CN112353774B - 一种那西肽风味咀嚼片及其制备方法及其在犬魏氏梭菌病上的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种那西肽风味咀嚼片及其制备方法及其在犬魏氏梭菌病上的用途，配方包括：按照质量百分比包括：那西肽1％‑10％，酸化剂5％，稀释剂30％‑40％，粘结剂1％，填充剂30％‑40％，崩解剂2％‑10％，矫味剂5％‑20％，包衣剂1％‑5％；本发明的配方中添加了酸化剂，制备成酸性粘结剂，使那西肽主成分的稳定性大大提高，利于生产质量可控的那西肽咀嚼片，且可以较为显著的延长产品有效期；本发明使用羧甲基乙基纤维素水性体系进行包衣，提高了那西肽的溶解度和生物利用度；经过动物试验表明：本发明生产的那西肽风味咀嚼片，可以有效治疗犬魏氏梭菌病。

Description

一种那西肽风味咀嚼片及其制备方法及其在犬魏氏梭菌病上 的用途

技术领域

本发明涉及医药领域，特别是一种那西肽风味咀嚼片及其制备方法及其在犬魏氏梭菌病上的用途。

背景技术

魏氏梭菌可出现在人畜粪便、土壤、水、和尘埃中，属典型的条件性致病菌；本病多数在秋末冬初尤其在气候变化异常，阴雨潮湿的条件下流行；本病不分年龄性别品种均可发病。魏氏梭菌可感染多种动物，如犬急性肠炎、牛肠炎、仔猪坏死性肠炎、兔子肠炎等，近年来国内发生家畜碎死症多与该菌有关，发病急、病程短、无任何前期症状而突然死亡，而且死亡率极高。

魏氏梭菌引发的犬魏氏梭菌病造成犬的急性死亡在国内时有发生，并有上升的趋势。由于人们缺少对本病的认识，在疾病的预防和工作人员的心理上产生了一定压力。

犬魏氏梭菌病是由魏氏梭菌(又称:产气荚膜梭菌)引起犬的急性败血症，以犬的多器官出血、水肿、急性病变和碎死为特征。根据魏氏梭菌合成分泌的主要毒素，可以将其分为A，B，C，D，E型，其中A型能够感染人，形成气肿疽。B、C、D型与动物的肠道感染关系密切。感染犬的主要为A型和C型。

那西肽可以有效预防及治疗犬魏氏梭菌病，但对于患病动物来说，治疗药物的适口性问题非常关键，因为不能够强迫喂药增加对动物的应激，药物的适口性不佳，会直接影响药物的治疗效果，导致治疗失败。

为改善药物的适口性，现在犬用药制剂更倾向于制成风味咀嚼片，外观、气味均为肉类食品相近，大大改善药物的适口性。但是这使药片的崩解、溶出增加了难度；且现有技术的风味咀嚼片加入的大部分矫味剂，一般都会对主药成分的稳定性存在较大影响，特别是那西肽作为一种发酵类抗生素，在环境中长期存放，极易造成降解，因此，解决那西肽咀嚼片的稳定性问题也非常关键。

市场需要一种适口性较好，能够快速溶出有效成分，质量稳定的那西肽风味咀嚼片，本发明解决这样的问题。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种那西肽风味咀嚼片及其制备方法及其在犬魏氏梭菌病上的用途，食用时适口性较好，对动物胃肠刺激小，能够快速崩解快速溶出有效成分，质量稳定。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种那西肽风味咀嚼片，配方包括：按照质量百分比包括：那西肽1％-10％，酸化剂5％，稀释剂30％-40％，粘结剂1％，填充剂30％-40％，崩解剂2％-10％，矫味剂5％-20％，包衣剂1％-5％。

