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Abstract

本发明为了充分开发泥鳅资源的保健功能利用泥鳅具有补脾益气、护肝除黄、清热解毒、消痞散结的药用功效,将泥鳅干燥后制成细粉或肉浆加以多种辅料制备多种形式的护肝作用确切、防治效果显著的护肝功能食品以及制备方法。

Description

用泥鳅制成的护肝功能食品及其制备方法
本发明涉及利用泥鳅制备有护肝功能的食品,以及其制备方法。
泥鳅(Misgurus angillicaudatus Cantor)系鳅科动物,肉或全体入药,其主要功效为补脾益气、护肝除黄、清热解毒、消痞散结。记载于《本草纲目》和《中药大辞典》等文献中。民间验方用泥鳅治疗痈肿、痢疾、阳痿等症,也有用泥鳅散或泥鳅汤治疗传染性肝炎。据《中药大辞典》所介绍的方法是:将泥鳅烘干后,研制成末,每次10克,每日三次,用以治疗传染性肝炎。该法的缺点是需要现制现食,食用不方便。至今尚未见到有关明确指出泥鳅中治疗肝炎的活性成分的报道。而且也还没有利用泥鳅为原料制成的护肝养肝功能食品的产品面市。我国是世界上肝炎发病率最高的国家,感染各种肝炎病毒的患者数以亿计。本发明为了充分开发泥鳅资源的保健功能和药用价值,利用泥鳅制成防治效果显著的新的防治肝炎的天然生化药物和护肝功能食品。
本发明的方法是:用清水喂养1~3天的鲜活泥鳅洗净,将这些泥鳅干燥后用粉碎机制成50~500目细粉,或进一步加工成纳米级的超细粉。也可以将泥鳅用绞肉机绞成肉浆,加0~10%蛋白酶(如:胃蛋白酶,胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,链丝菌蛋白酶E、蛋白酶V8或蛋白酶K等),控制pH=1~8.5,于10~50℃下温育5~48小时,分离,去残渣,干燥后用粉碎机制成50~500目细粉,或将此粉进一步加工成纳米级的超细粉。上述细粉作为护肝功能食品的主要原料。用这种含量可为1~98%具有护肝功能的泥鳅干粉(或其水解液),混入下述配料:含淀粉的辅料1~90%,如:面粉、淀粉、麦片、豆粉、魔芋粉、芝麻粉、花生粉;赋形剂和增稠剂0~10%,如:淀粉、糊精、羧甲基纤维素钠、琼脂、明胶、海藻胶、果胶;调味剂0~5%,如:食盐、糖、蜂蜜、奶粉、巧克力、蛋白糖、甜蜜素、安赛蜜、糖精、味精、鸡精、酵母精、食醋、醋(酸)精、五香粉、胡椒粉、花椒粉、咖喱粉、辣椒粉、葱、姜粉、蒜粉、薄荷;维生素类0~2%,如:维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、维生素P;食用色素0~3%,如:豆酱、酱油、胡萝卜素、焦糖色素、巧克力色素、咖啡色素、栀子黄素、橘子色素、日落黄;食用香精0~2%,如:荔枝香精、苹果香精、菠萝香精、草莓香精、水蜜桃香精、椰子香精、牛奶香精、牛肉香精、鸡肉香精、咖啡香精;防腐剂0~1%,如:苯甲酸盐、泥泊金酯、抗菌肽、山梨酸盐。可制成异形片、糖丸、饼干、糕点、方便面、口服液、冲剂、粥糊或供调糊用的干粉等各种形式的功能食品。本发明的效果如下:1泥鳅匀浆及泥鳅黏液的护肝作用1.1  对四氯化碳(CCl4)引起小鼠肝损伤的抑制作用
取雄性小鼠48只,按体重随机均分6组:正常对照组、生理盐水组(NS)、泥鳅匀浆组(LS)、泥鳅黏液组(LM)、联苯双酯组(DDB)和龙胆泻肝丸组(LD)。除正常对照组外,其余6组于第6天末次给药2小时后,称体重,按10ml/kg的剂量腹腔注射0.2%四氯化碳石蜡油溶液使之中毒。净食16小时后,断头取血测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,取肝脏称重,检测肝组织中脂质过氧化物(LPO)含量,计算单位体重的肝重和肝组织中丙二醛(MDA)含量。结果(表1)表明四氯化碳能使小鼠血清中的转氨酶活性和肝组织中的LPO含量显著升高,并使肝脏肿大。而泥鳅匀浆和泥鳅黏液都可明显抑制四氯化碳升高的小鼠血清中转氨酶活性、肝组织中的LPO含量和肝肿。
   表1  药物对四氯化碳(CCl4)致小鼠肝损伤的抑制作用(n=8,x±SD)组    别      剂量        血清ALT      血清AST     AST/ALT    肝MDA       肝重/体重
