CN113057917B

CN113057917B - 一种金花葵抗衰组合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN113057917B
Application number: CN202110255490.XA
Authority: CN
Inventors: 张利春; 黄丽翠
Original assignee: Guangdong Chuangmei Anti Aging Research Co ltd
Current assignee: Guangzhou Meizihe Cosmetics Co ltd
Priority date: 2021-03-09
Filing date: 2021-03-09
Publication date: 2022-07-26
Anticipated expiration: 2041-03-09
Also published as: CN113057917A

Abstract

本发明公开了一种金花葵抗衰组合物及其制备方法和应用。所述的抗衰组合物，主要由以下重量份的中药材提取制得：金花葵30‑50份、红景天10‑20份、柠檬1‑10份。本发明公开的抗衰老组合物可以作为一种活性添加剂应用在化妆品中，制得具有抗衰老功效的化妆品。消费者使用测试证明，添加了上述的抗衰老组合物的护肤品可以提升皮肤含水量，降低经皮水分丢失，皮肤弹性得到改善，有效去除面部皱纹及细纹，显示了良好的抗衰老功效。

Description

一种金花葵抗衰组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及化妆品领域，特别涉及一种金花葵抗衰组合物及其制备方法和应用。

背景技术

皮肤是人体最大的器官，随着年龄的增长而衰老。有文献报道女性30岁左右开始长皱纹，逐渐出现色斑，随后皮肤变得松弛、粗糙、黯淡、皱纹加深变多等。皮肤的衰老几乎伴随着每个人的下半生，对人们的工作、生活产生消极影响，因此如何延缓衰老是化妆品的研究焦点之一。

对于上述的延缓衰老化妆品，一直以来，相比化学合成的抗衰老原料而言，植物来源的抗衰老原料在皮肤刺激或者安全性方面有优势，也更易被消费者所接受。近年来学者研究发现一些植物或中草药中含有抗氧化成分，具有对抗自由基，促进皮肤新陈代谢，延缓机体衰老之功效，但实际应用中，其防皱抗衰老作用并不明显。因此，研究一款防皱抗衰老效果良好、稳定性好的专用于化妆品添加的全新纯天然护肤组合物十分有必要。

金花葵（Hibiscus manihot L.）为锦葵科秋葵属一年生草本植物，别名山榆皮、菜芙蓉、野芙蓉或黏干。野生金花葵近濒临绝种，最早于2003年8月在河北邢台地区被中国农科院唐益雄研究员发现，目前市场上多为人工种植品。《本草纲目》中记载金花葵具有清热、凉血、解毒之功效，可用于治疗消化不良、饮食不思、跌打损伤等病症。现代药理研究证明金花葵药用价值很高，在200多个秋葵属植物中保健药用功能最强，主要表现在消炎镇痛、清热解暑、降低血脂、抗肿瘤、抗氧化、调节免疫等方面有明显功效。

金花葵活性成分丰富，其生物黄酮含量极高，还包括不饱和脂肪酸、挥发油、有机酸、有机多糖、生物碱、蛋白质、维生素、聚糖胶、植物纤维等，而人体必须的微量元素也含量丰富。金花葵在化妆品领域有良好的应用前景，然而这方面的报道很少。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种金花葵抗衰组合物，该抗衰组合物的有效成分主要由金花葵等植物提取制得。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种抗衰组合物，主要由以下重量份的中药材提取制得：金花葵30-50份、红景天10-20份、柠檬1-10份。

