CN112457367B

CN112457367B - 作为蛋白降解剂的连环类化合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN112457367B
Application number: CN202010922341.XA
Authority: CN
Inventors: 邢唯强; 吕永聪; 陆洪福; 徐强; 齐保建; 彭建彪; 郭海兵
Original assignee: Shanghai Jiyu Pharmaceutical Technology Co ltd; Jiangxi Jemincare Group Co Ltd
Current assignee: Shanghai Jiyu Pharmaceutical Technology Co ltd; Jiangxi Jemincare Group Co Ltd
Priority date: 2019-09-06
Filing date: 2020-09-04
Publication date: 2022-08-23
Anticipated expiration: 2040-09-04
Also published as: CN112457367A

Abstract

本发明公开了作为蛋白降解剂的连环类化合物及其制备方法和应用，具体地，本发明公开了式(Ⅰ)所示化合物及其药效上可接受的盐，以及该化合物作为雄激素受体(AR)降解的应用。

Description

作为蛋白降解剂的连环类化合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及式(Ⅰ)所示化合物及其药效上可接受的盐，以及该化合物作为雄激素受体(AR)降解的应用。

背景技术

***癌(PCa)是最常见的癌症之一，在美国，它已超过肺癌成为发病率第一的男性癌症。***癌在早期并无显著症状，因此一般患者被发现时已是晚期，会出现尿频、排尿困难、尿血、尿痛等症状，并可能转移至其他部位。2016年，我国新发***癌患者数量为12万，预计至2030年，这一数字将上升至23.7万人，新发患者数量的年复合增长率为5％。也意味着未来10年，我国***癌的发病率将进入高峰期，成为男性癌症第一杀手。由于早期诊断率较低，中国***癌患者的死亡率远远高于发达国家。在美国，患病5年的患者生存率在98％以上，而同样的患者在中国生存率仅为50％。

***癌是雄激素依赖的肿瘤。雄激素可以刺激***癌细胞的生长和疾病进展，因此内分泌治疗，如雄激素剥夺疗法(ADT)(手术去势/药物去势)是常规的治疗手段之一。ADT疗法在治疗初期具有显著的效果，但是随着药物的使用和疾病的进展，雄激素受体(AR)会发生突变，突变的AR对于低水平的雄激素更加敏感，从而使疾病进展为去势抵抗***癌(CRPC)。有研究表明：几乎所有的晚期***癌患者在接受内分泌治疗后，最终都会进展为CRPC；此外高达30％的***癌患者会在初步治疗的10年内转变为转移性去势抵抗***癌(mCRPC)。目前，临床确诊为早期局灶性***癌的患者通常是能够治愈的，但确诊为无症状或轻微症状转移去势抵抗性***癌(mCRPC)的患者，在临床上尚无治愈的选择。

目前获批的用于治疗转移性去势抵抗***癌的口服药物，主要有阿比特龙和恩扎鲁胺。其中，阿比特龙为新型的雄激素生物合成抑制剂，它能够阻断睾丸、肾上腺或者肿瘤细胞内环境中雄激素的合成；恩扎鲁胺是一种雄激素受体拮抗剂，能够竞争性的抑制雄激素与受体的结合。此外，恩扎鲁胺与AR结合后，也可以进一步抑制AR的细胞核转运，从而阻断AR与DNA的相互作用。

ADT疗法难以维持长期的疗效，原因在于CRPC仍依赖于AR信号传导轴以维持生长。AR的突变使传统作用于AR的小分子拮抗活性降低，甚至转变为AR激动剂，从而在临床上出现耐药的现象。而选择性的雄激素受体降解剂(SARD)能够降解雄性激素受体，从而彻底阻断雄激素受体信号传导的过程，会带来更多的受益。

本发明主要依托于蛋白降解靶向嵌合体(PROTAC)技术，得到一类选择性的AR降解剂(SARD)。PROTAC技术主要依托于细胞内的泛素-蛋白酶体***。该***是细胞内的“清洁工”，泛素化***的主要作用是将细胞中变性、变异或有害的蛋白泛素化。泛素化的蛋白质，则被细胞内部的蛋白酶体***降解。PROTAC的设计思路在于：分子一端为靶标蛋白(如AR)相互作用片段，另一端为泛素-蛋白酶体(E3连接酶部分)相互作用片段，通过中间连接(Linker)，将两端连接成为一个嵌合型分子。PROTAC通过同时和靶标蛋白(AR)以及蛋白酶体***相互作用，使得蛋白酶体和靶标蛋白(如AR)在空间上相互靠近，进而使得AR被泛素化而降解。小分子PROTAC技术于2008年被报道，目前仅有Arvinas公司的一个基于AR降解的小分子药物ARV-110(目前结构未知)处于临床一期研发阶段。

目前PROTAC技术属于前沿领域，这类分子的详细作用机理仍不明确，但是有证据表明会远复杂于传统的小分子药物。初步研究认为：PROTAC通过形成“靶标蛋白-PROTAC-E3连接酶”三元蛋白复合物而发挥其蛋白降解作用，涉及三体结合动力学问题。三元复合物的形成与“靶标蛋白-PROTAC”，“PROTAC-E3连接酶”这两种二元复合物形成存在竞争，因此PROTAC的效应强弱与其本身在细胞内的浓度不一定成线性关系(如存在hook effect)。此外有研究表明：“靶标蛋白-PROTAC-E3连接酶”三元复合物的稳定性是蛋白质降解效应的关键。这意味着PROTAC自身与靶标蛋白(如AR)的亲和力与PROTAC活性无关，PROTAC Linker部分的微调，都有可能影响靶标蛋白-E3连接酶的蛋白-蛋白相互作用。

综上所述，PROTAC的分子设计与传统的小分子设计截然不同，并无一定的规律可循。这也意味着：常见的药化改造策略(如有效片段的等效替换等)在这类分子的设计中不一定适用。例如，Alessio Ciulli等人于2018年发表文章表明，对于某些靶标蛋白的降解，采用一些活性很弱的靶标蛋白作用片段，所衍生而成的PROTAC分子反而具有更强的蛋白降解活性(J.Med.Chem.2018,61,504-513)。

目前本领域仍然需要开发具有新型结构的、用于AR降解的PROTAC分子。

发明内容

本发明提供了式(Ⅰ)所示化合物、其光学异构体及其药效上可接受的盐，

其中，

环A选自3-12元杂环烷基和C_3-12环烷基，所述3-12元杂环烷基或C_3-12环烷基任选被1、2或3个Ra取代；

Ra选自H、CN、C_1-6烷基和卤素，所述C_1-6烷基任选地被1、2或3个R取代；

环B选自5-12元杂芳基和C_6-10芳基；

R₁选自H、C_1-6烷基、卤素、CN、苯基和5-6元杂芳基，所述C_1-6烷基、苯基或5-6元杂芳基任选被1、2或3个R取代；

R分别独立地选自H、卤素、OH、NH₂、CN、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基，所述C_1-6烷基或C_1-6烷氧基任选被1、2或3个卤素、OH、NH₂取代；

R₂、R₃分别独立地选自H、卤素、CN、NH₂、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基，所述C_1-6烷基或C_1-6烷氧基任选被1、2或3个卤素、OH、NH₂取代；

环C选自5-6元杂芳基和C_6-10芳基；

L₁、L₂、L₃、L₄分别独立地选自单键、O、S、NH、C(＝O)、S(＝O)、S(＝O)₂、C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-、C_2-3烯基、C_2-3炔基、C_3-10环烷基、3～10元杂环烷基、苯基和5～9元杂芳基，所述C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-、C_2-3烯基、C_2-3炔基、C_3-10环烷基、3～10元杂环烷基、苯基或5～9元杂芳基任选被1、2或3个R_L取代；

R_L分别独立地选自H、卤素、OH、NH₂、CN、

C_1-6烷基、C_3-6环烷基、C_1-6烷基-C(＝O)-、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基和C_1-6烷氨基，所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基或C_1-6烷氨基任选被1、2或3个R’取代；

R’选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、

CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

上述3～12元杂环烷基、5～12元杂芳基、3～10元杂环烷基、5～6元杂芳基或5～9元杂芳基包含1、2或3个独立选自O、NH、S、C(＝O)、C(＝O)O、S(＝O)、S(＝O)₂和N的杂原子或杂原子团。

在本发明的另一方面，本发明还提供了式(II)所示化合物、其光学异构体及其药效上可接受的盐，

其中，

环B选自5-12元杂芳基和C_6-10芳基；

环C选自5-6元杂芳基和C_6-10芳基；

R_L分别独立地选自H、卤素、OH、NH₂、CN、

R’选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、

CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

上述5～12元杂芳基、3～10元杂环烷基、5～6元杂芳基或5～9元杂芳基包含1、2或3个独立选自O、NH、S、C(＝O)、C(＝O)O、S(＝O)、S(＝O)₂和N的杂原子或杂原子团。

在本发明的另一方面，本发明还提供了式(Ⅰ-A)所示化合物、其光学异构体及其药效上可接受的盐，

其中，

X选自CH和N；

R₁选自H、CN、C_1-6烷基、卤素、苯基和5-6元杂芳基，所述C_1-6烷基、苯基或5-6元杂芳基任选被1、2或3个R取代；

R_L分别独立地选自H、卤素、OH、NH₂、CN、

R’选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、

CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

上述3～12元杂环烷基、3～10元杂环烷基、5～6元杂芳基或5～9元杂芳基包含1、2或3个独立选自O、NH、S、C(＝O)、C(＝O)O、S(＝O)、S(＝O)₂和N的杂原子或杂原子团。

在本发明的另一方面，本发明还提供了式(Ⅰ-B)所示化合物、其光学异构体及其药效上可接受的盐，

其中，

X选自CH和N；

X₁选自CH₂、NH、S和O；

X₂、X₃各自独立地选自CH或N；

R_L分别独立地选自H、卤素、OH、NH₂、CN、

R’选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、

CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

本发明还提供了式(II-1)所示化合物、其光学异构体及其药效上可接受的盐，

基团R₂、R₃、X、L₁、L₂、L₃、L₄、R₁如本发明所定义。

本发明还提供了式(II-2)所示化合物、其光学异构体及其药效上可接受的盐，

基团R₂、R₃、X、X₁、X₂、X₃、L₁、L₂、L₃、L₄、R₁如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述环A选自3-7元杂环烷基和C_3-7环烷基，所述3-7元杂环烷基或C_3-7环烷基任选被1、2或3个Ra取代，其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述环A选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基和四氢吡喃基，所述环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基或四氢吡喃基任选被1、2或3个Ra取代，其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述环B选自5-9元杂芳基和苯基，其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述环B选自苯基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并吡唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基和苯并咪唑基，其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₁选自H、CN、卤素、C_1-4烷基、苯基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、噁唑基和异噁唑基，所述C_1-4烷基、苯基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、噁唑基或异噁唑基任选被1、2或3个R取代，其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₁选自H、CN、卤素、甲基、乙基、正丙基、异丙基和

