CN111423377B - 5-氨基-1h-吡唑衍生物、制备方法及医药用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种通式(Ⅰ)所示的5‑氨基‑1H‑吡唑衍生物或其药学上可接受的盐，及其制备方法和作为P2Y14受体抑制剂的应用。相对于现有技术，本发明公开了一类对P2Y14受体有抑制作用的5‑氨基‑1H‑吡唑衍生物及其可药用盐，该类化合物通过药理学实验证实，其对P2Y14受体具有显著的抑制作用，尤其可以作为治疗炎症疾病药物。

Description

5-氨基-1H-吡唑衍生物、制备方法及医药用途
技术领域
本发明属于药物化学领域，具体涉及一类新型5-氨基-1(H)-吡唑衍生物以及含有这类化合物的药物组合物、其制备方法以及作为治疗剂特别是P2Y14受体拮抗剂的医药用途。
背景技术
细胞信号转导是指细胞外因子通过与受体(膜受体或核受体)结合，并将获得的信息强化、分化、整合并传递给下游感应器，引发细胞内的一系列生物化学反应以及蛋白间相互作用，直至细胞生理反应所需基因开始表达、各种生物学效应形成的过程。G蛋白偶联受体是目前最大的膜表面受体家族，其参与了各种信号传递过程。
G蛋白偶联受体(GPCRs)根据下游偶联的G蛋白种类分为三类：Gs蛋白、Gi蛋白、Gq蛋白和G12/13蛋白四种，分别介导不同的信号传递。目前G蛋白偶联受体被发现仅存在于真核生物中。可以结合G蛋白偶联受体的配体包括神经递质、信息激素、多肽类及小分子化合物等。G蛋白偶联受体参与了许多疾病的发生发展，因此是重要的药物靶标。据统计报道目前市场上约30％的药物均是以G蛋白偶联受体作为靶点的。
Gq/Gi偶联受体有许多的亚家族，包括：(1)嘌呤受体家族(Purinergic Receptor)，成员有P1、P2；(2)腺苷受体家族(Adenosine Receptor)，成员有A1、A2A、A2B及A3。嘌呤受体家族在调节心肌氧消耗、冠状动脉血流、抗炎、血管反应性、细胞凋亡、细胞因子分泌等方面起着重要作用。
P2亚族根据组织分布和药理学特征又可分5个亚型：P2X、P2Y、P2Z、P2U及P2T。其中P2X、P2Z属于离子通道型受体；P2Y、P2U和P2T属于G蛋白偶联受体。
已经报道的G蛋白偶联受体的P2Y受体家族包含8种亚型(P2Y1、2、4、6、11、12、13、14)，广泛分布于各种细胞和组织中，而且各亚型之间同源性比较低，因此不同的亚型对配体具有很高的选择性。其中P2Y1、2、4、6受体结合Gq并激活PLC途径；P2Y12、13、14受体结合Gi抑制腺苷酸环化酶的活性；P2Y4受体偶联Gq/Gi两种G蛋白；P2Y11偶联Gq/Gs两种G蛋白。P2Y受体介导免疫调节、血小板聚集、平滑肌细胞增殖等一系列生物学效应。
P2Y14受体主要存在于心脏、胎盘、脂肪组织、胃肠道以及外周免疫细胞中，它能够提高小神经胶质细胞的超敏性，中性粒细胞的流动性；增加肥大细胞释放介质和肾闰细胞炎症，并在中枢神经***中能够抑制星形胶质细胞释放间质金属蛋白酶和肿瘤坏死因子。最近的研究表明，在P2Y14受体基因敲除的小鼠中，P2Y14受体的拮抗作用具有潜在的治疗糖尿病的作用。还有报道称UDP和UDP-glu作为配体激活P2Y14受体与炎症、哮喘等疾病有很大关系。
目前对P2Y14受体抑制剂的研究仅仅报道了3种结构类型的化合物(嘧啶并哌啶类、2-萘酸类和3-取代苯甲酸类)，但还都在临床前研究阶段。其中活性和选择性最高的为2-萘酸类，然而目前报道的2-萘酸类结构的抑制剂存在溶解性差、口服生物利用度低、合成纯化难度大等缺陷，给进一步讨论构效关系及生物学评价带来了较大的困难。因此寻找新结构类型的P2Y14受体拮抗剂，改善2-萘酸类抑制剂存在的成药性差等问题，成为发现活性强、选择性好的P2Y14受体抑制剂的新策略。
发明内容
本发明的目的是提供一类结构新颖的且具有P2Y14受体拮抗作用的5-氨基-吡唑衍生物及其可药用盐。
本发明的另一个目的是提供一种上述5-氨基-1H-吡唑衍生物的制备方法。
本发明还有一个目的是提供一种上述5-氨基-1H-吡唑衍生物在治疗炎症性疾病方面的应用。
一种通式(Ⅰ)所示的5-氨基-1H-吡唑衍生物，以及它们的对映异构体、非对映异构体、互变异构体、N-氧化物、溶剂合物、制剂及药学上可接受的盐：
Figure BDA0002487824760000021
其中R1选自CnH2n-COOR5、CnH2n-CONHR5、CnH2n-CN及四氮唑，其中n选自0、1及2；
R2选自H、F、CN、C1-3-烷基、CF3；
R3为CmH2mR6、COCmH2mR6、CONHCmH2mR6、SOCmH2mR6或SO2CmH2mR6，其中m选自0、1及2；
R4为C5-10元单环芳基或二环芳基、含有1～4个选自N、O或S杂原子的C5-14元单环杂芳基或二环杂芳基、C3-10元环烷基或杂环烷基、C1-10-烷基、C1-10-烷氧基，
其中，所述的芳基或杂芳基独立地任选地被1至5个选自下列的取代基取代：NO2、CN、COH、COCH3、OH、NH2、F、Cl、Br、I、C1-6-烷基、卤代-C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、C3-10元环烷基或杂环烷基、C0-6-亚烷基-C3-10-环烷基、C0-6-亚烷基-(5或6元杂芳基)、C0-6-亚烷基-NR7R8、C0-6-亚烷基-COR7、C0-6-亚烷基-CONR7R8、C0-6-亚烷基-SO2R7、C0-6-亚烷基-SO3R7、C0-6-亚烷基-SO2NR7R8，
其中，所述烷基、烷氧基、环烷基及杂环烷基未被取代或独立地被1至6个选自下列的取代基取代：F、OH、NH2、C1-3-烷基、C1-3-烷氧基、C0-4-亚烷基-NR7R8、C0-4-亚烷基-OR8、C0-4-亚烷基-CONR7R8、C0-4-亚烷基-COR8、C0-4-亚烷基-SO2R8、C0-4-亚烷基-SO2NR7R8、C0-4-亚烷基-SO3R8，
或其中，两个毗邻的取代基形成含有碳原子及任选地含有1-3个选自N、O或S的杂原子的3-8元饱和或不饱和环；
R5为H、C1-6烷基，其中，烷基未被取代或被1至6个选自下列的取代基取代：F、OH、O-C1-3-烷基；
R6为C5-10元单环芳基或二环芳基、含有1～4个选自N、O或S杂原子的C5-14元单环杂芳基或二环杂芳基、C3-10元环烷基或杂环烷基、C1-10-烷基、C1-10-烷氧基；
