CN111803477A - 戒酒硫在制备抗头颈癌和抗纤维化药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了戒酒硫在制备抗头颈癌药物和抗肺纤维化药物中的用途。本发明首次发现了戒酒硫对头颈癌细胞的增殖抑制作用和凋亡促进作用，证明了戒酒硫是一种潜在的头颈癌疾病的临床治疗药物。所述头颈癌指包含口腔颌面部肿瘤(口腔癌，牙龈癌，颊癌)以及颈部肿瘤的头颈癌。本发明还首次发现了戒酒硫对肺纤维化具有缓解作用，说明戒酒硫在肺纤维化临床治疗中有重要意义，并为肺纤维化的治疗提供新的方向。所述肺纤维化指特发性肺纤维化以及临床继发性肺纤维化。

Description

戒酒硫在制备抗头颈癌和抗纤维化药物中的用途

技术领域

本发明涉及药品开发应用技术领域，具体涉及一种戒酒硫(二硫化四乙基秋兰姆)在制备抗头颈癌药物和抗肺纤维化药物中的用途。

背景技术

头颈癌是一种以口腔，咽，喉和鼻腔等部位的恶性上皮细胞包围为特征的肿瘤疾病。头颈癌是发病率第6高的癌症，头颈癌病人的5年生存率仅为40％-50％，每年全球头颈癌的新增病例为650000左右，同时每年因头颈癌而死亡的病人约350000。相关研究表明，吸烟，饮酒和***瘤病毒感染是头颈癌发病的主要诱导因素。目前对于头颈癌的治疗程序非常复杂，同时会给病人造成很大的经济和精神压力，与此同时，仍然缺乏有效的头颈癌治疗方法和药物。

特发性肺纤维化是一种以进行性慢性肺部炎症导致的，以肺通气功能丧失为转归的肺部疾病。特发性肺纤维化发病主要以成人为主，病人平均存活周期为3-6年。近些年来发现的药物中，吡非尼酮和尼达尼布是仅有的可用于肺纤维化治疗的药物，然而到目前为止能治疗肺纤维化的有效法只有肺移植。尽管近些年来对于特发性肺纤维化的研究一直在进行，但肺纤维化的有效治疗药物仍然十分匮乏。特发性肺纤维化发病过程中主要参与的细胞包括：淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细胞、上皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞等。其中成纤维细胞的激活为肌成纤维细胞，激活后的成纤维细胞通过分泌胶原蛋白、纤维连接蛋白等物质从而导致细胞外基质的沉积，最终引起肺纤维化。

戒酒硫最早被应用于肠道寄生虫疾病的治疗，随后发现治疗患者的酒精耐受反应的异常而被进一步研究并应用于戒除酒精中毒等症状。戒酒硫的用药剂量较高，在动物试验中的半数致死药量为8.6g/kg，病人用药剂量一般为每天500mg。因此戒酒硫对各类疾病的应用具有很高的安全性。作为一种小分子药物，戒酒硫在头颈癌和肺纤维化中的应用并未有报道。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种戒酒硫(二硫化四乙基秋兰姆)在制备抗头颈癌药物和抗肺纤维化药物中的用途；具体是在制备抗头颈癌(包含口腔颌面部肿瘤(口腔癌，牙龈癌，颊癌)以及颈部肿瘤的)药物和抗肺纤维化药物中的用途。本发明首次发现戒酒硫对肺纤维化的治疗作用。本发明选用临床应用后产生肺纤维化副作用的博来霉素作为实验性肺纤维化的诱导剂，从而使肺纤维化模型更贴近人体发病过程，让药物临床应用性更强。