在本发明的一些具体实施方案中，所述的抗衰组合物主要由以下重量份的中药材提取制得：金花葵40份、红景天15份、柠檬5份。

在其中一些实施例中，所述的抗衰组合物还可以包括如下重量份的中药材提取制得：黑灵芝15份、芦荟7份、甘草5份。

本发明所涉及的金花葵为锦葵科秋葵属一年生草本植物金花葵的花，具有清热、凉血、解毒之药效。

本发明所涉及的红景天为景天科大花红景天的干燥根和根茎。红景天味甘、苦，性平，归肺、心经。具有益气活血，通脉平喘之功。

本发明所涉及的柠檬为双子叶植物纲芸香科柑橘属植物柠檬的果皮。柠檬皮味微苦，性温，《广西中药志》记载其“行气，祛痰，健胃”。

本发明所涉及的黑灵芝帽为肾形，上表面为赤褐色，具有云状、环状图案和漆状光泽。性温、味淡，被称为灵芝中的极品，对人体保健具有健脑、消炎、利尿、益肾等功效药用疗效。

本发明所涉及的芦荟为库拉索芦荟，是芦荟属中少数可食用的物种之一，其制品被广泛应用于食品、美容、保健、医药等领域。有报道称芦荟具有使皮肤收敛、柔软化、保湿、消炎等美容功能。

本发明所涉及的甘草为豆科植物甘草的干燥根及根茎。甘草味甘，性平。入心、肺、脾、胃经。功能：和中缓急、润肺、解毒、调和诸药。

本发明的一些具体实施方案中，还提供了所述抗衰组合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）将柠檬果皮切碎，转入层析柱中，装柱、压实，用乙醇水溶液洗脱，获得洗脱液；

（2）向洗脱液中加入水，得到混合液；

（3）将金花葵和红景天烘干，粉碎，然后加入适量混合液浸泡，液面高于材料为宜，然后转入层析柱中，装柱、压实，用步骤（3)获得的混合液洗脱，获得提取液；

（4）将提取液离心，收集上清液，加入二丙二醇，混合均匀，然后旋转蒸发除去乙醇，即得。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤（1）所述乙醇水溶液的体积分数为90-95%；洗脱的流速为1-2BV/h，洗脱液的收集量为1-2BV。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤（2）所述混合液中乙醇体积分数为60-80%。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤（3）所述浸泡时间为6-12小时；所述洗脱的流速为1-2BV/h，洗脱液的收集量为2-3BV。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤（4）中二丙二醇的添加量为上清液重量的40-60%。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤（3）中还加入了黑灵芝、芦荟、甘草。

本发明实施例制得的抗衰组合物可以作为一种添加剂应用在化妆品中，所述的化妆品按剂型分可以为膏霜、乳液、精华液、面膜、爽肤水。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：本发明实施例提供的抗衰组合物，可以作为一种活性添加剂应用在化妆品中，制得具有抗衰老功效的化妆品。消费者使用测试证明，添加了上述的抗衰老组合物的护肤品可以提升皮肤含水量，降低经皮水分丢失，皮肤弹性得到改善，有效去除面部皱纹及细纹，显示了良好的抗衰老功效。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1、使用抗衰老乳液8周后皮肤角质层含水量的变化；

图2、使用抗衰老乳液8周后TEWL值的变化；

图3、使用抗衰老乳液8周后皮肤弹性值的变化；

图4、使用抗衰老乳液8周后皮肤皱纹分值的变化；

图5、志愿者使用抗衰老乳液8周眼部皱纹变化比较。

具体实施方式

本发明公开了一种金花葵抗衰组合物及其制备方法和应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都本视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更和组合，来师兄和应用本发明技术。

本发明提供的抗衰老组合物和应用配方中所用原料及试剂可由市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1

一种抗衰组合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）将柠檬果皮1kg切碎，转入层析柱中，装柱、压实，用90%体积分数的乙醇水溶液洗脱，流速为2BV/h，获得1BV洗脱液；

（2）向洗脱液中加入水，得到乙醇体积分数为80%的混合液；

（3）将金花葵50kg和红景天10kg烘干，粉碎，然后加入适量混合液浸泡6小时，其中液面稍高于材料为宜；然后转入层析柱中，装柱、压实，用步骤（3)获得的混合液洗脱，流速控制在2BV/h，获得2BV提取液；

（4）将提取液离心，收集上清液，加入二丙二醇，其中二丙二醇的添加量为上清液重量的40%；混合均匀，然后旋转蒸发除去乙醇，即得。

实施例2

一种抗衰组合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）将柠檬果皮10kg切碎，转入层析柱中，装柱、压实，用95%体积分数的乙醇水溶液洗脱，流速为1BV/h，获得2BV洗脱液；