前述的一种那西肽风味咀嚼片，酸化剂包括：柠檬酸，磷酸，乳酸，苹果酸，苯甲酸。

前述的一种那西肽风味咀嚼片，酸化剂为柠檬酸和磷酸；柠檬酸、磷酸重量比为1:1。

前述的一种那西肽风味咀嚼片，崩解剂包括：羧甲基淀粉钠，交联聚乙烯吡咯烷酮，聚维酮。

根据权利要求1所述的一种那西肽风味咀嚼片，粘结剂包括：羟丙基甲级纤维素，麦芽糊精，环糊精。

前述的一种那西肽风味咀嚼片，包衣剂包括：羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯，醋酸纤维素邻苯二甲酸酯，聚丙烯酸树脂，羧甲基乙基纤维素和交联聚乙烯吡咯烷酮。

前述的一种那西肽风味咀嚼片，矫味剂包括：人造鸡肉香精，人造牛肉香精，酵母粉。

前述的一种那西肽风味咀嚼片的用途，用于犬魏氏梭菌病。

一种那西肽风味咀嚼片的制备方法，包括如下步骤：

步骤一，按配方准备材料，配方按照质量百分比包括：那西肽1％-10％，酸化剂5％，稀释剂30％-40％，粘结剂1％，填充剂30％-40％，崩解剂2％-10％，矫味剂5％-20％，包衣剂1％-5％；

步骤二，将那西肽、稀释剂、填充剂、崩解剂、粘合剂、矫味剂粉碎后分别过筛过滤；

步骤三，将那西肽、稀释剂、崩解剂混合得到混合物，将粘结剂和酸化剂共同配置得到粘结液，将混合物和粘结液混合制成软材，过筛制成颗粒，40℃-45℃条件下干燥后再过筛得到整粒；

步骤四，将整粒用包衣剂进行包衣，然后过筛取整粒，得到包衣后颗粒；

步骤五，将包衣后颗粒与填充剂、矫味剂混合均匀，压片得到那西肽风味咀嚼片。

前述的一种那西肽风味咀嚼片的制备方法，包衣采用流化床包衣。

本发明的有益之处在于：

本发明的配方中添加了酸化剂，制备成酸性粘结剂，使那西肽主成分的稳定性大大提高，利于生产质量可控的那西肽咀嚼片，且可以较为显著的延长产品有效期；

本发明将含有那西肽原料颗粒进行包衣，这样可以有效去除口腔咀嚼时的苦味口感的刺激性；且使用羧甲基乙基纤维素水性体系进行包衣，在口腔中正常咀嚼以及进入胃部后包衣在那西肽颗粒上保持完整，只有进入肠道环境内才释放出活性成分，提高了那西肽的溶解度和生物利用度；

经过动物试验表明：本发明生产的那西肽风味咀嚼片，可以有效治疗犬魏氏梭菌病；

本发明使用人造牛肉香精等作为矫味剂，提高了产品的适口性，便于临床推广；

本发明的制备工艺简单，适宜于工业大规模生产。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作具体的介绍。

一种那西肽风味咀嚼片，配方包括：按照质量百分比包括：那西肽1％-10％，酸化剂5％，稀释剂30％-40％，粘结剂1％，填充剂30％-40％，崩解剂2％-10％，矫味剂5％-20％，包衣剂1％-5％。

酸化剂包括：柠檬酸，磷酸，乳酸，苹果酸，苯甲酸；作为一种优选，酸化剂为柠檬酸和磷酸；柠檬酸、磷酸重量比为1:1。

稀释剂包括：微晶纤维素，淀粉糖苷，壳聚糖。作为一种优选，稀释剂为微晶纤维素。

填充剂包括：大豆蛋白粉，玉米淀粉，小麦蛋白粉，玉米粉。作为一种优选，填充剂为玉米淀粉。

崩解剂包括：羧甲基淀粉钠，交联聚乙烯吡咯烷酮，聚维酮。作为一种优选，崩解剂为交联聚乙烯吡咯烷酮。

粘结剂包括：羟丙基甲级纤维素，麦芽糊精，环糊精。作为一种优选，粘结剂优选羟丙基甲基纤维素。

包衣剂包括：羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯，醋酸纤维素邻苯二甲酸酯，聚丙烯酸树脂，羧甲基乙基纤维素和交联聚乙烯吡咯烷酮。作为一种优选，包衣剂为羧甲基乙基纤维素。

