CN112898232B - 选择性靶向波形蛋白的小分子化合物及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种选择性靶向波形蛋白的小分子化合物及其制备方法与应用，其中，该小分子化合物的结构式如式(I)或式(II)所示。本发明制备得到的小分子化合物相较于常规的波形蛋白结合分子PQ7，化学性质更为稳定，波形蛋白结合能力更强，抗肿瘤活性更高。而且还具有分子大小适宜、水溶性好、成药性强等多重优势，具有极高的应用价值和开发前景。

Description

选择性靶向波形蛋白的小分子化合物及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于药物和化工技术领域，具体涉及选择性靶向波形蛋白的小分子化合物及其制备方法与应用。
背景技术
癌症是威胁人类生命健康的重大疾病之一，其中，癌症的侵袭和转移更是实体瘤患者发生肿瘤扩散和患者预后性差导致病人死亡的主要原因。目前的抗肿瘤迁移药物还十分匮乏，抗肿瘤迁移药物的开发还存在许多的问题与挑战，因此，开发良好抗肿瘤药物一直是药物学上重要的研究方向。
波形蛋白(vimentin)是中间丝骨架蛋白中表达量最高的成分。有相关研究表明，vimentin在肿瘤的迁移性形变以及肿瘤相关信号通路中都有着非常重要的作用，并且vimentin在多种恶性肿瘤都有异常的表达和修饰，包括***癌、黑色素瘤、肝细胞癌、乳腺癌、子宫内膜癌等。但目前熟知的化疗药物靶标也仅为细胞骨架蛋白(如微管蛋白)。因此，亟待开发出一种能够靶向vimentin的抗肿瘤增殖和迁移的药物。
发明内容
本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提供了一种小分子化合物，化学性质稳定，能够靶向波形蛋白，具有抗肿瘤增殖和迁移作用。
本发明的第一个方面，提供：
小分子化合物，该小分子化合物的结构式如式(I)或式(II)所示：
Figure BDA0002919119750000011
Figure BDA0002919119750000021
其中，在式(I)中，X包括碳、氧、氮、硫、酯基、羰基或酰胺；
R包括任意开链化合物、碳环、杂环、卤素、硝基、氰基、胺基、羟基或巯基；
n为1～4中的任意整数；
在式(II)中，X包括碳、氧、氮、硫、酯基、羰基或酰胺；
R包括任意开链化合物、碳环、杂环、卤素、硝基、氰基、胺基、羟基或巯基；
n为1～4中的任意整数。
根据本发明的一种具体实施方式，至少具有以下有益效果：本发明制备得到的小分子化合物分子量小，有助于快速吸收，同时，其空间位阻小，可有利于其与蛋白的结合；其次，本发明制备得到的小分子化合物存在一定的线性结构和疏水性，促进了小分子化合物与同样含有疏水性氨基酸的波形蛋白的高效结合；而且，本发明制备得到的小分子化合物含有同侧两支链结构，能有助于其与波形蛋白的α螺旋结合。
而且，对比常规的波形蛋白结合分子PQ7(聚季铵盐-7，CAS：26590-05-6)，其虽然也具有抗肿瘤活性，但由于其分子量大，空间位阻大，使其不适合作为药物被快速吸收，也不利于与蛋白结合。而且PQ7水溶性差，降低了其成药性。而本发明制备得到的小分子化合物在克服上述问题的情况下，化学性质更为稳定、药效更为明显(结合波形蛋白和抗肿瘤活性)，具有分子大小适宜、水溶性好、成药性强等多重优势。
根据本发明的第一个方面，当小分子化合物的结构式如式(II)时，该小分子化合物不包括：
(1)R为溴；
(2)n为2且R为式29所示结构；
(3)n为3且R为式30所示结构；
其中，式29所示结构为：
Figure BDA0002919119750000031
式30所示结构为：
Figure BDA0002919119750000032
根据本发明的第一个方面，该小分子化合物包括如式6～28所示结构的化合物。
当然，上述式6～28所示结构的化合物仅为本发明的优选化合物，本发明所涉及的化合物包括但不仅限于上述式6～28所示结构的化合物。
本发明的第二个方面，提供：
一种组合物，该组合物含有本发明的第一个方面所述的小分子化合物。
本发明的第三个方面，提供：
第一个方面所述的小分子化合物的制备方法，包括：
将茴香偶酰在酸性溶液中进行脱甲基处理，加入双溴代烷烃链，调节pH至碱性，加入环状化合物或含氮开链化合物，得到结构式如式(II)所示的小分子化合物；
结构式如式(II)所示的小分子化合物在酸性条件下与1,2-苯二胺反应得到结构式如式(I)所示的小分子化合物；
波形蛋白的二级结构中主要为α螺旋结构，这些结构中存在的疏水性氨基酸可以导致两个波形蛋白单体会相互缠绕形成二聚体。本发明的第三个方面提供的制备方法，可以以茴香偶酰为原料，合成得到分子量小、兼具线性和疏水性结构的小分子化合物，该小分子化合物可以通过同侧的两个支链的结构与波形蛋白的α螺旋结合，从而抑制波形蛋白单体的二聚化。
根据本发明的第三个方面，所述环状化合物包括芳香族化合物或杂环化合物。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述芳香族化合物包括：含二甲胺基的芳香族化合物、含二乙胺基的芳香族化合物、含哌啶基的芳香族化合物、含哌嗪基的芳香族化合物和苯。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述杂环化合物包括：含哌啶基的杂环化合物、含哌嗪基的杂环化合物、噻吩、呋喃、四氢吡咯和吗啉。
所述含氮开链化合物包括二甲氨基的开链化合物和二乙氨基的开链化合物。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述双溴代烷烃链包括1,2-二溴乙烷、1,3-二溴乙烷和1,4-二溴乙烷。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述脱甲基处理的脱甲基试剂为氢溴酸，酸性调节剂为醋酸。
本发明的第四个方面，提供：
一种药物，该药物含有本发明的第一个方面所述的小分子化合物或其药学上可接受的盐。
当然，本领域技术人员可以根据实际情况，合理的将本发明的第一个方面所述的小分子化合物进一步加工得到其立体异构体或其前药分子。
根据本发明的第四个方面，该药物还含有药学上可接受的辅料。
根据本发明的第四个方面，该药物的剂型包括注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮剂或乳剂。
本发明的第五个方面，提供：
本发明的第一个方面所述的小分子化合物在制备波形蛋白检测制剂中的应用。
本发明的第六个方面，提供：
本发明的第一个方面所述的小分子化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
根据本发明的第六个方面，肿瘤包括卵巢癌、***、乳腺癌、肺腺癌、结肠癌、肝癌、白血病、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、皮肤癌、上皮细胞癌、***癌、鼻咽癌、恶行胶质瘤、淋巴瘤或黑色素瘤中的一种或多种。
在本发明的一些实施方式中，肿瘤为肺癌、肝癌、乳腺癌和结直肠癌。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明做进一步的说明，其中：
图1为通式(II)和(I)所示的化合物的合成线路图；
图2为本发明实施例中制备得到的化合物与波形蛋白的相互作用(SPR)的响应值；
图3为本发明实施例中制备得到的化合物促进MDA-MB-231肿瘤细胞自噬的Western blot图示。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。
