CN112924604B - 离子对净化柱 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种离子对净化柱，涉及液相色谱检测的技术领域。一种离子对净化柱，包括吸附离子对试剂中杂质的吸附介质，所述吸附介质选自聚苯乙烯及其衍生物、聚丙烯酸酯及其衍生物、苯乙烯‑甲基丙烯酸酯共聚物及其衍生物、琼脂糖及其衍生物、反相键合硅胶、杂化型反相键合硅胶、活性炭、树脂碳、石墨烯、烧结聚四氟乙烯或烧结聚乙烯中的一种或多种的组合。离子对净化柱可以用于液相色谱分析和制备色谱含离子对流动相的净化中，以及离子对试剂提纯中。离子对净化柱能在不改变现有条件的基础上有效消除“有杂质的离子对流动相”引起的莫名峰现象，去除莫名峰的效果非常明显，解决了因莫名峰带来的烦扰，极大节省了人力，物力。

Description

离子对净化柱

技术领域

本发明涉及液相色谱检测的技术领域，具体涉及一种离子对净化柱。

背景技术

在生物、医学、药学、食品科学以及环境科学等领域中，液相色谱已经被广泛用于分开、分析和分离样品的成分，液相色谱仪的使用频率也越来越高。流动相作为液相色谱和制备色谱分离的基础，然而流动相试剂质量参差不齐，特别是离子对试剂杂质较多，通过传统的流动相过滤方式，无法很好地去除流动相中有机污染物，还可能会引入新污染物，如传统的抽滤瓶和滤膜过滤方式。在液相色谱分离过程中，特别是在梯度洗脱过程中这些污染物容易产生莫名其妙的色谱峰，我们称之为莫名峰，这些莫名峰一般在梯度最后产生，而且大部分是由疏水性物质引起的。莫名峰的来源很多，其中主要来源于流动相和管路，如：有机相中污染物，水相中污染物，缓冲盐，流动相瓶和混合过程等等。

使用液相色谱的过程中一旦出现莫名峰，消除莫名峰则需要花费分析人员较多的时间和精力，也是一项非常棘手的工作。研究者们也曾花费很多时间去处理莫名峰，采取了如更换水、缓冲盐、有机试剂品牌和滤膜等方式，但是这些方式去除莫名峰的效果不明显。

而且，使用液相色谱法分析电离能力比较强的样品时，样品在反相色谱柱上的保留时间很短或者根本不保留，这时要加入相应的离子对试剂，将分析物上的离子进行结合，形成在柱子上有保留的分子。普通流动相经过一些常规的净化柱过滤后也可以有效去除莫名峰，但如果流动相中含离子对试剂时，在基本不影响色谱峰保留和色谱峰形状的情况下，想要很好去除莫名峰，是很难做到的。

发明内容

有鉴于此，本发明致力于提供一种离子对净化柱，其包含的吸附介质对杂质起到物理吸附的作用，能在不改变现有条件的基础上有效消除“有杂质的离子对流动相”引起的莫名峰现象，去除莫名峰的效果非常明显，解决了因莫名峰带来的烦扰，极大节省了人力，物力。

本发明第一方面提供了一种离子对净化柱，包括吸附离子对试剂中杂质的吸附介质，所述吸附介质选自聚苯乙烯及其衍生物、聚丙烯酸酯及其衍生物、苯乙烯-甲基丙烯酸酯共聚物及其衍生物、琼脂糖及其衍生物、反相键合硅胶、杂化型反相键合硅胶、活性炭、树脂碳、石墨烯、烧结聚四氟乙烯或烧结聚乙烯中的一种或多种的组合。

需要说明的是，“离子对试剂”主要指含离子对试剂的流动相，包括含离子对的水相和有机相。

上述吸附介质均具有粒径较小，比表面积较大的多孔状结构，吸附有机物能力比无机物强，物理吸附流动相中的离子对试剂中的疏水性杂质，同时吸附性介质带有一定的电荷，对流动相中同电荷离子对有一定的排斥力，所以离子对很难被吸附，而不影响流动相中成分，达到不影响色谱峰形和出峰时间的效果。

