CN112322537A - 一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗hpv的治疗剂组合物及应用 - Google Patents

一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗hpv的治疗剂组合物及应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，包括以下步骤：选取发酵乳5g‑10g放置于45ml‑60ml的0.85％灭菌生理盐水中，并在生理盐水中加入5‑10颗直径0.8mm的玻璃珠，振荡搅拌10‑15min，充分混合，完成菌液，使用无菌操作用1ml灭菌吸管提取菌液做10倍梯度稀释。该使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，通过对发酵乳进行分离培养，选取其合适的动物双歧杆菌乳亚种，利用动物双歧杆菌乳亚种的原料的广泛性，提高动物双歧杆菌乳亚种的制取，保证原料的丰富性和多样性，利用动物双歧杆菌乳亚种在厌氧环境下产生较少的乙酸和乳酸，保证HPV患者体内弱酸环境，减少乙酸和乳酸对蛋白质的抑制效果，保证患者体内的抵抗力。

Description

一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及 应用
技术领域
本发明涉及动物双歧杆菌乳亚种技术领域，具体为一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用。
背景技术
20世纪50年代以来，抗生素抵御人体各种疾病得到了广泛的应用，然而给人类健康带来的忧虑也越来越明显。抗生素长期应用引起肠道菌群紊乱，造成肠道功能失调，由此而来的抗生素伴联性腹泻和超感染、肠道菌群易位已成为现代医院中难以解决的一大问题。尤其是抗生素引起的顽症和毒副作用，人们试图求助于生物防治方法，以菌治菌，重新建立起肠道正常菌群的平衡。
对于HPV患者进行治疗时，一般抗生素容易造成体内强酸环境，产生过多乙酸或者乳酸，对蛋白质起到明显的抑制效果，降低患者自身抗性。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，解决了HPV治疗时体内酸度较高影响蛋白质活性的问题。
(二)技术方案
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，包括以下步骤：
S1、选取发酵乳5g-10g放置于45ml-60ml的0.85％灭菌生理盐水中，并在生理盐水中加入5-10颗直径0.8mm的玻璃珠，振荡搅拌10-15min，充分混合，完成菌液，使用无菌操作用1ml灭菌吸管提取菌液做10倍梯度稀释，选取3个合适的稀释度；
S2、选取3个MRS培养基平板，并将3个合适稀释度的菌液利用灭菌涂布棒均匀涂抹在MRS培养基平板表面，将MRS培养基平板倒置与培养罐中，以温度为36℃-38℃，培养70h-75h，取得合适菌落；
S3、在步骤S2的基础上，将菌落进行分离并检测，提取需要的动物双歧杆菌乳亚种菌落，将动物双歧杆菌乳亚种菌落以2-5：100的比例倒入8％-15％脱脂牛乳中，以39℃-42℃环境培养15h-30h，取得发酵液；
S4、将发酵液放入种子罐中进行培育繁殖，种子罐内培养温度39℃-42℃，并保持种子罐内氧气含量为8％-12％；
S5、在步骤S4的基础上，将蔗糖和乳糖以1:1培育后发酵液进行混合，取得组合物，将组合物放置于-20℃--30℃冷冻箱中进行冷冻干燥处理；
S6、将冷冻干燥后的组合物进行破碎，以5:1比例加入低聚糖粉，进行混合，完成混合后填充于包装胶囊内部。
优选的，在步骤S1中，所述MRS培养基中，每升MRS琼脂培养基中加入5ml双氯青霉素钠盐溶液。
优选的，在步骤S2中，所述3个MRS培养基平板培养不同稀释度的菌液，作为对比实验，选取菌落最多MRS培养基平板取得菌落。
优选的，在步骤S3中，所述菌落的分离并检测，以专业检测机构进行。
优选的，在步骤S6中，所述包装胶囊为医用木薯淀粉胶囊。