关于下述实施方式中的术语“茴香偶酰”，包括本领域技术人员可以理解的不同名称下的结构一致的化合物，包括：4,4'-二甲氧基苯酚酯和4,4'-二甲氧基苯偶酰。
通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法
本发明实施例中的化合物的合成路线图如图1所示。
如图1所示，茴香偶酰(化合物1)在40％氢溴酸醋酸溶液环境下发生脱甲基反应得到化合物2(结构式如式2所示)；化合物2与不同长度的双溴代烷烃链反应得到中间体3(结构式如式3所示)、中间体4(结构式如式4所示)和中间体5(结构式如式5所示)；中间体3、中间体4和中间体5分别与不同的含氮脂肪杂环或含氮非杂环取代基化合物在碱性条件(使用K2CO3调节pH)下，反应得到如通式(II)所示的化合物。
通式(II)所示的化合物再和醋酸钠混合后，以醋酸作为反应溶剂，与1,2-苯二胺发生反应得到如通式(I)所示的化合物。
其中，上述实施例中的化合物2的结构式为：
Figure BDA0002919119750000051
中间体3的结构式为：
Figure BDA0002919119750000061
中间体4的结构式为：
Figure BDA0002919119750000062
中间体5的结构式为：
Figure BDA0002919119750000063
通式(II)所示的化合物的结构式为：
Figure BDA0002919119750000064
通式(I)所示的化合物的结构式为：
Figure BDA0002919119750000065
实施例1化合物2的制备
将4,4’-二甲氧基苯偶酰(茴香偶酰，18.50mmol)与50mL40％氢溴酸醋酸溶液混合，120℃下搅拌反应36小时，TLC点板监测到反应完全进行后，旋转蒸发除去溶液中的大部分酸液，其中，酸液的去除方式采用酸吸收装置。旋蒸至剩余少量溶液后，在冰水中搅拌直至有黄色固体析出，抽滤，真空干燥得到黄色固体，即得化合物2。
本实施例中的化合物2产率为：95.98％。
本实施例中的化合物2的氢谱为：
1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.82(s,2H),7.76–7.72(m,4H),6.95–6.90(m,4H)。
实施例2中间体3的制备
取5.00g上述实施例1制备得到的化合物2(20.64mmol)与23.27g1,2-二溴乙烷(123.85mmol)和17.12g K2CO3(123.85mmol)混合，加入适量丙酮或者乙腈作为溶剂，80℃油浴搅拌反应约16h，TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相为石油醚：二氯甲烷＝1：1的极性条件下，最终得到淡黄色固体状的中间体3。
本实施例中的中间体3产率为：40.53％。
本实施例中的中间体3的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.93(d,J＝8.9Hz,4H),6.95(d,J＝8.9Hz,4H),4.08(t,J＝5.9Hz,4H),3.48(t,J＝6.4Hz,4H),2.11–2.04(m,4H),2.02–1.94(m,4H)。
实施例3中间体4的制备
取5.00g上述实施例1制备得到的化合物2(20.64mmol)与25.00g 1,3-二溴丙烷(123.85mmol)和17.12g K2CO3(123.85mmol)混合，加入适量丙酮或者乙腈作为溶剂，80℃油浴搅拌反应约16h，TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相为石油醚：二氯甲烷＝1：1的极性条件下，最终得到淡黄色固体状的中间体4。
本实施例中的中间体4产率为：41.53％。
本实施例中的中间体4的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94(d,J＝8.9Hz,4H),6.97(d,J＝8.9Hz,4H),4.19(t,J＝5.8Hz,4H),3.60(t,J＝6.3Hz,4H),2.34(p,J＝6.1Hz,4H)。
实施例4中间体5的制备
取5.00g上述实施例1制备得到的化合物2(20.64mmol)与26.74g 1,4-二溴丁烷(123.85mmol)和17.12g K2CO3(123.85mmol)混合，加入适量丙酮或者乙腈作为溶剂，80℃油浴搅拌反应约16h，TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相为石油醚：二氯甲烷＝1：1的极性条件下，最终得到淡黄色固体状的中间体5。
本实施例中的中间体5产率为：20.22％。
本实施例中的中间体5的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝9.0Hz,4H),6.98(d,J＝9.0Hz,4H),4.37(t,J＝6.2Hz,4H),3.66(t,J＝6.2Hz,4H)。
实施例5化合物C-1的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体3(2.19mmol)，加入448.03mg哌啶(5.26mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相条件为甲醇：二氯甲烷＝2：25，并加入少量氨水，得到淡黄色固体状的化合物C-1。
本实施例中的化合物C-1的结构式如式6所示：
Figure BDA0002919119750000081
本实施例中的化合物C-1的产率为：74.66％。
本实施例中的化合物C-1的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.9Hz,4H),6.96(d,J＝8.9Hz,4H),4.21(t,J＝5.9Hz,4H),2.83(t,J＝5.9Hz,4H),2.55(s,8H),1.67–1.59(m,8H),1.51–1.41(m,8H)。
本实施例中的化合物C-1的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ193.58,164.19,132.42,126.35,114.91,66.44,57.64,55.11,25.90,24.15.11.10。
本实施例中的化合物C-1的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝465.2748,calcd for 464.2675。
HPLC测得本实施例中的化合物C-1的纯度为95.1％。
实施例6化合物C-2的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体3(2.19mmol)，加入237.22mg二甲氨(5.26mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相为甲醇：二氯甲烷＝2：25，得到淡黄色固体状的化合物C-2。
本实施例中的化合物C-2的结构式如式7所示：
Figure BDA0002919119750000091
本实施例中的化合物C-2的产率为：53.22％。
本实施例中的化合物C-2的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.9Hz,4H),6.97(d,J＝8.9Hz,4H),4.14(t,J＝5.6Hz,4H),2.76(t,J＝5.6Hz,4H),2.34(s,12H)。
本实施例中的化合物C-2的碳谱为：
