CN112843080A - 抗甲3型流感病毒的组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本申请属于医药技术领域，尤其涉及一种抗甲3型流感病毒的组合物及其制备方法。抗甲3型流感病毒的组合物包括原料组分：百蕊草素I。本申请抗甲3型流感病毒的组合物，通过百蕊草素I对病毒致细胞病变作用的影响试验，证明百蕊草素I对流感病毒甲3型(A3)显示出抗病毒活性。

Description

抗甲3型流感病毒的组合物及其制备方法

技术领域

本申请属于医药技术领域，尤其涉及一种抗甲3型流感病毒的组合物，以及一种抗甲3型流感病毒的组合物的制备方法。

背景技术

流行性感冒，是由流感病毒引起的一种患病率高、流行广泛、传播迅速的急性呼吸道传染病。流感病毒分甲型和乙型两种类型，甲型流感病毒为常见流感病毒，甲型流感病毒又称A型流感病毒，甲型流感病毒最容易发生变异。甲型流感病毒经常发生抗原变异，可以进一步分为H1N1、H3N2、H5N1、H7N9等亚型(其中的H和N分别代表流感病毒两种表面糖蛋白)，其中，甲3型流感病毒就是通常所说的H3N2。甲型流感病毒的亚型则被人们称为“禽流感”，禽流感是由禽流感病毒引起的一种急性传染病，病毒基因变异后能够感染人类，感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡，病死率很高。此病可通过消化道、呼吸道、皮肤损伤和眼结膜等多种途径传播，人员和车辆往来是传播本病的重要因素。

尽管经过多年的研究国际上已研制出一些药物用于防治流感，如金刚烷胺、金刚乙胺、三氦唑核苷等；但是，这些合成药物均有不同程度的副作用，而不尽如人意。因而，寻找高效、无毒副作用的抗流感病毒药物已得到世界各国的重视。

发明内容

本申请的目的在于提供一种抗甲3型流感病毒的组合物及其制备方法，旨在一定程度上解决现有抗甲3型流感病毒的药物副作用大，效果不佳的问题。

为实现上述申请目的，本申请采用的技术方案如下：

第一方面，本申请提供一种抗甲3型流感病毒的组合物，所述抗甲3型流感病毒的组合物包括原料组分：百蕊草素I。

进一步地，所述抗甲3型流感病毒的组合物中，所述百蕊草素I的剂量为0.3mg/kg/天～1mg/kg/天，其中，kg指使用对象的体重。

进一步地，所述抗甲3型流感病毒的组合物还包括药用辅料，所述药用辅料包括：EDTA-2Na、枸橼酸、蔗糖、香精、苯甲酸钠、乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅、硬脂酸镁、胃溶型薄膜包衣粉中的至少一种。

进一步地，所述抗甲3型流感病毒的组合物的剂型包括：注射剂、口服液、胶囊剂、片剂、颗粒剂中的至少一种。

进一步地，当所述抗甲3型流感病毒的组合物为注射剂时，所述百蕊草素I的浓度为0.9mg/mL～1.1mg/mL，所述药用辅料包括：EDTA-2Na和注射用水。

进一步地，当所述抗甲3型流感病毒的组合物为口服液时，所述百蕊草素I的浓度为0.8mg/mL～1.2mg/mL，所述药用辅料包括：枸橼酸、蔗糖、香精、苯甲酸钠中的至少一种。

进一步地，当所述抗甲3型流感病毒的组合物为胶囊剂、颗粒剂或片剂时，所述百蕊草素I的质量百分含量为3％～6％，所述药用辅料包括：乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅、硬脂酸镁、胃溶型薄膜包衣粉中的至少一种。

第二方面，本申请提供一种抗甲3型流感病毒的组合物的制备方法，包括以下步骤：

获取百蕊草，对所述百蕊草进行醇提后，分离提取液，得到百蕊草素I；

将所述百蕊草素I与药用辅料混合制剂，得到抗甲3型流感病毒的组合物。

进一步地，对所述百蕊草进行醇提的步骤包括：采用体积分数为60％～80％的乙醇对百蕊草加热回流提取2～4次，每次提取时间为2～4小时，合并得到提取液。

进一步地，所述分离提取液的步骤包括：

对所述提取液进行过滤处理后，采用大孔树脂层析柱对所述提取液进行洗脱分离，收集百蕊草素I的洗脱液；

在硫酸浓度为5％的硫酸-稀醇溶液的沸水浴中，对所述洗脱液水解2～4小时，得到水解液；

采用乙酸乙酯对所述水解液萃取4～8次，并洗涤至中性后，干燥得到百蕊草素I。

进一步地，将所述百蕊草素I与药用辅料混合制剂的步骤包括：将百蕊草素I与药用辅料分别过筛后，进行湿法制粒，得到所述抗甲3型流感病毒的组合物。

进一步地，所述药用辅料包括：乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅、硬脂酸镁、胃溶型薄膜包衣粉中的至少一种。