由于吸附介质是颗粒状，吸附介质不仅有吸附杂质的作用，而且有混合流动相的作用，可以解决色谱仪器混合问题，让色谱基线噪音降至更低，对痕量分析起到作用。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述离子对净化柱还包括柱管，柱管为两端开口的中空柱状结构，柱管的内部填充有所述吸附介质；所述柱管的两端开口处均连通有防止吸附性介质散出的过滤件；每个过滤件远离柱管的一侧连通有锁紧件。

柱管内部填充有吸附介质，柱管两端开口处连通有过滤件防止吸附介质从柱管内散处，过滤件的孔径小于吸附介质的粒径；过滤件侧面连通的锁紧件可以将柱管、过滤件、锁紧件连接成一个完整的离子对净化柱。

采用上述离子对净化柱处理含离子对试剂的流动相时，流动相从离子净化柱的一端流入，依次流经锁紧件、过滤件达到柱管内部，此时柱管内部的吸附介质会吸附流动相中的杂质，经过柱管中吸附介质的净化后从离子对净化柱的另一端流出，完成流动相的净化过程。

经过离子对净化柱处理的含离子对试剂的流动相，可以高效地去除流动相中的杂质，主要是一些疏水性物质的杂质，而且几乎不影响色谱峰形状和保留时间，去除莫名峰的效果非常明显，使一些因莫名峰的问题，而不得不花时间去改变和弃用的方法而得以顺利应用，无需研发人员投入较多时间和精力去处理莫名峰。

进一步，所述柱管的中空柱状结构包括圆柱结构、三角柱结构、四角柱结构或五角柱结构中的任意一种。

对柱管的中空柱状结构的进一步限定和优选，可以选择常规的圆柱结构、三角柱结构、四角柱结构或五角柱结构等形状规则的结构，可以减少混合柱管的难度，降低制作成本；而且便于配合安装，使流动相从中流动时更加顺畅，使离子对净化柱的使用更加便捷。

在本发明的一个优选实施方式中，所述柱管的中空柱状结构为圆柱结构。

优选柱管的外形为圆柱状结构，中空内部也呈圆柱状结构，相较于三角柱结构、四角柱结构或五角柱结构或其它结构，圆柱形结构的制作更加方便，而且与液相色谱的管路的圆柱的形状结构相适用，便于安装适用；而且中空内部也呈圆柱形的，内部空间大，可以填充更多的吸附介质，增加流动相与吸附介质的接触面积；而且还可以减少柱管的内壁与流动性之间的摩擦力，使流动相可以更快速顺畅地通过。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述吸附性介质的平均粒径为5-1000μm，孔径为2nm-1μm；优选地，所述吸附介质的形状为球形。

所述吸附介质的平均粒径典型但非限制性的为5μm、10μm、50μm、100μm、200μm、300μm、400μm、500μm、600μm、700μm、800μm、900μm或1000μm。

所述吸附介质的孔径典型但非限制性的为2nm、5nm、10nm、20nm、50nm、100nm、200nm、300nm、400nm、500nm、600nm、700nm、800nm、900nm或1μm。

吸附介质的粒径越大，比表面积越小，吸附杂质的容量也减小，影响离子对净化柱的使用寿命；吸附介质的粒径越小，离子对净化柱的柱压越大，柱压过大会严重影响离子对净化柱的使用寿命，而且对离子对净化柱的过滤效果没有很高的提升。所以优选吸附介质的粒径范围，既能很好去除鬼峰，同时保留时间也不受粒径影响，还能延长离子对净化柱的使用寿命。

吸附介质的孔径越大，比表面积越小，吸附容量也减小，影响离子对净化柱的产品寿命。吸附介质的孔径过小对于离子对净化柱的过滤效果没有明显的提升。优选孔径的范围，既能很好去离子对试剂中的疏水性杂质，同时保留时间也不受孔径影响。

对吸附介质的具体形状不作具体限定，可以为不规则形状、球形、方形、椭圆形、三角形等。优选球形，相同粒径下球形的比表面积更大，可以进一步提高吸附介质与含离子对试剂的流动相的接触面积，提高吸附杂质的效果，可以更好地去除莫名峰。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述柱管的一端或两端的过滤件与锁紧件之间连通有至少一个混合器；优选地，所述混合器为两端开口的中空柱状结构，中空部分的横截面积自两端开口处至内部逐步减小。