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ193.49,164.09,132.36,126.34,114.82,66.34,57.96,45.85.11.10。
本实施例中的化合物C-2的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝385.2122,calcd for 384.2049。
HPLC测得本实施例中的化合物C-2的纯度为95.6％。
实施例7化合物C-3的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体3(2.19mmol)，加入四氢吡咯(5.26mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相条件为甲醇：二氯甲烷＝1：20，得到淡黄色固体状的化合物C-3。
Figure BDA0002919119750000101
本实施例中的化合物C-3的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.98(d,J＝8.9Hz,1H),4.19(t,J＝5.8Hz,1H),2.94(t,J＝5.8Hz,1H),2.65(s,2H),1.82(s,2H)。
本实施例中的化合物C-3的碳谱为：
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ193.60,163.84,132.27,126.22,114.83,66.66,54.58,54.42,50.01,23.28.11.10。
本实施例中的化合物C-3的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝437.2435,calcd for 436.2362。
HPLC测得本实施例中的化合物C-3的纯度为98.3％。
实施例8化合物C-4的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体3(2.19mmol)，加入458.41mg吗啉环(5.26mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相条件为甲醇：二氯甲烷＝1：20，得到淡黄色固体状的化合物C-4。
本实施例中的化合物C-4的结构式如式9所示：
Figure BDA0002919119750000102
本实施例中的化合物C-4的产率为：75.65％。
本实施例中的化合物C-4的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝8.9Hz,1H),6.98(d,J＝8.9Hz,1H),4.21(t,J＝5.6Hz,1H),3.79–3.67(m,2H),2.85(t,J＝5.6Hz,1H),2.65–2.54(m,2H)。
本实施例中的化合物C-4的碳谱为：
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ193.60,163.84,132.27,126.22,114.83,66.66,54.58,54.42,50.01,23.28.11.10。
本实施例中的化合物C-4的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝469.2333,calcd for 486.2260。
HPLC测得本实施例中的化合物C-4的纯度为94.2％。
实施例9化合物C-5的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体3(2.19mmol)，加入453.23mg吡啶(5.26mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相为甲醇：二氯甲烷＝2：25，得到淡黄色固体状的化合物C-5。
本实施例中的化合物C-5的结构式如式10所示：
Figure BDA0002919119750000111
本实施例中的化合物C-5的产率为：30.26％。
本实施例中的化合物C-5的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.9Hz,1H),6.96(d,J＝8.9Hz,1H),4.17(t,J＝5.8Hz,1H),2.99–2.87(m,2H),2.81(t,J＝5.8Hz,1H),2.55(s,2H),2.55(s,2H),2.05(s,1H)。
本实施例中的化合物C-5的碳谱为：
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ193.56,164.15,132.49,126.45,114.93,66.38,57.58,54.87,46.01.11.10。
本实施例中的化合物C-5的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝467.2653,calcd for 466.2580。
HPLC测得本实施例中的化合物C-5的纯度为96.2％。
实施例10化合物C-6的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体4(2.07mmol)，加入233.48mg哌啶(4.96mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动现象为甲醇：二氯甲烷＝1：100，得到淡黄色固体状的化合物C-5。
本实施例中的化合物C-6的结构式如式11所示：
Figure BDA0002919119750000121
本实施例中的化合物C-6的产率为：43.83％。
本实施例中的化合物C-6的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.9Hz,4H),6.95(d,J＝9.0Hz,4H),4.11(t,J＝6.2Hz,4H),2.57(t,J＝25.5Hz,12H),2.13–2.04(m,4H),1.68(s,8H),1.53–1.44(m,4H)。
本实施例中的化合物C-6的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)193.42,164.29,132.35,126.07,114.73,77.41,77.09,76.77,66.75,66.45,55.24,53.61,25.99.11.10。
本实施例中的化合物C-6的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝493.3061,calcd for 492.2988。
HPLC测得本实施例中的化合物C-6的纯度为95.1％。
实施例11化合物C-7的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体4(2.07mmol)，加入233.48mg二甲胺(4.96mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动现象为甲醇：二氯甲烷＝1：100，得到淡黄色固体状的化合物C-7。
本实施例中的化合物C-7的结构式如式12所示：
Figure BDA0002919119750000131
本实施例中的化合物C-7的产率为：43.83％。
本实施例中的化合物C-7的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝8.9Hz,4H),6.95(d,J＝8.9Hz,4H),4.08(t,J＝6.4Hz,4H),2.45(t,J＝7.2Hz,4H),2.25(s,12H),1.97(dt,J＝13.4,6.6Hz,4H)。