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₁选自H、CN、卤素、甲基、乙基、正丙基、异丙基、

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R分别独立地选自H、卤素、OH、NH₂、CN、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基和乙氧基，其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述L₁、L₂、L₃、L₄分别独立地选自单键、O、S、NH、C(＝O)、S(＝O)、S(＝O)₂、C_1-3烷基、-C_1-3烷基-O-、C_2-3烯基、C_2-3炔基、C_3-6环烷基、5～6元杂环烷基、7-9元杂双环烷基、苯基和5～6元杂芳基，所述C_1-3烷基、-C_1-3烷基-O-、C_2-3烯基、C_2-3炔基、C_3-6环烷基、5～6元杂环烷基、7-9元杂双环烷基、苯基或5～6元杂芳基任选被1、2或3个R_L取代，其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R_L分别独立地选自H、卤素、OH、NH₂、CN、

C_1-3烷基、C_3-6环烷基、C_1-3烷基-C(＝O)-、C_1-3烷氧基、C_1-3烷硫基和C_1-3烷氨基，所述C_1-3烷基、C_3-6环烷基、C_1-3烷氧基、C_1-3烷硫基或C_1-3烷氨基任选被1、2或3个R’取代，其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R_L分别独立选自H、甲基和-CH₂OH，其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述环C选自

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述Ra、R分别独立地选自H、CN、卤素、甲基、乙基、正丙基和异丙基，其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述L₁、L₂、L₃、L₄分别独立地选自单键、O、S、NH、C(＝O)、S(＝O)、S(＝O)₂、CH₂、

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自

其余变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₂、R₃分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、NH₂、CN、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基和乙氧基，其余变量如本发明所定义。

在本发明的另一方面，本发明还提供了下式化合物、其光学异构体及其药效上可接受的盐，其选自

在本发明的再一方面，本发明还提供了一种药物组合物。本发明的一些方案中，上述药物组合物保护前面所述的化合物、其光学异构体及其药效上可接受的盐。

本发明的一些方案中，上述药物组合物还可以包含如下附加技术特征。

本发明的一些方案中，上述药物组合物进一步包含药用辅料。

在本发明的再一方面，本发明还提供了前面所述的化合物、其光学异构体及其药效上可接受的盐或前面所述的药物组合物在制备预防和/或治疗癌症、***癌、肯尼迪氏病的药物中的用途。

本发明的一些方案中，上述的癌症选自***癌、乳腺癌、卵巢癌、子***、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、肝细胞癌和肾细胞癌、膀胱癌、肠癌、结肠癌、食管癌、头癌、肾癌、肝癌、肺癌、颈癌、睾丸癌、胰腺癌和胃癌；白血病；良性和恶性淋巴瘤，特别是伯基特氏淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤；和恶性黑素瘤；骨髓增生性疾病；肉瘤，包括尤因肉瘤、血管肉瘤、卡波西氏肉瘤、脂肪肉瘤、肌肉瘤、周围神经上皮瘤、滑膜肉瘤、神经胶质瘤、星形细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤、成胶质细胞瘤、神经母细胞瘤、神经节瘤、神经节神经胶质瘤、髓母细胞瘤、松果体细胞肿瘤、脑膜瘤、脑膜肉瘤、神经纤维瘤和许旺细胞瘤；甲状腺癌、星形细胞瘤、黑素瘤；癌肉瘤、霍奇金病、威尔曼瘤或畸胎癌。

定义和说明

除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。

这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机胺或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐，所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸，碳酸氢根，磷酸、磷酸一氢根、磷酸二氢根、硫酸、硫酸氢根、氢碘酸、亚磷酸等；以及有机酸盐，所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、三氟乙酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸；还包括氨基酸(如精氨酸等)的盐，以及如葡糖醛酸等有机酸的盐。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。

本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。

本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。

本发明的化合物可以存在特定的。除非另有说明，术语“互变异构体”或“互变异构体形式”是指在室温下，不同官能团异构体处于动态平衡，并能很快的相互转化。若互变异构体是可能的(如在溶液中)，则可以达到互变异构体的化学平衡。例如，质子互变异构体(proton tautomer)(也称质子转移互变异构体(prototropic tautomer))包括通过质子迁移来进行的互相转化，如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键异构体(valencetautomer)包括一些成键电子的重组来进行的相互转化。其中酮-烯醇互变异构化的具体实例是戊烷-2,4-二酮与4-羟基戊-3-烯-2-酮两个互变异构体之间的互变。

本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氚(³H)，碘-125(¹²⁵I)或C-14(¹⁴C)。又例如，可用重氢取代氢形成氘代药物，氘与碳构成的键比普通氢与碳构成的键更坚固，相比于未氘化药物，氘代药物有降低毒副作用、增加药物稳定性、增强疗效、延长药物生物半衰期等优势。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的，并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。

术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，可以包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。术语“任选被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。

当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被0-2个R所取代，则所述基团可以任选地至多被两个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。

当其中一个变量选自单键时，表示其连接的两个基团直接相连，比如

中L₁代表单键时表示该结构实际上是

当所列举的取代基中没有指明其通过哪一个原子连接到被取代的基团上时，这种取代基可以通过其任何原子相键合，例如，吡啶基作为取代基可以通过吡啶环上任意一个碳原子连接到被取代的基团上。

当所列举的连接基团没有指明其连接方向，其连接方向是任意的，例如，

中连接基团L为-CH₂O-，此时-CH₂O-既可以按与从左往右的读取顺序相同的方向连接苯基和环戊基构成

也可以按照与从左往右的读取顺序相反的方向连接苯基和环戊基构成

所述连接基团、取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。

除非另有规定，环上原子的数目通常被定义为环的元数，例如，“3-6元环”是指环绕排列3-6个原子的“环”。

除非另有规定，术语“C_1-6烷基”用于表示直链或支链的由1至6个碳原子组成的饱和碳氢基团。所述C_1-6烷基包括C_1-5、C_1-4、C_1-3、C_1-2、C_2-6、C_2-4、C₆和C₅烷基等；其可以是一价(如CH₃)、二价(-CH₂-)或者多价(如次

)。C_1-6烷基的实例包括但不限于CH₃、

等。

除非另有规定，术语“C_1-3烷基”用于表示直链或支链的由1至3个碳原子组成的饱和碳氢基团。所述C_1-3烷基包括C_1-2和C_2-3烷基等；其可以是一价(如CH₃)、二价(-CH₂-)或者多价(如次

)。C_1-3烷基的实例包括但不限于CH₃、

等。

除非另有规定，“C_2-3烯基”用于表示直链或支链的包含至少一个碳-碳双键的由2至3个碳原子组成的碳氢基团，碳-碳双键可以位于该基团的任何位置上。所述C_2-3烯基包括C₃和C₂烯基；所述C_2-3烯基可以是一价、二价或者多价。C_2-3烯基的实例包括但不限于

等。

除非另有规定，“C_2-3炔基”用于表示直链或支链的包含至少一个碳-碳三键的由2至3个碳原子组成的碳氢基团，碳-碳三键可以位于该基团的任何位置上。其可以是一价、二价或者多价。所述C_2-3炔基包括C₃和C₂炔基。C_2-3炔基的实例包括但不限于

等。

术语“杂烷基”本身或者与另一术语联合，表示由一定数目碳原子和至少一个杂原子或杂原子团组成的，稳定的直链或支链的烷基原子团或其组合物。在一些实施方案中，杂原子选自B、O、N和S，其中氮和硫原子任选地被氧化，氮杂原子任选地被季铵化。在另一些实施方案中，杂原子团选自-C(＝O)O-、-C(＝O)-、-C(＝S)-、-S(＝O)、-S(＝O)₂-、-C(＝O)N(H)-、-N(H)-、-C(＝NH)-、-S(＝O)₂N(H)-和-S(＝O)N(H)-。在一些实施方案中，所述杂烷基为C_1-6杂烷基；在另一些实施方案中，所述杂烷基为C_1-3杂烷基。杂原子或杂原子团可以位于杂烷基的任何内部位置，包括该烷基与分子其余部分的连接位置，但术语“烷氧基”属于惯用表达，是指通过一个氧原子连接到分子的其余部分的那些烷基基团。杂烷基的实例包括但不限于-OCH₃、-OCH₂CH₃、-OCH₂CH₂CH₃、-OCH₂(CH₃)₂、-CH₂-CH₂-O-CH₃、-NHCH₃、-N(CH₃)₂、-NHCH₂CH₃、-N(CH₃)(CH₂CH₃)、-CH₂-CH₂-NH-CH₃、-CH₂-CH₂-N(CH₃)-CH₃、-SCH₃、-SCH₂CH₃、-SCH₂CH₂CH₃、-SCH₂(CH₃)₂、-CH₂-S-CH₂-CH₃、-CH₂-CH₂、-S(＝O)-CH₃、-CH₂-CH₂-S(＝O)₂-CH₃、和至多两个杂原子可以是连续的，例如-CH₂-NH-OCH₃。

除非另有规定，术语“C_1-6烷氧基”表示通过一个氧原子连接到分子的其余部分的那些包含1至6个碳原子的烷基基团。所述C_1-6烷氧基包括C_1-4、C_1-3、C_1-2、C_2-6、C_2-4、C₆、C₅、C₄和C₃烷氧基等。C_1-6烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基(包括正丙氧基和异丙氧基)、丁氧基(包括n-丁氧基、异丁氧基、s-丁氧基和t-丁氧基)、戊氧基(包括n-戊氧基、异戊氧基和新戊氧基)、己氧基等。

除非另有规定，术语“C_1-4烷氧基”表示通过一个氧原子连接到分子的其余部分的那些包含1至4个碳原子的烷基基团。所述C_1-4烷氧基包括C_1-3、C_1-2、C_2-4、C₄和C₃烷氧基等。C_1-6烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基(包括正丙氧基和异丙氧基)、丁氧基(包括n-丁氧基、异丁氧基、s-丁氧基和t-丁氧基)、戊氧基(包括n-戊氧基、异戊氧基和新戊氧基)、己氧基等。

除非另有规定，术语“C_1-3烷氧基”表示通过一个氧原子连接到分子的其余部分的那些包含1至3个碳原子的烷基基团。所述C_1-3烷氧基包括C_1-2、C_2-3、C₃和C₂烷氧基等。C_1-3烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基(包括正丙氧基和异丙氧基)等。