“柱管的一端或两端的过滤件与锁紧件之间连通有至少一个混合器”指的是：(1)离子对净化柱中的柱管的入口端(流动相流入的一端)连通有一个或一个以上的混合器；(2)离子对净化柱中的柱管的入口端(流动相流入的一端)和出口端(流动相流出的一端)连通有一个或一个以上的混合器。

“中空部分的横截面积自两端开口处至内部逐步减小”，其中，对中空部分的横截面的面积最小的位置不作具体限定，具***置可以为但不限于：混合器的中部、三分之一处、四分之一处或五分之一处。

混合器的中空柱状结构，与柱管的中空柱管结构的尺寸形状相适应，两者的内径也相一致，可以更加方便流动相从混合器流入和流出柱管。混合器中空部分的横截面积自两端开口处至内部逐步减小。如此一来，当液相色谱连通上离子对净化后，离子对净化柱入口端的混合器，靠近锁紧件的一端可以起到密封的作用，靠近柱管的一端可以有效扩大流动相和过滤件的接触面积，增加流动相和柱管内吸附介质的接触，达到更好的去除离子对试剂中疏水性杂质的效果。

流动相通过离子对净化柱，吸附介质吸附了流动相中杂质后，流动相成分相对不均匀，在色谱图中基线会出现漂移现象，离子对净化柱出口端的混合器，靠近锁紧件的一端可以起到密封的作用，靠近柱管的一端可以使不均匀的流动相进一步混合，汇集，实现流动相混合均一的效果，让色谱图中基线更平稳。

进一步，所述混合器的中空柱状结构包括圆柱结构、三角柱结构、四角柱结构或五角柱结构中的任意一种。

对混合器的中空柱状结构的进一步限定和优选，可以选择常规的圆柱结构、三角柱结构、四角柱结构或五角柱结构等形状规则的结构，可以减少混合器加工的难度，降低制作成本；而且与柱管的中空柱状结构相适应，便于配合安装，使流动相从中流动时更加顺畅，使离子对净化柱的使用更加便捷。

在本发明的一个优选实施方式中，所述混合器为两端开口的中空圆柱状结构，中空部分的横截面积自两端开口处至中部逐步减小形成圆锥形。

优选混合器的外形为圆柱状结构，中空内部包含有两个圆锥体的结构，使混合器的内径成锥形斜面，可以使流动相通过锥形空间时的阻力更小，而且两个圆锥形在混合器中部形成一个窄小的通道，可以使流动相在进入柱管前和流出柱管后混合更加均匀后再快速的成散射状流出，进入柱管后可以使流动相和柱管内吸附介质更充分地接触，达到更好的去除离子对试剂中疏水性杂质的效果；流出柱管后使不均匀的流动相进一步混合，实现流动相混合均一的效果，让色谱图中基线更平稳。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述过滤件为筛板；优选地，所述筛板的孔径为2um-100um。

优选过滤件为筛板，对筛板的具体材质不作具体限定，可以根据流动相的种类和价格成本自由选择。

筛板的材质可以为但不限于聚氨酯、锰钢、铸铁、316不锈钢、304不锈钢、碳素钢、聚四氟乙烯和聚醚醚酮。

柱管两端的筛板，可取代在线过滤器，有效防止固体颗粒物质达到色谱柱，避免因固体颗粒物质堵塞而引起的柱压升高。筛板的孔径可以为但不限于2um、10μm、20μm、30μm、40μm、50μm、60μm、70μm、80μm、90μm或100μm。

优选筛板的孔径在合理的范围内，既能防止吸附介质从柱管内散处，又能有效扩大流动相和筛板的接触面积，减少流动相经过时的阻力，方便流动相顺畅的流过。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述锁紧件为螺母，螺母为能够容纳过滤件和混合器的中空柱状结构，螺母靠近柱管的一端与柱管可拆卸连接。

可拆卸连接的方式包括但不限于：螺纹连接、卡嵌连接、铰链连接。

采用螺母为锁紧件，且螺母为中空柱状结构，将过滤件和混合器包裹在内与柱管连成一体，增加整个离子对净化柱的密封性，避免在净化处理含离子对试剂流动相时出现漏液的问题。此外，螺母与柱管的两端为可拆卸连接，既可以方便安装各个部分，便于向柱管内填充吸附介质；又可以在需要清理离子对净化柱时分开清理螺母、混合器、过滤件和柱管各个部位，清理效果更好，使离子对净化柱的使用寿命延长。

