CN112544812A

CN112544812A - 一种产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药添加剂及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN112544812A
Application number: CN202011319070.5A
Authority: CN
Inventors: 刘幸; 张文晔; 常青山; 赵文睿; 邓国红; 张荣斌; 郭俊
Original assignee: Shaanxi Shiyang Agriculture Co ltd
Current assignee: Shaanxi Shiyang Agriculture Co ltd
Priority date: 2020-11-23
Filing date: 2020-11-23
Publication date: 2021-03-26

Abstract

本发明属于饲料添加剂技术领域，公开了一种产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药饲料添加剂，为产蛋后期蛋鸡提供一种能有效增加胃肠道对营养物质的消化利用率，提高机体的抗氧化水平，并能延缓蛋鸡生殖***退化，延长产蛋周期，改善鸡蛋品质的混菌发酵型中草药饲料添加剂。在混合发酵中草药过程中，黑曲霉菌与酿酒酵母菌为适应特殊生长环境改变自身的代谢途径，产生新的代谢产物，与中药成分发生协同作用，达到提高药效、改变药性及产生新的治疗效果等作用。另外，发酵过程中还会产生芳香类物质，提高饲料适口性和改善动物的采食状况。本发明还提供一种低成本、操作工艺简单、有效成分含量高、营养物质更丰富、药效较佳的混菌发酵型中草药饲料添加剂的制备方法。

Description

一种产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药添加剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及饲料添加剂技术领域，更具体地，涉及一种产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药添加剂及其制备方法和应用。

背景技术

饲料添加剂是蛋鸡生产中重要的投入品，过去几十年抗生素作为饲料添加剂因其具有促生长和改善饲料转化率的功能，在畜禽养殖生产中得到了广泛使用。随着饲料工业的发展和大众对畜产品安全、环境污染问题的广泛关注，中草药作为抗生素类添加剂的替代物在蛋鸡饲养中的应用越来越多。中草药作为绿色、无公害的纯天然饲料添加剂，不仅药源丰富，在动物体内无毒副作用，几乎无残留，又不产生抗药性，兼有药物性和营养性双重作用。中草药含有多种化学成分，富含蛋白质、氨基酸、维生素、各种微量元素以及大量有机酸类、酶、生物碱、多糖、甙类、鞣质等多种起营养和促生长的活性物质，但由于植物细胞壁的阻碍，其大量有效成分难以释放出来。按照常规的方法提取，很难将中草药中的有效成分充分解离，使得很多有效成分被丢弃，从而造成用药量增加，经济效益降低。根据微生物代谢理论及发酵技术，中草药经发酵药效增强，不仅能产生新的活性成分，疗效明显，且具有无毒、无副作用、无污染、不产生抗药性等特点，应用前景十分广阔。而目前可用于微生物发酵饲料生产的菌种数量多并且趋向菌株的协同发酵，两种或两种以上微生物协同发酵效果要优于单菌发酵。

中国专利(CN201210056181.0)公开了一种蛋鸡饲料中药添加剂，所述饲料中药添加剂包括：益母草、熟地、栀子、补骨脂、陈皮、葛根、枸杞、党参、当归、白术、杜仲、山楂、板蓝根、覆盆子、川芎、白芍、松针、辣椒。该中草药添加剂提高了蛋鸡的生产性能，提高鸡蛋的品质和营养价值，但该添加剂并不能有效改善胃肠道消化吸收功能以及提高机体抗氧化能力。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术存在的上述问题，提供一种产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药饲料添加剂。

本发明的第二个目的是提供上述产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药饲料添加剂的制备方法。

本发明的第三个目的是提供上述产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药饲料添加剂的应用。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

一种产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药饲料添加剂，所述中草药由以下重量份的各物质组成：5～11份葛根、3～9份女贞子、3～9份枸杞、2～8份当归、3～9份熟地黄、2～8份赤芍、5～11份山药、3～9份补骨脂、4～10份乌药、2～8份薄荷、3～9份孜然、4～10份裂壶藻、4～10份杜仲，5～11份红景天、1～7份栀子、3～9份金钱草。

