CN111558045A - 一种治疗肺癌的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种用于治疗肺癌的药物组合物，所述肺癌优选地为小细胞肺癌。所述药物组合物包含免疫检查点抑制剂和桃叶珊瑚苷。还提供了所述药物组合物的相关制剂及其用途。所述药物组合物显著抑制肺癌裸鼠移植瘤生长并显著改善裸鼠的生存期，效果显著优于同等剂量免疫检查点抑制剂和桃叶珊瑚苷单独用药，这表明药物联用后，具有显著的协同增效作用，临床应用前景良好。

Description

一种治疗肺癌的药物组合物

技术领域

本发明涉及一种用于治疗肺癌的药物组合物。特别地，涉及一种用于治疗小细胞肺癌的药物组合物。

背景技术

肺癌是一种常见的恶性肿瘤，其患病率和死亡率均居于全球恶性肿瘤之首。根据世界卫生组织(WHO)提出的肺部肿瘤组织学分类法，可以将肺癌分为两大类：小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)。小细胞肺癌占原发性支气管肺癌中的15％-20％，属于神经内分泌肿瘤。相比非小细胞肺癌，小细胞肺癌具有分化程度低，恶性程度高，远端转移发生早等病理生理学特点，其预后差，平均五年生存率不超过10％。不幸的是，小细胞肺癌研究进展缓慢，临床上的治疗方案极其有限。长期以来，小细胞肺癌的一线疗法一般都是以铂类药物联合依托泊苷为基础的全身性化疗。尽管小细胞肺癌对化疗敏感，但是绝大多数患者很快复发，并在两年内死亡。

近年来，免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor)在小细胞肺癌的治疗上实现了巨大突破，正在改变小细胞肺癌治疗方法的整体布局。在一线治疗方面的阿特朱单抗(atezolizumab)，三线治疗方面的纳武单抗(nivolumab)和派姆单抗(pembrolizumab)已经获得美国食品和药物管理局(FDA)正式批准。阿特朱单抗是目前唯一被批准用于初期治疗广泛期小细胞肺癌的免疫治疗方法。也是近20年来小细胞肺癌治疗上的重大突破。免疫检查点抑制剂正逐渐成为在长期以来被认为是“研究禁区”的小细胞肺癌领域的研究热点(例如参见，朱林霄等，“免疫检查点抑制剂在小细胞肺癌治疗中的临床研究现状”，临床肺科杂志，第25卷第5期，2020年5月，第788-793页)。

但是，在临床研究和临床应用中发现，尽管疗效强大，但免疫检查点抑制剂也存在很多缺点，例如，以PD-1/PD-L1单抗为例，这些药物价格极其昂贵，在皮肤、内分泌、肝脏和肺部***容易出现较为严重的不良反应，甚至在某些患者中还会产生耐药性。通过采用联合用药似乎能够克服免疫检查点抑制剂的上述不足，如克服肿瘤耐药、产生协同增效作用和降低毒副作用等。但是，如何从大量药物中选择出能够与免疫检查点抑制剂产生协同增效作用并降低其毒性的组合，则又成为了药物研发领域的科学家所面临的新挑战。有研究表明，天然产物在调节肿瘤微环境、抑制肿瘤转移、改善肿瘤耐药方面有独特的优势。因此，寻找能够增强免疫检查点抑制剂疗效并降低其毒副作用的天然产物，对改善肺癌(特别是，小细胞肺癌)患者的治疗结局和生存期具有十分重要的临床意义。

桃叶珊瑚苷(aucubin)，属于环烯醚萜类化合物，其广泛存在于车前草科、玄参科、球花科、杜仲科等植物中，其中以车前草中含量最高。桃叶珊瑚苷具有护肝解毒、抗炎、抗氧化、抗骨质疏松等作用。桃叶珊瑚苷口服生物利用度较低，生物利用度从大到小的给药方式分别为静脉内、腹腔、口服。有研究表明，桃叶珊瑚苷对人髓性白血病K562细胞具有显著的细胞毒性，并且可诱导其凋亡。另有研究表明，桃叶珊瑚苷可增加人非小细胞肺癌A549细胞系中p53和p21蛋白的量，进而将细胞阻滞在G0/G1期，最终导致A549细胞凋亡(例如参见，韩曼飞等，“天然桃叶珊瑚苷及其衍生物的化学结构和药理作用研究进展”，中草药，第48卷第19期，2017年10月，第4105-4113页)。但是尚无桃叶珊瑚苷与免疫检查点抑制剂联用在治疗肺癌(特别是小细胞肺癌)方面的研究。

发明内容

本发明的目的是为肺癌(特别是小细胞肺癌)患者提供一种具有协同增效作用的治疗肺癌的药物组合物，为临床上能够安全、有效、经济地治疗肺癌(特别是小细胞肺癌)提供一种新思路。

实现本发明目的的技术方案如下：

本发明的第一个方面提供了一种治疗肺癌的药物组合物，所述药物组合物包含免疫检查点抑制剂和桃叶珊瑚苷，免疫检查点抑制剂和桃叶珊瑚苷的重量比为1：0.1-1。

在一个实施方式中，所述免疫检查点抑制剂选自伊匹单抗、纳武单抗、派姆单抗、阿特朱单抗、阿维鲁单抗、德瓦鲁单抗中的一种或多种。

在另一个实施方式中，免疫检查点抑制剂和桃叶珊瑚苷的重量比为1：0.2-0.8。

在一个优选的实施方式中，所述免疫检查点抑制剂选自阿特朱单抗，且阿特朱单抗和桃叶珊瑚苷的重量比为1：0.2。

在一个实施方式中，所述药物组合物还包含化疗药物，所述免疫检查点抑制剂、桃叶珊瑚苷和化疗药物的重量比为1：0.1-1:0.1-1。

在另一个实施方式中，所述化疗药物选自顺铂、卡铂、紫杉醇、多西他赛、依托泊苷、培美曲塞中的一种或多种。

在一个优选的实施方式中，所述免疫检查点抑制剂选自阿特朱单抗，所述化疗药物选自依托泊苷，且阿特朱单抗、桃叶珊瑚苷和依托泊苷的重量比为1：0.2：0.4。

本发明的第二个方面提供了一种用于治疗肺癌的药物制剂，所述药物制剂由上述药物组合物和药学上可接受的载体制成。

在一个实施方式中，所述药物制剂为注射剂。

在另一个实施方式中，注射剂选自注射液、注射用无菌粉末和注射用浓溶液。

给药途径可以是胃肠外给药，所述胃肠外给药包括但不限于静脉内注射、皮下注射、肌内注射等。

本发明药物组合物中的各活性成分(例如，阿特朱单抗、桃叶珊瑚苷和/或依托泊苷)可以同时给药或依次顺序地分开给药。本发明药物组合物中的各活性成分可以在同一药物制剂中或以分开的不同制剂的形式联合给药。

本发明的第三个方面提供了一种上文所述的药物组合物或药物制剂在制备治疗肺癌的药物中的用途。

在一个优选的实施方式中，所述肺癌是小细胞肺癌。

在一个更优选的实施方式中，所述小细胞肺癌是局限期小细胞肺癌或广泛期小细胞肺癌。

在一个更优选的实施方式中，所述广泛期小细胞肺癌是化疗后广泛期小细胞肺癌。

“局限期小细胞肺癌”是指肿瘤局限于一侧胸腔内，包括已有纵隔、同侧锁骨上和前斜角肌***转移的患者。“广泛期小细胞肺癌”是指肿瘤的发展超过局限期的范围。

本发明药物组合物中使用的桃叶珊瑚苷可以采用生物提纯方法从含有该活性成分的车前草科、玄参科、球花科、杜仲科等植物中提取分离得到，也可购自市售产品。

在上文所述的医药用途中，对于本发明组合物的给药时间、给药次数和给药频率等等，需要根据病情的具体诊断结果而定，这在本领域技术人员掌握的技术范围之内。

将对小鼠的治疗方案应用于人体上，所有药物对人的有效剂量可以通过该药物对小鼠的有效剂量进行换算，这对于本领域的普通技术人员而言也是容易实现的。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明结合我国在天然产物研究方面的优势，筛选出一种在治疗肺癌(特别是小细胞肺癌)方面具有协同增效作用的药物组合物，通过将桃叶珊瑚苷与免疫检查点抑制剂联合使用，显著增强了免疫检查点抑制剂治疗肺癌(特别是小细胞肺癌)的作用，进而使得通过降低免疫检查点抑制剂的用量，增加此类药物的有效性和安全性成为可能。

(2)含有桃叶珊瑚苷的植物(例如，车前草、玄参、杜仲等)在我国来源广泛，桃叶珊瑚苷制备方法简单，且已经有成熟的工业化生产方法，成本较低。因此，通过在价格昂贵的免疫检查点抑制剂中加入桃叶珊瑚苷增强其疗效，能够极大地降低我国肺癌(特别是小细胞肺癌)患者的用药成本，切实减轻了患者的经济负担。

具体实施方式

以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道购买得到的常规产品。

实施例：

1.实验目的

考察本发明药物组合物对H446小鼠移植瘤模型的影响

2.实验材料

2.1动物：SPF级BALB/c雌性裸小鼠，6-8周龄，体重18-22g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司，许可证号:SCXK(京)2018-0006。

2.2仪器：分析天平、电子天平、1mL注射器、灌胃针头、动物笼具、苦味酸等。

2.3主要药品和试剂：人小细胞肺癌细胞系H446，购自中国科学院细胞库；桃叶珊瑚苷购自美国Sigma公司(纯度99.5％以上)；依托泊苷注射液(20mg/mL)购自齐鲁制药；阿特朱单抗注射液(60mg/mL)购自罗氏基因泰克公司。

3.实验方法

3.1移植瘤模型的建立和给药

将BALB/c雌性裸小鼠于室温下饲养，待其适应环境后，向其接种H446细胞，每只裸小鼠注射5×10⁷个细胞。接种一周后，观察裸鼠左侧腋窝皮下，发现裸鼠接种部位有米粒大小的结节生成。继续饲养，待肿瘤直径5mm左右时，剔除肿瘤尺寸和体重差异较大的裸鼠，并将剩余的裸鼠随机分组。

本实验分为以下几组，每组10只荷瘤小鼠：(1)模型组；(2)阿特朱单抗(5mg/kg)组；(3)桃叶珊瑚苷(1mg/kg)组；(4)依托泊苷(2mg/kg)组；(5)阿特朱单抗(5mg/kg)+桃叶珊瑚苷(1mg/kg)组；(6)阿特朱单抗(5mg/kg)+桃叶珊瑚苷(1mg/kg)+依托泊苷(2mg/kg)组。

模型组荷瘤小鼠腹腔注射给予0.9％生理盐水，其余各组按照荷瘤小鼠的体重腹腔注射给药，每周给药一次，连续给药4周。4周后，每组处死一半小鼠，剥离瘤块。其余小鼠按照之前的给药方案继续给药，计算各组生存期。

3.2评价指标

3.2.1肿瘤重量和抑瘤率：

给药4周后，每组处死一半小鼠，剥离瘤块后，称重。

抑瘤率(％)＝(模型组平均肿瘤重量-给药组平均肿瘤重量)/模型组平均肿瘤重量×100％

3.2.2生存期：在评价生存期时，出于动物福利方面的考虑，将处于濒死状态的荷瘤动物安乐死。

3.3统计学方法

结果采用SPSS 13.0统计软件进行分析，数据以平均值±标准差表示。多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

4.实验结果

4.1本发明药物组合物对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用

在实验中，裸小鼠接种H446细胞后，经5天潜伏期后，肿瘤迅速生长。如下表1所示，结果表明，阿特朱单抗(5mg/kg)单独使用可有效抑制肿瘤生长(p<0.05)。桃叶珊瑚苷每周单独给药一次4周后，几乎未显示出对肿瘤的抑制作用，抑瘤率仅为0.05％。依托泊苷(2mg/kg)单独使用具有一定的抑制H446肿瘤生长的作用，但是其抑瘤率与模型组相比不具有统计学显著性。阿特朱单抗(5mg/kg)+桃叶珊瑚苷(1mg/kg)组每周给药一次4周后，极其显著地降低了裸小鼠的肿瘤重量(p<0.01)，其抑瘤率达到了43.42％。令人吃惊的是，在上述药物组合物中进一步加入依托泊苷(2mg/kg)后，药物组合物抑制H446肿瘤生长的作用得到了进一步增强，抑瘤率可达53.95％(p<0.01)。

上述结果表明，将阿特朱单抗与桃叶珊瑚苷按照一定比例联用时，其抑瘤作用显著优于阿特朱单抗和桃叶珊瑚苷单独使用的效果，且在上述组合物中加入依托泊苷能够进一步提升阿特朱单抗的抗肿瘤作用，说明将上述药物联用发挥了协同抗肿瘤作用。

表1：给药后4周本发明药物组合物对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用

注：*p<0.05，**p<0.01，与模型组比较。

4.2本发明药物组合物对荷瘤小鼠生存期的影响

如下表2所示，结果表明，阿特朱单抗(5mg/kg)单独使用可有效延长荷瘤小鼠的生存期(p<0.05)。桃叶珊瑚苷(1mg/kg)单独使用与模型组相比对荷瘤小鼠的生存期无改善作用。依托泊苷(2mg/kg)单独使用对荷瘤小鼠的生存期具有一定的延长作用(40.4±5.1天)，但与模型组相比不具有统计学显著性，这可能与化疗药物依托泊苷本身具有较强的毒性相关。阿特朱单抗(5mg/kg)+桃叶珊瑚苷(1mg/kg)组在给药后，极其显著地延长了荷瘤小鼠的生存期(59.2±3.7天，p<0.01)。在上述药物组合物中进一步加入依托泊苷(2mg/kg)后，与两药联用相比，并没有进一步延长荷瘤小鼠的生存期(54.3±2.4天，p<0.05)。如上所述，这可能与化疗药物依托泊苷本身具有较强的毒性相关。

上述结果表明，将阿特朱单抗与桃叶珊瑚苷按照一定比例联用时，其对荷瘤小鼠生存期的改善作用显著优于阿特朱单抗和桃叶珊瑚苷单独使用的效果，说明将上述药物联合用药发挥了协同抗肿瘤作用。但是，在上述药物组合物中加入依托泊苷没有能够进一步延长荷瘤小鼠的生存期。

本发明药物组合物对H446移植瘤裸小鼠的肿瘤抑制作用与其对实验动物生存期的影响显示出大体上一致的趋势。

表2：本发明药物组合物对荷瘤小鼠生存期的影响

注：*p<0.05，**p<0.01，与模型组比较。

5.实验结论

上述实验结果表明，将阿特朱单抗与桃叶珊瑚苷按照一定比例联用时，其对人小细胞肺癌H466移植瘤小鼠的肿瘤抑制作用和生存期改善作用均显著优于阿特朱单抗和桃叶珊瑚苷单独使用的效果，说明本发明的药物组合物产生了协同增效的治疗肺癌(特别是小细胞肺癌)的作用。

在上述药物组合物中进一步加入其他化疗药物(例如，依托泊苷)可能会进一步协同地改善对荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用及其生存期，但药物组合物表现出的整体抗肿瘤作用还可能与化疗药物的毒性相关。

此外，在上述动物实验中，未发现本发明药物组合物组(第5组和第6组)裸鼠有明显的惊恐、不安或拒食现象。未观察到本发明药物组合物存在明显的不良反应，实验动物对其具有良好的耐受性。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (10)

1.一种治疗肺癌的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含免疫检查点抑制剂和桃叶珊瑚苷，免疫检查点抑制剂和桃叶珊瑚苷的重量比为1：0.1-1。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述免疫检查点抑制剂选自伊匹单抗、纳武单抗、派姆单抗、阿特朱单抗、阿维鲁单抗、德瓦鲁单抗中的一种或多种。

3.如权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，免疫检查点抑制剂和桃叶珊瑚苷的重量比为1：0.2-0.8。

4.如权利要求1-3中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述免疫检查点抑制剂选自阿特朱单抗，且阿特朱单抗和桃叶珊瑚苷的重量比为1：0.2。

5.如权利要求1-4中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包含化疗药物，所述免疫检查点抑制剂、桃叶珊瑚苷和化疗药物的重量比为1：0.1-1:0.1-1。

6.如权利要求1-5中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述化疗药物选自顺铂、卡铂、紫杉醇、多西他赛、依托泊苷、培美曲塞中的一种或多种。

7.如权利要求1-6中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述免疫检查点抑制剂选自阿特朱单抗，所述化疗药物选自依托泊苷，且阿特朱单抗、桃叶珊瑚苷和依托泊苷的重量比为1：0.2：0.4。

8.一种用于治疗肺癌的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂由权利要求1-7中任一项所述的药物组合物和药学上可接受的载体制成，优选地，所述药物制剂为注射剂。

9.权利要求1-7中任一项所述的药物组合物或权利要求8所述的药物制剂在制备治疗肺癌的药物中的用途。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述肺癌为小细胞肺癌，优选地，所述小细胞肺癌为局限期小细胞肺癌或广泛期小细胞肺癌，更优选地，所述广泛期小细胞肺癌为化疗后广泛期的小细胞肺癌。