本发明的目的是通过以下技术方案实现：

本发明涉及一种戒酒硫在制备治疗和抑制头颈癌药物中的用途。

优选的，所述头颈癌为包含口腔颌面部肿瘤、颈部肿瘤的头颈癌。所述口腔颌面部肿瘤包括口腔癌、牙龈癌、颊癌。

优选的，抗头颈癌作用是以促进头颈癌细胞凋亡以及抑制头颈癌细胞增殖作用实现的。

优选的，以所述戒酒硫为活性成分，加上药学上可接受的辅料和辅助性成分制备成药物制剂使用。

优选的，所述药物制剂选自片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、喷雾剂、缓释剂中的一种。

本发明还涉及一种戒酒硫在制备抗肺纤维化药物中的用途。

优选的，所述肺纤维化为特发性肺纤维化和临床继发性肺纤维化。

优选的，以所述戒酒硫为活性成分，加上药学上可接受的辅料和辅助性成分制备成药物制剂使用。

优选的，所述药物制剂选自片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、喷雾剂、缓释剂中的一种。

与现有技术相比，本药物具有如下有益效果：

1)目前抗头颈癌的药物十分有限并且药物副作用明显；戒酒硫药物安全性强，没有严重的不良反应；目前肺纤维化药物只有两种(尼他尼布和吡非尼酮)，戒酒硫已经被应用数十年时间，药物安全性强，没有严重的不良反应；

2)本药物的生产成本低，有利于临床应用。

附图说明

通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显：

图1为克隆形成试验结果图和结果统计图；其中，A为戒酒硫刺激后HN4、HN12、HN30、Cal27、SCC9和SCC25细胞系克隆形成实验结果图，B为HN4细胞系克隆形成实验结果统计图，C为HN12细胞系克隆形成实验结果统计图，D为HN30细胞系克隆形成实验结果统计图，E为Cal27细胞系克隆形成实验结果统计图，F为SCC9细胞系克隆形成实验结果统计图，G为SCC25细胞系克隆形成实验结果统计图；

图2为MTT试验结果统计图；其中，A为HN4细胞系克隆形成实验结果统计图，B为HN30细胞系克隆形成实验结果统计图，C为Cal27细胞系克隆形成实验结果统计图，D为HN12细胞系克隆形成实验结果统计图；

图3为头颈癌细胞细胞周期流式结果图和结果统计图；其中，A为HN30细胞系细胞周期流式分析结果图，B为HN30细胞系细胞周期流式分析结果统计图；

图4为细胞凋亡流式结果图和统计图；其中，A为HN30细胞系细胞凋亡流式分析结果图，B为HN30细胞系细胞凋亡流式分析结果统计图；

图5为固定的小鼠肺组织进行H&E染色示意图；

图6为固定的小鼠肺组织进行Masson染色示意图；

图7为小鼠肺组织提取总RNA后进行quantitative RT-PCR方法检测fibronectinmRNA水平示意图。

图8为小鼠肺组织提取总RNA后进行quantitative RT-PCR方法检测collagenmRNA水平示意图；

图9为小鼠肺组织用羟脯氨酸检测试剂盒进行肺组织羟脯氨酸含量测定结果示意图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干调整和改进。这些都属于本发明的保护范围。

本发明使用的戒酒硫结构式如下：

实施例1、戒酒硫对头颈癌细胞功能调节作用的研究

戒酒硫可以明显抑制人头颈癌细胞的增殖功能，并且促进人头颈癌细胞的凋亡。为临床治疗头颈癌提供了重要的依据。本实施例进一步论证了戒酒硫对于头颈癌细胞系的具体作用机制，也为戒酒硫对于分子机制类似的相关疾病提供可能性。