除非另有规定，术语“C_1-6烷氨基”表示通过氨基连接到分子的其余部分的那些包含1至6个碳原子的烷基基团。所述C_1-6烷氨基包括C_1-4、C_1-3、C_1-2、C_2-6、C_2-4、C₆、C₅、C₄、C₃和C₂烷氨基等。C_1-6烷氨基的实例包括但不限于-NHCH₃、-N(CH₃)₂、-NHCH₂CH₃、-N(CH₃)CH₂CH₃、-N(CH₂CH₃)(CH₂CH₃)、-NHCH₂CH₂CH₃、-NHCH₂(CH₃)₂、-NHCH₂CH₂CH₂CH₃等。

除非另有规定，术语“C_1-4烷氨基”表示通过氨基连接到分子的其余部分的那些包含1至4个碳原子的烷基基团。所述C_1-4烷氨基包括C_1-3、C_1-2、C_2-4、C₄、C₃和C₂烷氨基等。C_1-4烷氨基的实例包括但不限于-NHCH₃、-N(CH₃)₂、-NHCH₂CH₃、-N(CH₃)CH₂CH₃、-N(CH₂CH₃)(CH₂CH₃)、-NHCH₂CH₂CH₃、-NHCH₂(CH₃)₂、-NHCH₂CH₂CH₂CH₃等。

除非另有规定，术语“C_1-3烷氨基”表示通过氨基连接到分子的其余部分的那些包含1至3个碳原子的烷基基团。所述C_1-3烷氨基包括C_1-2、C₃和C₂烷氨基等。C_1-3烷氨基的实例包括但不限于-NHCH₃、-N(CH₃)₂、-NHCH₂CH₃、-N(CH₃)CH₂CH₃、-NHCH₂CH₂CH₃、-NHCH₂(CH₃)₂等。

除非另有规定，术语“C_1-6烷硫基”表示通过硫原子连接到分子的其余部分的那些包含1至6个碳原子的烷基基团。所述C_1-6烷硫基包括C_1-4、C_1-3、C_1-2、C_2-6、C_2-4、C₆、C₅、C₄、C₃和C₂烷硫基等。C_1-6烷硫基的实例包括但不限于-SCH₃、-SCH₂CH₃、-SCH₂CH₂CH₃、-SCH₂(CH₃)₂等等。

除非另有规定，术语“C_1-4烷硫基”表示通过硫原子连接到分子的其余部分的那些包含1至4个碳原子的烷基基团。所述C_1-4烷硫基包括C_1-3、C_1-2、C_2-4、C₄、C₃和C₂烷硫基等。C_1-4烷硫基的实例包括但不限于-SCH₃、-SCH₂CH₃、-SCH₂CH₂CH₃、-SCH₂(CH₃)₂等等。

除非另有规定，术语“C_1-3烷硫基”表示通过硫原子连接到分子的其余部分的那些包含1至3个碳原子的烷基基团。所述C_1-3烷硫基包括C_1-3、C_1-2和C₃烷硫基等。C_1-3烷硫基的实例包括但不限于-SCH₃、-SCH₂CH₃、-SCH₂CH₂CH₃、-SCH₂(CH₃)₂等

除非另有规定，“C_3-6环烷基”表示由3至6个碳原子组成的饱和环状碳氢基团，其为单环和双环体系，所述C_3-6环烷基包括C_3-5、C_4-5和C_5-6环烷基等；其可以是一价、二价或者多价。C_3-6环烷基的实例包括，但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。

除非另有规定，术语“3-12元杂环烷基”本身或者与其他术语联合分别表示由3至12个环原子组成的饱和环状基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子，其中氮原子任选地被季铵化，氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)_p，p是1或2)。其包括单环、双环和三环体系，其中双环和三环体系包括螺环、并环和桥环。此外，就该“3-12元杂环烷基”而言，杂原子可以占据杂环烷基与分子其余部分的连接位置。所述3-12元杂环烷基包括3-10元、3-9元、3-8元、3-6元、3-5元、4-6元、5-6元、4元、5元和6元杂环烷基等。3-12元杂环烷基的实例包括但不限于氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、四氢噻吩基(包括四氢噻吩-2-基和四氢噻吩-3-基等)、四氢呋喃基(包括四氢呋喃-2-基等)、四氢吡喃基、哌啶基(包括1-哌啶基、2-哌啶基和3-哌啶基等)、哌嗪基(包括1-哌嗪基和2-哌嗪基等)、吗啉基(包括3-吗啉基和4-吗啉基等)、二噁烷基、二噻烷基、异噁唑烷基、异噻唑烷基、1,2-噁嗪基、1,2-噻嗪基、六氢哒嗪基、高哌嗪基、高哌啶基或二氧杂环庚烷基、

等。

除非另有规定，术语“3-10元杂环烷基”本身或者与其他术语联合分别表示由3至10个环原子组成的饱和环状基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子，其中氮原子任选地被季铵化，氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)_p，p是1或2)。其包括单环和双环体系，其中双环体系包括螺环、并环和桥环。此外，就该“3-10元杂环烷基”而言，杂原子可以占据杂环烷基与分子其余部分的连接位置。所述3-10元杂环烷基包括3-6元、4-7元、4元、5元、6元、7元、8元、9元、10元杂环烷基等。3-10元杂环烷基的实例包括但不限于氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、四氢噻吩基(包括四氢噻吩-2-基和四氢噻吩-3-基等)、四氢呋喃基(包括四氢呋喃-2-基等)、四氢吡喃基、哌啶基(包括1-哌啶基、2-哌啶基和3-哌啶基等)、哌嗪基(包括1-哌嗪基和2-哌嗪基等)、吗啉基(包括3-吗啉基和4-吗啉基等)、二噁烷基、二噻烷基、异噁唑烷基、异噻唑烷基、1,2-噁嗪基、1,2-噻嗪基、六氢哒嗪基、高哌嗪基或高哌啶基等。术语“3-10元杂环烷基”包含术语“5-6元杂环烷基”，例如，术语“5-6元杂环烷基”包括但不限于四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基等。术语“3-10元杂环烷基”也包含术语“7-9元杂双环烷基”，例如术语“7-9元杂双环烷基”包括但不限于

等。

除非另有规定，术语“3-7元杂环烷基”本身或者与其他术语联合分别表示由3至7个环原子组成的饱和环状基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子，其中氮原子任选地被季铵化，氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)_p，p是1或2)。其包括单环和双环体系，其中双环体系包括螺环、并环和桥环。此外，就该“3-6元杂环烷基”而言，杂原子可以占据杂环烷基与分子其余部分的连接位置。所述3-7元杂环烷基包括3-6元、4-7元、4元、5元、6元和7元杂环烷基等。3-7元杂环烷基的实例包括但不限于氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、四氢噻吩基(包括四氢噻吩-2-基和四氢噻吩-3-基等)、四氢呋喃基(包括四氢呋喃-2-基等)、四氢吡喃基、哌啶基(包括1-哌啶基、2-哌啶基和3-哌啶基等)、哌嗪基(包括1-哌嗪基和2-哌嗪基等)、吗啉基(包括3-吗啉基和4-吗啉基等)、二噁烷基、二噻烷基、异噁唑烷基、异噻唑烷基、1,2-噁嗪基、1,2-噻嗪基、六氢哒嗪基、高哌嗪基或高哌啶基等。

除非另有规定，术语“3-6元杂环烷基”本身或者与其他术语联合分别表示由3至6个环原子组成的饱和环状基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子，其中氮原子任选地被季铵化，氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)_p，p是1或2)。其包括单环和双环体系，其中双环体系包括螺环、并环和桥环。此外，就该“3-6元杂环烷基”而言，杂原子可以占据杂环烷基与分子其余部分的连接位置。所述3-6元杂环烷基包括4-6元、5-6元、4元、5元和6元杂环烷基等。3-6元杂环烷基的实例包括但不限于氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、四氢噻吩基(包括四氢噻吩-2-基和四氢噻吩-3-基等)、四氢呋喃基(包括四氢呋喃-2-基等)、四氢吡喃基、哌啶基(包括1-哌啶基、2-哌啶基和3-哌啶基等)、哌嗪基(包括1-哌嗪基和2-哌嗪基等)、吗啉基(包括3-吗啉基和4-吗啉基等)、二噁烷基、二噻烷基、异噁唑烷基、异噻唑烷基、1,2-噁嗪基、1,2-噻嗪基、六氢哒嗪基、高哌嗪基或高哌啶基等。

除非另有规定，本发明术语“5-12元杂芳环”和“5-12元杂芳基”可以互换使用，术语“5-12元杂芳基”是表示由5至12个环原子组成的具有共轭π电子体系的环状基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子。其可以是单环、稠合双环或稠合三环体系，其中各个环均为芳香性的。其中氮原子任选地被季铵化，氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)_p，p是1或2)。5-12元杂芳基可通过杂原子或碳原子连接到分子的其余部分。所述5-12元杂芳基包括5-10元、5-9元、5-8元、5-7元、5-6元、5元和6元杂芳基等。所述5-12元杂芳基的实例包括但不限于吡咯基(包括N-吡咯基、2-吡咯基和3-吡咯基等)、吡唑基(包括2-吡唑基和3-吡唑基等)、咪唑基(包括N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基和5-咪唑基等)、噁唑基(包括2-噁唑基、4-噁唑基和5-噁唑基等)、***基(1H-1,2,3-***基、2H-1,2,3-***基、1H-1,2,4-***基和4H-1,2,4-***基等)、四唑基、异噁唑基(3-异噁唑基、4-异噁唑基和5-异噁唑基等)、噻唑基(包括2-噻唑基、4-噻唑基和5-噻唑基等)、呋喃基(包括2-呋喃基和3-呋喃基等)、噻吩基(包括2-噻吩基和3-噻吩基等)、吡啶基(包括2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基等)、吡嗪基、嘧啶基(包括2-嘧啶基和4-嘧啶基等)、苯并噻唑基(包括5-苯并噻唑基等)、嘌呤基、苯并咪唑基(包括2-苯并咪唑基等)、苯并噁唑基、吲哚基(包括5-吲哚基等)、异喹啉基(包括1-异喹啉基和5-异喹啉基等)、喹喔啉基(包括2-喹喔啉基和5-喹喔啉基等)或喹啉基(包括3-喹啉基和6-喹啉基等)。

