CN112773733A

CN112773733A - 一种祛痘组合物及其乳液的制备方法

Info

Publication number: CN112773733A
Application number: CN202110025921.3A
Authority: CN
Inventors: 刘建平; 王莎莎; 杨政
Original assignee: Jiangsu High Wit Biotechnology Co ltd
Current assignee: Jiangsu High Wit Biotechnology Co ltd
Priority date: 2021-01-08
Filing date: 2021-01-08
Publication date: 2021-05-11

Abstract

本发明公开了一种祛痘组合物及其乳液的制备方法，祛痘组合物包括以下质量百分比的组分：烟酰胺2～6％，水飞蓟宾0.1～4%，银离子1～5ppm，蜂王浆1～3%，壬二酸0.5～5％，余量为水。本发明通过将配方活性成分根据痤疮发生机制合理配伍，依据活性成分的特性适宜选择原料的形式、浓度、加入方法、加入顺序。同时对制备工艺进行优化，减少活性成分损失，提高配方稳定性。本发明各成分抗菌活性、抑制脂肪酶活性、抗炎活性非常强，同时对痤疮治疗效果好。在质量可控方面，配方成分精简、含量明确，避免了同类产品中的复配多种中药提取物所易造成的质量不可控。

Description

一种祛痘组合物及其乳液的制备方法

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，尤其涉及一种由水飞蓟宾、壬二酸、烟酰胺、银离子、蜂王浆等构成的祛痘组合物及其O/W型乳液的制备方法。

背景技术

痘痘，又称“青春痘”、“粉刺”、“痤疮”，是一种涉及皮脂腺单位的慢性炎性皮肤疾病。其特征为皮脂分泌异常，毛囊上皮脱屑，细菌增殖，炎症和免疫宿主反应。它通常发生在面部、胸部、上背部和颈部区域。痤疮会严重影响患者的社交和心理生活。

痤疮的发病机理可分为四个阶段：

1、皮脂腺过度分泌皮脂，毛囊口处淤积形成脂栓即开放型粉刺；

2、表皮细胞过度角化导致闭口的的微粉刺及系列粉刺的形成；

3、厌氧菌群在毛囊内增殖、定殖；

4、毛囊皮脂腺结构内炎症。

由于***等因素体内激素分泌失衡导致雄激素睾酮水平过高，在皮脂腺中睾酮经5-α还原酶作用转化为二氢睾酮，二氢睾酮刺激皮脂腺增分泌过多皮脂，过量的皮脂混合物在毛囊口处逐渐淤积成一种固态的、不易清除的脂栓，至此形成开放型粉刺；进一步地由于痤疮丙酸杆菌不仅可以通过分泌脂酶将皮脂分解为游离脂肪酸或者分泌其他可溶性因子来刺激角质形成细胞的角化，还能通过细胞间相互作用直接诱导角质形成细胞的增殖，毛囊的表皮细胞过度角化导致毛囊堵塞，皮脂无法正常排出形成一个小皮脂球即闭口粉刺；皮脂腺分泌的大量皮脂和毛囊堵塞造成的弱酸性的厌氧环境，为包含痤疮丙酸杆菌在内的系列厌氧菌在毛囊内的迅速增殖和定殖提供了有利的媒介；由于厌氧菌的过度增殖引起一些列炎症反应，其一痤疮丙酸杆菌产生脂肪酶，该酶降解甘油三酯以形成游离脂肪酸，游离脂肪酸作用于毛囊上皮，产生出的各种酶将毛囊壁破坏，引起毛囊周围***的炎症，其二痤疮丙酸杆菌属于革兰氏阳性菌其细胞壁中的肽聚糖对Toll样受体的激活，触发促炎性细胞因子的释放。

