CN113174416A - 一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法 - Google Patents

一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于厨余垃圾资源化利用技术领域。本发明的目的是以红茶菌作为细菌纤维素的生产菌株,实现厨余垃圾高效定向转化细菌纤维素,达到厨余资源化利用,同时降低细菌纤维素的生产成本。本发明提供的一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法包括以下步骤:1)厨余垃圾的前处理:2)厨余垃圾的高效生物降解:3)厨余垃圾中红茶菌的驯化培养;4)厨余垃圾酶解液的红茶菌发酵制备细菌纤维素;5)细菌纤维素的收集及纯化。采用本发明提供的技术,可为厨余垃圾的产品定向转化提供高浓度糖平台,为实现厨余垃圾的资源化和高值化奠定基础;同时,也为细菌纤维素的生产开拓了廉价高效的生产原料。

Description

一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法
【技术领域】
本发明属于厨余垃圾资源化利用的技术领域,特别涉及一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法。
【背景技术】
细菌纤维素是一类由微生物发酵生产的多孔性网状纳米级生物高分子材料,因其由细菌合成而得名。就化学组分而言,它同植物纤维素在化学组成和结构上无明显区别,都是β-D-葡萄糖经过β-1,4-糖苷键连接而成的线型高分子化合物,两者的主要区别在于前者不含有半纤维素、木质素、果胶及其他细胞壁成分。但相较于植物纤维素,细菌纤维素具有高纯度(≥99%)、高结晶度和持水性好、高抗张强度、良好的生物相容性和可降解性、生物合成时具有可调控性等明显优势。因此细菌纤维素在医用敷料、组织工程、纺织、食品行业、电导材料及环保等行业都具有广阔的应用前景。但在我国,细菌纤维素的生产成本高(特别是培养基成本高)、产率较低,这些问题仍然在一定程度上制约了它的工业化及应用范围的扩宽。实际上,细菌纤维素发酵成本在很大程度上取决于培养基,尤其是碳源,故寻找廉价高效的生产原料是降低细菌纤维素生产成本的发展方向之一。
以工农业生产的剩余物、食品加工废弃物以及含糖和淀粉量较高的果蔬等农副产品作为细菌纤维素生产的原料得到了广泛的关注。作为城市固体垃圾中有机垃圾的重要组分之一,近些年来,厨余垃圾其排放量正随着人口数量的不断增长和人们生活水平的不断提高而与日俱增。厨余垃圾含淀粉、纤维素、蛋白质、脂类和无机盐等,可以为微生物的生长繁殖提供良好的碳源和能源。若能将这些厨余垃圾进一步资源化利用,不仅能够避免其对环境的污染,还能提高可再生资源的利用程度,获得一系列生物产品,促进其实现资源化,能源化等,符合可持续发展、循环经济的发展方向。但是,目前,厨余垃圾的处理方式还是以焚烧、填埋或堆肥为主。通过堆肥、自然发酵等方式可以实现对厨余垃圾进行降解,实现其减量化,但是资源化不足。而通过对厨余垃圾进行定向转化为高附加值的产品,时实现其资源化的重要途径。
目前,关于厨余垃圾定向转化的研究包括酶法和微生物转化法。根据厨余垃圾的原料特点采用酶制剂将其降解为可发酵的碳源,然后通过微生物将其转化为目标产物。关于厨余垃圾的定向转化产物主要有乳酸(ZL 201310437655.0)、鼠李糖脂生物表面活性剂、乙醇(ZL 201310015313.X,201910361741.5)、丁醇(ZL201210056810.X)、己酸(202010997594.3)等。但是尚未见到以厨余垃圾发酵细菌纤维素的相关研究。细菌纤维素的发酵微生物主要来自醋酸菌属,例如醋酸杆菌属(Acetobacter)、驹形杆菌属(Komagataeibacter)、葡糖醋杆菌属(Gluconacetobacter)和葡糖杆菌属(Gluconobacter)等,它们不仅能大量合成细菌纤维素,还能形成明显的纤维素膜。