CN113150774B - 一种近红外荧光分子探针及其制备方法和在细胞成像中的应用 - Google Patents

一种近红外荧光分子探针及其制备方法和在细胞成像中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN113150774B
CN113150774B CN202110481931.8A CN202110481931A CN113150774B CN 113150774 B CN113150774 B CN 113150774B CN 202110481931 A CN202110481931 A CN 202110481931A CN 113150774 B CN113150774 B CN 113150774B
Authority
CN
China
Prior art keywords
infrared fluorescent
molecular probe
compound
fluorescent molecular
preparing
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202110481931.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113150774A (zh
Inventor
孙春龙
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Binzhou University
Original Assignee
Binzhou University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Binzhou University filed Critical Binzhou University
Priority to CN202110481931.8A priority Critical patent/CN113150774B/zh
Publication of CN113150774A publication Critical patent/CN113150774A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113150774B publication Critical patent/CN113150774B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
    • C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6402—Atomic fluorescence; Laser induced fluorescence
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
    • G01N21/6456—Spatial resolved fluorescence measurements; Imaging
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
    • G01N21/6456—Spatial resolved fluorescence measurements; Imaging
    • G01N21/6458—Fluorescence microscopy
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1003—Carbocyclic compounds
    • C09K2211/1007—Non-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
    • C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
    • C09K2211/1029—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing one nitrogen atom as the heteroatom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
    • C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
    • C09K2211/1044—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing two nitrogen atoms as heteroatoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

本发明提供的一种近红外荧光分子探针，其结构式如下。本发明还提供了一种上述近红外荧光分子探针的制备方法。本发明还提供了上述近红外荧光分子探针在EML4‑ALK阳性非小细胞肺癌细胞(NCIH3122细胞)中靶向成像的应用。本发明提供的近红外荧光分子探针结构新颖，制备工艺简单，能有效的避开生物自发荧光和细胞内源性物质的干扰，灵敏度高、光学稳定性好、细胞膜渗透性好，能够作为EML4‑ALK阳性非小细胞肺癌(NCIH3122细胞)荧光成像的近红外荧光探针。

