CN113016800A - 一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂及抑制方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于环境微生物学技术领域，具体涉及一种油田硫酸盐还原菌活性抑制剂，所述的油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂是戊二醛、溴硝醇、四羟甲基硫酸磷三种化学杀菌剂复配生物表面活性剂鼠李糖脂得到的。是解决现有抑制油田硫酸盐还原菌产硫化氢量的方法存在抑菌效率低、抑菌方法复杂难以实施及油田微生物存在抗药性等一些现有技术不足的问题。与单一使用化学杀菌剂或生物表面活性剂相比，本发明中的抑制剂抑制硫酸盐还原菌产生硫化氢活性的效率更高，且能降低潜在的因杀菌剂过量使用导致的环境污染风险，可应用于油田开发过程中对于硫酸盐还原菌危害的防控中。

Description

一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂及抑制方法
技术领域
本发明涉及环境微生物学技术领域，尤其涉及一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制方法及应用。
背景技术
目前，在我国石油开采大多都进入后开发期的注水驱油阶段，此阶段采出液中极高的含水率造成了严重的微生物腐蚀(Microbial influenced Corrosion,MIC)，最终导致日益增加的油田开采的成本。随着厌氧技术的发展，我们对厌氧菌的了解更加深入，研究发现，硫酸盐还原菌(sulfate-reducing bacteria,SRB)是导致微生物腐蚀的最主要的菌群。硫酸盐还原菌是指以硫或含硫化合物为底物产生硫化氢气体的微生物。SPB在氧化营养物质还原硫酸盐的同时，产生了大量的硫化物，而这些硫化物就是导致微生物腐蚀的原因。在油田***中，硫化氢不仅可以加速腐蚀，污染原油，降低原油品质，增加后续处理成本，还因其本身毒性较大，对工作人员生命严重威胁。同时生成的硫酸亚铁沉淀则会导致油层堵塞以致降低油层渗漏率，使得开采难度大大增加。硫酸盐还原菌带来的损失每年高达数亿美元。因此，消除或降低油藏硫酸盐还原菌产生的硫化氢含量是亟待解决的问题。
我国抑制硫酸盐还原菌的方法有很多，主要分为物理法、化学法和生物法。物理方法主要包括阴极保护、紫外线照射、超声波处理以及高压脉冲电场杀菌等技术方法，但在实际运用中发现，物理法难以长期有效抑制硫酸盐还原菌，同时对于已经生成的生物膜没有明显效果。生物法是利用与SPB有着相同习性但不产H2S的微生物，通过竞争、拮抗或共生等关系，以达到抑制SPB的目的。或者是利用一些能够产生抑制SPB生长代谢产物的微生物，来阻碍***中SPB生长繁殖。但由于生物法相对复杂，故在我国油田***中运用较少。化学法，即向油田回注水中投加一定量的杀菌剂，从而达到杀死或抑制SPB的目的，此方法相对简单，容易操作，故在上世纪八十年代就被我国广泛使用。虽然杀菌剂可以通过破坏SRB细胞的细胞壁、细胞膜、酶或者基质等，来达到杀灭SPB的目的，是目前抑制SRB最直接有效的方法。但是长期使用化学杀菌剂，不仅会造成环境污染，还会使得SPB产生耐药性。
发明内容
本发明是解决现有抑制油田硫酸盐还原菌产硫化氢量的方法存在抑菌效率低、抑菌方法复杂难以实施及油田微生物存在抗药性等一些现有技术不足的问题，提供一种高效抑菌的抑制剂及抑制方法。。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂，所述的油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂是戊二醛、溴硝醇、四羟甲基硫酸磷三种化学杀菌剂复配生物表面活性剂鼠李糖脂得到的。
上述的一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂，在超净台中，用无菌水分别配制戊二醛、溴硝醇及四羟甲基硫酸磷三种化学杀菌剂母液，冰箱内保存，在超菌台内将活化的铜绿假单胞菌按5％接种于灭菌的代谢产鼠李糖脂的培养基中，37℃，180r/min发酵7d得到鼠李糖脂。