本申请第一方面提供的抗甲3型流感病毒的组合物，包括原料组分：百蕊草素I，本申请实施例通过百蕊草素I对病毒致细胞病变作用的影响试验，证明百蕊草素I对流感病毒甲3型(A3)显示出抗病毒活性。

本申请第二方面提供的抗甲3型流感病毒的组合物的制备方法，工艺简单，条件温和，适用于工业化大规模生产和应用，且制备的抗甲3型流感病毒的组合物存储稳定性好，抗甲3型流感病毒的组合物在温度40℃±2℃、湿度RH75％±5％的条件下，放置1～6月后，各项检测指标仍符合要求，无明显变化。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本申请实施例3提供的Vero-E6细胞对照图；

图2是本申请实施例3提供的使用百蕊草素I后的细胞图感染细胞后的图；

图3是本申请实施例3提供的使用百蕊草素I后的细胞图。

具体实施方式

为了使本申请要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请，并不用于限定本申请。

本发明中，术语“和/或”，描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，A和/或B，可以表示：单独存在A，同时存在A和B，单独存在B的情况。其中A，B可以是单数或者复数。字符“/”一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。

本发明中，“至少一个”是指一个或者多个，“多个”是指两个或两个以上。“以下至少一项(个)”或其类似表达，是指的这些项中的任意组合，包括单项(个)或复数项(个)的任意组合。例如，“a，b或c中的至少一项(个)”，或，“a，b和c中的至少一项(个)”，均可以表示：a，b，c，a-b(即a和b)，a-c，b-c，或a-b-c，其中a，b，c分别可以是单个，也可以是多个。

应理解，在本发明的各种实施例中，上述各过程的序号的大小并不意味着执行顺序的先后，部分或全部步骤可以并行执行或先后执行，各过程的执行顺序应以其功能和内在逻辑确定，而不应对本发明实施例的实施过程构成任何限定。

在本发明实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本发明。在本发明实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。

本发明实施例说明书中所提到的相关成分的重量不仅仅可以指代各组分的具体含量，也可以表示各组分间重量的比例关系，因此，只要是按照本发明实施例说明书相关组分的含量按比例放大或缩小均在本发明实施例说明书公开的范围之内。具体地，本发明实施例说明书中的质量可以是μg、mg、g、kg等化工领域公知的质量单位。

术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，用来将目的如物质彼此区分开，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。例如，在不脱离本发明实施例范围的情况下，第一XX也可以被称为第二XX，类似地，第二XX也可以被称为第一XX。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。

本申请实施例第一方面提供一种抗甲3型流感病毒的组合物，抗甲3型流感病毒的组合物包括原料组分：百蕊草素I。

本申请第一方面提供的抗甲3型流感病毒的组合物，包括原料组分：百蕊草素I，本申请实施例通过百蕊草素I对病毒致细胞病变作用的影响试验，证明百蕊草素I对流感病毒甲3型(A3)显示出抗病毒活性。

在一些实施例中，抗甲3型流感病毒的组合物中，百蕊草素I的剂量为0.3mg/kg/天～1mg/kg/天，其中，kg指使用对象的体重。本申请实施例抗甲3型流感病毒的组合物中百蕊草素I的剂量为0.3mg/kg/天～1mg/kg/天时，即可对抗甲3型流感病毒达到较好的疗效，且该剂量范围安全无毒副作用。在一些具体实施例中，抗甲3型流感病毒的组合物中，百蕊草素I的剂量为0.3mg/kg/天、0.4mg/kg/天、0.5mg/kg/天、0.6mg/kg/天、0.7mg/kg/天、0.8mg/kg/天、0.9mg/kg/天或者1.0mg/kg/天，其中，kg指使用对象的体重。