（2）向洗脱液中加入水，得到乙醇体积分数为60%的混合液；

（3）将金花葵30kg和红景天20kg烘干，粉碎，然后加入适量混合液浸泡12小时，其中液面稍高于材料为宜；然后转入层析柱中，装柱、压实，用步骤（3)获得的混合液洗脱，流速控制在1BV/h，获得3BV提取液；

（4）将提取液离心，收集上清液，加入二丙二醇，其中二丙二醇的添加量为上清液重量的60%；混合均匀，然后旋转蒸发除去乙醇，即得。

实施例3

一种抗衰组合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）将柠檬果皮5kg切碎，转入层析柱中，装柱、压实，用92%体积分数的乙醇水溶液洗脱，流速为1.5BV/h，获得1.5BV洗脱液；

（2）向洗脱液中加入水，得到乙醇体积分数为70%的混合液；

（3）将金花葵40kg和红景天15kg烘干，粉碎，然后加入适量混合液浸泡8小时，其中液面稍高于材料为宜；然后转入层析柱中，装柱、压实，用步骤（3)获得的混合液洗脱，流速控制在1.5BV/h，获得2.5BV提取液；

（4）将提取液离心，收集上清液，加入二丙二醇，其中二丙二醇的添加量为上清液重量的50%；混合均匀，然后旋转蒸发除去乙醇，即得。

实施例4

一种抗衰组合物的制备方法，包括如下步骤：

（2）向洗脱液中加入水，得到乙醇体积分数为70%的混合液；

（3）将金花葵40kg、红景天15kg、黑灵芝15kg、芦荟7kg、甘草5kg烘干，粉碎，然后加入适量混合液浸泡8小时，其中液面稍高于材料为宜；然后转入层析柱中，装柱、压实，用步骤（3)获得的混合液洗脱，流速控制在1.5BV/h，获得2.5BV提取液；

对比例1

一种抗衰组合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）将金花葵30kg和红景天20kg烘干，粉碎，然后加入适量60%体积分数的乙醇水溶液浸泡12小时，其中液面稍高于材料为宜；然后转入层析柱中，装柱、压实，用60%体积分数的乙醇水溶液洗脱，流速控制在1BV/h，获得3BV提取液；

（2）将柠檬果皮10kg切碎，转入层析柱中，装柱、压实，用95%体积分数的乙醇水溶液洗脱，流速为1BV/h，获得2BV洗脱液；

（3）将步骤（1）的提取液和步骤（2）获得的洗脱液混合，离心，收集上清液，加入二丙二醇，其中二丙二醇的添加量为上清液重量的60%；混合均匀，然后旋转蒸发除去乙醇，即得。

对比例2

一种抗衰组合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）将柠檬果皮5kg切碎，转入层析柱中，装柱、压实，用95%体积分数的乙醇水溶液洗脱，流速为1BV/h，获得2BV洗脱液；

（2）将洗脱液离心，收集上清液，加入二丙二醇，其中二丙二醇的添加量为上清液重量的60%；混合均匀，然后旋转蒸发除去乙醇，即得。

对比例3

一种抗衰组合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）将金花葵40kg烘干，粉碎，然后加入适量混合液浸泡12小时，其中液面稍高于材料为宜；然后转入层析柱中，装柱、压实，用60%体积分数的乙醇水溶液洗脱，流速控制在1BV/h，获得3BV提取液；

（2）将提取液离心，收集上清液，加入二丙二醇，其中二丙二醇的添加量为上清液重量的60%；混合均匀，然后旋转蒸发除去乙醇，即得。

对比例4

一种抗衰组合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）将红景天15kg烘干，粉碎，然后加入适量混合液浸泡12小时，其中液面稍高于材料为宜；然后转入层析柱中，装柱、压实，用60%体积分数的乙醇水溶液洗脱，流速控制在1BV/h，获得3BV提取液；