Description

一种近红外荧光分子探针及其制备方法和在细胞成像中的 应用
技术领域
本发明属于荧光分子探针技术领域，特别涉及一种近红外荧光分子探针及其制备方法和在细胞成像中的应用。
背景技术
近红外光系是指位于650～900nm区间内的光波，在此范围内的光抗干扰性强，可在较深组织中产生光信号，且对机体组织无影响。近红外成像技术已广泛应用于肿瘤组织定位成像、体内金属离子或其他微量生物活性成分成像、药物修饰等生物科学领域，以其安全、有效、无损、低成本、易操作、非侵入式、实时、在位检测等优点成为当前成像检测领域的热点[Maxwell D,Chang Q,Zhang X,et al.Bioconjug Chem,2009,20(4):702-709.Yi X,Wang F,Qin W,et al.International Journal of Nanomedicine,2014,9:1347–1365.Chen H,Lin W,Cui H,et al.Chem Eur J,2015,21:733-745.Cilliers C,Liao J,Atangcho L,et al.Mol Imaging Biol,2015,DOI:10.1007/s11307-015-0851-7]。据报道，近红外成像技术采用荧光探针标记肿瘤细胞、金属离子、抗体和多肽等，通过激发荧光基团产生发射光，其中更有效的标记方法是利用基因载体将荧光蛋白基因转染整合至人肿瘤细胞基因组中，使肿瘤细胞产生稳定的、可遗传的荧光标记，克服荧光标记探针在体内不稳定的缺点[张士新,陈明心,李芳秋.医学研究生学报,2009:195-197.成俊,史晓峰,谢森,等.医学研究生学报,2005,18(1):13-16.Shen Y,Zhao J,Chen C,et al.Guangzhou ChemicalIndustry,2014,42(1):47-48.]。与传统的侵入式检测方法相比，活体成像检测技术通过对活体试验对象在不同时间点进行定位，观察，检测，跟踪荧光所在位置及信号强度的变化，能清晰可见的了解目标的具体情况，数据真实可靠。迄今已有多种近红外荧光染料用于体外和体内肿瘤探测的研究，其中，吲哚菁绿(indocyanine green，ICG)是第一种由FDA批准用于人类的具有代表性的有机染料[Boutros S,Greiner C,Hwu D,el al.J Biomed,2007,12(10):1117-1123.Caesar J,Shaldon S,Chiandussi L,et al.Clin Sci,1961(21):43–57.Abd-El-Aziz A S,Strohm E A,Okasha R M.Journal of Molecular Structure,2015:228–235.]。
自2011-2015年先后有克里唑替尼(Crizotinib)、色瑞替尼(Ceritinib)和阿来替尼(Alectinib)三种药物作为小分子选择抑制剂获得美国FDA批准上市，主要用于治疗诊断为ALK阳性的局部晚期或转移的EML4-ALK阳性非小细胞肺癌。
当前，针对EML4-ALK阳性非小细胞肺癌的早期诊断及其治疗成为国际研究的热点。特别是近年来随着纳米医学和分子影像学的不断发展，针对肿瘤诊疗一体化的研究取得了一定的进展。但是，如何实现高灵敏、高分辨的肿瘤成像诊断与有效治疗的有机结合，并为肿瘤诊疗提供有效信息仍是目前癌症诊疗一体化的一大难题。因此，设计出理想诊疗试剂对于实现EML4-ALK阳性非小细胞肺癌实时监测与治疗一体化策略起决定性作用。当前还没有关于EML4-ALK阳性非小细胞肺癌诊疗一体化研究的研究报道。
发明内容
发明目的：针对现有技术中的缺陷，本发明提供了一种近红外荧光分子探针及其制备方法和在细胞成像中的应用，该近红外荧光分子探针可用于EML4-ALK阳性非小细胞肺癌细胞靶向成像，灵敏度高，结果准确。
技术方案：为达到上述发明目的，本发明采用如下技术方案：
一种近红外荧光分子探针，其结构式如下：
Figure BDA0003048803830000021
本发明还提供了一种上述近红外荧光探针的制备方法，包括以下步骤：在惰性气体保护下，化合物3和化合物2反应，制得化合物1；
其中，化合物3的结构式为：
Figure BDA0003048803830000022
其中化合物2的结构式为：
Figure BDA0003048803830000031
反应路线如下：
Figure BDA0003048803830000032
优选的，化合物3和化合物2的摩尔比为1：(1-5)，反应温度为20-40℃，反应时间为0.5～24h，反应溶剂为DMF或者DMSO。选用DMF或DMSO具有独特性，只有这两种溶剂所得化合物的产率高，副产物低，且反应时间短。
进一步优选，化合物3和化合物2的摩尔比为1:4，反应温度为25-30℃，反应时间0.5-6h。
优选的，反应后还需纯化工艺，具体为：减压浓缩反应液，加入醚类溶剂，过滤；滤饼经色谱柱层析，即得。
作为进一步优选：
其中，所述醚类溶剂为分子量为74-186的醚类化合物，选择***、甲基叔丁基醚或正己醚，醚类溶剂加入量可为减压浓缩后的反应液的体积的5-30倍。
其中，色谱柱为硅胶柱，硅胶的规格为200-300目；洗脱液为体积比30:1～35:1的二氯甲烷和甲醇的混合物。之所以用过硅胶柱法纯化该化合物是因为吲哚七甲川菁类染料的稳定性很差，在制备和纯化过程中容易产生大量杂质，国外大多采用制备型高效液相分离纯化，本专利的纯化方法采用过硅胶柱法，操作简单方便，速度较快，得到产品纯度和产率较高。
本发明还提供了上述的近红外荧光分子探针在细胞成像中的应用。
进一步，本发明还提供了所述的近红外荧光分子探针在制备非小细胞肺癌靶向成像检测试剂中的应用。优选，所述非小细胞肺癌为EML4-ALK阳性非小细胞肺癌(NCIH3122细胞)。
上述近红外荧光分子探针在NCIH3122细胞中靶向成像的应用，最佳孵育时间(30min)和投入探针的量(11μM)。
对于一般近红外荧光染料来说，其在体内代谢较快，对体内细胞没有毒性，且具有较好的荧光检测活性。而本发明将化合物3与一些功能性的分子(化合物2，色瑞替尼)相结合，以增加其生物相容性，延长其在体内的代谢时间，并可能使其具有肿瘤组织靶向识别、成像和治疗的能力。通过研究证实，该探针以EML4-ALK阳性非小细胞肺癌细胞作为靶点，可用于EML4-ALK阳性非小细胞肺癌的靶向成像诊断。
有益效果：相对于现有技术，本发明提供的近红外荧光分子探针结构新颖，制备工艺简单，能有效的避开生物自发荧光和细胞内源性物质的干扰，灵敏度高、光学稳定性好、细胞膜渗透性好，能够作为检测EML4-ALK阳性非小细胞肺癌荧光成像的近红外荧光探针。该荧光分子探针在分析化学、生命科学、环境科学等领域具有较强的实际应用价值。
附图说明
图1是本发明的近红外荧光分子探针的MS图。