除非另有规定，本发明术语“5-6元杂芳环”和“5-6元杂芳基”可以互换使用，术语“5-6元杂芳基”表示由5至6个环原子组成的具有共轭π电子体系的单环基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子。其中氮原子任选地被季铵化，氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)_p，p是1或2)。5-6元杂芳基可通过杂原子或碳原子连接到分子的其余部分。所述5-6元杂芳基包括5元和6元杂芳基。所述5-6元杂芳基的实例包括但不限于吡咯基(包括N-吡咯基、2-吡咯基和3-吡咯基等)、吡唑基(包括2-吡唑基和3-吡唑基等)、咪唑基(包括N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基和5-咪唑基等)、噁唑基(包括2-噁唑基、4-噁唑基和5-噁唑基等)、***基(1H-1,2,3-***基、2H-1,2,3-***基、1H-1,2,4-***基和4H-1,2,4-***基等)、四唑基、异噁唑基(3-异噁唑基、4-异噁唑基和5-异噁唑基等)、噻唑基(包括2-噻唑基、4-噻唑基和5-噻唑基等)、呋喃基(包括2-呋喃基和3-呋喃基等)、噻吩基(包括2-噻吩基和3-噻吩基等)、吡啶基(包括2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基等)、吡嗪基或嘧啶基(包括2-嘧啶基和4-嘧啶基等)。

除非另有规定，本发明术语“5-9元杂芳环”和“5-9元杂芳基”可以互换使用，术语“5-9元杂芳基”表示由5至9个环原子组成的具有共轭π电子体系的单环基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子。其中氮原子任选地被季铵化，氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)_p，p是1或2)。5-9元杂芳基可通过杂原子或碳原子连接到分子的其余部分。所述5-9元杂芳基包括5元、6元、7元、8元、9元杂芳基。所述5-9元杂芳基的实例包括但不限于吡咯基(包括N-吡咯基、2-吡咯基和3-吡咯基等)、吡唑基(包括2-吡唑基和3-吡唑基等)、咪唑基(包括N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基和5-咪唑基等)、噁唑基(包括2-噁唑基、4-噁唑基和5-噁唑基等)、***基(1H-1,2,3-***基、2H-1,2,3-***基、1H-1,2,4-***基和4H-1,2,4-***基等)、四唑基、异噁唑基(3-异噁唑基、4-异噁唑基和5-异噁唑基等)、噻唑基(包括2-噻唑基、4-噻唑基和5-噻唑基等)、呋喃基(包括2-呋喃基和3-呋喃基等)、噻吩基(包括2-噻吩基和3-噻吩基等)、吡啶基(包括2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基等)、吡嗪基或嘧啶基(包括2-嘧啶基和4-嘧啶基等)。

除非另有规定，C_n-n+m或C_n-C_n+m包括n至n+m个碳的任何一种具体情况，例如C_1-12包括C₁、C₂、C₃、C₄、C₅、C₆、C₇、C₈、C₉、C₁₀、C₁₁、和C₁₂，也包括n至n+m中的任何一个范围，例如C_1-12包括C_1-3、C_1-6、C_1-9、C_3-6、C_3-9、C_3-12、C_6-9、C_6-12、和C_9-12等；同理，n元至n+m元表示环上原子数为n至n+m个，例如3-12元环包括3元环、4元环、5元环、6元环、7元环、8元环、9元环、10元环、11元环、和12元环，也包括n至n+m中的任何一个范围，例如3-12元环包括3-6元环、3-9元环、5-6元环、5-7元环、6-7元环、6-8元环、和6-10元环等。

术语“离去基团”是指可以被另一种官能团或原子通过取代反应(例如亲和取代反应)所取代的官能团或原子。例如，代表性的离去基团包括三氟甲磺酸酯；氯、溴、碘；磺酸酯基，如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、对溴苯磺酸酯、对甲苯磺酸酯等；酰氧基，如乙酰氧基、三氟乙酰氧基等等。

术语“保护基”包括但不限于“氨基保护基”、“羟基保护基”或“巯基保护基”。术语“氨基保护基”是指适合用于阻止氨基氮位上副反应的保护基团。代表性的氨基保护基包括但不限于：甲酰基；酰基，例如链烷酰基(如乙酰基、三氯乙酰基或三氟乙酰基)；烷氧基羰基，如叔丁氧基羰基(Boc)；芳基甲氧羰基，如苄氧羰基(Cbz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)；芳基甲基，如苄基(Bn)、三苯甲基(Tr)、1,1-二-(4'-甲氧基苯基)甲基；甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。术语“羟基保护基”是指适合用于阻止羟基副反应的保护基。代表性羟基保护基包括但不限于：烷基，如甲基、乙基和叔丁基；酰基，例如链烷酰基(如乙酰基)；芳基甲基，如苄基(Bn)，对甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)和二苯基甲基(二苯甲基，DPM)；甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。

本发明的药物组合物的特点包括式(I)或(I-A)或(I-B)或(II)的化合物，本发明所列出的化合物，或实施例的化合物，和药学上可接受的载体，辅剂，或赋形剂。本发明的组合物中化合物能用于治疗癌症，特别是***癌。

药用辅料可以是药学上可接受的载体，辅剂，或赋形剂，这些像本发明所应用的，包括任何溶剂，稀释剂，或其他液体赋形剂，分散剂或悬浮剂，表面活性剂，等渗剂，增稠剂，乳化剂，防腐剂，固体粘合剂或润滑剂，等等，适合于特有的目标剂型。

本发明所用的术语“治疗”指给患有疾病或者具有所述疾病的症状的个体施用一种或多种药物物质、特别是本发明所述的式(I)化合物和/或其药学上可接受的盐，用以治愈、缓解、减轻、改变、医治、改善、改进或影响所述疾病或者所述疾病的症状。本发明所用的术语“预防”指给具有易患所述疾病的体质的个体施用一种或多种药物物质、特别是本文所述的式(I)化合物和/或其药学上可接受的盐，用以防止个体罹患该疾病。当涉及化学反应时，术语“处理”、“接触”和“反应”指在适当的条件下加入或混合两种或更多种试剂，以产生所示的和/或所需的产物。应当理解的是，产生所示的和/或所需的产物的反应可能不一定直接来自最初加入的两种试剂的组合，即，在混合物中可能存在生成的一个或多个中间体，这些中间体最终导致了所示的和/或所需的产物的形成。

本发明所用的术语“有效量”指通常足以对个体产生有益效果的量。可以通过常规方法(例如建模、剂量递增研究或临床试验)结合常规影响因素(例如给药方式、化合物的药代动力学、疾病的严重程度和病程、个体的病史、个体的健康状况、个体对药物的响应程度等)来确定本发明的化合物的有效量。

本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。

本发明所使用的溶剂可经市售获得。

本发明采用下述缩略词：Boc代表叔丁氧羰基。

化合物依据本领域常规命名原则或者使用

软件命名，市售化合物采用供应商目录名称。

具体实施方式

下面通过实施例对本申请进行详细描述，但并不意味着存在对本申请而言任何不利的限制。本文已经详细地描述了本申请，其中也公开了其具体实施例方式，对本领域的技术人员而言，在不脱离本申请精神和范围的情况下针对本申请具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。

中间体的制备

参考例1：中间体I-1的制备

将[1-(4-溴苯基)-环丙基]氨基甲酸叔丁酯(950mg,3.05mmol)，4-甲基噻唑(605mg,6.1mmol)，醋酸钾(600mg,6.1mmol)和醋酸钯(34mg,0.153mmol)混合于N,N-二甲基乙酰胺(10mL)中，在氮气氛围下，加热到130℃，搅拌反应8小时。反应液冷却到室温，用乙酸乙酯(20mL)稀释，过滤，滤液加水(60mL)稀释，乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到中间体I-1。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺331.3。

参考例2：中间体I-2的制备

中间体I-1(370mg,1.12mmol)溶于氯化氢甲醇溶液(20mL,4M)中，于室温搅拌反应4小时。反应液浓缩，加入饱和碳酸氢钠水溶液中和，二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，得中间体I-2。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺231.1。

参考例3：中间体I-3的制备

中间体I-2(240mg)，Boc-L-羟脯氨酸(240mg,1.04mmol)，N,N-二异丙基乙胺(400mg,3.12mmol)混合于N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中，加入O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N'-四甲基脲六氟磷酸盐(600mg,1.56mmol)，于室温搅拌反应16小时。反应液加水(20mL)稀释，乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到中间体I-3。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺444.3。

参考例4：中间体I-4的制备

将中间体I-3(200mg,0.45mmol)溶于氯化氢甲醇溶液(20mL,4M)中，于室温搅拌反应4小时。反应液浓缩，得到粗品中间体I-4。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺344.2。

参考例5：中间体I-5的制备

将中间体I-4(180mg)，N-Boc-L-叔亮氨酸(132mg,0.570mmol)，N,N-二异丙基乙胺(183mg,1.422mmol)混合于N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中，加入O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N'-四甲基脲六氟磷酸盐(270mg,0.711mmol)，于室温搅拌反应16小时。反应液加水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到中间体I-5。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺557.4。

参考例6：中间体I-6的制备

将中间体I-5(200mg,0.36mmol)溶于氯化氢甲醇溶液(20mL,4M)中，于室温搅拌反应4小时。反应液浓缩，得到粗品中间体I-6。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺457.2。

参考例7：中间体I-7的制备

在0℃搅拌下，将溴乙酸叔丁酯(23.00g,120mmol)加入到5-己基-1-醇(10.00g,99.8mmol)、四丁基硫酸氢氨(10.00g，99.8mmol)、40％氢氧化钾的水溶液(135mL)和甲苯(135mL)的混合物中。反应混合物在0℃搅拌反应1小时后，然后将温度升至室温继续反应24小时。将反应体系倒入冰水(300mL)中，用乙酸乙酯(200mL×4)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水(200mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，残余物经硅胶色谱法纯化得到中间体I-7。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ5.72-5.86(m,1H),4.90-5.04(m,2H),3.94(s,2H),3.51(t,J＝6.54Hz,2H),2.03-2.12(m,2H),1.59-1.67(m,2H),1.49-1.52(m,1H),1.47(s,9H),1.42-1.46(m,1H).

参考例8：中间体I-8的制备

在25℃下，将二水合锇酸钾(258.3mg,0.70mmol)加入到中间体I-7(5.00g,23.33mmol)在丙酮(250mL)的溶液中，然后把N-甲基-N-氧化吗啉(8.30g,70mmol)在水(75mL)中的溶液加入到混合物中。在氮气保护下，反应混合物在25℃搅拌反应18小时后，将高碘酸钠(258.3mg,0.70mmol)加入反应液中继续反应3小时。将反应体系倒入水(200mL)中，用二氯甲烷(100mL×4)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水(100mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，残余物经硅胶色谱法纯化得到中间体I-8。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.78(t,J＝1.65Hz,1H),3.92-3.96(m,2H),3.50-3.58(m,2H),2.46-2.66(m,2H),1.72-1.81(m,2H),1.62-1.71(m,2H),1.47-1.49(m,9H).