1实验材料

1.1细胞系：HN30细胞系，Cal27细胞系，HN4细胞系，HN12细胞系，SCC9细胞系SCC25细胞系。

1.2药品与试剂：MTT检测试剂盒(碧云天)，细胞凋亡检测试剂盒(碧云天)。

1.3主要仪器设备：BD LSRFortessa流式细胞仪；多功能酶标仪；

2方法与结果

2.1实验方法

2.1.1克隆形成实验：

控制细胞到对数生长期，在实验研究时应用到头颈癌细胞系是HN4。HN4细胞系是贴壁细胞，将细胞培养皿从培养箱取出，在超净台中无菌操作，弃掉上清，PBS洗两遍，以便去除残留的培养基，向培养有肿瘤细胞HN4的细胞培养皿中加入1ml胰酶，当细胞在镜下观察呈圆形状后接着向其中加入3ml的含10％FBS的DMEM培养基中和处理，结束消化后，将消化下来的细胞加入到对应离心管中，1000rpm低速离心3min后将上清吸掉，向离心管中加入10ml含10％FBS的DMEM培养基，用1ml的移液枪枪头轻轻吹打细胞，让细胞均匀的分散在培养基中。取分散均匀的细胞悬液10μl进行计数，按照：细胞密度＝数量/4×10⁴个/ml来计算出细胞的密度这个公式计算出细胞密度。各孔接种细胞悬液的体积为0.1ml，且在接种后确保细胞保持均匀的状态，各孔都保证200个细胞，向其中加入100μl含10％FBS的DMEM培养基，适当的晃动均匀后确保细胞分散开。加入浓度为0，0.05，0.10，0.20μM的戒酒硫。轻轻拍打96孔板，确保其分散，接着在37℃环境下进行培养7天。在此过程中密切观察，在发现形成细胞团情况下将孔板取出，上清弃掉，向孔板中每孔加200μl甲醇固定处理后，室温条件下静置30min，通过纯水轻轻漂洗处理后，接着在其中各加入Gimsa染色液(一)100μl，适当的混合后室温条件下放置20min。继续加入Gimsa染色液(二)200μl，室温条件下放置30min，充分的反应后，接着确保细胞着色，吸去染色液，进行充分的冲洗操作后，接着确定出其中各孔的克隆数。对所得结果进行记录，将具有抑制肿瘤增殖的化合物记录下来，以备进行复筛。

2.1.2 MTT实验

(1)准备工作：在此操作过程中先根据要求配制MTT储存液，准确的称量五十毫克的MTT粉末，避光。在进行操作时将粉末全部加入到10ml无菌离心管中，超声处理后使其粉末全部溶解在无菌去离子水中。在灭菌过程中一般选择过滤除菌的方式，利用0.22μM膜进行过滤，将对应的滤液转入到无菌离心管，接着去除1ml分装到离心管中，进行适当的包裹后接着在-80℃条件下进行妥善的保存。

(2)实验步骤：将HN12、HN4、Cal27和HN30细胞铺孔，消化处理后接着通过含10％FBS的DMEM培养基重悬，适当的吹打后重悬。血球计数板计控制其密度为1×10⁵个/ml，适当的吹打后接着取出96孔板，在目标孔中加入0.1毫升细胞悬液。在实验过程中每组加1×10⁴个细胞(根据不同细胞的增殖能力来具体决定铺孔的数量)，周围的孔不加细胞，加入灭菌磷酸盐缓冲液而有效的避免其液体蒸发。适当的在孔板表面喷洒酒精后接着转入到培养箱里，进行贴壁和生长。培养12h左右观察发现细胞能够覆盖孔板底部达到80％的时候取出，弃掉上清后，加入0.2ml新鲜培养基到各孔，且加入0、16、32和64μM的戒酒硫，每个浓度有六个复孔，轻轻拍打96孔板侧边使药物尽量在培养基中分散均匀，在充分的孵育24h后将孔板取出，在无菌条件下每孔加入0.01ml的MTT溶液，然后将孔板放回到细胞培养箱继续孵育4h，用1ml注射器(注射器针头斜面用钳子夹去，使针头变为平面)将上清轻轻的吸掉，接着通过相应的二甲基亚砜来进行溶解处理，各孔添加入0.1ml后则在摇床上晃动处理10min，且轻轻的拍打，以保证结晶能够完全溶解在DMSO中，后进行吸光度检测，在490nm条件下检测确定出各组的吸光度，进行数据处理分析。