矫味剂包括：人造鸡肉香精，人造牛肉香精，酵母粉。作为一种优选，矫味剂为人造牛肉香精。

需要说明的是：包括的含义为其中的一种或多种混合使用。

一种那西肽风味咀嚼片的制备方法，包括如下步骤：

步骤一，按配方准备材料，配方按照质量百分比包括：那西肽1％-10％，酸化剂5％，稀释剂30％-40％，粘结剂1％，填充剂30％-40％，崩解剂2％-10％，矫味剂5％-20％，包衣剂1％-5％；

步骤二，将那西肽、稀释剂、填充剂、崩解剂、粘合剂、矫味剂粉碎后分别过筛过滤；作为一种优选，过筛采用80目筛。

步骤三，将那西肽、稀释剂、崩解剂混合得到混合物，将粘结剂和酸化剂共同配置得到粘结液，将混合物和粘结液混合制成软材，过筛制成颗粒，40℃-45℃条件下干燥后再过筛得到整粒；作为一种优选，过40目筛制成颗粒，40℃-45℃条件下干燥后再过40目和65目筛整粒，除去粗颗粒和细粉。

步骤四，将整粒用包衣剂进行包衣，然后过筛取整粒，得到包衣后颗粒；作为一种优选，包衣工艺采用流化床包衣，作为一种优选，过40目和65目筛取整粒。

步骤五，将包衣后颗粒与填充剂、矫味剂混合均匀，压片得到那西肽风味咀嚼片。

按照如下实施例制备出样品进行实验验证:

先制备出粘结液和包衣液备用；

1，粘结液的制备A(以制备1000克那西肽咀嚼片为例)

量取250ml纯化水，加入10g羟丙基甲基纤维素，搅拌均匀，加入25克柠檬酸和25克磷酸，充分搅拌均匀，既得粘结液A，待用。

2，粘结液的制备B(以制备1000克那西肽咀嚼片为例)

量取250ml纯化水，加入10g羟丙基甲基纤维素，搅拌均匀，既得粘结液B，待用。

3，包衣液的制备

配制100ml 20％乙醇-水溶液，加入5g羧甲基乙基纤维素，搅拌均匀，既得包衣液。

实施例1

本实施例制备本发明的那西肽风味咀嚼片，由如表1中质量百分数的原料制成：

表1本发明那西肽风味咀嚼片各组分及其含量

制备方法：将那西肽、微晶纤维素、玉米淀粉、交联性聚乙烯吡咯烷酮和人造牛肉香精分别过80目筛，按比例取过筛后的那西肽、微晶纤维素、交联性聚乙烯吡咯烷酮，混合均匀，加入事先制备得到的粘结液A，制软材，过40目筛制粒，在45℃条件下干燥，过40目和65目筛整粒，除去粗颗粒和细粉，即得颗粒；将上述颗粒用事先制备得到的包衣液进行流化床包衣，包衣增重5％，然后过40目和65目筛整粒，除去粗颗粒及细粉，即得包衣后颗粒；将包衣颗粒与玉米淀粉、人造牛肉香精混合，压片。

实施例2

本实施例制备本发明的那西肽风味咀嚼片，由如表2中质量百分数的原料制成：

表2本发明那西肽风味咀嚼片各组分及其含量

制备方法：将那西肽、微晶纤维素、玉米淀粉、交联性聚乙烯吡咯烷酮和人造牛肉香精分别过80目筛，按比例取过筛后的那西肽、微晶纤维素、交联性聚乙烯吡咯烷酮，混合均匀，加入事先制备得到的粘结液A，制软材，过40目筛制粒，在45℃条件下干燥，过40目和65目筛整粒，除去粗颗粒和细粉，即得颗粒；将上述颗粒用事先制备得到包衣液进行流化床包衣，包衣增重5％，然后过40目和65目筛整粒，除去粗颗粒及细粉，即得包衣后颗粒；将包衣颗粒与玉米淀粉、人造牛肉香精混合，压片。