参考例9：中间体I-9的制备

在室温下，将乙酸(1.39g,23.12mmol)加入中间体I-8(2.50g,11.56mmol)和对氨基苯甲酸甲酯(1.75g,11.56mmol)在1，2-二氯乙烷(50mL)的混合物中，搅拌十分钟后加入醋酸硼氢化钠(4.90g,23.12mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应18小时。将饱和碳酸氢钠(30mL)倒入反应体系中，将反应液pH值调到8，用二氯甲烷(30mL×4)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水(100mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，残余物经硅胶色谱法纯化得到中间体I-9。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.82-7.88(m,2H),6.51-6.59(m,2H),3.94-3.97(m,2H),3.84(s,3H),3.49-3.59(m,2H),3.14-3.24(m,2H),1.62-1.80(m,4H),1.49-1.57(m,2H),1.48(s,9H).

参考例10：中间体I-10的制备

将中间体I-9(500mg,1.43mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，室温下加入三氟乙酸(1mL)，于室温下搅拌反应4小时。反应液浓缩得到粗品中间体I-10。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

参考例11：中间体I-11的制备

将中间体I-6(150mg)，中间体I-10(90mg)，N,N-二异丙基乙胺(120mg,0.9mmol)混合于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中，加入O-(1H-苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟磷酸盐(150mg,0.45mmol)，于室温搅拌反应16小时。反应液加水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到中间体I-11。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺734.4。

参考例12：中间体I-12的制备

将中间体I-11(80mg,0.109mmol)溶于四氢呋喃/甲醇(2mL/2mL)中，加入氢氧化锂一水合物(43mg,1.1mmol)的水(2mL)溶液，于40℃反应16小时。反应液用1N盐酸调节pH到5，乙酸乙酯(10mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，得到粗品中间体I-12。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺720.3。

参考例13：中间体I-13的制备

将[1-(4-溴苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(950mg,2.92mmol)，4-甲基噻唑(590mg,5.85mmol)，醋酸钾(900mg,8.77mmol)和醋酸钯(32mg,0.146mmol)混合于N,N-二甲基乙酰胺(10mL)中，在氮气氛围下，加热到150℃，搅拌反应5小时。反应液冷却到室温，用乙酸乙酯(20mL)稀释，过滤，滤液加水(20mL)稀释，乙酸乙酯(15mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，残余物经硅胶色谱法纯化得到中间体I-13。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺345.3。

参考例14：中间体I-14的制备

中间体I-13(640mg,1.86mmol)溶于氯化氢甲醇溶液(20mL,4M)中，于室温搅拌反应16小时。反应液浓缩得到粗品中间体I-14。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺245.2。

参考例15：中间体I-15的制备

在20℃下，将N-Boc-反式-4-羟基-L-脯氨酸甲酯(20.0g,81.5mmol)溶于氯化氢二氧六环溶液(200mL,4M)中。反应混合物在20℃搅拌反应8小时后。向反应体系中加入二氯甲烷(200mL)，并在20℃下搅拌1小时。将反应体系过滤，收集固体得到中间体I-15。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ4.65–4.53(m,2H),3.78(s,3H),3.46(dd,J＝12.6,1.6Hz,1H),3.34(dd,J＝12.6,1.2Hz,1H),2.43(ddd,J＝13.9,7.8,1.5Hz,1H),2.23(ddd,J＝18.1,9.3,3.1Hz,1H).

参考例16：中间体I-16的制备

在15℃下，将中间体I-15(9.00g)溶于二氯甲烷(200mL)中，依次加入N-Boc-L-叔亮氨酸(12.60g,54.6mmol)，O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N'-四甲基脲六氟磷酸盐(28.30g，74.4mmol)，N,N-二异丙基乙胺(19.3g，149mmol)。反应混合物在15℃搅拌反应8小时后，将反应体系倒入盐酸溶液(500mL,0.1N)中，用二氯甲烷(500mL×4)萃取。合并有机相，并用氢氧化钠水溶液(500mL，0.1N)和饱和食盐水(300mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经硅胶色谱法纯化得到中间体I-16。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ5.27(d,J＝8Hz,1H),4.69(dd,J＝19.4,10.8Hz,1H),4.52(s,1H),4.20(d,J＝9.5Hz,1H),4.03(d,J＝12Hz,1H),3.74(s,3H),3.12(dd,J＝14.3,7.0Hz,2H),2.41–2.29(m,1H),2.06–1.93(m,1H),1.41(s,9H),1.03(s,9H).

参考例17：中间体I-17的制备

在18℃下，将中间体I-16(10.00g,27.9mmol)溶于四氢呋喃/甲醇/水(300mL，1:1:1)中，加入氢氧化锂一水合物(1.76g,41.9mmol)。反应混合物在18℃搅拌反应8小时。用盐酸溶液(0.1N)调节体系的pH至3-4后倒入水(500mL)中，用乙酸乙酯萃取(500mL×4)。合并有机相，并用饱和食盐水(500mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品用反向柱分离纯化得到中间体I-17。

LC-MS(ESI)[M-H]^-343.2.

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ6.48–6.29(d,J＝8Hz,1H),4.50m,2H),4.30(m,1H),3.89–3.70(m,2H),2.33–2.23(m,1H),2.11–2.00(m,1H),1.43(s,9H),1.02(s,9H).

参考例18：中间体I-18的制备

中间体I-14(200mg)，中间体I-17(245mg,0.712mmol)，N,N-二异丙基乙胺(280mg,2.1mmol)混合于N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中，加入O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N'-四甲基脲六氟磷酸盐(352mg,0.93mmol)，于室温搅拌反应16小时。反应液加水(30mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到中间体I-18。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺571.3。

参考例19：中间体I-19的制备

中间体I-18(400mg,0.7mmol)溶于氯化氢甲醇溶液(20mL,4M)中，于室温搅拌反应16小时。反应液浓缩，得到粗品中间体I-19。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺471.3。

参考例20：中间体I-20的制备

将中间体I-19(100mg)，中间体I-10(60mg)，N,N-二异丙基乙胺(80mg,0.6mmol)混合于二氯甲烷(3mL)中，加入O-(1H-苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟磷酸盐(100mg,0.3mmol)，于室温搅拌反应16小时。反应液加水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到中间体I-20。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺748.4。

参考例21：中间体I-21的制备

中间体I-20(100mg,0.134mmol)溶于甲醇(2mL)中，加入氢氧化锂一水合物(60mg,1.34mmol)的水(1mL)溶液，于40℃反应16小时。反应液用1N盐酸调节pH到5，乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥、过滤。滤液减压浓缩得中间体I-21。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺734.4。

参考例22：中间体I-22的制备

将1-Boc-3-氮杂环丁酮(20.0g,117mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中，然后加入2-甲基-2-丙烷亚磺酰胺(15.6g,129mmol)和钛酸四异丙酯(66.5g,234mmol)。反应混合物在氩气保护下加热回流搅拌反应16小时。反应液降至室温，反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)中，搅拌20分钟，过滤。分出滤液中的有机相，并用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经硅胶色谱法纯化得到中间体I-22。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺275.2。

参考例23：中间体I-23的制备

将对二溴苯(22.60g,95.7mmol)溶于无水四氢呋喃(100mL)，在氩气保护下于-78℃下滴加正丁基锂(59.8mL，1.6M四氢呋喃溶液，95.7mmol)。滴加完毕，反应混合物在-78℃下搅拌反应1小时。向上述溶液中滴加中间体I-22(17.50g,63.8mmol)的无水四氢呋喃(50mL)溶液。滴加完毕，反应混合物在-78℃下搅拌反应30分钟后，缓慢升至室温继续搅拌反应1小时。反应混合物降至0℃，用饱和氯化铵水溶液(50mL)淬灭反应，并用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。合并有机相，饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经硅胶色谱法纯化得到中间体I-23。

LC-MS(ESI)[M+H-56]⁺376.9。

参考例24：中间体I-24的制备

将中间体I-23(4.50g,10.4mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(40mL)中，依次加入4-甲基噻唑(10.30g,104mmol)，无水乙酸钾(2.04g,20.8mmol)和醋酸钯(233mg,1.04mmol)。反应混合物在氩气保护下在100℃下搅拌反应3天。反应液冷却至室温，加入水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经反相柱层析分离纯化得中间体I-24。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺450.2。

参考例25：中间体I-25的制备

将中间体I-24(2.00g,4.45mmol)溶于二氯甲烷(40mL)中，向上述溶液中加入三氟乙酸(12mL)。反应混合物在室温下搅拌反应30分钟后减压浓缩得到粗产品中间体I-25，粗产品未经纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺350.2。

参考例26：中间体I-26的制备

将中间体I-25(2g)溶于甲醇(10mL)中，在搅拌下依次加入甲醛水溶液(37％,0.72mL,8.90mmol)和醋酸(534mg,8.90mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时后，加入氰基硼氢化钠(559mg,8.90mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌反应2小时后减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经硅胶色谱法纯化得到中间体I-26。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺364.1。

参考例27：中间体I-27的制备

将中间体I-26(1.00g,2.75mmol)溶于乙酸乙酯(5mL)中，向上述反应混合物中加入盐酸的甲醇溶液(2M,3mL)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时后减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品中间体I-27，粗产品未经纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺260.2。

参考例28：中间体I-28的制备

将中间体I-27(700mg)和Boc-L-羟脯氨酸(698mg,3.03mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，依次加入O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.25g,3.30mmol)和N,N-二异丙基乙胺(711mg,5.50mmol)。反应混合物在室温下搅拌反1小时，反应混合物用水(20mL)稀释，并用乙酸乙酯(15mL×3)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经反相柱层析分离纯化得到中间体I-28。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺473.2。

参考例29：中间体I-29的制备

将中间体I-28(420mg,0.889mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，向上述溶液中加入盐酸的二氧六环溶液(4M,2mL)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时后，减压浓缩除去有机溶剂得到中间体I-29。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺373.1。

参考例30：中间体I-30的制备

在25℃下，中间体I-29(70mg)溶于二氯甲烷(5mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(73mg,0.56mmol)，N-Boc-L-叔亮氨酸(52mg,0.23mmol)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(86mg,0.23mmol)，室温反应16小时。加水(10mL)，用二氯甲烷(10mL×3)萃取。合并萃取液，用饱和食盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到中间体I-30。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺586.3。

参考例31：中间体I-31的制备

在25℃下，中间体I-30(110.0mg,0.19mmol)，溶于氯化氢的甲醇溶液(5mL,3M)中，室温搅拌5小时。直接浓缩得到中间体I-31。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺486.3。

参考例32：中间体I-32的制备

在25℃下，中间体I-31(80.0mg)溶于二氯甲烷(10mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(64.0mg，0.50mmol)，中间体I-10(58.0mg)和O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸(64.0mg,0.20mmol)，室温反应16小时。加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。合并萃取液，用饱和食盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到中间体I-32。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺763.4。