优选地，所述中草药由以下重量份的各物质组成：8份葛根、6份女贞子、6份枸杞、5份当归、6份熟地黄、5份赤芍、8份山药、6份补骨脂、7份乌药、5份薄荷、6份孜然、7份裂壶藻、7份杜仲，8份红景天、4份栀子、6份金钱草。

葛根是豆科植物葛的块根，其味甘平而略带苦涩，具有清热、止渴、生津、透疹、解毒、升阳止泻、醒脾解酒之功效。葛根有效生物活性物质中的葛根异黄酮，对调节母禽的内分泌，提高产蛋率，降低料蛋比具有重要作用。

女贞子系木犀科植物女贞的果实，性平，味甘、苦，能够强阴健腰膝，安五脏养精神，补中壮筋骨，具有清热明目、扶正固本、补益肝肾的功效，一般常用于治疗头晕目眩、耳鸣目暗、腰膝酸痛、内热、须发早白等病症。

枸杞是商品枸杞子、植物宁夏枸杞、中华枸杞等枸杞属物种的统称。宁夏枸杞的干燥成熟果实即枸杞子，性甘，平，能养肝，滋肾，润肺，其有效活性成分枸杞多糖和枸杞色素对提高机体的免疫功能、抗氧化活性以及生殖功能的保护具有重要的影响作用。

当归是伞形科当归属一种多年生草本植物，其干燥贮藏根是我国一味常用中药材，味温，归肝脾经，有补气活血的功效，具有保护肾脏、润燥滑肠、抗炎抗癌、抗衰老、免疫等广泛的药理作用。

熟地黄，又称干地黄，是玄参科植物地黄或怀庆地黄的根茎，经加工蒸晒而成。性甘，微温，能滋阴补血，益精填髓，对免疫、血液、内分泌、中枢神经***、心脑血管及抗肿瘤抗衰老等方面具有一定的药理作用。

赤芍为毛茛科植物芍药或川赤芍的干燥根，性苦，微寒，归肝经，能止痛益气，通顺血脉，清热凉血，活血祛瘀，具有保肝、抗肿瘤、神经保护、心脏保护、抗血栓等显著的药理作用，且其主要化学活性成分中的儿茶素类化合物具有很强的清除体内自由基的生物活性。

山药，薯蓣科薯蓣属植物，其块茎含有丰富的淀粉、皂苷、黏液质、胆碱、糖蛋白和多种氨基酸，入药能补虚赢，强阴益气，健脾胃，具降血脂、降血糖，调节体内酸碱平衡，改善机体消化功能的功效。

补骨脂味苦、辛、温，归肾、脾经，温肾助阳、纳气平喘、温脾止泻，具抗炎、抗菌和免疫调节的活性。

乌药系樟科植物乌药的干燥块根，性辛，温，归肺、脾、肾、膀胱经，是重要的温胃理气止痛药。入药可用于寒凝气滞，胸腹胀痛，气逆喘急，膀胱虚冷，遗尿尿频，疝气疼痛，经寒腹痛。此外，乌药还具改善饲料适口性、调节促进消化机能等功效。

薄荷清新怡神，疏风散热，可治感冒发热喉痛，头痛，目赤痛，肌肉疼痛，皮肤风疹搔痒，麻疹不透等症。而薄荷中含有的薄荷醇具有多种药性，可缓解腹痛、胆囊问题如痉挛，还具有防腐杀菌、利尿、化痰、健胃和助消化等功效。

孜然富含蛋白质、必需脂肪酸、多酚类物质、膳食纤维等多种功能性营养成分，具有理气开胃、祛寒除湿、抗过敏、杀菌抑菌、抗癌、抗血小板聚集和抗糖尿病等保健功效，还可刺激食欲，保护机体抗氧化能力。

