CN112957291A

CN112957291A - 一种美白抗衰的护肤组合物

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Publication number: CN112957291A
Application number: CN202110189086.7A
Authority: CN
Inventors: 刘芳
Original assignee: Hangzhou Red Cross Hospital
Current assignee: Hangzhou Red Cross Hospital
Priority date: 2021-02-19
Filing date: 2021-02-19
Publication date: 2021-06-15

Abstract

本发明提供一种美白抗衰的护肤组合物：按质量百分比计算，美白抗衰的护肤组合物的原料包括：2～20％植物提取物、10～30％甘油酯，余量为分散基质和不可避免的杂质；植物提取物包括构树提取物，构树提取物在活性成分中的质量百分比占比不低于50％。本发明以构树提取物、人参皂苷、丹参酮作为有效活性成分，添加到含有甘油酯的护肤品基质中，由此制得的护肤品具有良好的修复、抗衰、美白作用。

Description

一种美白抗衰的护肤组合物

技术领域

本发明属于日化产品领域，具体地，涉及一种美白抗衰的护肤组合物。

背景技术

构树为落叶乔木的一种，广泛地分布于亚洲各地，其根和种子均可入药，树液可治皮肤病，具有很高的经济价值。近二十年来,国内外学者对构树的化学成分以及生物活性进行了大量的研究,从中分离出来了多种化学成分,主要有香豆素、三萜类、生物碱类、脂肪油以及大量的黄酮类和二苯丙烷类化合物。据广泛报道，构树中含有的多种构树醇能够抑制炎症细胞因子的表达，具有优异的抗氧化和抗炎抑菌作用，能够改善皮肤组织。基于构树提取物具备的护肤特性，将其作为有效活性成分添加到护肤品中，有利于构树提取物的推广应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种美白抗衰的护肤组合物，以解决上述技术问题中的至少一个。

根据本发明的一个方面，提供一种美白抗衰的护肤组合物：按质量百分比计算，美白抗衰的护肤组合物的原料包括：2～20％植物提取物、10～30％甘油酯，余量为分散基质和不可避免的杂质；植物提取物包括构树提取物，构树提取物在活性成分中的质量百分比占比不低于50％；构树提取物按照如下方法制备：S1.将构树样品与提取溶剂按照1：12～15的料液比混合，将由此形成的混合液的pH调节至酸性，提取溶剂由50％乙醇的水溶液与甲酰胺按照8～10:1的体积比混合而成；S2.加热混合液至40～60℃，保温1.8～3小时；S3.收集提取液；植物提取物还包括人参皂苷、丹参酮中的至少一种。

优选地，按照质量百分比计算，植物提取物的组成为50～60％构树提取物+20～40％人参皂苷+20～40％丹参酮。

优选地，甘油酯包括甘油磷脂，甘油磷酸酯在甘油酯中所占的质量百分比为20～50％。

优选地，甘油酯还包括辛酸/癸酸甘油三酯，辛酸/癸酸甘油三酯在甘油酯中所占的质量百分比为50～80％。

优选地，按照质量百分比计算，甘油酯的组成为30～35％甘油磷脂+65～70％辛酸/癸酸甘油三酯。

优选地，分散基质为水。

优选地，用于制备构树提取物的构树样品为构树根皮。

优选地，在构树提取物的制备过程中，在S2中引入纤维素酶辅助处理。

优选地，S2包括：S2.1.向S1得到的混合液中加入纤维素酶，纤维素酶在混合溶液中的终含量为5×10⁴～9×10⁴U/kg；S2.2.水浴加热混合液至40～50℃，保温1.8～3小时；S2.3.沸水浴灭酶。