上述的一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂，所述的代谢产鼠李糖脂的培养基是甘油3-4％，NaNO3 0.2-0.4％，K2HPO4·3H2O 0.35-0.45％，KH2PO4 0.4-0.5％，MgSO4·7H2O 0.003-0.005％，CaC12 0.01-0.02％，KCl 0.08-0.14％，NaCl 0.08-0.14％，酵母粉0.1-0.2％，余量为水。
上述的一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂，按质量浓度比，戊二醛:溴硝醇:四羟甲基硫酸磷:鼠李糖脂＝(10～100mg/L):(10～100mg/L):(10～100mg/L):(0.1～10mg/L)。
上述的任一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂的抑制方法，所述的抑制剂抑制油田硫酸盐还原菌产硫化氢，包括如下步骤，
1)将油田采出水接种于灭菌的硫酸盐还原菌培养基内，置于45℃生化培养箱中静置培养，直至厌氧管内富集液变黑，得到油田硫酸盐还原菌富集培养物；
2)将油田硫酸盐还原菌富集培养物按1％～20％接种量接种于油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂内，并用亚甲基蓝分光光度法检测其硫化氢含量，随后置于37℃生化培养箱中静置培养2天～60天后，再次检测硫化氢含量。
上述的任一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂的抑制方法，步骤1)中，所述的硫酸盐还原菌培养基成分为乳酸钠(50％)2.5g·L-1，NH4Cl 1.0g·L-1，Na2SO4 1.0g·L-1，酒石酸钾钠1.0g·L-1，MgSO4·7H2O 0.5g·L-1，K2HPO4·3H2O 0.5g·L-1，酵母膏0.5g·L-1，Na2S2O3 0.2g·L-1，柠檬酸铁铵0.2g·L-1，NaCl 7.0g·L-1，抗坏血酸0.1g·L-1；加入1.7％琼脂条为固体培养基，调pH为7.0～8.0。
本发明的有益效果：
本发明提供一种抑制油田硫酸盐还原菌产硫化氢的混合抑菌剂，该抑菌剂由化学杀菌剂和生物表面活性剂按比例混合，可以提高杀灭或抑制油田硫酸盐还原菌的能力。
将化学杀菌剂与生物表面活性剂复配使用，对比使用单一化学杀菌剂作为油田硫酸盐还原菌抑制剂来说，一定程度上减少投加量，降低了对油田及周边环境的污染，其次能够抵抗油田硫酸盐还原菌的抗药性。对比单独使用生物表面活性剂而言，具有较为快速、高效、长期的杀菌抑菌效果。
本发明适用范围广，对我国大部分油田均可使用，且操作简单。
本发明可长期使用，环境友好，同时杀菌抑菌效率高、持续时间长，有利于现场推广与应用。
具体实施方式：
以下结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明内容不仅局限于以下实施例。
材料准备
1、化学杀菌剂和生物表面活性剂
三种化学杀菌剂戊二醛、溴硝醇及THPS购于市场，配制好母液后，置于4℃冰箱内保存备用。生物表面活性剂由活化的铜绿假单胞菌按5％接种于灭菌的代谢产鼠李糖脂的培养基，37℃，180r/min发酵7d得到。
所述的代谢产鼠李糖脂的培养基是甘油3-4％，NaNO3 0.2-0.4％，K2HPO4·3H2O0.35-0.45％，KH2PO4 0.4-0.5％，MgSO4·7H2O 0.003-0.005％，CaC12 0.01-0.02％，KCl0.08-0.14％，NaCl 0.08-0.14％，酵母粉0.1-0.2％，余量为水。
2、培养基
硫酸盐还原菌培养基成分为：乳酸钠(50％)2.5g·L-1，NH4Cl 1.0g·L-1，Na2SO41.0g·L-1，酒石酸钾钠1.0g·L-1，MgSO4·7H2O 0.5g·L-1，K2HPO4·3H2O 0.5g·L-1，酵母膏0.5g·L-1，Na2S2O3 0.2g·L-1，柠檬酸铁铵0.2g·L-1，NaCl 7.0g·L-1，抗坏血酸0.1g·L-1；加入1.7％琼脂条为固体培养基，调pH为7.0～8.0。
3、实验仪器
恒温培养箱
超净工作台
立式压力蒸汽灭菌器
微型紫外分光光度计
实验室pH计
串联真空抽滤装置