另外也有非醋酸菌科的微生物如肠杆菌属(Enterobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)等。红茶菌(Kombucha)中存在着多种醋酸菌、酵母菌和乳酸菌组成的“共生群落”。因此红茶菌也被用来生产细菌纤维素,如专利201510133651.2公开了一种利用红茶菌和棉籽糖生产细菌纳米纤维素的方法,以棉粕中提取的棉籽糖为原料,利用红茶菌可以克服棉酚对木醋杆菌的抑制,大大降低细菌纳米纤维素的生产原料成本;专利201810424077.X公开了一种利用豆腐黄浆水制备细菌纤维素的方法,也实现了红茶菌发酵细菌纤维素。而研究表明,相对于单独培养所分离出的醋酸菌,红茶菌多种微生物之间形成强大的共生关系及复杂代谢通路使得红茶菌产纤维素的速度和产量均相对较高。因此,红茶菌在细菌纤维素生产方面具有重要的应用价值。
因此,本发明专利拟以红茶菌作为细菌纤维素的生产菌株,以厨余垃圾为细菌纤维素的生产原料,公开一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法。
【发明内容】
【发明目的】
细菌纤维素的生产成本高(特别是培养基成本高)、产率较低,这些问题仍然在一定程度上制约了它的工业化及应用范围的扩宽。实际上,细菌纤维素发酵成本在很大程度上取决于培养基,尤其是碳源,故寻找廉价高效的生产原料是降低细菌纤维素生产成本的发展方向之一。厨余垃圾的高效高值利用兼具了资源化与污染防治的双重属性,将其定向转化为高附加值的产品,是实现厨余垃圾资源化的重要途径。本发明的目的之一是以厨余垃圾为细菌纤维素的生产原料,提供一种厨余垃圾进行细菌纤维素生产的方法,从而为实现厨余垃圾的定向高值化提供思路。本发明的目的之二是以红茶菌作为细菌纤维素的生产菌株,提供一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法,通过红茶菌多菌种交互作用提高细菌纤维素的发酵效率,降低其发酵成本。
【技术方案】
本发明所述的一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法,包括以下步骤:
1)厨余垃圾的前处理:首先从厨余垃圾挑拣出废纸、一次性餐具、骨头等不可降解的无机杂物,然后将厨余垃圾进行粉碎、浆化;
2)厨余垃圾的高效生物降解:步骤1)得到的厨余垃圾原料加水调节至一定固液比后,加入高温淀粉酶、果胶酶、纤维素酶和糖化酶进行酶解;
3)厨余垃圾中红茶菌的驯化培养:对水解液进行梯度稀释,经高温灭菌和冷却后,按照稀释度从高到低逐级接种各类降解菌的种子液进行驯化,已获得高发酵性能的红茶菌;
4)厨余垃圾酶解液的红茶菌发酵制备细菌纤维素:步骤2)得到的厨余垃圾酶解液直接或者补加营养物质后,在115℃灭菌30min,冷却后接种驯化好的红茶菌种子液,然后在恒温培养箱中静置培养;
5)细菌纤维素的收集及纯化:步骤4)发酵结束后取出细菌纤维素膜经除菌体,除杂,纯化后,得到白色透明状的细菌纤维素膜。
发明步骤2)所述的厨余垃圾加水调节的固液比为1:5~1:15(w/v,以厨余垃圾湿重计)。
本发明步骤2)所述的厨余垃圾原料中加入的各种酶的酶解参数为,加入高温淀粉酶在70-90℃处理厨余垃圾30-60min,冷却至50℃,同时加入糖化酶和果胶酶、纤维素酶,在50℃保温酶解2-6h,酶解结束后过滤收集滤液。
本发明所述的红茶菌和各种酶制剂均可从市售产品中购买得到。
本发明步骤3)所述的红茶菌的驯化培养方法为,以水对厨余垃圾水解液进行稀释,经高温灭菌后,冷却,然后按照20%的接种量将红茶菌种子液接种至稀释度最高的厨余垃圾水解液中,在28-30℃静置培养7d;待菌体生长良好后,按照稀释倍数从高到低逐级将所得到的红茶菌发酵液接种至下一稀释度的厨余垃圾水解液中,直至获得可以在高浓度厨余垃圾水解液中生长良好的红茶菌。
本发明步骤4)所述的营养物质包括蛋白胨、酵母膏、玉米浆,添加量为0.5%~2%。
