CN111574582A - 一种雷公藤红素衍生物及其制备方法与应用 - Google Patents

一种雷公藤红素衍生物及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种式(I)所示雷公藤红素衍生物，其制备方法为：将雷公藤红素(II)溶于甲醇，调节pH＝1‑2，室温下搅拌反应8‑16h，得到含有中间体(III)的反应液；向该反应液中加入氨基酸(IV)，调节pH＝7‑8，室温下搅拌反应8‑16h，之后反应液经后处理，得到式(I)所示产物；本发明雷公藤红素衍生物可应用于制备抗肿瘤药物。

Description

一种雷公藤红素衍生物及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种雷公藤红素衍生物及其制备方法，以及在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术
天然产物是人类预防和治疗疾病的重要来源，目前上市的化学药物中大约有30％来源于天然产物，还有部分药物是以天然产物为先导化合物经过结构修饰和结构改造产生的。雷公藤红素(Celastrol)，又名南蛇藤素，是一个具有多种生物活性的天然产物，来源于中药雷公藤的根皮，是一种三萜类红色结晶状粉末。雷公藤红素作为一种具有多活性的天然产物，在临床上具有一定的应用前景，但由于毒性大、生物利用度低，限制了它的应用。雷公藤红素的众多活性中，抗肿瘤活性最为显著，超过了临床上一些常用的抗肿瘤药物。在其结构修饰研究中，主要思路是将29位羧基形成酯键和酰胺键，但并没有显著提高其抗肿瘤活性，也没有改变雷公藤红素成药性不足的现状。
早在20世纪60年代，药物学家们已发现雷公藤红素具有较强的抗肿瘤作用。2006年，中国科学院武汉植物园与美国科学家共同合作开展了中药雷公藤抗癌的研究，经体内、体外的抗癌机理研究证实雷公藤中的抗癌活性成分雷公藤红素是通过控制癌细胞的蛋白酶体进而诱发癌细胞凋亡，可有效抑制裸鼠***癌的增生。
公开号为CN1276209的中国专利公开了一种雷公藤属植物提取物在预防和治疗神经***疾病方面的应用，所述神经***疾病包括阿尔兹海默病、帕金森病、亨廷顿氏神经退行性疾病和脊髓损伤、脊髓侧索硬化疾病。公开号为CN101091713A的中国专利申请公开了预防和治疗神经损伤类疾病雷公藤红素胶囊及其制备方法和用法，应用雷公藤红素为主要原料复配海藻糖，制成胶囊用于治疗神经损伤性疾病。申请号为20040220267的USA专利“五环去甲基三萜酮的衍生物用于炎症、神经损伤类和肿瘤疾病”，该专利申请公开了使用雷公藤红素和扁蒴藤素的衍生物，如它们的二氢物和二氢物的乙酰化物来治疗炎症、神经损伤类和肿瘤疾病，以及衍生物的制备方法。申请号为CN201010150428.6的中国专利申请公开了雷公藤红素衍生物作为抗炎、抗癌以及治疗中枢神经***疾病的药物用途。
目前国内外专利的研究主要是将雷公藤红素29位羧基形成酯键和酰胺键，但这并没有显著提高其抗肿瘤活性，也没有改变雷公藤红素成药性不足的现状。
发明内容
本发明公开了一种雷公藤红素衍生物及其制备方法，以及在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明的技术方案如下：
一种雷公藤红素衍生物，具有如式(I)所示结构：
Figure BDA0002530079120000011
式(I)中，R为氢、C1-C8烷基或者被一个或多个取代基取代的C1-C8烷基，所述取代基各自独立选自：氟、氯、羟基、羟甲基、腈基、C1-C6烷硫基、C1-C8烷氧基、C1-C8酰胺基、C6-C14芳基、C6-C14芳香杂环基、五元杂环或六元杂环；
优选R为氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、甲基硫醚乙基、3-亚甲基吲哚基、4-亚甲基咪唑基、正丙酰胺基、对羟基苯甲基或苯甲基。
特别优选的本发明所述雷公藤红素衍生物为实施例3a～3k所示的化合物。
除非特别注明，本发明所用的术语具有如下定义：
“烷基”表示饱和或不饱和的、取代或非取代的直链、支链烷烃链，具体例如：甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、1-甲基丁基、2-甲基丙基、己基、异己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、1,1,2-三甲基丙基、1,2,2-三甲基丙基、1-乙基-1-甲基丙基、1-乙基-2-甲基丙基。
“芳基”表示芳香族烃基，以6-14个碳原子的芳基为佳，具体例如：苯基、甲苯基、二甲苯基、联苯基、萘基、茚基、蒽基、菲基，更优选的为苯基或萘基，最优选为苯基。
“芳香杂环基”表示含有1-4个氧原子、氮原子或硫原子的杂芳基，具体例如：呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、吡唑基、异噻唑基、异噁唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、***基、四唑基。