其中所述的芳基或杂芳基独立地任选地被1至5个选自下列的取代基取代：F、Cl、Br、I、C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、NO2、CN、COH、COCH3、OH、NH2；所述烷基、烷氧基、环烷基及杂环烷基未被取代或独立地被1-6个选自下列的取代基取代：F、OH、C1-3-烷基、C1-3-烷氧基；
R7为H；
R8选自H、C1-10-烷基、C3-10-环烷基、C3-10-杂环烷基、C1-10-亚烷基-C3-10-环烷基，C1-10-亚烷基-C3-10-杂环烷基、C1-10-亚烷基-(5元杂芳基)，其中，烷基、亚烷基、环烷基、杂环烷基及杂芳基未被取代或独立地被1-7个选自下列的取代基取代：OR9、C1-6-烷基、CO2R9、CONR9R10、NR9COR9、C3-10-杂环烷基；
或R7和R8与他们所连接的氮共同形成含有碳原子及任选地含有1或2个选自N、O或S的杂原子的3-8元环，其中所述环未被取代或被1-4个选自下列的取代基取代：C0-6-亚烷基-CO2R9、C1-6-烷基、C3-8-杂环烷基；
R9选自H、C1-6-烷基，其中，烷基未被取代或被1-6个选自下列的取代基取代：F、O-C1-3-烷基；
R10为H。
作为优选方案，所述的式Ⅰ化合物中：
R1选自CH2COOH、COOH或CONH2；
R2选自H或F；
R3选自CmH2mR6、COCmH2mR6、SOCmH2mR6或SO2CmH2mR6，其中，m选自0；
R6为C5-10元单环芳基、含有1～4个选自N、O或S杂原子的C5-14元单环杂芳基、C3-10元环烷基或杂环烷基；
其中所述的芳基或杂芳基独立地任选地被1至5个选自下列的取代基取代：F、Cl、Br、I、C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、NO2、CN、COH、COCH3、OH、NH2；所述环烷基及杂环烷基未被取代或独立地被1-6个选自下列的取代基取代：F、OH、C1-3-烷基、C1-3-烷氧基。
R4选自：
Figure BDA0002487824760000041
其中，Ring为C5-7元单环芳基、含有1～4个选自N、O或S杂原子的C5-7元单环杂芳基，
其中，R11选自如下取代基：NO2、CN、OH、NH2、F、Cl、Br、I、C1-6-烷基、卤代-C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、卤代-C1-6-烷氧基、C0-6-亚烷基-NR7R8、C0-6-亚烷基-COR8、C0-6-亚烷基-CO2R8、C0-6-亚烷基-CONR7R8、C0-6-亚烷基-SO3R8、C0-6-亚烷基-SO2NR7R8，或其中，两个毗邻的取代基形成含有碳原子及任选地含有1-3个选自N、O或S的杂原子的3-8元饱和或不饱和环；
其中，R7和R8同上所述。
进一步优选，R4选自：
Figure BDA0002487824760000042
Ring为苯基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑、咪唑基、吡唑基；
R11选自NO2、CN、OH、NH2、F、Cl、Br、I、C1-6-烷基、卤代-C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、卤代-C1-6-烷氧基、COR8、CONR7R8、CO2R8、SO2NR7R8、SO3R8；
R7为H；
R8选自H、C1-6-烷基、C3-6-环烷基、CH2CONH2、CH2CONMe2、CH2CH2OH、CH2CH2Me、(CH2)3OH、(CH3)3OMe、(CH2)4OH、(CH2)4OMe、(CH2)5OH、(CH2)2COOH、(CH2)3COOH、(CH2)4COOH、(CH2)5COOH、(CH2)2CH(CH3)COOH、C(CH2OH)3、C(CH2OH)2CH3、CH2CH(CH3)OH、(CH2)2CF3、(CH2)3CF3、(CH2)4CF3
Figure BDA0002487824760000051
最优选的，R4选自：
Figure BDA0002487824760000052
Ring为苯基、嘧啶基、噻吩基、呋喃基；
R11选自NO2、CN、F、Cl、C1-6-烷基、卤代-C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、卤代-C1-6-烷氧基、CONR7R8、CO2R8、SO2NR7R8、SO3R8；
R7为H；
R8选自H、C1-6-烷基、C3-6-环烷基、CH2CONH2、CH2CONMe2、CH2CH2OH、CH2CH2OMe、(CH2)3OH、(CH3)3OMe、(CH2)4OH、(CH2)4OMe、(CH2)2COOH、(CH2)3COOH、(CH2)4COOH、(CH2)2CH(CH3)COOH、C(CH2OH)3、C(CH2OH)2CH3、CH2CH(CH3)OH、
Figure BDA0002487824760000053
作为本发明最优选的实施方案，所述的式Ⅰ化合物选自如下化合物：
Figure BDA0002487824760000061
本领域普通技术人员应了解，当备选取代基列表包括因其化合价要求或其他原因无法用于取代特定基团成员时，意在按本领域普通技术人员的知识来参阅该列表以仅纳入那些适于取代该特定集团的列表成员。这同样适用于在一个基团上的可能的取代基的数目。
本发明中所用化合物可呈药学上可接受的盐或溶剂合物形式。术语“药学上可接受的盐”指由药学上可接受的无毒碱或酸(包括无机碱或酸及有机碱或酸)制备的盐。倘若本发明化合物含有一或多个酸性或碱性基团，则本发明亦包含其相应药学上或毒理学上可接受的盐，具体而言其药学上可利用的盐。因此，根据本发明，含有酸性基团的本发明化合物可按例如碱金属盐、碱土金属盐或铵盐形式使用。这些盐的更具体的实例包括钠盐、钾盐、钙盐、镁盐或与氨或有机胺(例如，乙胺、乙醇胺、三乙胺或氨基酸)形成的盐。根据本发明，含有一或多个碱性基团(即可质子化得基团)的本发明化合物可以按它们的无机酸或有机酸的加成盐形式使用。适合的酸的实例包括盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、萘二磺酸、草酸、乙酸、酒石酸、乳酸、水杨酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、新戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富马酸、马来酸、苹果酸、氨基磺酸、苯基丙酸、葡糖酸、抗坏血酸、异烟酸、柠檬酸、己二酸及本领域普通技术人员已知的酸。若本发明化合物在分子中同时含有酸性或碱性基团，则本发明除所提及的盐形式外亦包括内盐或甜菜碱(两性离子)。各种盐可通过本领域普通技术人员已知的通常方法获得，例如，通过在溶剂或分散剂中使这些物质与有机或无机酸或碱反应或通过与其他盐进行阴离子交换或阳离子交换。本发明亦包括所有因低生理相容性无法直接适用于药物但可例如作为中间体用于化学反应或用于制备药学上可接受的盐的本发明化合物的盐。