(三)有益效果
本发明提供了一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，具备的有益效果：该使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，通过对发酵乳进行分离培养，选取其合适的动物双歧杆菌乳亚种，利用动物双歧杆菌乳亚种的原料的广泛性，提高动物双歧杆菌乳亚种的制取，保证原料的丰富性和多样性，利用动物双歧杆菌乳亚种在厌氧环境下产生较少的乙酸和乳酸，保证HPV患者体内弱酸环境，减少乙酸和乳酸对蛋白质的抑制效果，保证患者体内的抵抗力。
具体实施方式
基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例一
本发明提供一种技术方案：一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，包括以下步骤：选取发酵乳5g放置于45ml的0.85％灭菌生理盐水中，并在生理盐水中加入5颗直径0.8mm的玻璃珠，振荡搅拌10min，充分混合，完成菌液，使用无菌操作用1ml灭菌吸管提取菌液做10倍梯度稀释，选取3个合适的稀释度，MRS培养基中，每升MRS琼脂培养基中加入5ml双氯青霉素钠盐溶液；选取3个MRS培养基平板，并将3个合适稀释度的菌液利用灭菌涂布棒均匀涂抹在MRS培养基平板表面，3个MRS培养基平板培养不同稀释度的菌液，作为对比实验，选取菌落最多MRS培养基平板取得菌落，将MRS培养基平板倒置与培养罐中，以温度为36℃，培养70h，取得合适菌落；将菌落进行分离并检测，菌落的分离并检测，以专业检测机构进行，提取需要的动物双歧杆菌乳亚种菌落，将动物双歧杆菌乳亚种菌落以2：100的比例倒入8％脱脂牛乳中，以39℃环境培养15h，取得发酵液；将发酵液放入种子罐中进行培育繁殖，种子罐内培养温度39℃，并保持种子罐内氧气含量为8％；将蔗糖和乳糖以1:1培育后发酵液进行混合，取得组合物，将组合物放置于-20℃冷冻箱中进行冷冻干燥处理；将冷冻干燥后的组合物进行破碎，以5:1比例加入低聚糖粉，进行混合，完成混合后填充于包装胶囊内部，包装胶囊为医用木薯淀粉胶囊。
实施例二
本发明提供一种技术方案：一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，包括以下步骤：选取发酵乳8g放置于50ml的0.85％灭菌生理盐水中，并在生理盐水中加入8颗直径0.8mm的玻璃珠，振荡搅拌12min，充分混合，完成菌液，使用无菌操作用1ml灭菌吸管提取菌液做10倍梯度稀释，选取3个合适的稀释度，MRS培养基中，每升MRS琼脂培养基中加入5ml双氯青霉素钠盐溶液；选取3个MRS培养基平板，并将3个合适稀释度的菌液利用灭菌涂布棒均匀涂抹在MRS培养基平板表面，3个MRS培养基平板培养不同稀释度的菌液，作为对比实验，选取菌落最多MRS培养基平板取得菌落，将MRS培养基平板倒置与培养罐中，以温度为37℃，培养72h，取得合适菌落；将菌落进行分离并检测，菌落的分离并检测，以专业检测机构进行，提取需要的动物双歧杆菌乳亚种菌落，将动物双歧杆菌乳亚种菌落以3：100的比例倒入12％脱脂牛乳中，以40℃环境培养22h，取得发酵液；将发酵液放入种子罐中进行培育繁殖，种子罐内培养温度40℃，并保持种子罐内氧气含量为10％；将蔗糖和乳糖以1:1培育后发酵液进行混合，取得组合物，将组合物放置于-25℃冷冻箱中进行冷冻干燥处理；将冷冻干燥后的组合物进行破碎，以5:1比例加入低聚糖粉，进行混合，完成混合后填充于包装胶囊内部，包装胶囊为医用木薯淀粉胶囊。
实施例三