本实施例中的化合物C-7的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ193.67,164.43,132.48,126.32,114.86,66.65,56.18,45.43,27.19.11.10。
本实施例中的化合物C-7的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝413.2435,calcd for 412.2362。
HPLC测得本实施例中的化合物C-7的纯度为94.7％。
实施例12化合物C-8的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体4(2.07mmol)，加入352.54mg四氢吡咯(4.96mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，分离条件为甲醇：二氯甲烷＝2：25，得到淡黄色固体状的化合物C-8。
本实施例中的化合物C-8的结构式如式13所示：
Figure BDA0002919119750000132
本实施例中的化合物C-8的产率为：73.54％。
本实施例中的化合物C-8的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝8.9Hz,4H),6.95(d,J＝8.9Hz,4H),4.11(t,J＝6.4Hz,4H),2.68–2.60(m,4H),2.56(t,J＝5.8Hz,8H),2.09–1.99(m,4H),1.82–1.75(m,8H)。
本实施例中的化合物C-8的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ193.65,164.34,132.49,126.35,114.86,66.66,54.27,53.01,28.16,23.56.11.10。
本实施例中的化合物C-8的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝465.2748,calcd for464.2675。
HPLC测得本实施例中的化合物C-8的纯度为93.6％。
实施例13化合物C-9的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体4(2.07mmol)，加入431.85mg吗啉(4.96mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，分离条件为甲醇：二氯甲烷＝1：20，得到淡黄色固体状的化合物C-9。
本实施例中的化合物C-9的结构式如式14所示：
Figure BDA0002919119750000141
本实施例中的化合物C-9的产率为：75.22％。
本实施例中的化合物C-9的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.8Hz,4H),6.95(d,J＝8.8Hz,4H),4.10(t,J＝6.3Hz,4H),3.75–3.67(m,8H),2.52(t,J＝7.2Hz,4H),2.46(s,8H),2.04–1.94(m,4H)。
本实施例中的化合物C-9的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ193.60,164.40,132.50,126.36,114.85,66.88,66.57,55.39,53.75,26.14.11.10。
本实施例中的化合物C-9的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝465.2748,calcd for 496.2573。
HPLC测得本实施例中的化合物C-9的纯度为96.4％。
实施例14化合物C-10的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体4(2.07mmol)，加入426.97mg吡啶(4.96mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相条件为2：25，并加入少量氨水，得到淡黄色固体状的化合物C-10。
本实施例中的化合物C-10的结构式如式15所示：
Figure BDA0002919119750000151
本实施例中的化合物C-10的产率为：21.52％。
本实施例中的化合物C-10的氢谱为：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.96(d,J＝8.9Hz,1H),4.09(t,J＝4.8Hz,1H),2.91(s,2H),2.63–2.47(m,2H),2.05–1.93(m,1H)。
本实施例中的化合物C-10的碳谱为：
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ193.60,163.84,132.27,126.22,114.83,66.66,54.58,54.42,50.01,23.28.11.10。
本实施例中的化合物C-10的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝495.2966,calcd for 494.2893。
HPLC测得本实施例中的化合物C-10的纯度为94.1％。
实施例15化合物C-11的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体5(1.95mmol)，加入398.96mg哌啶(4.69mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相为甲醇：二氯甲烷＝2：25，得到淡黄色固体状的化合物C-11。
本实施例中的化合物C-11的结构式如式16所示：
Figure BDA0002919119750000161
本实施例中的化合物C-11的产率为：72.44％。
本实施例中的化合物C-11的氢谱为：
1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.84(d,J＝8.9Hz,4H),7.12(d,J＝8.9Hz,4H),4.11(t,J＝6.5Hz,4H),2.37–2.23(m,12H),1.79–1.69(m,4H),1.60–1.51(m,4H),1.50–1.43(m,4H),1.41–1.33(m,4H)。
本实施例中的化合物C-11的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ193.68,164.47,132.46,126.23,114.82,68.27,58.82,54.53,27.21,25.75,24.35,23.19.11.10。
本实施例中的化合物C-11的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝521.3374,calcd for520.3301。
HPLC测得本实施例中的化合物C-11的纯度为93.8％。
实施例16化合物C-12的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体5(1.95mmol)，加入333.23mg四氢吡咯(4.69mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相条件为甲醇：二氯甲烷＝2：25，得到淡黄色固体状的化合物C-12。