在一些实施例中，抗甲3型流感病毒的组合物还包括药用辅料，药用辅料包括：EDTA-2Na、枸橼酸、蔗糖、香精、苯甲酸钠、乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅、硬脂酸镁、胃溶型薄膜包衣粉中的至少一种。这些药用辅料可用于制备不同药物剂型，提升用户口感，顺应性等，具体辅料的选择可根据药物的剂型、口感等因素对应添加。

在一些实施例中，抗甲3型流感病毒的组合物的剂型包括：注射剂、口服液、胶囊剂、片剂、颗粒剂中的至少一种。本申请实施例抗甲3型流感病毒的组合物，可通过选择不同的药用辅料或者药用载体制备成不同的剂型，应用灵活方便

在一些具体实施例中，当抗甲3型流感病毒的组合物为注射剂时，百蕊草素I的浓度为0.9mg/mL～1.1mg/mL，该浓度的注射剂对抗甲3型流感病毒可实现较好的疗效，且患者顺应性好，可添加的药用辅料包括：EDTA-2Na和注射用水等。在一些具体实施例中，抗甲3型流感病毒的组合物注射剂中，百蕊草素I的浓度为0.9mg/mL、1.0mg/mL、1.1mg/mL等。

在一些具体实施例中，当抗甲3型流感病毒的组合物为口服液时，百蕊草素I的浓度为0.8mg/mL～1.2mg/mL，该浓度的口服液对抗甲3型流感病毒可实现较好的疗效，且患者顺应性好，可添加的药用辅料包括：枸橼酸、蔗糖、香精、苯甲酸钠中的至少一种。在一些具体实施例中，抗甲3型流感病毒的组合物口服制剂中，百蕊草素I的浓度为0.8mg/mL、0.9mg/mL、1.0mg/mL、1.1mg/mL、1.2mg/mL等。

在一些具体实施例中，当抗甲3型流感病毒的组合物为胶囊剂、颗粒剂或片剂时，百蕊草素I的质量百分含量为3％～6％，该质量百分含量的胶囊剂、颗粒剂或片剂对抗甲3型流感病毒可实现较好的疗效，且患者顺应性好，可添加的药用辅料包括：乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅、硬脂酸镁、胃溶型薄膜包衣粉中的至少一种，用量用法可1日1～3次。在一些具体实施例中，抗甲3型流感病毒的组合物胶囊剂、颗粒剂或片剂中，百蕊草素I的质量百分含量为3％、4％、5％或者6％。

本申请实施例抗甲3型流感病毒的组合物可通过以下实施例方法制备。

本申请实施例第二方面提供一种抗甲3型流感病毒的组合物的制备方法，包括以下步骤：

S10.获取百蕊草，对百蕊草进行醇提后，分离提取液，得到百蕊草素I；

S20.将百蕊草素I与药用辅料混合制剂，得到抗甲3型流感病毒的组合物。

本申请第二方面提供的抗甲3型流感病毒的组合物的制备方法，工艺简单，条件温和，适用于工业化大规模生产和应用，且制备的抗甲3型流感病毒的组合物存储稳定性好，抗甲3型流感病毒的组合物在温度40℃±2℃、湿度RH75％±5％的条件下，放置1～6月后，各项检测指标仍符合要求，无明显变化。

在一些实施例中，上述步骤S10中，对百蕊草进行醇提的步骤包括：采用体积分数为60％～80％的乙醇对百蕊草加热回流提取2～4次，每次提取时间为2～4小时，合并得到提取液。在一些具体实施例中，取百蕊草用体积分数为70％的乙醇加热回流提取3小时，提取3次，合并提取液，回收乙醇殆尽，提取液浓缩至适当体积，备用。

在一些实施例中，上述步骤S10中，分离提取液的步骤包括：

S11.对提取液进行过滤处理后，采用大孔树脂层析柱对提取液进行洗脱分离，具体地，先用水进行洗脱至洗脱液接近无色，然后改用体积分数为60％～80％的乙醇进行洗脱，减压回收乙醇洗脱液，即为百蕊草素I的洗脱液；

S12.在硫酸浓度为5％的硫酸-稀醇溶液的沸水浴中，对洗脱液水解2～4小时，得到水解液。具体地，将百蕊草素I的洗脱液浓缩至浸膏状后，加硫酸配成浓度为5％的硫酸-稀醇溶液，在沸水浴中水解2～4小时，得到水解液。