试验1 总黄酮含量的测定

试验原理：黄酮母核中含有碱性氧原子,一般又多带酚羟基，能和铝离子产生黄色络合物,又加入亚硝酸钠和氢氧化钠,使在碱性溶液中呈红色，溶液在510nm 处有最大吸收，显色反应在60min内稳定。用芦丁作为对照品，用硝酸铝作为黄酮类比色测定的显色剂，吸光度与芦丁的浓度呈线形关系，采用分光光度法对总黄酮进行了含量测定。

仪器与试剂：紫外可见分光光度计；电子天平（0.1mg）；60%（V/V）的乙醇溶液；5%亚硝酸钠溶液；10%硝酸铝溶液。

芦丁标准溶液的配制：称量20.8mg芦丁，用60%乙醇定容到25ml容量瓶作为标准溶液。

标准曲线的制作：精密量取芦丁标准溶液0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL，分别置于25mL 容量瓶中，各加水至6mL，加亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6min，加硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6min，加氢氧化钠溶液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min，同时，按上述步骤不加硝酸铝溶液配制空白液，作为空白调零，在波长510nm 处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，进行线性拟合，得到标准曲线方程Y =100.02X-0.4165,R²=0.9996。

试样的制备：精密量取样品适量（V），置25mL（V1）容量瓶中，加入60%乙醇溶液定容至刻度。准确吸取该液5mL（V2），置于另一只25mL 容量瓶中，加水1mL，加亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6min，加硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6min，加氢氧化钠溶液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min，作为测试液。同时，按上述步骤不加硝酸铝溶液配制空白液，作为空白调零。

试样的测定：吸取测试液，以空白液为对照，在波长510nm 处测定其吸光度，根据标准曲线计算测试液中总黄酮的含量（A）。如果测试液的吸光度超出标准曲线最高浓度的吸光度，则应对测试液进行适当稀释后再测定。

样品中总黄酮的含量（X）按下列公式计算：

X ——样品中总黄酮含量，单位为毫克每100 毫升（mg/100mL）；

A ——从标准曲线算得的测试液中总黄酮含量，单位为毫克（mg）；

V ——量取样品的体积，单位为毫升（mL）；

V1 ——样品定容的体积，单位为毫升（mL）；

V2 ——配制测试液量取样品溶液的体积，单位为毫升（mL）。

分别对实施例1-3和对比例1-4所制得的抗衰组合物进行总黄酮含量的测定，测试结果如表1。

表1 总黄酮含量

由表1可见，实施例1-3所制得的抗衰老组合物的总黄酮含量相比对比例要高。由实施例2与对比例1-4对比可见，本发明提供的工艺比常规工艺提取得到的总黄酮含量要高。

实验2 DPPH自由基清除试验

抗氧化就是任何以低浓度存在就能有效抑制自由基的氧化反应的物质，其作用机理可以是直接作用在自由基，或是间接消耗掉容易生成自由基的物质，防止发生进一步反应。目前对自由基清除剂的研究方法主要有2类，一类是体外模型，另一类是体内模型，其中DPPH法是体外模型中最常用的方法。

DPPH又称1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，是一种很稳定的氮中心的自由基，他的稳定性主要来自共振稳定作用的3个苯环的空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。它的无水乙醇溶液呈紫色，在517nm波长处有最大吸收，吸光度与浓度呈线性关系。向其中加入自由基清除剂时，可以结合或替代DPPH·，使自由基数量减少，吸光度变小，溶液颜色变浅，借此可评价清除自由基的能力。即通过在517nm波长处检测样品清除DPPH·的效果，来计算抗氧化能力。

参照文献（王笑晴.基于DPPH自由基清除能力的姜黄提取物抗氧化活性评价[J].药物评价研究,2011,34(05):360-363）所记载的方法，首先，配制抗坏血酸梯度稀释液，检测它们对 DPPH 自由基的清除作用，平行测试3次，取平均值计算抗坏血酸对DPPH的清除率（Y），进行线性拟合得到标准曲线方程，得出抗坏血酸的IC50值。然后，移取待测组合物10mL于离心管内，9000转/分离心10分钟，弃去上清液，获取沉淀，加入丙酮10mL，在避光条件下震荡提取30分钟，制得待检样品；分别取梯度稀释的待检样品，以IC50值为待测组合物清除DPPH能力的评价指标，测定待测组合物对DPPH自由基的清除能力。