本发明的另外一个目的是提供了如式Ⅰ所示通式化合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)通式化合物1经硝基还原制得通式化合物2；
(2)通式化合物2与不同的羧酸或磺酸衍生物缩合反应，或不同的烃基衍生物取代反应制得通式化合物3；
(3)通式化合物3与不同的烃基衍生物经取代反应、脱保护基反应制得通式化合物4，即为通式(Ⅰ)所示的化合物；
Figure BDA0002487824760000071
R1、R2、R3及R4同权利要求1所述。
本发明还提供了一种药物组合物，其中含有所述的通式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐及药学上可接受的辅料。
本发明最后提供了所述的通式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、或所述的药物组合物在制备P2Y14受体抑制剂药物中的用途。
以及所述的通式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、或所述的药物组合物在制备治疗P2Y14受体相关的炎症疾病药物中的用途。
本发明所述化合物在作为P2Y14受体抑制剂时，可以单独使用，也可以与其他药物配合同时使用，或者与其他药物一起制成复方制剂使用，都可以达到抑制P2Y14受体的目的。
所述药学上可接受的辅料，是指制备不同剂型时加入所需的各种常规辅料，例如稀释剂、黏合剂、崩解剂、助流剂、润滑剂、矫味剂、包合材料、吸附材料等以常规的制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂，例如可以是颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、丸剂、口服液、汤剂、滴丸剂等。
有益效果：相对于现有技术，本发明公开了一类对P2Y14受体有抑制作用的5-氨基-1H-吡唑衍生物及其可药用盐，该类化合物通过药理学实验证实，其对P2Y14受体具有显著的抑制作用，尤其可以作为治疗炎症疾病药物。
附图说明
图1是THP-1细胞P2Y14受体蛋白相对表达，其中，数据是平均值±标准差(n＝4)，用one-way anova进行方差分析(###代表与正常组比较P＜0.001，*代表与模型对照组比较P＜0.05，**代表与模型对照组比较P＜0.01，***代表与模型对照组比较P＜0.001)。
图2是THP-1细胞培养基上清液中IL-1β水平，其中，数据是平均值±标准差，用one-way anova进行方差分析(###代表与正常组比较P＜0.001，*代表与模型对照组比较P＜0.05，***代表与模型对照组比较P＜0.001)。
图3是4只大鼠滑膜组织P2Y14受体蛋白相对表达，其中，数据平均值±标准差，用one-way anova进行方差分析(###代表与正常组比较P＜0.001，*代表与模型对照组比较P＜0.05，***代表与模型对照组比较P＜0.001)。
图4是10只大鼠血清IL-1β水平，其中，数据平均值±标准差，用one-way anova进行方差分析(###代表与正常组比较P＜0.001，*代表与模型对照组比较P＜0.05，***代表与模型对照组比较P＜0.001)。
具体实施方式
下面通过实施例具体说明本发明的内容。在本发明中，以下所述的实施例是为了更好的阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。
实施例1和实施例2
步骤一：1-(4-氟苄基)-5-硝基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(1a)
Figure BDA0002487824760000081
将5-硝基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(1.0g，5.40mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，加入K2CO3(1.49g，10.80mmol)，室温下搅拌混合物20min，然后添加4-氟溴苄(1.23g，6.48mmol)，室温搅拌6h。反应完全后，加水，乙酸乙酯萃取(3次)。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)，得到淡黄色固体1.30g，产率为82％。
步骤二：5-氨基-1-(4-氟苄基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(1b)
将1-(4-氟苄基)-5-硝基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(2.0g，6.82mmol)溶于乙醇/水(10/1)(30mL)混合溶剂中，加入NH4Cl(3.65g，68.20mmol)，0℃条件下缓慢加入铁粉(3.81g，68.20mmol)，加入完毕后，移至室温搅拌反应7h。反应完全后，加入NaHCO3饱和溶液调至pH＝7，二氯甲烷萃取(3次)。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1:1)，得到白色固体1.52g，产率为84％。
步骤三：1-(4-氟苄基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(1)
将5-氨基-1-(4-氟苄基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(150mg，0.569mmol)溶于二氯甲烷(3mL)溶剂中，依次加入4-甲基苯甲酸(118.31mg，0.869mmol)，4-二甲胺基吡啶(DMAP)(141.64mg，1.16mmol)，卡特缩合剂(BOP)(384.22mg，0.869mmol)，加入完毕后，室温搅拌反应10h。反应完全后，过滤除去不溶物，滤液加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)，得到白色固体190mg，产率为72％。