裂壶藻是海洋微藻的一种，富含必需氨基酸，维生素，矿物质元素及各种酶类，可以促进健康肠道内有益微生物的生长。

杜仲叶微辛、温，归肝、肾经，主治肝肾不足，腰膝酸软，筋骨痿弱等症。杜仲叶中含有丰富的维生素、胡萝卜素、游离氨基酸和微量元素，具有抗菌、抗病毒、抗真菌、抗肿瘤、抗衰老和免疫刺激等多种药理作用。

红景天系景天科大花红景天的干燥根和根茎，味甘、苦，性平，归肺、心经，主要用于气虚血瘀，胸痹心痛，中风偏瘫，倦怠气喘。红景天提取物或其有效成分具有抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射以及对神经***、心血管***、免疫***的显著作用。

栀子系茜草科植物栀子的干燥成熟果实，其主要成分环烯醚萜苷类有利胆作用；醇提物和藏红花苷、藏红花酸有促进胆汁分泌、促进胰腺分泌、改善肝脏和胃肠功能、增强机体的抗病能力等功效；栀子黄色素具有很强的抗氧化、淬灭自由基及抑癌活性。

金钱草属报春花科的一种植物，味苦，酸，微寒，归肝、肾、膀胱经，具有抗泌尿***结石、改善心血管***、抗炎和利胆等功效。

本发明所述的中草药原材料中葛根、女贞子、枸杞、当归、熟地黄、赤芍为补气补血类药物，具扶正固本、益气固表之功效和***样作用，协同作用可刺激家禽生殖器官的活动，兴奋下丘脑-垂体-性腺轴，增加血液***的分泌，促进卵泡发育与***。山药、乌药、补骨脂、薄荷、孜然为消食导滞、理气开脾类中草药，具刺激食欲，提高代谢率的功能，可增加钙储存和胰腺分泌，调节改善消化机能。裂壶藻、杜仲富含必需氨基酸，维生素和各种矿物质元素，具有抗菌、抗真菌、抗病毒、抗氧化的药理作用。另外，本发明选用的当归、枸杞、孜然、杜仲叶、红景天等可增强机体抗氧化能力，抑制癌细胞生长，延缓机体衰老。

本发明还提供上述中草药饲料添加剂的制备方法，是以酿酒酵母和黑曲霉的混合物作为发酵菌种，以中草药得到的液体作为培养基，进行有氧发酵，发酵结束后，上清液即为饲料添加剂的粗产物。

优选地，所述的中草药饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)菌液的制备：

制备酿酒酵母种子液和黑曲霉种子液；

(2)中草药液体培养基的制备：

将中草药清洗除杂，经烘干、浸泡、灭菌后得到中草药液体培养基。

(3)发酵过程：

向冷却后的中草药液体培养基中同时加入预培养的黑曲霉与酵母菌种子液，发酵30天，结束发酵，经分离、灭菌即为中草药饲料添加剂。

优选地，步骤(3)中，黑曲霉种子液或酵母菌种子液的接种量为1：1.2～1.5。

更优选地，上述制备方法包括以下步骤：

(1)菌液的制备：

将酿酒酵母菌种接种到麦芽汁琼脂培养基斜面上，在28℃恒温培养箱中培养2～4d制成酿酒酵母种子液；将黑曲霉菌种接种到PDA培养基斜面上，在28℃恒温培养箱中培养，再按5％接种量接种到装有PDB培养基的锥形瓶中，在28℃恒温摇床上振荡培养2～4d，制得黑曲霉种子液。

(2)中草药液体培养基的制备：

按比例称取各中草药成分；首先将葛根、红景天、当归、熟地黄、赤芍和乌药除去须根和泥沙等杂质，裂壶藻和杜仲叶、孜然、薄荷洗净，再将各中草药于40℃烘干破碎，过50目筛后制成中药粉末待用，最后往制成的中药粉末中加入中药成分总重量80％的水，搅拌均匀后浸泡0.5～2小时，添加适量葡萄糖以调整PH值至6.0左右，于100℃蒸汽灭菌30min，冷却至30℃后得到中草药液体培养基。