在本发明的一个优选地实施方式中，所述柱管为中空圆柱状结构，两端外部设置有环形外螺纹，螺母内部设置配合使用的环形内螺纹，螺母与柱管的两端为螺纹连接。

优选柱管为中空圆柱状结构，在其长度方向的两端的圆形外壁上设置有螺纹，在螺母的中空结构内部设置有配合使用的环形螺纹，柱管与螺母的连接采用螺纹连接的方式，螺纹连接可以提高整个离子对净化柱的密封性，而且方便组装和拆卸，提高离子对净化柱整体的连接稳固性。

在本发明的一个优选地实施方式中，一种典型的离子对净化柱的组装过程包括：(1)将混合器和筛板依次放置于螺母的空腔内；(2)将一个螺母通过螺纹连接的方式与柱管的入口端连接，拧紧；(3)将适量的吸附介质填充于柱管内；(4)将另一个螺母通过螺纹连接的方式与柱管的出口端连接，拧紧；组装完成。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述柱管的长度为10-35mm，内壁粗糙度≤5.0μm；优选地，所述柱管为中空圆柱状结构的内径为1.5-7.6mm。

柱管的长度可以为但不限于10mm、12mm、15mm、18mm、20mm、22mm、25mm、28mm、30mm或35mm。

柱管为中空圆柱状结构的内径为1.5mm、2mm、2.5mm、3mm、3.5mm、4mm、4.5mm、5mm、5.5mm、6mm、6.5mm、7mm、7.5mm或7.6mm。

优选柱管的长度范围和内径范围，使柱管具有合适的体积，既可以填充更多的吸附介质来吸附疏水性杂质，又可以使流动相在柱管中的保留时间延迟不到1min，使柱效变化不大，减少了对液相色谱结果准确度的影响。

优选内壁粗糙度≤5.0μm，可以减少柱管的内壁与流动性之间的摩擦力，使流动相可以更快速顺畅地通过，减少流动相在柱管中的保留时间，减少柱效变化。

进一步，所述柱管的材质包括316不锈钢、304不锈钢、碳素钢、聚四氟乙烯和聚醚醚酮中的一种或几种的组合。

优选柱管的材质为不锈钢、聚四氟乙烯或聚醚醚酮等具有优良的稳定性、密封性和抗老化能力等性能的材质，上述的螺母、混合器和过滤件也可以选择与柱管相同的材质制作，优选柱管的材质可以进一步提高离子对净化柱的使用寿命，且不易粘附吸附介质。

本发明第二方面提供了所述的离子对净化柱在液相色谱分析、液相色谱制备/半制备，以及离子对试剂提纯中的应用。

本发明第三方面提供了一种液相色谱分析装置，其包含所述的离子对净化柱；优选地，所述液相色谱分析装置包括高效液相色谱仪；进一步优选所述高效液相色谱仪包括溶剂容器、泵、混合器、进样器、色谱柱和检测器。

对高效液相色谱仪连接离子对净化柱的具***置不作具体限定，可以根据个人需要选择合适的连接位置，连接位置包括但不限于混合器和进样器之间、混合器和泵之间、溶剂容器和泵之间。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述混合器和进样器之间连通有所述离子对净化柱。

离子对净化柱连接于所述混合器和进样器之间，其中，离子对净化柱的入口端与混合器连接，出口端连接进样器。在泵的作用下，流动相从溶剂容器内流出经过混合器的混合后，从入口端流入离子对净化柱中，经过柱管内吸附介质的吸附后，从出口端流出离子对净化柱后进入进样器中，流动相再依次流经色谱柱和检测器。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述混合器和泵之间连通有所述离子对净化柱。

离子对净化柱连接于所述混合器和泵之间，其中，离子对净化柱的入口端与泵连接，出口端连接混合器。在泵的作用下，流动相从溶剂容器内流出，从入口端流入离子对净化柱中，经过柱管内吸附介质的吸附后，从出口端流出离子对净化柱后经过混合器的混合，流动相再依次流经进样器、色谱柱和检测器。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述溶剂容器和泵之间连通有所述离子对净化柱。