实施例3

本实施例制备本发明的那西肽风味咀嚼片，由如表3质量百分数的原料制成：

表3本发明那西肽风味咀嚼片各组分及其含量

制备方法：将那西肽、微晶纤维素、玉米淀粉、交联性聚乙烯吡咯烷酮和人造牛肉香精分别过80目筛，按比例取过筛后的那西肽、微晶纤维素、交联性聚乙烯吡咯烷酮，混合均匀，加入事先制备得到的粘结液A，制软材，过40目筛制粒，在45℃条件下干燥，过40目和65目筛整粒，除去粗颗粒和细粉，即得颗粒；将上述颗粒用事先制备得到包衣液进行流化床包衣，包衣增重5％，然后过40目和65目筛整粒，除去粗颗粒及细粉，即得包衣后颗粒；将包衣颗粒与玉米淀粉、人造牛肉香精混合，压片。

对比例1(不加酸化剂)

本实施例制备本发明的那西肽风味咀嚼片，由如表4质量百分数的原料制成：

表4本发明那西肽风味咀嚼片各组分及其含量

制备方法：将那西肽、微晶纤维素、玉米淀粉、交联性聚乙烯吡咯烷酮和人造牛肉香精分别过80目筛，按比例取过筛后的那西肽、微晶纤维素、交联性聚乙烯吡咯烷酮，混合均匀，加入事先制备得到的粘结液B，制软材，过40目筛制粒，在45℃条件下干燥，过40目和65目筛整粒，除去粗颗粒和细粉，即得颗粒；将上述颗粒用事先制备得到的包衣液进行流化床包衣，包衣增重5％，然后过40目和65目筛整粒，除去粗颗粒及细粉，即得包衣后颗粒；将包衣颗粒与玉米淀粉、人造牛肉香精混合，压片。

实验一，用样品1-3和对比样品1进行那西肽沙坦风味咀嚼片稳定性研究；

参考中华人共和国《兽药典》2015年版一部附录9001《原料药物与制剂稳定性试验指导原则》要求，将制剂置于40℃、75％RH条件下放置6个月进行加速试验，观察制剂性状变化，用高效液相色谱(HPLC)测定含量和有关物质变化。表5为各实施例制备制剂的加速试验结果。

表5那西肽风味咀嚼片加速试验结果

由表5结果可知，本发明样品1-3在40℃，相对湿度75％条件下放置6个月，性状无显著变化，有关物质和含量，均在控制范围内；而未加入酸化剂的对比例1制备的的那西肽咀嚼片，有关物质大幅升高，含量显著下降。本发明制备的那西肽风味咀嚼片较对比例1，制剂稳定得到显著提高。

实验二，本发明那西肽风味咀嚼片体外溶出度试验；

那西肽溶出度测定：照溶出度测定法(中国药典2015年版附录XC)第二法装置，分别以pH1.0盐酸溶液和pH6.8磷酸盐缓冲溶液900ml作为两种溶出介质，转速为75转/分钟，结果见表6。

表6那西肽风味咀嚼片溶出度试验结果

上述的溶出度试验，分别在模拟胃部环境的pH值1.0盐酸溶液中和模拟肠道环境的pH值6.8的磷酸盐缓冲溶液中进行的。

由表6可以看出，本发明制备的那西肽风味咀嚼片在模拟胃部环境中不易溶出，30min溶出度在8.6％～10.4％之间，而在模拟肠道环境中溶出度可以达到95％以上，表明本发明制备的那西肽风味咀嚼片口服进入胃部后不会被胃酸中和，大部分到达肠道后才释放出活性成分，且所制备的那西肽风味咀嚼在肠道中溶出速度快，30分钟时溶出度均大于90％以上，满足那西肽咀嚼片的溶出要求。

