CN111505281A - 一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒 - Google Patents
一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111505281A CN111505281A CN202010310112.2A CN202010310112A CN111505281A CN 111505281 A CN111505281 A CN 111505281A CN 202010310112 A CN202010310112 A CN 202010310112A CN 111505281 A CN111505281 A CN 111505281A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- colloidal gold
- test strip
- copper
- copper growth
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 title claims abstract description 24
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 title claims description 9
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 title claims description 9
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 title claims description 6
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 91
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 67
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 58
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 50
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims abstract description 50
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims abstract description 50
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims abstract description 26
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 20
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims abstract description 20
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims abstract description 17
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims abstract description 17
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims abstract description 7
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 74
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 34
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 32
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 26
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 16
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 claims description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 12
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 claims description 12
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims description 11
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 11
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 8
- PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M sodium ascorbate Substances [Na+].OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M 0.000 claims description 8
- 235000010378 sodium ascorbate Nutrition 0.000 claims description 8
- 229960005055 sodium ascorbate Drugs 0.000 claims description 8
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 claims description 8
- ORTQZVOHEJQUHG-UHFFFAOYSA-L copper(II) chloride Chemical compound Cl[Cu]Cl ORTQZVOHEJQUHG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 7
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 7
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 7
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 claims description 7
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 6
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 6
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 claims description 5
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 4
- 239000002078 nanoshell Substances 0.000 claims description 4
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 claims description 4
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 4
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims description 3
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 3
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 3
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 claims description 2
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 claims description 2
- 229920001601 polyetherimide Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 claims description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 claims description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 claims 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 11
- 238000011841 epidemiological investigation Methods 0.000 abstract 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 12
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 12
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 9
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 6
- 238000011896 sensitive detection Methods 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 3
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 3
- 208000002109 Argyria Diseases 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical group [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- -1 silver ions Chemical class 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 102000002723 Atrial Natriuretic Factor Human genes 0.000 description 1
- 101800001288 Atrial natriuretic factor Proteins 0.000 description 1
- 101800001890 Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 description 1
- 101800000407 Brain natriuretic peptide 32 Proteins 0.000 description 1
- 102400000667 Brain natriuretic peptide 32 Human genes 0.000 description 1
- 101800002247 Brain natriuretic peptide 45 Proteins 0.000 description 1
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 1
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012406 Carcinoembryonic Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 1
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 102000036675 Myoglobin Human genes 0.000 description 1
- 108010062374 Myoglobin Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000004697 Polyetherimide Substances 0.000 description 1
- WVOXLKUUVCCCSU-ZPFDUUQYSA-N Pro-Glu-Ile Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WVOXLKUUVCCCSU-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- 108010048233 Procalcitonin Proteins 0.000 description 1
- 102000007066 Prostate-Specific Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N carperitide Chemical group C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000000696 magnetic material Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N nesiritide Chemical group C([C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N procalcitonin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CSSC1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
- G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/08—RNA viruses
- G01N2333/165—Coronaviridae, e.g. avian infectious bronchitis virus
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2469/00—Immunoassays for the detection of microorganisms
- G01N2469/20—Detection of antibodies in sample from host which are directed against antigens from microorganisms
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒，该试剂盒在胶体金免疫层析试纸条的基础上引入可控铜生长技术放大其检测线胶体金探针的光学信号强度，从而实现待测物的高灵敏检测。所述试剂盒包括胶体金免疫层析试纸条和铜生长液，胶体金免疫层析试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸依次固定于PVC塑料底板上；所述铜生长液包括铜生长A液和铜生长B液。本发明提供的试剂盒操作简单、灵敏度高、稳定性好、检测速度快(20‑30min)、结果易读，且无需其他辅助仪器设备，可用于临床和突发事件的现场快速超灵敏检测以及大规模的流行病学调查。
Description
技术领域
本发明涉及免疫层析分析技术领域，具体涉及一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒，其技术原理为双抗原夹心法。
背景技术
胶体金免疫层析试纸条因其简单、快速、方便以及裸眼检测已被广泛应用于临床诊断、食品安全检测以及环境监控等领域。传统胶体金免疫层析试纸条主要采用粒径为20～40nm胶体金作为信号探针，然而由于其较小的粒径导致其比色信号强度相对偏弱，进而导致其检测灵敏度偏低。相对较低的检测灵敏度在一定程度上局限了其在超灵敏检测中的应用。近些年，随着纳米科学和技术的快速发展，各种各样的新型纳米材料如荧光微球、量子点、量子点微球、上转换荧光纳米粒子、碳纳米材料以及磁性材料已经被报道可用于替代胶体金作为检测探针提高传统免疫层析试纸条的检测灵敏度，但这些纳米探针的合成相对复杂，价格昂贵很难被市场推广使用。相对于这些新型纳米材料，胶体金因其合成简单、易修饰、生物相容性好、光学性质稳定以及易读取等优势一直以来在免疫层析试纸条占据主要的位置，特别是在商业化生产中，其市场占有率达90％以上。因此，如何提高传统胶体金免疫层析试纸条的检测灵敏度对于进一步拓展其在超灵敏检测中的应用具有重要意义。
基于试纸条检测线信号放大策略因无需合成额外的辅助信号放大材料，因而得到了科研工作者的广泛关注。该类策略主要包括以下几类：1)双金信号放大技术：在传统胶体金免疫层析试纸条的基础上，通过引入信号扩增金标垫，其可以借助抗原抗体反应和生物素-链霉亲和素***等特异性地在检测线结合金标抗体偶联物，导致胶体金纳米粒子的进一步聚集，从而放大胶体金的比色信号，如专利CN102507929A；2)酶增强技术：在传统胶体金免疫层析试纸条的基础上，通过引入辣根过氧化物酶或具有过氧化物酶活性的纳米酶催化氧化相应的底物如四甲基联苯胺(TMB)等生成有色的沉淀物沉积于检测线，从而使胶体金的比色信号得到放大；3)金或银染增强技术：在传统胶体金免疫层析试纸条的基础上，当还原剂存在的情况下，金或银离子容易以胶体金为核心，聚集在胶体金表面还原成金或银原子，使纳米级大小的胶体金通过金或银离子的聚集和还原生长为更大的颗粒，从而使胶体金的比色信号得到放大，如专利CN102135536A。前两种方法由于需要对胶体金探针进行双标记，往往容易影响胶体金探针的免疫性能，导致方法学稳定性差。金或银染增强技术中金属纳米壳层的生长属于层层生长模式，其生长速率不仅与试纸条T、C线上金纳米粒子数量有关，而且与生长液的浓度以及生长时间密切相关，导致生长过程不可控，检测结果的稳定性和重现性差，大大限制了该方法在实践中的推广应用。此外这些方法提高检测灵敏度的能力是有限的，仅为1～2个数量级。因此增敏后的胶体金免疫层析试纸条依然无法实现低浓度待检物的超灵敏检测。本发明提出使用聚合物介导可控铜生长技术显著增强试纸条检测线上胶体金探针的光学信号强度，条带颜色呈现从无到有、从弱到强的变化，可实现超低目标物浓度下的裸眼定性检测。经检索未见有采用可控铜生长技术增敏传统胶体金免疫层析试纸条检测灵敏度的公开文献报道。
发明内容
本发明的目的是本发明旨在针对现有胶体金免疫层析试纸条因其20～40nm胶体金探针信号强度偏弱导致检测灵敏度偏低的现状缺陷，使用聚合物介导胶体金探针表面可控铜生长沉积显著放大试纸条检测线上胶体金探针的光学信号强度，提供了一种提高传统胶体金免疫层析方法检测灵敏度的新技术，实现对超低浓度目标检测物进行现场快速检测。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒，所述试剂盒包括胶体金免疫层析试纸条和铜生长液，胶体金免疫层析试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸依次固定于PVC塑料底板上，所述结合垫为喷涂有胶体金标记的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组抗原和胶体金标记的兔IgG抗体的玻璃纤维膜，所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，检测线上包被有SARS-CoV-2重组抗原，质控线上包被有抗兔二抗溶液；所述铜生长液包括铜生长A液和铜生长B液，铜生长A液为聚合物和二价铜离子预先形成铜离子配位生长液，铜生长B液为抗坏血酸钠和柠檬酸三钠混合溶液。
本发明还提供了一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
1)胶体金标记的重组抗原的制备：取1mL粒径为30～40nm柠檬酸包被胶体金溶液，用浓度0.2M的碳酸钾溶液调节该溶液的pH值至7.0～8.0；向溶液加入5μL浓度为1～2mg/mLSARS-CoV-2重组抗原溶液，室温下振荡反应30min；然后再将100μL1～2mg/mL牛血清白蛋白溶液加至上述混合溶液中继续于室温下振荡反应30min；在4℃条件下，于10000rpm离心20min，弃上清，沉淀物复溶于0.01M pH7.4磷酸盐缓冲溶液(PBS)，得终产物胶体金标记的重组抗原；胶体金标记兔IgG抗体采用相同的方法完成，将SARS-CoV-2重组抗原溶液替换成兔IgG抗体溶液。
2)胶体金免疫层析试纸条的制备：a)结合垫的制备是将胶体金标记的重组抗原和胶体金标记的兔IgG抗体喷涂于玻璃纤维膜上；b)具有检测线和质控线的硝酸纤维膜的制备是将浓度为1～2mg/mL SARS-CoV-2重组抗原和浓度为1～2mg/mL抗兔二抗溶液分别喷涂硝酸纤维膜上绘制两条线平行线，SARS-CoV-2重组抗原溶液划线作为检测线(T线)，抗兔二抗溶液划线为质控线(C线)；c)胶体金免疫层析试纸条组装：将样品垫、具有金标检测抗体的结合垫、具有T和C线的硝酸纤维膜和吸水纸分别依次粘贴到塑料衬板上，相邻重叠部分的长度为2mm，切割成4mm宽的试纸条，密封干燥，于温度保存；
3)铜生长液的配置：a)铜生长A液：准确称取200～400mg氯化铜和100～200mg聚合物分别溶解于10mL超纯水中，然后将二者混均制备得铜生长A液；b)铜生长B液：准确称取1～2g抗坏血酸钠和1mg柠檬酸三钠分别溶解于10mL和1mL超纯水中，然后将二者混均制备得铜生长B液。
进一步地，所述聚合物为聚乙烯亚胺PEI、聚丙烯酸PAA、聚乙烯吡咯烷酮PVP或聚赖氨酸PL。
本发明还提供了一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒的使用方法，包括以下步骤：
1)取100～120μL待测样品溶液加入到试纸条的检测卡加样孔中，于室温反应5～10min；
2)将上述反应后的试纸条依次使用磷酸盐缓冲液和超纯水洗涤后，浸泡于铜生长A液中室温反应5min；
3)接着将试纸条转移至铜生长B液中继续反应2min，使聚合物介导铜纳米壳层可控生长沉积至胶体金表面，显著增强胶体金的光学信号强度，肉眼观察实验结果。
本发明适用于疾病相关抗原及抗体标志物的超灵敏检测，所述的疾病相关标志物包括：肿瘤标志物如癌胚抗原、***特异性抗原、甲胎蛋白；炎症标志物如C反应蛋白、降钙素原、白介素6；心肌标志物如肌钙蛋白、肌红蛋白、N末端心房利钠肽及N末端脑利钠肽；传染病标志物如新型冠状病毒抗原及抗体、艾滋病病毒抗原及抗体、埃博拉病毒抗原及抗体、中东呼吸综合征冠状病毒抗原及抗体、乙肝病毒相关抗原及抗体；病原体如病毒、致病菌等，特别是适合于待检物的现场快速超灵敏检测。样品处理按照常规处理方法即可。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、本发明是在传统胶体金免疫层析试纸条的基础上，采用聚合物介导可控铜生长信号放大技术既提高了胶体金免疫层析试纸条的检测灵敏度，也保留了其特异性强的特点。
2、本发明所采用的聚合物介导可控铜生长信号放大技术涉及胶体金探针表面聚合物介导下抗坏血酸钠诱导二价铜离子的可控还原沉积。其原理为将完成常规检测后的胶体金试纸条依次浸泡于铜生长A液和B液，此时预吸附的铜离子被还原成铜单质沉积在胶体金探针表面并实现信号增强。该方案中被还原沉积在检测区域的铜纳米粒子数量与预吸附的铜离子数量有关，而预吸附的铜离子数量只与试纸条检测区域的胶体金探针数目有关，因而可实现铜纳米粒子可控生长。相较于传统的金银生长增敏型试纸条，该方法灵敏度更高、检测结果的准确性和可靠性更好。此外信号放大体系中所涉及的氯化铜、聚合物、抗坏血酸钠及柠檬酸三钠均已实现商业化大规模生产，因此本方法试剂成本低、稳定性高以及重现性好，具有较好的商业化前景。
3、本发明所使用聚合物介导可控铜生长信号放大技术可适用于所有胶体金免疫层析试纸条。
4、本发明所构建的增敏型免疫层析试纸条特别适用于痕量目标分析物的超灵敏检测，在临床和突发事件的现场检测中具有广泛的应用前景，如传染病的早期筛查等。
附图说明
图1为试纸条结构示意图，为(A)是传统胶体金免疫层析试纸条结构图，(B)是本发明方法的原理示意图；
图2为对新型冠状病毒感染者血清中抗体检测的示意图：传统胶体金免疫层析试纸条(上)和本发明所构建的增敏型试纸条(下)。
具体实施方式
以下将对本发明的具体实施方式进行详细描述。为了避免过多不必要的细节，在以下实施例中对属于公知的结构或功能将不进行详细描述。
除有定义外，以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。
以下实施例中所用的试验试剂耗材，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
在以下试验中，磷酸盐缓冲液(PBS，0.05M，pH 7.4)的配置方法如下：NaCl 40g，Na2HPO4 13.5g，KH2PO4 1.0g，KCl 1.0g溶于1L超纯水中。用0.1M NaOH调pH值至7.4。
试验中所涉及的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组抗原购于江西业力医疗器械有限公司。兔IgG抗体以及抗兔二抗均由北京热景生物技术股份有限公司提供。所述氯化铜、聚乙烯亚胺PEI、抗坏血酸钠及柠檬酸三钠均可自市面购得。
实施例1
一种用于增敏型胶体金免疫层析试纸条的检测试剂盒，它包括胶体金免疫层析试纸条和铜生长液；如图1中A所示，胶体金免疫层析试纸条包括样本垫、结合垫、NC膜和吸水纸，结合垫上设有用胶体金标记的新型冠状病毒重组抗原，硝酸纤维素膜上设有检测线(T线)和质控线(C线)；铜生长液包括铜生长A液和B液。
所述的试剂盒按以下方法制备得到：
一、胶体金免疫层析试纸条的制备
1、胶体金标记的重组抗原的制备：
取1mL粒径为35nm柠檬酸包被胶体金溶液，用浓度0.2M的碳酸钾溶液调节该溶液的pH值至7.4；向溶液加入5μL浓度为1.5mg/mL新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组抗原溶液，室温下振荡反应30min；然后再将100μL 1.5mg/mL牛血清白蛋白溶液加至上述混合溶液中继续于室温下振荡反应30min；在4℃条件下，于10000rpm离心20min，弃上清，沉淀物复溶于0.01M pH7.4磷酸盐缓冲溶液(PBS)，得终产物胶体金标记的重组抗原。胶体金标记兔IgG抗体采用类似方法完成。
2、胶体金免疫层析试纸条的制备：
a)结合垫的制备是将胶体金标记的重组抗原和胶体金标记的兔IgG抗体喷涂于玻璃纤维膜上；
b)具有检测线和质控线的硝酸纤维(NC)膜的制备是将浓度为1.5mg/mL SARS-CoV-2重组抗原和浓度为1.5mg/mL抗兔二抗溶液分别喷涂NC膜上绘制两条线平行线，SARS-CoV-2重组抗原溶液划线作为检测线(T线)，抗兔二抗溶液划线为质控线(C线)；
c)胶体金免疫层析试纸条组装：将样品垫、具有金标检测抗体的结合垫、具有T和C线的NC膜和吸水纸分别依次粘贴到塑料衬板上，相邻重叠部分的长度为2mm，切割成4mm宽的试纸条，密封干燥，于温度保存。
二、比色信号放大试剂的制备
3、铜生长液的配置：
a)铜生长A液：准确称取300mg氯化铜和150mg聚乙烯亚胺PEI分别溶解于10mL超纯水中，然后将二者混均制备A液；
b)铜生长B液：准确称取1.5g抗坏血酸钠和1mg柠檬酸三钠分别溶解于10和1mL超纯水中，然后将二者混均制备B液。
实施例2
应用实施例1所述的试剂盒执行本发明方法，用以验证该方法对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗体的检测效果。
参照图1中B所示流程，用移液器准确取120μL含不同浓度抗体的血清样品溶液加入到试纸条检测卡加样孔中，于室温反应10min；将上述反应后的试纸条依次使用磷酸盐缓冲液和超纯水洗涤后，浸泡于铜生长A液中室温反应5min；接着将试纸条转移至铜生长B液中继续反应2min，肉眼判读实验结果。
如图2所示，当使用由江西业力医疗有限公司购买商业化胶体金试纸条检测10份由南昌大学第一附属医院收集的病人临床血清样本时，我们发现所有试纸条均只有质控线(C线)出现明显的红色条带，而检测线(T线)未见红色条带。然而执行本发明方法后，其中7份检测样本(编号：27、30、31、32、40、41、43)T线出现肉眼可见的红色条带，表明待测血清中含有新型冠状病毒抗体。
进一步与临床核酸检测结果进行比对分析显示上述7份血清样本所对应患者的核酸检测呈现阳性结果，表明本发明所建立的方法具有更高的检测灵敏度，能够检测出传统胶体金免疫层析试纸条未能成功检测的“假阴性”样本，有效地避免了漏检。此外，3份临床核酸确证阴性的血清样本(编号：17、60、61)放大后其T线未见肉眼可见的条带，表明该放大方法具有良好的特异性。
结论：经实施例2所述的检测试验发现，本发明中所提到的新方法对临床新型冠状病毒感染者血清样本中抗体检测较传统胶体金免疫层析试纸条具有更高的检测灵敏度，更适合用于临床血清样本中痕量抗体的超灵敏检测，进一步证明本发明所提供的基于聚合物介导可控铜生长技术增敏传统胶体金免疫层析试纸条的新方法是可行的。
尽管本发明以新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗体作为模式分析物在双抗原夹心免疫层析平台上探讨聚合物介导可控铜生长技术增强免疫层析试纸条检测灵敏度的可行性，但是本发明所限定的内容并不局限于新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗体，其他所有使用本发明方法检测其他的目标分析物如生物大分子、核酸以及病原体等均在本专利的保护范围之内。此外，除了使用传统抗原抗体反应，本发明还可以采用近些年出现的新型生物识别反应如核酸杂交、核酸适配体、配受体等构建相应超灵敏的分析方法用于目标分析物的检测。因此，基于这些识别分子对本发明的拓展和延伸也在本发明所保护的范围之内。
Claims (4)
1.一种灵敏检测新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括胶体金免疫层析试纸条和铜生长液，胶体金免疫层析试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸依次固定于PVC塑料底板上，所述结合垫为喷涂有胶体金标记的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组抗原和胶体金标记的兔IgG抗体的玻璃纤维膜，所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，检测线上包被有SARS-CoV-2重组抗原，质控线上包被有抗兔二抗溶液；所述铜生长液包括铜生长A液和铜生长B液，铜生长A液为聚合物和二价铜离子预先形成铜离子配位生长液，铜生长B液为抗坏血酸钠和柠檬酸三钠混合溶液。
2.一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)胶体金标记的重组抗原的制备：取1mL粒径为30～40nm柠檬酸包被胶体金溶液，用浓度0.2M的碳酸钾溶液调节该溶液的pH值至7.0～8.0；向溶液加入5μL浓度为1～2mg/mLSARS-CoV-2重组抗原溶液，室温下振荡反应30min；然后再将100μL1～2mg/mL牛血清白蛋白溶液加至上述混合溶液中继续于室温下振荡反应30min；在4℃条件下，于10000rpm离心20min，弃上清，沉淀物复溶于0.01M pH7.4磷酸盐缓冲溶液(PBS)，得终产物胶体金标记的重组抗原；胶体金标记兔IgG抗体采用相同的方法完成，将SARS-CoV-2重组抗原溶液替换成兔IgG抗体溶液。
2)胶体金免疫层析试纸条的制备：a)结合垫的制备是将胶体金标记的重组抗原和胶体金标记的兔IgG抗体喷涂于玻璃纤维膜上；b)具有检测线和质控线的硝酸纤维膜的制备是将浓度为1～2mg/mL SARS-CoV-2重组抗原和浓度为1～2mg/mL抗兔二抗溶液分别喷涂硝酸纤维膜上绘制两条线平行线，SARS-CoV-2重组抗原溶液划线作为检测线(T线)，抗兔二抗溶液划线为质控线(C线)；c)胶体金免疫层析试纸条组装：将样品垫、具有金标检测抗体的结合垫、具有T和C线的硝酸纤维膜和吸水纸分别依次粘贴到塑料衬板上，相邻重叠部分的长度为2mm，切割成4mm宽的试纸条，密封干燥，于温度保存；
3)铜生长液的配置：a)铜生长A液：准确称取200～400mg氯化铜和100～200mg聚合物分别溶解于10mL超纯水中，然后将二者混均制备得铜生长A液；b)铜生长B液：准确称取1～2g抗坏血酸钠和1mg柠檬酸三钠分别溶解于10mL和1mL超纯水中，然后将二者混均制备得铜生长B液。
3.根据权利要求2所述的一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒，所述聚合物为聚乙烯亚胺PEI、聚丙烯酸PAA、聚乙烯吡咯烷酮PVP或聚赖氨酸PL。
4.一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)取100～120μL待测样品溶液加入到试纸条的检测卡加样孔中，于室温反应5～10min；
2)将上述反应后的试纸条依次使用磷酸盐缓冲液和超纯水洗涤后，浸泡于铜生长A液中室温反应5min；
3)接着将试纸条转移至铜生长B液中继续反应2min，使聚合物介导铜纳米壳层可控生长沉积至胶体金表面，显著增强胶体金的光学信号强度，肉眼观察实验结果。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010310112.2A CN111505281A (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010310112.2A CN111505281A (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111505281A true CN111505281A (zh) | 2020-08-07 |
Family
ID=71869605
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010310112.2A Pending CN111505281A (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111505281A (zh) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111650370A (zh) * | 2020-08-10 | 2020-09-11 | 苏州微湃医疗科技有限公司 | 新型冠状病毒SARS-CoV-2的检测方法及检测装置 |
| CN112098656A (zh) * | 2020-08-25 | 2020-12-18 | 广州优迪生物科技股份有限公司 | 用于检测人SARS-CoV-2的HRP免疫层析试剂条及其制备方法 |
| CN113189329A (zh) * | 2020-10-14 | 2021-07-30 | 北京化工大学 | 一种基于单原子纳米酶的多重免疫比色病毒检测方法 |
| CN113244916A (zh) * | 2021-05-13 | 2021-08-13 | 国家纳米科学中心 | 一种纳米酶及其应用 |
| CN113466449A (zh) * | 2021-05-14 | 2021-10-01 | 南昌大学 | 一种高灵敏多元现场检测的金磁纳米免疫分析试剂盒及其制作方法与检测方法 |
| CN114062673A (zh) * | 2021-11-23 | 2022-02-18 | 济南百博生物技术股份有限公司 | 一种高灵敏度新冠抗原检测试剂条及制备方法 |
| WO2022040523A1 (en) * | 2020-08-20 | 2022-02-24 | BiopolariX Scientific, LLC | Saliva testing kit using nano carbon immunochromatography |