外用药品和化妆品是痤疮治疗的常规手段。目前痤疮治疗外用药品主要有维A酸类、过氧化苯甲酰及抗生素类。由于药品本身的性质通常存在的问题有刺激性强，易引发不良反应，且存在不同程度的致畸与光敏等毒副作用，抗生素类药物长期使用还易产生耐药性的问题。外用药品类可以在短期内针对特定的某一环节、迅速起效，但是药品由于其作用途径单一且强力，长期使用会造成不可逆转的其他皮肤问题诸如干燥、敏感，严重者可致激素依赖性皮炎等长期慢性皮肤疾病。

同时目前市售的各种祛痘化妆品中，存在的问题颇多，一类护肤品存在问题是有效成分种类繁多但是实际添加量聊胜于无，而且不考虑成分之间配伍及成分之间的相互作用，也不考虑该成分是否可以在配方中稳定以活性形式存在、是否可以实际作用于皮肤相关部位。如专利CN111150674A活性成分复配了烟酰胺和水杨酸，烟酰胺的稳定性受到PH的影响在5.5-7的范围内稳定,酸性条件下分解产生烟酸产生刺激，而水杨酸的PKa在3左右且其角质溶解能力与体系PH相关在其本身PKa附近才可较好发挥作用，在制备过程中的酸性条件会导烟酰胺分解，同时制备过程最后通过调节PH达到6左右会降低水杨酸活性；另一类护肤品存在问题是是主要靠高浓度水杨酸、果酸、复配多种中药提取物等达到溶解角质角质和抑菌抗炎的效果，如专利CN111150674A和CN201911369152.8，祛痘效果具有即时性，但长期使用存在诸多问题。首先来讲水杨酸、果酸的PKa在3左右，而健康人的皮肤pH一般是在4.5-6.5之间，长期使用会使角质层变薄皮肤敏感造成更复杂的皮肤问题；再者水杨酸具有致畸性，高浓度长期使用所导致的经皮吸收会导致全身血液累积，另外来讲中药提取物成分复杂易引起皮肤刺激性，同时提取物未经纯化分离有效成分含量低，如专利CN109864917 A含有菊花提取物、金银花提取物、水飞蓟果提取物、蔷薇果油四种成分，专利CN109172399 A添加了水解大豆提取物、川黄柏提取物、地黄提取物、白柳树皮提取物、乳酸杆菌/梨汁发酵产物滤液、印度楝叶提取物、黄芩提取物、鱼腥草提取物、苦参根提取物数十种提取物，专利CN 109453054 A则在配方的组成中包含了中药粉末有明确种类和数量，专利CN 107998000和ACN 108451782 A添加的是壬二酸衍生物，CN 108158912 A添加活性物为水飞蓟精华。中药提取物也存在不同批次、不同厂家之间的不一致性，祛痘效果具有不确定性。

发明内容

本发明针对现有的祛痘产品皮肤刺激性大，所含成分复杂，有效成分纯度低，长期使用不利于皮肤功能正常化同时有可能造成皮肤问题的复杂化，提供一种祛痘组合物及含有该种祛痘组合物乳液的制备方法，从痤疮的发生机制出发以恢复皮肤的正常生理功能为目的，成分明确，含量适宜，刺激性低。

为解决上述技术问题，本发明提供一种祛痘组合物，包括以下质量百分比的组分：

余量为水。

优选地，包括以下质量百分比的组分：

余量为水。

优选地，还包括以下质量百分比的组分：

优选地，所述增稠剂包括黄原胶、卡波姆980、卡波姆971、透明质酸钠、羟乙基纤维素中的一种或多种。

优选地，所述祛痘组合物中还含有pH调节剂，所述pH调节剂的添加量为使祛痘组合物的pH为5～7。

优选地，所述润肤剂包括以下组分且各组分在祛痘组合物中的质量百分比为：2～6％的荷荷巴油、1～3％的肉豆蔻酸异丙酯、0.5～3％的鲸蜡醇、1～5％的聚二甲基硅氧烷。