参考例33：中间体I-33的制备

在25℃下，中间体I-32(70.0mg,0.092mmol)溶于甲醇(4mL)和水(1mL)中，加入氢氧化钠(36.8mg,0.92mmol)，50℃反应16小时。冷却到室温，滴加1N盐酸直到pH＝2。直接冻干，用乙腈(20mL)溶解，过滤，旋干，得到中间体I-33。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺749.40。

参考例34：中间体I-34的制备

将四氢呋喃-3-酮(20.00g,232mmol)溶于二氯甲烷(200mL)中，依次加入2-甲基-2-丙烷亚磺酰胺(30.90g,255mmol)和钛酸四异丙酯(132.00g,464mmol)。反应混合物在氩气保护下回流搅拌反应16小时。反应液降至室温，加入饱和碳酸氢钠水溶液(400mL)，在室温下继续搅拌20分钟，过滤。分出滤液中的有机相，并用饱和食盐水(200mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经硅胶色谱法纯化得到中间体I-34。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺190.3。

参考例35：中间体I-35的制备

将对二溴苯(37.50g,159mmol)溶于无水四氢呋喃(300mL)，在氩气保护下于-78℃下滴加正丁基锂(99.4mL，1.6M四氢呋喃溶液，159mmol)。滴加完毕，反应混合物在-78℃下搅拌反应1小时。向上述溶液中滴加中间体I-34(20.0g,106mmol)的无水四氢呋喃(100mL)溶液。滴加完毕，反应混合物在-78℃下搅拌反应30分钟，缓慢升至室温继续搅拌反应1小时。在0℃下用饱和氯化铵水溶液(100mL)淬灭，并用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。合并有机相，饱和食盐水(100mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经硅胶色谱法纯化得到中间体I-35。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺346.1。

参考例36：中间体I-36的制备

将中间体I-35(6.00g,17.3mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(60mL)中，依次加入4-甲基噻唑(3.43g,34.6mmol)，无水乙酸钾(3.40g,34.6mmol)和醋酸钯(388mg,1.73mmol)。反应混合物在氩气保护下在100℃下搅拌反应24小时。反应液冷却至室温，加入水(150mL)稀释，并用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经反相柱层析分离纯化得到中间体I-36。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺365.1。

参考例37：中间体I-37的制备

将中间体I-36(1.90g,5.21mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)中，加入氯化氢的甲醇溶液(2M,5mL)中。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。将反应液浓缩得到粗产品中间体I-37，粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H-17]⁺244.0。

参考例38：中间体I-38的制备

将中间体I-37(1.90g)和Boc-L-羟脯氨酸(1.33g,5.73mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，依次加入O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N'-四甲基脲六氟磷酸盐(2.38g,6.25mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.34g,10.4mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应液用水(50mL)稀释后，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。合并有机相，饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经反相柱层析分离纯化得到中间体I-38。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺474.2。

参考例39：中间体I-39的制备

将中间体I-38(1.60g,3.38mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入三氟乙酸(4mL)中。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。将反应液浓缩得到粗产品中间体I-39。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺374.2。

参考例40：中间体I-40的制备

将中间体I-39(1.50g)和N-Boc-L-叔亮氨酸(860mg,3.72mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，依次加入O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.54g,4.06mmol)和N,N-二异丙基乙胺(874mg,6.76mmol)。反应液在室温搅拌反应1小时后，加入水(20mL)，混合物经乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(20mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残余物经反相柱层析分离纯化得到中间体I-40。

LCMS(ESI)[M+H]⁺587.2。

参考例41：中间体I-41的制备

将中间体I-40(300mg,0.511mmol)溶于二氯甲烷(3.00mL)中，加入氯化氢的二氧六环溶液(4M,1.5mL)，反应混合物在室温下搅拌反应1小时后，减压浓缩得到粗产品。粗产品经反相柱层析分离纯化得到中间体I-41。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺487.2。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.02–8.95(m,1H),8.70(d,J＝9.4Hz,1H),7.57(d,J＝8.4Hz,2H),7.47–7.39(m,1H),7.38–7.30(m,2H),5.03(d,J＝52.3Hz,1H),4.62–4.50(m,1H),4.29(d,J＝40.7Hz,1H),4.09–3.77(m,5H),3.60–3.49(m,2H),2.64–2.57(m,1H),2.44(d,J＝6.6Hz,3H),2.34–2.26(m,1H),2.09–2.01(m,1H),1.88–1.80(m,1H),0.89(d,J＝5.4Hz,9H).

参考例42：中间体I-42的制备

在室温下，将中间体I-41(50mg,0.103mmol)，中间体I-10(30.34mg,0.103mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(39.86mg,0.309mmol)，O-(1H-苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟磷酸盐(49.59mg,0.1545mmol)，反应混合物在室温下搅拌反应16小时后，将反应体系倒入水(20mL)中，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到中间体I-42。

参考例43：中间体I-43的制备

在室温下，将中间体I-42(60mg,0.078mmol)溶于四氢呋喃/水/甲醇(1:1:1,3mL)的混合溶剂中，再加入一水合氢氧化锂(32.76mg,0.78mmol)，40℃下搅拌过夜后用1M的盐酸调节反应液的pH至6，乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，浓缩，除去有机溶剂得到粗产品中间体I-43。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺750.4。

参考例44：中间体I-44的制备

在25℃下，向微波管中依次加入6-溴-1,3-苯并噻唑(2.00g,9.344mmol)，N,N-二甲基甲酰胺(20mL)，氰化锌(1.65g,14.01mmol)和四(三苯基膦)钯(1.07g,0.93mmol)。用氮气流吹1分钟换气，微波加热到100℃反应1小时。加水(50mL)，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。合并萃取液，用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。残余物经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-44。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺161.0。

参考例45：中间体I-45的制备

在25℃下，中间体I-44(2.20g,13.73mmol)溶于***(100mL)中，加入钛酸四异丙酯(4.30g,15.11mmol)，用干冰/乙酸乙酯浴冷却到-50℃。滴加1M的乙基溴化镁的四氢呋喃溶液(30.2mL,30.21mmol)。滴加完毕后，-50℃反应0.5小时，去掉干冰浴，自然升温到室温，继续反应0.5小时，滴加三氟化硼***络合物(4.30g,30.21mmol)，室温反应16小时。滴加1M盐酸直到pH＝1。加水(50mL)，分液。保留水相，水相用1N氢氧化钠溶液调pH＝9，再用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。合并萃取液，用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。残余物经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-45。

LC-MS(ESI)[M-NH₃+H]⁺174.1。

参考例46：中间体I-46的制备

在25℃下，中间体I-45(1.00g,5.26mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，依次加入Boc-L-羟脯氨酸(1.46g,6.31mmol)，N,N-二异丙基乙胺(2.04g,15.78mmol)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(2.40g,6.31mmol)。室温反应5小时。加水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。残余物经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-46。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺404.2。

参考例47：中间体I-47的制备

在25℃下，中间体I-46(850.00mg,2.11mmol)溶于甲醇(5mL)，加入氯化氢的二氧六环溶液(4M,5mL,20.00mmol)，室温反应5小时。直接旋干得到中间体I-47。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺304.0。

参考例48：中间体I-48的制备

在25℃下，中间体I-47(850.00mg)溶于二氯甲烷(20mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(818.15mg,6.33mmol)，中间体7(585.16mg,2.53mmol)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(962.01mg,2.53mmol)，室温反应5小时。加水(10mL)，用二氯甲烷(10mL×3)萃取。合并萃取液，用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。残余物经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-48。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺517.2。

参考例49：中间体I-49的制备

在25℃下，中间体I-48(300.00mg,0.58mmol)，溶于氯化氢的甲醇溶液(3M,5mL,15.00mmol)中，室温搅拌5小时。直接浓缩得到中间体I-49。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺417.2。

参考例50：中间体I-50的制备

在25℃下，中间体I-49(250.00mg)溶于二氯甲烷(10mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(232.65mg,1.80mmol)，中间体I-10(212.64mg)和O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸(231.22mg,0.72mmol)，室温反应3小时。加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。残余物经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-50。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺694.3。

参考例51：中间体I-51的制备

在25℃下，中间体I-50(230.00mg,0.33mmol)溶于甲醇(4mL)和水(1mL)中，加入一水合氢氧化锂(139.31mg,3.32mmol)，50℃反应16小时。冷却到室温，滴加1N盐酸直到pH＝2。加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。合并萃取液，用饱和食盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得到中间体I-51。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺680.2。

参考例52：中间体I-52的制备

室温下，将1,4-丁二醇(20g,221.9mmol)，溴乙酸叔丁酯(30g,153.8mmol)和四丁基氯化铵(4.5g,16.2mmol)溶于二氯甲烷(400mL)中，然后加入氢氧化钠水溶液(300mL,35％w/w)，反应混合物室温搅拌过夜。混合物倒入水中(400mL)，分出有机相，水相用二氯甲烷(300mL×2)萃取。合并有机相，用水(200mL)和饱和食盐水(200mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩得到粗产品，粗产品经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-52。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ3.95(s,2H),3.72–3.64(m,2H),3.59–3.54(m,2H),2.05(s,1H),1.77–1.65(m,4H),1.48(s,9H).

参考例53：中间体I-53的制备

室温下，将中间体I-52(9.587g,46.93mmol)和三乙胺(23.74g,234.6mmol)溶于二氯甲烷(150mL)中。将反应混合物降温至0℃，然后滴加对甲苯磺酰氯(17.89g,93.84mmol)的二氯甲烷(53.0mL)溶液。滴加完毕，反应混合物缓慢升至室温并搅拌反应过夜。反应混合物中加入水(50mL)稀释，并用二氯甲烷(50.0mL×3)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(50.0mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩得到粗产品，粗产品经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-53。

LCMS(ESI)[M+H-56]⁺303.1。

参考例54：中间体I-54的制备

室温下，将中间体I-53(11.82g,33.0mmol)和4-羟基苯甲酸苯甲酯(9.04g,39.6mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(150mL)中，然后加入碳酸钾(9.12g,66.0mmol)。反应混合物在70℃搅拌反应过夜。冷却至室温，加入水(300mL)稀释，并用乙酸乙酯萃取(100mL×3)。合并有机相，用水(100mL)和饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩得到粗产品，粗产品经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-54。

LCMS(ESI)[M+NH₃+H]⁺432.2。

参考例55：中间体I-55的制备

室温下，将中间体I-54(5.00g,12.1mmol)溶于甲醇(50.0mL)中，再加入钯碳(0.5g,10％w/w)，反应混合物在氢气氛围下于室温搅拌过夜反应。反应混合物经过滤，滤液减压浓缩得到中间体I-55，未经纯化直接用于下一步反应。

参考例56：中间体I-56的制备

在室温下，将中间体I-55(70.00mg)，试剂1(54.75mg,0.20mmol)和溶于二氯甲烷(3mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(77.40mg,0.6mmol)，O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯(96.30mg,0.30mmol)，反应混合物在室温下搅拌反应16小时后，将反应体系倒入水(20mL)中，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-56。