离子对净化柱连接于所述溶剂容器和泵之间，其中，离子对净化柱的入口端与溶剂容器的管线连接，出口端连接泵。在泵的作用下，流动相从溶剂容器内流出，从入口端流入离子对净化柱中，经过柱管内吸附介质的吸附后，从离子对净化柱的出口端流出，流动相流经泵后经过混合器的混合，流动相再依次流经进样器、色谱柱和检测器。

本发明第四方面提供了一种高效液相色谱分析方法，包括采所述的离子对净化柱，对含离子对的流动相中的杂质进行吸附的步骤。

在本发明的一个优选地实施方式中，所述的高效液相色谱分析方法包括以下步骤：

(1)将所述的离子对净化柱连接于混合器和进样器之间，离子对净化柱的入口端与混合器连接，出口端连接进样器；

(2)在泵提供动力的作用下，流动相从溶剂容器内流出经过混合器混合；

(3)流动相从入口端流入离子对净化柱中，柱管内的吸附介质对流动相中的杂质进行吸附，从出口端流出离子对净化柱后进入进样器中；

(4)流动相从进样器中流出后流经色谱柱和检测器。

本发明采用上述技术方案具有以下有益效果：

1.本发明提供的离子对净化柱，能在不改变现有条件的基础上有效消除“有杂质的离子对流动相”引起的莫名峰现象，解决了因莫名峰带来的烦扰，改善了色谱空白图；大大减少了分析，制备和方法开发中莫名峰带来的干扰，极大节省了人力，物力。

2.本发明提供的离子对净化柱，柱管内的吸附介质，不仅有吸附杂质的作用，而且有混合流动相的作用，可以解决色谱仪器混合问题，让色谱基线噪音降至更低，对痕量分析起到作用。

3.本发明提供的离子对净化柱，离子对净化柱入口端的混合器，可以有效扩大流动相和过滤件的接触面积，增加流动相和柱管内吸附介质的接触，达到更好的去除离子对试剂中疏水性杂质的效果；出口端的混合器可以使不均匀的流动相进一步混合，汇集，实现流动相混合均一的效果，让色谱图中基线更平稳。

4.本发明提供的离子对净化柱，其中柱管两端的筛板，可取代在线过滤器，有效防止固体颗粒物质达到色谱柱，避免因固体颗粒物质堵塞而引起的柱压升高，还能防止吸附介质从柱管内散处。

5.本发明提供的离子对净化柱，应用不限于液相色谱分析领域，还可以应用于液相色谱制备/半制备，离子对的提纯等应用领域。

附图说明

图1所示为实施例1的离子对净化柱的结构示意图；

图2所示为实施例1的离子对净化柱的***结构示意图；

图3所示为图2中A处的局部放大示意图；

图4所示为实施例1的离子对净化柱中混合器的结构示意图；

图5所示为实施例10的空白色谱图；其中a为不接离子对净化柱的空白色谱图；b为接入离子对净化柱的空白色谱图；

图6所示为实施例10的样品色谱图；其中a为不接离子对净化柱的样品色谱图；b为接入离子对净化柱的样品色谱图；

图7所示为实施例11和实施例12的样品色谱图；其中a为不接离子对净化柱的样品色谱图；b为接入实施例2的离子对净化柱的样品色谱图；c为接入实施例3的离子对净化柱的样品色谱图；

图8所示为实施例13和实施例14的样品色谱图；其中a为不接离子对净化柱的样品色谱图；b为接入实施例4的离子对净化柱的样品色谱图；c为接入实施例5的离子对净化柱的样品色谱图；

图9所示为实施例15和实施例16的样品色谱图；其中a为不接离子对净化柱的样品色谱图；b为接入实施例6的离子对净化柱的样品色谱图；c为接入实施例7的离子对净化柱的样品色谱图；

图10所示为实施例17和实施例18的样品色谱图；其中a为不接离子对净化柱的样品色谱图；b为接入实施例8的离子对净化柱的样品色谱图；c为接入实施例9的离子对净化柱的样品色谱图；

图11所示为实施例10中离子对净化柱的安装示意图；

图12所示为实施例19中离子对净化柱的安装示意图；

图13所示为实施例20中离子对净化柱的安装示意图。

附图标记：1、柱管；2、过滤件；21筛板；3、锁紧件；31、螺母；4、混合器。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种离子对净化柱，如图1和图2所示，包括柱管1，柱管1为两端开口的中空圆柱状结构；柱管1长度方向的两端开口处均连通有过滤件2，每个过滤件2远离柱管1的一侧连通有一个混合器4，混合器4远离过滤件2的一侧连通有一个锁紧件3。