本实施例中的化合物C-12的结构式如式17所示：
Figure BDA0002919119750000162
本实施例中的化合物C-12的产率为：48.13％。
本实施例中的化合物C-12的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.89(d,J＝8.7Hz,4H),6.92(d,J＝8.7Hz,4H),4.04(t,J＝6.3Hz,4H),2.61–2.47(m,12H),1.86–1.65(m,16H)。
本实施例中的化合物C-12的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ193.57,164.36,132.34,126.11,114.71,68.14,55.95,54.12,27.08,25.24,23.39.11.10。
本实施例中的化合物C-12的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝493.3061,calcd for 492.2988。
HPLC测得本实施例中的化合物C-12的纯度为96.8％。
实施例17化合物C-13的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取1g实施例2制备得到的中间体5(1.95mmol)，加入408.19mg吗啉(4.69mmol)和适量K2CO3，以乙腈作为溶剂，常温下搅拌反应。TLC点板监测反应完全进行后，过滤除去固体沉淀，进行柱层析分离纯化，流动相条件为甲醇：二氯甲烷＝1：20，得到淡黄色固体状的化合物C-13。
本实施例中的化合物C-13的结构式如式18所示：
Figure BDA0002919119750000171
本实施例中的化合物C-13的产率为：66.52％。
本实施例中的化合物C-13的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.9Hz,4H),6.94(d,J＝8.9Hz,4H),4.06(t,J＝6.3Hz,4H),3.76–3.66(m,8H),2.52–2.36(m,12H),1.89–1.79(m,4H),1.74–1.63(m,4H)。
本实施例中的化合物C-13的碳谱为：
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ193.61,164.38,132.45,126.14,114.79,68.11,66.65,58.42,53.55,26.94,22.72.11.10。
本实施例中的化合物C-13的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝525.2934,calcd for 524.2886。
HPLC测得本实施例中的化合物C-13的纯度为96.8％。
实施例18化合物B-1的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取200mg上述实施例5制备的化合物C-1(452.38mmol)，加入49.54mg 1,2-苯二胺(458.14mmol)和适量醋酸钠，以醋酸作为溶剂，120℃搅拌反应24h。TLC点板监测反应完全进行后，用冰水稀释，然后用碳酸氢钠调节溶液pH至中性，二氯甲烷萃取，萃取物经2～3次水洗后进行柱层析分离纯化，流动相条件为1：25，得到具有蓝色荧光的黄色固体状的化合物B-1。
本实施例中的化合物B-1的结构式如式19所示：
Figure BDA0002919119750000181
本实施例中的化合物B-1的产率为：52.25％。
本实施例中的化合物B-1的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(dd,J＝6.3,3.4Hz,2H),7.69(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.46(d,J＝8.7Hz,4H),6.86(d,J＝8.7Hz,4H),4.12(t,J＝6.0Hz,4H),2.77(t,J＝6.0Hz,4H),2.50(s,8H),1.60(dt,J＝11.0,5.6Hz,8H),1.48–1.38(m,4H)。
本实施例中的化合物B-1的碳谱为：
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ159.16,152.99,141.08,131.91,131.27,129.59,129.02,114.46,57.65,54.97,25.42,23.82.11.10。
本实施例中的化合物B-1的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝537.3224,calcd for 536.3151。
HPLC测得本实施例中的化合物B-1的纯度为94.7％。
实施例19化合物B-2的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取200mg上述实施例7制备的化合物C3，(458.46mmol)，加入59.49mg 1,2-苯二胺(550.16mmol)和适量醋酸钠，以醋酸作为溶剂，120℃搅拌反应24h。TLC点板监测反应完全进行后，用冰水稀释，然后用碳酸氢钠调节溶液pH至中性，二氯甲烷萃取，萃取物经2～3次水洗后进行柱层析分离纯化，流动相条件为1：25，得到粗品，再利用薄层色谱(大板)纯化，展开剂条件为甲醇：氨水：二氯甲烷＝10：1：300，得到具有蓝色荧光的黄色固体状的化合物B-2。
本实施例中的化合物B-2的结构式如式20所示：
Figure BDA0002919119750000191
本实施例中的化合物B-2的产率为：48.75％。
本实施例中的化合物B-2的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(dd,J＝6.4,3.4Hz,1H),7.73(dd,J＝6.4,3.4Hz,1H),7.49(d,J＝8.8Hz,2H),6.90(d,J＝8.8Hz,2H),4.17(t,J＝5.9Hz,2H),2.95(t,J＝5.9Hz,2H),2.68(t,J＝6.0Hz,4H),1.84(t,J＝5.1Hz,4H)。
本实施例中的化合物B-2的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ159.46,153.15,141.17,131.89,131.34,129.64,129.11,114.55,67.02,55.07,54.87,23.59.11.10。
本实施例中的化合物B-2的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝509.2911,calcd for 508.2838。
HPLC测得本实施例中的化合物B-2的纯度为93.3％。
实施例20化合物B-3的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取200mg上述实施例10制备的化合物C6(405.96mmol)，加入52.68mg 1,2-苯二胺(487.15mmol)和适量醋酸钠，以醋酸作为溶剂，120℃搅拌反应24h。TLC点板监测反应完全进行后，用冰水稀释，然后用碳酸氢钠调节溶液pH至中性，二氯甲烷萃取，萃取物经2～3次水洗后进行柱层析分离纯化，流动相条件为1：25，得到具有蓝色荧光的黄色固体状的化合物B-3。
本实施例中的化合物B-3的结构式如式21所示：
Figure BDA0002919119750000201