优选地，提取液由50％乙醇的水溶液与甲酰胺按照9.25:1的体积比混合而成。

基于构树提取物所具有的抗炎、抗氧化的作用，本发明以构树提取物作为有效活性成分，添加到含有甘油酯的护肤品基质中，由此制得的护肤品具有良好的修复、抗衰作用。而甘油酯具有良好的保湿效果，能够优化护肤品的保湿性能，也能够延缓护肤品的水分挥发，有利于植物提取物在皮肤表面的扩散、渗透。人参皂苷对酪氨酸酶和黑色素细胞都具有抑制活性，而丹参酮则具有良好的抑菌抗炎活性，本发明利用人参皂苷和丹参酮与构树提取物复配使用，使所制得的护肤品兼具优异的修复效果和美白效果。此外，人参皂苷具有良好的增稠、乳化效果，其配合甘油酯共同作用，能够与甘油酯共同形成层状结晶，包裹植物提取物，稳定地存在于护肤品的分散基质中，能够优化护肤品中的保湿效果和有效作用时长。

甘油磷脂具有良好的亲油性和亲水性，此外，甘油磷脂是是生物细胞膜的主要成分,本发明将甘油磷脂添加到上述护肤品中，不仅能够起到良好的乳化作用，还可以作为促进皮肤细胞再生的有效活性物质，改善粗糙、褶皱等皮肤问题，使皮肤具有光泽。

构树中的活性物质能否得到有效的利用，与其提取工艺息息相关。在构树植株中，能够抑制炎症细胞因子表达的构树醇具有丰富的羰基和酚羟基，甲酰胺属于强极性的质子型溶剂，其中与N离子相连的质子具有较高的活性，其能够与构树醇形成氢键，促进构树醇的溶出。另外，本发明利用酶处理辅助构树样品的破壁，一方面能够缩短提取时间、降低提取温度，另一方面能够避免高温条件下甲酰胺的过早水解，由此能够保证提取的效率和产物的质量。在构树植株中，以构树根皮作为本方案中的构树样品，能够得到促生长因子分泌活性较高的提取物。针对构树根皮的结构，选择纤维素酶作为酶解处理的酶，能够有效地降解根皮细胞的细胞壁，促进构树醇的释放。进一步地，通过方案的优化设计，在本发明所选择的参数范围内，纤维素酶能够在含有甲酰胺的溶液环境中保持良好的活性，同时，反应过程也具有较高的可控性。

附图说明

图1为实施例2中参试护肤乳液的酪氨酸酶抑制率统计图；

图2为实施例2中各参试护肤乳液对应的HaCaT细胞增殖率统计图。

具体实施例方式

为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。

实施例1

本实施例设置4个处理组，分别采用不同的方案开展构树根皮提取实验，通过调整提取实验的实验参数获得具有良好抗炎症细胞因子活性及抗氧化特性的构树提取物。

1、构树根皮提取实验

处理Ⅰ：

本处理组采用构树根部作为提取的样品，按照以下步骤进行构树样品的提取：

S1.将经过切碎处理的构树根皮与提取溶剂按照1:13的料液比混合，将混合液的pH调节至酸性，其中，提取溶剂由50％乙醇的水溶液与甲酰胺按照9.25:1的体积比混合而成；

S2.

S2.1.向混合液中加入纤维素酶，使其在混合液中的终含量为7.5×10⁴U/kg。

S2.2.水浴酶解2小时；

S2.3.提高水浴温度，利用沸水浴灭酶5分钟；

S3.

S3.1.过滤，然后对滤液进行10000r/min离心操作，离心时间为5分钟，收集离心后的上清液；

S3.2.利用硅胶柱层析对所收集的上清液进行纯化操作，采用甲醇水溶液进行梯度洗脱的：55％甲醇水溶液→75％甲醇水溶液→100％甲醇，洗脱剂的用量为层析柱体积的3倍。

处理Ⅱ：

S1.将经过切碎处理的构树根皮与提取溶剂按照1:20的料液比混合，将混合液的pH调节至酸性，其中，提取溶剂由50％乙醇的水溶液与甲酰胺按照9.25:1的体积比混合而成；

S2.

S2.1.将经过S1处理后获得的混合液加热至一定温度，保温2小时；

S2.2.提高加热温度，高温灭酶5分钟；

S3.

处理Ⅲ：

S1.将经过切碎处理的构树根皮与50％乙醇按照1:25的料液比混合，将混合液的pH调节至酸性；

S2.

S2.2.水浴酶解2小时；

S2.3.提高水浴温度，利用沸水浴灭酶5分钟；

S3.