柱管1为两端开口的中空圆柱状结构，内部空间呈圆柱状，长度为30mm，内径为4.6mm，外径为7.0mm。长度方向的两端外部设置有环形外螺纹。柱管1内填充有聚苯乙烯阴离子交换介质，聚苯乙烯阴离子交换为球形，聚苯乙烯阴离子交换的粒径为300μm，孔径为300nm。柱管1选用316不锈钢材质，内壁粗糙度≤5.0μm。

如图2和图3所示，柱管1长度方向的两端开口处均连通有过滤件2，过滤件2为筛板21。筛板21为带有孔径的圆片状结构，厚度为1mm，轴线方向与柱管1的轴线方向重合。筛板21的圆形中部遍布有滤孔，孔径为2um-100um。圆形边沿为实心结构。筛板21的直径尺寸与柱管的外径相同，边沿的厚度与柱管1的壁厚尺寸相同。

如图2和图4所示，筛板21远离柱管1的一侧连通有混合器4，混合器4为两端开口的中空圆柱状结构，内部空间呈圆柱状，长度为8.0mm，中空部分的横截面积自两端开口处至中部逐步减小形成圆锥形，两个圆锥形相接处的空间呈圆柱状，中间部位的圆柱状的长度为1.0mm，内径为0.5mm。混合器4轴线方向与柱管1的轴线方向重合，两端的外径与内径与柱管1的内径和外径相同。

每个混合器4远离柱管1的一侧连通有锁紧件3，锁紧件3为螺母31。螺母31呈中空圆柱状结构，靠近混合器4的一端的内壁设置有内螺纹，该内螺纹与柱管1的环形外螺纹配合使用。螺母31靠近混合器4的一端的内径与混合器4和筛板21的外径尺寸相适应，以使混合器4和筛板21可以容纳入螺母31。螺母31远离混合器4的一端的外壁呈六角形状，内部设置有环形内螺纹，该环形内螺纹可以与高效液相色谱仪的管路线连接。

实施例2

一种离子对净化柱，与实施例1的区别在于，柱管(1)的内径为4mm。

实施例3

一种离子对净化柱，与实施例1的区别在于，柱管(1)的内径为7.6mm。

实施例4

一种离子对净化柱，与实施例1的区别在于，柱管(1)的长度为10mm。

实施例5

一种离子对净化柱，与实施例1的区别在于，柱管(1)的长度为35mm。

实施例6

一种离子对净化柱，与实施例1的区别在于，聚苯乙烯阴离子交换填料的孔径为2nm。

实施例7

一种离子对净化柱，与实施例1的区别在于，聚苯乙烯阴离子交换填料的孔径为1μm。

实施例8

一种离子对净化柱，与实施例1的区别在于，聚苯乙烯阴离子交换填料的平均粒径为5μm。

实施例9

一种离子对净化柱，与实施例1的区别在于，聚苯乙烯阴离子交换填料的平均粒径为1000μm。

实施例10

一种高效液相色谱分析方法，包括以下步骤：

(1)将实施例1的离子对净化柱连接于混合器和进样器之间，安装示意图如图11所示，离子对净化柱的入口端与混合器连接，出口端连接进样器；

(2)溶剂容器内加入样品和流动相，在泵提供动力的作用下，流动相从溶剂容器内流出经过混合器混合；流动相从入口端流入离子对净化柱中，柱管内的吸附介质对流动相中的杂质进行吸附，从出口端流出离子对净化柱后进入进样器中

(3)流动相和样品从进样器中流出后流经色谱柱和检测器。

液相色谱中不接入离子对净化柱作为空白对照组。色谱条件见表1，梯度洗脱条件见表2：

表1

表2

时间	流动相A	流动相B
			0	90％	10％
8	50％	50％
			15	50％	50％
20	20％	80％
			30	20％	80％

不加入样品时的色谱图的检测结果如图5所示，加入样品时的色谱图的检测结果如图6所示。图5和图6的检测结果表明，高效液相色谱中接入本发明实施例1的离子对净化柱可以改善色谱空白图，有效去除莫名峰。