S13.采用乙酸乙酯对水解液萃取4～8次，并洗涤至中性后，用无水硫酸钠干燥，减压回收乙酸乙酯，得到百蕊草素I。

在一些实施例中，上述步骤S20中，将百蕊草素I与药用辅料混合制剂的步骤包括：将百蕊草素I与药用辅料分别过筛后，进行湿法制粒，得到抗甲3型流感病毒的组合物。具体地，将百蕊草素I过80目筛，将羟丙纤维素、乳糖、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅以及硬脂酸镁分别过60或80目筛网，备用。然后，分别称取方量恩格列净、乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等药用辅料，置于湿法制粒机中，混合均匀，以纯化水为润湿剂制粒，过24目筛湿整粒。将湿颗粒置60℃烘箱中烘干，然后过30目筛整粒，干颗粒加入微晶纤维素及胶态二氧化硅混合均匀。然后加入硬脂酸镁混合均匀，采用适当冲模，调节片重硬度压片。称取素片重量的3％的薄膜包衣粉，用纯化水配制成重量百分比为10％包衣液，将制备的素片置包衣机上，调整参数进行包衣，得到抗甲3型流感病毒的组合物的片剂。

为使本申请上述实施细节和操作能清楚地被本领域技术人员理解，以及本申请实施例抗甲3型流感病毒的组合物及其制备方法的进步性能显著的体现，以下通过多个实施例来举例说明上述技术方案。

实施例1：对Vero-E6培养细胞的体外抗病毒毒性试验

(1)采用吐温-80助溶百蕊草素I后，再加水和培养基配制到所需浓度。

(2)按常规实验操作，将瓶中非洲绿猴肾细胞(Vero-E6)用胰酶消化下来，接种于48孔细胞培养板中，置37℃的5％CO₂培养箱中培养1天，长成单层细胞后进行试验。具体操作为：将培养板中的培养液倾去，加入细胞维持液100L/孔，第一行1-6孔百蕊草素I药样并混匀，吸取100L/孔移到下一行6孔中并混匀，如此稀释共7个浓度；稀释方法相同；第8行不加药液作正常细胞对照，全部板孔补加维持液100L/孔。将培养板置于37℃的5％CO₂培养箱中培养3天，每日用倒置显微镜观察药液对细胞的影响。

(3)毒性实验结果判断标准：

以数字表示药物对细胞的毒性程度分级，如下：

“－”：表示细胞生长基本正常，未出现中毒现象；

“1”：表示中毒细胞发生率在25％以下；

“2”：表示中毒细胞发生率在25％～50％之间；

“3”：表示中毒细胞发生率在50％～75％之间；

“4”：表示中毒细胞已在75％以上。

若毒性为“1”及其以下“－”，则视为阴性，可认为此浓度药样对细胞无中毒现象，其余的“2”及其以上各级，均视为阳性，即所试药样在此浓度对细胞有中毒作用。

利用Reed-Muench法计算50％毒性浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0)。

(4)试验结果：百蕊草素I的50％毒性浓度TC50为28.05μg/mL，最大无毒浓度TC0为39.06μg/mL，若细胞中百蕊草素I的浓度超过39.06μg/mL，则100％细胞中毒。

本实施例通过上述毒性试验，确定了百蕊草素I的有效浓度，该有效浓度不会对细胞产生较大毒副作用，为下一步试验做准备。

实施例2：流感病毒甲3型(A3)病毒滴度(TCID50)的测定

(1)试验方法：按常规实验操作，将瓶中Vero-E6细胞消化下来，接种于96孔细胞培养板中，置37℃的5％CO₂培养箱中培养2天，长成单层细胞后，进行病毒毒力滴定试验，测定出流感病毒甲3型(A3)病毒的滴度(TCID50，即组织细胞培养半数感染量)。

具体操作为：将流感病毒甲3型(A3)以细胞维持液作10倍连续稀释7个浓度，倒去细胞板中培养液，加入维持液100μL/孔，再将每稀释度病毒液加入板中4孔，每孔100μL，留1行不加病毒液改加维持液作为正常细胞对照。置37℃的5％CO₂培养箱中培养，次日开始观察细胞病变(CPE)，连续观察3天，以最后1天的CPE为准，以Reed-Muench法计算流感病毒甲3型(A3)的TCID50。