将抗坏血酸标准品用水分别稀释成0.03、0.04、0.05、0.06、0.08 mg/mL浓度梯度的溶液，检测它们对 DPPH 自由基的清除作用，计算抗坏血酸对DPPH的清除率（Y），进行线性拟合，得到标准曲线方程Y=0.5257X+0.4659，R²=0.9956，得出抗坏血酸的IC50值为6.5mg/100mL。

分别对实施例1-4、对比例1-4所制得的抗衰组合物进行DPPH自由基清除试验，测试结果如表2。

表2 各待测组的IC50值

由表2可见，本发明实施例1-4所制得的抗衰老组合物抗氧化能力明显高于对比例1-4，且实施例4中增加黑灵芝、芦荟、甘草后抗氧化能力进一步提升。

实验3 人体斑贴测试

对本发明实施例1-4所制得的抗衰老组合物进行人体皮肤封闭型斑贴试验，以评估产品对人体皮肤潜在的不良反应。具体方法参照《化妆品安全技术规范》（2015版）第七章人体安全性检验方法第2节所记载的方法执行。其中判断标准见表3，测试结果见表4.

表4 人体皮肤封闭型斑贴试验结果

从表4可见，本发明实施例所制得的抗衰老组合物没有发现对人体皮肤潜在的不良反应，可以作为一种原料应用在化妆品中。

实施例5

一种抗衰老爽肤水，包括如下质量百分含量的组分：双丙甘醇1%、甲基丙二醇2%、甘油1%、甘油聚醚-26 0.5%、对羟基苯乙酮0.5%、尿囊素0.05%、海藻糖0.1%、羟乙基纤维素0.03%、甘草酸二钾0.02%、黄原胶0.05%、己二醇0.5%、辛基十二醇聚醚-16 0.3%、卡波姆0.1%、氨丁三醇0.03%、透明质酸钠0.02%、小核菌（SCLEROTIUM ROLFSSII）胶0.02%、实施例1所制得的抗衰老组合物1%、水余量。

实施例6

一种抗衰老乳液，包括如下质量百分含量的组分：苯基聚三甲基硅氧烷1%、聚二甲基硅氧烷1%、异壬酸异壬酯3%、聚二甲基硅氧烷醇0.5%、环五聚二甲基硅氧烷2%、聚二甲基硅氧烷交联聚合物0.5%、双丙甘醇2%、甘油5%、透明质酸钠0.05%、泛醇0.2%、尿囊素0.05%、丙烯酸（酯）类/C10-30 烷醇丙烯酸酯交联聚合物0.3%、C20-22 醇磷酸酯0.5%、C20-22 醇0.5%、氨甲基丙醇0.15%、EDTA 二钠0.03%、羟苯丙酯0.1%、苯氧乙醇0.5%、乙基己基甘油0.05%、羟苯甲酯0.2%、实施例2所制得的抗衰老组合物5%、水余量。

试验4 志愿者测试

参照文献（朱丽平,孙常磊,李子安.人参抗衰老面膜临床功效测试与分析[J].中国美容医学,2016,25(02):33-36.）记载的方法对实施例6所制得的抗衰老产品进行为期8周的抗衰测试。

选取健康志愿者30名。纳入标准：①男女不限，年龄30～65岁；有一定的面部/眼部皮肤松弛或面部/眼部有细小皱纹现象；②身体健康，态度认真，具有一定表述能力，能真实反应使用后的感受；③自愿参加，并签阅知情同意书，能严格遵守研究方案的要求，按研究方案要求使用产品并完成随访。排除标准：①妊娠或哺乳期妇女；②敏感性皮肤；③面部皮肤破损或有影响观察面部状态的皮肤病者；④面部接受过皮肤治疗、美容以及其他可能影响结果的测试；⑤近1个月内有日晒伤或使用激素类药物及免疫抑制剂者；⑥当前或近3个月内参加过其他面部临床研究或接受过皮肤科医生治疗者。终止和剔除标准：①受试者要求中止试验；②受试者的顺应性不好；③由于不良反应或特殊生理病理变化等，无法继续试验；④测试中，使用其他对本实验有影响的护肤品，过多接受紫外线照射等。