处理Ⅳ：

S1.将经过切碎处理的构树根皮与50％乙醇按照1:30的料液比混合，将混合液的pH调节至酸性；

S2.

S2.2.提高加热温度，高温灭酶5分钟；

S3.

2、炎症细胞因子抑制实验

参照姚露等(姚露,罗雯,顾华,何黎.TGF-β1对人工皮肤光损伤炎症因子IL-1α、IL-6、TNF-α影响的研究[J].皮肤病与性病，2011,33(5):252-255)提供的人工皮肤的构建方法，采用实验鼠的表皮组织，按照以下操作构建人工皮肤：取实验鼠表皮组织分离成纤维细胞及角质形成细胞，培养备用；将胎牛血清注入到成纤维细胞悬液中，胎牛血清(胶原)的终浓度为1.5mg/mL；将细胞悬液的pH值调节至7.2；将由此得到的细胞悬液注入细胞培养池，置于细胞培养箱中，37℃孵育过夜；次日细胞悬液凝固呈胶冻状的胶原，将角质形成细胞悬液接种于胶原中央，加入K-SFM培养基，继续置于37℃的培养箱内培养，培养过程中向培养箱内通入CO₂；一周后去除细胞培养池内的培养基，在细胞培养池外加入含10％胎牛血清的K-SFM培养基，继续置于37℃的培养箱内培养，培养过程中向培养箱内通入CO₂，培养14天备用。将由此制得的对照组设置方式：为作为对照组的标本更换新鲜的K-SFM培养基500μL。

实验组设置方式：将50μL待测的构树根皮提取液与450μLK-SFM培养基混合后更换实验组的标本中的培养基。

将对照组和实验组的标本置于紫外线下照射，照射完后将标本置入37℃的培养箱(通CO₂)中继续培养24小时后取上清，采用ELISA测试对照组和实验组人工皮肤培养上清液中的TNF-α浓度。以C₀为对照组的TNF-α浓度，以C₁为实验组的TNF-α浓度，TNF-α的抑制率设定为(C₀－C₁)/C₀。

3、清除DPPH自由基能力测定

以DPPH-甲醇溶液作为对照，在波长517nm处测定吸光度A₀，平行读数3次；吸取构树提取物样品1mL于试管中，再加入4.5mL0.1 mmol/L DPPH-甲醇溶液，充分摇匀后避光反应30min，在波长517nm处测定吸光度A₁，平行读数3次；以(A₀－A₁)/A₀表征DPPH自由基清除率。

分别在上述处理Ⅰ、处理Ⅱ、处理Ⅲ、处理Ⅳ中设置平行实验，以细胞炎症因子抑制实验测试和清除DPPH自由基能力测试的结果作为测评标准，筛选上述各处理组的优选参数组合并统计该优选参数组合所对应的细胞炎症因子抑制率和DPPH自由基清除能力，统计结果如表1所示。

表1各处理组的优选参数组合及其抗炎、抗氧化效果

处理Ⅰ设置的提取实验过程中，反应可控性强，无明显的尾气以及有毒物质的产生，所得到的产物具有良好的TNF-α抑制率和DPPH自由基清除率。处理Ⅱ、处理Ⅲ、处理Ⅳ所分别设置的平行实验中，在提取温度低于50℃的情况下，提取物对应的TNF-α抑制率和DPPH自由基清除率都比较低，可能是在上述三组处理组提供的提取反应环境中，构树样品的提取效率偏低。进行参数优化后，上述三组处理组的最佳提取温度都比处理Ⅰ的最佳提取温度高，然而，即使在最佳提取温度下，处理Ⅱ、处理Ⅲ、处理Ⅳ所制得的提取物能够达到的TNF-α抑制率和DPPH自由基清除率都依然小于处理Ⅰ所制得的提取物所能够达到的对应值。证明通过利用纤维素酶辅助乙醇+甲酰胺复配形成的提取液对构树样品进行提取，一方面能够降低提取的最佳温度，另一方面还能够使所制得的提取物兼具有优异的TNF-α抑制率和DPPH自由基清除率。

实施例2

1、配方配制

本实施例中所采用的构树提取物按照如下步骤制备：

S1.将经过切碎处理的构树根皮与提取溶剂按照1:13的料液比混合，将混合液的pH调节至6.2，其中，提取溶剂由50％乙醇的水溶液与甲酰胺按照9.25:1的体积比混合而成；

S2.