优选地，所述乳化剂包括以下组分且各组分在祛痘组合物中的质量百分比为：2～4％的聚甘油-6硬脂酸酯、聚甘油-6癸酸酯，0.2～0.5％的单硬脂酸甘油酯。

优选地，所述保湿剂为丁二醇和尿囊素，所述pH调节剂为三乙醇胺。

本发明还提供一种含有上述的祛痘组合物的乳液的制备方法，包括：

将水、保湿剂、增稠剂加入水相锅中，搅拌并升温至70～80℃，保温搅拌使各组分完全混合均匀形成水相；

冷锅将固态油脂(鲸蜡醇)及乳化剂(聚甘油-6硬脂酸酯、聚甘油-6癸酸酯、单硬脂酸甘油酯)加入，搅拌条件下加入水乳化剂飞蓟宾，混合后使水飞蓟宾均匀的分散在固态油脂中间，搅拌条件下加入剩余液态油脂升温至70～80℃，至完全溶解，均质后形成油相；

将油相和水相同时抽入乳化罐中，均质，然后在保持混合物的温度为70～80℃下搅拌30min；接着使混合物降温；

当混合物的温度降至40～50℃(优选为45℃)时，向混合物中加入烟酰胺、壬二酸、蜂王浆、银离子；

根据混合物的pH，通过pH调节剂调节混合物的pH在5.5～6.9(pH优选为6.2)的范围内。

优选地，均质转速为12000～20000rpm，均质时间为3～5min。

在抗炎方面：

水飞蓟宾对皮肤细胞有类维A酸样的作用，被称为“植物视黄酸”，具有极佳的抗炎效果，没有维A酸类的致畸与光敏等毒副作用，且不存在皮肤刺激性与角质剥脱性的问题，但该物质难溶于水及一般有机溶剂，25℃水中的平衡溶解度为1.352mg/L，且皮肤生物利用度低。本发明通过对原料改性、油相基质筛选、乳化剂筛选、工艺的优化，水飞蓟宾在配方中的含量达到1％以上。此外配方中的烟酰胺、壬二酸、可以达到协同抗炎的效果。

在抑制皮脂分泌方面：

壬二酸可竞争性抑制5-α还原酶的作用，抑制过多的雄激素转化为二氢睾酮，最终抑制皮脂腺内游离脂肪酸过多分泌；3％的蜂王浆根据临床数据皮脂分泌率可有效减少393％；2％的烟酰胺据报道也具有抑制皮脂分泌作用。本发明通过对配方三种成分的配伍使用，可有效减少皮脂分泌率。

在抑菌方面：

配方采用银离子作为配方的防腐剂和对痤疮发生过程中的关建菌群的抑制剂，银离子的浓度仅为1-2ppm可产生广谱抗菌效果，且不会产生耐性菌，对皮肤无刺激性，同时银在食品中也可作为添加剂使用安全性高。同时配方中的壬二酸可以抑制细菌的蛋白质合成，直接抑制和杀灭皮肤表面及毛囊内的需氧菌和厌氧菌，最低抑菌浓度为2.5mmol/L。2.5％的蜂王浆在28天的试验周期内可以有效抑制痤疮丙酸杆菌。

在抑制色素沉积方面：

壬二酸可以抑制异常色素细胞内酪氨酸酶活性，抑制色素合成。烟酰胺主要通过抑制黑素小体转移，即黑色素颗粒由基底层表皮细胞上行至角质层的过程,二者协同作用可有效减少痤疮后期的色素沉着和瘢痕形成。