实施例11

一种高效液相色谱分析方法，与实施例10的区别在于步骤(1)中采用实施例2的离子对净化柱。

实施例12

一种高效液相色谱分析方法，与实施例10的区别在于步骤(1)中采用实施例3的离子对净化柱。

实施例11与实施例10的区别在于减小了柱管的内径，实施例12与实施例10的区别在于增大了柱管的内径。实施例11与实施例12的检测结果如图7所示，结果显示接入离子对净化柱，能很好的去除莫名峰，保留时间延迟不到1min，柱效变化不大。

实施例13

一种高效液相色谱分析方法，与实施例10的区别在于步骤(1)中采用实施例4的离子对净化柱。

实施例14

一种高效液相色谱分析方法，与实施例10的区别在于步骤(1)中采用实施例5的离子对净化柱。

实施例13与实施例10的区别在于减小了柱管的长度，实施例14与实施例10的区别在于增大了柱管的长度。实施例13与实施例14的检测结果如图8所示，结果显示接入离子对净化柱，能很好的去除莫名峰，保留时间延迟不到1min，柱效变化不大。

实施例15

一种高效液相色谱分析方法，与实施例10的区别在于步骤(1)中用采实施例6的离子对净化柱。

实施例16

一种高效液相色谱分析方法，与实施例10的区别在于步骤(1)中采用实施例7的离子对净化柱。

实施例15与实施例10的区别在于减小了吸附介质的孔径，实施例16与实施例10的区别在于增大了吸附介质的孔径。实施例15与实施例16的检测结果如图9所示，结果显示吸附介质的孔径在2nm-1μm范围内，都能很好去除莫名峰，同时保留时间也不受粒径影响。

实施例17

一种高效液相色谱分析方法，与实施例10的区别在于步骤(1)中采用实施例8的离子对净化柱。

实施例18

一种高效液相色谱分析方法，与实施例10的区别在于步骤(1)中采用实施例9的离子对净化柱。

实施例17与实施例10的区别在于减小了吸附介质的粒径，实施例18与实施例10的区别在于增大了吸附介质的粒径。实施例17与实施例18的检测结果如图10所示，结果显示吸附介质的粒径在5nm-1000μm范围内，都能很好去除莫名峰，同时保留时间也不受粒径影响。

实施例19

一种高效液相色谱分析方法，与实施例10的区别在于步骤(1)中离子对净化柱安装的位置如图12所示，离子对净化柱的入口端与泵连接，出口端连接混合器。

实施例20

一种高效液相色谱分析方法，与实施例10的区别在于步骤(1)中离子对净化柱安装的位置如图13所示，离子对净化柱的入口端与溶剂容器连接，出口端连接泵。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (17)

1.一种离子对净化柱，包括柱管（1），所述柱管（1）为两端开口的中空柱状结构；所述柱管（1）长度方向的两端开口处均连通有过滤件（2），每个所述过滤件（2）远离所述柱管（1）的一侧连通有一个混合器（4），所述混合器（4）远离所述过滤件（2）的一侧连通有一个锁紧件（3）；

所述柱管（1）内部空间呈圆柱状，长度为10-35mm，内径为4-7.6mm，外径为7.0mm，长度方向的两端外部设置有环形外螺纹，所述柱管（1）内填充有球形聚苯乙烯阴离子交换介质，聚苯乙烯阴离子交换的粒径为5-1000μm，孔径为2nm-1μm，所述柱管（1）采用316不锈钢材质，内壁粗糙度≤5.0μm；

所述过滤件（2）为筛板（21），所述筛板（21）为带有孔径的圆片状结构，厚度为1mm，轴线方向与所述柱管（1）的轴线方向重合，所述筛板（21）的圆形中部均布有滤孔，孔径为2um-100um；圆形边沿为实心结构；所述筛板（21）的直径尺寸与所述柱管（1）的外径相同，边沿的厚度与所述柱管（1）的壁厚尺寸相同；

所述混合器（4）为两端开口的中空圆柱状结构，内部空间呈圆柱状，长度为8.0mm，中空部分的横截面积自两端开口处至中部逐步减小形成圆锥形，两个圆锥形相接处的空间呈圆柱状，中间部位的圆柱状的长度为1.0mm，内径为0.5mm，所述混合器（4）轴线方向与所述柱管（1）的轴线方向重合，两端的外径与内径与所述柱管（1）的内径和外径相同；