实验三，那西肽对中华田园犬人工感染魏氏梭菌的治疗效果试验；

1、试验材料

试验用菌：魏氏梭菌A型，犬场病死犬分离。

试验动物：中华田园犬4月龄，够自浙江某犬养殖场

试验药物：那西肽风味咀嚼片 照实施例4工艺制备。

甲硝唑片 购自药店

2、试验方法

试验设计

以80％左右攻毒犬只出现魏氏梭菌临床症状的攻毒剂量为正式试验攻毒剂量的选择标准。确定攻毒菌量为1×10⁸CFU/mL，每只犬需攻毒20mL。

按照《抗菌药物Ⅱ、Ⅲ期临床药效评价试验指导原则》中的要求，120只健康中华田园犬，每组20只，将那西肽咀嚼片，设高、中、低三个剂量水平，另设甲硝唑对照组(阳性对照组)、感染不给药对照组(模型对照组)和不感染不给药组(空白对照组)。具体分组见表7。

表7试验分组与给药处理

给药治疗，给药方式

给药人员按照正式试验动物分组与处理给药表(表7)，给药组自攻毒6小时，试验犬只出现临床症状后，开始给药，给药5天，每天2次，给药剂量见表7。

药效学评价指标

详细记录给药期前、给药第5d、停药后的第1天、第3天、第5天及第7天各组的临床表现，并进行临床指标综合评分，收集并通过以下参数进行药效评估，根据分值判定疗效。

死亡率：试验期间出现犬魏氏梭菌病典型症状并死亡，剖检有典型的特征性病变，并从肠道中分离出魏氏梭菌的犬只，即判定为感染死亡。根据各组动物的死亡数计算死亡率，死亡率＝死亡犬数/试验犬数量

治愈率

试验期间，用药后临床症状消失，精神、食欲等恢复正常，增重接近或超过健康对照组的犬只，判定为治愈。根据每组动物中的治愈数计算其治愈率，治愈率＝治愈犬的数量/试验犬数量。

有效率：治愈的犬及用药后感染犬食欲降低、腹泻等临床症状与感染对照组相比明显减轻或消失的犬只，均判定为有效。根据每组动物中的有效数计算其有效率，有效率＝(治愈犬的数量+治疗有效犬数量)/试验犬数量。

三、结果与分析

临床症状

感染不给药组犬只，初期，病犬精神沉郁，食欲正常。次日早上发现该犬出现乱冲乱撞、转圈现象，部分犬只很快倒地，全身肌肉振颤、抽搐、四肢划动、怪叫、呻吟、口流白沫、呼吸困难，几分钟后死亡，给药组，情况明显减轻，病犬精神略有沉郁，大部分预后良好，偶有死亡。

临床疗效评价

对随机对照治疗试验期间6组犬的死亡动物数进行统计。空白组无犬死亡，感染不给药组有16只犬死亡，甲硝唑对照组有8只犬死亡，那西肽低剂量组有6只犬死亡，中剂量组有1只犬死亡，高剂量组有2只犬死亡。相较于阴性对照组，阳性药物对照组、那西肽高剂量和中剂量组动物的死亡率均有显著下降。对各组的治愈率进行排序，可见：那西肽高剂量组＞那西肽中剂量组＞那西肽低剂量组＞甲硝唑组。详见表8。

表8那西肽对犬坏死性肠炎的治疗效果

结论

试验结果表明：本发明制备的那西肽风味咀嚼片，可以有效治疗犬魏氏梭菌病，效果优于传统药物甲硝唑。给药剂量：犬，口服，20mg/kg BW，每天2次，连用五天。

实验四，那西肽咀嚼片对犬魏氏梭菌病的预防及治疗效果。

发病情况

浙江省某工作犬养殖场，同圈舍15只5月龄边牧，其中5只重症犬突然发病死亡。从发病到死亡整个过程约12h左右。经流行病学调查排除食物中毒、鼠药中毒及其他因素中毒，驻场兽医初步诊断，疑为魏氏梭菌感染。