本发明所达到的有益效果：

(1)本发明通过将配方活性成分根据痤疮发生机制合理配伍，在抑制皮脂分泌、抑菌、抗炎、抑制色素沉积方面选择合适的活性成分，依据活性成分的特性选择原料的形式、浓度、加入方法、加入顺序。本发明冷锅将固态油脂鲸蜡醇及乳化剂(2～4％的聚甘油-6硬脂酸酯和聚甘油-6癸酸酯，0.2～0.5％的单硬脂酸甘油酯)加入，搅拌条件下加入水飞蓟宾，混合后使水飞蓟宾均匀的分散在固态油脂中间，搅拌条件下加入剩余液态油脂升温至70～80℃，至完全溶解，均质后形成油相，可减少加热时间以减少水飞蓟宾的活性损失，同时增溶难溶性成分水飞蓟宾，使水飞蓟宾在配方中的含量达到1％以上，提高配方稳定性。

(2)本发明在安全性方面，不同于其他同类专利复配多种中药提取物，本配方成分和含量范围明确，单独成分安全，在红细胞溶血实验中本配方经测试为无眼刺激；在有效性方面，各成分以活性形式、有效含量、稳定存在于配方，小鼠巨噬细胞为模型的抗炎效果评价的细胞实验与对照组相比具有显著性差异。本发明各成分抗菌活性、抑制脂肪酶活性、抗炎活性非常强，同时对痤疮治疗效果好。在质量可控方面，配方成分精简、含量明确，避免了同类产品中的复配多种中药提取物所易造成的质量不可控。

附图说明

图1是祛痘组合物的RAW264.7的MTT实验结果；

图2是祛痘组合物对脂多糖LPS诱导RAW264.7小鼠巨噬细胞模型的炎症因子TNF-α抑制结果。

具体实施方式

下面结合附图对本发明作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。

以下实施例中使用的各种试剂和原料均为市售产品。所使用仪器均为本领域常规可购买的仪器，在此不予赘述。

以下实施例中的水为纯化水。实施例中的聚甘油-6硬脂酸酯、聚甘油-6癸酸酯、单硬脂酸甘油酯甘油酯均是乳化剂，实施例中的荷荷巴油、二甲基硅油、鲸蜡醇、均为油相组分，可以直接从市场上采购。

实施例1

本实施例提供一种由水飞蓟宾、壬二酸、烟酰胺、银离子、蜂王浆等构成的祛痘组合物的O/W型乳液。

具体实施步骤如下，各组分配比见表1。

步骤一：将水、保湿剂、增稠剂加入水相锅中，搅拌并升温至70℃，保温搅拌30min，各组分完全混合均匀形成水相；

步骤二：冷锅将固态油脂及乳化剂鲸蜡醇、聚甘油-6硬脂酸酯、聚甘油-6癸酸酯、单硬脂酸甘油酯加入搅拌下加入水飞蓟宾，混合10分钟后使水飞蓟宾均匀的分散在固态油脂中间搅拌下加入剩余液态油脂升温至70度，至完全溶解以12000rpm均质5min；

步骤三：将油相和水相同时抽入乳化罐中，以12000rpm均质5min，然后在保持混合物的温度为70℃下搅拌30min；接着使混合物降温。

步骤四：当混合物的温度降至45℃时，向混合物中加入由烟酰胺、壬二酸、蜂王浆、银离子。

步骤五：根据混合物的pH，通过pH调节剂调节混合物的pH为6.2。

上述实施例1所用的原料如表1所示。

表1实施例1所用原料

对比例1

配方组分中不含活性物(水飞蓟宾、壬二酸、烟酰胺、银离子、蜂王浆)，其余组分同实施例1，按照表2的各组分配比称取原料。

本实施例的制备方法仅步骤四与实施例1不同，无步骤四。

表2对比例1所用原料

实施例2、祛痘组合物及其乳液的功效评价实验

1.实施例1原液制备

以水飞蓟宾、烟酰胺、壬二酸、蜂王浆控油因子、银离子比例为1：1：1：1：0.1以DMSO为溶剂配制41mg/ml的实施例1原液，去离子水稀释104倍后得到1号4.1μg/ml实施例1原液，去离子水稀释105倍后得到2号0.41μg/ml实施例1原液,稀释106倍后得到3号0.041μg/ml实施例1原液,稀释107倍后得到4号0.0041μg/ml实施例1原液。

2.实施例1乳液制备

按添加量为水飞蓟宾3％、烟酰胺3％、壬二酸3％、蜂王浆控油因子3％、银离子3ppm制备乳液。

3.脂多糖LPS诱导RAW264.7小鼠巨噬细胞模型抗炎测试

1)细胞培养

将复苏的RAW264.7细胞静置于37℃、5％CO₂培养箱中，观察细胞生长状态，细胞覆盖约80％～90％的培养皿底部面积时，用10％FBS的DMEM将细胞悬液按1×10⁶～3×10⁶的总细胞数进行分皿培养。

2)细胞活力检测

用细胞传代的方法收集处于生长对数期的RAW264.7细胞，得到RAW264.7单细胞悬液，将细胞密度调整为5×10⁴个/mL，取标准96孔板，每孔种100μL细胞悬液，置于5％CO₂、37℃培养箱中恒温培养24h。弃去96孔板中旧的培养液，每孔加入100μL含有不同浓度实施例1祛痘组合物的完全培养液(样品组)，空白对照组加入100μL完全培养液，每组设3个复孔作为平行组。置于5％CO₂、37℃培养箱中恒温培养24h后弃去96孔板内旧的培养液，加入200μLPBS清洗2次，每孔加入100μL含有5g/L的MTT溶液的完全培养基(现配现用)，放入培养箱中孵育4h后，吸尽培养孔中液体，每孔加入200μL DMSO。将培养板放在振荡器上振荡10min后，用酶标仪测量其在490nm处吸收值，以阴性对照为基准，计算细胞存活率。当细胞存活率>85％时，可认为该浓度下受试物对细胞增殖无影响，即细胞安全浓度。每组实验独立重复3次，数据以x±s表示，其中*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

3)ELISA试剂盒检测TNF-a含量

RAW264.7细胞浓度为1×10⁵个/mL接种于6孔板内(2mL/孔)，置于37℃、5％CO₂培养箱内孵育24h后弃掉旧培养基，用PBS清洗2遍。加入配置好的不同浓度实施例1祛痘组合物处理细胞1h后，加入含有5mg/L LPS的完全培养基继续孵育18～24h，并设置相应的空白组(即未添加LPS及受试物)，收集上清液，于1 000r/min离心10min后取200μL上清液，按照ELISA试剂盒说明书进行TNF-a含量检测。每组实验独立重复3次，数据表示同上。

实验结果：

利用MTT法检测分析祛痘组合物对RAW264.7细胞的抑制作用。结果显示实施例1祛痘组合物在0.0041ug·mL^-1～4.1ug·mL^-1的范围内为安全质量浓度，见图1。

本研究检测了实施例1祛痘组合物对LPS诱导RAW264.7细胞产生TNF-a的抑制作用，结果见图2。空白组不诱导炎症是正常状态下的炎症因子分泌量，模型组诱导炎症不给药，与空白组相比，炎症因子分泌量有极显著性差异，证明炎症诱导成功；给药组和模型组对照，减少了炎症因子分泌量，证明祛痘组合物可减少炎症状态下炎症因子的分泌量。当祛痘组合物添加量在0.0041ug·mL^-1～4.1ug·mL^-1范围内时与对比例1的模型组相比，能显著降低炎症因子TNF-a的含量。

4.红细胞溶血测试

红细胞溶血测试是利用化学物质对血红蛋白及细胞膜的损伤程度原理来评估受试物的眼刺激作用。红细胞溶血实验作为动物替代实验评估化妆品成品及原料对眼刺激作用，具有较强的相关性和代表性。

本文通过红细胞溶血测试评估该祛痘组合物的刺激性。

实施例1的祛痘组合物乳液用PBS配制成浓度分别为200mg·L^-1、175mg·L^-1、150mg·L^-1、125mg·L^-1、100mg·L^-1、75mg·L^-1、50mg·L^-1、25mg·L^-1(w/v)的溶液，取不同浓度的实施例1的祛痘组合物乳液溶液、PBS、0.01％十二烷基硫酸钠、蒸馏水各1.5mL于试管内，分别各加入0.5mL绵羊红细胞悬液混匀。在32℃水浴中振荡孵育30min，然后以10000r/min的速度离心2min，取上清液，分别读取540nm、560nm、575nm波长下的吸光度(A)。以560nm的Abs计算溶血率(HR)：HR＝A受试管/A全溶管×100％，并计算血红蛋白变性指数(DI)＝R样品/RSDS×100％，R样品、RSDS分别为样品和SDS上清液A575/A540值。主要观察指标：50％红细胞发生溶血时的样品浓度(HD50)、蛋白质变性指数(DI)、HD50与变性变性指数DI的比值(IP＝HD50/DI)。

实验结果：

在最高浓度(200mg·L^-1)下实施例1祛痘组合物乳液未引起溶血，即HD50>200,DI＝0.23,IP>10,判断为无刺激性。

5.人体功效评价

选择10名志愿者，在测试前三天受试者面部不能使用任何产品(化妆品或外用药品)，将产品分发给受试者，受试者按产品说明书自行使用，早晚各一次，使用周期为4周。分别在D0、D7、D14、D21、D28回访。

表3受试者反馈结果

	痘痘红肿减轻	痘痘疼痛减轻	痘痘数量减少	痘印减轻
					受试者反馈	8	7	8	7

反馈结果表明，本发明对痤疮治疗效果显著。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变形，这些改进和变形也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种祛痘组合物，其特征在于，包括以下质量百分比的组分：

余量为水。

2.根据权利要求1所述的一种祛痘组合物，其特征在于，包括以下质量百分比的组分：

余量为水。

3.根据权利要求1所述的一种祛痘组合物，其特征在于，还包括以下质量百分比的组分：

4.根据权利要求3所述的一种祛痘组合物，其特征在于，所述增稠剂包括黄原胶、卡波姆980、卡波姆971、透明质酸钠、羟乙基纤维素中的一种或多种。

5.根据权利要求3所述的一种祛痘组合物，其特征在于，所述祛痘组合物中还含有pH调节剂，所述pH调节剂的添加量为使祛痘组合物的pH为5～7。

6.根据权利要求3所述的一种祛痘组合物，其特征在于，所述润肤剂包括以下组分且各组分在祛痘组合物中的质量百分比为：2～6％的荷荷巴油、1～3％的肉豆蔻酸异丙酯、0.5～3％的鲸蜡醇、1～5％的聚二甲基硅氧烷。

7.根据权利要求3所述的一种祛痘组合物，其特征在于，所述乳化剂包括以下组分且各组分在祛痘组合物中的质量百分比为：2～4％的聚甘油-6硬脂酸酯和聚甘油-6癸酸酯，0.2～0.5％的单硬脂酸甘油酯。

8.根据权利要求3所述的一种祛痘组合物，其特征在于，所述保湿剂为丁二醇和尿囊素，所述pH调节剂为三乙醇胺。

9.一种含有如权利要求3所述的祛痘组合物的乳液的制备方法，其特征在于，包括：

冷锅将固态油脂鲸蜡醇及乳化剂聚甘油-6硬脂酸酯、聚甘油-6癸酸酯、单硬脂酸甘油酯加入，搅拌条件下加入水飞蓟宾，混合后使水飞蓟宾均匀的分散在固态油脂中间，搅拌条件下加入剩余液态油脂升温至70～80℃，至完全溶解，均质后形成油相；

当混合物的温度降至40～50℃时，向混合物中加入烟酰胺、壬二酸、蜂王浆、银离子；

根据混合物的pH，通过pH调节剂调节混合物的pH在5.5～6.9的范围内。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，均质转速为12000～20000rpm，均质时间为3～5min。