图2是本发明的近红外荧光分子探针的1H-NMR图。
图3是本发明的近红外荧光分子探针的紫外吸收光谱图。
图4是本发明的近红外荧光分子探针的荧光发射光谱图。
图5为本发明的近红外荧光分子探针在活的EML4-ALK阳性非小细胞肺癌细胞(NCIH3122细胞)内荧光成像图，其中，a,b为在NCIH3122细胞中先加入化合物2(色瑞替尼)后再加入化合物1的共聚焦成像图(a为白光图，b为荧光图)；c,d为在NCIH3122细胞中只加入化合物1的共聚焦成像图(c为白光图，d为荧光图)。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。下面描述的实例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所用的材料、试剂、仪器等，若无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
将0.15mmol化合物3加入到50mL反应瓶中，加入3mL无水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)搅拌,加热到25℃，溶解，氩气保护下,加入0.6mmol化合物2，25℃搅拌2h，反应结束。将反应液倒入25mL甲基叔丁基醚中，析出绿色固体，滤纸过滤，收集上层固体物质。200-300目硅胶柱柱层析分离提纯，洗脱液为体积比30:1的二氯甲烷和甲醇的混合物，得11mg绿色金属色泽晶体为近红外荧光探针。
其质谱谱图见图1，氢谱谱图见图2。
ESI-MS m/z：1060.56[M+H-I]+。
1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)δ(ppm)＝8.18(s,1H)，7.95(d,1H)，7.93(s,1H)，7.88-7.76(d,1H)，7.73-7.70(m,3H)，7.70(d,1H)，7.41-7.32(m,4H)，7.14-7.11(m,3H)，6.95(s,1H)，5.99(d,1H)，4.65(d,1H)，4.18-4.16(s,2H)，4.00-3.97(m,3H)，3.84-3.86(m,2H)，2.67(m,10H)，2.27(m,3H)，2.12-2.09(m,2H)，1.98-1.93(m,5H)，1.74-1.71(m,9H)，1.61(s,6H)，1.40-1.25(m,14H)，1.07-1.04(m,5H)。
其紫外吸收光谱见图3，其荧光发射光谱见图4。
实施例2
将0.15mmol化合物3加入到50mL反应瓶中，加入3mL无水二甲基亚砜(DMSO)搅拌,加热到25℃，溶解，氩气保护下,加入0.6mmol化合物2，25℃搅拌2h，反应结束。将反应液倒入25mL***中，析出绿色固体，滤纸过滤，收集上层固体物质。200-300目硅胶柱柱层析分离提纯，洗脱液为体积比30:1的二氯甲烷和甲醇的混合物，得10mg绿色金属色泽晶体为近红外荧光探针。
实施例3
将0.15mmol化合物3加入到50mL反应瓶中，加入3mL无水二甲基亚砜(DMSO)搅拌,加热到25℃，溶解，氩气保护下,加入0.6mmol化合物2，25℃搅拌2h，反应结束。将反应液倒入25mL***中，析出绿色固体，滤纸过滤，收集上层固体物质。200-300目硅胶柱柱层析分离提纯，洗脱液为体积比35:1的二氯甲烷和甲醇的混合物，得8mg绿色金属色泽晶体为近红外荧光探针。
实施例4
将0.15mmol化合物3加入到50mL反应瓶中，加入3mL无水二甲基亚砜(DMSO)搅拌,加热到20℃，溶解，氩气保护下,加入0.3mmol化合物2，20℃搅拌2h，反应结束。将反应液倒入25mL甲基叔丁基醚中，析出绿色固体，滤纸过滤，收集上层固体物质。200-300目硅胶柱柱层析分离提纯，洗脱液为体积比30:1的二氯甲烷和甲醇的混合物，得8mg绿色金属色泽晶体为近红外荧光探针。
实施例5
将0.15mmol化合物3加入到50mL反应瓶中，加入3mL无水DMF搅拌,加热到20℃，溶解，氩气保护下,加入0.15mmol化合物2，20℃搅拌4h，反应结束。将反应液倒入30mL***中，析出绿色固体，滤纸过滤，收集上层固体物质。200-300目硅胶柱柱层析分离提纯，洗脱液为体积比30:1的二氯甲烷和甲醇的混合物，得5mg绿色金属色泽晶体为近红外荧光探针。
实施例6
将0.15mmol化合物3加入到50mL反应瓶中，加入3mL无水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)搅拌,加热到25℃，溶解，氩气保护下,加入0.6mmol化合物2，25℃搅拌2h，反应结束。将反应液倒入25mL甲基叔丁基醚中，析出绿色固体，滤纸过滤，收集上层固体物质。200-300目硅胶柱柱层析分离提纯，洗脱液为体积比35:1的二氯甲烷和甲醇的混合物，得10mg绿色金属色泽晶体为近红外荧光分子探针。
实施例7
将0.15mmol化合物3加入到50mL反应瓶中，加入3mL无水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)搅拌,加热到25℃，溶解，氩气保护下,加入0.6mmol化合物2，25℃搅拌0.5h，反应结束。将反应液倒入25mL甲基叔丁基醚中，析出绿色固体，滤纸过滤，收集上层固体物质。200-300目硅胶柱柱层析分离提纯，洗脱液为体积比30:1的二氯甲烷和甲醇的混合物，得7mg绿色金属色泽晶体为近红外荧光分子探针。
实施例8
如图5所示，a,b为在NCIH3122细胞中先加入化合物2(色瑞替尼)后再加入探针化合物1的共聚焦成像图(图5a为白光图，b为荧光图)，从b图中可以看到，细胞几乎没有荧光信号。c，d为在NCIH3122细胞中只加入探针化合物1的共聚焦成像图(图5c为白光图，d为荧光图)，从d图中可以看到，细胞荧光强度较强。从图a，c中可以看到，标记新探针的NCIH3122细胞外形呈边缘光整的单核形态，该肿瘤细胞***增殖速度较慢，且细胞活力较弱。
通过激光共聚焦成像实验证明了荧光探针化合物1具有成像的活性。当NCIH3122细胞首先加入了ALK阳性抑制剂色瑞替尼，再加入荧光探针化合物1后，细胞中没有荧光信号；相同条件下，在细胞中直接加入荧光探针化合物1，细胞有荧光信号。实验结果说明，ALK阳性抑制剂色瑞替尼进入了含有ALK阳性肿瘤细胞中且阻碍了探针化合物1继续进入细胞，而在没有色瑞替尼的另一组实验中，探针化合物1进入细胞内部且产生了荧光信号。这充分说明，探针化合物1同色瑞替尼一样具有ALK阳性抑制的作用，且具有在ALK阳性肿瘤细胞中荧光成像的性质。本实验组的激光共聚焦显微镜(20倍物镜)最大激发波长是690nm。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (11)