长效测试：志愿者每天晚上洁面后，施用实施例6所制得的抗衰老乳液，按摩吸收后无需洁面和涂抹其他任何化妆品,连续8周；在使用前0周、使用2周、4周、6周、8周时各随访1次，共计5次，要求受试者每次随访为日间同一时间。

仪器测量方法：采用德国CK公司的水分测试仪Corneometer、皮肤水分流失仪Tewameter、皮肤弹性测试仪MPA580，以及美国Canfield公司的VISIA面部图像分析***进行测试。具体的：①皮肤角质层含水量测量（皮肤含水量）：使用水分测试仪测量左右脸颊部位角质层含水量，测量4次取平均值；②面部皮肤经皮水分流失（TEWL值）测量：使用皮肤水分流失仪，测量左右面部经皮水分流失，测量2次取平均值；③面部皮肤弹性测量：用皮肤弹性测试仪测量左右眼尾和眼下的皮肤弹性，核算取R2的平均值，R2=Ua/Uf；Ua为从取消负压到下一次连续测试皮肤表面再加负压时皮肤的恢复值；Uf为有负压时的皮肤最大拉伸量。④面部成像：采用VISIA面部图像分析***对受试者面部进行拍照(正面，左、右侧45°方向)。提取皱纹分值和纹理分值，取平均值。

皮肤角质层含水量的测试结果：由图1可知，同0周相比，使用产品第2周起，皮肤角质层含水量逐渐提升，本发明制得的抗衰老乳液显示了良好的补水保湿效果。

TEWL值（单位g/hm²）的测量结果：由图2可知，同0周相比，使用产品第2周起，皮肤经皮流失水分逐渐降低，本发明制得的抗衰老乳液显示了良好的锁水效果。

皮肤弹性的测试结果：由图3可知，同0周相比，使用产品第4周起，皮肤弹性得到显著提升，本发明制得的抗衰老乳液显示了良好的提升皮肤弹性效果。

皮肤皱纹分值的测试结果:由图4可知，同0周相比，使用产品第4周起，志愿者面部皱纹分值明显逐渐降低，说明本发明制得的抗衰老乳液有很强的改善面部皱纹及细纹的功效，且不会因长时间使用而产生皮肤耐受性。另外从图5可知，使用产品8周后志愿者鱼尾纹区的小细纹得到明显改善。

因此，受试者长期使用本发明实施例所制得的抗衰老乳液可以提升皮肤含水量，降低经皮水分丢失，皮肤弹性得到改善，有效去除面部皱纹及细纹，显示了良好的抗衰老功效。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种抗衰组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）称取以下重量份的中药材：金花葵30-50份、红景天10-20份、柠檬1-10份；

将柠檬果皮切碎，转入层析柱中，装柱、压实，用乙醇水溶液洗脱，获得洗脱液；其中所述乙醇水溶液的体积分数为90-95%；洗脱的流速为1-2BV/h，洗脱液的收集量为1-2BV；

（2）向洗脱液中加入水，得到混合液，使所述混合液中乙醇体积分数为60-80%；

（3）将金花葵和红景天烘干，粉碎，然后加入适量步骤（2）所得的混合液浸泡，液面高于材料为宜，然后转入层析柱中，装柱、压实，用混合液洗脱，获得提取液；其中所述浸泡时间为6-12小时；所述洗脱的流速为1-2BV/h，提取液的收集量为2-3BV；

（4）将提取液离心，收集上清液，加入二丙二醇，混合均匀，然后旋转蒸发除去乙醇，即得；其中所述二丙二醇的添加量为上清液重量的40-60%。

2.根据权利要求1所述的抗衰组合物的制备方法，其特征在于，步骤（1）中称取以下重量份的中药材：金花葵40份、红景天15份、柠檬5份。