S2.1.向混合液中加入纤维素酶，使其在混合液中的终含量为7.5×104U/kg。

S2.2.在48℃的温水中水浴酶解2小时；

S2.3.提高水浴温度，利用沸水浴灭酶5分钟；

S3.

采用按照上述步骤制备的构树提取物，按照表2中所提供的配方，参与护肤乳液的配制。根据表2记载，按量称取各配方的所需物料，在20～25℃的环境下，避光将所需物料迅速地充分混合，得到成品，将成品避光封存，备用。

表2护肤乳液的配方组成

2、性能测试

(1)乳液稳定性测试

稳定性测试：耐热40℃测试：将样品放置于40℃烘箱中，观察样品是否出现分层、絮凝等异常现象，若有则评判为“不通过”，若无则评判为“通过”。

显微镜观察：取少量样品放在载玻片上，用盖玻片轻轻压平，观察样品液晶的数量及分布。

(2)美白效果测试

在黑色素细胞中，黑色素是由酪氨酸经酪氨酸酶催化形成多巴，再由酪氨酸酶继续催化形成多巴醌，然后重新排列成5,6-醌吲哚，其发生聚合后与黑素体内的结构蛋白结合形成黑素蛋白即黑色素。由此可见，酪氨酸酶在黑色素合成过程中起着关键作用。基于此在本实施例中，以产品对酪氨酸酶的抑制作用作为产品美白效果的表征。

酪氨酸酶抑制实验参照贾越光等(贾越光,丁志英,肖嘉婧,张新然,池季洪,孙波.人参皂苷纳米乳的美白抗衰作用及其安全性评价[J].中国生化药物杂志，2015,35(9):19-22)提供的方案设置。

(3)修复效果测试

取对数生长期的人永生化表皮细胞(HaCaT细胞)，于96孔培养板上，每孔接种细胞悬液100μL，并将其置于37℃、5％CO₂培养箱中培养过夜。次日取出细胞板，弃上清，实验组每孔分别加入参试产品(培养基稀释至50μg/mL)100μL，对照组加入100μL的培养基。另做一孔不加HaCaT细胞，只加培养液(比色时用此孔调零)。将上述96孔培养板置于在37℃、5％CO₂的培养箱中培养。于培养时间结束时，依次在每孔中加入浓度为5mg/mL的MTT溶液10μL，继续孵育4小时。弃去孔中培养上清液100μL，再于每孔加入100μLDMSO充分震荡至结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪上选择570nm波长，测试各孔光吸收至(OD值)。

3、实验结果

(1)乳液稳定性

参试产品的耐热测试结果如表3所示，分别对应配方1#和配方2#的参试产品具有良好的耐热性能，直到耐热性测试结束也并未出现分层或絮凝的现象。而对应配方3#的产品中不含有人参皂苷，其耐热稳定性也明显差于其他组别的参试产品，由此可以说明人参皂苷有利于乳液的热稳定性。配方4#、配方5#和配方6#所对应的产品在热稳定性实验进行的过程中，都出现了分层、絮凝等类似现象，将分别对应上述三个配方的产品热稳定性与配方1#对应的产品热稳定性相比较，可以说明甘油磷脂的添加能够提高乳液的热稳定性，随着甘油磷脂与辛酸/癸酸甘油三酯的用量比进一步增大，反而不利于乳液的热稳定性，通过甘油磷脂浓度梯度试验，当甘油磷脂在配方中的甘油酯总量中所占的质量百分不超过50％范围内，所得到的乳液具有良好的热稳定性。

表3护肤乳液的耐热稳定性

各参试产品中所含有的层状液晶情况如表4所示，通过显微镜观察，分别对应配方3#、配方4#的参试产品中的层状液晶在乳液中的含量以及均匀度显著低于其他参试产品。基于此，推断人参皂苷和甘油磷脂复配使用有利于形成液晶，而液晶的形成有利于提高乳液的稳定性和保湿性能。此外，甘油磷脂的用量对液晶在乳液中的均一度的影响较为显著，若甘油磷脂用量过高，液晶在乳液中的均一度下降。