实施例1东北某油田硫酸盐还原菌抑制实验
用预先除菌的聚乙烯塑料桶(10.0L)从东北某油田采油井口端收集采出液，待取满10.0L聚乙烯塑料桶后，关闭采样口阀门，迅速将聚乙烯塑料桶加盖密封，做好标记后，由物流公司运回实验室。随后对各油井采出液进行油水分离。用中速定性滤纸分别过滤10口油井的采出液，完成油水分离。将过滤好的采出水内通一段时间的99.99％高纯氮气，赶走空气，将采出水保存于实验室内。用作硫酸盐还原菌富集培养物制备。
在超净台内，用无菌注射器将处理好的油田采出水以5％的比例接种于灭菌的硫酸盐还原菌培养基内。硫酸盐还原菌培养基，成分为乳酸钠(50％)2.5g·L-1，NH4Cl 1.0g·L-1，Na2SO4 1.0g·L-1，酒石酸钾钠1.0g·L-1，MgSO4·7H2O 0.5g·L-1，K2HPO4·3H2O 0.5g·L-1，酵母膏0.5g·L-1，Na2S2O3 0.2g·L-1，柠檬酸铁铵0.2g·L-1，NaCl 7.0g·L-1，抗坏血酸0.1g·L-1；加入1.7％琼脂条为固体培养基，调pH为7.0～8.0。再将其置于45℃生化培养箱中静置培养。每日定时观察富集液变化情况，直至厌氧管内富集液变黑(形成的FeS黑色沉淀表明菌株生长)，即获得东北某油田硫酸盐还原菌的富集培养物。
在超净台中，用无菌水分别配制戊二醛、溴硝醇及THPS三种化学杀菌剂母液。母液配制好后，置于4℃冰箱内保存备用。在超菌台内将活化的铜绿假单胞菌按5％接种于灭菌的代谢产鼠李糖脂的培养基，37℃，180r/min发酵7d得到鼠李糖脂，备用。随后，将化学杀菌剂母液及生物表面活性剂按照质量比为戊二醛:溴硝醇:THPS:鼠李糖脂＝10mg/L:5mg/L:5mg/L:0.5mg/L的比例接种于灭菌的硫酸盐还原菌的培养基内。随后将油田硫酸盐还原菌富集培养物按5％接种量接种至硫酸盐还原菌的培养基内，并用亚甲基蓝分光光度法检测其硫化氢含量。随后置于45℃生化培养箱中静置培养45天后，检测到硫化氢增量为零，故加入混合抑制剂对东北某油田硫酸盐还原菌富集培养物有良好的抑制效果。
实施例2新疆某油田硫酸盐还原菌抑制实验
用预先除菌的聚乙烯塑料桶(10.0L)从新疆某油田采油井口端收集采出液，待取满10.0L聚乙烯塑料桶后，关闭采样口阀门，迅速将聚乙烯塑料桶加盖密封，做好标记后，由物流公司运回实验室。随后对各油井采出液进行油水分离。用中速定性滤纸分别过滤10口油井的采出液，完成油水分离。将过滤好的采出水内通一段时间的99.99％高纯氮气，赶走空气，将采出水保存于实验室内。用作硫酸盐还原菌富集培养物制备。
在超净台内，用无菌注射器将处理好的油田采出水以10％的比例接种于灭菌的硫酸盐还原菌培养基内。培养基为硫酸盐还原菌培养基，成分为乳酸钠(50％)2.5g·L-1，NH4Cl 1.0g·L-1，Na2SO4 1.0g·L-1，酒石酸钾钠1.0g·L-1，MgSO4·7H2O 0.5g·L-1，K2HPO4·3H2O 0.5g·L-1，酵母膏0.5g·L-1，Na2S2O3 0.2g·L-1，柠檬酸铁铵0.2g·L-1，NaCl7.0g·L-1，抗坏血酸0.1g·L-1；加入1.7％琼脂条为固体培养基，调pH为7.0～8.0。再将其置于37℃生化培养箱中静置培养。每日定时观察富集液变化情况，直至厌氧管内富集液变黑(形成的FeS黑色沉淀表明菌株生长)，即获得新疆某油田硫酸盐还原菌的富集培养物。
在超净台中，用无菌水分别配制戊二醛、溴硝醇及THPS三种化学杀菌剂母液。母液配制好后，置于4℃冰箱内保存备用。在超菌台内将活化的铜绿假单胞菌按5％接种于灭菌的代谢产鼠李糖脂的培养基，37℃，180r/min发酵7d得到鼠李糖脂，备用。随后，将化学杀菌剂母液及生物表面活性剂按照质量比为戊二醛:溴硝醇:THPS:鼠李糖脂＝10mg/L:10mg/L:10mg/L:0.5mg/L的比例接种于灭菌的硫酸盐还原菌的培养基内。随后将油田硫酸盐还原菌富集培养物按5％接种量接种至硫酸盐还原菌的培养基内，并用亚甲基蓝分光光度法检测其硫化氢含量。随后置于37℃生化培养箱中静置培养45天后，检测到硫化氢增量为零，故加入混合抑制剂对新疆某油田硫酸盐还原菌富集培养物有良好的抑制效果。
实施例3海域某油田硫酸盐还原菌抑制实验
