CN112245376B - 一种抗氧化石斛提取物的制备方法、石斛抗氧精华液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗氧化石斛提取物的制备方法、石斛抗氧精华液及其制备方法，其中精华液的原料包括1,2‑丙二醇、甘油、1,3‑丁二醇、透明质酸钠、透明汉生胶、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、海藻酸钠、EDTA二钠、柠檬酸、羟苯甲酯、十聚甘油、海藻糖、尿囊素、PEG‑60氢化蓖麻油、羟苯丙酯、三乙醇胺、石斛提取物、D‑泛醇、苯氧乙醇、剩余量的去离子水。本发明从石斛中提取具有抗氧化功效的成分，提取时间大大减少，并且具有很好的抗氧化活性；利用石斛提取物制成石斛抗氧精华液安全、天然无刺激，且试用后皮肤生理状态得到明显改善，具有显著的抗衰效果。

Description

一种抗氧化石斛提取物的制备方法、石斛抗氧精华液及其制 备方法

技术领域

本发明属于天然产物化学植物成分提取技术领域，具体涉及一种抗氧化石斛提取物的制备方法、石斛抗氧精华液及其制备方法。

背景技术

石斛属植物主要有效成分为石斛类多糖及生物碱。铁皮石斛多糖对肝微粒脂质过氧化具有抑制作用，且具有较强的清除自由基作用。研究表明，人体衰老与自由基氧化息息相关，铁皮石斛表现出良好的抗氧化效果，从而从侧面验证了其延缓衰老的作用，紫皮石斛也有增强新陈代谢、抗衰老等作用。

目前，市面上的石斛抗氧化产品的提取方式多为水提醇沉法、溶剂萃取法、超声波提取法等。例如专利申请号为201710986081.0的专利公开了“一种具有抗氧化活性和保湿功效的鲜铁皮石斛茎叶提取物及其制备方法以及在护肤品中应用”，将新鲜铁皮石斛以5~20倍重量的水提取三次，每次20-120分钟，提取温度60-100℃，再经50-90℃减压浓缩、干燥，得鲜铁皮石斛提取物。但其能耗高，提取时间长，且提取温度较高，不利于石斛有效成分的活性保持。再例如专利申请号为201710986065.1的专利公开了“一种高抗氧化活性铁皮石斛提取物的制备方法及其应用”，以膨化工艺处理铁皮石斛，以70%乙醇、正己烷和乙酸乙酯依次萃取、分离，得目标产物。同样地，其萃取时间长，溶剂消耗高，增加了提取的成本，不利于后续应用。

发明内容

有鉴于此，本发明实施例期望提供一种抗氧化石斛提取物的制备方法、石斛抗氧精华液及其制备方法，可解决上述问题。

为达到上述目的，本发明采用一种抗氧化石斛提取物的制备方法，包括以下步骤：

a) 称取石斛样品置于闪式提取罐中，加入5~20倍体积量的提取溶剂，室温闪提1~3次，每次闪提时间30~300s，每次闪提转速1000~5000rpm，60目筛过滤，药渣再重复闪提；合并闪提滤液，静置分层15~30分钟，上清液过200目滤布，得滤液备用；

b) 将步骤a)中所述滤液加热浓缩成密度为1.0~1.2的浸膏；所得浸膏冻干处理，即得石斛提取物。

优选地，所述石斛样品为铁皮石斛叶干品。

进一步地，步骤a)中所述提取溶剂为水或10%~50%的乙醇溶液。

本发明还提供了石斛抗氧精华液，所述精华液的原料包括以下质量百分比的组分：1,2-丙二醇2~6%、甘油2~6%、1,3-丁二醇2~6%、透明质酸钠0.02~0.2%、透明汉生胶0.1~0.3%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.2~1%、海藻酸钠0.05~0.2%、EDTA二钠0.05~0.1%、柠檬酸0.05~0.2%、羟苯甲酯0.1~0.3%、十聚甘油2~5%、海藻糖0.2~0.5%、尿囊素0.2~0.5%、PEG-60氢化蓖麻油0.4~1.6%、羟苯丙酯0.05~0.1%、三乙醇胺0.1~0.3%、石斛提取物0.3~1%、D-泛醇0.2~0.5%、苯氧乙醇0.2~0.5%、剩余量的去离子水。

优选地，所述精华液的原料包括以下质量百分比的组分：1,2-丙二醇6%、甘油4%、1,3-丁二醇2%、透明质酸钠0.1%、透明汉生胶0.1%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.6%、海藻酸钠0.1%、EDTA二钠0.05%、柠檬酸0.1%、羟苯甲酯0.2%、十聚甘油3%、海藻糖0.5%、尿囊素0.5%、PEG-60氢化蓖麻油1%、羟苯丙酯0.08%、三乙醇胺0.1%、石斛提取物0.5%、D-泛醇0.2%、苯氧乙醇0.2%、剩余量的去离子水。

另外，本发明也提供了所述的石斛抗氧精华液的制备方法，包括以下步骤：

a) 将所述1,2-丙二醇2~6%、甘油2~6%、1,3-丁二醇2~6%、透明质酸钠0.02~0.2%、透明汉生胶0.1~0.3%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.2~1%、海藻酸钠0.05~0.2%、EDTA二钠0.05~0.1%、柠檬酸0.05~0.2%、羟苯甲酯0.1~0.3%、剩余量的去离子水混合搅拌加热至80℃~85℃至完全溶解；

b) 将所述十聚甘油2~5%、海藻糖0.2~0.5%、尿囊素0.2~0.5%、PEG-60氢化蓖麻油0.4~1.6%、羟苯丙酯0.05~0.1%混合搅拌加热至80℃~85℃至完全溶解，然后加入所述步骤a)中以600~800rpm转速搅拌均匀后，保温10~20分钟；再加入所述三乙醇胺0.1~0.3%关闭加热，继续以600~800rpm转速搅拌降温，冷却至50~60℃，以600~800rpm转速搅拌；最后加入所述石斛提取物0.3~1%、D-泛醇0.2~0.5%、苯氧乙醇0.2~0.5%，搅拌均匀，即得石斛抗氧精华液。

优选地，所述石斛抗氧精华液的制备方法，包括以下步骤：

a) 将所述1,2-丙二醇6%、甘油4%、1,3-丁二醇2%、透明质酸钠0.1%、透明汉生胶0.1%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.6%、海藻酸钠0.1%、EDTA二钠0.05%、柠檬酸0.1%、羟苯甲酯0.2%、剩余量的去离子水混合搅拌加热至85℃至完全溶解；

b) 将所述十聚甘油3%、海藻糖0.5%、尿囊素0.5%、PEG-60氢化蓖麻油1%、羟苯丙酯0.08%混合搅拌加热至85℃至完全溶解，然后加入所述步骤a)中以600rpm转速搅拌均匀后，保温15分钟；再加入所述三乙醇胺0.1%关闭加热，继续以600rpm转速搅拌降温，冷却至60℃，以700rpm转速搅拌；最后加入所述石斛提取物0.5%、D-泛醇0.2%、苯氧乙醇0.2%，搅拌均匀，即得石斛抗氧精华液。

本发明有益效果如下：1）本发明方法从石斛中提取具有抗氧化功效的成分，提取时间大大减少，并且具有很好的抗氧化活性；2）本发明利用石斛提取物制成石斛抗氧精华液安全、天然无刺激，且试用后皮肤生理状态得到明显改善，具有显著的抗衰效果。

附图说明

图1为铁皮石斛干品/紫皮石斛干品/铁皮石斛叶干品的抗氧化活性曲线。

具体实施方式

为了能够更加详尽地了解本发明的特点与技术内容，下面对本发明的实现进行详细阐述。

本发明一种抗氧化石斛提取物的制备方法，包括以下步骤：

a) 称取石斛样品置于闪式提取罐中，加入5~20倍体积量的提取溶剂，室温闪提1~3次，每次闪提时间30~300s，每次闪提转速1000~5000rpm，60目筛过滤，药渣再重复闪提；合并闪提滤液，静置分层15~30分钟，上清液过200目滤布，得滤液备用；