本发明步骤4)所述的红茶菌接种量为5%~30%(v/v),红茶菌发酵培养温度为25-32℃,培养时间为7-14d。
本发明步骤5)所述的细菌纤维素膜纯化的方法为:以0.1mol/L的NaOH溶液在100℃水浴处理30min,得到白色透明状的细菌纤维素膜。
【有益效果】
厨余垃圾富含有机质,其高效利用兼具了资源化利用与污染防治的双重属性,具有重要的研究意义和应用价值。但是,目前,厨余垃圾的处理方式还是以焚烧、填埋或堆肥为主,不仅附加值较低,且浪费了资源。因此,急需可实现厨余垃圾定向转化为高附加值产品的技术。而细菌纤维素作为一种在医药、纺织、食品、材料及环保等行业都具有广阔的应用前景的高分子材料,其工业化和应用推广受到生产成本高(特别是培养基成本高)、产率较低等问题的制约。因此,采用微生物发酵的方法将厨余垃圾定向转化为细菌纤维素,具有重要意义。
本发明以红茶菌作为细菌纤维素的生产菌株,以厨余垃圾为细菌纤维素的生产原料,公开了一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素生产的方法。具有如下有益效果:
1)以多酶协同生物解聚实现厨余垃圾高效降解,得到高浓度可发酵糖;
2)本发明中厨余垃圾水解液可直接或补偿少量氮源后用于细菌纤维素的生产,可显著降低细菌纤维素的生产成本;
3)通过逐级提高厨余垃圾水解液浓度,驯化培养获得了发酵性能优良的红茶菌;
4)利用红茶菌中多种微生物之间强大的共生关系及复杂代谢通路,显著提高厨余垃圾发酵细菌纤维素的速度和产量;
总之,采用本发明提供的技术,可为后续厨余垃圾的产品定向转化提供高浓度糖平台,为实现厨余垃圾的资源化和高值化奠定基础;同时,也为细菌纤维素的生产开拓了廉价高效的生产原料。
【具体实施方式】
下面结合实施例对本发明技术方案作进一步阐述。实施例中未注明具体技术或条件者,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1:
1)首先从厨余垃圾挑拣出废纸、一次性餐具、骨头等不可降解的无机杂物,然后将厨余垃圾进行粉碎、浆化;
2)在粉碎的厨余垃圾原料中,加水调节固液比为1:5(w/v,以厨余垃圾干重计),搅拌均匀后,加入高温淀粉酶在70℃处理60min,冷却至50℃,同时加入糖化酶和果胶酶、纤维素酶,在50℃保温酶解1h,酶解结束后过滤收集滤液,即为厨余垃圾水解液,冷藏备用。
3)对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,经115℃高温灭菌30min后,冷却,以无菌水对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,首先取稀释度最高的厨余垃圾水解液,接种20%的红茶菌种子液,在28-30℃静置培养7d;待菌体生长良好后,将所得到的红茶菌发酵液接种至下一稀释度的厨余垃圾水解液中,按照相同的接种量和培养方法继续培养至菌体生长良好;然后按照稀释度从高到低的顺序,继续进行驯化培养。
4)经步骤2)得到的厨余垃圾水解液中,加入0.5%的蛋白胨(均为w/v),于115℃高温灭菌30min,冷却后按照20%(v/v)的接种量接种经驯化后的红茶菌种子液,在恒温培养箱中以28℃静置培养7d。
5)发酵结束后,取出细菌纤维素膜,除菌体、除杂后,以0.1mol/L的NaOH溶液在100℃水浴处理30min,得到纯化后的白色透明状的细菌纤维素膜。
按照上述方法,细菌纤维素的得率为6.542g/L(厨余垃圾水解液)。
实施例2:
1)首先从厨余垃圾挑拣出废纸、一次性餐具、骨头等不可降解的无机杂物,然后将厨余垃圾进行粉碎、浆化;
2)在粉碎的厨余垃圾原料中,加水调节固液比为1:8(w/v,以厨余垃圾干重计),搅拌均匀后,加入高温淀粉酶在90℃处理45min,冷却至50℃,同时加入糖化酶和果胶酶、纤维素酶,在50℃保温酶解2h,酶解结束后过滤收集滤液,备用。