“五元、六元杂环”表示含有1-4个氧原子、硫原子或氮原子的杂环基，具体例如：吗啉基、哌嗪基、取代哌嗪基、吡咯烷基、哌啶基。
本发明提供了式(I)所示雷公藤红素衍生物的制备方法，所述制备方法为：
将雷公藤红素(II)溶于甲醇，调节pH＝1-2(用pH＝1的盐酸调节)，室温(20-30℃)下搅拌反应8-16h(TLC跟踪监测)，得到含有中间体(III)的反应液；向该反应液中加入氨基酸(IV)，调节pH＝7-8(用碳酸钠调节)，室温下搅拌反应8-16h(TLC跟踪监测)，之后反应液经后处理，得到式(I)所示产物；
所述甲醇的体积用量以雷公藤红素(II)的物质的量计为30-50mL/mmol；
所述雷公藤红素(II)与氨基酸(IV)的物质的量之比为1：2-3；
所述氨基酸(IV)可以为D型或L型的氨基酸，向反应液中加入碱性氨基酸后，用碳酸钠调节pH＝8左右，向反应液中加入中性或酸性氨基酸后，用碳酸钠调节pH＝7-8左右；式(IV)中R的定义与式(I)中相同；
所述后处理的方法为：反应结束后，调节反应液pH＝7，乙酸乙酯萃取，萃取液经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩至干得到粗品；所得粗品经硅胶柱层析分离，以体积比6：1的石油醚与乙酸乙酯混合液或体积比30：1的氯仿与甲醇混合液为洗脱剂，收集含目标化合物的洗脱液，减压蒸除溶剂并干燥，得到产物雷公藤红素衍生物(I)。
Figure BDA0002530079120000021
本发明所述式(I)所示雷公藤红素衍生物可用于制备抗肿瘤药物。
具体的，所述药物为本发明雷公藤红素衍生物与制剂学上可接受的固体或液体载体，以及制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂的药物组合物。
所述药物组合物可使用标准和常规的技术进行制备，例如：使本发明雷公藤红素衍生物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂结合制备成微粒或微球。固体剂型包括片剂、分散颗粒、胶囊、缓释片、缓释微丸等。固体载体可以是至少一种物质，其可以充当稀释剂、香味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、崩解剂以及包裹剂。惰性固体载体包括磷酸镁、硬脂酸镁、乳糖、果胶、丙二醇、聚山梨酯80、糊精、淀粉、明胶、纤维素类物质(例如甲基纤维素、微晶纤维素)、低熔点石蜡、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液体剂型包括溶剂、悬浮液，例如注射剂、粉剂等。
药物组合物以及单元剂型中含有的活性成份(本发明化合物)的量可以根据患者的病情、医生诊断的情况特定地加以应用，所用的化合物的量或浓度在一个较宽的范围内调节，通常，基于药物组合物的总重量，活性化合物的含量为0.5～90wt％，优选0.5～70wt％。
相对于现有技术，本发明的有益效果在于：
本发明根据雷公藤红素衍生物在抗肿瘤活性方面的构效关系，通过结构修饰，将雷公藤红素的2位和3位环合成恶唑环结构，增加了雷公藤红素衍生物的水溶性，降低了雷公藤红素衍生物的细胞毒活性，制备得到衍生物的抗肿瘤活性均优于阳性对照药顺铂，部分衍生物的抗肿瘤活性优于雷公藤红素，可用于抗肿瘤药物的开发。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不仅限于此。
实施例1：雷公藤红素衍生物Ia的合成
Figure BDA0002530079120000031
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2。室温搅拌下反应12小时，加入甘氨酸(15.0mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝8左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，先用饱和食盐水洗涤2次，经无水硫酸镁干燥，然后抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)法分离纯化，产物经真空干燥得白色的雷公藤红素衍生物Ia为12.7mg，产率27.6％。
雷公藤红素衍生物Ia的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ8.36(s,1H,1’-H),7.48(s,1H,H-1),6.72(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.49(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.72(dd,J＝6.75,1.73Hz,1H,H-11),2.47(s,3H,4-CH3),1.23(s,3H,9-CH3),1.12(s,3H,20-CH3),1.11(s,3H,17-CH3),1.04(s,3H,14-CH3),1.03(s,3H,13-CH3),MS(ESI)m/z458.3(M-H)-.