本发明提供一种技术方案：一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，包括以下步骤：选取发酵乳10g放置于60ml的0.85％灭菌生理盐水中，并在生理盐水中加入10颗直径0.8mm的玻璃珠，振荡搅拌15min，充分混合，完成菌液，使用无菌操作用1ml灭菌吸管提取菌液做10倍梯度稀释，选取3个合适的稀释度，MRS培养基中，每升MRS琼脂培养基中加入5ml双氯青霉素钠盐溶液；选取3个MRS培养基平板，并将3个合适稀释度的菌液利用灭菌涂布棒均匀涂抹在MRS培养基平板表面，3个MRS培养基平板培养不同稀释度的菌液，作为对比实验，选取菌落最多MRS培养基平板取得菌落，将MRS培养基平板倒置与培养罐中，以温度为38℃，培养75h，取得合适菌落；将菌落进行分离并检测，菌落的分离并检测，以专业检测机构进行，提取需要的动物双歧杆菌乳亚种菌落，将动物双歧杆菌乳亚种菌落以5：100的比例倒入15％脱脂牛乳中，以42℃环境培养30h，取得发酵液；将发酵液放入种子罐中进行培育繁殖，种子罐内培养温度42℃，并保持种子罐内氧气含量为12％；将蔗糖和乳糖以1:1培育后发酵液进行混合，取得组合物，将组合物放置于-30℃冷冻箱中进行冷冻干燥处理；将冷冻干燥后的组合物进行破碎，以5:1比例加入低聚糖粉，进行混合，完成混合后填充于包装胶囊内部，包装胶囊为医用木薯淀粉胶囊。
实验结论：本发明提供了一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，具有长时间保持体内酸度为弱酸，保持体内蛋白质活性等特点，能够很好的满足HPV病患的治疗稳定性。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下。由语句“包括一个......限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素”。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (5)

1.一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，其特征在于，包括以下步骤：
S1、选取发酵乳5g-10g放置于45ml-60ml的0.85％灭菌生理盐水中，并在生理盐水中加入5-10颗直径0.8mm的玻璃珠，振荡搅拌10-15min，充分混合，完成菌液，使用无菌操作用1ml灭菌吸管提取菌液做10倍梯度稀释，选取3个合适的稀释度；
S2、选取3个MRS培养基平板，并将3个合适稀释度的菌液利用灭菌涂布棒均匀涂抹在MRS培养基平板表面，将MRS培养基平板倒置与培养罐中，以温度为36℃-38℃，培养70h-75h，取得合适菌落；
S3、在步骤S2的基础上，将菌落进行分离并检测，提取需要的动物双歧杆菌乳亚种菌落，将动物双歧杆菌乳亚种菌落以2-5：100的比例倒入8％-15％脱脂牛乳中，以39℃-42℃环境培养15h-30h，取得发酵液；
S4、将发酵液放入种子罐中进行培育繁殖，种子罐内培养温度39℃-42℃，并保持种子罐内氧气含量为8％-12％；
S5、在步骤S4的基础上，将蔗糖和乳糖以1:1培育后发酵液进行混合，取得组合物，将组合物放置于-20℃--30℃冷冻箱中进行冷冻干燥处理；
S6、将冷冻干燥后的组合物进行破碎，以5:1比例加入低聚糖粉，进行混合，完成混合后填充于包装胶囊内部。
2.根据权利要求1所述的一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，其特征在于：在步骤S1中，所述MRS培养基中，每升MRS琼脂培养基中加入5ml双氯青霉素钠盐溶液。
3.根据权利要求1所述的一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，其特征在于：在步骤S2中，所述3个MRS培养基平板培养不同稀释度的菌液，作为对比实验，选取菌落最多MRS培养基平板取得菌落。
4.根据权利要求1所述的一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，其特征在于：在步骤S3中，所述菌落的分离并检测，以专业检测机构进行。
5.根据权利要求1所述的一种使用动物双歧杆菌乳亚种治疗HPV的治疗剂组合物及应用，其特征在于：在步骤S6中，所述包装胶囊为医用木薯淀粉胶囊。
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