(3)发酵过程：

向冷却后的中草药液体培养基中同时加入预培养的黑曲霉与酵母菌种子液(按照接种量1：1.5)；将发酵罐置于35℃左右的环境中有氧发酵30天，结束发酵。离心，将上清液浓缩后的产物与滤渣干燥，再混合均匀进行蒸汽灭菌，到此混合发酵的中药组合物制成。

本发明还提供上述中草药饲料添加剂的应用。将其作为饲料添加剂添加到蛋鸡饲料中，该添加剂能够提高产蛋率，改善鸡蛋品质，有效减少破软壳蛋率。同时调节胃肠道消化机能，提高机体的抗氧化水平，延缓机体衰老，延长产蛋周期，达到提高蛋鸡养殖业经济效益的目的。此外，混合发酵中草药所得的发酵产物富含各种营养物质，药活性成分种类增加，药效明显提高。

优选地，按照蛋鸡饲料饲喂量的重量比的0.2％～1.0％添加到产蛋后期蛋鸡的日常饲料中，

优选地，从蛋鸡350日龄开始添加上述饲料添加剂。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明提供了一种产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药饲料添加剂，为产蛋后期蛋鸡提供一种能有效增加胃肠道对营养物质的消化利用率，提高机体的抗氧化水平，并能延缓蛋鸡生殖***退化，延长产蛋周期，改善鸡蛋品质的发酵型中草药饲料添加剂。

第一，本发明所选用的草药兼药效和营养双重功能，其提供的丰富营养物质能促进蛋鸡对营养物质的吸收利用，改善肠道健康，提高机体免疫功能，并能清除老龄蛋鸡体内的自由基，改善机体抗氧化状态，延缓生殖***的老化，达到产蛋性能提高，生产周期延长的目的。

第二，本发明能够改善老龄蛋鸡的蛋壳质量，保证鸡蛋内部品质不受外来细菌的感染，并能有效减少鸡蛋在收集、运输、储存等过程的损失，增加养殖效益。本发明选用的中草药能够调节蛋鸡胃肠道酸碱度，增加消化酶的作用活性，并能抑制有害菌繁殖，促进有益菌的生长定植，提高对营养物质尤其是钙磷等矿物质元素的吸收利用，对蛋壳的保护至关重要。另一方面，所选中草药富含维生素和矿物质，能有效增强机体的免疫功能与抗病、抗菌和抗氧化能力，保证蛋鸡子宫健康，促进蛋壳沉积过程。

第三，黑曲酶与酿酒酵母混合发酵中草药组合物，由于霉菌可同将淀粉和纤维素降解为酵母更容易能利用的单糖或多糖物质，因此促进了发酵期酿酒酵母的良好繁殖。在混合发酵中草药过程中，黑曲霉菌与酿酒酵母菌为适应特殊生长环境改变自身的代谢途径，产生新的代谢产物，与中药成分发生协同作用，达到提高药效、改变药性及产生新的治疗效果等作用。另外，发酵过程中还会产生芳香类物质，提高饲料适口性和改善动物的采食状况。

本发明还提供一种低成本、操作工艺简单、有效成分含量高、营养物质更丰富、药效较佳的混菌发酵型中草药饲料添加剂的制备方法。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

所有试验数据采用SPSS 21.0分析软件进行单因素方差分析和Duncan氏法多重比较。

实施例1

中草药饲料添加剂的中草药成分组成：每100份(重量份)的中草药组合物中包括(以下均为重量份)：葛根5份、女贞子8份、枸杞3份、当归6份、熟地黄8份、赤芍6份，山药10份、补骨脂9份、乌药4份、薄荷2份，孜然3份、裂壶藻10份、杜仲8份，红景天5份、栀子5份、金钱草8份。