临床症状

重症急性病犬发病初期精神沉郁，食欲减退，6至12小时内突然停止进食，乱冲乱撞，朝天狂吠，转圈，倒地，呻吟，口吐白沫，呼吸困难，大小便失禁，全身肌肉震颤，抽搐，四肢划动，几个小时后死亡。轻症病犬可见犬只精神沉郁，有的腹部明显膨胀，耳尖、可视黏膜发绀。

实验室诊断

采集该犬场病死犬的胃、肠内容物、心血及心、肝、脾、肺、肾、肌肉组织、粪便样本，经实验室细菌分离鉴定、动物接种、血清学鉴定等检测，确诊为A型魏氏梭菌感染。

防治措施

立即封锁该犬场和死亡犬所在圈舍。挖2m以上深坑，撒布生石灰，将病死犬尸体、垃圾、食料焚烧深埋。用0.2％过氧乙酸溶液浸泡及清洗消毒饲养用具，用0.5％过氧乙酸溶液喷雾消毒圈舍地面、墙壁、天花板及舍外环境。

对该场轻症病犬，以及其他无症状犬口服样品2、3、4，按20mg/kg BW，2次/天，连用5天。经采取以上措施，该犬场8只轻症病犬症状逐渐消失，于给药后第6～10天，逐渐恢复正常，无轻症转为重症犬只，且至今未发生新病例。

本发明的那西肽风味咀嚼片食用时适口性较好，对动物胃肠刺激小，能够快速崩解快速溶出有效成分，质量稳定；在犬魏氏梭菌病上具有有效治疗的用途。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，上述实施例不以任何形式限制本发明，凡采用等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。

Claims (9)

1.一种那西肽风味咀嚼片，其特征在于，配方包括：按照质量百分比包括：那西肽1％-10％，酸化剂5％，稀释剂30％-40％，粘结剂1％，填充剂30％-40％，崩解剂2％-10％，矫味剂5％-20％，包衣剂1％-5％。

2.根据权利要求1所述的一种那西肽风味咀嚼片，其特征在于，所述酸化剂为：柠檬酸、磷酸、乳酸、苹果酸、苯甲酸中的一种或几种的组合。

3.根据权利要求2所述的一种那西肽风味咀嚼片，其特征在于，所述酸化剂为柠檬酸和磷酸；柠檬酸、磷酸重量比为1:1。

4.根据权利要求1所述的一种那西肽风味咀嚼片，其特征在于，所述崩解剂为：羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮中的一种或几种的组合。

5.根据权利要求1所述的一种那西肽风味咀嚼片，其特征在于，所述粘结剂为：羟丙基甲级纤维素、麦芽糊精、环糊精中的一种或几种的组合。

6.根据权利要求1所述的一种那西肽风味咀嚼片，其特征在于，所述包衣剂为：羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、醋酸纤维素邻苯二甲酸酯、聚丙烯酸树脂、羧甲基乙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮中的一种或几种的组合。

7.根据权利要求1所述的一种那西肽风味咀嚼片，其特征在于，所述矫味剂包括：人造鸡肉香精、人造牛肉香精、酵母粉中的一种或几种的组合。

8.一种那西肽风味咀嚼片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，按配方准备材料，配方按照质量百分比包括：那西肽1％-10％，酸化剂5％，稀释剂30％-40％，粘结剂1％，填充剂30％-40％，崩解剂2％-10％，矫味剂5％-20％，包衣剂1％-5％；

步骤二，将那西肽、稀释剂、填充剂、崩解剂、粘合剂、矫味剂粉碎后分别过筛过滤；

步骤三，将那西肽、稀释剂、崩解剂混合得到混合物，将粘结剂和酸化剂共同配置得到粘结液，将混合物和粘结液混合制成软材，过筛制成颗粒，40℃-45℃条件下干燥后再过筛得到整粒；

步骤四，将整粒用包衣剂进行包衣，然后过筛取整粒，得到包衣后颗粒；

步骤五，将包衣后颗粒与填充剂、矫味剂混合均匀，压片得到那西肽风味咀嚼片。

9.根据权利要求8所述的一种那西肽风味咀嚼片的制备方法，其特征在于，所述包衣采用流化床包衣。