所述锁紧件（3）为螺母（31），所述螺母（31）呈中空圆柱状结构，靠近所述混合器（4）的一端的内壁设置有与所述柱管（1）的环形外螺纹相匹配的内螺纹，所述螺母（31）靠近所述混合器（4）的一端的内径与所述混合器（4）和所述筛板（21）的外径尺寸相适应，所述螺母（31）远离所述混合器（4）的一端的外壁呈六角形状，内部通过设置环形内螺纹与高效液相色谱仪的管路线连接。

2.根据权利要求1所述的一种离子对净化柱，其特征在于，所述柱管（1）的内径为4.6mm，所述长度为30mm，所述聚苯乙烯阴离子交换的粒径为300μm，孔径为300nm。

3.根据权利要求1所述的一种离子对净化柱，其特征在于，所述柱管（1）的内径为4mm，所述长度为30mm，所述聚苯乙烯阴离子交换的粒径为300μm，孔径为300nm。

4.根据权利要求1所述的一种离子对净化柱，其特征在于，所述柱管（1）的内径为7.6mm，所述长度为30mm，所述聚苯乙烯阴离子交换的粒径为300μm，孔径为300nm。

5.根据权利要求1所述的一种离子对净化柱，其特征在于，所述柱管（1）的内径为4.6mm，所述长度为10mm，所述聚苯乙烯阴离子交换的粒径为300μm，孔径为300nm。

6.根据权利要求1所述的一种离子对净化柱，其特征在于，所述柱管（1）的内径为4.6mm，所述长度为35mm，所述聚苯乙烯阴离子交换的粒径为300μm，孔径为300nm。

7.根据权利要求1所述的一种离子对净化柱，其特征在于，所述柱管（1）的内径为4.6mm，所述长度为30mm，所述聚苯乙烯阴离子交换的粒径为5μm，孔径为300nm。

8.根据权利要求1所述的一种离子对净化柱，其特征在于，所述柱管（1）的内径为4.6mm，所述长度为30mm，所述聚苯乙烯阴离子交换的粒径为1000μm，孔径为300nm。

9.根据权利要求1所述的一种离子对净化柱，其特征在于，所述柱管（1）的内径为4.6mm，所述长度为30mm，所述聚苯乙烯阴离子交换的粒径为300μm，孔径为2nm。

10.根据权利要求1所述的一种离子对净化柱，其特征在于，所述柱管（1）的内径为4.6mm，所述长度为30mm，所述聚苯乙烯阴离子交换的粒径为300μm，孔径为1μm。

11.权利要求1-10任一项所述的离子对净化柱在液相色谱分析、液相色谱制备/半制备，以及离子对试剂提纯中的应用。

12.一种液相色谱分析装置，其特征在于，包含权利要求1-10任一项所述的离子对净化柱。

13.根据权利要求12所述的液相色谱分析装置，其特征在于，包括高效液相色谱仪，所述高效液相色谱仪包括溶剂容器、泵、混合器、进样器、色谱柱和检测器。

14.根据权利要求13所述的液相色谱分析装置，其特征在于，所述混合器和进样器之间连通有所述离子对净化柱。

15.根据权利要求13所述的液相色谱分析装置，其特征在于，所述混合器和泵之间连通有所述离子对净化柱。

16.根据权利要求13所述的液相色谱分析装置，其特征在于，所述溶剂容器和泵之间连通有所述离子对净化柱。

17.一种高效液相色谱分析方法，其特征在于，包括采用权利要求1-10任一项所述的离子对净化柱，对含离子对的流动相中的杂质进行吸附，具体步骤如下：

（1）将离子对净化柱连接于混合器和进样器之间，离子对净化柱的入口端与混合器连接，出口端连接进样器；

（2）溶剂容器内加入样品和流动相，在泵提供动力的作用下，流动相从溶剂容器内流出经过混合器混合；流动相从入口端流入离子对净化柱中，柱管内的吸附介质对流动相中的杂质进行吸附，从出口端流出离子对净化柱后进入进样器中；

（3）流动相和样品从进样器中流出后流经色谱柱和检测器。