LC-MS(ESI)[M+H-56]⁺529.6。

参考例57：中间体I-57的制备

在室温下，将中间体I-56(80.00mg,0.13mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，慢慢加入三氟乙酸(1mL)，室温下搅拌90分钟。将反应液浓缩，除去有机溶剂得到粗产品中间体I-57。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

参考例58：中间体I-58的制备

6-溴-3-甲基-2H-吲唑(1.00g,4.8mmol)、氰化锌(840mg,7.1mmol)和四三苯基膦钯(270mg,0.24mmol)混合于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，在微波反应器中，于100℃下，搅拌反应1小时。反应混合物加乙酸乙酯(50mL)和水(20mL)稀释，过滤，滤液用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥、过滤、浓缩，残余物通过硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-58。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺:158.0。

参考例59：中间体I-59的制备

中间体I-58(80mg,0.51mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(86mg,1.0mmol)和对甲苯磺酸一水合物(10mg,0.05mmol)混合于二氯甲烷(3mL)中，于室温下搅拌反应4小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)，用乙酸乙酯萃取(50mL×2)，合并有机相，用无水硫酸钠干燥、过滤、浓缩，残余物通过硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-59。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺:242.2。

参考例60：中间体I-60的制备

氮气保护下，在-60℃下，向中间体I-59(200mg,0.84mmol)和钛酸四异丙酯(264mg,0.92mmol)的无水四氢呋喃(6mL)溶液中滴加乙基溴化镁(1.86mL,1.8mmol,1.0Min THF)，于室温下搅拌反应1小时。在0℃下，向反应液中加入三氟化硼***(240mg,1.7mmol)，于室温下搅拌16小时。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(5mL)，用二氯甲烷(50mL×2)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，残余物通过硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-60。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺272.2。

参考例61：中间体I-61的制备

在25℃下，中间体I-16(395.00mg,1.10mmol)溶于氯化氢的甲醇溶液(3M,5mL)，室温搅拌过夜。直接旋干得到中间体I-61。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

参考例62：中间体I-62的制备

在室温下，将中间体I-8(740mg,3.42mmol)和4-氨基苯甲酸苄酯(777.59mg,3.42mmol)溶于二氯乙烷中，再依次加入乙酸(307.8mg，5.13mmol)和醋酸硼氢化钠(1.45g,6.84mmol)，反应混合物在室温下搅拌反应16小时后，将反应体系倒入水(50mL)中，再加入饱和碳酸氢钠溶液(30mL)，用二氯甲烷(50mL×3)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品。粗产品经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-62。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺428.3。

参考例63：中间体I-63的制备

在室温下，将中间体I-62(300mg,0.702mmol)溶于甲醇(5mL)中，加入10％的钯碳(50mg)。反应混合物在室温氢气环境下搅拌反应1小时后，过滤掉钯碳。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品中间体I-63。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

参考例64：中间体I-64的制备

在室温下，将中间体I-63(180mg)，试剂1(148.72mg,0.533mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(206.27mg,1.599mmol)，O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯(256.64mg,0.80mmol)，反应混合物在室温下搅拌反应16小时后，将反应体系倒入水(20mL)中，用二氯甲烷(20mL×3)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品，经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-64。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺598.4。

参考例65：中间体I-65的制备

在室温下，将中间体I-64(230mg,384.5mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，慢慢加入三氟乙酸(1mL)，室温下搅拌90分钟。将反应液浓缩，除去有机溶剂得到粗产品中间体I-65。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺542.3。

参考例66：中间体I-66的制备

在室温下，将中间体I-61(250mg)，中间体I-65(551.68mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(328.95mg,2.55mmol)，O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯(409.28mg,1.28mmol)，反应混合物在室温下搅拌反应16小时后，将反应体系倒入水(20mL)中，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品，经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-66。

参考例67：中间体I-67的制备

在室温下，将中间体I-66(370.00mg,0.47mmol)溶于四氢呋喃/甲醇/水的混合溶剂(6mL,1:1:1)中，再加入一水合氢氧化锂(198.45mg,4.73mmol)，40℃下搅拌过夜后用1摩尔的盐酸调节反应液的pH至5～6，再用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，并用饱和食盐水(20mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品中间体I-67。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。LC-MS(ESI)[M+H]⁺768.4。

参考例68：中间体I-68的制备

将中间体I-60(30.00mg,0.11mmol)、中间体I-67(85.00mg)、O-苯并三氮唑-N,N,N′,N′-四甲基脲四氟硼酸酯(53.00mg,0.17mmol)和N,N-二异丙基乙胺(43.00mg,0.33mmol)混合于二氯甲烷(2mL)中，于室温下搅拌反应16小时。反应液浓缩，经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-68。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺1021.6。

参考例69：中间体I-69的制备

在室温下，将中间体I-57(1.80g)，中间体I-61(0.88g)溶于二氯甲烷(30mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(1.32g,10.21mmol)，O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯(1.64g,5.10mmol)，反应混合物在室温下搅拌反应16小时后，将反应体系倒入水(20mL)中，用二氯甲烷(50mL×3)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法分离纯化得到中间体I-69。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺769.4。

参考例70：中间体I-70的制备

在室温下，将中间体I-69(350.00mg,0.45mmol)溶于四氢呋喃/甲醇/水的混合溶剂(9mL,1:1:1)中，再加入一水氢氧化锂(190.90mg,4.6mmol)，40℃下搅拌过夜后用1摩尔的盐酸调节反应液的pH至5～6，再用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，并用饱和食盐水(20mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品中间体I-70。粗产品未经进一步纯化直接用于下一步反应。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺755.5。

实施例的制备：

实施例1：化合物1的制备

将中间体I-12(100mg)，试剂1(40mg,0.14mmol)，N,N-二异丙基乙胺(55mg,0.42mmol)混合于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，加入O-(1H-苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟磷酸盐(67

mg,0.21mmol)，于室温搅拌反应16小时。反应液加水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(15mL×2)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到化合物1。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺980.4。

¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄)δ8.81(s,1H),7.71(d,J＝8.7Hz,1H),7.64–7.59(m,2H),7.39–7.32(m,4H),7.11(d,J＝2.4Hz,1H),6.96(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.62–6.56(m,2H),4.70(s,1H),4.58(dd,J＝9.4,7.5Hz,1H),4.53–4.48(m,1H),4.26(s,1H),4.11(s,1H),4.03–3.92(m,2H),3.87(d,J＝10.8Hz,1H),3.79(dd,J＝11.0,3.7Hz,1H),3.59(t,J＝6.2Hz,2H),3.16(t,J＝6.9Hz,2H),2.43(s,3H),2.29–2.18(m,1H),2.09–2.00(m,1H),1.76–1.65(m,4H),1.57(ddd,J＝11.2,8.7,4.9Hz,2H),1.40–1.27(m,4H),1.26(s,6H),1.20(s,6H),1.03(s,9H).

实施例2：化合物2的制备

将中间体I-21(70mg)，试剂1(27mg,0.095mmol)，N,N-二异丙基乙胺(40mg,0.3mmol)混合于二氯甲烷(2mL)中，加入O-(1H-苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟磷酸盐(45mg,0.143mmol)，于室温搅拌反应16小时。反应液加水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(15mL×2)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩，经硅胶色谱法纯化得到化合物2。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺994.5。

¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄)δ8.83(s,1H),7.71(d,J＝8.7Hz,1H),7.63(dd,J＝8.4,3.9Hz,4H),7.40(d,J＝8.1Hz,2H),7.32(d,J＝9.0Hz,1H),7.12(d,J＝2.4Hz,1H),6.97(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.60(d,J＝8.5Hz,2H),4.68–4.61(m,2H),4.47(s,1H),4.27(s,1H),4.13–4.09(m,1H),3.97(d,J＝5.1Hz,2H),3.83(s,1H),3.74(d,J＝3.7Hz,1H),3.59(t,J＝6.2Hz,2H),3.17(t,J＝6.8Hz,2H),2.56(t,J＝8.6Hz,4H),2.46(s,3H),2.20(dd,J＝15.0,8.1Hz,2H),2.03–1.96(m,2H),1.73–1.66(m,4H),1.57(d,J＝8.9Hz,2H),1.26(s,6H),1.21(s,6H),0.98(s,9H).

实施例3：化合物3的制备

在25℃下，中间体I-33(70.0mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，依次加入试剂1(31.0mg,0.11mmol)，N,N-二异丙基乙胺(36mg,0.28mmol)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(42.0mg,0.11mmol)，室温反应3小时。加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。合并萃取液，用饱和食盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，粗产品经制备HPLC纯化得化合物3。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺1009.40。

¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄)δ8.74(s,1H),7.67(d,J＝8.4Hz,2H),7.62(d,J＝8.7Hz,1H),7.56–7.48(m,2H),7.37–7.30(m,2H),7.03(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.56–6.43(m,2H),4.60–4.51(m,2H),4.43–4.36(m,1H),4.18(s,1H),4.02(s,1H),3.88(d,J＝4.4Hz,2H),3.79–3.61(m,4H),3.59–3.44(m,4H),3.07(t,J＝6.9Hz,2H),2.38–2.34(m,6H),2.23–2.12(m,1H),2.02–1.91(m,1H),1.66–1.42(m,6H),1.17(s,6H),1.11(s,6H),0.88(s,9H).

实施例4：化合物4的制备

在室温下，将中间体I-43(35mg)，试剂1(13.01mg,0.046mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(17.802mg,0.138mmol)，O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯(22.15mg,0.576mmol)，反应混合物在室温下搅拌反应16小时后，将反应体系倒入水(20mL)中，用二氯甲烷(20mL×3)萃取。合并有机相，并用饱和食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液减压浓缩除去有机溶剂得到粗产品，经制备HPLC纯化得化合物4。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺1010.4。

¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄)δ8.84(s,1H),7.69-7.75(m,1H),7.60(s,4H),7.38-7.44(m,2H),7.11-7.15(m,1H),6.95-7.00(m,1H),6.55-6.63(m,2H),4.68(s,2H),4.45-4.51(m,1H),4.24-4.31(m,1H),4.06-4.13(m,4H),3.97-4.04(m,3H),3.81-3.90(m,1H),3.69-3.78(m,1H),3.56-3.64(m,2H),3.11-3.21(m,3H),2.60-2.70(m,1H),2.46(s,3H),2.16-2.34(m,2H),1.96-2.08(m,1H),1.70-1.76(m,3H),1.53-1.63(m,2H),1.27(s,6H),1.21(s,6H),1.00(s,9H).