该中草药饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：

(1)菌液的制备：

将酿酒酵母菌种接种到麦芽汁琼脂培养基斜面上，在28℃恒温培养箱中培养2～4d制成酿酒酵母种子液；将黑曲霉菌种接种到PDA培养基斜面上，在28℃恒温培养箱中培养2d，再按5％接种量接种到装有PDB培养基的锥形瓶中，在28℃恒温摇床上振荡培养2～4d，制得黑曲霉种子液。

(2)中草药液体培养基的制备：

按下列重量称取各中草药成分：葛根5份、女贞子8份、枸杞3份、当归6份、熟地黄8份、赤芍6份，山药10份、补骨脂9份、乌药4份、薄荷2份，孜然3份、裂壶藻10份、杜仲8份，红景天5份、栀子5份、金钱草8份。

首先将葛根、红景天、当归、熟地黄、赤芍和乌药除去须根和泥沙等杂质，裂壶藻和杜仲、孜然、薄荷洗净，再将各中草药于40℃烘干破碎，过50目筛后制成中药粉末待用，最后往制成的中药粉末中加入中药成分总重量80％的水，搅拌均匀后浸泡0.5～2小时，添加适量葡萄糖以调整pH值至6.0左右，于100℃蒸汽灭菌30min，冷却至30℃后得到中草药液体培养基。

(3)发酵过程：

向冷却后的中草药液体培养基中同时加入预培养的黑曲霉或酵母菌种子液(按照接种量1：1.5)；将发酵罐置于35℃左右的环境中有氧发酵30天，结束发酵。离心，将上清液浓缩后的产物与滤渣干燥，再混合均匀进行蒸汽灭菌，到此混合发酵的中草药添加剂制成。

实施例2

中草药饲料添加剂的中草药成分组成：每100份(重量份)的中草药组合物中包括(以下均为重量份)：葛根8份、女贞子6份、枸杞6份、当归5份、熟地黄6份、赤芍5份，山药8份、补骨脂6份、乌药7份、薄荷5份，孜然6份、裂壶藻7份、杜仲7份，红景天8份、栀子4份、金钱草6份。

该中草药饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：

(1)菌液的制备：

(2)中草药液体培养基的制备：

按下列重量称取各中草药成分：葛根8份、女贞子6份、枸杞6份、当归5份、熟地黄6份、赤芍5份，山药8份、补骨脂6份、乌药7份、薄荷5份，孜然6份、裂壶藻7份、杜仲7份，红景天8份、栀子4份、金钱草6份。

(3)发酵过程：

向冷却后的中草药液体培养基中同时加入预培养的黑曲霉或酵母菌种子液(按照接种量1：1.2)；将发酵罐置于35℃左右的环境中有氧发酵30天，结束发酵。离心，将上清液浓缩后的产物与滤渣干燥，再混合均匀进行蒸汽灭菌，到此混合发酵的中草药添加剂制成。

实施例3

中草药饲料添加剂的中草药成分组成：每100份(重量份)的中草药组合物中包括(以下均为重量份)：葛根11份、女贞子5份、枸杞8份、当归3份、熟地黄3份、赤芍3份，山药5份、补骨脂8份、乌药10份、薄荷8份，孜然9份、裂壶藻4份、杜仲6份，红景天11份、栀子2份、金钱草4份。

该中草药饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：

(1)菌液的制备：

(2)中草药液体培养基的制备：

按下列重量称取各中草药成分：葛根11份、女贞子5份、枸杞8份、当归3份、熟地黄3份、赤芍3份，山药5份、补骨脂8份、乌药10份、薄荷8份，孜然9份、裂壶藻4份、杜仲6份，红景天11份、栀子2份、金钱草4份。