b) 将步骤a)中所述滤液加热浓缩成密度为1.0~1.2的浸膏；所得浸膏冻干处理，即得石斛提取物。

这里，通过静置分层15~30分钟，上清液过200目滤布处理步骤，抗氧化作用大大增强，具体在下面给出实施例比较。

进一步地，所述石斛样品优选为铁皮石斛叶干品，因为在抗氧化活性方面，铁皮石斛叶干品>紫皮石斛干品>铁皮石斛干品，具体在下面实施例中给出佐证并如图1所示。

进一步地，步骤a)中所述提取溶剂优选为水或10%~50%的乙醇溶液。

本发明还提供了石斛抗氧精华液，所述精华液的原料包括以下质量百分比的组分：1,2-丙二醇2~6%、甘油2~6%、1,3-丁二醇2~6%、透明质酸钠0.02~0.2%、透明汉生胶0.1~0.3%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.2~1%、海藻酸钠0.05~0.2%、EDTA二钠0.05~0.1%、柠檬酸0.05~0.2%、羟苯甲酯0.1~0.3%、十聚甘油2~5%、海藻糖0.2~0.5%、尿囊素0.2~0.5%、PEG-60氢化蓖麻油0.4~1.6%、羟苯丙酯0.05~0.1%、三乙醇胺0.1~0.3%、石斛提取物0.3~1%、D-泛醇0.2~0.5%、苯氧乙醇0.2~0.5%、剩余量的去离子水。

优选地，所述精华液的原料包括以下质量百分比的组分：1,2-丙二醇6%、甘油4%、1,3-丁二醇2%、透明质酸钠0.1%、透明汉生胶0.1%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.6%、海藻酸钠0.1%、EDTA二钠0.05%、柠檬酸0.1%、羟苯甲酯0.2%、十聚甘油3%、海藻糖0.5%、尿囊素0.5%、PEG-60氢化蓖麻油1%、羟苯丙酯0.08%、三乙醇胺0.1%、石斛提取物0.5%、D-泛醇0.2%、苯氧乙醇0.2%、剩余量的去离子水。

另外，本发明也提供了所述的石斛抗氧精华液的制备方法，包括以下步骤：

a) 将所述1,2-丙二醇2~6%、甘油2~6%、1,3-丁二醇2~6%、透明质酸钠0.02~0.2%、透明汉生胶0.1~0.3%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.2~1%、海藻酸钠0.05~0.2%、EDTA二钠0.05~0.1%、柠檬酸0.05~0.2%、羟苯甲酯0.1~0.3%、剩余量的去离子水混合搅拌加热至80℃~85℃至完全溶解；

b) 将所述十聚甘油2~5%、海藻糖0.2~0.5%、尿囊素0.2~0.5%、PEG-60氢化蓖麻油0.4~1.6%、羟苯丙酯0.05~0.1%混合搅拌加热至80℃~85℃至完全溶解，然后加入所述步骤a)中以600~800rpm转速搅拌均匀后，保温10~20分钟；再加入所述三乙醇胺0.1~0.3%关闭加热，继续以600~800rpm转速搅拌降温，冷却至50~60℃，以600~800rpm转速搅拌；最后加入所述石斛提取物0.3~1%、D-泛醇0.2~0.5%、苯氧乙醇0.2~0.5%，搅拌均匀，即得石斛抗氧精华液。

优选地，所述石斛抗氧精华液的制备方法，包括以下步骤：

a) 将所述1,2-丙二醇6%、甘油4%、1,3-丁二醇2%、透明质酸钠0.1%、透明汉生胶0.1%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.6%、海藻酸钠0.1%、EDTA二钠0.05%、柠檬酸0.1%、羟苯甲酯0.2%、剩余量的去离子水混合搅拌加热至85℃至完全溶解；

b) 将所述十聚甘油3%、海藻糖0.5%、尿囊素0.5%、PEG-60氢化蓖麻油1%、羟苯丙酯0.08%混合搅拌加热至85℃至完全溶解，然后加入所述步骤a)中以600rpm转速搅拌均匀后，保温15分钟；再加入所述三乙醇胺0.1%关闭加热，继续以600rpm转速搅拌降温，冷却至60℃，以700rpm转速搅拌；最后加入所述石斛提取物0.5%、D-泛醇0.2%、苯氧乙醇0.2%，搅拌均匀，即得石斛抗氧精华液。

本发明利用石斛提取物制成石斛抗氧精华液安全、天然无刺激，且试用后皮肤生理状态得到明显改善，具有显著的抗衰效果。

实施例1

称取100g铁皮石斛叶置于闪式提取罐中，加入1.5L纯水，室温下闪提2次，闪提转速4500rpm，闪提120s，闪提液过60目筛，药渣二次提取；合并闪提滤液，静置分层20分钟，上清液过200目滤布；将滤液浓缩成密度1.1的浸膏后冻干，即得抗氧化石斛提取物。

实施例2

与实施1相比，去掉静置分层20分钟，上清液过200目滤布步骤，其余均相同。

石斛提取物的抗氧化活性比较

将铁皮石斛干品、紫皮石斛干品、铁皮石斛叶干品分别按照实施例1实验操作，将提取物分别溶于水中，配置浓度为1mg/mL，4X浓度稀释8个梯度，各梯度分别取50μL置于96孔板中，再加入100μL ，100nM荧光素钠。37℃孵育10min，加入100mM AAPH 50μL，每30s检测一次荧光强度，共检测1h。计算荧光曲线下面积AUC，净面积= AUC样品-AUC磷酸盐缓冲液，并绘制抗氧化剂浓度、待测剂浓度-净面积标准曲线。比较铁皮石斛干品/紫皮石斛干品/铁皮石斛叶干品的抗氧化活性。

实验结果如图1所示，经计算得出石斛抗氧化活性比较：铁皮石斛叶干品>紫皮石斛干品>铁皮石斛干品。

实施例3（石斛抗氧精华液的制备方法具体实施例）

a) 将所述1,2-丙二醇6%、甘油4%、1,3-丁二醇2%、透明质酸钠0.1%、透明汉生胶0.1%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.6%、海藻酸钠0.1%、EDTA二钠0.05%、柠檬酸0.1%、羟苯甲酯0.2%、剩余量的去离子水混合搅拌加热至85℃至完全溶解；

b) 将所述十聚甘油3%、海藻糖0.5%、尿囊素0.5%、PEG-60氢化蓖麻油1%、羟苯丙酯0.08%混合搅拌加热至85℃至完全溶解，然后加入所述步骤a)中以600rpm转速搅拌均匀后，保温15分钟；再加入所述三乙醇胺0.1%关闭加热，继续以600rpm转速搅拌降温，冷却至60℃，以700rpm转速搅拌；最后加入所述石斛提取物0.5%、D-泛醇0.2%、苯氧乙醇0.2%，搅拌均匀，即得石斛抗氧精华液。

抗氧化功效实例测评

利用实施例1和实施例2制得的铁皮石斛叶提取物按照上述实施例3石斛抗氧精华液的制备方法来分别配制精华液，另外再用一款现有市售的抗衰精华液作对比。

随机选取90例年龄在30~50岁的女性人群进行试验，选取的人群表现为：皮肤松弛发皱，特别是额头及眼角有皱纹，面部皮肤较为粗糙，光泽黯淡。

将90例志愿者按每组30例随机分为试验组1、试验组2、试验组3，试验组1和试验组2使用的精华液分别为实施例1和实施例2制得的铁皮石斛叶提取物按照上述实施例3石斛抗氧精华液的制备方法来分别配制的精华液，试验组3使用的精华液为一款现有市售的抗衰精华液。

精华液应用方法：每晚清洁面部后涂抹，每次用量为1~2ml为宜，持续4周以上。

应用结果：试验组1使用的精华液有效率为93.33%，试验组2使用的精华液有效率为83.33%，试验组3使用的精华液有效率仅为50%。在分别持续使用试验组1、试验组2以及试验组3使用的精华液4周之后，皱纹减少，试验组1有28人面部皮肤***，皮肤更加光滑有光泽，且皮肤表面皱纹减少；试验组2有25人面部皮肤变得光滑柔软；而试验组3仅有15人皮肤状况得到明显改善，还有15人皮肤特征没有明显变化。

应用结论：试验组1和试验组2的志愿者分别在使用对应的精华液1个月后，皮肤问题大多得到明显改善，这说明实施例1和实施例2制得的铁皮石斛叶提取物按照上述石斛抗氧精华液的制备方法来分别配制的精华液具有显著的抗衰老作用；另外，从试验组1和试验组2的对比结果看，使用1个月对应的精华液后，试验组1皮肤改善有效率为93.33%，比试验组2的皮肤改善有效率83.33%高出10%。这说明了本发明制备得到的铁皮石斛叶提取物具有很好的抗氧化活性，另外从提取步骤中可知相比现有技术提取时间大大减少，且实施例1制备得到的铁皮石斛叶提取物比实施例2制备得到的铁皮石斛叶提取物的抗氧化活性更好。

以上所述，仅为本发明的较佳实施例，并非用于限定本发明的保护范围，故凡依照本发明专利范围所做的等效变化或修饰，均属于本发明专利权利要求范围内。

Claims (4)

1.一种石斛抗氧精华液，其特征在于，所述精华液的原料包括以下质量百分比的组分：1,2-丙二醇2~6%、甘油2~6%、1,3-丁二醇2~6%、透明质酸钠0.02~0.2%、透明汉生胶0.1~0.3%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.2~1%、海藻酸钠0.05~0.2%、EDTA二钠0.05~0.1%、柠檬酸0.05~0.2%、羟苯甲酯0.1~0.3%、十聚甘油2~5%、海藻糖0.2~0.5%、尿囊素0.2~0.5%、PEG-60氢化蓖麻油0.4~1.6%、羟苯丙酯0.05~0.1%、三乙醇胺0.1~0.3%、石斛提取物0.3~1%、D-泛醇0.2~0.5%、苯氧乙醇0.2~0.5%、剩余量的去离子水；

所述石斛提取物的制备方法，包括以下步骤：

a) 称取石斛样品置于闪式提取罐中，加入5~20倍体积量的提取溶剂，室温闪提1~3次，每次闪提时间30~300s，每次闪提转速1000~5000rpm，60目筛过滤，药渣再重复闪提；合并闪提滤液，静置分层15~30分钟，上清液过200目滤布，得滤液备用；

b) 将步骤a)中所述滤液加热浓缩成密度为1.0~1.2的浸膏；所得浸膏冻干处理，即得石斛提取物；

所述石斛样品为铁皮石斛叶干品；

步骤a)中所述提取溶剂为水或10%~50%的乙醇溶液。

2.根据权利要求1所述的石斛抗氧精华液，其特征在于，所述精华液的原料包括以下质量百分比的组分：1,2-丙二醇6%、甘油4%、1,3-丁二醇2%、透明质酸钠0.1%、透明汉生胶0.1%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.6%、海藻酸钠0.1%、EDTA二钠0.05%、柠檬酸0.1%、羟苯甲酯0.2%、十聚甘油3%、海藻糖0.5%、尿囊素0.5%、PEG-60氢化蓖麻油1%、羟苯丙酯0.08%、三乙醇胺0.1%、石斛提取物0.5%、D-泛醇0.2%、苯氧乙醇0.2%、剩余量的去离子水。

3.根据权利要求1所述一种石斛抗氧精华液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a) 将所述1,2-丙二醇2~6%、甘油2~6%、1,3-丁二醇2~6%、透明质酸钠0.02~0.2%、透明汉生胶0.1~0.3%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.2~1%、海藻酸钠0.05~0.2%、EDTA二钠0.05~0.1%、柠檬酸0.05~0.2%、羟苯甲酯0.1~0.3%、剩余量的去离子水混合搅拌加热至80℃~85℃至完全溶解；

b) 将所述十聚甘油2~5%、海藻糖0.2~0.5%、尿囊素0.2~0.5%、PEG-60氢化蓖麻油0.4~1.6%、羟苯丙酯0.05~0.1%混合搅拌加热至80℃~85℃至完全溶解，然后加入所述步骤a)中以600~800rpm转速搅拌均匀后，保温10~20分钟；再加入所述三乙醇胺0.1~0.3%关闭加热，继续以600~800rpm转速搅拌降温，冷却至50~60℃，以600~800rpm转速搅拌；最后加入所述石斛提取物0.3~1%、D-泛醇0.2~0.5%、苯氧乙醇0.2~0.5%，搅拌均匀，即得石斛抗氧精华液。

4.根据权利要求3所述一种石斛抗氧精华液的制备方法，其特征在于，其特征在于，包括以下步骤：

a) 将所述1,2-丙二醇6%、甘油4%、1,3-丁二醇2%、透明质酸钠0.1%、透明汉生胶0.1%、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物0.6%、海藻酸钠0.1%、EDTA二钠0.05%、柠檬酸0.1%、羟苯甲酯0.2%、剩余量的去离子水混合搅拌加热至85℃至完全溶解；

b) 将所述十聚甘油3%、海藻糖0.5%、尿囊素0.5%、PEG-60氢化蓖麻油1%、羟苯丙酯0.08%混合搅拌加热至85℃至完全溶解，然后加入所述步骤a)中以600rpm转速搅拌均匀后，保温15分钟；再加入所述三乙醇胺0.1%关闭加热，继续以600rpm转速搅拌降温，冷却至60℃，以700rpm转速搅拌；最后加入所述石斛提取物0.5%、D-泛醇0.2%、苯氧乙醇0.2%，搅拌均匀，即得石斛抗氧精华液。