(3)根据下面的公式计算出肿瘤细胞的生长率或者肿瘤细胞生长抑制率：

细胞生长率＝(OD给药组/OD溶剂组)×100％

细胞生长抑制率＝(1-OD给药组/OD溶剂组)×100％

2.1.3细胞周期检测

PI染料检测细胞周期分布的实验步骤：

复苏细胞并调整细胞状态使其取处于对数生长期，此时细胞状态最佳，收集相应的细胞后调整细胞密度，并且在六孔板中的每个孔中接种1×10⁶个细胞，每个孔接种1ml细胞悬液，再补加1ml含10％FBS的DMEM培养基，培养过夜后，弃掉上清加入相应浓度的化合物药物处理24h后，用枪头吸掉上清，细胞的消化要用0.25％胰酶，低速离心机中以1000rpm的转速离心以分离上清，然后再在每个管中加入1ml预冷的PBS清洗细胞两遍以去除残留的胰酶等，同样离心后去掉上清的液体，继续在每管中加0.5ml的PBS，并用1ml的枪头轻轻吹悬细胞沉淀使细胞以单细胞的状态分散，将预冷的70％乙醇(以50ml为例，35ml无水乙醇与15ml去离子水混合均匀，放在-20℃条件下预冷)加入流式管中，为保证细胞的分散效果要在每个流式管中加4ml预冷的70％乙醇，将细胞悬液用枪头均匀的分散到70％的乙醇中固定，这一步较重要，边加入细胞悬液边旋转流式管，继续吹打液体使细胞在75％乙醇中完全分散成单个细胞，然后放置在4℃放置，或者-20℃放置至少24h，在用流式细胞仪检测之前先用1500rpm离心5min后弃掉上清以去除乙醇，为进一步去除残留的乙醇，需要用PBS清洗细胞沉淀，同样经过离心后，将上清弃掉，剩下的细胞沉淀用400μl PBS轻轻重悬，这一步要保证细胞完全是单细胞的状态才能减少实验误差，之后在每管中加入RNA酶(RNase)后放在室温中和30min以尽量完全去除细胞内的RNA(RNA酶使用浓度为10μg/ml)，30min后直接在每管中加入配制好的PI染料(终浓度50μg/ml)，室温避光的条件下放置15min后在流式细胞仪上检测细胞周期分布情况与变化，由于PI染料本身比较黏，检测的时候需要去除黏连的细胞，数据用Flowjo 7.6分析。

2.1.4细胞凋亡的检测

Annexin V-FITC/PI双染法步骤：

培养的HN30细胞，取处于对数生长期，0.25％胰酶消化，1000rpm离心3min，去除上清，用适量含10％FBS的DMEM培养基重悬，血球计数板计数，铺孔，一般六孔板铺6×10⁵个，十二孔板铺3×10⁵个，过夜培养。当细胞增殖到70％-80％时，孔板内换成新的培养液，加入相应的药物处理24h。标注好流式管后，收集上清培养液，用PBS洗涤一次(为了去除残留的培养基中的血清)，并将PBS收集到相应的离心管中其中包含凋亡的细胞，下层贴壁细胞通过胰酶消化收集时与上清合并后进行低速离心处理3min，接着通过磷酸盐缓冲液适当的冲洗后弃掉上清，继续低速离心后各管子中都加入500μl 1×Binding Buffer重悬细胞(用双蒸水稀释5×Binding Buffer为1×工作液)，将细胞凋亡检测试剂盒中的Annexin-FITC染液和PI染液瞬间离心，放置于冰上暂存备用，用枪头进行适当的吹打后，接着在其中每管分出部分细胞悬液进行对照研究，其中对照组包括空白组、只染Annexin V-FITC组(只加Annexin V-FITC 2.5μl)与只染PI(只加PI 6μl)组，设置三组对照组的目的是为了方便上机检测的时候调整荧光之间产生的补偿，每管加入5μl Annexin V-FITC和10μl PI。适当的混合后，接着在室温条件下孵育5min。利用FITC检测通道对二者进行检测，对所得结果进行分析而确定出细胞的凋亡情况。

2.2实验结果

2.2.1药物对头颈癌细胞增殖能力的影响

HN4，HN12，Cal27，HN3，SCC9和SCC25头颈癌细胞在6孔板进行铺孔，

图1：戒酒硫具有抗肿瘤活性,设置不同浓度的戒酒硫(0，0.05，0.10，0.20μM)对多种头颈癌细胞系进行克隆形成实验(HN4，HN12，Cal27，HN3，SCC9和SCC25细胞)(图1A)，同时统计戒酒硫对各头颈癌细胞克隆形成的影响情况并绘制相应的统计图(图1B-G)，实验结果和统计结果显示，戒酒硫对上述细胞的增殖功能都有一定的抑制作用，且抑制作用呈剂量依赖性。其中HN30的抑制作用最明显。