用预先除菌的聚乙烯塑料桶(10.0L)从海域某油田采油井口端收集采出液，待取满10.0L聚乙烯塑料桶后，关闭采样口阀门，迅速将聚乙烯塑料桶加盖密封，做好标记后，由物流公司运回实验室。随后对各油井采出液进行油水分离。用中速定性滤纸分别过滤10口油井的采出液，完成油水分离。将过滤好的采出水内通一段时间的99.99％高纯氮气，赶走空气，将采出水保存于实验室内。用作硫酸盐还原菌富集培养物制备。
在超净台内，用无菌注射器将处理好的油田采出水以10％比例接种于灭菌的硫酸盐还原菌培养基内。培养基为硫酸盐还原菌培养基，成分为乳酸钠(50％)2.5g·L-1，NH4Cl1.0g·L-1，Na2SO4 1.0g·L-1，酒石酸钾钠1.0g·L-1，MgSO4·7H2O 0.5g·L-1，K2HPO4·3H2O0.5g·L-1，酵母膏0.5g·L-1，Na2S2O3 0.2g·L-1，柠檬酸铁铵0.2g·L-1，NaCl 7.0g·L-1，抗坏血酸0.1g·L-1；加入1.7％琼脂条为固体培养基，调pH为7.0～8.0。再将其置于60℃生化培养箱中静置培养。每日定时观察富集液变化情况，直至厌氧管内富集液变黑(形成的FeS黑色沉淀表明菌株生长)，即获得海域某油田硫酸盐还原菌的富集培养物。
在超净台中，用无菌水分别配制戊二醛、溴硝醇及THPS三种化学杀菌剂母液。母液配制好后，置于4℃冰箱内保存备用。在超菌台内将活化的铜绿假单胞菌按5％接种于灭菌的代谢产鼠李糖脂的培养基，37℃，180r/min发酵7d得到鼠李糖脂，备用。随后，将化学杀菌剂母液及生物表面活性剂按照质量比为戊二醛:溴硝醇:THPS:鼠李糖脂＝10mg/L:5mg/L:5mg/L:0.5mg/L的比例接种于灭菌的硫酸盐还原菌的培养基内。随后将油田硫酸盐还原菌富集培养物按5％接种量接种至硫酸盐还原菌培养基内，并用亚甲基蓝分光光度法检测其硫化氢含量。随后置于60℃生化培养箱中静置培养45天后，检测到硫化氢增量为零，故加入混合抑制剂对海域某油田硫酸盐还原菌富集培养物有良好的抑制效果。
实施例4西北某油田硫酸盐还原菌抑制实验
用预先除菌的聚乙烯塑料桶(10.0L)从西北某油田采油井口端收集采出液，待取满10.0L聚乙烯塑料桶后，关闭采样口阀门，迅速将聚乙烯塑料桶加盖密封，做好标记后，由物流公司运回实验室。随后对各油井采出液进行油水分离。用中速定性滤纸分别过滤10口油井的采出液，完成油水分离。将过滤好的采出水内通一段时间的99.99％高纯氮气，赶走空气，将采出水保存于实验室内。用作硫酸盐还原菌富集培养物制备。
在超净台内，用无菌注射器将处理好的油田采出水以10％的比例接种于灭菌的硫酸盐还原菌培养基内。培养基为硫酸盐还原菌培养基，成分为乳酸钠(50％)2.5g·L-1，NH4Cl 1.0g·L-1，Na2SO4 1.0g·L-1，酒石酸钾钠1.0g·L-1，MgSO4·7H2O 0.5g·L-1，K2HPO4·3H2O 0.5g·L-1，酵母膏0.5g·L-1，Na2S2O3 0.2g·L-1，柠檬酸铁铵0.2g·L-1，NaCl7.0g·L-1，抗坏血酸0.1g·L-1；加入1.7％琼脂条为固体培养基，调pH为7.0～8.0。再将其置于37℃生化培养箱中静置培养。每日定时观察富集液变化情况，直至厌氧管内富集液变黑(形成的FeS黑色沉淀表明菌株生长)，即获得西北某油田硫酸盐还原菌的富集培养物。
在超净台中，用无菌水分别配制戊二醛、溴硝醇及THPS三种化学杀菌剂母液。母液配制好后，置于4℃冰箱内保存备用。在超菌台内将活化的铜绿假单胞菌按5％接种于灭菌的代谢产鼠李糖脂的培养基，37℃，180r/min发酵7d得到鼠李糖脂，备用。随后，将化学杀菌剂母液及生物表面活性剂按照质量比为戊二醛:溴硝醇:THPS:鼠李糖脂＝10mg/L:10mg/L:10mg/L:0.5mg/L的比例接种于灭菌的硫酸盐还原菌的培养基内。随后将油田硫酸盐还原菌富集培养物按5％接种量接种至其中，并用亚甲基蓝分光光度法检测其硫化氢含量。随后置于37℃生化培养箱中静置培养45天后，检测到硫化氢增量为零，故加入混合抑制剂对西北某油田硫酸盐还原菌富集培养物有良好的抑制效果。

Claims (6)

1.一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂，其特征在于，所述的油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂是戊二醛、溴硝醇、四羟甲基硫酸磷三种化学杀菌剂复配生物表面活性剂鼠李糖脂得到的。