3)对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,经115℃高温灭菌30min后,冷却,以无菌水对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,首先取稀释度最高的厨余垃圾水解液,接种20%的红茶菌种子液,在28-30℃静置培养7d;待菌体生长良好后,将所得到的红茶菌发酵液接种至下一稀释度的厨余垃圾水解液中,按照相同的接种量和培养方法继续培养至菌体生长良好;然后按照稀释度从高到低的顺序,继续进行驯化培养。
4)经步骤2)得到的厨余垃圾水解液中,加入1%的蛋白胨和0.5%的玉米浆(均为w/v),于115℃高温灭菌30min,冷却后按照10%(v/v)的接种量接种经驯化后的红茶菌种子液,在恒温培养箱中以25℃静置培养9d。
5)发酵结束后,取出细菌纤维素膜,除菌体、除杂后,以0.1mol/L的NaOH溶液在100℃水浴处理30min,得到纯化后的白色透明状的细菌纤维素膜。
按照上述方法,细菌纤维素的得率为4.65g/L(厨余垃圾水解液)。
实施例3:
1)首先从厨余垃圾挑拣出废纸、一次性餐具、骨头等不可降解的无机杂物,然后将厨余垃圾进行粉碎、浆化;
2)粉碎的厨余垃圾原料加水调节厨余垃圾固液比1:12(v/v,以厨余垃圾干重计),搅拌均匀后,加入高温淀粉酶在90℃处理30min,冷却至50℃,同时加入糖化酶和果胶酶、纤维素酶,在50℃保温酶解6h,酶解结束后过滤收集滤液,备用。
3)对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,经115℃高温灭菌30min后,冷却,以无菌水对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,首先取稀释度最高的厨余垃圾水解液,接种20%的红茶菌种子液,在28-30℃静置培养7d;待菌体生长良好后,将所得到的红茶菌发酵液接种至下一稀释度的厨余垃圾水解液中,按照相同的接种量和培养方法继续培养至菌体生长良好;然后按照稀释度从高到低的顺序,继续进行驯化培养。
4)经步骤2)得到的厨余垃圾水解液中,加入0.5%的酵母膏和1%的玉米浆(均为w/v),于115℃高温灭菌30min,冷却后按照30%(v/v)的接种量接种经驯化后的红茶菌种子液,在恒温培养箱中以30℃静置培养12d。
5)发酵结束后,取出细菌纤维素膜,除菌体、除杂后,以0.1mol/L的NaOH溶液在100℃水浴处理30min,得到纯化后的白色透明状的细菌纤维素膜。
按照上述方法,细菌纤维素的得率为7.84g/L(厨余垃圾水解液)。
实施例4:
1)首先从厨余垃圾挑拣出废纸、一次性餐具、骨头等不可降解的无机杂物,然后将厨余垃圾进行粉碎、浆化;
2)粉碎的厨余垃圾原料加水调节厨余垃圾固液比1:15(w/v,以厨余垃圾干重计),搅拌均匀后,加入高温淀粉酶在90℃处理60min,冷却至50℃,同时加入糖化酶和果胶酶、纤维素酶,在50℃保温酶解4h,酶解结束后过滤收集滤液,备用。
3)对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,经115℃高温灭菌30min后,冷却,以无菌水对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,首先取稀释度最高的厨余垃圾水解液,接种20%的红茶菌种子液,在28-30℃静置培养7d;待菌体生长良好后,将所得到的红茶菌发酵液接种至下一稀释度的厨余垃圾水解液中,按照相同的接种量和培养方法继续培养至菌体生长良好;然后按照稀释度从高到低的顺序,继续进行驯化培养。
4)经步骤2)得到的厨余垃圾水解液中,加入2%的玉米浆(均为w/v),于115℃高温灭菌30min,冷却后按照5%(v/v)的接种量接种经驯化后的红茶菌种子液,在恒温培养箱中以30℃静置培养14d。
5)发酵结束后,取出细菌纤维素膜,除菌体、除杂后,以0.1mol/L的NaOH溶液在100℃水浴处理30min,得到纯化后的白色透明状的细菌纤维素膜。
按照上述方法,细菌纤维素的得率为6.31g/L(厨余垃圾水解液)。
实施例5:
1)首先从厨余垃圾挑拣出废纸、一次性餐具、骨头等不可降解的无机杂物,然后将厨余垃圾进行粉碎、浆化;
2)粉碎的厨余垃圾原料加水调节厨余垃圾固液比1:9(w/v,以厨余垃圾干重计),搅拌均匀后,加入高温淀粉酶在90℃处理30min,冷却至50℃,同时加入糖化酶和果胶酶、纤维素酶,在50℃保温酶解6h,酶解结束后过滤收集滤液,备用。
3)对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,经115℃高温灭菌30min后,冷却,以无菌水对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,首先取稀释度最高的厨余垃圾水解液,接种20%的红茶菌种子液,在28-30℃静置培养7d;待菌体生长良好后,将所得到的红茶菌发酵液接种至下一稀释度的厨余垃圾水解液中,按照相同的接种量和培养方法继续培养至菌体生长良好;然后按照稀释度从高到低的顺序,继续进行驯化培养。
4)经步骤2)得到的厨余垃圾水解液中,加入2%的酵母膏和0.5%玉米浆(均为w/v),于115℃高温灭菌30min,冷却后按照20%(v/v)的接种量接种经驯化后的红茶菌种子液,在恒温培养箱中以30℃静置培养9d。
5)发酵结束后,取出细菌纤维素膜,除菌体、除杂后,以0.1mol/L的NaOH溶液在100℃水浴处理30min,得到纯化后的白色透明状的细菌纤维素膜。
按照上述方法,细菌纤维素的得率为6.74g/L(厨余垃圾水解液)。
实施例6:
1)首先从厨余垃圾挑拣出废纸、一次性餐具、骨头等不可降解的无机杂物,然后将厨余垃圾进行粉碎、浆化;
2)粉碎的厨余垃圾原料加水调节厨余垃圾固液比1:8(w/v,以厨余垃圾干重计),搅拌均匀后,加入高温淀粉酶在90℃处理60min,冷却至50℃,同时加入糖化酶和果胶酶、纤维素酶,在50℃保温酶解4h,酶解结束后过滤收集滤液,备用。
3)对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,经115℃高温灭菌30min后,冷却,以无菌水对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,首先取稀释度最高的厨余垃圾水解液,接种20%的红茶菌种子液,在28-30℃静置培养7d;待菌体生长良好后,将所得到的红茶菌发酵液接种至下一稀释度的厨余垃圾水解液中,按照相同的接种量和培养方法继续培养至菌体生长良好;然后按照稀释度从高到低的顺序,继续进行驯化培养。
4)经步骤2)得到的厨余垃圾水解液中,加入0.5%玉米浆、1%的蛋白胨和2%的酵母膏(均为w/v),于115℃高温灭菌30min,冷却后按照10%(v/v)的接种量接种经驯化后的红茶菌种子液,在恒温培养箱中以28℃静置培养14d。
5)发酵结束后,取出细菌纤维素膜,除菌体、除杂后,以0.1mol/L的NaOH溶液在100℃水浴处理30min,得到纯化后的白色透明状的细菌纤维素膜。
按照上述方法,细菌纤维素的得率为8.32g/L(厨余垃圾水解液)。
实施例7:
1)首先从厨余垃圾挑拣出废纸、一次性餐具、骨头等不可降解的无机杂物,然后将厨余垃圾进行粉碎、浆化;
2)在粉碎的厨余垃圾原料中,加水调节固液比为1:4(w/v,以厨余垃圾干重计),搅拌均匀后,加入高温淀粉酶在90℃处理60min,冷却至50℃,同时加入糖化酶和果胶酶、纤维素酶,在50℃保温酶解4h,酶解结束后过滤收集滤液,备用。
3)对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,经115℃高温灭菌30min后,冷却,以无菌水对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,首先取稀释度最高的厨余垃圾水解液,接种20%的红茶菌种子液,在28-30℃静置培养7d;待菌体生长良好后,将所得到的红茶菌发酵液接种至下一稀释度的厨余垃圾水解液中,按照相同的接种量和培养方法继续培养至菌体生长良好;然后按照稀释度从高到低的顺序,继续进行驯化培养。