(3)发酵过程：

对比例1

本对比例的中草药配方同实施例1，唯一不同的是，发酵方法与实施例1不同。

本对比例的发酵方法包括以下步骤：

(1)菌液的制备：

将酿酒酵母菌种接种到麦芽汁琼脂培养基斜面上，在28℃恒温培养箱中培养2～4d制成酿酒酵母种子液。

(2)中草药液体培养基的制备：

(3)发酵过程：

向冷却后的中草药液体培养基中加入预培养的酵母菌种子液(按照接种量1：1.5)；将发酵罐置于35℃左右的环境中有氧发酵30天，结束发酵。离心，将上清液浓缩后的产物与滤渣干燥，再混合均匀进行蒸汽灭菌，到此混合发酵的中草药添加剂制成。

对比例2

本对比例的发酵方法包括以下步骤：

(1)菌液的制备：

将黑曲霉菌种接种到PDA培养基斜面上，在28℃恒温培养箱中培养2d，再按5％接种量接种到装有PDB培养基的锥形瓶中，在28℃恒温摇床上振荡培养2～4d，制得黑曲霉种子液。

(2)中草药液体培养基的制备：

(3)发酵过程：

向冷却后的中草药液体培养基中加入预培养的黑曲霉种子液(按照接种量1：1.5)；将发酵罐置于35℃左右的环境中有氧发酵30天，结束发酵。离心，将上清液浓缩后的产物与滤渣干燥，再混合均匀进行蒸汽灭菌，到此混合发酵的中草药添加剂制成。

实验例

选取体重相近、产蛋率82％的健康54周龄海兰灰蛋鸡300只，随机分为6组，每组5个重复，每个重复10只。第1组为对照组，饲喂基础日粮(不添加本发明的中草药添加剂)；第2组为试验Ⅰ组，基础日粮中添加0.2％中草药添加剂(实施例1)；第3组为试验Ⅱ组，基础日粮中添加0.5％中草药添加剂(实施例2)；第4组为试验Ⅲ组，基础日粮中添加1.0％中草药添加剂(实施例3)，第五组为对比例1组(基础日粮中添加0.2％中草药添加剂，添加量与实施例1相同)，第六组为对比例2组(基础日粮中添加0.2％中草药添加剂，添加量与实施例1相同)，试验日粮配方见表1。试验期共10周，预试期2周，正试期8周。饲养试验在陕西蒲城某鸡场进行，试验期间同组的鸡均匀分布于鸡舍，自由采食、饮水。

表1试验日粮配方

1、生产性能

记录各组蛋鸡每天产蛋数、喂料量、蛋重、鸡只存栏数、破蛋数，每周称一次剩余料，统计蛋鸡的产蛋率、料蛋比、平均蛋重、破壳蛋率、死亡率等。

结果如表2，与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组的产蛋率显著上升(P＜0.05)，而试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组的破蛋率、料蛋比均显著低于对照组(P＜0.05)；对比例1组和对比例2组的产蛋率、平均蛋重相对于对照组有所提升，但是也低于试验I组；对比例1组和对比例2组的料蛋比和破蛋率有所下降，但是也高于试验I组，说明混菌发酵制得的中草药添加剂相对于单菌发酵制得的中草药添加剂，其饲喂效果更好。

表2混菌发酵型中草药添加剂对蛋鸡生产性能的影响

项目

对照组

试验Ⅰ组

试验Ⅱ组

试验Ⅲ组

对比例1组

对比例2组

产蛋率(％)

81.6c

87.3a

88.5a

87.0a

84.3b

83.8b

平均蛋重(g)

54.80

55.06

55.19

55.01

54.91

54.86

料蛋比

2.42a

1.56b

1.28c

1.33c

2.22ab

2.10ab

破蛋率(％)

0.13a

0.06c

0.07c

0.06c

0.10b

0.11b

注：同行数据肩标无字母或相同小写字母表示差异不显著(P＞0.05)，肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。下表同。