实施例2：雷公藤红素衍生物Ib的合成
Figure BDA0002530079120000041
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2左右。室温搅拌下反应12小时，加入丙氨酸(17.8mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝8左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，再用无水硫酸镁干燥，之后抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)法分离纯化，产物经真空干燥得黄色的雷公藤红素衍生物Ib为42.9mg，产率90.7％。
雷公藤红素衍生物Ib的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ7.34(s,1H,H-1),6.66(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.45(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.68(dd,J＝6.50,1.50Hz,1H,H-11),2.59(s,3H,1’-CH3),2.41(s,3H,4-CH3),1.24(s,3H,9-CH3),1.11(s,6H,20,17-CH3),1.04(s,3H,14-CH3),1.03(s,3H,13-CH3),MS(ESI)m/z 472.3(M-H)-.
实施例3：雷公藤红素衍生物Ic的合成
Figure BDA0002530079120000042
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2左右。室温搅拌下反应12小时，加入缬氨酸(23.4mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝7左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸镁干燥，再抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)法分离纯化，产物经真空干燥得淡黄色的雷公藤红素衍生物Ic为19.7mg，产率为39.0％。
雷公藤红素衍生物Ic的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ7.37(s,1H,H-1),6.65(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.44(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.69(dd,J＝6.70,1.4Hz,1H,H-11),2.42(s,3H,4-CH3),1.43(d,J＝6.95Hz,6H,2’,3’-CH3),1.24(s,3H,9-CH3),1.11(s,6H,20,17-CH3),1.03(s,3H,14,13-CH3),MS(ESI)m/z 500.3(M-H)-.
实施例4：雷公藤红素衍生物Id的合成
Figure BDA0002530079120000051
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2左右。室温搅拌下反应12小时，加入甲硫氨酸(29.8mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝8左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，之后抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)法分离纯化，产物经真空干燥得淡黄色的雷公藤红素衍生物Id为21.0mg，产率38.7％。
雷公藤红素衍生物Id的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ7.38(s,1H,H-1),6.67(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.44(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.69(dd,J＝6.77,1.53Hz,1H,H-11),3.25(t,J＝7.35Hz,2H,H-1’),3.04(t,J＝7.35Hz,2H,H-1’),2.41(s,3H,4-CH3),2.16(s,3H,4’-CH3),1.24(s,3H,9-CH3),1.11(s,6H,20,17-CH3),1.04(s,3H,14-CH3),1.03(s,3H,13-CH3),MS(ESI)m/z 532.3(M-H)-.
实施例5：雷公藤红素衍生物Ie的合成
Figure BDA0002530079120000052
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2。室温搅拌下反应12小时，加入异亮氨酸(26.2mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝8左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，然后抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)法分离纯化，产物经真空干燥得淡黄色的雷公藤红素衍生物Ie为17.8mg，产率34.4％。
雷公藤红素衍生物Ie的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ7.40(s,1H,H-1),6.65(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.32(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.60(dd,J＝6.50,1.50Hz,1H,H-11),3.08(m,1H,H-1’),2.40(s,3H,4-CH3),1.43(d,J＝7.26Hz,3H,2’-CH3),1.28(s,3H,9-CH3),1.09(s,3H,20-CH3),1.03(s,3H,17-CH3),1.01(s,6H,14,13-CH3),0.95(t,J＝7.41Hz,3H,4’-CH3),MS(ESI)m/z514.3(M-H)-.
实施例6：雷公藤红素衍生物If的合成
Figure BDA0002530079120000061
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2。室温搅拌下反应12小时，加入亮氨酸(26.2mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝8左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸镁干燥，然后抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)法分离纯化，产物经真空干燥得白色的雷公藤红素衍生物If为37.6mg，产率72.9％。
雷公藤红素衍生物If的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ7.37(s,1H,H-1),6.65(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.41(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.68(dd,J＝6.65,1.40Hz,1H,H-11),2.81(d,J＝7.15Hz,2H,H-1’),2.38(s,3H,4-CH3),1.24(s,3H,9-CH3),1.11(s,6H,20,17-CH3),1.04(d,J＝6.5Hz,6H,3’,4’-CH3),1.03(s,6H,14,13-CH3),MS(ESI)m/z 514.3(M-H)-.