1.一种近红外荧光分子探针，其结构式如下：
Figure FDA0003604710030000011
2.权利要求1所述的近红外荧光分子探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：在惰性保护下，化合物3(IR-780)和化合物2(色瑞替尼)反应，制得化合物1；
Figure FDA0003604710030000012
3.根据权利要求2所述的近红外荧光分子探针的制备方法，其特征在于，化合物3和化合物2的摩尔比为1：(1-5)，反应温度为20-40℃，反应时间为0.5-24h，反应溶剂为DMF或者DMSO。
4.根据权利要求2所述的近红外荧光分子探针的制备方法，其特征在于，化合物3和化合物2的摩尔比为1:4，反应温度为25-30℃，反应时间0.5-6h。
5.根据权利要求2所述的近红外荧光分子探针的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括纯化工艺：减压浓缩反应液，加入醚类溶剂，过滤；滤饼经色谱柱层析，即得。
6.根据权利要求5所述的近红外荧光分子探针的制备方法，其特征在于，所述醚类溶剂为分子量为74-186的醚类化合物。
7.根据权利要求5所述的近红外荧光分子探针的制备方法，其特征在于，所述醚类溶剂选择***、甲基叔丁基醚或正己醚。
8.根据权利要求5所述的近红外荧光分子探针的制备方法，其特征在于，色谱柱为硅胶柱，硅胶的规格为200-300目；洗脱液为体积比30:1～35:1的二氯甲烷和甲醇的混合物。
9.权利要求1所述的近红外荧光分子探针在制备细胞成像试剂中的应用。
10.权利要求1所述的近红外荧光分子探针在制备非小细胞肺癌靶向成像检测试剂中的应用。
11.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述非小细胞肺癌为EML4-ALK阳性非小细胞肺癌。
CN202110481931.8A 2021-04-30 2021-04-30 一种近红外荧光分子探针及其制备方法和在细胞成像中的应用 Active CN113150774B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110481931.8A CN113150774B (zh) 2021-04-30 2021-04-30 一种近红外荧光分子探针及其制备方法和在细胞成像中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110481931.8A CN113150774B (zh) 2021-04-30 2021-04-30 一种近红外荧光分子探针及其制备方法和在细胞成像中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113150774A CN113150774A (zh) 2021-07-23
CN113150774B true CN113150774B (zh) 2022-05-31