步骤四：1-(4-氟苄基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸(2)
将1-(4-氟苄基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(190mg,0.498mmol)溶于甲醇(1mL)溶剂中，加入4mol/L的LiOH溶液(1mL)，加毕，室温搅拌反应5h。反应完全后，加入1N的HCl调至溶液pH＝2，继续搅拌30min，过滤，得到白色固体120mg，产率为69％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.86–7.78(m,2H),7.34(dddd,J＝7.2,6.2,2.1,1.0Hz,4H),7.22–7.12(m,2H),6.52(s,1H),5.60(t,J＝1.0Hz,2H),2.39(d,J＝0.8Hz,3H)。
实施例3
如实施例1及实施例2方法类似地制备下列化合物：
Figure BDA0002487824760000091
Figure BDA0002487824760000101
Figure BDA0002487824760000111
实施例4和实施例5
步骤一：5-(环丙烷甲酰胺基)-1-(4-氟苄基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(4)
Figure BDA0002487824760000112
将5-氨基-1-(4-氟苄基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(1b)(150mg，0.569mmol)溶于二氯甲烷(2mL)溶剂中，加入三乙胺(115mg，1.138mmol)，0℃下缓慢加入环丙烷甲酰氯(89.19mg，0.854mmol)，加入完毕后，移至室温反应3h。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得到白色固体130mg，产率为69％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.76(s,1H),4.20(q,J＝7.0Hz,2H),1.41(p,J＝6.4Hz,1H),1.28(t,J＝7.0Hz,3H),1.07–0.88(m,4H)。
步骤二：5-(环丙烷甲酰胺基)-1-(4-氟苄基)-1H-吡唑-3-羧酸(5)
将5-(环丙烷甲酰胺基)-1-(4-氟苄基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(130mg,0.393mmol)溶于甲醇(1mL)溶剂中，加入4mol/L的LiOH溶液(1mL)，加毕，室温搅拌反应5h。反应完全后，加入1N的HCl调至溶液pH＝2，继续搅拌30min，过滤，得到白色固体95mg，产率为80％。
实施例6
如实施例4及实施例5方法类似地制备下列化合物：
Figure BDA0002487824760000121
Figure BDA0002487824760000131
实施例7和实施例8
Figure BDA0002487824760000132
步骤一：1-(4-氟苄基)-5-((4-甲基苯基)磺酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(7)
将5-氨基-1-(4-氟苄基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(1b)(150mg，0.569mmol)溶于四氢呋喃(3mL)溶剂中，加入三乙胺(115mg，11.138mmol)和对甲基苯磺酰氯(108mg，0.569mmol)，加入完毕，室温搅拌过夜。反应完全后，减压除去溶剂，粗产物加入水，用二氯甲烷萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得到白色固体180mg，产率为71％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.34(ddt,J＝8.5,1.6,0.8Hz,2H),7.14–7.06(m,2H),6.72(s,1H),4.20(q,J＝7.0Hz,2H),2.37(d,J＝0.6Hz,3H),1.28(t,J＝7.0Hz,3H)。
步骤二：1-(4-氟苄基)-5-((4-甲基苯基)磺酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸(8)
将1-(4-氟苄基)-5-((4-甲基苯基)磺酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(150mg,0.336mmol)溶于甲醇(1mL)溶剂中，加入4mol/L的LiOH溶液(1mL)，加毕，室温搅拌反应5h。反应完全后，加入1N的HCl调至溶液pH＝2，继续搅拌30min，过滤，得到白色固体115mg，产率为82％。
实施例9
如实施例7及实施例8中方法类似地制备下列化合物：
Figure BDA0002487824760000133
Figure BDA0002487824760000141
实施例10和实施例11
步骤一：1-(4-氟苄基)-5-((4-甲基苄基)氨基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(10)
Figure BDA0002487824760000142
将1-(4-氟苄基)-5-氨基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(150mg，0.569mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，加入K2CO3(121mg，0.854mmol)，室温下搅拌混合物20min，然后添加4-甲基溴苄(126mg，0.682mmol)，室温搅拌6h。反应完全后，加水，乙酸乙酯萃取(3次)。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)，得到淡黄色固体175mg，产率为84％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.92(t,J＝5.5Hz,1H),7.24–7.10(m,4H),5.75(s,1H),4.68(dt,J＝5.5,0.9Hz,2H),4.20(q,J＝7.0Hz,2H),2.25(d,J＝0.7Hz,3H),1.28(t,J＝7.0Hz,3H)。