2.根据权利要求1所述的一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂，其特征在于，在超净台中，用无菌水分别配制戊二醛、溴硝醇及四羟甲基硫酸磷三种化学杀菌剂母液，冰箱内保存，在超菌台内将活化的铜绿假单胞菌按5％接种于灭菌的代谢产鼠李糖脂的培养基中，37℃，180r/min发酵7d得到鼠李糖脂。
3.根据权利要求2所述的一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂，其特征在于，所述的代谢产鼠李糖脂的培养基是甘油3-4％，NaNO3 0.2-0.4％，K2HPO4·3H2O 0.35-0.45％，KH2PO40.4-0.5％，MgSO4·7H2O 0.003-0.005％，CaC12 0.01-0.02％，KCl 0.08-0.14％，NaCl 0.08-0.14％，酵母粉0.1-0.2％，余量为水。
4.根据权利要求3所述的一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂，其特征在于，按质量浓度比，戊二醛:溴硝醇:四羟甲基硫酸磷:鼠李糖脂＝(10～100mg/L):(10～100mg/L):(10～100mg/L):(0.1～10mg/L)。
5.根据权利要求1-4所述的任一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂的抑制方法，其特征在于，所述的抑制剂抑制油田硫酸盐还原菌产硫化氢，包括如下步骤，
1)将油田采出水接种于灭菌的硫酸盐还原菌培养基内，置于45℃生化培养箱中静置培养，直至厌氧管内富集液变黑，得到油田硫酸盐还原菌富集培养物；
2)将油田硫酸盐还原菌富集培养物按1％～20％接种量接种于油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂内，并用亚甲基蓝分光光度法检测其硫化氢含量，随后置于37℃生化培养箱中静置培养2天～60天后，再次检测硫化氢含量。
6.根据权利要求5所述的任一种油田硫酸盐还原菌富集培养物抑制剂的抑制方法，其特征在于，步骤1)中，所述的硫酸盐还原菌培养基成分为乳酸钠(50％)2.5g·L-1，NH4Cl1.0g·L-1，Na2SO4 1.0g·L-1，酒石酸钾钠1.0g·L-1，MgSO4·7H2O 0.5g·L-1，K2HPO4·3H2O0.5g·L-1，酵母膏0.5g·L-1，Na2S2O3 0.2g·L-1，柠檬酸铁铵0.2g·L-1，NaCl 7.0g·L-1，抗坏血酸0.1g·L-1；加入1.7％琼脂条为固体培养基，调pH为7.0～8.0。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113956860A (zh) * 2021-09-16 2022-01-21 华东理工大学 一种油田***微生物腐蚀控制体系构建方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104232708A (zh) * 2013-11-08 2014-12-24 中国科学院沈阳应用生态研究所 一种代谢产鼠李糖脂的培养基及其应用
CN110697916A (zh) * 2019-10-17 2020-01-17 大庆石油管理局有限公司 一种多功能硫化物去除剂及其制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104232708A (zh) * 2013-11-08 2014-12-24 中国科学院沈阳应用生态研究所 一种代谢产鼠李糖脂的培养基及其应用
CN110697916A (zh) * 2019-10-17 2020-01-17 大庆石油管理局有限公司 一种多功能硫化物去除剂及其制备方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113956860A (zh) * 2021-09-16 2022-01-21 华东理工大学 一种油田***微生物腐蚀控制体系构建方法

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