实施例7：雷公藤红素衍生物Ig的合成
Figure BDA0002530079120000062
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2。室温搅拌下反应12小时，加入谷氨酰胺(23.4mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝7左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)法分离纯化，产物经真空干燥得白色的雷公藤红素衍生物Ig为36.7mg，产率为69.2％。
雷公藤红素衍生物Ig的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ7.33(s,1H,H-1),6.55(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.29(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.58(d,J＝6.0Hz,1H,H-11),3.25(m,2H,H-2’),3.0(m,1H,H-2a’),2.8(m,1H,H-2b’),2.33(s,3H,4-CH3),1.34(s,3H,9-CH3),1.11(s,6H,20-CH3),1.03(s,6H,17,14-CH3),1.00(s,3H,13-CH3),MS(ESI)m/z 531.3(M+H)+.
实施例8：雷公藤红素衍生物Ih的合成
Figure BDA0002530079120000071
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2。室温搅拌下反应12小时，加入酪氨酸(36.2mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝8左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)法分离纯化，产物经真空干燥得黄色的雷公藤红素衍生物Ih为24.7mg，产率43.7％。
雷公藤红素衍生物Ih的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ7.37(s,1H,H-1),7.24(d,J＝8.5Hz,2H,H-3’,7’),6.82(d,J＝8.5Hz,2H,H-4’,6’),6.65(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.43(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.68(dd,J＝6.65,1.4Hz,1H,H-11),4.18(s,2H,H-1’),2.38(s,3H,4-CH3),1.23(s,3H,9-CH3),1.10(s,6H,20,17-CH3),1.03(s,3H,14-CH3),1.02(s,3H,13-CH3),MS(ESI)m/z564.3(M-H)-.
实施例9：雷公藤红素衍生物Ii的合成
Figure BDA0002530079120000072
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2。室温搅拌下反应12小时，加入苯丙氨酸(33.0mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝8左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)法分离纯化，产物经真空干燥得淡黄色的雷公藤红素衍生物Ii为29.4mg，产率53.5％。
雷公藤红素衍生物Ii的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ7.29-7.43(m,5H,H-苯环),7.38(s,1H,H-1),6.66(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.43(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.68(dd,J＝6.8,1.65Hz,1H,H-11),4.30(s,2H,H-1’),2.38(s,3H,4-CH3),1.24(s,3H,9-CH3),1.10(s,6H,20,17-CH3),1.03(s,3H,14-CH3),1.02(s,3H,13-CH3),MS(ESI)m/z 548.3(M-H)-.
实施例10：雷公藤红素衍生物Ij的合成
Figure BDA0002530079120000081
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2。室温搅拌下反应12小时，加入色氨酸(40.8mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝8左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)法分离纯化，产物经真空干燥得黄色的雷公藤红素衍生物Ij为18.5mg，产率31.5％。
雷公藤红素衍生物Ij的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ7.31-7.97(m,5H,吲哚环),7.63(s,1H,H-1),6.91(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.68(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.94(dd,J＝6.73,1.47Hz,1H,H-11),4.68(s,2H,H-1’),2.64(s,3H,4-CH3),1.40(s,3H,9-CH3),1.37(s,6H,20,17-CH3),1.29(s,3H,14-CH3),1.27(s,3H,13-CH3),MS(ESI)m/z 587.3(M-H)-.