实施例5：化合物5的制备

在25℃下，中间体I-51(200.00mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(112.45mg,0.87mmol)，试剂1(97.57mg,0.35mmol)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(133.08mg,0.35mmol)，室温反应3小时。加水(10mL),用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，经制备HPLC纯化得化合物5。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺940.4。

1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.98(s,1H),8.13(d,J＝1.9Hz,1H),7.83(d,J＝8.7Hz,1H),7.62(d,J＝8.7Hz,1H),7.54–7.45(m,2H),7.26–7.16(m,2H),7.03(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.56–6.40(m,2H),4.63–4.58(m,1H),4.55–4.44(m,2H),4.40(s,1H),4.17(s,1H),4.01(d,J＝8.9Hz,1H),3.96–3.84(m,2H),3.82–3.64(m,2H),3.52(t,J＝6.2Hz,2H),3.07(t,J＝6.9Hz,2H),2.17–2.06(m,1H),1.98–1.91(m,1H),1.66–1.50(m,4H),1.22–1.18(m,4H),1.17(s,6H),1.11(s,6H),0.92(s,9H).

实施例6：化合物6的制备

在25℃下，中间体I-57(150.00mg)溶于二氯甲烷(5mL)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(108.57mg,0.84mmol)，中间体I-49(116.63mg)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(129.28mg,0.34mmol)，室温反应3小时。加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，经制备HPLC纯化得化合物6。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺927.5。

¹H NMR(400MHz,Methanol-d₄)δ8.97(s,1H),8.15(d,J＝1.9Hz,1H),7.83(d,J＝8.6Hz,1H),7.70–7.64(m,2H),7.62(d,J＝8.8Hz,1H),7.20(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H),7.03(d,J＝2.5Hz,1H),6.90–6.84(m,3H),4.60(s,1H),4.48(dd,J＝9.5,7.4Hz,1H),4.40(q,J＝2.8,2.1Hz,1H),4.18(s,1H),4.06–4.00(m,3H),3.98–3.87(m,2H),3.77(d,J＝11.0Hz,1H),3.69(dd,J＝11.0,3.7Hz,1H),3.63–3.54(m,2H),2.16–2.06(m,1H),1.98–1.86(m,3H),1.85–1.75(m,2H),1.37–1.19(m,4H),1.18(s,6H),1.12(s,6H),0.93(s,9H).

实施例7：化合物7的制备

将中间体I-68(70.00mg,0.069mmol)和三氟乙酸(1mL)混合于二氯甲烷(2mL)中，于室温搅拌反应16小时。反应液浓缩，经制备HPLC纯化得化合物7。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺937.6。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.33(s,1H),8.72(s,1H),7.84(d,J＝8.7Hz,1H),7.57(d,J＝8.3Hz,2H),7.43(d,J＝8.5Hz,1H),7.29(dd,J＝16.9,9.4Hz,2H),7.21–7.10(m,2H),6.96–6.90(m,1H),6.82(d,J＝8.6Hz,1H),6.50(d,J＝8.2Hz,2H),6.12(s,1H),5.11(d,J＝3.4Hz,1H),4.48(d,J＝9.5Hz,1H),4.29(m,3H),3.97(d,J＝9.2Hz,1H),3.87(s,2H),3.55(m,1H),3.43(m,2H),3.00(d,J＝6.3Hz,2H),2.35(s,3H),1.93(m,1H),1.81(m,1H),1.53(m,4H),1.41–1.35(m,2H),1.19(s,2H),1.14(s,6H),1.08(s,2H),1.04(s,6H),0.85(s,9H).

实施例8：化合物8的制备

在室温下，将中间体I-70(350.00mg)，4-(1-氨基环丙基)苯甲腈盐酸盐(90.20mg,0.46mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(179.67mg,1.39mmol)，O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯(223.18mg,0.70mmol)，反应混合物在室温下搅拌反应16小时后，将反应体系倒入水(30mL)中，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，先用硅胶色谱法分离纯化得粗品，再经制备HPLC纯化得化合物8。

LC-MS(ESI)[M+H]⁺895.6。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.91(s,1H),7.91(d,J＝8.75Hz,1H),7.82(d,J＝8.76Hz,2H),7.66(d,J＝9.26Hz,1H),7.61(d,J＝8.51Hz,2H),7.46(d,J＝9.51Hz,1H),7.38(d,J＝8.63Hz,2H),7.21(d,J＝2.38Hz,1H),7.00(d,J＝8.88Hz,3H),5.18(d,J＝3.38Hz,1H),4.55(d,J＝9.63Hz,1H),4.27-4.45(m,3H),4.02-4.13(m,3H),3.96(s,2H),3.60-3.64(m,2H),3.56(t,J＝6.25Hz,2H),1.94-2.06(m,2H),1.77-1.92(m,3H),1.66-1.77(m,2H),1.25-1.34(m,3H),1.22(s,6H),1.12(s,6H),0.90-0.95(s,9H).

实验例1：雄激素受体In-Cell-Western测定

该测定在Lncap细胞中对化合物性能进行了评估。根据下述测定步骤，通过In-Cell-Western对胞内的雄激素受体进行测定。

在poly-D-Lysin预处理的96孔板细胞培养板(Corning 3599)中，将LNcap细胞以100μL/孔体积，以30,000个细胞/孔接种在LNcap细胞测定培养基中[含酚红的DMEM(Gibco目录号：11995065)；胎牛血清FBS(Gibco目录号：10099141C)]。将细胞培养至少两天。

1.首先使用化合物处理细胞。使用DMSO和细胞培养基将化合物进行梯度稀释，使得细胞培养板中所含DMSO稀释到0.5％。根据下述方案使用聚丙烯平板:

(1)(i)在DMSO中制备200×储备液平板；(ii)将10mM储备液用DMSO进行1：4稀释(10μL储备液+40μL DMSO)＝2000μM进入第2行；(iii)从第2行至第9行进行1：4(10μLprotac+40μL DMSO)梯度稀释，保留第1行用于2000μM参考化合物，第10行用于DMSO。(iv)共8个浓度(在该200×平板上的终浓度为2000μM,400μM,80μM等)。(2)(i)在培养基中制备3×储备液；(ii)将3μL 200×储备液转移至197μL培养基中(使用12通道移液管，从第1行至10行)，即3×储备液平板。(iii)混合均匀该储备液平板。(3)(i)将Vcap细胞的培养基进行更换新鲜培养基，100μL体积培养基。(ii)将混合均匀的3×储备液转移至细胞培养板中(使用12通道移液管，从第1行至10行，转移50μL储备液)。(iii)细胞培养24小时。

2.检测化合物处理后细胞内雄激素受体的表达水平，根据下述方法进行测定。

(1)(i)在细胞培养板中加入等体积8％多聚甲醛，进行细胞固定。弃掉细胞板中固定液，并用PBS清洗三遍。(ii)制备Triton溶液(将储备液稀进行1：1000稀释)。弃掉细胞板中溶液，每孔加入200μL体积Triton稀释液。(iii)制备2×blocking溶液(10×blocking储备液进行1：4稀释)。弃掉细胞板中溶液，每孔加入100μL体积2×blocking溶液。(iv)制备一抗溶液(Androgen receptor Rabbbit mAb,Cell Signaling Technology目录号：5153；1：1000稀释)。弃掉细胞板中溶液，每孔加入100μL体积一抗稀释液，4度孵育过夜。(v)弃掉一抗溶液，使用1×Wash buffer对细胞板进行清洗。(vi)制备二抗溶液(Goat anti RabbitIgG(H+L)Secondary Antibody,HRP，Thermo目录号：31460；1:5000稀释)，每孔加入100μL体积二抗稀释液进行孵育。(vii)弃掉细胞板中二抗溶液，使用1×Wash buffer对细胞板进行清洗。(viii)制备TMB显色液(BD目录号：550534)，每孔加入100μL体积显色液。(ix)每孔加入50μL体积stop溶液(BD目录号：550534)(x)通过EnVision读取OD 450nm和570nm处的吸收值。(2)(i)对每孔中的细胞数进行标准化分析。弃掉细胞板内溶液，wash buffer清洗三遍。(ii)制备Janus稀释液(1:3稀释)。(iii)每孔加入50μL体积稀释液进行孵育。(iv)将板内溶液弃掉，去离子水清洗。(v)配置1M盐酸(浓盐酸以1：24进行稀释)，每孔加入200μL体积盐酸稀释液处理细胞。(vi)用Flex Station读取OD 595nm处的吸收值。(vii)根据所得到的读值，计算出所测试化合物的对雄激素受体表达的影响。

实验结果如表1所示。

表1：化合物对LnCaP细胞内雄激素受体降解活性的评价

化合物编号	DC<sub>50</sub>(nM)	D<sub>max</sub>(％)	化合物编号	DC<sub>50</sub>(nM)	D<sub>max</sub>(％)
						1	17	95	2	107	87
3	162	91	4	25	93
						5	14	99	6	11	108
7	29	94	8	9.75	106

D_max：对LnCaP细胞内AR的最大降解程度。DC₅₀:实现LnCaP细胞内AR最大降解程度一半时，所需要的化合物浓度。

实验例2：测试化合物对LNcap FGC细胞增殖抑制作用

肿瘤细胞系LNcap FGC(ATCC目录号CRL-1740)，分别使用含10％FBS(Gibco目录号10099-141C)的RPMI 1640(Gibco目录号11875-093)和DMEM(Gibco目录号11965-092)培养基培养。

测定方法如下：

LNcap FGC细胞以400个/孔的细胞密度，20μL/孔的体积种于384孔板(PerkinElmer目录号6007460)中，放入二氧化碳培养箱(Thermo)中培养过夜后以5μL/孔的体积加入配置好的不同浓度的化合物溶液，同时设相应的溶媒对照，继续放入培养箱培养6天后，将细胞板及其内容物平衡至室温，每孔加入25μL Cell Titer Glor(Promega目录号G7573)试剂，振荡混匀后避光孵育10-30分钟，用Envision酶标仪(PerkinElmer)检测信号值。

实验数据处理方法：

通过板上溶媒对照孔计算化合物处理孔的百分比抑制率，使用GraphPad prism拟合不同浓度相对应的百分比抑制率数据通过4参数非线性逻辑公式计算出IC₅₀值。

表2：化合物对LnCaP细胞增殖抑制活性的评价

化合物编号	IC<sub>50</sub>(nM)	E<sub>max</sub>(％)	化合物编号	IC<sub>50</sub>(nM)	E<sub>max</sub>(％)
						1	74	74	2	82	77
3	727	84	4	119	76
						5	18.5	79	6	4.5	81
7	20	68	8	3.5	82

E_max：对LnCaP细胞细胞增殖抑制的最大程度。IC₅₀:实现对LnCaP细胞增殖抑制最大程度的一半，所需要的化合物浓度。