      /mg·kg-1×d    /U·L-1      /U·L-1             /nmol·g-1      /g·kg-1正常对照     ——                 188±47      286±38      1.52    25.8±3.7      35.2±5.1NS+CCl4      150×6       896±33##    579±87##    0.65    40.6±4.5##    47.2±1.8##LS+CCl4      150×6       439±97**   358±94**   0.82    35.2±4.1**   43.2±3.3**LM+CCl4      150×6       533±48*    446±60*    0.84    36.5±5.0**   45.1±3.9*DDB+CCl4     150×6       276±23**   288±26**   1.04    39.7±3.5      40.6±6.5**LD+CCl4      150×6       457±79**   401±67**   0.88    29.6±3.1**   41.8±3.4**与正常组比较:#P<0.05,##P<0.01    与组比较:*P<0.05,**P<0.011.2   对硫代乙酰胺(TAA)引起小鼠肝损伤的抑制作用
小鼠分组、给药途径、给药剂量、给药次数及连续天数均与1.2相同。除正常对照组外,其余6组于第6天末次给药后2小时,先称体重,再按80ml/kg的剂量腹腔注射0.2%硫代乙酰胺溶液使之中毒。净食16小时后,断头取血测定血清ALT和AST,取肝脏称重,检测LPO含量,计算单位体重的肝重和肝组织中MDA含量。结果(表2)说明硫代乙酰胺能使小鼠血清中的转氨酶活性和肝组织中的LPO含量显著升高,并使肝脏肿大。而泥鳅匀浆和泥鳅黏液及其提取物都可明显抑制硫代乙酰胺升高的小鼠血清中转氨酶活性、肝组织中的LPO含量和肝肿。
表2  药物对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的抑制作用(n=8,x±SD)组    别      剂  量    血清ALT      血清AST    AST/ALT     肝MDA       肝重/体重
      /mg·kg-1×d  /U·L-1      /U·L-1             /nmol·g-1      /g·kg-1正常对照      ——            188±47      286±38      1.52    25.8±3.7      35.2±5.1NS+TAA       150×6     937±22##    693±78##    0.74    41.6±2.8##    50.8±2.5##LS+TAA       150×6     541±26**   436±92**   0.81    32.6±4.0**   45.9±4.3*LM+TAA       150×6     638±14*    528±18*    0.83    34.3±3.5**   45.6±3.2*DDB+TAA      150×6     306±13**   297±25**   0.97    40.2±3.6      45.8±2.5*LD+TAA       150×6     460±49**   421±68**   0.92    30.8±3.2**   43.7±4.5**与正常组比较:#P<0.05,##P<0.01    与组比较:*P<0.05,**P<0.01
四氯化碳和硫代乙酰胺致肝损伤是目前研究保肝药物作用及作用机理常用的病理模型。大剂量攻击可引起严重的肝细胞损害,导致能量代谢障碍,使肝细胞膜通透性增加,细胞内转氨酶因巨大的浓度梯度而释放入血液中。因此,血清转氨酶活性升高是肝细胞受损的敏感指标。本工作观察到泥鳅匀浆和泥鳅黏液都能显著抑制这两种模型物所引起的小鼠血清转氨酶升高。同时还观察到两种模型物都能引起小鼠肝组织中脂质过氧化物含量增加和肝肿胀,泥鳅匀浆和泥鳅黏液能显著抑制这些指标的升高。可见,泥鳅及其黏液对实验性肝损伤有多方面的抑制作用。2  泥鳅多糖的护肝作用2.1  对四氯化碳(CCl4)引起小鼠肝损伤的抑制作用
小鼠40只,雌雄各半,随机均分为5组:正常对照组、生理盐水(NS)组、泥鳅多糖高剂量(HPS)组、泥鳅多糖低剂量(LPS)组和联苯双酯(DDB)组,灌胃给药剂量和连续天数按表3进行。除正常对照组外,其余6组于第6天末次给药2小时后,称体重,按10ml/kg的剂量腹腔注射0.2%四氯化碳石蜡油溶液使之中毒。净食16小时后,断头取血测定血清ALT和AST,取肝脏称重,计算单位体重的肝重。结果(表3)表明四氯化碳能使小鼠血清中的转氨酶活性显著升高,并使肝脏肿大。而泥鳅多糖可明显抑制四氯化碳升高的小鼠血清中转氨酶活性和肝肿。
表3  药物对四氯化碳(CCl4)致小鼠肝损伤的抑制作用(n=8,x±SD)组    别       剂量     血清ALT      血清AST    AST/ALT   肝重/体重
      /mg·kg-1×d  /U·L-1      /U·L-1              /g·kg-1正常对照       ——          120±31      266±39      2.22    35.2±5.1NS+CCl4       150×6    727±19##    510±29##    0.70    47.2±1.8##HPS+CCl4      300×6    352±38**   347±75**   0.99    42.7±3.8**LPS+CCl4      150×6    438±21**   426±74**   0.97    43.2±3.3**DDB+CCl4      150×6    270±23**   278±16**   1.03    40.6±6.5**LD+CCl4       150×6    457±79**   401±67**   0.88    41.8±3.4**与正常组比较:#P<0.05,##P<0.01    与组比较:*P<0.05,**P<0.012.2 对硫代乙酰胺(TAA)引起小鼠肝损伤的抑制作用
小鼠分组、给药途径、给药剂量、给药次数及连续天数均与2.1相同。除正常对照组外,其余6组于第6天末次给药2小时后,称体重,按80ml/kg的剂量腹腔注射0.2%硫代乙酰胺溶液使之中毒。净食16小时后,断头取血测定血清ALT和AST,取肝脏称重,计算单位体重的肝重。结果(表4)说明硫代乙酰胺能使小鼠血清中的转氨酶活性显著升高,并使肝脏肿大。而泥鳅多糖可明显抑制硫代乙酰胺升高的小鼠血清中转氨酶活性和肝肿。
      表4  药物对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的抑制作用(n=8,x±SD)组    别     剂  量     血清ALT      血清AST    AST/ALT   肝重/体重
      /mg·kg-1×d  /U·L-1      /U·L-1              /g·kg-1正常对照      ——            120±31      266±39      2.22    35.2±5.1NS+TAA       150×6     737±22##    471±29##    0.64    50.8±2.5##HPS+TAA      300×6     368±15**   424±18**   1.15    43.6±2.2**LPS+TAA      150×6     414±32**   388±48**   0.94    45.9±4.3*DDB+TAA    150×6    306±13**    297±25**     0.97    45.8±2.5*LD+TAA     150×6    460±49**    421±68**     0.92    43.7±4.5**与正常组比较:#P<0.05,##P<0.01  与组比较:*P<0.05,**P<0.012.3  对萘异硫氰酸酯(NAIT)引起小鼠肝损伤的抑制作用
小鼠分组、给药途径、给药剂量、给药次数及连续天数均与2.1相同。除正常对照组外,其余6组于第6天末次给药后2小时,称体重,按80ml/kg的剂量灌胃15mg/ml萘异硫氰酸酯色拉油溶液使之中毒。净食16小时,断头取血测定血清ALT和AST,取肝胆称重,计算单位体重的肝胆重。结果(表5)说明NAIT能使小鼠血清中的转氨酶活性和黄疸指数显著升高,并使肝脏肿大。而泥鳅多糖可明显抑制NAIT引起的小鼠血清中转氨酶活性和黄疸指数升高,并能显著降低小鼠的肝肿胀度和黄疸郁积。
         表5  药物对萘异硫氰酸酯(NAIT)致小鼠肝损伤的抑制作用(n=8,x±SD)组  别       剂  量      血清ALT      血清AST     肝重/体重      胆重/体重      黄疸指数