步骤二：1-(4-氟苄基)-5-((4-甲基苄基)氨基)-1H-吡唑-3-羧酸(11)
将1-(4-氟苄基)-5-((4-甲基苄基)氨基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(150mg,0.409mmol)溶于甲醇(1mL)溶剂中，加入4mol/L的LiOH溶液(1mL)，加毕，室温搅拌反应5h。反应完全后，加入1N的HCl调至溶液pH＝2，继续搅拌30min，过滤，得到白色固体120mg，产率为86％。
实施例12
如实施例10及实施例11中方法类似地制备下列化合物：
Figure BDA0002487824760000143
Figure BDA0002487824760000151
实施例13和实施例14
Figure BDA0002487824760000152
步骤一：5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(13a)
将5-氨基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(200mg，1.29mmol)溶于二氯甲烷(5mL)溶剂中，依次加入4-甲基苯甲酸(263mg，1.935mmol)，4-二甲胺基吡啶(DMAP)(315mg，2.58mmol)，卡特缩合剂(BOP)(855mg，1.935mmol)，加入完毕后，室温搅拌反应10h。反应完全后，过滤除去不溶物，滤液加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)，得到白色固体150mg，产率为43％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.86–7.78(m,2H),7.37–7.25(m,2H),4.20(q,J＝7.0Hz,2H),2.39(d,J＝0.6Hz,3H),1.28(t,J＝7.0Hz,3H)。
步骤二：5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯 (13)
将5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(150mg，0.549mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2.5mL)溶剂中，0℃条件下缓慢加入NaH(60％油分散体，24mg，0.604mmol)，加入完毕，0℃搅拌20min，然后添加4-氟溴苄(155mg，0.823mmol)，加毕，移至室温反应过夜。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得到白色固体165mg，产率为79％。
步骤三：5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-吡唑-3-羧酸(14)
将5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(150mg,0.394mmol)溶于甲醇(1mL)溶剂中，加入4mol/L的LiOH溶液(1mL)，加毕，室温搅拌反应5h。反应完全后，加入1N的HCl调至溶液pH＝2，继续搅拌30min，过滤，得到白色固体110mg，产率为80％。
实施例15
如实施例13及实施例14中方法类似地制备下列化合物：
Figure BDA0002487824760000161
Figure BDA0002487824760000171
实施例16、实施例17和实施例18
Figure BDA0002487824760000172
步骤一：4-((3-(乙氧基羰基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯甲 酸叔丁酯(16)
将5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(150mg，0.549mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2.5mL)溶剂中，0℃条件下缓慢加入NaH(60％油分散体，24mg，0.604mmol)，加入完毕，0℃搅拌20min，然后添加4-溴甲基苯甲酸叔丁酯(223mg，0.823mmol)，加毕，移至室温反应过夜。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得到白色固体215mg，产率为81％。
步骤二：4-((3-(乙氧基羰基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯甲 酸(17)
将4-((3-(乙氧基羰基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯甲酸叔丁酯(215mg，0.46mmol)溶于三氟乙酸(4mL)溶剂中，室温搅拌反应3h。反应完全后，减压浓缩除去TFA，得到浅黄色油状物。加入水，用二氯甲烷萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。减压旋干溶剂，得到淡黄色固体168mg，产率为89％。
步骤三：4-((3-羧基-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯甲酸(18)
将4-((3-(乙氧基羰基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯甲酸(200mg，0.385mmol)溶于甲醇(1mL)溶剂中，加入4mol/L的LiOH溶液(1mL)，加毕，室温搅拌反应5h。反应完全后，加入1N的HCl调至溶液pH＝2，继续搅拌30min，过滤，得到白色固体147mg，产率为78％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.17–8.09(m,2H),7.86–7.78(m,2H),7.64(dt,J＝8.3,1.1Hz,2H),7.37–7.29(m,2H),6.83(s,1H),5.54(t,J＝1.0Hz,2H),2.39(d,J＝0.8Hz,3H)。
实施例19
如实施例17及任选地实施例18中那样类似地制备下列实施例：
Figure BDA0002487824760000181
Figure BDA0002487824760000191
实施例20和实施例21
Figure BDA0002487824760000192
步骤一：5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1-(4-(3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酰基)苄基)- 1H-吡唑-3-羧酸乙酯(20)
将4-((3-(乙氧基羰基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)甲基)苯甲酸(200mg，0.385mmol)溶于无水二氯甲烷(5mL)溶剂中，0℃条件下依次加入1-羟基苯并***水合物(71mg，0.462mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(89mg，0.462mmol)。)，氮气保护下反应10min。然后将(四氢-2H-吡喃-4-基)甲胺(44mg，0.385mmol)和二乙基异丙基胺(1.21mmol)溶于无水二氯甲烷(2.5mL)，添加到反应混合物中。移至室温，并在氮气保护下搅拌反应4h。反应完全后，反应混合物加入二氯甲烷稀释，依次用1N HCl，饱和NaHCO3水溶液和饱和食盐水溶液洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝8:1)，得到白色固体163mg，产率为68％。
步骤二：5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1-(4-(3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酰基)苄基)- 1H-吡唑-3-羧酸(21)
将5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1-(4-(3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酰基)苄基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(163mg，0.262mmol)溶于甲醇(1mL)溶剂中，加入4mol/L的LiOH溶液(1mL)，加毕，室温搅拌反应5h。反应完全后，加入1N的HCl调至溶液pH＝2，继续搅拌30min，过滤，得到白色固体122mg，产率为81％。
实施例22
如实施例20及实施例21中方法类似地制备下列化合物：
Figure BDA0002487824760000201
实施例23和实施例24
Figure BDA0002487824760000202
步骤一：5-氨基-1-(噻吩-2-基甲基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(23a)
0℃条件下，将硫酸缓慢加入噻吩-2-甲基肼盐酸盐(1.0g，6.58mmol)在水中的溶液。室温下，将该溶液滴加到3-氰基-2-氧代-丙酸乙酯钠盐(1.08g，6.58mmol)、乙腈和乙醇钠在二氯甲烷(30mL)中的混悬液中。两相混合物搅拌12h后，完成向相应腙的转化。分离各相并用二氯甲烷萃取(3次)。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。蒸发浓缩，将残余物溶于乙醇(25mL)，回流16h，环化完成，减压除去溶剂。粗产物硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1:2)，得到白色固体0.87g，产率为53％。
步骤二：5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1-(噻吩-2-基甲基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(23)
将5-氨基-1-(噻吩-2-基甲基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(200mg，0.796mmol)溶于二氯甲烷(3mL)溶剂中，依次加入4-甲基苯甲酸(162mg，1.19mmol)，4-二甲胺基吡啶(DMAP)(194mg，1.59mmol)，卡特缩合剂(BOP)(529mg，1.19mmol)，加入完毕后，室温搅拌反应10h。反应完全后，过滤除去不溶物，滤液加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)，得到白色固体200mg，产率为66％。
步骤三：5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1-(噻吩-2-基甲基)-1H-吡唑-3-羧酸(24)
将5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1-(噻吩-2-基甲基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(200mg，0.518mmol)溶于甲醇(1mL)溶剂中，加入4mol/L的LiOH溶液(1mL)，加毕，室温搅拌反应5h。反应完全后，加入1N的HCl调至溶液pH＝2，继续搅拌30min，过滤，得到白色固体170mg，产率为84％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.86–7.78(m,2H),7.33(dq,J＝8.5,0.7Hz,2H),7.25(dd,J＝4.2,3.1Hz,1H),7.01–6.91(m,2H),6.52(s,1H),5.81(s,2H),2.39(t,J＝0.7Hz,3H)。
实施例25
如实施例23及实施例24中方法类似地制备下列化合物：
Figure BDA0002487824760000211
Figure BDA0002487824760000221
实施例26和实施例27
Figure BDA0002487824760000222
步骤一：5-氨基-4-氟-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(26a)
将5-氨基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(1.0g，5.91mmol)溶于乙腈(20mL)中，向该溶液中添加氟化试剂(Selectfluor)(2.8g，7.97mmol)，并在室温下搅拌过夜。过滤产生的固体，浓缩滤液，硅胶柱层析纯化(PE/EA＝1:1)，得到黄色固体化合物430mg，产率42％。
