的临床症状评分
表2.2 治疗效果
表2.3 白细胞数值(109/l)
Claims (1)
1.一种治疗猫杯状病毒感染的中药,其特征在于:制成有效成分的原料重量份组成为:
青黛20-40、儿茶20-40、生石膏20-40、黄芪10-30、白芍10-30、麦冬10-30、
炒白术10-30、桔梗5-15、辛夷5-15、甘草5-15、化橘红5-15、陈皮5-15、
法半夏5-15、杏仁5-15。
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