CN112107583A

CN112107583A - 一种色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物及其制备方法和应用

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Publication number: CN112107583A
Application number: CN202010755023.9A
Authority: CN
Inventors: 廖志新; 陈磊
Original assignee: Southeast University
Current assignee: Southeast University
Priority date: 2020-07-31
Filing date: 2020-07-31
Publication date: 2020-12-22

Abstract

本发明提供了一种色满‑6‑磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物及其制备方法和应用，该A晶型化合物的粒径分布为：Dv(10)：5‑7um；Dv(50)：7‑14um；Dv(90)：21‑33um；在X‑射线粉末衍射光谱图中特征峰的2θ值为3.46，7.02，10.97，15.20，19.35和22.89，2θ衍射角误差为0.2；DSC吸热转变在159±2℃和254±2℃；TG在200℃前几乎无明显失重，250℃后开始气化迅速失重。本发明制备的A晶型化合物，工艺简单可重复，易于工业化放大生产。本发明制备的A晶型化合物制剂，在15分钟即可达到80％以上的溶出度，具有良好的溶解性；在加速10天的高温、光照和高湿稳定性实验中，也体现出了很好的稳定性。作为临床前开发的候选化合物，该晶型有着广阔的开发前景。

Description

一种色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及化合物的组合物及其制备方法和应用；具体涉及色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物及其制备方法和应用。

背景技术

维甲酸受体相关的孤儿受体(retinoic acid receptor-related orphanreceptors，RORs)是一类配体依赖的转录因子，在生殖发育、生理节律调节、新陈代谢紊乱、炎症发生以及免疫***调节等一系列生理病理过程中扮演重要角色。RORs是核受体超家族中的一员，包括RORα、RORβ、RORγ。RORα主要分布在肝脏、骨骼肌、皮肤、肺、脂肪组织、肾脏、胸腺、大脑和血液中，与肝糖原异生、脂代谢、动脉粥样硬化等生理病理过程有关。RORβ主要分布在中枢神经***中，包括大脑、视网膜和松果腺，主要与脊髓、丘脑、小脑皮质对敏感信息的处理方面有关。RORγ高表达于胸腺中，在肾脏、肝脏、心脏、骨骼肌、脂肪组织、睾丸、***、胰腺中也有分布，与类风湿性关节炎、牛皮癣、多发性硬化症等自身免疫病有关。

据报道，RORγt为Th17细胞分化的关键调节剂，最近发现Th17细胞是优先产生细胞因子IL-17A、IL-17F、IL-21和IL-22的T辅助细胞的亚组。RORγt诱导编码IL-17A和IL-17F的基因在初始CD4+T辅助细胞中的转录。RORγt缺陷的小鼠显示非常少的Th17细胞。RORγt的抑制、缺失使得EAE得到改善

专利CN108218845A报道了一类如式I所示化合物，该类化合物具有治疗RORγ介导的炎性、代谢性和自身免疫性疾病中的用途。

其中，化合物N-异丁基-N-(2-甲基-6-吗啉吡啶-3-基)-4-酮-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)色满-6-磺酰胺具有较好的RORγt酶抑制活性(IC₅₀≈50nM)和成药性，适合开展***的盐型、晶型筛选。本研究主要报道了晶型(A)N-异丁基-N-(2-甲基-6-吗啉吡啶-3-基)-4-酮-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)色满-6-磺酰胺的粒径、含有该化合物的组合物及组合物的用途。

发明内容

发明目的：第一目的：作为一个较好的RORγt酶抑制剂的，适合开展***的盐型、晶型筛选和较好的成药性的如式I所示的化合物及其组合物；

第二目的：制备该化合物组合物的方法；

第三目的：该化合物组合物的应用。

技术方案：本申请提供一种色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物，其特征在于：使用

辐射，在X-射线粉末衍射光谱图中特征峰的2θ值为3.46，7.02，10.97，15.20，19.35和22.89；2θ衍射角误差为0.2，其结构式如式I所示。

其中，上述化合物在DSC吸热转变在159±2℃和254±2℃。

进一步地，所述组合物还包括甘露醇、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素和硬脂酸镁。

优选地，所述组合物包含如下重量份的组分：A晶型化合物12～13份、甘露醇50～60份、微晶纤维素40～50份、羟丙基甲基纤维素1～2份、低取代羟丙基纤维素5～8份和硬脂酸镁1～2份。

本发明还提供所述的色满-6-磺酰胺RORγ调节剂A晶型的制备方法，包括如下步骤：

(1)在乙酸乙酯中溶解N-异丁基-N-(2-甲基-6-吗啉吡啶-3-基)-4-酮-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)色满-6-磺酰胺；

(2)冷却步骤(1)的溶液得到沉淀物；

(3)洗涤分离干燥步骤(2)的沉淀物得到所述色满-6-磺酰胺RORγ调节剂A晶型。

其中，所述步骤(2)的冷却为搅拌冷却，搅拌时间为1～1.5小时。

进一步地，所述步骤(2)的冷却至温度为室温。

优选地，所述步骤(3)的洗涤为使用乙酸乙酯洗涤；干燥为35～40℃干燥10～12小时。

作为优选，步骤(1)中所提乙酸乙酯量为化合物质量体积比约为1：50；

作为优选，步骤(1)中所提搅拌溶解温度为回流；

作为优选，步骤(2)降温析晶温度为室温；

作为优选，步骤(3)中微粉化条件为：气源压力，8.0～9.0bar；进料压力：7.0～7.5bar；粉碎压力：6.5～7.0bar；粉碎时间25min。粒径分布于Dv(10)：2-4um；Dv(50)：6-13um；Dv(90)：20-32um；

进一步地，步骤(4)中羟丙基纤维素水溶液浓度为1.5％；

更进一步地，步骤(5)中混合机转速为10转每分钟，混合时间为20分钟。

本发明的是重结晶发得到纯度较高的A晶型化合物，通过制剂手段得到该药物的片剂形式。

本发明还提供上述的色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物在制备治疗RORγ介导的炎性、代谢性和自身免疫性疾病药物中的用途。

优选地，所述疾病为银屑病。

有益效果：与现有技术相比本发明具有以下优点：

(1)本发明提出的A晶型暂无报道；制备A晶型方法，具有晶型纯度稳定，操作简单，生产周期短，重复性好优点，适合作为工业化生产的工艺；

(2)本发明通过制剂工艺，可得到稳定性好，溶出度高的片剂形式，作为一种RORγt的抑制剂具有很好的临床开发前景。

附图说明

图1为N-异丁基-N-(2-甲基-6-吗啉吡啶-3-基)-4-酮-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)色满-6-磺酰胺的A晶型化合物的XRD图；

图2为N-异丁基-N-(2-甲基-6-吗啉吡啶-3-基)-4-酮-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)色满-6-磺酰胺的A晶型化合物的DSC图；

图3为N-异丁基-N-(2-甲基-6-吗啉吡啶-3-基)-4-酮-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)色满-6-磺酰胺的A晶型化合物的TGA图。

具体实施方式

以下结合附图和实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

晶型A：在100mL单口瓶中，加入N-异丁基-N-(2-甲基-6-吗啉吡啶-3-基)-4-酮-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)色满-6-磺酰胺(10.0g，18.42mmol，1eq)、乙酸乙酯(50mL)，在回流下搅拌溶解，缓慢降至室温，有白色固体析出，搅拌1h后过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤(20mL*2次)，真空干燥(40℃)12小时，得类白色固体8.50g，收率为85％，HPLC：99.5％。

粒径1分布于：Dv(10)：5-7um；Dv(50)：7-14um；Dv(90)：21-33um。

实施例2

参照实施例1制备100g晶型A的N-异丁基-N-(2-甲基-6-吗啉吡啶-3-基)-4-酮-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)色满-6-磺酰胺A晶型化合物(Dv(10)：5-7um；Dv(50)：7-14um；Dv(90)：21-33um)进行微粉化，微粉化条件为：气源压力，8.0～9.0bar；进料压力：7.0～7.5bar；粉碎压力：6.5～7.0bar；粉碎时间25min。

粒径2分布于Dv(10)：2-4um；Dv(50)：6-13um；Dv(90)：20-32um。

图2中DSC吸热转变在159±2℃和254±2℃；

图3中TGA显示在200℃前几乎无明显失重，250℃后开始迅速失重。

实施例3

制备工艺：

N-异丁基磺酰胺为N-异丁基-N-(2-甲基-6-吗啉吡啶-3-基)-4-酮-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)色满-6-磺酰胺的简称。

将1.5g羟丙基纤维素溶于纯水中，制得1.5％羟丙基纤维素水溶液。

将12.8gN-异丁基磺酰胺的A晶型化合物、58g甘露醇、45g微晶纤维素、6g低取代羟丙基纤维素放入湿法制粒机中，预混10min，充分混合后，加入1.5％羟丙基纤维素水溶液制软材，24目制粒，60℃干燥，干燥颗粒过20目筛网整粒。

将得到的颗粒与1g硬脂酸镁混合均匀，混合机速度为10转/分钟，混合时间为20分钟，压片，包衣。

实施例4

实施例5

制备工艺:同实施例3。

实施例6

实施例7

实施例8

实施例3和实施例4中不同粒径N-异丁基磺酰胺的A晶型化合物处方的溶出度考察：

溶出介质：pH4.5醋酸盐缓冲液作为溶出介质。

方法：中国药典2015年版四部0931溶出度与释放度测定法第二法(浆法)

转速：每分钟50转

取样点：分别经5、10、15、20、30时，取溶出液10mL，经0.8μm滤膜滤过，同时补加等量同温度的溶出介质。结果见表1。

实施例9

参照中国药典2015年版四部通则9001原料药物与制剂稳定性试验指导原则。将样品放置于强光(4500Lx±500Lx)、高湿(RH92.5％，25℃)和高温(60℃)条件下，于10天取样，依法检测外观性状、增失重、溶出度、有关物质、基因毒性杂质和含量。

影响因素实验结果见表2：

实施例10

实验材料

1)动物

BALB/c小鼠，spf级，18-22g雌性，上海杰思捷实验动物有限公司，许可证号码SCXK(沪)2013-0006，合格证编号2010002611163。

2)药物及试剂

N-异丁基磺酰胺的A晶型化合物固体粉末，研磨而成的细粉.

5％咪喹莫特乳膏，湖北科益药业股份有限公司，批号：160801

5％咪喹莫特乳膏，规格3g/支，四川明欣药业有限责任公司，产品批号：17020140

3)仪器

电子天平：北京赛多利斯仪器***有限公司生产。

离心机：上海医疗器械(集团)有限公司手术器械厂生产。

4)方法与结果

雌性BALB/c小鼠(近交系，10周龄)，共100只，随机分成5组，每组各20只。实验开始后，剃除小鼠背部毛发，形成约2cm*3cm大小的暴露区域，每日灌胃受试药药物3天，模型组和阴性组涂抹相应的溶剂(赋形剂)，给药第4天开始造模，将5％咪喹莫特乳膏62.5mg/天连续涂抹于小鼠背部皮肤7天以诱导银屑病，对照组给予同等剂量的凡士林软膏，造模同时每天继续给药，每日先给药后造模，给药与造模时间间隔2h。动物于造模第8天取材，摘眼球取血，3000r/min离心10min取上层血清，存于-80℃低温冰箱待测试剂盒。脱颈法处死动物，取背部皮肤固定于10％甲醛溶液待病理检测用。血清炎症因子结果见表3。

表3受试化合物对咪喹莫特致小鼠银屑病血清IL-6水平影响(n＝6，x±sd)

^##p<0.01,与空白组相比；**p<0.01，与模型组相比

由表3可见，模型组与空白组相比，小鼠血清中IL-6的水平有显著提升(p<0.01)，说明造模成功，而一号药与模型组相比，IL-6的水平明显下降(p<0.01),显示药物可以降低咪喹莫特致小鼠银屑病的小鼠体内IL-6的水平。

Claims

1.一种色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物，其特征在于：所述化合物，使用

2.根据权利要求1所述的色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物，其特征在于：所述化合物在DSC吸热转变在159±2℃和254±2℃。

3.根据权利要求1所述的色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物，其特征在于：还包括甘露醇、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素和硬脂酸镁。

4.根据权利要求1所述的色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物，其特征在于，所述组合物包含如下重量份的组分：A晶型化合物12～13份、甘露醇50～60份、微晶纤维素40～50份、羟丙基甲基纤维素1～2份、低取代羟丙基纤维素5～8份和硬脂酸镁1～2份。

5.权利要求1所述的色满-6-磺酰胺RORγ调节剂A晶型的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(2)冷却步骤(1)的溶液得到沉淀物；

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)的冷却为搅拌冷却，搅拌时间为1～1.5小时。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)的冷却至温度为室温。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)的洗涤为使用乙酸乙酯洗涤；干燥为35～40℃干燥10～12小时。

9.权利要求1～4所述的色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物在制备治疗RORγ介导的炎性、代谢性和自身免疫性疾病药物中的用途。

10.根据权利要求1～4所述的色满-6-磺酰胺RORγ调节剂的A晶型化合物的组合物在制备治疗RORγ介导的炎性、代谢性和自身免疫性疾病药物中的用途，其特征在于：所述疾病为银屑病。