4)经步骤2)得到的厨余垃圾水解液中,加入0.5%的蛋白胨、0.5%的玉米浆和0.5%的酵母膏(均为w/v),于115℃高温灭菌30min,冷却后按照10%(v/v)的接种量接种经驯化后的红茶菌种子液,在恒温培养箱中以28℃静置培养9d。
5)发酵结束后,取出细菌纤维素膜,除菌体、除杂后,以0.1mol/L的NaOH溶液在100℃水浴处理30min,得到纯化后的白色透明状的细菌纤维素膜。
按照上述方法,细菌纤维素的得率为7.93g/L(厨余垃圾水解液)。

Claims (8)

1.本发明所述的一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)厨余垃圾的前处理:首先从厨余垃圾挑拣出废纸、一次性餐具、骨头等不可降解的无机杂物,然后将厨余垃圾进行粉碎、浆化;
2)厨余垃圾的高效生物降解:步骤1)得到的厨余垃圾原料加水调节至一定固液比后,加入高温淀粉酶、果胶酶、纤维素酶和糖化酶进行酶解;
3)厨余垃圾中红茶菌的驯化培养:对厨余垃圾水解液进行梯度稀释,经高温灭菌和冷却后,按照稀释度从高到低逐级接种各类降解菌的种子液进行驯化,以获得高发酵性能的红茶菌;
4)厨余垃圾酶解液的红茶菌发酵制备细菌纤维素:步骤2)得到的厨余垃圾酶解液直接或者补加营养物质后,在115℃灭菌30min,冷却后接种驯化好的红茶菌种子液,然后在恒温培养箱中静置培养;
5)细菌纤维素的收集及纯化:步骤4)发酵结束后取出细菌纤维素膜经除菌体,除杂,纯化后,得到白色透明状的细菌纤维素膜。
2.根据权利要求1所述的一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法,其特征在于,步骤2)中厨余垃圾生物降解时加水调节的固液比为1:1~1:7(w/v,以厨余垃圾干重计)。
3.根据权利要求1所述的一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法,其特征在于,步骤2)中各种酶的酶解参数为,加入高温淀粉酶在70-90℃处理厨余垃圾30-60min,冷却至50℃,同时加入糖化酶和果胶酶、纤维素酶,在50℃保温酶解2-6h,酶解结束后过滤收集滤液。
4.根据权利要求1所述的一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法,其特征在于,所述的红茶菌和各种酶制剂均可从市售产品中购买得到。
5.根据权利要求1所述的一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法,其特征在于,步骤3)中红茶菌的驯化培养方法为,将厨余垃圾水解液进行不同浓度的稀释,经高温灭菌后,冷却,然后按照20%的接种量将红茶菌种子液接种至稀释度最高的厨余垃圾水解液中,在28-30℃静置培养7d;待菌体生长良好后,按照稀释倍数从高到低逐级将所得到的红茶菌发酵液接种至下一稀释度的厨余垃圾水解液中,直至获得可以在高浓度厨余垃圾水解液中生长良好的红茶菌。
6.根据权利要求1所述的一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法,其特征在于,步骤4)中营养物质包括蛋白胨、酵母膏、玉米浆中的一种或者几种,营养物质的添加量为0.5%~2%(w/v)。
7.根据权利要求1所述的一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法,其特征在于,步骤4)中红茶菌接种量为5%~30%(v/v),红茶菌发酵培养温度为25-32℃,培养时间为7-14d。
8.根据权利要求1所述的一种红茶菌发酵厨余垃圾生产细菌纤维素的方法,其特征在于,步骤5)中细菌纤维素膜纯化的方法为:以0.1mol/L的NaOH溶液在100℃水浴处理30min,得到白色透明状的细菌纤维素膜。
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