2、蛋壳质量与鸡蛋内部品质

试验第2周、第4周、第6周、第8周分别从各组随机抽取20枚鸡蛋，用游标卡尺量取鸡蛋的长径与短径，计算蛋形指数(蛋形指数＝长径/短径)。采用鸡蛋品质测定仪(日本DET6500)直接读取蛋重、蛋壳厚度，蛋壳强度，蛋白高度，蛋黄颜色及哈氏单位，计算蛋壳比例(蛋壳比例＝蛋壳重/蛋重×100％)，蛋壳致密度(蛋壳致密度＝蛋壳重/蛋的表面积)。用蛋清蛋黄分离器将蛋黄蛋白分离，分别测定各自的质量，计算蛋黄蛋白比(蛋黄蛋白比＝蛋黄质量/蛋白质量)。

由表3知，与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组的蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋壳比例均显著增加(P<0.05)，蛋壳致密度略有增加。相较对照组，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组的哈氏单位、蛋白高度显著增加(P<0.05)，蛋黄颜色略有增加；对比例1组和对比例2组的蛋壳品质和内部品质相对于对照组提升，但是低于试验I组，说明混菌发酵制得的中草药添加剂相对于单菌发酵制得的中草药添加剂，饲喂蛋鸡后蛋鸡的产蛋的整体品质更好。

表3混菌发酵型中草药添加剂对鸡蛋品质的影响

3、血清抗氧化酶活性

试验第2周、第4周、第6周、第8周，每组随机选取5只鸡，空腹翅静脉采血，制备血清，试剂盒法测定血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)的活性及丙二醛(MDA)的浓度。

由表4知，与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组的T-SOD与GSH-PX的活性均显著提高(P<0.05)，而MDA浓度显著下降(P<0.05)；对比例1组和对比例2组的血清抗氧化酶能力相对于对照组显著提升(P<0.05)，同时也显著低于试验I组(P<0.05)，说明混菌发酵制得的中草药添加剂相对于单菌发酵制得的中草药添加剂，其饲喂效果更有利于提高蛋鸡机体抗氧化状态。

表4混菌发酵型中草药添加剂对蛋鸡血清抗氧化能力的影响

项目

对照组

试验Ⅰ组

试验Ⅱ组

试验Ⅲ组

对比例1组

对比例2组

T-AOC(U/ml)

10.39

10.37

10.41

10.43

10.37

10.39

T-SOD(U/ml)

296.3c

334.7a

324.9a

324.3a

312.1b

315.9b

GSH-PX(U/ml)

6725.0c

7187.3a

7756.7a

7650.0a

6854.3b

6871.4b

MDA(Umol/l)

5.24a

4.94c

4.21c

4.18c

5.12b

5.09b

4、消化道PH和消化酶活性

试验第2周、第4周、第6周、第8周，每组随机选取5只采食2h后的鸡处死，取嗉囊、肌胃、十二指肠的食糜，用pH计直接测定嗉囊、肌胃、和十二指肠的食糜pH。十二指肠淀粉酶、糜蛋白酶与胰蛋白酶活性测定参照相应试剂盒说明进行。

消化酶活性测定分析结果见表5。与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组的淀粉酶与糜蛋白酶活性均显著增加(P<0.05)，而试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组的胰蛋白酶活性略高于对照组。对比例1组和对比例2组的蛋鸡消化酶活性相对于对照组有所提升，但是也显著低于试验I组(P<0.05)。蛋鸡消化道测定结果见表6。与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组的十二指肠PH显著降低(P<0.05)，且对比例1组和对比例2组的蛋鸡嗉囊、肌胃和十二指肠的PH略高于试验I组。由上说明混菌发酵制得的中草药添加剂相对于单菌发酵制得的中草药添加剂，更容易被蛋鸡消化吸收。

表5混菌发酵型中草药添加剂对蛋鸡消化酶活性的影响

项目

对照组

试验Ⅰ组

试验Ⅱ组

试验Ⅲ组

对比例1组

对比例2组

淀粉酶(U/mg)

60.95c

64.93a

64.59a

66.07a

63.21b

63.08b

糜蛋白酶(U/g)

1.47c

1.69a

1.71a

1.64a

1.53b

1.55b

胰蛋白酶(U/g)