(2)试验结果：流感病毒甲3型(A3)的TCID50为-4，即表示中毒细胞已在75％以上。

本实施例上述毒性试验，确定了流感病毒甲3型的毒性，即确定下一步甲3型(A3)病毒液浓度，保证下一步对细胞作用是百蕊草素I产生的，而不是因甲3型(A3)病毒液浓度过高产生的。

实施例3：百蕊草素I对病毒致细胞病变作用的影响

(1)试验方法：取已长成单层细胞的培养板，倒掉培养液，接种100TCID50的流感病毒甲3型(A3)病毒液100μl/孔于培养板，留第8行不接种病毒作正常细胞对照。置37℃的5％CO₂培养箱中吸附2小时，倒掉病毒液，用不含小牛血清的MEM维持液洗培养板1次后，加入从最大无毒浓度TC0起倍比稀释6个浓度的药液(1～6行)200μL/孔，各浓度加4孔。第7行不加药液作病毒对照，第8行为未感染未加药的正常细胞对照。置37℃的5％CO₂培养箱中培养3天，每日在倒置显微镜下镜检CPE进展。

(2)细胞病变程度的判断标准如下：

“－”：细胞生长正常，无病变出现；

“1”：细胞病变约占整个单层细胞的<25％；

“2”：细胞病变约占整个单层细胞的25％～50％；

“3”：细胞病变约占整个单层细胞的50％～75％；

“4”：细胞病变约占整个单层细胞的75％～100％。

根据以上细胞病变五级标准判断，利用Reed-Muench法计算50％有效浓度(EC50)，并求出治疗指数(TI＝TC50/EC50)，药物的ED50越小，LD50越大，TI值越高，表明药效作用越强，药物越安全。

(3)试验结果：通过三次实验证明，百蕊草素I对所试的流感病毒甲3型(A3)显示出抗病毒活性，如附图1～3所示，其中附图1为Vero-E6细胞对照图，附图2为病毒感染细胞后的图，附图3为使用百蕊草素I后的细胞图，从附图可见，使用百蕊草素I后，细胞表面出更好的活力，说明百蕊草素I对所试的流感病毒甲3型(A3)显示出抗病毒活性。

实施例4

一种抗甲3型流感病毒的组合物片剂，其制备包括步骤：

1.取百蕊草用体积分数为70％的乙醇加热回流提取3小时，提取3次，合并提取液，回收乙醇殆尽，提取液浓缩至适当体积，备用。

2.对提取液进行过滤处理后，采用大孔树脂层析柱对提取液进行洗脱分离，具体地，先用水进行洗脱至洗脱液接近无色，然后改用体积分数为60％～80％的乙醇进行洗脱，减压回收乙醇洗脱液。然后，将百蕊草素I的洗脱液浓缩至浸膏状后，加硫酸配成浓度为5％的硫酸-稀醇溶液，在沸水浴中水解2～4小时，得到水解液。采用乙酸乙酯对水解液萃取4～8次，并洗涤至中性后，用无水硫酸钠干燥，减压回收乙酸乙酯，得到百蕊草素I。

3.将百蕊草素I过80目筛，将羟丙纤维素、乳糖、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅以及硬脂酸镁分别过60或80目筛网，备用。然后，分别称取方量恩格列净、乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等药用辅料，置于湿法制粒机中，混合均匀，以纯化水为润湿剂制粒，过24目筛湿整粒。将湿颗粒置60℃烘箱中烘干，然后过30目筛整粒，干颗粒加入微晶纤维素及胶态二氧化硅混合均匀。然后加入硬脂酸镁混合均匀，采用适当冲模，调节片重硬度压片。称取素片重量的3％的薄膜包衣粉，用纯化水配制成重量百分比为10％包衣液，将制备的素片置包衣机上，调整参数进行包衣，得到抗甲3型流感病毒的组合物的片剂。

针对抗甲3型流感病毒的组合物的片剂的SD大鼠灌胃给药毒性试验：

采用SD大鼠，随机分为4组，分别为溶媒对照组，百蕊草素I低、中和高剂量组；各剂量组动物每天灌胃给药1次，PDN21开始给药，共4周，溶媒对照组给予等量的去离子水；试验期间每日观察1次动物的一般状况；给药第1周隔天测定1次，之后每周测定2次体重；每周测定1次摄食量；定期进行生长发育指标、自发活动、平衡协调能力和学习记忆能力检查；采集尿液进行检测，解剖时采集血液进行血液学、凝血、血液生化学、激素和免疫等指标检测，测量顶臀长、胫骨长度和密度，取材和称量脏器，并进行病理学检查。