Family

ID=76873179

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110481931.8A Active CN113150774B (zh) 2021-04-30 2021-04-30 一种近红外荧光分子探针及其制备方法和在细胞成像中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113150774B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115504984B (zh) * 2022-09-09 2023-07-25 南京诺源医疗器械有限公司 一种靶向α型叶酸受体的培美近红外荧光分子及其制备方法和应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103834382B (zh) * 2014-01-02 2016-03-02 东南大学 一种近红外荧光分子探针及其制备方法与用途
NZ739788A (en) * 2015-08-18 2023-07-28 Rakuten Medical Inc Phthalocyanine dye conjugates and their storage

Also Published As

Publication number Publication date
CN113150774A (zh) 2021-07-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2020233166A1 (en) Tertiary amine substituted coumarin compounds and their uses as fluorescent labels
WO2021103700A1 (zh) 一种可响应硝基还原酶的乏氧探针化合物及其制备与应用
CN102146284B (zh) 一种比率型荧光探针及其应用
CN110511245B (zh) 一种基于硫代半菁染料的近红外荧光探针SHCy-P及其制备方法和应用
CN109053802A (zh) 一种比率型近红外荧光探针及其合成方法与应用
CN113292582B (zh) 一种同时区分羟基自由基和过氧化氢的双功能荧光探针的合成与应用
CN104177341A (zh) 一种检测二价铜离子的化合物及其制备与应用
CN113150774B (zh) 一种近红外荧光分子探针及其制备方法和在细胞成像中的应用
Liu et al. Oxidized-morpholine dressing ratiometric fluorescent probe for specifically visualizing the intracellular glutathione
CN113185498A (zh) 一种近红外荧光靶向分子探针及其制备方法和在细胞成像中的应用
CN113354627B (zh) 一种用于检测粘度的近红外荧光化合物及其制备与应用
CN100486966C (zh) 检测羟基自由基的近红外荧光探针及其合成方法
CN113004258B (zh) 一种基于esipt效应的硫化氢比率型荧光分子探针的制备方法及其应用
CN110642772A (zh) 检测硝基还原酶的近红外比率荧光探针及制备方法和应用
Mei et al. A novel fluorescence probe for the selective detection of cysteine in aqueous solutions and imaging in living cells and mice
CN109485627B (zh) 一种香豆素衍生物及其合成方法和在检测硫化氢中的应用
CN113773265B (zh) 一种用于检测cyp450的荧光探针及其制法和应用
WO2023164003A2 (en) Reagents for labeling biomolecules and uses thereof
JPWO2007100082A1 (ja) 蛍光プローブ
CN111978342B (zh) 一种靶向egfr的荧光淬灭探针及其制备方法与应用
CN112794819B (zh) 一种基于分子异构化机理的可用于铁离子特异性检测的荧光探针的制备方法及应用
CN111978340A (zh) 一种同时检测生物硫醇及过氧化氢的探针和制备方法
CN113354676B (zh) 一种半胱氨酸荧光探针及其制备方法与应用
CN113004310B (zh) 一种基于dcpo母核的过氧化氢比率型荧光分子探针的制备方法及其应用
CN110669350A (zh) 一种哌啶基bodipy类红光荧光染料及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant