CN111513084A - 一种复合根瘤菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种复合根瘤菌剂及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及农业微生物技术领域，具体公开了一种复合根瘤菌剂及其制备方法和应用，复合根瘤菌剂包括紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌、弗兰克氏放线菌、枯草芽孢杆菌、白僵菌，所述复合根瘤菌剂中含有紫云英根瘤菌、弗兰克氏放线菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌的效活菌数均为1.5‑3.5亿CFU/g，所述复合根瘤菌剂中含有枯草芽孢杆菌和白僵菌活菌数均为0.5‑2.5亿CFU/g。本发明制得的复合根瘤菌剂能够提高豆科植物固氮效率，抑制植物病虫害，提高作物成活率。

Description

一种复合根瘤菌剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及农业微生物技术领域，具体涉及一种复合根瘤菌剂及其制备方法和应用。
背景技术
绿肥作物是提供作物肥源和培肥土壤的作物，如紫云、毛叶苕子、箭筈豌豆、三叶草、苜蓿、草木樨、柽麻、田菁、紫穗槐等。绿肥作物在经过一定期间生长之后，将其绿色茎叶切断直接翻入土中，可以节省人力，减少运输费用，也可沤制土肥施用。绿肥含有多种养分和大量有机质，能改善土壤结构，促进土壤熟化，增强地力。
氮是构成蛋白质的主要成分，对茎叶的生长和果实的发育有重要作用，是与产量最密切的营养元素。栽培绿肥以豆科作物为主，所有豆科绿肥作物均可以与其共生根瘤菌结瘤和固氮，但是仅仅依赖绿肥作物自身的固氮效果对于植物的萌发和生长促进力度较低，也无法在固氮的同时防止植物病虫害侵害。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供了一种复合根瘤菌剂及其制备方法和应用。
本发明的第一个目的是提供了一种复合根瘤菌剂，包括紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌、弗兰克氏放线菌、枯草芽孢杆菌、白僵菌；
所述复合根瘤菌剂中含有紫云英根瘤菌、弗兰克氏放线菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌的效活菌数均为1.5-3.5亿CFU/g；
所述复合根瘤菌剂中含有枯草芽孢杆菌和白僵菌活菌数均为0.5-2.5亿CFU/g。
本发明的第二个目的是提供了一种复合根瘤菌剂的制备方法，包括以下步骤：
S1，用YMA培养基制备紫云英根瘤菌剂、毛叶苕子根瘤菌剂、箭筈豌豆根瘤菌剂、三叶草根瘤菌剂；用S培养基制备弗兰克氏放线菌剂；
S2，分别将S1中制备得到的紫云英根瘤菌剂和弗兰克氏放线菌剂混合后放大培养，获得一级培养液；然后将毛叶苕子根瘤菌剂加入到一级培养液中继续培养，获得二级培养液，然后将箭筈豌豆根瘤菌剂和三叶草根瘤菌剂同时加入到二级培养液中继续培养获得三级培养液，然后将三级培养液进行离心，获得菌泥；
S3，将S2中获得的菌泥经真空冷冻干燥获得菌粉；
S4，将枯草芽孢杆菌和白僵菌微粒剂加入到S3中获得菌粉中，混合均匀后获得复合根瘤菌剂。
优选的，所述紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌和弗兰克氏放线菌的培养条件均为：培养温度为20-30℃，转速为130-180rpm，培养时间为36-72h。
优选的，S1中，所述紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌和弗兰克氏放线菌接种量比例为1:1:1:1:1-2。
优选的，S1中，所述枯草芽孢杆菌、白僵菌微粒剂和菌粉的质量比为1:1:3-6。
优选的，S3中，所述菌泥在干燥前需要用无菌水洗涤。
本发明的第三个目的是提供了上述复合根瘤菌剂在绿肥作物种植中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
1、本发明中的弗兰克氏放线菌能够有效促进紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌与豆科绿肥之间的共生结瘤，并提高豆科植物固氮效率，促进绿肥作物的生长。
2、本发明中的复合根瘤菌剂中的枯草芽孢杆菌和白僵菌能够与紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌相互协同抑制植物病虫害，提高作物成活率。
3、本发明获得的复合根瘤菌剂能够有效促进植物产生生长激素，从而提高植物生长速率。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1
一种复合根瘤菌剂，包括紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌、弗兰克氏放线菌、枯草芽孢杆菌、白僵菌；
所述复合根瘤菌剂中含有紫云英根瘤菌、弗兰克氏放线菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌的效活菌数均为1.5-3.5亿CFU/g；
所述复合根瘤菌剂中含有枯草芽孢杆菌和白僵菌活菌数均为0.5-2.5亿CFU/g。
上述复合根瘤菌剂的制备方法，包括如下制备步骤：
S1，菌剂制备
分别制备紫云英根瘤菌剂、毛叶苕子根瘤菌剂、箭筈豌豆根瘤菌剂、三叶草根瘤菌剂和弗兰克氏放线菌菌剂，具体为：
分别活化紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌和三叶草根瘤菌，并分别以1:1:1:1的接种量比例接种于YM液体培养基，转速为180rpm，28℃培养36h，得到紫云英根瘤菌剂、毛叶苕子根瘤菌剂、箭筈豌豆根瘤菌剂和三叶草根瘤菌剂；
活化弗兰克氏放线菌菌种，接种于S液体培养基，弗兰克氏放线菌的接种量与紫云英根瘤菌接种量比例为1:1，转速为180rpm，pH为7.0，28℃培养36h，得到弗兰克氏放线菌菌剂。
菌剂制备过程中所需培养基具体为：
(1)YM培养基配方：甘露醇10g/L，酵母膏1g/L，K2HPO4 0.5g/L，NaCl0.1g/L，CaCl0.05g/L，MgSO40.2g/L，蒸馏水1L；
(2)S培养基配方：葡萄糖10g/L，酵母膏4g/L，蛋白胨4g/L，K2HPO44g/L，KH2PO42g/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，蒸馏水1L。
S2，菌泥的制备
分别将S1中制备得到的紫云英根瘤菌剂和弗兰克氏放线菌剂全部混合后在相同条件下放大培养，获得一级培养液；
然后将毛叶苕子根瘤菌剂加入到一级培养液中在同一条件下继续培养24h，获得二级培养液；
然后将箭筈豌豆根瘤菌剂和三叶草根瘤菌剂同时加入到二级培养液中继续在相同条件下培养24h，获得三级培养液，然后将三级培养液进行离心，获得菌泥；
S3，菌粉制备
将S2中获得的菌泥用无菌水洗涤3遍，然后离心，置于温度为-65℃的真空冷冻干燥机中干燥24h后获得菌粉。
S4，复合根瘤菌剂制备
将枯草芽孢杆菌和白僵菌微粒剂加入到S3中获得的菌粉中，且所述枯草芽孢杆菌、白僵菌微粒剂和菌粉的质量比为1:1:6，混合均匀后获得复合根瘤菌剂。
实施例2
一种复合根瘤菌剂，包括紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌、弗兰克氏放线菌、枯草芽孢杆菌、白僵菌；
所述复合根瘤菌剂中含有紫云英根瘤菌、弗兰克氏放线菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌的效活菌数均为2亿CFU/g；
所述复合根瘤菌剂中含有枯草芽孢杆菌和白僵菌活菌数均为1.8亿CFU/g。
上述复合根瘤菌剂的制备方法，具体步骤与实施例1基本相同，区别在于：
S1中，弗兰克氏放线菌的接种量与紫云英根瘤菌接种量比例为2:1，所述紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌和弗兰克氏放线菌培养条件相同，培养温度为30℃，转速为150rpm，培养时间为50h。
S4中，所述枯草芽孢杆菌、白僵菌微粒剂和菌粉的混合质量比为1:1:4。
实施例3
一种复合根瘤菌剂，包括紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌、弗兰克氏放线菌、枯草芽孢杆菌、白僵菌；
所述复合根瘤菌剂中含有紫云英根瘤菌、弗兰克氏放线菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌的效活菌数均为1.5亿CFU/g；
所述复合根瘤菌剂中含有枯草芽孢杆菌和白僵菌活菌数均为0.5亿CFU/g。
上述复合根瘤菌剂的制备方法，具体步骤与实施例1基本相同，区别在于：
S1中，弗兰克氏放线菌的接种量与紫云英根瘤菌接种量比例为2:1，所述紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌和弗兰克氏放线菌培养条件相同，培养温度为32℃，转速为130rpm，培养时间为72h。
S4中，所述枯草芽孢杆菌、白僵菌微粒剂和菌粉的混合质量比为1:1:3。
应用实施例1
本发明提供的一种复合根瘤菌剂在绿肥作物种植中的应用，具体步骤为：
S1，挑选同样饱满的紫云英优质种子200粒，备用；
S2，用实施例1中获得的复合根瘤菌剂对S1中200粒紫云英种子进行拌种，拌种时使用的复合根瘤菌剂与紫云英种子的质量比为1:460；
S3，将S2中拌种后200粒紫云英种子在黑暗条件下进行萌发，待种子萌发7天后随机选择100粒萌发的种子计算萌发率，测量芽长和根长，结果记录在表2中；
S4，将S3中剩余的100粒已萌发的种子采用本领域技术人员常规种植方式移栽和种植，待紫云英生长21天后观察其根部、叶片和茎部病虫害侵染情况，病虫害侵染观察结果记录在表3中，表3中仅记录侵染率最高的级别好相应的侵染率，即100粒种植后的植株中，哪个级别占比最高则作为代表记录。
应用实施例2
本发明提供的一种复合根瘤菌剂在绿肥作物种植中的应用，具体步骤与应用实施例1基本相同，区别在于：应用实施例2采用的绿肥作物是苕子。
应用实施例3
本发明提供的一种复合根瘤菌剂在绿肥作物种植中的应用，具体步骤与应用实施例1基本相同，区别在于：应用实施例3采用的绿肥作物是柽麻。
对比例1
操作步骤与应用实施例1相同，区别在于：不使用复合根瘤菌剂拌种，直接播种。
对比例2
操作步骤与应用实施例2相同，区别在于：不使用复合根瘤菌剂拌种，直接播种。
对比例3
操作步骤与应用实施例3相同，区别在于：不使用复合根瘤菌剂拌种，直接播种。
对比例4
对比例4提供了一种复合根瘤菌剂，操作步骤与应用实施例1基本相同，区别在于：所述复合根瘤菌剂包括紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌、枯草芽孢杆菌、白僵菌。
上述实施例1-3通过本发明提供的技术方案制备得到的复合根瘤菌剂，上述应用实施例1-3是利用实施例1-3制备得到的复合根瘤菌剂对于绿肥作物播种前进行拌种后种植，对比例1-3和对比例4作为对照组，研究复合根瘤菌剂对于紫云英、苕子、柽麻的种子萌发率、芽长、根长的影响以及观察病虫害侵害程度，以及去掉弗兰克氏放线菌对复合根瘤菌剂的影响，为方便观察记录，本发明中将病虫害侵害程度根据不同的表征分为1-5级，且病虫害侵害程度与级别数大小成正比例关系，也就是说5级为最严重的程度，病虫害侵染标准如表1所示。
研究结果如表2和表3所示：
表1病虫害侵染标准
Figure BDA0002484597870000071
Figure BDA0002484597870000081
表2本发明中的复合根瘤菌剂拌种对紫云英、苕子和柽麻生长的影响
Figure BDA0002484597870000082
表3本发明中的复合根瘤菌剂对紫云英、苕子和柽麻的病虫害影响
Figure BDA0002484597870000083
如表2所示，应用实施例1紫云英的种子萌发率为91％，相应的对比例1没有使用复合根瘤菌剂拌种的情况下萌发率为75％，下降18％，芽长减少了4cm，根长减少了2cm；
应用实施例2苕子的萌发率高达100％，相应的对比例2的萌发率为73％，种子萌发率降低了27％，芽长减少了3cm，根长减少了2cm；
应用实施例3柽麻的种子萌发率为94％，相应的对比例3的萌发率为85％，种子萌发率降低了10％，芽长减少了5cm，根长减少了1cm；
从对比例4可以看出，弗兰克氏放线菌影响着紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌和三叶草根瘤菌之间的协同固氮，促进绿肥生长的作用。
因此，通过应用实施例1-3、对比例1-3和对比例4发现使用本发明中实施例1-3中的方法获得的复合根瘤菌剂能够有效提高种子发芽率，芽长和根长，也就是说，对绿肥作物的生长有非常明显的促进作用。
如表3所示，应用实施例1为侵染1级，且侵害率为92％，即有92％的幼苗肉眼均没有观察到任何明显的病变现象，而对比例1没有使用复合根瘤菌剂时发现其病变达到3级，且占据了60％；
应用实施例2为侵染2级，且侵害率为85％，对比例2为4级，侵害率为56％；
应用实施例3为侵染1级，且侵害率为90％，对比例3为3级，侵害率为54％；
由上述可知，在不使用复合根瘤菌剂拌种的情况下，病虫害侵染程度均在3级以上(根部根结，腐烂，茎基部局部坏死腐烂，叶片萎蔫、腐烂)，且超过一半的植物均被侵染，因此，本发明实施例1-3制备得到的复合根瘤菌剂对于病虫害的侵染具有明显的抵御能力，能够有效防控植物病害。
需要说明的是，本发明中的放大培养指代将培养基和所用容器均放大十倍培养。
还需要说明的是，所述紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌、弗兰克氏放线菌和枯草芽孢杆菌均为购买自河南培尼尔农业科技有限公司的新鲜菌种；所述白僵菌是从鹤壁市百惠生物科技有限公司购买所得的微粒剂；
本发明中使用的紫云英、苕子、柽麻的种子均购买自郑州开元草业科技有限公司。
综上所述，本发明提供的一种复合根瘤菌剂，不仅能够促进绿肥作物的萌芽、生长，还能有效的防控植物病虫害。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (7)

1.一种复合根瘤菌剂，其特征在于，包括紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌、弗兰克氏放线菌、枯草芽孢杆菌、白僵菌；
所述复合根瘤菌剂中含有紫云英根瘤菌、弗兰克氏放线菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌的效活菌数均为1.5-3.5亿CFU/g；
所述复合根瘤菌剂中含有枯草芽孢杆菌和白僵菌活菌数均为0.5-2.5亿CFU/g。
2.如权利要求1所述的一种复合根瘤菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1，用YMA培养基分别培养制备紫云英根瘤菌剂、毛叶苕子根瘤菌剂、箭筈豌豆根瘤菌剂、三叶草根瘤菌剂；用S培养基制备弗兰克氏放线菌剂；
S2，分别将S1中制备得到的紫云英根瘤菌剂和弗兰克氏放线菌剂混合后放大培养，获得一级培养液；然后将毛叶苕子根瘤菌剂加入到一级培养液中继续培养，获得二级培养液，然后将箭筈豌豆根瘤菌剂和三叶草根瘤菌剂同时加入到二级培养液中继续培养获得三级培养液，然后将三级培养液进行离心，获得菌泥；
S3，将S2中获得的菌泥经真空冷冻干燥获得菌粉；
S4，将枯草芽孢杆菌和白僵菌微粒剂加入到S3中获得菌粉中，混合均匀后获得复合根瘤菌剂。
3.如权利要求2所述的复合根瘤菌剂的制备方法，其特征在于，S1中，所述紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌和弗兰克氏放线菌的培养条件均为：培养温度为28-32℃，转速为130-180rpm，培养时间为36-72h。
4.如权利要求2所述的复合根瘤菌剂的制备方法，其特征在于，S1中，所述紫云英根瘤菌、毛叶苕子根瘤菌、箭筈豌豆根瘤菌、三叶草根瘤菌和弗兰克氏放线菌接种量比例为1:1:1:1:1-2。
5.如权利要求2所述的复合根瘤菌剂的制备方法，其特征在于，S1中，所述枯草芽孢杆菌、白僵菌微粒剂和菌粉的质量比为1:1:3-6。
6.如权利要求2所述的复合根瘤菌剂的制备方法，其特征在于，S3中，所述菌泥在干燥前需要用无菌水洗涤。
7.如权利要求1所述的复合根瘤菌剂在绿肥作物种植中的应用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116686704A (zh) * 2023-03-24 2023-09-05 郑州轻工业大学 一种快速高效的豌豆毛状根体系诱导和扩繁的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1463604A (zh) * 2002-06-03 2003-12-31 杨爱民 含有多种微生物的病虫害防治剂
CN101671205A (zh) * 2009-09-27 2010-03-17 上海创博生物技术有限公司 一种促进油菜生长的复合微生物制剂及其制备方法
CN103274836A (zh) * 2013-06-09 2013-09-04 苏州仁成生物科技有限公司 一种防治麻山药炭疽病的多元微生物专用肥及其制备方法
CN103848702A (zh) * 2014-01-14 2014-06-11 淅川县绿新生物科技有限公司 一种花生专用肥
CN105072915B (zh) * 2013-03-20 2018-05-01 巴斯夫公司 包含枯草芽孢杆菌菌株和生物农药的协同增效组合物

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1463604A (zh) * 2002-06-03 2003-12-31 杨爱民 含有多种微生物的病虫害防治剂
CN101671205A (zh) * 2009-09-27 2010-03-17 上海创博生物技术有限公司 一种促进油菜生长的复合微生物制剂及其制备方法
CN105072915B (zh) * 2013-03-20 2018-05-01 巴斯夫公司 包含枯草芽孢杆菌菌株和生物农药的协同增效组合物
CN103274836A (zh) * 2013-06-09 2013-09-04 苏州仁成生物科技有限公司 一种防治麻山药炭疽病的多元微生物专用肥及其制备方法
CN103848702A (zh) * 2014-01-14 2014-06-11 淅川县绿新生物科技有限公司 一种花生专用肥

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
姜成林 等: "《微生物资源开发利用》", 30 April 2001, 中国轻工业出版社 *
张俊杰 等: "我国豆科绿肥根瘤菌资源研究现状", 《轻工学报》 *
徐孝华: "《普通微生物学》", 30 November 1998, 中国农业大学出版社 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116686704A (zh) * 2023-03-24 2023-09-05 郑州轻工业大学 一种快速高效的豌豆毛状根体系诱导和扩繁的方法

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