50.78

52.14

52.27

51.06

50.94

51.05

表6混菌发酵型中草药添加剂对蛋鸡消化道PH的影响

项目	对照组	试验Ⅰ组	试验Ⅱ组	试验Ⅲ组	对比例1组	对比例2组
							嗉囊	5.66	5.62	5.59	5.61	5.61	5.62
肌胃	3.51	3.48	3.50	3.45	3.50	3.49
							十二指肠	6.08<sup>a</sup>	5.73<sup>b</sup>	5.92<sup>b</sup>	5.62<sup>b</sup>	6.02<sup>ab</sup>	5.98<sup>ab</sup>

5、钙、磷的表观代谢率

本试验采用全收粪法测定钙和磷的表观代谢率。每组选10只鸡准确记录采食量，连续48h收集***物，并计算试验第2周周日钙和磷的表观代谢率。第4周、第6周、第8周的代谢试验做法同第2周。火焰原子吸收光谱法测定钙、磷含量。养分代谢率计算公式如下：

某养分表观代谢率(％)＝100×(W1×A1～W2×A2)/(W1×A1)；

式中:W1为日采食风干饲粮质量(g)；W2为日***物风干物质量(g)；A1、A2分别为饲粮、***物中的某养分(钙和磷)含量(％)。

如表7所示，相较对照组，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组及试验Ⅲ组的钙代谢率与磷代谢率显著增加(P<0.05)；对比例1组和对比例2组的钙磷表观代谢率相对于对照组有所提升，但是也显著低于试验I组(P<0.05)，说明混菌发酵制得的中草药添加剂相对于单菌发酵制得的中草药添加剂，其饲喂后，钙和磷的表观代谢率下降，蛋鸡产蛋的钙和磷含量更高。

表7混菌发酵型中草药添加剂对蛋鸡钙磷表观代谢率的影响

以上详细描述了本发明的较佳具体实施例，应当理解，本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思做出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明构思在现有技术基础上通过逻辑分析、推理或者根据有限的实验可以得到的技术方案，均应该在由本权利要求书所确定的保护范围之中。

Claims

1.一种产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药饲料添加剂，其特征在于，所述中草药由以下重量份的各物质组成：5～11份葛根、3～9份女贞子、3～9份枸杞、2～8份当归、3～9份熟地黄、2～8份赤芍、5～11份山药、3～9份补骨脂、4～10份乌药、2～8份薄荷、3～9份孜然、4～10份裂壶藻、4～10份杜仲，5～11份红景天、1～7份栀子、3～9份金钱草。

2.根据权利要求1所述的产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药饲料添加剂，其特征在于，所述中草药由以下重量份的各物质组成：8份葛根、6份女贞子、6份枸杞、5份当归、6份熟地黄、5份赤芍、8份山药、6份补骨脂、7份乌药、5份薄荷、6份孜然、7份裂壶藻、7份杜仲，8份红景天、4份栀子、6份金钱草。

3.权利要求1或2任一项所述混菌发酵型中草药饲料添加剂的制备方法，其特征在于，以酿酒酵母和黑曲霉的混合物作为发酵菌种，以中草药得到的液体作为培养基，进行有氧发酵，发酵结束后，上清液即为饲料添加剂的粗产物。

4.根据权利要求3所述的混菌发酵型中草药饲料添加剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)菌液的制备：

制备酿酒酵母种子液和黑曲霉种子液；

(2)中草药液体培养基的制备：

将中草药清洗除杂，经烘干、浸泡、灭菌后得到中草药液体培养基；

(3)发酵过程：

5.根据权利要求4所述的混菌发酵型中草药饲料添加剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，黑曲霉种子液或酵母菌种子液的接种量为1：1.2～1.5。

6.权利要求1或2任一项所述混菌发酵型中草药饲料添加剂的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，按照蛋鸡饲料饲喂量的重量比的0.2％～1.0％添加到产蛋后期蛋鸡的日常饲料中。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，从蛋鸡350日龄开始添加上述饲料添加剂。