| CN114636817A (zh) * | 2022-02-08 | 2022-06-17 | 广东环凯生物科技有限公司 | 一种基于聚丙烯胺盐酸盐介导的铜生长增强检测大肠杆菌o157:h7试剂盒及检测方法 |
| CN115575632A (zh) * | 2022-12-07 | 2023-01-06 | 广州国家实验室 | 一种检测试纸条及应用 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100230644A1 (en) * | 2007-11-05 | 2010-09-16 | Kazuomi Ryoshi | Copper fine particles, method for producing the same, and copper fine particle dispersion |
| JP2011209069A (ja) * | 2010-03-29 | 2011-10-20 | Institute Of National Colleges Of Technology Japan | 高感度免疫測定法 |
| CN103063844A (zh) * | 2012-10-30 | 2013-04-24 | 东南大学 | 一种检测信号催化放大的免疫层析试纸检测方法 |
| CN104181298A (zh) * | 2014-09-02 | 2014-12-03 | 秦志浩 | 一种人类副流感病毒IgM抗体检测试纸条及其制备方法 |
| CN107860920A (zh) * | 2017-11-01 | 2018-03-30 | 杭州微瑞科技有限公司 | 狂犬病毒抗体快速定量检测卡及使用方法 |
| CN208224282U (zh) * | 2017-11-01 | 2018-12-11 | 杭州微瑞科技有限公司 | 犬冠状病毒抗体定量快速检测*** |
| CN109342715A (zh) * | 2018-10-09 | 2019-02-15 | 浙江度安生物科技有限公司 | 一种增强胶体金层析试纸信号强度的增敏试剂和使用增敏试剂的增敏方法 |
| CN110770572A (zh) * | 2017-02-09 | 2020-02-07 | Essenlix公司 | 比色测定 |
-
2020
- 2020-04-17 CN CN202010310112.2A patent/CN111505281A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100230644A1 (en) * | 2007-11-05 | 2010-09-16 | Kazuomi Ryoshi | Copper fine particles, method for producing the same, and copper fine particle dispersion |
| JP2011209069A (ja) * | 2010-03-29 | 2011-10-20 | Institute Of National Colleges Of Technology Japan | 高感度免疫測定法 |
| CN103063844A (zh) * | 2012-10-30 | 2013-04-24 | 东南大学 | 一种检测信号催化放大的免疫层析试纸检测方法 |
| CN104181298A (zh) * | 2014-09-02 | 2014-12-03 | 秦志浩 | 一种人类副流感病毒IgM抗体检测试纸条及其制备方法 |
| CN110770572A (zh) * | 2017-02-09 | 2020-02-07 | Essenlix公司 | 比色测定 |
| CN107860920A (zh) * | 2017-11-01 | 2018-03-30 | 杭州微瑞科技有限公司 | 狂犬病毒抗体快速定量检测卡及使用方法 |
| CN208224282U (zh) * | 2017-11-01 | 2018-12-11 | 杭州微瑞科技有限公司 | 犬冠状病毒抗体定量快速检测*** |
| CN109342715A (zh) * | 2018-10-09 | 2019-02-15 | 浙江度安生物科技有限公司 | 一种增强胶体金层析试纸信号强度的增敏试剂和使用增敏试剂的增敏方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 同重湘 等: "基于金标免疫层析技术SARS-CoV-2抗体检测COVID-19的临床应用价值分析", 《兰州大学学报(医学版)》 * |
| 周耀锋: "两种提高传统免疫学分析方法检测灵敏度的新型信号放大策略研究", 《万方数据 硕士论文》 * |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111650370A (zh) * | 2020-08-10 | 2020-09-11 | 苏州微湃医疗科技有限公司 | 新型冠状病毒SARS-CoV-2的检测方法及检测装置 |
| WO2022040523A1 (en) * | 2020-08-20 | 2022-02-24 | BiopolariX Scientific, LLC | Saliva testing kit using nano carbon immunochromatography |
| CN112098656A (zh) * | 2020-08-25 | 2020-12-18 | 广州优迪生物科技股份有限公司 | 用于检测人SARS-CoV-2的HRP免疫层析试剂条及其制备方法 |
| CN113189329A (zh) * | 2020-10-14 | 2021-07-30 | 北京化工大学 | 一种基于单原子纳米酶的多重免疫比色病毒检测方法 |
| CN113244916A (zh) * | 2021-05-13 | 2021-08-13 | 国家纳米科学中心 | 一种纳米酶及其应用 |
| CN113466449A (zh) * | 2021-05-14 | 2021-10-01 | 南昌大学 | 一种高灵敏多元现场检测的金磁纳米免疫分析试剂盒及其制作方法与检测方法 |
| CN114062673A (zh) * | 2021-11-23 | 2022-02-18 | 济南百博生物技术股份有限公司 | 一种高灵敏度新冠抗原检测试剂条及制备方法 |
| CN114636817A (zh) * | 2022-02-08 | 2022-06-17 | 广东环凯生物科技有限公司 | 一种基于聚丙烯胺盐酸盐介导的铜生长增强检测大肠杆菌o157:h7试剂盒及检测方法 |
| CN114636817B (zh) * | 2022-02-08 | 2022-12-13 | 广东环凯生物科技有限公司 | 一种基于聚丙烯胺盐酸盐介导的铜生长增强检测大肠杆菌o157:h7试剂盒及检测方法 |
| CN115575632A (zh) * | 2022-12-07 | 2023-01-06 | 广州国家实验室 | 一种检测试纸条及应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111505281A (zh) | 一种灵敏检新型冠状病毒抗体的增敏型免疫层析试剂盒 | |
| CN108459159B (zh) | 超分子自组装介导网状纳米金增强免疫层析试纸条灵敏度的新方法 | |
| Zhou et al. | Emerging strategies to develop sensitive AuNP-based ICTS nanosensors | |
| Zhao et al. | based laser induced fluorescence immunodevice combining with CdTe embedded silica nanoparticles signal enhancement strategy | |
| Tian et al. | Copper deposition-induced efficient signal amplification for ultrasensitive lateral flow immunoassay | |
| CN110275028B (zh) | 一种胶体金标记的抗he4抗体试剂盒及其制备方法 | |
| Gan et al. | Fe3O4/Au magnetic nanoparticle amplification strategies for ultrasensitive electrochemical immunoassay of alfa-fetoprotein | |
| WO2022262135A1 (zh) | 一种检测小分子物质的通用型适配体胶体金侧向层析试纸 | |
| CN110779905B (zh) | 一种基于表面增强拉曼散射的金纳米标记的试纸条、制备方法及使用方法 | |
| Zuo et al. | Rapid detection of severe fever with thrombocytopenia syndrome virus via colloidal gold immunochromatography assay | |
| WO2015119386A1 (ko) | 효소 모방 무기 나노입자를 이용한 고감도 측면유동 면역 발색칩 및 이를 이용한 검출 방법 | |
| Ge et al. | Ultra-sensitive magnetic immunoassay of HE4 based on surface enhanced Raman spectroscopy | |
| CN113804887A (zh) | 一种具有多检测尺度的免疫检测试剂盒及其应用 | |
| CN111830255A (zh) | 一种诺氟沙星的检测方法 | |
| CN103063844A (zh) | 一种检测信号催化放大的免疫层析试纸检测方法 | |
| JP5104622B2 (ja) | 磁性粒子を用いた測定対象物質の濃度測定法 | |
| CN117310164B (zh) | 一种丙型肝炎病毒核心抗原检测试纸条及试剂盒 | |
| CN111505280A (zh) | 一种超灵敏检测单增李斯特菌的胶体金免疫层析试剂盒 | |
| Wang et al. | High-sensitivity biosensor based on SERS integrated with dendrimer-assisted boronic acid-functionalized magnetic nanoparticles for IL-6 detection in human serum | |
| CN111505279B (zh) | 一种银生长增强超灵敏检测轮状病毒的方法 | |
| Yang et al. | Au/Fe 3 O 4-based nanozymes with peroxidase-like activity integrated in immunochromatographic strips for highly-sensitive biomarker detection | |
| Cui et al. | Development of enzyme-free single-step immunoassays for glycocholic acid based on palladium nanoparticle-mediated signal generation | |
| CN113109558A (zh) | 一种定量检测cyfra21-1的磁微粒化学发光试剂盒及其制作方法 | |
| CN111693689B (zh) | 一种用于酶促化学发光检测的纳米酶及其用途 | |
| CN114544532A (zh) | 一种非洲猪瘟病毒荧光与比色多模态精准检测的试剂盒及其检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200807 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |