CN111819174A - 嘧啶基氨基-吡唑化合物的多晶型物和固体形式以及制备方法 - Google Patents

Abstract

本公开涉及2‑甲基‑2‑(3‑甲基‑4‑(4‑(甲氨基)‑5‑(三氟甲基)嘧啶‑2‑基氨基)‑1H‑吡唑‑1‑基)丙腈的结晶多晶型物和非晶形式无定形形式或其溶剂合物、互变异构体以及药学上可接受的盐或共晶以及其制备方法。

Description

嘧啶基氨基-吡唑化合物的多晶型物和固体形式以及制备 方法

相关申请的交叉参考

本申请要求于2017年11月21日提交的美国临时申请号62/589,276的优先权，所述临时申请以引用的方式并入本文中。

技术领域

本公开涉及2-甲基-2-(3-甲基-4-((4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈的多晶型物形式，所述多晶型物形式用于治疗外周和神经退行性疾病，包括帕金森氏病(Parkinson's disease)。本公开还涉及获得多晶型物形式的方法。

背景技术

组合的基因和生物化学证据暗示某些激酶在神经退行性病症的发病机理中起作用(Christensen,K.V.(2017)Progress in medicinal chemistry 56:37-80；Fuji,R.N.等(2015)Science Translational Medicine7(273):273ra15；Taymans,J.M.等(2016)Current Neuropharmacology14(3):214-225)。正在研究激酶抑制剂用于治疗阿茨海默氏病(Alzheimer's disease)、帕金森氏病、ALS以及其他疾病(Estrada,A.A.等(2015)J.Med.Chem.58(17):6733-6746；Estrada,A.A.等(2013)J.Med.Chem.57:921-936；Chen,H.等(2012)J.Med.Chem.55:5536-5545；Estrada,A.A.等(2015)J.Med.Chem.58:6733-6746；Chan,B.K.等(2013)ACS Med.Chem.Lett.4:85-90；US 8354420；US8569281；US8791130；US8796296；US 8802674；US 8809331；US8815882；US 9145402；US 9212173；US 9212186以及WO2012/062783。

具有原料药的不同固态性质的多种晶体形式可在生物利用度、保质期、物理化学性质(包括熔点、晶体形态学、固有溶解速率、溶解度以及稳定性)以及加工期间的性质方面展现差异。X射线粉末衍射(XRPD)为通过独特衍射图案来鉴定不同晶体相的强大工具。诸如固态核磁共振NMR波谱学、拉曼光谱学、DSC(差示扫描量热法)等其他技术同样可用。

药物行业常常会遇到相同结晶化学实体的多个多晶型物的现象。常常将多晶型性描述为原料药(即活性药物成分(API))以在晶格中作为具有不同分子排列和/或构象的两种或更多种结晶相存在从而给予晶体不同物理化学性质的能力。能够可靠地制造所选多晶型形式的能力为决定药物产品成功的关键因素。

全世界的管理机构要求作出合理努力来鉴定原料药的多晶型物并且检查多晶型物相互转化。归因于多晶型物的常常不可预测的性质以及其物理化学性质的相应差异，在相同产品的各批次之间必须展现制造一致性。适当了解多晶型物情况和药物多晶型物的性质将有助于获得制造一致性。

原子水平的晶体结构测定以及分子间相互作用为建立绝对构型(对映异构体)、相鉴定、质量控制以及工艺开发控制和优化提供重要信息。X射线衍射被广泛认可为用于药物固体的晶体结构分析以及晶体形式鉴定的可靠工具。

原料药的单一晶体的可获得性归因于结构测定的速度和准确性而为优选的。然而，并非总能获得尺寸适合于数据收集的晶体。同步辐射X射线粉末衍射为可用的技术。在此类情况下，可由通过在周围条件下和/或在可变温度或湿度下测量所获得的X射线粉末衍射数据来解析晶体结构。

需要研发原料药的新多晶型物形式以及其制备方法。

描述

本公开涉及嘧啶基氨基-吡唑激酶抑制剂的结晶多晶型物或无定形形式，嘧啶基氨基-吡唑激酶抑制剂在本文中称为式I化合物并且具有以下结构：

或其溶剂合物、互变异构体或药学上可接受的盐或共晶。

本公开的一个方面为一种式I化合物多晶型物形式的药物组合物。

本公开的另一方面为一种结晶化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈，所述结晶化合物选自：

形式B多晶型物，所述形式B多晶型物展现在约7.0、7.3、16.1、16.3、24.1、25.1以及26.6处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案；

形式C多晶型物，所述形式C多晶型物展现在约6.4、15.1、21.2、25.7以及27.8处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案；以及

形式D多晶型物，所述形式D多晶型物展现在约9.2、14.0、14.8、19.7以及20.0处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

在一个方面中，提供了一种形式A多晶型物，所述形式A多晶型物展现在约7.7、9.9、12.7、13.6、14.1、15.4、15.9、19.2、20.5、21.6、22.4 23.2以及24.7处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

在一个方面中，提供了一种形式B多晶型物，所述形式B多晶型物展现在约7.0、7.3、16.1、16.3、24.1、25.1以及26.6处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。在一些方面中，形式B多晶型物具有大体上不含在12.9和14.8±0.05度2-θ处的峰的X射线粉末衍射图案。在一些方面中，形式B多晶型物为环己醇溶剂合物。在一些方面中，形式B多晶型物的差示扫描量热术DSC显示在约87.9和103.2℃下起始的两处熔融吸热。

在一个方面中，提供了一种形式C多晶型物，所述形式C多晶型物展现在约6.4、8.1、8.6、8.8、9.9、10.2、12.9、13.8、15.1、15.4、16.5、19.8、21.2、22.1、23.7、25.7以及27.8处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

在一个方面中，提供了一种形式C多晶型物，所述形式C多晶型物展现在约6.4、15.1、21.2、25.7以及27.8处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。在诸多个方面中，形式C多晶型物还包含在22.1处的峰。在诸多个方面中，形式C多晶型物还包含在16.5和22.1±0.05度2-θ处的峰。在一些方面中，形式C多晶型物具有大体上不含在13.6和14.8±0.05度2-θ处的峰的X射线粉末衍射图案。在一些方面中，形式C多晶型物为无水物。在一些方面中，形式C多晶型物具有在约127.8℃下起始的差示扫描量热法(DSC)熔融吸热。

在一个方面中，提供了一种形式D多晶型物，所述形式D多晶型物展现在约8.0、8.7、9.2、9.8、10.4、12.9、13.4、14.0、14.8、16.4、18.5、19.7、20.0、20.8、23.1、23.3、23.9、25.5以及25.7处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

在一个方面中，提供了一种形式D多晶型物，所述形式D多晶型物展现在约9.2、14.0、14.8、19.7以及20.0处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。在一些方面中，形式D多晶型物具有大体上不含在13.6±0.05度2-θ处的峰的X射线粉末衍射图案。在一些方面中，形式D多晶型物为无水物。在一些方面中，形式D多晶型物具有在约129.1℃下起始的差示扫描量热法(DSC)熔融吸热。

在一个方面中，本文所提供的结晶化合物当经受从约0％到约95％相对湿度的相对湿度增加持续约180分钟时展现不到约1％的质量增加。

在一个方面中，本文所提供的结晶化合物在暴露于约40℃和约75％相对湿度至少6个月后为稳定的。

本公开的另一方面为结晶化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈，所述结晶化合物展现在6.4、15.1、21.2、25.7以及27.8处具有以±0.3度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

在另一方面中，本公开提供了一种结晶化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈，所述结晶化合物展现在6.4、15.1、21.2、25.7以及27.8处具有以±0.05度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

本公开的一个方面为一种药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的式I化合物的结晶多晶型物或无定形形式或其溶剂合物、互变异构体或药学上可接受的盐或共晶以及药学上可接受的载体、助流剂、稀释剂或赋形剂。

本公开的一个方面为一种制备式I化合物的结晶多晶型物或无定形形式或其溶剂合物、互变异构体或药学上可接受的盐或共晶的方法。

在一个方面中，提供了一种制备结晶多晶型物的方法，所述方法包括在50℃下或高于50℃下在甲基叔丁醚、环戊基甲醚、乙酸乙酯、乙酸异丙酯或它们的组合以及诸如庚烷等非极性溶剂中加热2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈，然后将混合物冷却，借此形成形式C结晶多晶型物，所述形式C结晶多晶型物展现在约6.4、15.1、21.2、25.7以及27.8度2-θ处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。在一些方面中，将混合物种晶。

在一个方面中，提供了一种制备结晶多晶型物的方法，所述方法包括在50℃下或高于50℃下加热2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈于甲基叔丁醚、环戊基甲醚、乙酸乙酯、乙酸异丙酯或它们的组合以及诸如庚烷等非极性溶剂中的无水溶液，然后将混合物冷却，借此形成形式D结晶多晶型物，所述形式D结晶多晶型物展现在约9.2、14.0、14.8、19.7以及20.0度2-θ处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。在一些方面中，将混合物种晶。

在一个方面中，本文所提供的结晶多晶型物为研磨的。在另一方面中，本文所提供的结晶无水多晶型物为研磨的。

在一个方面中，提供了一种无定形化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈。

在一个方面中，提供了一种制备无定形化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈的方法，所述方法包括加热化合物的结晶形式直到溶解，随后冷却以形成无定形化合物。在一个方面中，通过诸如在干冰或液氮浴槽中快速冷却来进行冷却。

附图说明

图1以示意图示出了式I化合物多晶型物形式形式A、B、C以及D之间的相互转化关系。

图2示出了式I化合物多晶型物形式形式A、B、C以及D的XRPD图案的叠加图。

图3示出了形式A多晶型物的单晶X射线结构。

图4示出了形式C多晶型物的单晶X射线结构。

图5示出了形式D多晶型物的单晶X射线结构。

图6示出了形式A(无水)多晶型物的XRPD图案。

图7示出了形式A(无水)多晶型物的TGA和DSC数据。

图8示出了形式B(环己醇溶剂合)多晶型物的XRPD图案。

图9示出了形式B(环己醇溶剂合)多晶型物的TGA和DSC数据。

图10示出了形式C(无水)多晶型物的XRPD图案。

图11示出了形式C(无水)多晶型物的TGA和DSC数据。

图12示出了形式D(无水)多晶型物的XRPD图案。

图13示出了形式D(无水)多晶型物的TGA和DSC数据。

图14示出了形式C单晶的PLM图像。

图15示出了形式D单晶的PLM图像。

图16示出了无定形形式E的偏振光显微术图像。

图17示出了无定形形式E的XRPD衍射图。

定义

除非另外定义，否则本文所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员通常所理解相同的含义，并且与下文一致：

词语“包含(comprise/comprising)”和“包括(include/including/includes)”在用于本说明书和以下权利要求中时意在表示存在所陈述的特征、整体、组件或步骤，但它们不排除存在或添加一个或多个其他特征、整体、组件、步骤或它们的组。

如本文所用，术语“约”或“大致”当用于提到X射线粉末衍射图案峰位置时是指峰的固有变异性，所述峰的固有变异性根据所用的仪器取决于例如所用设备的校准、用于制备多晶型物的方法、结晶材料的年龄等。在此情况下，仪器的测量变异性为约加/减±0.3度2-θ。除非另外指出(例如为±0.05度2-θ)，否则受益于本公开，本领域技术人员将在此背景下理解“约”或“大致”的使用。关于其他所规定参数(例如水含量、C_最大、t_最大、AUC、固有溶解速率、温度以及时间)的术语“约”或“大致”指示在例如测量所述参数或实现所述参数时的固有变异性。受益于本公开，本领域技术人员将将参数变异性理解为意味着使用词语约或大致。

如本文所用，“多晶型物”是指出现化合物的堆积或构象/构型不同但具有相同化学组成的不同结晶形式。结晶形式在晶格中具有分子的不同排列和/或构象。溶剂合物为含有化学计算量或非化学计算量的溶剂的晶体形式。如果合并的溶剂为水，那么溶剂合物通常称为水合物。水合物/溶剂合物可以具有相同溶剂含量但晶格堆积或构象不同的化合物多晶型物的形式存在。因此，单一化合物可产生多种多晶型形式，其中每种形式具有不同并且独特的物理性质，诸如溶解度型态、熔点温度、吸湿性、粒子形状、形态、密度、流动性、可压制性和/或X射线衍射峰。每种多晶型物的溶解度可变化，因此，鉴定药物多晶型物的存在为提供具有可预测的溶解度型态的药物所必需的。需要对药物的所有固体状态形式，包括所有多晶型形式进行表征和研究，并且测定每种多晶型形式的稳定性、溶解情况以及流动性质。可在实验室中通过X射线衍射测量术以及通过诸如红外或拉曼或固态NMR波谱学等其他方法来辨别化合物的多晶型形式。关于多晶型物和多晶型物的药物应用的总综述参见G.M.Wall,Pharm Manuf.3:33(1986)；J.K.Haleblian和W.McCrone,J.Pharm.Sci.,58:911(1969)；“Polymorphism in Pharmaceutical Solids,Second Edition(Drugs and thePharmaceutical Sciences)”,Harry G.Brittain编(2011)CRC Press(2009)；以及J.K.Haleblian,J.Pharm.Sci.,64,1269(1975)，所述参考文献全部以引用的方式并入本文中。

缩略词“XRPD”意指X射线粉末衍射，这是一种在存在一种固体组分的情况下以展示X射线衍射图案来测量X射线衍射的分析技术。可使用CuKα1辐射来制备x射线衍射图案。结晶并且具有规则重复的原子阵列的材料产生独特粉末图案。具有类似晶胞的材料将给出与在°2θ(θ)中所测量的位置类似的X射线衍射图案。展现此性质的溶剂合物称为同构或同形溶剂合物。反射强度根据引起衍射的电子密度以及样品、样品制备以及仪器参数而变化。根据用于收集数据的X射线衍射***的已知反应基于一个或多个所测量粉末图案的整体外观来进行XRPD数据的分析。对于粉末图案中可存在的衍射峰，可使用它们的位置、形状、宽度以及相对强度分布来表征粉末样品中的固态有序性类型。可使用仪器背景顶部的任何宽扩散式散射(晕)的位置、形状以及强度来表征固态无序性的水平和类型。存在于粉末样品中的固态有序性和无序性的组合解释提供样品宏观结构的定性测量。

术语“共晶”是指由通常呈化学计算比率的两种或更多种不同分子化合物组成的结晶分子复合物，所述两种或更多种不同分子化合物既不是溶剂合物，也不是简单盐。共晶由氢键键结的复合物与“药学上可接受的”共晶形成物(coformer)组成(Aitipamula,S.等(2012)Cryst.Growth Des.12(5):2147–2152)。共晶形成物包括但不限于乙酰水杨酸、反-乌头酸、己二酸、L-抗坏血酸、苯甲酸、柠檬酸、果糖、富马酸、没食子酸、葡萄糖、戊二酸、马尿酸、4-羟基苯甲酸、马来酸、丙二酸、甘露糖醇、烟酰胺、烟酸、苯丙氨酸、核黄素、水杨酸、琥珀酸以及香草酸。

如本文所用的短语“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的药学上可接受的有机或无机盐。示例性盐包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、丹宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、蔗糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲烷磺酸盐“甲磺酸盐”、乙烷磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐以及双羟萘酸盐(即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐))。其他盐包括酸性盐，诸如上文所描述的共晶形成物。药学上可接受的盐可涉及包括另一分子，诸如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其他反离子。反离子可为稳定母体化合物上的电荷的任何有机或无机部分。此外，药学上可接受的盐可在其结构中具有超过一个带电荷原子。多个带电荷原子为药学上可接受的盐的一部分的情况可具有多个反离子。因此，药学上可接受的盐可具有一个或多个带电荷原子和/或一个或多个反离子。

可通过本领域中可获得的任何适合的方法来制备所需药学上可接受的盐。举例来说，用无机酸或用有机酸处理游离碱，所述无机酸为诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，所述有机酸为诸如乙酸、马来酸、琥珀酸、苦杏仁酸、甲磺酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷基酸(诸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α羟基酸(诸如柠檬酸或酒石酸)、氨基酸(诸如天冬氨酸或谷氨酸)、芳族酸(诸如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(诸如对甲苯磺酸或乙磺酸)等。例如以下文献论述了通常被认为适合于由碱性药物化合物形成药学上可用或可接受的盐的酸：Stahl PH,Wermuth CG编.Handbook of Pharmaceutical Salts；Properties,Selection and Use,第2版修订本(International Union of Pure andApplied Chemistry).2012,New York:Wiley-VCH；S.Berge等,Journal ofPharmaceutical Sciences(1977)66(1)1 19；P.Gould,International J.ofPharmaceutics(1986)33 201 217；Anderson等,The Practice of Medicinal Chemistry(1996),Academic Press,New York；Remington’s Pharmaceutical Sciences,第18版,(1995)Mack Publishing Co.,Easton PA；以及The Orange Book(Food&DrugAdministration,Washington,D.C.在它们的网站上)。这些公开内容以对其引用的方式并入本文中。

短语“药学上可接受”表明物质或组合物必须与包含制剂的其他成分和/或用其治疗的哺乳动物在化学上和/或毒理学上为相容的。

“溶剂合物”是指一个或多个溶剂分子与本发明的化合物的缔合或复合。形成溶剂合物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、环己醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸以及乙醇胺。可形成溶剂合物的其他溶剂包括来自“Q3C-Tables and List Guidance forIndustry:”(2017年6月)US Dept.HHS,Food and Drug Administration,Center for DrugEvaluation and Research(CDER)以及Center for Biologics Evaluation and Research(CBER)的2类和3类组。可形成溶剂合物的2类组溶剂为：乙腈、氯苯、氯仿、环己烷、异丙苯、1,2-二氯乙烯、二氯甲烷、1,2-二甲氧基乙烷、N,N-二甲基乙酰胺、N,N-二甲基甲酰胺、1,4-二噁烷、2-乙氧基乙醇、乙二醇、甲酰胺、己烷、甲醇、2-甲氧基乙醇、甲基丁基酮、甲基环己烷、甲基异丁基酮、N-甲基吡咯烷酮、硝基甲烷、吡啶、环丁砜、四氢呋喃(THF)、四氢萘、甲苯、三氯乙烯以及二甲苯。也可形成溶剂合物的3类组溶剂为：乙酸、庚烷、丙酮、乙酸异丁酯、苯甲醚、乙酸异丙酯、1-丁醇、乙酸甲酯、2-丁醇、3-甲基-1-丁醇、乙酸丁酯、甲基乙基酮、叔丁基甲醚、2-甲基-1-丙醇、二甲亚砜、戊烷、乙醇、1-戊醇、乙酸乙酯、1-丙醇、***、2-丙醇、甲酸乙酯、乙酸丙酯、甲酸以及三乙胺。

术语“水合物”是指溶剂分子为水的复合物。

术语“手性”是指分子具有与镜像配偶体不可重叠的性质，而术语“非手性”是指分子可重叠于它们的镜像配偶体上。

术语“立体异构体”是指化学组成相同，但原子或基团的空间排列有所不同的化合物。

“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心并且分子不为彼此的镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同物理性质，例如熔点、沸点、光谱性质以及反应性。可在诸如电泳和色谱法等高分辨率分析程序下对非对映异构体的混合物进行分离。

“对映异构体”是指为彼此的不能重叠的镜像的两种化合物立体异构体。

本文所用的立体化学定义和惯例总体上遵循S.P.Parker编,McGraw-HillDictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；以及Eliel,E.和Wilen,S.,“Stereochemistry of Organic Compounds”,John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994。本发明的化合物可含有不对称或手性中心，并且因此以不同立体异构体形式存在。本发明的化合物的所有立体异构体形式(包括但不限于非对映异构体、对映异构体以及阿托异构体(atropisomer)以及其混合物，诸如外消旋混合物)旨在形成本发明的一部分。许多有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有转动平面偏振光的平面的能力。在描述光学活性化合物时，前缀D和L或R和S用于表示分子围绕它的一个或多个手性中心的绝对构型。前缀d和l或(+)和(-)用于指定由化合物引起的平面偏振光旋转的符号，其中(-)或l意味着化合物为左旋的。具有前缀(+)或d的化合物为右旋的。对于给定化学结构，这些立体异构体相同，除了它们为彼此的镜像。特定立体异构体也可称为对映异构体，并且此类异构体的混合物常常被称为对映异构体混合物。对映异构体的50:50混合物称为外消旋混合物或外消旋物，外消旋混合物或外消旋物在化学反应或方法中在一直不存在立体选择或立体特异性的情况下可存在。术语“外消旋混合物”和“外消旋物”是指两种对映异构体种类的等摩尔混合物，它没有光学活性。

术语“互变异构体”或“互变异构体形式”是指经由低能量屏障可相互转化的具有不同能量的结构异构体。举例来说，质子互变异构体(也称为质子异变互变异构体)包括经由质子迁移而相互转化，诸如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过一些成键电子的再组织而相互转化。

式I化合物

本公开包括式I化合物(CAS登记号1374828-69-9)的多晶型物和无定形形式，所述式I化合物具有以下结构：

并且名称为：2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈(WO 2012/062783；US 8815882；US2012/0157427，其中的每一者以引用的方式并入本文中)。如本文所用，式I化合物包括互变异构体和其药学上可接受的盐或共晶。式I化合物为制剂中用于治疗神经退行性和其他病症的API(活性药物成分)，质子化时的pKa经计算为6.7和2.1。

式I化合物的结晶和筛选

使用多种结晶或固体转变方法来进行初始多晶型物筛选实验，包括：反溶剂添加、反向反溶剂添加、缓慢蒸发、缓慢冷却、在室温(RT)下制浆、在50℃下制浆、固体气相扩散、液体气相扩散以及聚合物诱导结晶。通过所有这些方法，均可鉴定形式A晶体类型。收集从各种多晶型物筛选方法获得的形式A的偏振光显微术(PLM)图像(实施例5)。经由反溶剂添加获得的粒子显示约20至50微米(μm)直径的小尺寸，而缓慢蒸发、缓慢冷却(除了THF/异辛烷)、液体气相扩散以及聚合物诱导结晶产生具有较大尺寸的粒子。将异辛烷添加至式I化合物的二氯甲烷(DCM)溶液中产生具有最均匀尺寸的粒子。粗式I化合物从THF/正庚烷结晶析出，然后进行微粒化。开展结晶程序以控制粒度。

制备式I化合物的总共四种晶体形式(形式A、B、C以及D)以及无定形形式E，包括3种无水物(形式A、C以及D)和一种溶剂合物(形式B)。浆液竞争实验表明当在RT下水分活度a_w≤0.2时形式D为热力学更稳定的，而当在RT下a_w≥0.5时形式C为更稳定的。24h溶解度评估显示形式A、C以及D在RT下在H₂O中的溶解度分别为0.18、0.14以及0.11mg/mL。DVS(动态气相吸附)结果表明形式A和D如在DVS中不到0.1％的可逆水吸收所定义为不吸湿的，而形式C为稍微吸湿的。表1中示出了晶体形式的某些表征数据和观测。

表1式I化合物的晶体形式的表征汇总

形式A和C的差示扫描量热法(DSC)分析表明形式C具有较高熔点和较高熔化热(表1)，表明两种形式为单向转变的，形式C为更稳定的形式。使用1:1形式A和C在多种溶剂中进行的竞争性浆液实验总是产生形式C，证实形式C比形式A更稳定。根据此结果，即使当结晶批次是用形式A的晶种进行种晶时也产生形式C。

式I化合物的多晶型物

对物理表征和相互转化关系进行评估以鉴定式I化合物的适合用于进一步研发的晶体形式。迄今为止，已制备总共四种晶体形式A、B、C以及D。还已制备无定形形式E。通过根据实施例6的程序进行的X射线粉末衍射(XRPD)以及根据实施例7的程序进行的热重分析(TGA)和差示扫描量热法(DSC)来表征所有晶体形式。形式鉴定研究证实形式A、C以及D为无水物并且形式B为环己醇溶剂合物。表1中呈现了所有晶体形式的表征汇总。经由浆液竞争实验研究三种无水物(形式A、C以及D)之间的热力学稳定性关系。以示意图描绘详细相互转化关系(图1中所示)。形式C与D之间的相互转化关系与H₂O的溶剂效应相关。当在室温(RT，25±2℃)下a_w≤0.2时形式D为热力学更稳定的，而当在RT下a_w≥0.5时形式C为更稳定的。通过在H₂O中的24h溶解度和吸湿性对形式A、C以及D进行进一步评估。形式A、C以及D在RT下在H₂O中的24h溶解度经测量分别为0.18、0.14以及0.11mg/mL。在24h溶解度评估之后未观测到形式变化。动态气相吸附(DVS)数据表明形式A和D为不吸湿的，而形式C为稍微吸湿的。根据表征和评估结果，形式C与D两者均显示优良物理化学性质，包括高结晶度、低TGA重量(Wt)损失以及单一尖锐DSC吸热。然而，考虑H₂O的溶剂效应与形式C与D之间的相互转化关系相关，控制加工溶剂中的水含量以及制造和储存期间的环境相对湿度可为有益的(对于形式C a_w≥0.5，对于形式D a_w≤0.2)。

制备式I化合物的总共四种晶体形式A、B、C以及D以及无定形形式E。图2中展示了式I化合物晶体形式的XRPD图案的叠加图。

晶体形式的相互转化

进行浆液竞争实验以研究三种无水物(形式A、C以及D)之间的相互转化关系。由于式I化合物在H₂O和非极性溶剂(例如正庚烷、环己烷)中显示低溶解度(<2mg/mL)并且在其他溶剂中显示良好溶解度(>40mg/mL)，所以将混合溶剂***用于大多数浆液竞争实验。首先在RT和50℃下进行形式A与C之间的浆液竞争。在RT下制浆40h或在50℃下制浆2h之后获得形式C。再进一步制浆三周产生除在暴露于H₂O时均呈新无水物形式的形式D。因此，在各种溶剂***中在形式C与D之间进一步进行浆液竞争。发现H₂O的溶剂效应与形式C与D之间的相互转化关系相关，并且在无水条件下形式D形成。

为理解形式A与形式C之间的热力学稳定性关系，在RT和50℃下在包括丙酮/正庚烷、甲基叔丁醚(MTBE)/庚烷以及水的不同溶剂***中进行浆液竞争实验。使用形式A使对应溶剂饱和，然后过滤以获得近饱和溶液。称取等量的形式A和C样品，然后与所制备的近饱和溶液混合以形成新的悬浮液，在RT和50℃下对其进行磁性搅拌(约1000rpm)。测量在制浆后剩余的固体的XRPD图案。在RT下制浆40h或在50℃下制浆2h之后获得形式C，指示从RT到50℃形式C为比形式A热力学更稳定的。进一步制浆超过3周使得形式D形成，除了在H₂O中在50℃下。添加形式D样品作为晶种，经由将形式A在RT下在MTBE/正庚烷(1:4，v/v)中制浆1天来获得形式D。

为进一步理解形式C与形式D之间的热力学稳定性关系，在RT和70℃下在包括甲基叔丁醚/庚烷、水、环己烷以及乙醇/异辛烷的各种溶剂***中进行浆液竞争实验。称取等量的形式C和D样品，然后与形式A在对应溶剂中的近饱和溶液混合以形成悬浮液，在不同温度下对其进行磁性搅拌(约1000rpm)。测量在制浆后剩余的固体的XRPD图案。在H₂O中在RT/70℃下和在EtOH/异辛烷(1:19)中在RT下制浆之后获得形式C，而在其他溶剂***中获得形式D。根据这些结果，认为形式C与D之间的相互转化关系与H₂O或EtOH的溶剂效应有关。为研究加工溶剂中的H₂O对形式C与D之间的相互转化关系的影响，在EtOAc/正庚烷(1:4，v/v)中在存在和不存在H₂O饱和的情况下进行形式C与形式D的浆液竞争。在用H₂O饱和的EtOAc/正庚烷(1:4，v/v)中获得形式C，而在未预处理的溶剂***中获得形式D。监测加工溶剂中的水含量并且在制造形式C或D样品期间加以控制。在于RT下具有不同水分活度(aw约0.2、0.5、0.8)的丙酮/H₂O***中进行形式C与形式D的浆液竞争。当在RT下aw为约0.2时获得形式D，而当在RT下aw为约0.5、0.8时获得形式C。监测水分活度(或相对湿度)并且在制造和储存形式C或D样品期间加以控制。

在RT下在水中测量形式A、C以及D的24h溶解度。将形式A、形式C以及形式D样品以10mg/mL的剂量浓度悬浮至H₂O中。在将悬浮液在RT下制浆24h(1000rpm)之后，分离上清液用于HPLC溶解度测量并且通过XRPD表征残余固体。形式A、C以及D在H₂O中的溶解度经测量分别为0.18、0.14以及0.11mg/mL。对于形式A、C或D在于RT下进行24h溶解度评估之后未观测到形式变化。

单晶结构测定

通过实施例4的程序通过单晶X射线衍射(SCXRD)测定形式A、C以及D的晶体结构。经由在RT下从乙酸正丁酯/环己烷溶剂***(乙酸正丁酯为溶剂，而环己烷为反溶剂)进行液体气相扩散来获得对于SCXRD来说质量适当的形式A的单晶。实施例4中列出了关于结构精修的结晶学数据和信息。SCXRD表征表明晶体采用P2₁/n空间群，并且

α＝90°，β＝94.408(11)°，γ＝90°。

图3中展示了形式A多晶型物的单晶的不对称单元。不对称单元仅包含一个式I分子，指示形式A为无水物。

形式A单晶结构中的氢键显示通过分子间H键(N3-H3…N7,N-4…N1)以及额外凡得瓦相互作用(Van der Waals interaction)维持的式I分子三维(3-D)堆积。所计算的XRPD图案与形式A的实验XRPD图案一致(图6)。

形式C(图4)和形式D(图5)的单晶X射线结构显示这些形式的单晶相互作用，以及密度(表2)。

表2.形式A、C、D的晶体密度

动态气相吸附DVS

为研究固体形式稳定性随湿度的变化，通过实施例8的程序在25℃下在0与95％相对湿度(RH)之间采集形式A、形式C以及形式D的动态气相吸附(DVS)等温线。根据DVS结果，形式A(在80％RH下在25℃下水吸收为0.04％)和形式D(在80％RH下在25℃下水吸收为0.05％)为不吸湿的，而形式C(在80％RH下在25℃下水吸收为0.6％)为稍微吸湿的。在DVS评估之后未观测到形式变化。

X射线粉末衍射分析

通过实施例6的程序使用可商购获得的分析软件进行X射线粉末衍射(XRPD)图案的分析。XRPD可用于通过独特衍射图案来分辨不同结晶相、多晶型物、水合物或溶剂合物。沿横坐标(水平轴)绘制2-θ值，即入射光束与衍射光束之间的一系列角度。纵座标(竖直轴)记录由检测器登记的散射X射线的强度。峰集合充当结晶物质内的结晶晶胞的独特指纹。结晶晶胞为在整个晶体的三维空间中周期性重复的最小原子尺度3D片段。通过结晶晶胞(并且因此峰位置)来辨别所有结晶物质。通过将所测量的峰位置与数据库中所拥有的那些峰位置相比较，可唯一地鉴定出结晶物质。对于纯物质，所有峰的位置通常为定义构成结晶晶胞的基础平行六面体的三个参数：a、b、c以及三个角度：α、β、γ的函数。

式I化合物固体形式

通过XRPD、TGA以及DSC对形式A进行表征。图6中示出了XRPD图案并且显示形式A为结晶的。表3中编辑了式I，形式A的XRPD峰检索报告。图7中示出了TGA和DSC数据。在TGA曲线上在高达120℃下观测到0.6％的重量损失。DSC结果展现在122.8℃(起始温度)下的尖锐吸热。根据低TGA重量损失和唯一的尖锐DSC吸热，认为形式A为无水物。

表3.式I，形式A的XRPD峰检索报告

通过XRPD、TGA以及DSC对形式B进行表征，并且经由将形式A在乙酸异丁酯/环己醇(1:9，v/v)中在RT下制浆1周来获得形式B。图8中示出了XRPD图案。表4中编辑了式I，形式B的XRPD峰检索报告。图9中展示了TGA和DSC数据。观测到在TGA曲线上在高达120℃下13.9％的重量损失以及在DSC曲线上在87.9℃和103.2℃(起始温度)下的两处吸热。NMR谱(1H)指示环己醇/API的摩尔比为0.5:1(12.9wt％)。与加热和1H NMR结果组合，认为形式B为环己醇溶剂合物。

表4.式I，形式B的XRPD峰检索报告

通过XRPD、TGA以及DSC对形式C进行表征。图10中示出了XRPD图案。表5中编辑了式I，形式C的XRPD峰检索报告。图11中展示了TGA和DSC数据。观测到在TGA曲线上在高达120℃下0.8％的重量损失以及在DSC曲线上在127.8℃(起始温度)下的尖锐吸热。根据低TGA重量损失和唯一的尖锐DSC吸热，认为形式C为无水物。

表5.式I，形式C的XRPD峰检索报告

添加从浆液竞争获得的形式D样品，经由将形式A在RT下在MTBE/正庚烷(1:4，v/v)中制浆1天来获得形式D晶种。图12中示出了XRPD图案。表6中编辑了式I，形式D的XRPD峰检索报告。图13中展示了TGA和DSC数据。观测到在TGA曲线上在高达120℃下0.2％的重量损失以及在DSC曲线上在129.1℃(起始温度)下的尖锐吸热。根据低TGA重量损失和唯一的尖锐DSC吸热，认为形式D为无水物。

表6.式I，形式D的XRPD峰检索报告

药物组合物和制剂

可根据标准药物惯例并且根据实施例9的程序对式I的多晶型物形式进行配制，用于在包括人的哺乳动物中进行治疗性治疗(包括预防性治疗)。本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含与一种或多种药学上可接受的载体、助流剂、稀释剂或赋形剂缔合的式I化合物。

适合的载体、稀释剂、助流剂以及赋形剂为本领域技术人员熟知的并且包括诸如以下材料：碳水化合物、蜡、水溶性和/或可膨胀聚合物、亲水或疏水材料、明胶、油、溶剂、水等。

可使用常规溶解和混合程序来制备制剂。将本公开的化合物典型地配制成用于提供轻易可控制的药物剂量并且实现在所规定方案情况下的患者顺应性的药物剂型。

可根据用于施用药物的方法以多种方式对用于施加的药物组合物(或制剂)进行包装。通常，用于分配的物品包括以适当形式存放药物制剂的容器。适合的容器为本领域技术人员熟知的并且包括诸如以下材料：瓶子(塑料和玻璃)、香囊、安瓿、塑料袋、金属筒等。容器还可包括防干扰装配物以防止不慎接触包装的内容物。此外，容器上面放置有描述容器内容物的标签。标签还可包括适当警告。

可将式I化合物的多晶型物形式的药物制剂制备成用于以冻干制剂、磨碎的粉末或水溶液形式与药学上可接受的稀释剂、载体、赋形剂、助流剂或稳定剂(Remington'sPharmaceutical Sciences(1995)第18版,Mack Publ.Co.,Easton,PA)一起施用的各种途径和类型。可通过在周围温度下在适当pH值下并且在所要纯度下与生理学上可接受的载体(即在所采用的剂量和浓度下对接受者无毒的载体)混合来进行配制。制剂的pH值主要取决于特定用途和化合物浓度，但可在约3至约8范围内。

药物制剂优选为无菌的。特别地，要用于体内施用的制剂必须为无菌的。此类灭菌通过经无菌过滤膜过滤而轻易实现。

药物制剂一般可以固体组合物、片剂、丸剂、胶囊、冻干制剂的形式或以水溶液形式加以储存。

将以一定方式，即与优良医学实践一致的量、浓度、时间表、过程、媒介物以及施用途径来给予和施用本发明的药物制剂。此背景下考虑的因素包括所治疗的特定病症、个别患者的临床疾患、病症的病因、剂递送部位、施用方法、施用时间表以及执业医师已知的其他因素。

可接受的稀释剂、载体、赋形剂以及稳定剂在所采用的剂量和浓度下对接受者无毒，并且包括缓冲剂，诸如磷酸盐、柠檬酸盐以及其他有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨酸；防腐剂(诸如氯化十八基二甲基苯甲铵；氯化六甲铵；苯扎氯铵、苄索氯铵；苯酚、丁基、乙醇或苯甲醇；对羟基苯甲酸烷基酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；以及间甲酚)；低分子量(小于约10个残基)多肽；蛋白质，诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，诸如EDTA；糖，诸如乳糖、蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐反离子，诸如钠；金属络合物(例如Zn-蛋白质络合物)；以及和/或非离子表面活性剂，诸如TWEEN^TM(包括Tween 80)、PLURONICS^TM或聚乙二醇(PEG)，包括PEG400。还可将活性药物成分包埋于微胶囊中、胶态药物递送***(例如脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米粒子以及纳米胶囊)中或***液中，所述微胶囊系例如通过凝聚技术或通过界面聚合而制备，例如分别为羟甲基纤维素或明胶-微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊。Remington'sPharmaceutical Sciences第18版,(1995)Mack Publ.Co.,Easton,PA中公开了此类技术。Liberman,H.A.和Lachman,L.编,Pharmaceutical Dosage Forms,Marcel Decker,第3卷,第2版,New York,NY中可找到药物制剂的其他实例。

片剂可包含选自以下的一种或多种药学上可接受的载体、助流剂、稀释剂或赋形剂：微晶纤维素、乳糖、淀粉乙醇酸钠以及硬脂酸镁。

药学上可接受的助流剂可选自二氧化硅、粉末纤维素、微晶纤维素、金属硬脂酸酯、铝硅酸钠、苯甲酸钠、碳酸钙、硅酸钙、玉米淀粉、碳酸镁、石棉游离滑石、stearowet C、淀粉、淀粉1500、月桂基硫酸镁、氧化镁以及它们的组合。

药物制剂包括适合于本文详述的施用途径的那些药物制剂。制剂可适宜地以单位剂型存在并且可通过制药技术中熟知的方法中的任一者来制备。技术和制剂通常可在Remington's Pharmaceutical Sciences第18版(1995)Mack Publishing Co.,Easton,PA中找到。此类方法包括使活性成分与构成一种或多种辅助成分的载体缔合的步骤。可通过使活性成分与液体载体或精细粉碎的固体载体或两者均匀并且紧密地缔合，然后在必要时使产物成形来制备制剂。

药物组合物可呈无菌可注射制剂的形式，诸如无菌可注射水性或油性悬浮液。可根据已知技术使用上文已提到的那些适合的分散或润湿剂和悬浮剂来配制此悬浮液。无菌可注射制剂可为于无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的溶液或悬浮液，诸如于1,3-丁二醇中的溶液，或由冻干粉末制备。在可接受的媒介物和溶剂中，可使用的为水、林格氏溶液(Ringer's solution)以及等张氯化钠溶液。此外，可常规地采用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，诸如油酸等脂肪酸同样可用于制备可注射物。

在另一方面中，本公开涉及一种治疗至少部分由富含亮氨酸重复激酶2(LRRK2)介导的疾病或疾患的方法。具体地说，本公开提供了预防或治疗哺乳动物的与LRRK2相关的病症的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的本文所提供的化合物的步骤。在一些实施方案中，至少部分由LRRK2介导的疾病或疾患为神经退行性疾病，例如中枢神经***(CNS)病症，诸如帕金森氏病(PD)、阿茨海默氏病(AD)、痴呆(包括路易体痴呆(Lewybody dementia)和血管性痴呆)、肌萎缩性侧索硬化(ALS)、年龄相关记忆功能障碍、轻度认知损伤(例如包括从轻度认知损伤到阿茨海默氏病的转变)、嗜银颗粒疾病、溶酶体病症(例如尼曼-皮克C型疾病(Niemann-Pick Type C disease)、高歇氏病(Gaucher disease))皮质基底节变性、进行性核上性麻痹、遗传性额颞痴呆以及与染色体17关联的帕金森症(FTDP-17)、与药物成瘾相关的戒断症状/复发、L-多巴诱导的运动障碍、亨廷顿氏病(Huntington's disease，HD)以及HIV相关痴呆(HAD)。在其他实施方案中，病症为包括但不限于脑、心脏、肾脏以及肝脏的器官的缺血性疾病。

在另外一些实施方案中，至少部分由LRRK2介导的疾病或疾患为癌症。在某些特定实施方案中，癌症为甲状腺癌、肾癌(包括***状肾癌)、乳腺癌、肺癌、血癌以及***癌(例如实体肿瘤)、白血病(包括急性骨髓性白血病(AML))或淋巴瘤。在一些实施方案中，癌症为肾癌、乳腺癌、***癌、血癌、***状癌、肺癌、急性骨髓性白血病或多发性骨髓瘤。

在其他实施方案中，将目前所公开的化合物用于治疗炎性病症的方法中。在一些实施方案中，病症为肠道的炎性疾病，诸如克罗恩氏病(Crohn's disease)或溃疡性结肠炎(两者通常一起称为炎性肠道疾病)。在其他实施方案中，炎性疾病为麻疯病、肌萎缩性侧索硬化、类风湿性关节炎或强直性脊柱炎。在一些实施方案中，炎性疾病为麻疯病、克罗恩氏病、炎性肠道疾病、溃疡性结肠炎、肌萎缩性侧索硬化、类风湿性关节炎或强直性脊柱炎。

在其他实施方案中，将目前所公开的化合物用于治疗以下疾病的方法中：多发性硬化、全身性红斑狼疮、自体免疫性溶血性贫血、纯红细胞再生障碍、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、伊文思综合征(Evans syndrome)、血管炎、大疱性皮肤病症、1型糖尿病、休格伦氏综合征(Sjogren's syndrome)、德维克氏病(Devic's disease)以及炎性肌病变。

实施例

实施例1式I化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈CAS登记号1374828-69-9的分离和物理化学性质.