本实施例中的化合物B-3的产率为：45.24％。
本实施例中的化合物B-3的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(dd,J＝6.3,3.4Hz,2H),7.72(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.47(d,J＝8.7Hz,4H),6.88(t,J＝9.1Hz,4H),4.15(t,J＝5.9Hz,4H),2.81(t,J＝5.9Hz,4H),2.58(d,J＝17.9Hz,8H),1.68–1.60(m,8H),1.49–1.43(m,4H),1.25(s,4H)。
本实施例中的化合物B-3的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ159.39,153.14,141.21,131.98,131.38,129.69,129.15,122.34,114.59,65.84,57.83,55.13,29.84,25.72,24.07.11.10。
本实施例中的化合物B-3的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝509.2911,calcd for 508.2838。
HPLC测得本实施例中的化合物B-3的纯度为95.5％。
实施例21化合物B-4的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取200mg上述实施例11制备的化合物C7(484.81mmol)，加入62.91mg 1,2-苯二胺(581.78mmol)和适量醋酸钠，以醋酸作为溶剂，120℃搅拌反应24h。TLC点板监测反应完全进行后，用冰水稀释，然后用碳酸氢钠调节溶液pH至中性，二氯甲烷萃取，萃取物经2～3次水洗后进行柱层析分离纯化，流动相条件为1：25，得到具有蓝色荧光的黄色固体状的化合物B-4。
本实施例中的化合物B-4的结构式如式22所示：
Figure BDA0002919119750000202
Figure BDA0002919119750000211
本实施例中的化合物B-4的产率为：45.68％。
本实施例中的化合物B-4的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.71(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.47(d,J＝8.8Hz,4H),6.86(d,J＝8.8Hz,4H),4.04(t,J＝6.4Hz,4H),2.52–2.45(m,4H),2.28(s,12H),1.98(dt,J＝13.5,6.5Hz,4H)。
本实施例中的化合物B-4的碳谱为：
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ159.62,153.11,141.07,131.63,131.27,129.56,129.02,114.36,66.23,56.38,45.49,27.42.11.10。
本实施例中的化合物B-4的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝485.2911,calcd for 484.2838。
HPLC测得本实施例中的化合物B-4的纯度为96.1％。
实施例22化合物B-5的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取200mg上述实施例12制备的化合物C8(430.47mmol)，加入55.86mg 1,2-苯二胺(516.56mmol)和适量醋酸钠，以醋酸作为溶剂，120℃搅拌反应24h。TLC点板监测反应完全进行后，用冰水稀释，然后用碳酸氢钠调节溶液pH至中性，二氯甲烷萃取，萃取物经2～3次水洗后进行柱层析分离纯化，流动相条件为1：25，得到具有蓝色荧光的黄色固体状的化合物B-5。
本实施例中的化合物B-5的结构式如式23所示：
Figure BDA0002919119750000212
本实施例中的化合物B-5的产率为：38.25％。
本实施例中的化合物B-5的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(dd,J＝6.3,3.4Hz,2H),7.71(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.47(d,J＝8.7Hz,4H),6.86(d,J＝8.7Hz,4H),4.05(t,J＝6.4Hz,4H),2.74–2.61(m,4H),2.56(s,8H),2.09–1.96(m,4H),1.80(s,8H)。
本实施例中的化合物B-5的碳谱为：
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ159.55,152.99,140.97,131.51,131.18,129.44,128.92,114.27,66.33,54.19,53.08,28.66,23.41.11.10。
本实施例中的化合物B-5的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝537.3209,calcd for 536.3151。
HPLC测得本实施例中的化合物B-5的纯度为95.8％。
实施例23化合物B-6的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取200mg上述实施例13制备的化合物C9(402.74mmol)，加入52.26mg 1,2-苯二胺(483.29mmol)和适量醋酸钠，以醋酸作为溶剂，120℃搅拌反应24h。TLC点板监测反应完全进行后，用冰水稀释，然后用碳酸氢钠调节溶液pH至中性，二氯甲烷萃取，萃取物经2～3次水洗后进行柱层析分离纯化，流动相条件为1：25，得到具有蓝色荧光的黄色固体状的化合物B-6。
本实施例中的化合物B-6的结构式如式24所示：
Figure BDA0002919119750000221
本实施例中的化合物B-6的产率为：52.81％。
本实施例中的化合物B-6的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.72(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.48(d,J＝8.7Hz,4H),6.86(d,J＝8.8Hz,4H),4.06(t,J＝6.3Hz,4H),3.79–3.72(m,8H),2.61–2.55(m,4H),2.52(s,8H),2.02(dt,J＝13.5,6.6Hz,8H)。
本实施例中的化合物B-6的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ159.56,153.01,141.07,131.72,131.25,129.56,129.00,66.91,66.14,55.54,53.73,26.34.11.10。
本实施例中的化合物B-6的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝569.3122,calcd for 568.3050。
HPLC测得本实施例中的化合物B-6的纯度为94.0％。
实施例24化合物B-7的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取200mg上述实施例15制备的化合物C11(384.09mmol)，加入49.84mg 1,2-苯二胺(460.91mmol)和适量醋酸钠，以醋酸作为溶剂，120℃搅拌反应24h。TLC点板监测反应完全进行后，用冰水稀释，然后用碳酸氢钠调节溶液pH至中性，二氯甲烷萃取，萃取物经2～3次水洗后进行柱层析分离纯化，流动相条件为1：25，得到具有蓝色荧光的黄色固体状的化合物B-7。
本实施例中的化合物B-7的结构式如式25所示：
Figure BDA0002919119750000231
本实施例中的化合物B-7的产率为：33.26％。
本实施例中的化合物B-7的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.72(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.47(d,J＝8.7Hz,4H),6.85(d,J＝8.7Hz,4H),4.00(t,J＝6.2Hz,4H),2.55–2.38(m,12H),1.86–1.77(m,4H),1.75–1.69(m,4H),1.67–1.59(m,4H),1.49–1.42(m,4H)。
本实施例中的化合物B-7的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ159.68,153.08,141.05,131.54,131.23,129.46,128.99,114.32,67.82,59.07,54.60,27.40,25.97,24.48,23.47.11.10。
本实施例中的化合物B-7的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝593.3848,calcd for 592.3777。
HPLC测得本实施例中的化合物B-7的纯度为98.1％。
实施例25化合物B-8的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取200mg上述实施例16制备的化合物C12(453.95mmol)，加入58.91mg 1,2-苯二胺(544.74mmol)和适量醋酸钠，以醋酸作为溶剂，120℃搅拌反应24h。TLC点板监测反应完全进行后，用冰水稀释，然后用碳酸氢钠调节溶液pH至中性，二氯甲烷萃取，萃取物经2～3次水洗后进行柱层析分离纯化，流动相条件为1：25，得到具有蓝色荧光的黄色固体状的化合物B-8。
本实施例中的化合物B-8的结构式如式26所示：
Figure BDA0002919119750000241
本实施例中的化合物B-8的产率为：28.55％。
本实施例中的化合物B-8的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.9Hz,4H),6.94(d,J＝8.9Hz,4H),4.06(t,J＝6.3Hz,4H),3.76–3.66(m,8H),2.52–2.36(m,12H),1.89–1.79(m,4H),1.74–1.63(m,4H)。
本实施例中的化合物B-8的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ159.77,153.21,141.19,131.73,131.35,129.61,129.12,114.46,67.86,59.46,45.47,27.21,24.24.11.10。
本实施例中的化合物B-8的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝513.3224,calcd for 512.3151。
HPLC测得本实施例中的化合物B-8的纯度为96.2％。
实施例26化合物B-9的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取200mg上述实施例17制备的化合物C13(405.95mmol)，加入52.68mg 1,2-苯二胺(487.14mmol)和适量醋酸钠，以醋酸作为溶剂，120℃搅拌反应24h。TLC点板监测反应完全进行后，用冰水稀释，然后用碳酸氢钠调节溶液pH至中性，二氯甲烷萃取，萃取物经2～3次水洗后进行柱层析分离纯化，流动相条件为1：25，得到具有蓝色荧光的黄色固体状的化合物B-9。
本实施例中的化合物B-9的结构式如式27所示：
Figure BDA0002919119750000251
本实施例中的化合物B-9的产率为：40.68％。
本实施例中的化合物B-9的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.72(dd,J＝6.4,3.4Hz,2H),7.50–7.45(m,4H),6.85(d,J＝8.8Hz,4H),4.00(t,J＝6.3Hz,4H),3.76–3.70(m,8H),2.50–2.40(m,12H),1.87–1.78(m,4H),1.75–1.65(m,4H)。
本实施例中的化合物B-9的碳谱为：
13C NMR(126MHz,CDCl3)δ159.69,153.10,141.13,131.70,131.32,129.59,129.07,114.37,67.78,67.05,58.70,53.80,27.24,23.14.11.10。
本实施例中的化合物B-9的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝597.3435,calcd for 564.3463。
HPLC测得本实施例中的化合物B-9的纯度为96.5％。
实施例27化合物B-10的制备
根据通式(II)和(I)所示的化合物的制备方法，取200mg上述实施例18制备的化合物C14(381.20mmol)，加入49.47mg 1,2-苯二胺(457.44mmol)和适量醋酸钠，以醋酸作为溶剂，120℃搅拌反应24h。TLC点板监测反应完全进行后，用冰水稀释，然后用碳酸氢钠调节溶液pH至中性，二氯甲烷萃取，萃取物经2～3次水洗后进行柱层析分离纯化，流动相条件为1：25，得到具有蓝色荧光的黄色固体状的化合物B-10。
本实施例中的化合物B-10的结构式如式28所示：
Figure BDA0002919119750000252
Figure BDA0002919119750000261
本实施例中的化合物B-10的产率为：15.28％。
本实施例中的化合物B-10的氢谱为：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(dd,J＝6.4,3.5Hz,2H),7.72(dd,J＝6.3,3.4Hz,2H),7.47(d,J＝8.6Hz,4H),6.85(d,J＝8.7Hz,4H),4.00(t,J＝6.1Hz,4H),3.13–3.06(m,4H),2.69–2.63(m,4H),2.52–2.46(m,4H),2.31(s,10H),1.87–1.77(m,4H),1.75–1.63(m,4H)。
本实施例中的化合物B-10的碳谱为：
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ159.73,153.19,141.16,131.69,131.35,129.65,129.09,114.42,67.85,58.87,54.21,45.91,27.33,23.29.11.10。
本实施例中的化合物B-10的电喷雾质谱(ESI-HRMS)为：
[M+H]+m/z＝595.3755,calcd for 596.3363。
HPLC测得本实施例中的化合物B-10的纯度为95.1％。
上述实施例中制备得到的化合物的波形蛋白结合效果检测
使用表面等离子共振技术对实施例1～28中制备得到的化合物与波形蛋白的结合作用进行测试，具体步骤为：
1.用醋酸钠溶液(pH5.5)将波形蛋白进行稀释，使其终浓度为100mM，标记于NTA芯片上；
2.用SPR缓冲液稀释待测化合物至50mM，设定程序，使待测化合物流过NTA芯片，待测化合物与波形蛋白结合后用SPR缓冲液冲洗NTA芯片，使待测化合物解离；
3.拟合待测化合物与波形蛋白的平衡解离常数KD值。
其中，以PQ7(聚季铵盐-7，CAS：26590-05-6)作为对照。PQ7是一种特异性结合波形蛋白的小分子。
待测化合物与波形蛋白的平衡解离常数KD值如表1所示。
表1待测化合物与波形蛋白的平衡解离常数KD值
Figure BDA0002919119750000262
Figure BDA0002919119750000271
同时，计算得出待测化合物与波形蛋白的响应值，根据响应值和解离曲线初步判断待测化合物与波形蛋白的结合能力强弱和结合模式，结果如图2所示。
由结果可知，上述实施例制备得到的化合物对波形蛋白具有较强的结合能力，且大部分均优于PQ7。
上述实施例中制备得到的化合物对肿瘤细胞生长的抑制作用检测
选取上述实施例中对波形蛋白有较强结合作用的化合物，使用MTT法对多种肿瘤细胞株进行体外细胞毒性检测。
其中，使用的肿瘤细胞株为：A549人非小细胞肺癌细胞、HEK293T人胚肾上皮细胞、HepG2人肝癌细胞、MDA-MB-231人乳腺癌细胞、HUVEC人脐静脉血管内皮细胞、SW480人结肠癌细胞、DLD-1人结直肠腺癌上皮细胞。
具体步骤为：在对数生长期的细胞中分别加入不同浓度的待测化合物，孵育24h，加入MTT，测定吸光度。计算抑制细胞生长50％时的化合物浓度(IC50值)，结果如表2所示,。
表2待测化合物对多种肿瘤细胞株生长的抑制作用(IC50值/μM)
Figure BDA0002919119750000272
Figure BDA0002919119750000281
由结果可知，与PQ7相比，上述实施例制备得到的多种化合物的IC50更低，说明上述实施例制备得到的化合物对多种肿瘤细胞的抑制能力更强。
上述实施例中制备得到的化合物对肿瘤自噬的作用测试
采用Western blot检测上述实施例中制备得到的化合物对肿瘤自噬的作用效果，具体步骤为：
培养细胞(以MDA-MB-231肿瘤细胞为实验对象)，加入细胞裂解液，提取上清总蛋白。使用BCA法检测总蛋白浓度，然后对蛋白进行变性。取相同质量的蛋白上样，SDS-PAGE电泳分离蛋白条带。根据目标蛋白计算分子量，将相应位置的电泳胶条带切下，湿转法将蛋白条带转到PVDF膜上。
用TBST缓冲液(25mM NaCl、100mM Tris、0.2％Tween-20，pH 7.4)溶解5％脱脂奶粉溶液(w/v)，封闭PVDF膜，加入一抗和二抗孵育，然后用TBST缓冲液漂洗，使用SuperECLPlus超敏发光试剂盒显色成像。
结果如图3所示，经过Western Blot结果验证，上述实施例中制备得到的化合物能通过诱导肿瘤细胞自噬引起肿瘤细胞的死亡，且其促进肿瘤自噬能力方面也远优于对照组的PQ7。
综上所述，本发明实施例中的化合物在波形蛋白结合能力、肿瘤细胞自噬促进作用、肿瘤细胞(包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结直肠癌细胞等)抑制能力均远优于PQ7，其中，B系列化合物(实施例18～27)的化学结构相比PQ7更简单，各方面活性更强；而C系列化合物(实施例5～17)则具有与PQ7类似的线性结构，却显示出比PQ7更强的波形蛋白结合能力。
上面结合附图对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

Claims (6)

1.小分子化合物，其特征在于，所述小分子化合物选自式19～式28所示结构的化合物；
Figure FDA0003671691550000011
Figure FDA0003671691550000021
Figure FDA0003671691550000031
2.一种组合物，其特征在于，所述组合物含有权利要求1所述的小分子化合物。
3.一种药物，其特征在于，所述药物含有权利要求1所述的小分子化合物或其药学上可接受的盐。
4.根据权利要求3所述的药物，其特征在于，所述药物还含有药学上可接受的辅料。
5.权利要求1所述的小分子化合物在制备波形蛋白检测制剂中的应用。
6.权利要求1所述的小分子化合物在制备抗肿瘤药物中的应用；所述肿瘤为肺癌、肝癌、乳腺癌和结直肠癌。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20120025903A (ko) * 2010-09-08 2012-03-16 (주)아모레퍼시픽 신규한 자외선 흡수제용 퀴녹살린계 화합물
CN106604939A (zh) * 2014-08-25 2017-04-26 日东电工株式会社 发光性乙烯系共聚物、太阳能电池用封装材料组合物、及使用其的太阳能电池模组

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2003223467B2 (en) * 2002-04-08 2007-10-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of Akt activity
CN101050213A (zh) * 2007-05-14 2007-10-10 中山大学 9－脂肪氨基取代小檗碱衍生物及其制备方法与作为抗癌药物的应用
CN108658869A (zh) * 2017-03-29 2018-10-16 复旦大学 具有抗肿瘤活性的化合物及其制备方法和在制药中的用途
CN107445963B (zh) * 2017-06-23 2019-11-05 中山大学 一种喹喔啉类衍生物及其制备方法和应用
KR101871166B1 (ko) * 2018-02-27 2018-07-02 (주)오스티오뉴로젠 신규 화합물 및 이를 유효성분으로 함유하는 섬유증 또는 비알코올성 지방간염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
CN111732584B (zh) * 2019-03-25 2024-02-27 复旦大学 二芳基取代稠杂环类化合物及其制备方法和在制药中的用途

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20120025903A (ko) * 2010-09-08 2012-03-16 (주)아모레퍼시픽 신규한 자외선 흡수제용 퀴녹살린계 화합물
CN106604939A (zh) * 2014-08-25 2017-04-26 日东电工株式会社 发光性乙烯系共聚物、太阳能电池用封装材料组合物、及使用其的太阳能电池模组

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
One-step synthesis of poly(triazole-ether-quinoxaline)s using click reaction: preparation and properties of magnetic nanocomposites with modified Fe3O4 for metal ions removal;Ghaemy, Mousa et al.;《Journal of Polymer Research》;20140502;第21卷(第61期);第1-17页 *

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