      /mg·kg-1×d  /U·L-1      /U·L-1      /g·kg-1       /g·kg-1正常对照      ——            120±31      266±39      35.2±5.1      0.41±0.12    9.3±1.16NS+NAIT      150×6     787±13##    529±9##     49.4±4.4##    1.85±0.95##  29.5±1.60##HPS+NAIT     300×6     319±20**   353±29**   45.5±1.9**   0.92±0.91** 15.7±1.07**LPS+NAIT     150×6     350±32**   377±26**   45.3±2.1*    1.41±0.90    17.8±1.31**DDB+NAIT     150×6     243±11**   286±77**   49.7±6.9*    0.88±0.39** 18.5±1.06**LD+NAIT      150×6     460±49**   421±68**   43.7±4.5**   1.63±0.97    27.3±1.52与正常组比较:#P<0.05,##P<0.01    与组比较:*P<0.05,**P<0.01
综合上述结果:用泥鳅制成保健食品或从中提取到分子量为1,000~150,000的天然多糖、糖蛋白和多肽类物质,经动物实验研究表明它具有抗炎、降转氨酶、除黄疸和保护肝脏的作用。成人服用剂量为0.1毫克~100克/日。
制备实例:
例1.泥鳅护肝片:取鲜活泥鳅5~6公斤,用清水喂养1天,洗净,将这些泥鳅干燥后用粉碎机制成100目细粉。按如下配方制剂:泥鳅干粉880克,淀粉100克,羧甲基纤维素钠17.5克,薄荷2克,苯甲酸钠0.5克,加蒸馏水造粒后,压制成1克/粒的泥鳅护肝异形片。
例2.泥鳅护肝胶囊:取鲜活泥鳅5~6公斤,用清水喂养1天,洗净,将这些泥鳅干燥后用粉碎机制成150目细粉。按如下配方制剂:泥鳅干粉900克,淀粉80克,羧甲基纤维素钠19.5克,苯甲酸钠0.5克,加蒸馏水造粒后,按0.5克/粒装入胶囊,封盖,制成泥鳅护肝胶囊。

Claims (6)

1.一种制备护肝功能食品的方法,其特征是:用清水喂养1~3天的鲜活泥鳅洗净,将这些泥鳅干燥后制成50目到纳米级的细粉,用这种含量可为1~98%具有护肝功能的泥鳅细干粉,混入配料制成护肝成功能的食品。
2.一种制备护肝功能食品的方法,其特征是:将泥鳅用绞肉机绞成肉浆,加0~10%蛋白酶,控制PH=1~8.5,于10~50℃下温育5~48小时,将分出的水解液干燥后制成50目到纳米级的细粉,用这种含量可为1~98%具有护肝功能的泥鳅细干粉,混入配料制成护肝成功能的食品。
3.根据权利要求2所指的一种制备护肝功能食品的方法,其特征是:所述的蛋白酶可以是胃蛋白酶,胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,链丝菌蛋白酶E、蛋白酶V8或蛋白酶K。
4.采用泥鳅制备的护肝功能食品,其特征是:护肝功能的食品是用含量为1~98%泥鳅细干粉作为主要原料,并混入下述配料:含淀粉的辅料1~90%,赋形剂和增稠剂0~10%,调味剂0~5%,维生素类0~2%,食用色素0~3%,食用香精0~2%,防腐剂0~1%,制成护肝功能的食品。
5.根据权利要求4所指的采用泥鳅制备的护肝功能食品,其特征在于:所说的护肝功能食品可以是异形片、糖丸、饼干、糕点、方便面、口服液、冲剂、粥糊或供调糊用的干粉。
6.根据权利要求4所指的泥鳅制备的护肝功能食品,其特征是:所指的含淀粉的辅料是:面粉、淀粉、麦片、豆粉、魔芋粉、芝麻粉、花生粉;赋形剂和增稠剂是:淀粉、糊精、羧甲基纤维素钠、琼脂、明胶、海藻胶、果胶;调味剂是:食盐、糖、蜂蜜、奶粉、巧克力、蛋白糖、甜蜜素、安赛蜜、糖精、味精、鸡精、酵母精、醋酸、五香粉、胡椒粉、花椒粉、咖喱粉、辣椒粉、葱、姜粉、蒜粉、薄荷;维生素类是:维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、维生素P;食用色素是:豆酱、酱油、胡萝卜素、焦糖色素、巧克力色素、咖啡色素、栀子黄素、橘子色素、日落黄;食用香精是:荔枝香精、苹果香精、菠萝香精、草莓香精、水蜜桃香精、椰子香精、牛奶香精、牛肉香精、鸡肉香精、咖啡香精;防腐剂是:苯甲酸盐、泥泊金酯、抗菌肽、山梨酸盐。
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