2.2.2戒酒硫对头颈癌细胞系的细胞活性影响

图2：不同浓度(0、16、32和64μM)的戒酒硫处理细胞24h，用MTT实验检测药物对细胞的活性影响，计算出细胞增值率，图2A为HN4细胞系，图2B为HN30细胞系，图2C为Cal 27细胞系，图2D为HN12细胞系，实验统计结果显示，戒酒硫对上述细胞都有一定的毒性作用，且杀伤作用呈浓度依赖性。

2.2.3戒酒硫对头颈癌细胞系周期的影响

图3：细胞***过程分为细胞***期(M期)和细胞***间期，***间期的细胞又分为DNA合成前期(G0/G1期)，DNA合成期(S期)和DNA合成后期(G2)。碘化丙锭(PI)染色可以将细胞内的DNA结合，由于细胞内DNA在***的不同时期的DNA含量不同，我们通过PI染色检测细胞的***时期，用不同浓度(0、10、30和100μM)的戒酒硫处理细胞24h，用流式细胞仪检测HN30细胞周期分布情况，并进行统计分析。实验统计结果显示，戒酒硫可以使HN30头颈癌细胞停滞在细胞增殖的S期和G2/M期，从而有效的阻断了头颈癌细胞的增殖过程，戒酒硫对头颈癌细胞的增殖阻断作用呈剂量依赖性。

2.2.4戒酒硫诱导细胞凋亡

图4：A：Annexin V-FITC/PI检测用不同浓度戒酒硫(0、10、30和100μM)处理24小时HN30细胞的凋亡情况并对凋亡细胞比例进行统计；实验结果统计图显示，戒酒硫可以促进头颈癌细胞的凋亡过程，在浓度为30μM时就显著促进细胞凋亡。

本实施例研究结果表明，戒酒硫对头颈癌细胞的增殖有显著的抑制作用，对头颈癌细胞的凋亡具有促进作用，说明戒酒硫对临床应用于头颈癌具有潜在的作用和价值。为寻找抗头颈癌药物提供了新的方向。

实施例2、戒酒硫对肺纤维化调节作用的研究

本实验中：动物实验所用的戒酒硫的配制方法如下，戒酒硫溶解于DMSO中，浓度为2g/ml，再将25μl与400μl乙醇和400μl蓖麻油混合，再用7.2ml PBS进行混合，得到的混合物用超声混匀得到混悬液。

细胞实验所用的戒酒硫配制方法：戒酒硫直接溶解于DMSO中配制成为100mM和10mM两种储存液存放于-80℃冰箱中。

本实施例中，经动物实验发现，戒酒硫对肺纤维化有一定的治疗作用，试验方法和结果如下：

1实验材料：

1.1实验动物：C57BL/6小鼠，雄性，体重25g左右，饲养于上海交通大学实验动物中心，空调控制室温20-25℃，无菌水，灭菌鼠粮。

1.2试剂：戒酒硫(Disulfiram，Sigma)，蓖麻油(生工生物)，无水乙醇(生工生物)。

1.3主要仪器设备：Real-time PCR***(ABI)，正置显微镜(Olympus)。

2方法与结果

2.1实验方法

2.1.1小鼠肺纤维化模型构建

小鼠23只，随机分为4组，分别给予博来霉素或PBS和戒酒硫或溶剂对照(给予博来霉素的戒酒硫和溶剂对照组各6只，给予PBS的溶剂对照组5只，给予PBS的戒酒硫组6只)。在造模第0天给予小鼠博来霉素(气管给药)，每只小鼠按体重给予博来霉素，博来霉素溶解于PBS中配制成工作浓度(1.4U/kg)，并进行气管给药，造模当天即为0天。每天腹腔注射给予小鼠50mg/kg戒酒硫，在21天后收集小鼠肺组织、外周血进行分析。

2.1.2肺组织HE染色：肺组织多聚甲醛固定后常规脱水、包埋、切片，脱蜡处理后碧云天H&E染色试剂盒染色后按说明书进行染色，最后封片观察。

2.1.3肺组织Masson染色：肺组织多聚甲醛固定后常规脱水、包埋、切片，脱蜡处理后南京建成Masson染色试剂盒染色后按说明书进行染色，最后封片观察。

2.1.4肺组织羟脯氨酸检测：肺组织从超低温冰箱取出后按照南京建成生物公司羟脯氨酸检测试剂盒说明书处理后检测羟脯氨酸水平变化。

2.1.5肺组织mRNA提取，反转录以及qPCR实验：肺组织低温研磨后经三氯甲烷、异丙醇和75％乙醇处理并离心后得到总RNA，用toyobo反转录试剂盒并按说明书进行反转录，得到的cDNA用toyobo SYBR Green试剂盒进行实时定量PCR检测。

2.2实验结果

2.2.1肺组织病理学分析

由于博来霉素诱导的肺纤维化小鼠的肺组织会出现过度修复造成的病灶区域，并且病灶区域会有胶原等细胞外基质的沉积。我们对小鼠肺组织病理学切片(H&E染色和Masson染色)进行分析。

将小鼠肺组织固定、脱水、包埋并进行切片和染色，H&E染色结果显示(图5)博来霉素造模后肺组织出现了病灶区域，而戒酒硫给药组的肺组织病灶区域明显减少，表明戒酒硫对肺纤维化的减轻作用。Masson染色(图6)反映了肺组织内胶原的沉积情况，结果显示肺组织在博来霉素造模后出现了胶原沉积的情况，戒酒硫可以减弱肺纤维化引起的胶原沉积。

2.2.2 RT-PCR检测肺组织肺纤维化标志分子mRNA和蛋白水平变化

在肺纤维化过程中，小鼠肺组织的Fibronectin和Collagen表达会增加，我们对肺组织的Fn1,Col1a1的mRNA水平进行检测。结果如图7、8。造模后小鼠肺组织的总RNA提取后进行反转录，后续进行real-time PCR进行检测Fn1,Col1a1 mRNA水平的变化；与此同时，由于羟脯氨酸是肺组织内胶原成分的特异性氨基酸，我们检测了小鼠肺组织羟脯氨酸的含量(图9)，上述实验结果表明戒酒硫可以明显抑制肺纤维化相关分子的表达。

实施例3

片剂的制备：

取戒酒硫500g，加入适量淀粉制成颗粒，加入适量硬脂酸镁，混匀后压制成片剂1000片，每天一次每次一片。

实施例4

胶囊剂的制备

取戒酒硫500g，加入适量稀释剂，混匀，分装填入空胶囊。制成胶囊剂1000粒，每天1次，每次1粒。

实施例5

颗粒剂的制备

取戒酒硫40g，加入蔗糖670g以及辅料糊精290g，混匀，用滚筒平压制粒机制粒，得戒酒硫颗粒1000g，每次1包(10g)，每日3次。

本实验研究结果表明，本发明的戒酒硫对博来霉素诱导的肺纤维化有显著的抑制作用，说明戒酒硫在临床上对于肺纤维化具有重要的价值，为抗纤维化治疗药物的研发提供了新的方向。

以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。

Claims (9)

1.一种戒酒硫在制备治疗和抑制头颈癌药物中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述头颈癌为包含口腔颌面部肿瘤、颈部肿瘤的头颈癌。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述口腔颌面部肿瘤包括口腔癌、牙龈癌、颊癌。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的用途，其特征在于，以所述戒酒硫为活性成分，加上药学上可接受的辅料和辅助性成分制备成药物制剂使用。

5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述药物制剂选自片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、喷雾剂、缓释剂中的一种。

6.一种戒酒硫在制备抗肺纤维化药物中的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述肺纤维化为特发性肺纤维化以及临床继发性肺纤维化。

8.根据权利要求6或7所述的用途，其特征在于，以所述戒酒硫为活性成分，加上药学上可接受的辅料和辅助性成分制备成药物制剂使用。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述药物制剂选自片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、喷雾剂、缓释剂中的一种。

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