结果显示，各剂量组动物均未发现与供试品有关的明显毒性体征表现，生长发育指标(GH、IGF-1和IGFBP-3等生长相关激素)、摄食量、行为学指标(平衡协调能力、自发活动次数和学***和动情周期)、眼科指标、凝血指标、免疫指标(IgM和IgG)、尿液指标以及各主要脏器的镜下组织结构，均未见与供试品有关的明显改变。说明本申请抗甲3型流感病毒的组合物的片剂对流感病毒甲3型(A3)显示出抗病毒活性。

以上所述仅为本申请的较佳实施例而已，并不用以限制本申请，凡在本申请的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种抗甲3型流感病毒的组合物，其特征在于，所述抗甲3型流感病毒的组合物包括原料组分：百蕊草素I。

2.如权利要求1所述的抗甲3型流感病毒的组合物，其特征在于，所述抗甲3型流感病毒的组合物中，所述百蕊草素I的剂量为0.3mg/kg/天～1mg/kg/天，其中，kg指使用对象的体重。

3.如权利要求1或2所述的抗甲3型流感病毒的组合物，其特征在于，所述抗甲3型流感病毒的组合物还包括药用辅料，所述药用辅料包括：EDTA-2Na、枸橼酸、蔗糖、香精、苯甲酸钠、乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅、硬脂酸镁、胃溶型薄膜包衣粉中的至少一种。

4.如权利要求3所述的抗甲3型流感病毒的组合物，其特征在于，所述抗甲3型流感病毒的组合物的剂型包括：注射剂、口服液、胶囊剂、片剂、颗粒剂中的至少一种。

5.如权利要求4所述的抗甲3型流感病毒的组合物，其特征在于，当所述抗甲3型流感病毒的组合物为注射剂时，所述百蕊草素I的浓度为0.9mg/mL～1.1mg/mL，所述药用辅料包括：EDTA-2Na和注射用水；

当所述抗甲3型流感病毒的组合物为口服液时，所述百蕊草素I的浓度为0.8mg/mL～1.2mg/mL，所述药用辅料包括：枸橼酸、蔗糖、香精、苯甲酸钠中的至少一种；

当所述抗甲3型流感病毒的组合物为胶囊剂、颗粒剂或片剂时，所述百蕊草素I的质量百分含量为3％～6％，所述药用辅料包括：乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅、硬脂酸镁、胃溶型薄膜包衣粉中的至少一种。

6.一种抗甲3型流感病毒的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

获取百蕊草，对所述百蕊草进行醇提后，分离提取液，得到百蕊草素I；

将所述百蕊草素I与药用辅料混合制剂，得到抗甲3型流感病毒的组合物。

7.如权利要求6所述的抗甲3型流感病毒的组合物的制备方法，其特征在于，对所述百蕊草进行醇提的步骤包括：采用体积分数为60％～80％的乙醇对百蕊草加热回流提取2～4次，每次提取时间为2～4小时，合并得到提取液。

8.如权利要求7所述的抗甲3型流感病毒的组合物的制备方法，其特征在于，所述分离提取液的步骤包括：

对所述提取液进行过滤处理后，采用大孔树脂层析柱对所述提取液进行洗脱分离，收集百蕊草素I的洗脱液；

在硫酸浓度为5％的硫酸-稀醇溶液的沸水浴中，对所述洗脱液水解2～4小时，得到水解液；

采用乙酸乙酯对所述水解液萃取4～8次，并洗涤至中性后，干燥得到百蕊草素I。

9.如权利要求6～8任一所述的抗甲3型流感病毒的组合物的制备方法，其特征在于，将所述百蕊草素I与药用辅料混合制剂的步骤包括：将百蕊草素I与药用辅料分别过筛后，进行湿法制粒，得到所述抗甲3型流感病毒的组合物。

10.如权利要求9所述的抗甲3型流感病毒的组合物的制备方法，其特征在于，所述药用辅料包括：乳糖、微晶纤维素、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅、硬脂酸镁、胃溶型薄膜包衣粉中的至少一种。

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