步骤二：4-氟-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(26b)
将5-氨基-4-氟-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(500mg，2.89mmol)溶于二氯甲烷(3mL)溶剂中，依次加入4-甲基苯甲酸(590mg，4.33mmol)，4-二甲胺基吡啶(DMAP)(706mg，5.78mmol)，卡特缩合剂(BOP)(191mg，4.33mmol)，加入完毕后，室温搅拌反应10h。反应完全后，过滤除去不溶物，滤液加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)，得到白色固体460mg，产率为51％。
步骤三：4-氟-1-(4-氟苄基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(26)
将4-氟-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(200mg，0.651mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶剂中，0℃条件下缓慢加入NaH(60％油分散体，29mg，0.716mmol)，加入完毕，0℃搅拌20min，然后添加对氟溴苄(184mg，0.976mmol)，加毕，移至室温反应过夜。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得到白色固体195mg，产率为75％。
步骤四：4-氟-1-(4-氟苄基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸(27)
将4-氟-1-(4-氟苄基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(150mg，0.376mmol)溶于甲醇(1mL)溶剂中，加入4mol/L的LiOH溶液(1mL)，加毕，室温搅拌反应5h。反应完全后，加入1N的HCl调至溶液pH＝2，继续搅拌30min，过滤，得到白色固体115mg，产率为83％。
实施例28
如实施例26及实施例27中方法类似地制备下列化合物：
Figure BDA0002487824760000231
实施例29和实施例30
Figure BDA0002487824760000232
步骤一：2-(5-氨基-1H-吡唑-3-基)乙酸乙酯(29a)
将2-(5-氨基-1H-吡唑-3-基)乙酸(5g，35.46mmol)溶于乙醇(25mL)溶剂中，冷却至0℃后，在0℃条件下，逐滴加入SOCl2(15mL)，滴加完毕后移至室温搅拌反应2h。反应完全后缓慢加入NaHCO3饱和溶液(100mL)，继续搅拌30min至无气泡产生，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得到白色固体约4.8g，产率为80％。
步骤二：2-(5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)乙酸乙酯(29b)
将2-(5-氨基-1H-吡唑-3-基)乙酸乙酯(500mg，2.95mmol)溶于二氯甲烷(8mL)溶剂中，依次加入4-甲基苯甲酸(604mg，4.44mmol)，4-二甲胺基吡啶(DMAP)(722mg，5.91mmol)，卡特缩合剂(BOP)(1.96g，4.44mmol)，加入完毕后，室温搅拌反应10h。反应完全后，过滤除去不溶物，滤液加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)，得到白色固体0.55g，产率为65％。
步骤三：2-(1-(4-氟苄基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)乙酸乙酯(29)
将2-(5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)乙酸乙酯(200mg，0.696mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶剂中，0℃条件下缓慢加入NaH(60％油分散体，30mg，0.766mmol)，加入完毕，0℃搅拌20min，然后添加对氟溴苄(197mg，1.04mmol)，加毕，移至室温反应过夜。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得到白色固体230mg，产率为83％。
步骤四：2-(1-(4-氟苄基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)乙酸(30)
将1-(4-氟苄基)-5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(150mg，0.380mmol)溶于甲醇(1mL)溶剂中，加入4mol/L的LiOH溶液(1mL)，加毕，室温搅拌反应5h。反应完全后，加入1N的HCl调至溶液pH＝2，继续搅拌30min，过滤，得到白色固体120mg，产率为86％。
实施例31
如实施例29及实施例30中方法类似地制备下列化合物：
Figure BDA0002487824760000241
Figure BDA0002487824760000251
实施例32
Figure BDA0002487824760000252
步骤一：5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酰胺(32a)
将对甲基苯甲酸(1.3g，9.52mmol)溶于乙酸乙酯(25mL)溶剂中，加入N,N’-羰基二咪唑(1.5g，9.52mmol)，室温搅拌1h，然后加入5-氨基-1H-吡唑-3-羧酰胺(1.0g，7.93mmol)，移至80℃油浴加热搅拌反应过夜，反应完全后析出大量白色固体，过滤，滤饼用***洗涤，干燥，得到白色固体2.1g，产率为92％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.96(s,2H),7.86–7.78(m,2H),7.33(dq,J＝8.5,0.7Hz,2H),6.60(s,1H),2.39(t,J＝0.7Hz,3H).
步骤二：5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-羧酰胺(32)
将2-(5-(4-甲基苯甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)乙酸乙酯(200mg，0.819mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶剂中，0℃条件下缓慢加入NaH(60％油分散体，36mg，0.90mmol)，加入完毕，0℃搅拌20min，然后添加对氟溴苄(232mg，1.23mmol)，加毕，移至室温反应过夜。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取(3次)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥。硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)，得到白色固体187mg，产率为65％。
实施例33
如实施例32方法类似地制备下列化合物：
Figure BDA0002487824760000261
式Ⅰ的部分化合物的药理学实验及结果如下：
实验方法：
稳转P2Y14受体的HEK293细胞株培养于DMEM培养基中(含10％胎牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素)，实验前接种至培养板，改用无血清培养基，接种密度为1×105个细胞/孔，细胞于37℃、95％O2、5％CO2湿度条件下培养。加入IBMX抑制PDEs活性，以保证cAMP在一个较高的水平上。采用AC激动剂Forskolin(30μM)刺激细胞cAMP的产生，预先加入不同浓度的受试化合物(0.01、0.1、1、10、100nm)，以PPTN作为阳性对照。随后加入1μM的P2Y14受体激动剂UDPG，4h后cAMP GloTM Assay试剂盒(PROMEGA Co.Ltd，美国)检测细胞内cAMP的含量。根据对cAMP含量的抑制率计算IC50值。
受试化合物抑制尿酸盐晶体诱导的巨噬细胞炎性反应的药理研究实验方法
人THP-1细胞培养于RPMI-1640培养基中(含10％胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素)，实验前接种至培养板，接种密度为1×105个细胞/孔，细胞于37℃、95％O2、5％CO2湿度条件下培养。实验前每孔加入100ng/ml PMA孵育24h诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞。预先向培养基中加入受试化合物(2.5、5、10μM)、PPTN(5μM)和***(5μM)进行干预，1h后向细胞中加入终浓度为500μg/ml的尿酸盐晶体(MSU)，6h后测定如下指标：
Western Blot法检测细胞中P2Y14受体的蛋白表达；
按ELISA试剂盒(深圳欣博盛)方法检测细胞培养基上清液中IL-1β的水平。
受试化合物在整体动物水平对急性痛风性关节炎的治疗作用的药理实验研究方法
雄性清洁级SD大鼠，体重200±20g，自由水食，每天12h照明，环境温度为25±2℃。动物分为若干组：正常对照组、模型对照组、给药组(受试化合物、PPTN和***)，采用一次性关节腔注射MSU诱导急性痛风性关节炎模型，而正常对照组和正常给药各组采用等量的生理盐水注射入关节腔。各给药组通过关节腔注射给予受试化合物(5、10、20mg/kg)、PPTN(10mg/kg)和***(10mg/kg)。采用缚线法检测大鼠关节周径，测定时间点选择0h、2h、4h、8h、12h、24h，24h后，24h后大鼠眼球后静脉丛取血，在10000×g离心条件下离心5min，取血清，置于4℃保存备用。然后断颈处死动物，在冰台上快速分取关节滑膜组织，检测如下指标：
Western Blot法检测滑膜组织中P2Y14受体的蛋白表达。
按ELISA试剂盒(深圳欣博盛)方法检测血清、滑膜组织中IL-1β的水平。
实验结果：
表1部分化合物在细胞水平对P2Y14R的IC50值：
Figure BDA0002487824760000271
表2：组合物对急性痛风性关节炎大鼠关节周径的影响(cm)
Figure BDA0002487824760000272
Figure BDA0002487824760000281
表2中数据是10只大鼠不同时间点关节周径的平均值±标准差，用one-way anova进行方差分析(##代表与正常组比较P＜0.01，###代表与正常组比较P＜0.001，*代表与模型对照组比较P＜0.05，**代表与模型对照组比较P＜0.01，***代表与模型对照组比较P＜0.001)。由表2可知：MSU造成大鼠关节肿胀，在4h、8h、12h、24h呈现出显著性差异，提示造模成功；不同剂量受试组合物能够不同程度的缓解MSU造成的大鼠关节周径增大，与模型对照组比较均体现出显著性差异；PPTN和***也体现出了预期的效果，表明实验结果真实可信。
由图1可知：MSU造成THP-1细胞P2Y14受体蛋白表达显著升高，提示造模成功；不同剂量受试组合物能够不同程度的下调P2Y14受体蛋白表达，与模型对照组比较均体现出显著性差异；PPTN也体现出了预期的效果，表明实验结果真实可信。***并未显示出对P2Y14受体表达的调控作用。
由图2可知：MSU造成THP-1细胞培养基上清液中IL-1β水平显著升高，提示造模成功；不同剂量受试组合物能够不同程度的下调细胞培养基上清液中IL-1β水平，与模型对照组比较均体现出显著性差异；PPTN和***也体现出了预期的效果，表明实验结果真实可信。
由图3可知：MSU造成大鼠滑膜P2Y14受体蛋白表达显著升高，提示造模成功；不同剂量受试组合物能够不同程度的下调滑膜P2Y14受体蛋白表达，与模型对照组比较均体现出显著性差异；PPTN也体现出了预期的效果，表明实验结果真实可信。***并未显示出对P2Y14受体表达的调控作用。
由图4可知：MSU造成大鼠血清IL-1β水平显著升高，提示造模成功；不同剂量受试组合物能够不同程度的下调血清IL-1β水平，与模型对照组比较均体现出显著性差异；PPTN和***也体现出了预期的效果，表明实验结果真实可信。

Claims (5)

1.一种通式(Ⅰ)所示的化合物，或其药学上可接受的盐：
Figure FDA0002994274300000011
所述的式Ⅰ化合物选自如下化合物：
Figure FDA0002994274300000012
2.权利要求1所述的式Ⅰ化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)通式化合物1经硝基还原制得通式化合物2；
(2)通式化合物2与不同的羧酸或磺酸衍生物缩合反应，或不同的烃基衍生物取代反应制得通式化合物3；
(3)通式化合物3与不同的烃基衍生物经取代反应、脱保护基反应制得通式化合物4，即为通式(Ⅰ)所示的化合物；
Figure FDA0002994274300000021
R1、R2、R3及R4同权利要求1所述。
3.一种药物组合物，其中含有权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐及药学上可接受的辅料。
4.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐、或权利要求3所述的药物组合物在制备P2Y14受体抑制剂药物中的用途。
5.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐、或权利要求3所述的药物组合物在制备治疗P2Y14受体相关的炎症疾病药物中的用途。
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