实施例11：雷公藤红素衍生物Ik的合成
Figure BDA0002530079120000082
25mL的两口瓶中加入甲醇(4mL)，雷公藤红素(45.0mg,0.1mmol)，室温搅拌下加入pH＝1的盐酸(1mL)，反应液的pH＝1-2。室温搅拌下反应12小时，加入组氨酸(31.0mg,0.2mmol)，加入碳酸钠调pH＝7左右，继续反应8小时，TLC检测，反应结束后，加入水(5mL)，搅拌溶解碳酸钠固体，加入盐酸使反应液pH＝7左右，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，抽滤，滤液浓缩至干，得粗产品。粗产品经快速柱层析(氯仿:甲醇＝30:1)法分离纯化，产物经真空干燥得黄色的雷公藤红素衍生物Ik为5.5mg，产率10.2％。
雷公藤红素衍生物Ik的波谱分析如下：
1H NMR(500MHz，CD3COCD3)δ7.89(s,1H,H-4’),7.62(s,1H,H-1),7.37(s,H-6’),6.93(d,J＝10.0Hz,1H,H-6),6.70(d,J＝10.0Hz,1H,H-7),5.94(dd,J＝6.7,1.5Hz,1H,H-11),4.51(s,2H,H-1’),2.66(s,3H,4-CH3),1.49(s,3H,9-CH3),1.37(s,6H,20,17-CH3),1.29(s,6H,14,13-CH3),MS(ESI)m/z 538.3(M-H)-.
实施例12：本发明合成的雷公藤红素衍生物采用了MTT法，测定了雷公藤红素及其衍生物对A549细胞的抗增殖作用。
采用MTT法，取对数生长期的A549细胞，制成细胞悬液，分别接种于96孔培养(190μL/孔)，每孔5000个细胞等待其贴壁生长。置于37℃、5％CO2培养箱中培养24h后，加入10μL不同浓度的化合物培养液使96孔板中药物浓度为5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL，选取部分含有细胞的孔，加入等量不含药物的培养液作为空白对照，每个浓度设3个平行孔。加药完毕后继续置于37℃、5％CO2培养箱中培养。培养48h后，对每孔加入20μL MTT溶液(5mg/mL)，轻轻震荡混匀，放回培养箱继续孵育4h。培养结束后，吸走96孔板内培养液，按照150μL每孔加入DMSO，轻轻振荡使晶体完全溶解，使用酶标仪测定490nm波长处的OD值。各孔的抑制率按照如下公式计算。
Figure BDA0002530079120000091
根据得到的抑制率使用Graph pad prism 5软件计算IC50值。
结果见表1：
表1雷公藤红素及其衍生物体外抗肿瘤活性
Figure BDA0002530079120000092
从表1可以看出，本发明雷公藤红素衍生物均具有很好的抗肿瘤活性，其活性明显强于阳性对照药顺铂，部分衍生物的抗肿瘤活性优于雷公藤红素。

Claims (6)

1.一种雷公藤红素衍生物，具有如式(I)所示结构：
Figure FDA0002530079110000011
式(I)中，R为氢、C1-C8烷基或者被一个或多个取代基取代的C1-C8烷基，所述取代基各自独立选自：氟、氯、羟基、羟甲基、腈基、C1-C6烷硫基、C1-C8烷氧基、C1-C8酰胺基、C6-C14芳基、C6-C14芳香杂环基、五元杂环或六元杂环。
2.如权利要求1所述雷公藤红素衍生物，其特征在于，式(I)中，R为氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、甲基硫醚乙基、3-亚甲基吲哚基、4-亚甲基咪唑基、正丙酰胺基、对羟基苯甲基或苯甲基。
3.如权利要求1所述雷公藤红素衍生物的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：
将雷公藤红素(II)溶于甲醇，调节pH＝1-2，室温下搅拌反应8-16h，得到含有中间体(III)的反应液；向该反应液中加入氨基酸(IV)，调节pH＝7-8，室温下搅拌反应8-16h，之后反应液经后处理，得到式(I)所示产物；
所述雷公藤红素(II)与氨基酸(IV)的物质的量之比为1：2-3；
式(IV)中R的定义与式(I)中相同；
Figure FDA0002530079110000012
4.如权利要求3所述雷公藤红素衍生物的制备方法，其特征在于，所述甲醇的体积用量以雷公藤红素(II)的物质的量计为30-50mL/mmol。
5.如权利要求3所述雷公藤红素衍生物的制备方法，其特征在于，所述后处理的方法为：反应结束后，调节反应液pH＝7，乙酸乙酯萃取，萃取液经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩至干得到粗品；所得粗品经硅胶柱层析分离，以体积比6：1的石油醚与乙酸乙酯混合液或体积比30：1的氯仿与甲醇混合液为洗脱剂，收集含目标化合物的洗脱液，减压蒸除溶剂并干燥，得到产物雷公藤红素衍生物(I)。
6.如权利要求1所述雷公藤红素衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。
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