将根据US 8815882的实施例394制备的式I化合物以及Estrada,A.A.等(2013)J.Med.Chem.57:921-936的化合物12溶解于甲基叔丁醚(MTBE，10体积，200ml)中，得到棕色溶液，所述参考文献中的每一者特定地以引用的方式并入中。将此溶液在3ml/min下经3MZeta Plus活性炭片(R55SP，5cm直径)过滤。将过滤器用MTBE(5体积，100ml)洗涤。将透明无色溶液(300ml)浓缩至8体积(160ml)并且装入500ml反应器中。在20℃下添加正庚烷(8体积，160ml)。溶液最初仍然透明，但然后在2分钟之后开始结晶。逐渐增加温度(速率2℃/min)。仅在69℃下即实现完全溶解。在70℃下再添加庚烷(4体积，80ml)；在70℃下视觉观测到透明溶液。将温度设定为65℃(1.0℃/min)；在65℃下在透明溶液中，添加式I化合物的晶种晶体(200mg，相同批次)并且它们未溶解。然后历经8h将温度降低至20℃。将其在20℃下搅拌过夜。将固体过滤并且用母液洗涤两次。将其在真空下在40℃下干燥2h，得到15.91g的结晶式I化合物(79.6％产率)。将母液蒸发至干燥，再得到3.47g(17.4％回收率)。

实施例2形式C多晶型物的单晶生长

经由在RT下进行液体气相扩散从乙酸正丁酯/环己烷溶剂混合物***(乙酸正丁酯为溶剂，而环己烷为反溶剂)获得式I，形式C多晶型物的块状单晶。实验细节如下。

称取约30mg式I，形式A样品至3mL玻璃小瓶中，并且添加65μL乙酸正丁酯溶剂以将所有固体样品溶解。还将少量形式C晶体样品添加至3-mL小瓶中作为晶种。然后，将小瓶添加至含有4mL反溶剂环己烷的20-mL玻璃小瓶中用于在周围温度下进行液体气相扩散。在11天之后，如图14中所示获得块状晶体。

实施例3形式D多晶型物的单晶生长

经由在RT下缓慢蒸发从丙酮/正庚烷(1:10，v/v)溶剂混合物***获得式I，形式D多晶型物的块状单晶。实验细节如下。

称取约30mg式I，形式A样品至4mL套管瓶(shell vial)(44.6mm×14.65mm)中，并且添加0.2mL乙酸正丁酯和2.0mL正庚烷以将固体样品溶解。还将少量形式D晶体样品添加至4-mL小瓶中作为晶种。然后将小瓶放置于通风橱中用于在周围温度下缓慢蒸发。在15天之后，如图15中所示获得块状晶体。

实施例4单晶结构测定

从形式C单晶样品或形式D单晶样品选择无色块状单晶并且用Paratone-N(油基防冻剂)包裹。将晶体以随机取向安装于密拉环(mylar loop)上并且在150K下浸没于氮气流中。在Agilent

(Cu/K_α

)衍射仪上进行初步检查和数据收集并且用

(Agilent，版本：1.171.38.41)软件包分析。

形式C单晶的数据收集细节如下：调取晶胞参数和用于数据收集的取向矩阵并且通过

软件使用在4.0790°＜θ＜70.0660°范围内的6568个反射的设定角进行精修。收集数据，直到在150.2(2)K下70.266°的最大衍射角(θ)。数据集合为99.9％完整的，平均I/σ为19.4并且D min(Cu)为

形式C单晶的数据还原细节如下：将数据框(Frame)用

版本：1.171.38.41软件整合。收集到总共12836个反射，其中6205个为独特的。对数据应用洛伦兹(Lorentz)和极化校正。使用在SCALE3 ABSPACK尺度算法中实现的球谐函数进行经验吸收修正。此材料在此波长

下的吸收系数μ为0.964mm^-1并且最小和最大透射为0.80956和1.00000。对等效反射的强度取平均值。根据强度，所述平均的吻合因子为2.08％。

使用ShelXS^TM结构解析程序(Sheldrick,G.M.(2008).Acta Cryst.A64:112-122)通过直接法在空间群C2/c中解析形式C的结构并且使用OLEX2中所含的使用对F²的全矩阵最小二乘法的ShelXS^TM，版本2014/7精修程序包进行精修(Dolomanov,O.V.,等,(2009)J.Appl.Cryst.42:339-341)。对所有非氢原子进行各向异性精修。用几何学计算氢原子出现在碳原子上的位置并有使用骑式模型(riding model)精修，但根据傅里叶图(FourierMap)对出现在氮原子上的氢原子自由精修。

形式D单晶的数据收集细节如下：调取晶胞参数和用于数据收集的取向矩阵并且通过

软件使用在4.0180°＜θ＜70.5190°范围内的30349个反射的设定角进行精修。收集数据，直到在150K下70.562°的最大衍射角(θ)。数据集合为89.9％完整的，平均I/σ为29.3并且D min(Cu)为

形式D单晶的数据还原细节如下：将数据框用

版本：1.171.38.41软件整合。收集到总共47670个反射，其中11179个为独特的。对数据应用洛伦兹和极化校正。使用在SCALE3 ABSPACK尺度算法中实现的球谐函数进行经验吸收修正。此材料在此波长

下的吸收系数μ为0.980mm^-1并且最小和最大透射为0.83622和1.00000。对等效反射的强度取平均值。根据强度，所述平均的吻合因子为2.69％。

通过直接法使用ShelXS结构解析程序在空间群Pca2₁中解析形式D的结构并且使用OLEX2中所含的使用对F²的全矩阵最小二乘法的ShelXS^TM，版本2014/7精修程序包进行精修。对所有非氢原子进行各向异性精修。用几何学计算氢原子位置并且使用骑式模型精修。

表7.单晶X射线衍射(SCXRD)仪器参数

使用ShelXT(Sheldrick,G.M.(2015).Acta Cryst.A71,3-8)结构解析程序(固有位相决定法)解析式I化合物的多晶型物形式并且使用OLEX2(Dolomanov,O.V.等,“OLEX2:acomplete structure solution,refinement and analysis program”.J.Appl.Cryst.2009,42,339-341)中所含的SHELXL-2015精修程序包(Sheldrick,G.M.(2015).Acta Cryst.A71,3-8))(对F²的全矩阵最小二乘法)进行精修。从Mercury(Macrae,C.F.等,Appl.Cryst.(2006)39:453–457)获得所计算的XRPD图案并且通过Diamond产生晶体结构表示。使用Bruker D8 VENTURE衍射仪(Mo/Kα辐射，

)在296K下收集单晶X射线衍射数据。表8示出了形式A、C以及D的结晶学数据和结构精修。

表8.式I单晶多晶型物形式A、C、D的结晶学数据和结构精修

制备形式C和形式D的单晶并且通过单晶X射线衍射(SCXRD)分析。成功测定形式C和形式D的单晶结构。

SCXRD表征证实形式C以单斜晶系和C2/c空间群形式结晶，晶胞参数

晶胞体积V经计算为

不对称单元包含两个分子，表明形式C为无水物。形式C的所计算的密度为1.367g/cm³。单晶的晶胞包含十六个分子。

SCXRD表征证实形式D以斜方晶系和Pca2₁空间群形式结晶，晶胞参数

晶胞体积V经计算为

不对称单元包含四个分子，表明形式D为无水物。形式D的所计算的密度为1.390g/cm³。单晶的晶胞包含十六个分子。

实施例5偏振光显微术(PLM)

使用具有

CT3照相机的Axio Lab.A1正置显微镜在RT下捕获PLM图像。

实施例6周围X射线粉末衍射术(XRPD)

用在表9的XRPD参数情况下使用的PANalytical Empyrean X射线粉末衍射计收集XRPD图案：

表9XRPD仪器参数

实施例7TGA和DSC测试

使用来自TA Instruments的TA Q500/Q5000 TGA收集TGA数据。使用来自TAInstruments的TA Q200/Q2000 DSC进行DSC。表10中列出了所用的详细参数：

表10.TGA和DSC参数

参数	TGA	DSC
			方法	斜坡法	斜坡法
样品盘	铂，开放	铝，折边
			温度	RT-所需温度	25℃-所需温度
加热速率	10℃/min	10℃/min
			吹扫气体	N<sub>2</sub>	N<sub>2</sub>

实施例8DVS测试

经由SMS(表面测量***)DVS Intrinsic测量DVS。针对LiCl、Mg(NO₃)₂以及KCl的潮解点对25℃下的相对湿度进行校准。表11中列出了用于DVS测试的参数。

表11.DVS参数

实施例9结晶式I化合物的配制

在结晶之后，可通过使用辊式压实机进行干式造粒，随后进行压片操作对式I化合物的多晶型物形式进行配制。片剂中的其他成分可包括微晶纤维素(

PH，FMCBioPolymer)、乳糖(

Foremost Farms USA)、淀粉乙醇酸钠(

JRS Pharma)或硬脂酸镁(

Macron Fine Chemicals)。

实施例10无定形形式E

使固体2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈的0.5g样品升温直到观测到液体，然后添加至冷却至-45℃的小瓶中，从而产生“玻璃”固体。通过偏振光显微术(PLM)，未观测到双折射(图16)。通过XRPD进行的分析显示无衍射峰(inflection peak)并且显示指示无定形固体的特征“晕”(图17)。通过DSC进行的热分析显示在77.8℃下起始的放热结晶事件，随后为宽吸热熔融，指示在122.8℃下起始的结晶熔融。

虽然已出于清楚理解的目的通过描述和实施例较为详细地描述了前述发明，但所述描述和实施例不应被视为限制本发明的范围。因此，所有适合的修改和等效型式均可被视为属于本发明的如以下权利要求所限定的范围内。本文中所引用的所有专利和科学文献的公开内容明确地以全文引用的方式并入本文中。

Claims (29)

1.一种结晶化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈，所述结晶化合物选自：

形式B多晶型物，所述形式B多晶型物展现在约7.0、7.3、16.1、16.3、24.1、25.1以及26.6处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案；

形式C多晶型物，所述形式C多晶型物展现在约6.4、15.1、21.2、25.7以及27.8处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案；以及

形式D多晶型物，所述形式D多晶型物展现在约9.2、14.0、14.8、19.7以及20.0处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

2.如权利要求1所述的结晶化合物，其选自：

形式C多晶型物，所述形式C多晶型物展现在约6.4、8.1、8.6、8.8、9.9、10.2、12.9、13.8、15.1、15.4、16.5、19.8、21.2、22.1、23.7、25.7以及27.8处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案；以及

形式D多晶型物，所述形式D多晶型物展现在约8.0、8.7、9.2、9.8、10.4、12.9、13.4、14.0、14.8、16.4、18.5、19.7、20.0、20.8、23.1、23.3、23.9、25.5以及25.7处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

3.如权利要求1所述的结晶化合物，其中所述化合物呈大体上纯形式。

4.如权利要求1所述的结晶化合物，其中所述X射线粉末衍射图案是使用CuKα1辐射制备。

5.如权利要求1所述的结晶化合物，其中所述化合物为所述形式B多晶型物，所述形式B多晶型物具有大体上不含在约12.9和14.8±0.05度2-θ处的峰的X射线粉末衍射图案。

6.如权利要求1所述的结晶化合物，其中所述形式B多晶型物为环己醇溶剂合物。

7.如权利要求1所述的形式B多晶型物，其中差示扫描量热法DSC显示在约87.9和103.2℃下起始的两处熔融吸热。

8.如权利要求1所述的结晶化合物，其中所述化合物为所述形式C多晶型物，所述形式C多晶型物具有大体上不含在13.6和14.8±0.05度2-θ处的峰的X射线粉末衍射图案。

9.如权利要求1所述的结晶化合物，其中所述化合物为所述形式C多晶型物，所述形式C多晶型物还包含在16.5和22.1±0.05度2-θ处的峰。

10.如权利要求1所述的结晶化合物，其中所述形式C多晶型物为无水物。

11.如权利要求1所述的形式C多晶型物，其以图10中所示的X射线粉末衍射图案为特征。

12.如权利要求1所述的形式C多晶型物，其中差示扫描量热法DSC显示在约127.8℃下起始的熔融吸热。

13.如权利要求1所述的结晶化合物，其中所述化合物为所述形式D多晶型物，所述形式D多晶型物具有大体上不含在13.6±0.05度2-θ处的峰的X射线粉末衍射图案。

14.如权利要求1所述的结晶化合物，其中所述形式D多晶型物为无水物。

15.如权利要求1所述的形式D多晶型物，其以图12中所示的X射线粉末衍射图案为特征。

16.如权利要求1所述的形式D多晶型物，其中差示扫描量热法DSC显示在约129.1℃下起始的熔融吸热。

17.如权利要求1所述的结晶化合物，其当经受从约0％到约95％相对湿度的相对湿度增加持续约180分钟时展现不到约1％的质量增加。

18.如权利要求1所述的结晶化合物，其在暴露于约40℃和约75％相对湿度至少6个月后为稳定的。

19.一种结晶化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈，所述结晶化合物展现在约6.4、15.1、21.2、25.7以及27.8处具有以±0.3度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

20.一种药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的如权利要求1-19中任一项所述的结晶多晶型物以及药学上可接受的载体、助流剂、稀释剂或赋形剂。

21.如权利要求20所述的药物组合物，其呈片剂形式。

22.如权利要求20所述的药物组合物，其中所述治疗有效量为1至200mg。

23.如权利要求20所述的药物组合物，其中所述结晶多晶型物为研磨的。

24.一种制备结晶多晶型物的方法，所述方法包括在50℃下或高于50℃下在甲基叔丁醚、环戊基甲醚、乙酸乙酯、乙酸异丙酯或它们的组合以及诸如庚烷等非极性溶剂中加热2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈，然后将混合物冷却，借此形成形式C结晶多晶型物，所述形式C结晶多晶型物展现在约6.4、15.1、21.2、25.7以及27.8度2-θ处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

25.如权利要求24所述的方法，其中将所述混合物种晶。

26.一种制备结晶多晶型物的方法，所述方法包括在50℃下或高于50℃下加热2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈于甲基叔丁醚、环戊基甲醚、乙酸乙酯、乙酸异丙酯或它们的组合以及诸如庚烷等非极性溶剂中的无水溶液，然后将混合物冷却，借此形成形式D结晶多晶型物，所述形式D结晶多晶型物展现在约9.2、14.0、14.8、19.7以及20.0度2-θ处具有以度2-θ表示的特征峰的X射线粉末衍射图案。

27.如权利要求26所述的方法，其中将所述混合物种晶。

28.一种无定形化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈。

29.一种制备如权利要求28所述的无定形化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈的方法，所述方法包括加热所述化合物的结晶形式直到溶解，随后冷却以形成所述无定形化合物。

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