表4护肤乳液中的液晶现象

配方编号	液晶现象
		配方1#	有较多液晶，且液晶均一度良好
配方2#	有较多液晶，且液晶均一度良好
		配方3#	有少量液晶，且液晶均一度差
配方4#	有少量液晶，但液晶均一度良好
		配方5#	有较多液晶，但液晶均一度差
配方6#	有较多液晶，但液晶均一度差

(2)美白效果

图1展示了参试的护肤乳液的酪氨酸酶抑制效果，对应配方3#的参试产品的酪氨酸酶抑制率明显低于其他参试产品的酪氨酸酶抑制率，由此说明，将人参皂苷与构树提取物复配使用，两者协同增效，由此制得的护肤乳液能够有效抑制酪氨酸酶的活性，具有良好的美白效果。

(3)修复效果测试

本实施例设置的HaCaT细胞增殖实验结果(图2)显示，本实例所有的参试产品均能够促进HaCaT细胞的增殖，其中，相比起配方2#、配方3#、配方4#的产品，HaCaT细胞在含有配方1#产品的培养环境中显示出明显的增值优势，说明配方中所涉及的构树提取物、人参皂苷、丹参酮以及甘油磷脂都是促进HaCaT细胞增殖的有效作用成分，将其复配使用，协同增效，使由此配制而成的护肤乳液具有良好的修复效果。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims

1.一种美白抗衰的护肤组合物，其特征在于：

按质量百分比计算，所述美白抗衰的护肤组合物的原料包括：2～20％植物提取物、10～30％甘油酯，余量为分散基质和不可避免的杂质；

所述植物提取物包括构树提取物，所述构树提取物在所述活性成分中的质量百分比占比不低于50％；所述构树提取物按照如下方法制备：S1.将构树样品与提取溶剂按照1：12～15的料液比混合，将由此形成的混合液的pH调节至酸性，所述提取溶剂由50％乙醇的水溶液与甲酰胺按照8～10:1的体积比混合而成；S2.加热混合液至40～60℃，保温1.8～3小时；S3.收集提取液；

所述植物提取物还包括人参皂苷、丹参酮中的至少一种。

2.如权利要求1所述美白抗衰的护肤组合物，其特征在于：按照质量百分比计算，所述植物提取物的组成为50～60％所述构树提取物+20～40％所述人参皂苷+20～40％所述丹参酮。

3.如权利要求1所述美白抗衰的护肤组合物，其特征在于：所述甘油酯包括甘油磷脂，所述甘油磷酸酯在所述甘油酯中所占的质量百分比为20～50％。

4.如权利要求3所述美白抗衰的护肤组合物，其特征在于：所述甘油酯还包括辛酸/癸酸甘油三酯，所述辛酸/癸酸甘油三酯在所述甘油酯中所占的质量百分比为50～80％。

5.如权利要求4所述美白抗衰的护肤组合物，其特征在于：按照质量百分比计算，所述甘油酯的组成为30～35％所述甘油磷脂+65～70％所述辛酸/癸酸甘油三酯。

6.如权利要求1所述美白抗衰的护肤组合物，其特征在于：所述分散基质为水。

7.如权利要求1所述美白抗衰的护肤组合物，其特征在于：用于制备所述构树提取物的所述构树样品为构树根皮。

8.如权利要求7所述美白抗衰的护肤组合物，其特征在于：在所述构树提取物的制备过程中，在所述S2中引入纤维素酶辅助处理。

9.如权利要求8所述美白抗衰的护肤组合物，其特征在于，所述S2包括：

S2.1.向所述S1得到的所述混合液中加入纤维素酶，所述纤维素酶在所述混合溶液中的终含量为5×10⁴～9×10⁴U/kg；

S2.2.水浴加热所述混合液至40～50℃，保温1.8～3小时；

S2.3.沸水浴灭酶。

10.如权利要求9所述美白抗衰的护肤组合物，其特征在于：所述提取液由50％乙醇的水溶液与甲酰胺按照9.25:1的体积比混合而成。